Высокотемпературный метод стерилизации: Стерилизация высокой температурой — Студопедия

Содержание

Стерилизация высокой температурой — Студопедия

Стерилизация высокой температурой является одним из наиболее надежных и распространенных методов стерилизации (табл. 10). Она проводится прокаливанием предметов в пламени горелки, сухим жаром, паром под давлением и текучим паром.

Прокаливанием в пламени горелки в течение 5-7 секунд стерилизуют бактериальные петли, пинцеты, предметные стекла и некоторые мелкие инструменты (иглы, крючки, лопаточки). Температура пламени горелки достигает 900°С. При прокаливании происходит сгорание микроорганизмов и их спор.

Стерилизацию сухим жаром осуществляют в сухожаровых шкафах (печь Пастера). Метод основан на бактерицидном действии нагретого до 165-180°С воздуха. Сухим жаром стерилизуют изделия из стекла, металлов, фарфора и резин на основе силиконового каучука,

лабораторную посуду. Кроме того, сухим жаром можно стерилизовать термостойкие порошкообразные лекарственные средства (тальк, белая глина, окись цинка и др. ), минеральные и растительные масла, жиры, ланолин, вазелин, воск. Режимы стерилизации: при температуре 160°С — 2,5 ч, при 180°С — 60 мин, при 200°С — 15 мин. Началом стерилизации считается тот момент, когда температура в печи достигнет нужной высоты.



Стерилизация паром не требует такой высокой температуры, как стерилизация сухим жаром, т.к. пар из-за большой теплопроводности действует на микробы эффективнее. Обеспложивание паром проводится при температуре 100-130°С. Существуют два способа стерилизации паром: стерилизация насыщенным паром под давлением и стерилизация текучим паром.

Таблица 10 Методы тепловой стерилизации

МЕТОД
 
АППАРАТ
 
РЕЖИМ (температура, время, давление)*
 
МАТЕРИАЛЫ
 
Однократные методы:
 
Прокаливание
 
Спиртовка, газовая горелка
 
До красного каления
 
Бактериологические петли, мелкие металлические инструменты
 
Сухим жаром
 
Воздушный стерилизатор
 
180°С,60мин(160°С,
150 мин )
 
Стеклянная посуда, пипетки, вата, тальк, вазелиновое масло, металлические инструменты
 
Паром под давлением (1атм=0. 11 МПа 1,1 кгс/см’)**
 
Паровой стерилизатор (автоклав)
 
120°С, 45 мин давление 1атм(132°С, 20 мин, 2 атм)
 
Простые пит. среды (МПБ. МПА), заразный материал, изделия из стекла и металла, резины и латекса, халаты, бельё, перчатки, перевязочный и шовный материал, зеркала, некоторые лекарства и др.
 
Дробная стерилизация (тиндализация)***:
 
Текучим паром
 
Паровой стерилизатор с открытым выпускным краном
 
100°С, 3 дня по 1 ч в
день
 
Молоко, среды и лекарства с углеводами, некоторые другие лекарства
 
Щадящее прогревание
 
Водяная баня с терморегулятором
 
56-58°С5дней: 1 день 2 ч, остальные дни по 1 ч
 
Белковые жидкости (питательные среды, содержащие белок, сыворотка крови, асцитическая жидкость)
 

* приведены некоторые из возможных режимов — стерилизующим фактором является не давление, а температура пара; *** дробно стерилизуют объекты, которые могут быть питательным субстратом для микробов (впромежутках между воздействиями объект оставляют в термостате при 37°С или комнатной температуре для прорастания спор). Образовавшиеся вегетативные формы микроорганизмов убивают при последующем прогревании.


Стерилизация паром под давлением — наиболее надежный и часто применяемый способ. Он основан на нагревании материала насыщенным водяным паром при давлении выше атмосферного в специальных приборах-стерилизаторах водопаровых (автоклавах). Совместное действие высокой температуры и пара обеспечивает высокую эффективность данного способа. При однократной обработке при 1-2 атм. в течение 15-25 мин. как вегетативные, так и споровые формы бактерий погибают. Этим методом стерилизуют перевязочный материал, операционное белье, хирургические инструменты, лабораторную посуду, инфицированный материал, инъекционные растворы и питательные среды. Материал помещают в емкости (биксы). На дно бикса помещают прокладки из ткани, впитывающие влагу после стерилизации. Стерильность материала сохраняется 3 суток. Обычно стерилизуют при давлении до 1 избыточной атмосферы, что соответствует температуре 119-120°С. Таким способом в течение 15-20 минут стерилизуют: 1) перевязочные и операционные материалы и зараженную посуду; 2) приборы с резиновыми деталями; 3) питательные среды, не содержащие нативного белка и углеводов. Некоторые питательные среды (сахара), а также растворы для инъекций, глазные капли, дистиллированную воду и воду для инъекций стерилизуют при 0,5-0,7 атм., что соответствует 112-115°С.

Стерилизация достигается только при полной исправности автоклава и правильной его эксплуатации специально обученным персоналом. Поэтому необходим постоянный контроль за режимом стерилизации, который производится физическим (термометр максимальный и др.), биологическим (биотест со спорами тест-культур микроорганизмов) и химическим (химические тесты, индикаторы типа ИС) способами.

Стерилизацию текучим паром применяют в тех случаях, когда стерилизуемый материал изменяет свои свойства при температуре выше 100°С. Таким способом стерилизуют растворы, содержащие углеводы, витамины, молоко и др. Используют автоклав с незакрепленной крышкой и открытым паровыпускным краном или специальный аппарат Коха. Стерилизацию проводят в течение 30-40 минут с момента выделения пара. Однократная стерилизация текучим паром не обеспечивает полного обеспложивания, т.к. при температуре 100°С погибают только вегетативные формы микробов, споры сохраняют жизнеспособность. Щ

Полное обеспложивание достигается лишь при повторных стерилизациях. Поэтому этот метод стерилизации называется дробной стерилизацией. Суть этого метода заклю-

чается в том, что после первой стерилизации материал оставляют при комнатной температуре, давая оставшимся спорам прорасти в вегетативные формы, на следующий день стерилизацию при 100°С повторяют. Оставшимся в меньшем числе спорам опять дают прорасти, оставляя при комнатной температуре, и через сутки снова стерилизуют при 100°С.. После третьей стерилизации при 100°С материал полностью освобожден от бактерий и спор. Таким образом, стерилизация текучим паром проводится в аппарате Коха или автоклаве при 100 °С 3 дня подряд по 30 минут.

Тиндализация — вид дробной стерилизации который применяют к объектам, содержащим вещества, разлагающиеся и денатурирующиеся при 100°С (сыворотка крови, витамины, некоторые глазные капли, питательные среды). При этом нагревают стерилизуемый объект на водяных банях с терморегулятором температуре 60-65 °С в течение 1 часа 5-6 дней подряд. Недостаток дробной стерилизации — возможность образования спор вегетативными клетками, образовавшимися из проросших спор. Поэтому в промежутках между прогреваниями обрабатываемый материал выдерживают при температуре 37°С для прорастания спор в вегетативные формы, которые погибают при последующих прогреваниях.

Помимо указанных имеются и другие методы тепловой стерилизации. Например, в стоматологической практике получила распространение стерилизация в среде горячих стеклянных шариков в гласс-перленовом стерилизаторе при температуре до 250°С (так стерилизуют зубные боры, рабочие части зондов, гладилок и другие стоматологические инструменты).

Стерилизация облучением.Лучевую стерилизацию используют в различных отраслях медицинской и микробиологической промышленности для стерилизации материалов, не выдерживающих термических или химических способов обработки (некоторые лекарственныесредства, в том числе антибиотики и гормоны, биологические ткани, изделия из пластмасс одноразового пользования, например систем для переливания крови, шприцев и т.п.)- Выбор дозы облучения зависит от стерилизуемого объекта и его инициальной контаминации. При выборедозы стерилизации необходимо руководствоваться двумя требованиями: во-первых, облучение должно оказывать на микроорганизмы бактерицидное действие; во-вторых, стерилизация не должна изменять качества обрабатываемых объектов. Необходим контроль остаточной радиации изделий. Основные преимущества лучевой стерилизации: возможность обработки термолабильных материалов, стерилизации объектов в упакованном виде, включения стерилизации в непрерывный производственный процесс.

Солнечный свет, особенно его ультрафиолетовый и инфракрасный спектры, губительно действуют на вегетативные формы микробов в течение нескольких минут.

Стерилизация ультрафиолетовыми лучами. Этот вид стерилизации проводится с помощью любого источника ультрафиолетовых лучей, чаще всего используют бактерицидные лампы. Эти лампы представляют собой ртутно-кварцевые газоразрядные светильники из фиолетового стекла. Ультрафиолетовые лучи оказывают на микробы бактерицидное действие. Лампы ультрафиолетового излучения (БУВ-15, БУВ-30) широко используют для обеззараживания воздуха и поверхностей различных помещениях лечебных учреждений, аптек, бактериологических лабораторий. Повреждающее действие УФ излучения вызвано повреждением ДНК микробных

клеток, приводящим к мутациям и гибели. УФ-лучи можно использовать для стерилизации прозрачных растворов термолабильных веществ (некоторых белков, витаминов, антибиотиков), помещенных в сосуды из кварцевого стекла и налитых тонким слоем.

Стерилизация инфракрасными лучами. Этот метод стерилизации основан на способности инфракрасных лучей, при поглощении веществом, нагревать это вещество. Инфра-красные лучи не обладают специфическим действием на микроорганизмы, последние погибают не от лучей, а от воздействия высокой температуры 300°С в течение 30 мин. Инфракрасные лучи оказывают воздействие на свободно-радикальные процессы, в результате чего нарушаются химические связи в молекулах микробной клетки. Этот метод используют для стерилизации ряда хирургических инструментов. Для этого выпускают специальные инфракрасные печи с глубоким вакуумом.

Ионизирующая радиация обладает мощным проникающим и повреждающим клеточный геном микробов действием. Для стерилизации инструментов одноразового использования (игл, шприцев) используют гамма-излучение, источником которого являются радиоактивные изотопы 6°Со и 137Сs в дозе 1,5-2,5 Мрад, получаемые в специальных гамма-установках. Для получения электронного излучения применяют ускорители электронов (с высоким уровнем энергии — 5-10 МеV). Гибель микробов под действием гамма-лучей и ускоренных электронов происходит прежде всего в результате повреждения нуклеиновых кислот. Причем микробы более устойчивы к облучению, чем многоклеточные организмы.

Стерилизация ультразвуком.Этим методом стерилизуют также системы переливания крови и шовный материал. Действие ультразвука в определенных частотах на микроорганизмы вызывает деполимеризацию органелл клетки, денатурацию входящих в их состав молекул в результате локального нагревания или повышения давления. Стерилизация объектов ультразвуком осуществляется на промышленных предприятиях, так как источником УЗ являются мощные генераторы. Стерилизации подвергаются жидкие среды, в которых убиваются не только вегетативные формы, но и споры.

Стерилизация фильтрованием— освобождение материала, который не может быть подвергнут нагреванию (растворы белков, сыворотки, некоторые витамины, летучие вещества, ряд лекарств) от находящихся в нем бактерий, а также для отделения бактерий от вирусов, фагов и экзотоксинов. Для фильтрации используют специальные фильтры, задерживающие микробные клетки как механически, так и путем адсорбции клеток на фильтрующем материале. Для изготовления фильтров применяют мелкопористые материалы (каолин, нитроцеллюлоза (мембранные фильтры), асбестовые пластинки (фильтр Зейтца) и др.), способные задерживать бактерий. Наиболее широко используют два типа фильтров: мембранные ультрафильтры и фильтры Зейтца. Для ускорения процесса фильтрации обычно создают повышенное давление в емкости с фильтруемой жидкостью или пониженное давление в емкости с фильтратом. Фильтрование происходит под повышенным давлением, жидкость нагнетается через поры фильтра в приемник или создается разрежение воздуха в приемнике и жидкость всасывается в него через фильтр. К фильтрующему прибору присоединяется нагнетающий или разрежающий насос. В результате образующей разности давлений фильтруемая жидкость проходит через поры фильтра в приёмник. Микроорганизмы остаются на поверхности фильтра.

Промышленная технология лекарств. Электронный учебник




5.10. Методы стерилизации

По требованиям Государственной Фармакопеи ХI-го издания все готовые лекарственные препараты должны выдерживать тест на микробиологическую чистоту. Поэтому процесс стерилизации имеет большое значение при изготовлении всех лекарственных форм, а особенно инъекционных.

Под стерилизацией (обеззараживание, обеспложивание) понимают совокупность физических, химических и механических способов освобождения от вегетативных и покоящихся форм микроорганизмов (H. Horn, 1984).

ГФ ХI издания определяет стерилизацию как процесс умерщвления в объекте или удаления из него микроорганизмов всех видов, находящихся на всех стадиях развития.

Поскольку к производству стерильных лекарственных форм предъявляют высокие требования по микробиологической чистоте (надежность стерильных инъекционных препаратов должна быть не ниже 10–6), то обеспложиванию подвергаются не только готовый продукт, но и используемое оборудование, вспомогательные материалы, фильтры, растворители, исходные вещества. Выбор того или иного способа стерилизации должен основываться на экономических соображениях и технологичности обработки, включая возможность ее автоматизации. От правильно подобранного метода стерилизации зависит качество производимой стерильной продукции.

В технологии лекарственных форм промышленного производства в настоящее время используют 3 группы методов стерилизации:

  • Механические
  • Химические
  • Физические

Механические методы стерилизации

Стерилизующая фильтрация. Микробные клетки и споры можно рассматривать как нерастворимые образования с очень малым (1-2 мкм) размером частиц. Подобно другим включениям, они могут быть отделены от жидкости механическим путем – фильтрованием сквозь мелкопористые фильтры. Этот метод стерилизации включен в ГФ ХI для стерилизации термолабильных растворов.

По механизму действия фильтрующие перегородки, используемые для стерильной фильтрации, подразделяют на глубинные и поверхностные (мембранные) с размером пор не более 0,3 мкм.

Глубинные фильтры характеризуются сложным механизмом задержания микроорганизмов (ситовым, адсорбционным, инерционным). Ввиду большой толщины таких фильтров удерживаются и частицы меньшего размера, чем размер пор фильтрующей перегородки.

Глубинные фильтры бывают: керамические и фарфоровые (размер пор 3-4 мкм), стеклянные (около 2 мкм), бумажно-асбестовые (1-1,8 мкм). Недостатками керамических и фарфоровых фильтров является продолжительность стерилизации, потеря раствора в порах толстого фильтра, образование микротрещин из-за хрупкости материала и, следовательно, ненадежность стерилизации.

Стеклянные фильтры малопроизводительны, бумажно-асбестовые фильтры не рекомендуются для стерилизации инъекционных растворов, поскольку они состоят из волокнистых материалов и имеется угроза отрыва волокон от фильтра. Попадая в организм с раствором, такие волокна могут вызывать различные патологические реакции.

Получившие в последние годы большое распространение для стерилизующей фильтрации микропористые мембранные фильтры, лишены этих недостатков.

Мембранные фильтры представляют собой тонкие (100-150 мкм) пластины из полимерных материалов, характеризующиеся ситовым механизмом задержания микроорганизмов и постоянным размером пор (около 0,3 мкм). Во избежание быстрого засорения фильтра мембраны используют в сочетании с префильтрами, имеющими более крупные поры. При стерилизации больших объемов растворов оптимальным является применение фильтров обоих типов.

Использование глубинных и мембранных фильтров обеспечивает необходимую чистоту, стерильность и апирогенность растворов для инъекций.

Стерилизующая фильтрация имеет преимущества по сравнению с методами термической стерилизации. Для многих растворов термолабильных веществ (апоморфина гидрохлорид, викасол, барбитал натрия и другие) он является единственно доступным методом стерилизации. Метод весьма перспективный в производстве глазных капель.

Химические методы стерилизации

Эти методы основаны на высокой специфической (избирательной) чувствительности микроорганизмов к различным химическим веществам, что обусловливается физико-химической структурой их клеточной оболочки и протоплазмы. Механизм антимикробного действия многих таких веществ еще не достаточно изучен. Считают, что некоторые вещества вызывают коагуляцию протоплазмы клетки, другие – действуют как окислители, ряд веществ влияет на осмотические свойства клетки, многие химические факторы вызывают гибель микробиологической клетки благодаря разрушению ферментной системы. Основой любого варианта химической стерилизации является взаимодействие бактерицидного вещества с компонентами микробной клетки или споры.

Химическая стерилизации подразделяется на стерилизацию растворами (веществами) и стерилизацию газами (газовая стерилизация).

Стерилизация растворами или веществами. Стерилизацию растворами (веществами) серийно выпускаемой инъекционной продукции в заводских условиях не используют, так как введение в раствор постороннего биологического активного вещества нежелательно из-за возможного химического взаимодействия стерилизующего агента с действующими компонентами, а также из-за возможных побочных действий этого агента на организм человека. Еще одно принципиальное ограничение данного метода связано с тем, что практически любое бактерицидное вещество обладает определенной селективностью и его эффективность проявляется при высоких концентрациях или часто в определенных интервалах рН, недопустимых для живых организмов. Этот вид стерилизации используют для обеззараживания различной аппаратуры, трубопроводов и другого оборудования, применяемого в производстве стерильной продукции.

Газовая стерилизация. Своеобразной химической стерилизацией является метод стерилизации газами. Преимуществом метода является возможность стерилизации объектов в пластмассовой упаковке, проницаемой для газов. В герметическую камеру вводят стерилизант – смесь этиленоксида и углерода диоксида в соотношении 9:1. Углекислый газ добавляют в связи со взрывоопасностью окиси этилена. При стерилизации стерилизант поступает в аппарат под давлением до 2 кгс/см2 (196133 Н/м2) при температуре 43-45°С. Продолжительность стерилизации зависит от проницаемости упаковки, толщины слоя материала и продолжается от 4 до 20 часов. Затем этиленоксид удаляют продуванием стерильным воздухом (азотом) или путем вакуумирования.

При химической стерилизации газами погибают все вегетативные формы микроорганизмов и плесневые грибы.

Для стерилизации донорского материала, растворов кровезаменителей или продуктов, полученных из крови, широко применяют β-пропиолактон.

Главный недостаток химических методов стерилизации – необходимость освобождения простерилизованного объекта от остатков стерилизанта и продуктов возможного взаимодействия. Широкому распространению этого метода препятствуют длительность стерилизации, высокая стоимость, возможность побочного действия химического агента на обслуживающий персонал и, тем не менее, для ряда лекарственных препаратов – это единственно надежный способ стерилизации в современных условиях.

Использование консервантов. Добавление консервантов условно можно отнести к методам химической стерилизации. Введение консервантов в растворы проводится в тех случаях, когда нельзя гарантировать сохранение стерильности. При этом возможно снижение температуры стерилизации или сокращение времени ее проведения.

Механизмы воздействия консервантов на микроорганизмы очень различны и определяются их химическим строением. Основным результатом при этом является нарушение жизненных функций клетки, в частности, инактивация белковой части клеточных ферментов. В зависимости от степени инактивации наступает либо гибель клетки, либо замедление ее жизненных функций.

Физические методы стерилизации

Тепловая (термическая) стерилизация. В настоящее время монопольное положение среди возможных методов стерилизации в фармацевтическом производстве занимает тепловая стерилизация.

В зависимости от температурного режима тепловая стерилизация подразделяется на:

Стерилизация паром под давлением. Автоклавирование – это стерилизация растворов, устойчивых к нагреванию, паром под давлением 1,1 атм при температуре 119-121°С. В данных условиях погибают не только вегетативные, но и споровые микроорганизмы за счет коагуляции белка клетки.

Этот традиционный способ стерилизации обладает сегодня преимуществом перед другими по трем причинам. Во-первых, он дает возможность стерилизации препаратов в конечной герметичной упаковке, что исключает опасность вторичной контаминации. Во-вторых, благодаря длительной практике использования он обеспечен достаточно надежной аппаратурой. И, в-третьих, на сегодняшний день он наиболее экономичен.

При этом методе происходит комбинированное воздействие на микроорганизмы высокой температуры и влажности, при этом погибают самые стойкие споры. Коагуляция белковых веществ в этих условиях начинается при температуре 56°С.

Стерилизацию паром под давлением проводят в стерилизаторах различной конструкции цилиндрической или квадратной формы. Стерилизаторы квадратной формы типа АП-7 (рис. 5.25.), АП-18 имеют двери с двух сторон: через одну происходит загрузка нестерильной продукции; через другую – выгрузка простерилизованной. Корпус автоклава нагревается глухим паром, чтобы не было его конденсации в рабочей камере. Затем в камеру для вытеснения воздуха подается острый пар. Отчет времени стерилизации начинается с момента достижения заданного давления по манометру. Стерилизаторы оснащены автоматической контрольной аппаратурой, с помощью которой на контрольной ленте записывается давление и время стерилизации. Условия стерилизации продукции указаны в промышленных регламентах или другой нормативно-технической документации.

Рис. 5.25. Устройство парового стерилизатора АП-7

1 – корпус; 2 – крышка; 3 – теплоизоляция; 4 – стерилизационная камера; 5 – клапан предохранительный; 6 – пульт управления; 7 – полка; 8 – подача острого пара

Стерилизацию растительных масел и жиров в заводских условиях осуществляют паром под давлением в герметически закрытых сосудах при температуре 119-121°С и давлении 1,0-1,1 атм. в течение 2 часов.

Автоклавированию также подвергаются установки для стерилизующего фильтрования, фильтрующие перегородки и другой вспомогательный материал, используемый в технологическом процессе производства инъекционных лекарственных форм.

Среди недостатков метода можно выделить невозможность стерилизации растворов, содержащих термолабильные вещества, опасность работы с паром под давлением, отсыревание многих материалов во время стерилизации и др.

Стерилизация текучим паром. Растворы веществ, термически малоустойчивые, иногда стерилизуют при 100°С текучим паром (без примеси воздуха и избыточного давления). Насыщенный пар убивает только вегетативные формы микроорганизмов и при наличии в объекте споровых форм этот метод неэффективен.

Тиндализация (дробная стерилизация). Для термолабильных веществ, а также для растворов в шприц-ампулах стерилизацию иногда проводят методом тиндализации. Суть метода заключается в трехкратном нагревании растворов до 40-60°С с перерывами в сутки, в течение которых объекты термостатируют при температуре 37±1°С для прорастания споровых форм в вегетативные.

Стерилизация сухим жаром (воздушная стерилизация). Стерилизация сухим жаром, проводимая в аэростерилах или других аппаратах этого типа, также высокоэффективна. При этом погибают все формы микроорганизмов за счет пирогенетического разложения белковых веществ. Однако, высокая температура нагрева (160-200°С), длительное время воздействия (1-2 часа) и сухой горячий воздух оказывает повреждающее действие на стерилизуемые объекты и, следовательно, ограничивают возможности данного способа.

Инъекционные растворы не подвергают стерилизации сухим жаром, так как из-за плохой теплопроводности воздух не обеспечивает быстрый нагрев растворов до температуры стерилизации, а длительный прогрев – приводит к разложению большинства лекарственных веществ.

Сухим жаром стерилизуют некоторые термостойкие порошки, масла, стеклянную тару (ампулы, флаконы и необходимую посуду), вспомогательные материалы.

Лучшими являются стерилизаторы с ламинарным потоком стерильного воздуха, нагретого до требуемой температуры, что улучшает создание равномерного температурного поля и устраняет загрязнения от обогреваемых стенок  камеры и из воздуха, попадаемого в момент выгрузки объекта.

Радиационная стерилизация. Лучистая энергия губительно действует на клетки живого организма, в том числе и на различные микроорганизмы. Принцип стерилизующего эффекта этих излучений основан на способности вызывать в живых клетках при определенных дозах поглощенной энергии такие изменения, которые неизбежно приводят их к гибели за счет нарушения метаболических процессов и коагуляции белка.

Источником ионизирующих γ-излучений служат долгоживущие изотопы 60Со27, 137Cs55, ускорители электронов прямого действия и линейные ускорители электронов. Для бактерицидного эффекта достаточно от 15 до 25 кГр, причем верхний предел необходим для инактивации споровых форм.

В настоящее время накоплен большой опыт применения этого метода, точно установлены типичные дозы излучения, необходимые для надежной стерилизации, разработано радиационное оборудование для высокопроизводительного процесса стерилизации, решены вопросы безопасности работы установок для обслуживающего персонала.

Этот метод по экономическим показателям превосходит асептическое изготовление растворов со стерильной фильтрацией, но несколько уступает тепловой стерилизации. Однако, в будущем может приблизиться к ней из-за неизбежного снижения относительной стоимости изотопов, которые являются побочным продуктом атомной энергетики.

Ультразвуковая стерилизация. Прохождение ультразвука (УЗ) в жидкой среде сопровождается чередующимися сжатиями, разрежениями и большими переменными ускорениями. В жидкости образуются разрывы, называемые кавитационными полостями. В момент сжатия эти полости захлопываются. Избыточное давление, создаваемое УЗ-волной, накладывается на постоянное гидростатическое и суммарно может составлять в пузырьках несколько атмосфер. В качестве «зародышей» кавитационных полостей могут быть пузырьки газа, пара в жидкости, твердые частицы и места неровностей твердой поверхности. Большие импульсные давления кавитаций приводят к разрушению целостности клеточной мембраны микроорганизмов, споровых образований и других частиц. Важно установить оптимальные параметры процесса стерилизации, так как высокие импульсные давления могут приводить к механическому разрушению ампул. Стерилизующая частота  звука должна быть в пределах 18-22 кГц.

И, хотя метод очень эффективен, он не нашел широкого применения из-за сложности аппаратурного оснащения и возможных сложных химических превращений компонентов растворов. Вопросы стабильности компонентов при УЗ-стерилизации имеют много общего с аналогичными проблемами радиационной стерилизации. Для повышения устойчивости лекарств при ультразвуковом воздействии необходимо подобрать такие условия стерилизующей обработки, которые обеспечивают снижение вводимой в систему энергии на тех частотах ультразвука, которые одновременно со стерилизацией не приводят к разложению компонентов лекарственных препаратов.

Чаще метод применим при производстве эмульсий и суспензий с целью  лучшего диспергирования веществ в них и одновременно получения стерильных гетерогенных систем для парентерального применения.

Стерилизация токами высокой и сверхвысокой частоты. К настоящему времени нет единой точки зрения на механизм инактивации микроорганизмов при ВЧ- и СВЧ-облучении. Существует мнение об исключительно тепловом механизме действия токов высокой частоты на биологические объекты.  Принцип действия высокочастотного поля заключается в его активном воздействии на ориентацию молекул вещества. Изменение направленности поля вызывает изменение ориентации молекул и поглощение части энергии поля веществом. В результате происходит быстрый нагрев вещества во всех точках его массы.

Менее широко распространены представления о том, что, помимо тепловых процессов, на гибель микроорганизмов оказывает влияние специфическое действие ВЧ- и СВЧ-излучения.

С помощью СВЧ-энергии возможно стерилизовать в расфасованном виде готовую продукцию:  глазные мази, пасты в тубах, лекарственные средства в конвалютах, порошки, таблетки, пористые лиофилизированные массы, не содержащие гидрофильные жидкости. Стерилизация ампулированных растворов и жидких лекарственных форм, укупоренных герметически нежелательна, так как в замкнутой емкости возникает избыток давления паров испарившейся жидкости, взрывающий ее. В результате наступает разгерметизация в виде растрескивания стенок ампул или срыва укупорочного материала.

Метод также не нашел широкого применения из-за сложности аппаратурного оснащения и возможности неблагоприятного воздействия быстрого кратковременного нагрева инъекционного раствора.

Стерилизация ультрафиолетовым излучением. Из-за возможности образования ядовитых продуктов и возможности разложения биологически активных компонентов инъекционных растворов под действием УФ-излучения, метод не нашел своего применения для стерилизации препаратов для инъекций. Однако он широко используется для стерилизации порошков, воды для инъекций, вспомогательных материалов, воздушной среды производственных помещений, технологического оборудования и других объектов.

При стерилизации воздушной среды производственных помещений в качестве источников УФ-радиации используют специальные лампы БУВ (бактерицидная увиолевая), которые изготавливают в виде трубки из специального увиолевого стекла, способного пропускать УФ-лучи, с электродами из длинной вольфрамовой спирали, покрытой бария и стронция гидрокарбонатами. В трубке находится ртуть и аргон при давлении в несколько мм рт.ст. Источником УФ-лучей является разряд ртути, происходящий между электродами при подаче на них напряжения. Излучение лампы БУВ обладает большим бактерицидным действием, так как максимум излучения лампы близок к  максимуму бактерицидного действия (254 нм).

Количество и мощность бактерицидных ламп подбирается так, чтобы при прямом облучении на 1 м3 объема помещения приходилось не менее 2-2,5 Вт мощности излучателя. Промышленностью выпускаются лампы БУВ-15, БУВ-30, БУВ-60 и др. (цифра обозначает мощность в Ваттах), а также бактерицидные облучатели: настенный ОБН, состоящий из двух ламп БУВ-30; потолочный ОБП – из 4 ламп БУВ-30; передвижной маячного типа ОБПЕ – из 6 ламп БУВ-30. Облучатели используют только при отсутствии в помещении людей.

Для стерилизации воды применяют аппараты с погруженными и непогруженными источниками УФ-радиации. В аппаратах первого типа источник УФ-излучения (бактерицидная увиолевая лампа, покрытая кожухом из кварцевого стекла) помещается внутри водопровода и обтекается водой. Данный способ стерилизации больших объемов воды для инъекций является наиболее экономичным.

В аппаратах с непогруженными лампами последние помещаются над поверхностью облучаемой воды. В связи с тем, что обычное стекло практически непроницаемо для ультрафиолетовых лучей, водопровод в местах облучения делают из кварцевого стекла, а это значительно повышает стоимость аппарата. В настоящее время разработана возможность замены кварцевого стекла полиэтиленовым, свободно пропускающим УФ-радиацию.

Как положительный фактор, следует отметить, что при стерилизации воды не происходит накопления пероксидных соединений и под действием УФ-излучения инактивируются некоторые пирогенные вещества, попавшие в воду.

Стерилизация ИК- и лазерным излучением. Электронная стерилизация. Эти перспективные виды стерилизации практически не находят сегодня применения, хотя возможности для этого имеются.

Облучение инъекционных водных систем инфракрасным (ИК) излучением в областях поглощения воды (l = 2,7 мкм) может быть эффективным средством ее нагрева и тем самым является по сути еще одним вариантом тепловой стерилизации. Наличие достаточно мощных источников ИК-излучения позволяет надеяться на возможность создания оборудования для высокопроизводительной технологии. Преимуществом этого метода перед традиционным автоклавированием может считаться возможность отказа от небезопасного в обслуживании и нетехнологичного перегретого пара.

Принципиально возможны  способы стерилизации с применением лазерного и электронного излучения, при этом можно достичь высокой эффективности стерилизации как путем интенсивного нагрева вследствие поглощения мощного излучения в воде, так и за счет селективного поглощения излучения макромолекулами микроорганизмов в многоквантовых процессах. Однако исчерпывающих исследований применительно к какой-либо конкретной системе, совокупность которых дала бы основание о создании хотя бы основ таких методов стерилизации, пока не проведено.


Современные методы стерилизации — Мегаобучалка

К современным методам стерилизации по праву можно отнести гласперленовый метод предназначен для быстрой стерилизации небольших цельнометаллических инструментов, не имеющих полостей, каналов и замковых частей. Метод крайне прост — инструмент погружается в среду мелких стеклянных шариков, нагретых до температуры 190 — 2900С (таким образом, чтобы над рабочей поверхностью инструмента оставался слой шариков не менее 10 мм) на 20 — 180 секунд, в зависимости от размера и массы инструмента.

Этот метод используется, в основном, стоматологами для экспресс-стерилизации мелких инструментов — боров, пульпоэкстракторов, корневых игл, алмазных головок и др., а также рабочих частей более крупных — зондов, гладилок, экскаваторов, шпателей и т.д. Так же можно стерилизовать акупунктурные иглы.

Преимущества метода — короткое время стерилизации и отсутствие расходных материалов.

Для термолабильных медицинских изделий (эндоскопы и принадлежности к ним, диализаторы, катетеры и т.п.) наиболее приемлемым является метод газовой стерилизации. Для этого используются химические соединения, обладающие безусловным спороцидным действием: окись этилена, бромистый метил, смесь окиси этилена и бромистого метила (смесь ОБ) и формальдегид. Несмотря на то, что окись этилена является токсическим веществом (при однократном воздействии проявляет себя как малоопасное вещество 4-го класса опасности, при постоянном воздействии — как вещество 2-го класса опасности), она чрезвычайно популярна в качестве стерилизующего агента. Однако, ее токсичность вынуждает проводить дегазацию стерильных изделий (с дожиганием выделяющейся окиси этилена — она весьма горюча).

Газовая стерилизация — метод значительно более сложный, чем традиционные методы стерилизации паром и горячим воздухом. При этом необходимо на строго определенном уровне поддерживать температуру, влажность, концентрацию стерилизующего газа, давление и экспозицию.

Самым известным этиленоксидным стерилизатором является установка «Комбимат» . Стерилизация проводится при температуре 42 — 550С за 60 — 90 минут. Результат практического использования показывает значительное превосходство этиленоксидного метода стерилизации над альтернативными в универсальности, экономичности, ремонтопригодности и технической обеспеченности. Применение данного метода для стерилизации высокоточной термолабильной медицинской аппаратуры получило высокую оценку специалистов ЦСО Центральной Клинической Больницы (Москва) , где этиленоксидные стерилизаторы применяются более 20-ти лет. По заключению специалистов, применение этиленоксидной стерилизации позволяет обеспечить своевременную стерилизацию всего объема термолабильной аппаратуры и инструментария, имеющегося в данном ЛПУ, снизить капитальные затраты на оборудование, текущие затраты на закупку расходных материалов, повысить производительность оборудования, оборачиваемость стерилизуемых изделий и продлить сроки их эксплуатации.

 

Рисунок 1

 

Стерилизация термолабильных изделий формальдегидом стоит на втором месте после этиленоксида. Оптимальный диапазон температуры при формальдегидной стерилизации должен быть 60 — 800С, давление — от 0,25 до 0,475 бар, при концентрации формальдегида от 8 до 15 мг/л. Реально формальдегид используется в концентрации около 30 мг/л, экспозиция до 60 минут; при этом общая продолжительность цикла составляет 3,5 часа (с учетом дегазации простерилизованных изделий (аэрации)).

Наиболее популярным аппаратом для формальдегидной стерилизации является установка «Формомат». Пару лет назад стерилизатор подвергся модернизации и теперь выпускается под маркой «Евро-Формомат».

 

Рисунок 2

 

Так называемая плазменная стерилизация, действующим стерилизантом которой являются пары перекиси водорода в сочетании с низкотемпературной плазмой, представляющей собой продукты распада пероксида водорода (гидроксильные группы ОН, ООН), образующиеся под воздействием электромагнитного излучения с выделением видимого и ультрафиолетового излучения, в настоящее время находится в стадии становления и, возможно, со временем получит определенное распространение в учреждениях здравоохранения. Пероксид водорода и плазма не обладают такими проникающими способностями, как этиленоксид, но имеют большое преимущество — распадается на нетоксичные продукты — воду и кислород, не оказывая вредного воздействия на окружающую среду.

Стерилизация проводится при температуре 46 — 500С за 54 — 72 минуты. На сегодняшний день отсутствуют общепризнанные международные стандарты для данного метода. Имеются определенные ограничения в отношении стерилизации материалов, содержащих целлюлозу и каучук.

Высокая стоимость оборудования и расходных материалов сужает спектр применения данного метода стерилизации. Кроме того, стерилизация полых многоканальных изделий требует применения дополнительных расходных приспособлений, еще более увеличивающих стоимость цикла стерилизации.

Один из самых высоких потенциалов окисления имеет озон. Именно поэтому он уже давно привлекает внимание специалистов, занимающихся проблемами стерилизации. В течение многих лет озон используется для обеззараживания питьевой воды и воздуха, и лишь только недавно он был предложен для стерилизации в медицине. Стерилизация производится озоно-воздушной смесью, продуцируемой генератором озона из атмосферного воздуха. Однако, окислительная способность озона и ограничивает его спектр применения. При контакте с ним могут повреждаться изделия из стали, меди, резины и др. Кроме того, озон токсичен, а имеющиеся сегодня аппараты не позволяют обезопасить персонал от контакта с ним. Немаловажным обстоятельством является то, что повторяемость метода до сих пор под вопросом. Для контролирования процесса существуют только индикаторы первого класса (свидетели процесса).

 

Рисунок 3

 

Стерилизантом при радиационной стерилизации является проникающее гамма- или бета-излучение. Наиболее широко используется гамма-излучающий изотоп кобальта-60, реже изотоп цезия-137, в связи с его низким уровнем энергии и излучения. Бета-излучающие изотопы используются вообще крайне редко, так как бета-излучение обладает гораздо меньшей проникающей способностью.

Эффективность радиационной стерилизации зависит от общей дозы излучения и не зависит от времени. Средняя летальная доза для микроорганизмов всегда одинакова, проводится ли облучение при низкой интенсивности в течение длительного промежутка времени или недолго при высокой интенсивности излучения. Доза 25 кГр (2,5 Мрад) надежно гарантирует уничтожение высокорезистентных споровых форм микроорганизмов.

Радиационная стерилизация обладает рядом технологических преимуществ: высокая степень инактивации микроорганизмов, возможность стерилизации больших партий материалов, автоматизация процесса, возможность стерилизации материалов в любой герметичной упаковке (кроме радионепрозрачной). Немаловажным обстоятельством является то, что температура стерилизуемых изделий в ходе стерилизации не повышается.

 

Заключение

 

Подводя итоги, следует отметить следующее. Уничтожение микроорганизмов физическими и химическими методами, которые используются при стерилизации медицинских изделий, подчиняется экспоненциальному закону. Это означает, что неизбежно имеется конечная вероятность того, что микроорганизм может выживать независимо от степени проведенной обработки. Для конкретной обработки вероятность выживания определена количеством и типами микроорганизмов и условиями их существования до и во время обработки. Следовательно, стерильность любого изделия в ряду изделий, подвергнутых стерилизации, может выражаться только в терминах вероятности существования нестерильного изделия.

Применение современных стерилизантов, тепловая и холодная стерилизация гибкого инструментария после каждого исследования позволяют достигать высокого уровня дезинфекции и стерильности аппаратуры.

В качестве стерилизантов используют насыщенный высокотемпературный водяной пар (стерилизация паром), сухой горячий воздух (стерилизация жаром), химические вещества (стерилизация химическая), газ (стерилизация газовая), реже используют ионизирующие излучения (лучевая стерилизация), фильтрование через мелкопористые фильтры (механическая стерилизация), многократное прогревание жидкостей на водяной бане при 100 0С (дробная стерилизация) или 56 0С (тиндализация).

Список использованной литературы:

 

1. ГОСТ Р ИСО 11135-2000 (Введен постановлением госстандарта РФ ОТ 27.10.2000 №279-СТ) «Валидация и текущий контроль стерилизации оксидом этилена.

2. Абрамова И.М. Пути оптимизации способов и средств предстерилизационной очистки, стерилизации и методов их контроля // Актуальные проблемы дезинфектологии в профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний. Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения В.И.Вашкова / Под ред. М.Г.Шандалы. — М: ИТАР-ТАСС, 2002. -С. 31-37.

3. Абрамова И.М. Современные возможности выбора химических стерилизующих средств для изделий медицинского назначения из термолабильных материалов в лечебно-профилактических учреждениях // Дезинфекционное дело, 2003. — № 2. — С. 35-38.

4. Благовидов Д.Ф., Зарубин Г.Л., Федяев Б.П., Рубан Г.И. Вопросы контроля централизованной стерилизации в лечебно-профилактических учреждениях.// Журнал микробиологии. -1996.- № 10. -С. 129-133.

5. Вашков В.И. Средства и методы стерилизации, применяемые в медицине. -М.: Медицина, 1999.- 368 с.

6. Методические рекомендации по организации централизованных стерилизационных в лечебно-профилактических учреждениях. Утверждены Минздравом СССР 21.12.1989 г., №15-6/8.- М., 1989. -322 с.

7. Основы инфекционного контроля: Практическое руководство/ Американский международный союз здравоохранения. Пер. с англ., 2-е изд. — М.: Альпина Паблишер, 2003. — 478 с.

8. Прилуцкий В.И., Шомовская Н.Ю. Пути повышения устойчивости к коррозии металлических медицинских инструментов при обработке анолитом АНК с различной минерализацией и концентрацией оксидантов // Задачи современной дезинфектологии и пути их решения. Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 70-летию НИИ дезинфектологии Минздрава России. Часть 1. Под общей ред. М.Г.Шандалы. — М.: ИТАР-ТАСС, 2003. — С. 186-187.

9. Рамкова Н.В. Разработка условий стерилизации изделий медицинского назначения. Дезинфекция и стерилизация. Перспективы развития. Материалы Всесоюзной научной конференции. Волгоград, 1983.-С. 109-110.

10. Рамкова Н.В. Стерилизация изделий медицинского назначения в профилактике внутрибольничных инфекций. Актуальные проблемы внутрибольничных инфекций. Российская научно-практическая конференция. — М., 1993.-243 с.

11. Рубан Г.И. Совершенствование стерилизационного дела в медицинских учреждениях: Автореф. дисс. канд. мед. наук., М., 1983.-182 с.

12. Руководство по инфекционному контролю в стационаре. Пер.с англ. / Под ред. Р.Венцеля, Т.Бревера, Ж-П.Бутцлера. — Смоленск: МАКМАХ, 2003. — 272 с.

13. Шандала М.Г. Дезинфектология как научная специальность // Дезинфекционное дело.- 2004. — № 4. — С. 25-27.

Методы стерилизации питательных сред и посуды, микробиология


Методы стерилизации питательных сред и посуды, микробиология / Methods of sterilization of nutrient media and dishes, microbiology


Стерилизация является одним из важнейших и необходимых приемов в микробиологической практике. Слово «стерилизация» в переводе с латинского означает обеспложивание. В практической работе под стерилизацией понимают методы, применяемые для уничтожения всех форм жизни как на поверхности, так и внутри стерилизуемых объектов. Различают термическую и холодную стерилизацию. Способы термической стерилизации: прокаливание в пламени и обжигание, сухожаровая стерилизация (горячим воздухом), стерилизация насыщенным паром под давлением (автоклавирование), дробная стерилизация (тиндализация), кипячение. Методы холодной стерилизации: стерилизация фильтрованием, газообразными средствами, ультрафиолетовыми лучами и другими видами излучений.


Физико-химические свойства материала и стерилизация / Physical and chemical properties of the material and sterilization


Возможность и целесообразность применения того или иного способа определяется в первую очередь физико-химическими свойствами материала, подлежащего стерилизации, а иногда и целью исследования.


Стерилизация питательных сред насыщенным паром под давлением (автоклавирование) Совместное действие высокой температуры и давления пара обеспечивает особую эффективность данного способа (табл. 1).


Таблица 1


Температура насыщенного пара при разных давлениях Давление Температура, нормальное, атм кПа °С 1,0 101,32 100 1,5 151,98 111 2,0 202,65 121 2,5 251,20 128 3,0 299,75 134 При этом погибают и вегетативные клетки, и споры микроорганизмов. Установлено, что споры большинства микроорганизмов не выдержи6 вают и 5-минутную экспозицию в насыщенном паре при 121 °С.


Стерилизацию текучим паром под давлением осуществляют в автоклавах. Автоклав представляет собой металлический двустенный резервуар, способный выдерживать высокое давление, в который помещают стерилизуемый материал на специальную подставку. Предметы следует размещать не слишком плотно, так как пар должен проходить между ними, иначе они не нагреваются до нужной температуры и могут остаться нестерильными. По окончании времени стерилизации автоклав открывают, когда давление в нем сравняется с атмосферным. Преждевременное открывание крана автоклава недопустимо, так как перегретые среды при резком снижении давления сразу же бурно закипают, смачивают и даже иногда выталкивают ватные пробки, что нарушает впоследствии стерильность материала. К работе с автоклавом допускаются только подготовленные лица! Подготовка сред к стерилизации.


При автоклавировании 3 — 5 % жидкости теряются в результате испарения, поэтому рекомендуется в приготавливаемые среды добавлять сверх объема примерно 5% дистиллированной воды. Тогда после стерилизации среда (раствор) будет иметь требуемую концентрацию. Среды обычно стерилизуют в пробирках, колбах, бутылях.


Емкости заполняют средой не более чем на половину их высоты, чтобы предотвратить смачивание пробок. Сосуды со средами закрывают ватными пробками с бумажными колпачками. Стеклянные, резиновые, корковые и другие пробки завертывают в двойной слой оберточной бумаги и стерилизуют привязанными к склянке, закрытой ватной пробкой. Выбор режима автоклавирования. В микробиологической практике стерилизацию в автоклавах осуществляют при температуре в пределах 111-138 °С, т.е. от 0,5 до 2,5 атм. Температура ниже 111 °С не может считаться надежной; а выше 138 0С, как правило, не является необходимой, к тому же, чем выше давление пара, тем сложнее условия эксплуатации автоклава. Микробиологи чаще всего стерилизуют среды при 0,5 и 1 атм. Температура и длительность автоклавирования питательных сред определяются, прежде всего, их составом, термоустойчивостью или термолабильностью компонентов.


Стерилизация легко разрушающиеся субстраты при 0,5 атм в течение 15-30 мин / Sterilization of easily degraded substrates at 0.5 atm for 15-30 minutes


Внимание! Легко разрушающиеся субстраты, как молоко или желатиновые среды, а также субстраты, содержащие сахара, 7 витамины (пивное сусло, соки, дрожжевой автолизат и др.) обычно стерилизуют при 0,5 атм в течение 15-30 мин.


Мясопептонные среды можно стерилизовать при 1,0 атм 20 мин. С трудом поддаются стерилизации в автоклаве различные порошки (например тальк) и вязкие жидкости (глицерин, вазелиновое масло), поэтому их лучше стерилизовать в сушильных шкафах при 160 °С в течение 2 или 1 ч при 170 °С. В этом случае слой масла или порошка в сосуде не должен превышать 1,5 см. После автоклавирования среды для проверки стерильности выдерживают 2 — 3 сут в термостате при 30 0С. Если в средах обнаруживается рост микроорганизмов, их готовят заново.


Дробная стерилизация (тиндализация) и пастеризация Тиндализация, дробная стерилизация, была предложена в 1877 г. Тиндалем. Она применяется для сред, портящихся под действием температур выше 100 °С. Тиндализацию осуществляют текучим паром а автоклаве с незавинченной крышкой или в аппарате Коха. Среды прогревают несколько раз по 10 — 15 мин. Между прогреваниями среды ставят в термостат при температуре 3 0 0 С н а 8 — 1 2 ч для прорастания жизнеспособных спор. Среды, не выдерживающие нагревания при 100 °С, прогревают более осторожно при 60 — 80 °С через каждые 8 — 1 2 ч 4 — 5 дней подряд. Однократный прогрев материала при температуре ниже 100 0С известен под названием пастеризация. Этот метод, предложенный Пастером, предназначен для уничтожения только бесспоровых форм микроорганизмов. Следовательно, в подавляющем большинстве случаев он не обеспечивает стерильности.


Пастеризацию проводят при 60-80 0С 10 — 30 мин. Этот процесс используют в пищевой промышленности для обработки молока, фруктовых соков, вина, пива и др.


Стерилизация фильтрованием Фильтрованием стерилизуют синтетические среды строго определенного состава, которые содержат легкоразрушающиеся или летучие компоненты — витамины, аминокислоты (цистеин и цистин), белки, углеводы, антибиотики и др. Фильтрование жидкостей осуществляют через мелкопористые материалы, легко адсорбирующие клетки микроорганизмов: асбест, целлюлозу, фарфор, каолин и др.


Стерилизующими фильтрами теоретически считают такие, размер пор которых не превышает 0,20 мкм. Наиболее широкое распространение в микробиологической практике получили мембранные фильтры, которые в зависимости от величины пор применяют для фильтрования и стерилизации. Для стерилизации используют отечественные фильтры фирм «Владипор», «Владисарт» с диаметром пор 0,20 мкм. Плотные диски, изготовленные из смеси асбеста с целлюлозой, называются фильтрами Зейтца. В зависимости от диаметра пор они обозначаются разными индексами.


Стерилизующими являются СФ-3 и СФ-4. Мембранные фильтры стерилизуют автоклавированием при 1 атм 15 мин или длительным кипячением. Стерилизация стеклянной посуды. Основным способом стерилизации стеклянной посуды является обработка ее сухим горячим воздухом при температуре не выше 180 ° в течение 1 — 3 ч (табл. 2). При этом погибают и вегетативные клетки, и споры микроорганизмов. Стерилизацию осуществляют в специальных суховоздушных (сухожаровых) стерилизаторах и сушильных шкафах, приспособленных для стерилизации и обеспечивающих автоматическое поддержание необходимой температуры.


Таблица 2 Время, необходимое для стерилизации стеклянной посуды сухим жаром Температура, °С Время, мин 140 180 150 150 160 120 170 60 Посуда перед стерилизацией должна быть тщательно вымыта и завернута в бумагу для сохранения стерильности после прогревания. После этого еѐ загружают в стерилизатор (или в сушильный шкаф) не слишком плотно, чтобы обеспечить циркуляцию воздуха и равномерный надежный прогрев стерилизуемого материала. По окончании стерилизации шкаф не открывают до тех пор, пока температура в нем не упадет до 80 °С, так как при резком охлаждении иногда нарушается стерильность материала, а сильно нагретое стекло может растрескаться. Стерилизация инструментов и приборов.


Стерилизация прокаливанием в пламени перед использованием, металлические инструменты / Flame sterilization before use, metal tools


Внимание! Мелкие лабораторные металлические инструменты — петли, иглы, пинцеты, ножницы, шпатели — стерилизуют прокаливанием в пламени (т.е. нагреванием докрасна) непосредственно перед использованием.


На пламени кратковременно обжигают предметные и покровные стекла, стеклянные шпатели и палочки, фарфоровые ступки и пестики, горлышки колб, пробирок, бутылок, а также ватные пробки при посевах культур и разливе сред. В пламени погибают и вегетативные клетки, и споры микроорганизмов. Шприцы лучше всего стерилизовать сухим жаром при 160 0С либо в собранном, либо в разобранном виде. В первом случае длительность стерилизации 75, во втором — 60 мин. Собранные шприцы вместе с иглой стерилизуют в пробирке, закрытой ватной пробкой, разобранные заворачивают в бумагу или ткань.


Можно стерилизовать шприцы и в автоклаве при 1 атм в течение 15-20 мин. Автоклавируют их только в разобранном виде, иначе они повреждаются.


Стерилизация газообразными веществами / Sterilization with gaseous substances


Лабораторную аппаратуру, имеющую зеркальное, оптическое и радиоэлектронное оборудование, а также изделия из термолабильных пластмасс, например центрифужные пробирки, стерилизуют газовым методом. Для газовой стерилизации применяются только те соединения, которые обладают спороцидными свойствами. Это оксид этилена, метилбромид, оксид пропилена, формальдегид, глютаральдегид, бета-пропиолактон, озон и др. Газовую стерилизацию проводят в специальных герметически закрывающихся аппаратах.


Стерилизуемые объекты, помещаемые в камеру, упаковывают как при стерилизации в автоклаве или сушильном шкафу. При проведении газовой стерилизации строго соблюдают правила работы с ядовитыми газообразными веществами. Стерилизация облучением Для стерилизации помещений, оборудования, некоторых медицинских принадлежностей, пищевых продуктов используют различные виды излучений: инфракрасное, ультрафиолетовое, рентгеновские лучи, а-, Р- и у-лучи радиоактивных элементов. Чаще других в микробиологической практике используют ультрафиолетовое облучение. Мощность ультрафиолета измеряется в бактах. Доза УФ-излучения, губительная для различных видов микроорганизмов (кроме спор), составляет 5 мкб/см2

Методы и средства стерилизации — КиберПедия

Физический метод

Паровой Воздушный Глассперленовый Радиационный

Химический метод

Стерилизация в газовых Стерилизация в растворах

Стерилизаторах химических средств

Выбор метода стерилизации зависит от:

· Материалов, из которых изготовлено изделие

· Конструкции изделия

· Необходимости длительного сохранения стерильности

· Оперативности использования

Физические методы стерилизации

Преимущества физических методов стерилизации:

  • надежность, удобство, оперативность
  • возможность использования различных видов упаковок
  • длительная сохранность стерильности в упаковках
  • отсутствие необходимости удаления остатков химических веществ с изделий.

Паровой метод стерилизации — использование парового стерилизатора.

«Паровым стерилизатором»называют стерилизатор, в котором стерилизующим агентом является насыщенный пар под давлением.

Стерилизуют изделия из:

Хлопка Металла Стекла Термолабильных материалов

Режимы работы для стерилизаторов новых марок (ГОСТ 19569-89 «Стерилизаторы паровые медицинские. Общие технические требования и методы исследования»):

  • 141 гр.+1 гр., время стерилизации 3 минуты
  • 134 гр. +1 гр., время стерилизации 5 минут
  • 126 гр. + 1 гр., время стерилизации 10 минут

Режимы работы для стерилизаторов старых марок:

  • 2 ат 132 гр. 20 минут
  • 1,1 ат 120 гр. 45 минут
  • 0,5 ат 110 гр. 180 минут

Эффективность стерилизации в паровом стерилизаторе зависит от:

  • правильного выбора упаковки
  • соблюдения правил загрузки для свободного прохождения пара
  • плотности загрузки биксов

 

Виды упаковок при паровой стерилизации

Наименование упаковки Срок сохранения стерильности
 
Бикс с фильтром
 
20 суток
 
Бикс без фильтра
 
3 суток
 
Двухслойная бязевая укладка
 
3 суток
 
Крафт-пакеты
 
20 суток
 
Пакеты из пергамента
 
20 суток
 
Бумага двухслойная крепированная
 
20 суток

Бумажные пакеты склеиваются с 4 сторон:

  • 10% клеем из поливинилового спирта
  • 5% крахмальным клеем

Биксы перед укладкой:

  • изнутри обрабатываются 0,5% раствором нашатырного спирта
  • укладку изделий при целевой укладке производят справа налево, секторально, рыхло
  • укладку изделий при видовой укладке производят рыхло

 

Воздушный метод стерилизации — использование воздушного стерилизатора

«Воздушный стерилизатор» —это стерилизатор, в котором стерилизующим агентом является горячий воздух.


Стерилизуют изделия из:

Металла Стекла Силиконовой резины

Режимы работы воздушных стерилизаторов новых марок

(ГОСТ 22649 — 83 «Стерилизаторы воздушные медицинские. Общие технические условия»):

  • 200 гр.+ 3 гр., время стерилизации 30 минут
  • 180 гр. + 3 гр., время стерилизации 40 минут
  • 160 гр. +3 гр., время стерилизации 120 минут

Режимы работы воздушных стерилизаторов старых марок:

  • 180 градусов 60 минут
  • 160 градусов 150 минут

Эффективность воздушной стерилизации зависит от:

  • равномерности распределения горячего воздуха в стерилизационной камере
  • правильности загрузки аппарата
  • правильного выбора упаковки

 

Виды упаковок при воздушной стерилизации

Наименование упаковки Срок сохранения стерильности
 
Крафт-пакеты
 
 
20 суток
 
Бумага упаковочная высокопрочная
 
 
20 суток
 
 
Бумага крепированная двухслойная
 
20 суток
 
 
Без упаковки (в открытых емкостях)
 
Должны быть использованы непосредственно после стерилизации
 

Во время стерилизации воздушным методом без упаковки:

  • металлические изделия располагаются так, чтобы они не касались друг друга
  • шприцы многоразового использования стерилизуются в разобранном виде

Загрузку и выгрузку из воздушных стерилизаторов желательно проводить при температуре в камере 40 –50 градусов, отсчет времени стерилизации производят с момента достижения температуры стерилизации.

 

Газовый метод стерилизации- использование газового стерилизатора

«Газовый стерилизатор» — стерилизатор, в котором стерилизующим агентом является газ.

Для стерилизации используются газы:

  • окись этилена
  • смесь ОБ (смесь окиси этилена с бромистым метилом в соотношении 1 : 2,5)
  • пары формалина (формальдегид в 80% этиловом спирте)

 

Газы (как холодный метод стерилизации) используют для стерилизации:

  • термолабильных изделий
  • изделий из металла
  • стекла
  • хлопка

Эффективность газовой стерилизации зависит от:


  • соблюдения правил загрузки стерилизатора (не более, чем на 2/3 объема)

 

Стерилизация прокаливанием в пламени. Стерилизация сухим жаром.

Стерилизация прокаливанием в пламени и стерилизация сухим жаром относятся к однократным методам тепловой стерилизации.

В пламени спиртовки, газовой горелки (до красного каления, t015600) стерилизуют бактериологические петли, мелкие металлические инструменты.

Cтерилизацию сухим жаром производят в воздушном стерилизаторе, который представляет собой металлический шкаф с двойными стенками, снаружи обшитый материалом, плохо проводящим тепло (например, асбестом).

Современные стерилизаторы имеют автоматический терморегулятор. Нагретый воздух циркулирует в пространстве между стенками и выходит наружу через специальные отверстия. В верхней стенке шкафа имеется отверстие для термометра.

Метод основан на бактерицидном действии нагретого до 160-180°С воздуха в течение 150- 60 мин. При более высокой температуре происходит обугливание ватных пробок, бумаги, в которую завернута посуда, а при более низкой температуре требуется больший срок стерилизации.

 

Стерилизуемый материал, режим стерилизации в воздушном стерилизаторе:

1) стеклянные, металлические, фарфоровые предметы, предварительно завернутые в бумагу и закрытые ватно-марлевыми пробками для сохранения стерильности (после извлечения их из стерилизатора), — при температуре 160-170°С 45 мин.;

2) термостойкие порошкообразные лекарственные средства (тальк, белая глина, окись цинка) при температуре 180-200°С 30-60 мин.;

3) минеральные и растительные масла, жиры, ланолин, вазелин, воск, — при температуре 180-200°С 20-40 мин.

По окончании стерилизации шкаф открывают только после его остывания, иначе стеклянная посуда может потрескаться из-за резкой смены температуры.

 

Стерилизация паром под давлением, устройство автоклава, режим стерилизации, стерилизуемый материал.



Стерилизация паром под давлением относится к однократным методам тепловой стерилизации. Это один из наиболее эффективных методов стерилизации, широко применяется в микробиологической практике. Её проводят в автоклаве.

В основу устройства автоклава положен принцип кипячения воды в замкнутом пространстве.

Автоклав состоит из двух цилиндрических металлических котлов, вставленных друг в друга, с герметически закрывающейся крышкой, завинчивающейся винтами; снабжен манометром, паровыпускным краном, предохранительным клапаном, водомерным стеклом.

 

 

автоклав горизонтальной автоклав вертикальной

конструкции конструкции

 

 

Наружный котел — водопаровая камера, внутренний — стерилизационная. В верхней части стерилизационного котла – отверстие, через которое проходит пар из водопаровой камеры. Манометр служит для определения давления в стерилизационной камере. Нормальное атмосферное давление 760 мм рт. ст. принимается за 0. Между показателем манометра и температурой существует определенная зависимость : 0,5 атм. соответствует температуре 112 °С; 1-1,1 атм. – 119-121°С; 2 атм. – 134°С.

 

Предохранительный клапан служит для защиты автоклава от чрезмерного повышения давления. При превышении заданного давления клапан автоматически открывается и выпускает лишний пар, мешая подъему давления выше заданного.

Перед стерилизацией в автоклав наливают воду, уровень которой контролируют по водомерному стеклу. Поместив в автоклав стерилизуемый материал, плотно завинчивают крышку, оставляя открытым паровыпускной кран; включают нагрев.

После закипания воды кран закрывают лишь тогда, когда будет вытеснен весь воздух. При этом пар будет идти непрерывной сильной сухой струей. Если закрыть кран раньше, показания манометра не будут соответствовать нужной температуре (воздух плохой проводник тепла).

После закрытия крана в котле постепенно повышается давление. Начало стерилизации – тот момент, когда стрелка манометра показывает заданное давление.

Совместное действие высокой температуры и пара обеспечивает высокую эффективность этой стерилизации, при которой погибают самые стойкие споровые бактерии.


Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:

Мой научный блог — Исследования и статьи: СТЕРИЛИЗАЦИЯ / КОНТРОЛЬ МИКРООРГАНИЗМОВ

Следует помнить, что микроорганизмы присутствуют повсеместно и, если им будет предоставлена ​​возможность, они заразят все, каждое оборудование, используемое для исследования. При выделении микроорганизмов для детального изучения необходимо проявлять максимальную осторожность, чтобы избежать загрязнения.

Необходимо удалить или убить все микроорганизмы с оборудования и сред, используемых для микробиологических работ, чтобы исключить или уменьшить возможность нежелательного попадания загрязнителей в них впоследствии.Все оборудование, такое как стеклянная посуда, скальпели, иглы, щипцы и т. Д., А также среды для культивирования микроорганизмов необходимо тщательно стерилизовать с соблюдением принципов асептики.

Определение терминов в стерилизации

Стерилизация : означает полное уничтожение всех форм нежелательной микробной жизни. Стерильный объект в микробиологическом смысле свободен от всех живых микроорганизмов. Значение этих терминов стерильный и стерилизация является абсолютным.Не существует такого понятия, как «практически бесплодный» или «почти стерильный»; она либо стерильна, либо не стерильна.

Дезинфекция: означает уничтожение (уничтожение) патогенных микроорганизмов.

Дезинфицирующее средство : представляет собой средство, обычно химическое, которое используется для уничтожения (уничтожения) возбудителей болезней.
Гермицид (микробицид): агент, убивающий живые микроорганизмы, но не обязательно их устойчивые споры. На практике гермицид — это почти то же самое, что и дезинфицирующее средство, но гермициды обычно используются для всех видов микроорганизмов и в любом месте.

Бактерицид (микробицид): средство, убивающее бактерии.

Фунгицид (прил. Фунгицидный): средство, убивающее грибки.

Вируцид (прил. Вирулицидный): агент, убивающий вирусы.

Спорицид (прил. Спорицидный): агент, убивающий споры.

Дезинфицирующее средство : средство, снижающее микробную популяцию до безопасного уровня. Обычно это химический агент, убивающий 99,9% растущих бактерий.Обычно их наносят на неодушевленные предметы и обычно используют для ежедневного ухода за оборудованием, посудой и т. Д.

Антисептик : средство, противодействующее сепсису. Последнее слово происходит от греческого языка и означает «гниение, разложение, разложение». Антисептик должен обладать свойством предотвращать размножение микроорганизмов (то есть останавливать рост). Это может быть гораздо более слабое средство, чем дезинфицирующее средство, потому что последнее фактически уничтожает микроорганизмы.

Бактериостат (прил.бактериостатический): средство, останавливающее рост бактерий. Фунгистат (прил. Фунгистатик): средство, останавливающее рост грибов.

Ингибитор : агент, который просто замедляет, но не обязательно предотвращает рост микроорганизмов.

Противомикробный: агент, препятствующий росту, то есть замедляющий рост микроорганизмов.

Антибактериальный : агент, замедляющий рост бактерий.

Противогрибковое: средство, замедляющее рост грибков.

Антивирус: агент, замедляющий рост вирусов.

Antispores : агент, замедляющий рост спор.

Антипатоген : агент, замедляющий рост патогенов.

СПОСОБЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ

Существует много методов стерилизации, но большинство из них подпадают под широкую классификацию физических, химических и газовых.

A. Физические методы стерилизации

Физический метод стерилизации включает высокую температуру, низкую температуру, осушение, облучение, фильтрацию, осмотическое давление и т. Д.

1. Нагрев / высокая температура

1. 1. Сухой нагрев

(a) Пылающий

Мелкие предметы, например, петли и иглы для инокуляции, которые трудно повредить теплом, являются стерилизовать, бросая их в тускло-красный огонь, нагревая до температуры, достаточно высокой, чтобы уничтожить любые организмы, присутствующие на поверхности. При стерилизации иглы для переноса необходимо соблюдать осторожность, чтобы предотвратить разбрызгивание (разбрызгивание), поскольку отлетающая капля может нести жизнеспособные организмы. в пламя.

(b) Стерилизация горячим воздухом

Автоклавирование не рекомендуется для стерилизации стеклянной посуды, поскольку стеклянная посуда остается влажной после такой стерилизации. Сначала их тщательно просушивают, заворачивают в коричневую бумагу, а затем подвергают воздействию горячего воздуха в электрической или газовой духовке при температуре 160 ° C в течение двух часов. Этой обработки достаточно для полной стерилизации, поскольку при этой температуре происходит разрушение всех живых клеток и жизнеспособных спор из-за деструктивного окисления содержимого клеток.Равномерное нагревание зависит от правильной загрузки духовки. Дальнейшее повышение температуры может привести к обугливанию бумаги или ватной пробки.

Стерилизатор горячим воздухом (печь с горячим воздухом)

Стерилизатор горячим воздухом — это печь, работающая от электроэнергии и используемая для стерилизации стеклянной посуды, например, чашек Петри, колб, пробирок, пипеток в микробиологических лабораториях . Стенки стерилизатора изготовлены из нержавеющей стали или алюминия и сконструированы таким образом, что передача тепла изнутри наружу полностью предотвращена.
Духовка состоит из большой камеры, в которой хранятся стерилизуемые материалы. Внизу печи установлен вентилятор, который заставляет пар из горячего сухого воздуха циркулировать через камеру, что приводит к повышению температуры в камере для стерилизации материалов. Для регистрации температуры духовки установлен термометр. При температуре 160 ° C стеклянная посуда стерилизуется за два часа.

Стерилизатор горячего воздуха

Стена диффузора Воздуходувка

1.

Выхлоп

4.

Пробоотборник воздушного потока

2.

3.

Стекловата изоляция

6.

Двигатель

1.2. Влажное нагревание

Влажное нагревание более эффективно при стерилизации, чем сухое нагревание, потому что теплопроводность менее быстрая, процесс занимает намного больше времени и уровень смертности ниже при сухом тепле по сравнению с влажным теплом.
Питательные среды, водные растворы, ткани, резина и другие материалы, которые могут быть разрушены при сухом нагревании, стерилизуют влажным нагреванием. Ниже приведены обычно используемые методы стерилизации влажным теплом.

(a) Поток пара

Поток пара или острого пара обычно осуществляется в паровом стерилизаторе Arnold или другом подобном аппарате, который позволяет пару вступать в контакт с стерилизуемым материалом.Стерилизатор Arnold состоит из поддона, частично заполненного водой, часть которого находится между слоями двойного дна. Эта вода между дном вскоре достигает температуры кипения, когда ее помещают над пламенем, и вытесняется через подходящие отверстия в поддоне наверху так же быстро, как и испаряется.

Пар выходит через большое отверстие в центре и, наконец, выходит через отверстие вверху или вокруг дверей. Острый пар имеет температуру 100 ° C, и однократное воздействие в течение 90 минут может удовлетворительно стерилизовать материалы.

(b) Тиндаллизация или периодическая стерилизация

Некоторые среды, содержащие желатин, молоко и сахар, подвергаются неблагоприятному воздействию нагревания при высокой температуре, поэтому было бы разумно использовать периодическую (также называемую «фракционной») стерилизацию. с помощью ранее описанного парового стерилизатора Arnold. Этот метод включает нагревание материала при 100 ° C в течение 30 минут в течение трех дней подряд с периодами инкубации между ними.

Устойчивые споры прорастают во время инкубационного периода; новообразованные вегетативные клетки разрушаются при последующем воздействии тепла.Недостатком этого процесса является то, что он требует много времени, и непитательный раствор нельзя стерилизовать этим методом, поскольку устойчивые споры могут не прорасти, но оставаться в состоянии покоя в таком растворе.

(c) Пар под давлением

Этот метод полезен для стерилизации сред, а также аппаратов. Лабораторное устройство, предназначенное для использования пара под регулируемым давлением, называется автоклавом . Автоклав — неотъемлемая часть оборудования любой микробиологической лаборатории.

Автоклав
Автоклав — это лабораторное оборудование, используемое для стерилизации сред и аппаратов паром под давлением. Есть разные типы автоклавов; принцип действия одинаков для всех видов. Пар может образовываться во внутреннем цилиндре, слыша воду. Давление пара внутри цилиндра увеличивается со временем нагрева. Повышение давления показывает манометр.

Давление пара повышает температуру внутри до желаемого уровня.Давление, которое обычно может развиваться внутри, превышает атмосферное давление на 15 фунтов / дюйм 2 , что эквивалентно температуре 121 ° C (250 ° F) на уровне моря.

Воздействия в течение 15 минут при этой температуре достаточно для стерилизации любой среды, если приняты все меры предосторожности. Однако время работы при температуре или давлении, необходимом для достижения полной стерильности, зависит от природы стерилизуемых материалов, типа контейнера и объема материалов.

Автоклав

Принцип
Пар может образовываться во внутреннем цилиндре автоклава за счет нагрева воды. Давление пара внутри цилиндра увеличивается со временем нагрева, и количество пара отключается. Возникающее внутри давление можно определить по манометру.

Обычно автоклав работает при давлении около 15 фунтов / дюйм2 (121 ° C). Время операции для достижения стерильности зависит от природы стерилизуемого материала, типа контейнера и объема.Например, пробирки с жидкой средой можно стерилизовать за 10-15 минут при 15 фунт / дюйм2 (121 ° C), для той же среды в количестве 10 литров потребуется час или более при той же температуре для полной стерилизации.

По истечении заданного времени воздействия пара под давлением подача тепла прекращается, а давление пара в автоклаве снижается до нуля перед открытием крышки для удаления стерилизованных материалов.

Стерилизация пробирок, содержащих жидкую среду

Периоды воздействия, необходимые для водных растворов или жидкостей в различных контейнерах, обеспечивающие разумный коэффициент безопасности для стерилизации в автоклаве

Контейнер

Диаметр

Минуты воздействия при 250-254 ° F (121-123 ° C)

Пробирки

18 × 150 мм
32 × 200 мм
38 × 200 мм

13-17
12-14
15-20

Колба Эрленмейера

50 мл
500 мл
1000 мл
2000 мл

12-14
17-22
20-25
30-35

Колба Фенвала

500 мл
1000 мл
2000 мл

24-28
25-30
40-45

9 0152

Флакон для разбавления молока

200 мл

13-17

Флакон для сыворотки

9000 мл

Источник: J.Дж. Перкинс, Принципы и методы стерилизации. Чарльз С. Томас. Спрингфилд. III., 1956.

Меры предосторожности
1. Важно отметить, что организмы убивает не давление, а высокая температура пара. Поэтому воздух в камере автоклава необходимо полностью заменить чистым паром. Если присутствует воздух, он снизит температуру пара, достигаемого внутри камеры, значительно ниже. Это можно сделать, удерживая выпускное отверстие для пара (в некоторых автоклавах «выпускной клапан») открытым до тех пор, пока не начнет выходить чистый пар.

2. Следует избегать слишком большой нагрузки, поскольку это может помешать правильной циркуляции пара.

3. Когда давление или температура достигают требуемого уровня, т.е. следует начать отсчет времени 15 фунтов / дюйм2 (температура 121 ° C). Требуемое давление 15 фунтов / дюйм2 (температура 121 ° C) должно постоянно поддерживаться в течение требуемого периода времени.

2. Низкая температура

Способ действия: Воздействие низких температур на микроорганизмы зависит от конкретного микроба и интенсивности нанесения.Например, при температурах обычных холодильников (0 ˚ C) скорость метаболизма некоторых микробов настолько снижена, что они не могут воспроизводить или синтезировать токсины. Другими словами, обычное охлаждение оказывает бактериостатическое действие, но не убивает многие микробы. Тепло убивает микроорганизмы гораздо эффективнее холода.

Недостаток:

Тем не менее, психротрофы действительно медленно растут при температуре холодильника и со временем изменяют внешний вид и вкус продуктов.Например, один микроб, размножающийся только три раза в день, достигнет популяции более 2 миллионов человек в течение недели.

Преимущества с медицинской точки зрения:

Патогенные бактерии обычно не размножаются при температуре холодильника.

Использование холода при температуре: Охлаждение используется для предотвращения порчи продуктов. Замораживание, сушка и сублимационная сушка используются для сохранения как пищевых продуктов, так и микроорганизмов, но эти методы не обеспечивают стерилизации.

Оптимальные условия: Удивительно, но некоторые бактерии могут расти при температуре на несколько градусов ниже нуля. Большинство продуктов остаются незамороженными до -2oC или ниже. Быстро достигаемые минусовые температуры приводят к тому, что микробы становятся неактивными, но не обязательно убивают их. Медленное замораживание более вредно для бактерий; кристаллы льда, которые образуются и растут, нарушают клеточную и молекулярную структуру бактерий. Оттаивание, по своей сути более медленное, на самом деле является наиболее разрушительной частью цикла замораживания-оттаивания.После замораживания одна треть популяции некоторых вегетативных бактерий может выжить в течение года, тогда как другие виды могут иметь очень мало выживших после этого времени.

Результаты низкотемпературной обработки: Многие эукариотические паразиты, такие как круглые черви, вызывающие трихинеллез, погибают при низких температурах в течение нескольких дней.

Условия: Многие свежие продукты можно предотвратить, если хранить их при 5 ° C (обычная температура холодильника).

Ограничения: Однако срок хранения должен быть ограничен несколькими днями, поскольку некоторые бактерии и плесень продолжают расти при этой температуре. Чтобы убедиться в этом, вспомните некоторые странные вещи, которые вы обнаружили на оставшейся части задней части холодильника. В редких случаях было обнаружено, что штаммы Clostridium botulinum растут и производят смертельные токсины в холодильнике, когда организм находится глубоко в контейнере с пищей, где существуют анаэробные условия.

2. 1. Охлаждение

Чистые культуры могут успешно храниться при 0-4 ° C как в холодильниках, так и в холодильных камерах. Этот метод применяется кратковременно (2-3 недели для бактерий и 3-4 месяца для грибов), потому что метаболическая активность микроорганизмов значительно замедляется, но не останавливается. Таким образом, их рост продолжается медленно, питательные вещества утилизируются, а продукты жизнедеятельности выделяются в среду. Это, наконец, через некоторое время приводит к гибели микробов.

2. 2. Криоконсервация

Криоконсервация (т.е. замораживание в жидком азоте при -196 ° C) помогает выжить чистым культурам в течение длительного времени хранения. В этом методе микроорганизмы в культуре быстро замораживаются в жидком азоте при -196 ° C в присутствии стабилизирующих агентов, таких как глицерин, которые предотвращают образование кристаллов льда и способствуют выживанию клеток.

3. Фильтрация

Когда ингредиенты питательной среды термолабильны.то есть разрушается под действием тепла, использование тепловой стерилизации нецелесообразно. Например, биологические жидкости, такие как растворы антибиотиков, витаминов, экстракты тканей, сыворотка животных и т. Д., Подпадают под эту категорию. Однако в таких случаях используется процесс фильтрации. Для этой цели подходят фильтры Seize (асбестовый фильтр), фильтр Чемберленда-Пастера (фарфоровый фильтр), фильтр Беркефельда (фильтр из диатомовой земли) и мембранный или молекулярный фильтр. Первые три фильтра являются бактериологическими.т.е. они пропускают жидкость, но задерживают бактерии.

В отличие от этого, мембранные фильтры задерживают все формы организмов, какими бы маленькими они ни были (даже вирусы). Средний диаметр пор в этих фильтрах составляет от одного до нескольких микрометров. Эти фильтры служат не только для механической защиты, но и для других факторов, таких как электрические заряды фильтра, электрический заряд микроорганизмов и характер фильтруемой жидкости. Фильтр HEPA (высокоэффективный воздух для твердых частиц) и ламинарный воздушный поток обычно используются в лаборатории для фильтрации входящего и выходящего воздуха соответственно.HEPA-фильтр предотвращает попадание частиц размером 0,3 мкм и крупных размеров.

4. Излучения

Энергия передается через пространство в различных формах, обычно называемых «излучениями». Некоторые из излучений, а именно ультрафиолетовый свет, рентгеновские лучи, гамма-лучи, используются для стерилизации микроорганизмов, особенно чувствительных к нагреванию. Этот метод стерилизации называется «холодная стерилизация » и идеально подходит для одноразовых материалов, состоящих из пластика, шерсти, хлопка и т. Д., Которые можно стерилизовать с использованием высокой дозы или облучения без изменения материала.По мнению других, полная стерилизация затруднена без изменения цвета и вкуса материалов, которые возникают при более высоких дозах излучения. Такие излучения, как УФ-лучи, являются неионизирующими излучениями, а рентгеновские и гамма-лучи — ионизирующими излучениями.

4. 1. Ультрафиолетовые лампы

Ультрафиолетовая часть спектра включает все излучения с длинами волн от 150 до 3900 А. Длины волн около 2650 А обладают наивысшей бактерицидной эффективностью. В настоящее время доступны многие лампы, такие как «бактерицидные лампы», которые излучают ультрафиолетовый свет с высокой концентрацией в наиболее эффективном диапазоне длин волн от 2600 до 2700 А.
Бактерицидные лампы дуги широко используются для уничтожения или уменьшения количества жизнеспособных микроорганизмов при стерилизации операционных в микробиологических лабораториях, больницах и, в частности, комнат розлива в различных отраслях промышленности. Ультрафиолетовый свет имеет очень небольшую способность проникать в материю; он не может проникнуть даже в жидкость. Следовательно, только микроорганизмы, присутствующие на поверхности объекта, уничтожаются при интенсивном и длительном воздействии на него.

4. 2 Гамма-лучи и рентгеновские лучи

Производство гамма-лучей: Гамма-лучи испускаются некоторыми радиоактивными элементами, такими как кобальт, а электронные лучи производятся путем ускорения электронов до высоких энергий в специальных машинах.

Производство рентгеновских лучей: Рентгеновские лучи, которые производятся машинами таким же образом, как и производство электронных лучей, по своей природе аналогичны гамма-лучам.

Способ действия: И рентгеновское, и гамма-излучение имеют длину волны короче длины волны ультрафиолетового света. Рентгеновские лучи с длиной волны от 0,1 до 40 нм и гамма-лучи с еще более короткой длиной волны являются формами ионизирующего излучения, названного так потому, что оно может вытеснять электроны из атомов, создавая ионы.(Более длинные волны включают неионизирующее излучение.) Эти формы излучения также убивают микроорганизмы и вирусы, а ионизирующее излучение повреждает ДНК и производит пероксиды, которые действуют в клетках как мощные окислители. Это излучение также может убить или вызвать мутации в клетках человека, если достигнет их.

Преимущества гамма-лучей:

Гамма-лучи проникают глубоко, но для стерилизации больших масс могут потребоваться часы.

Электронные пучки высокой энергии:

Эффективность электронного пучка:

Электронные пучки высокой энергии имеют гораздо меньшую проникающую способность, но обычно требуют всего нескольких секунд воздействия.

Применение метода: Пищевая промышленность недавно возобновила интерес к использованию излучения для консервирования пищевых продуктов. Его можно использовать для предотвращения порчи морепродуктов дозами от 100 до 250 килорад, мяса и птицы — дозами от 50 до 100 килорад и фруктов — дозами от 200 до 300 килорад. (Один килорад равен 1000 рад) многие потребители в Соединенных Штатах отказываются от облученных продуктов из-за боязни получить радиацию, но такие продукты вполне безопасны и не содержат патогенов и радиации.В Европе мил и другие продукты часто облучают для достижения стерильности. Электронные лучи особенно высокой энергии используются для стерилизации фармацевтических препаратов и одноразовых стоматологических и медицинских принадлежностей, таких как пластиковые шприцы, хирургические перчатки, сшивающие материалы и катетеры. В качестве защиты от биотерроризма почтовые службы часто используют электронно-лучевое излучение для стерилизации определенных классов почты. Эти излучения можно использовать для различения грамположительных и отрицательных бактерий.Грамположительные бактерии более чувствительны к ионизирующим излучениям, чем грамотрицательные бактерии. В настоящее время ионизирующее излучение используется для стерилизации таких чувствительных к нагреванию фармацевтических препаратов, как витамины, гормоны и антибиотики, а также некоторых пластиков и шовных материалов.

5. Десикация

Способ действия: В отсутствие воды, состояние, известное как высыхание, микроорганизмы не могут расти или воспроизводиться, но могут оставаться жизнеспособными в течение многих лет. Затем, когда им станет доступна вода, они могут возобновить свой рост и деление.Эта способность используется в лаборатории, когда микробы сохраняются путем лиофилизации или лиофилизации. Некоторые продукты также подвергаются сублимационной сушке (например, кофе и некоторые фруктовые добавки для сухих злаков).

Устойчивость и усыхание: Устойчивость вегетативных клеток к высыханию варьируется в зависимости от вида и окружающей среды организма. Например, бактерия гонореи может выдерживать сухость только около часа, а бактерия туберкулеза может оставаться жизнеспособной в течение нескольких месяцев.Вирусы обычно устойчивы к высыханию, но они не так устойчивы, как бактериальные эндоспоры, некоторые из которых выжили веками. Эта способность некоторых высушенных микробов и эндоспор сохранять жизнеспособность важна в условиях больницы. Пыль, одежда, постельное белье и повязка могут содержать инфекционные микробы в сухой слизи, моче, гное и кале.

5. 1. Лиофилизация (сублимационная сушка)

В этом методе культуру быстро замораживают при очень низкой температуре (-70 ° C), а затем обезвоживают в вакууме.В этих условиях микробные клетки обезвоживаются и их метаболическая активность прекращается; в результате микробы переходят в состояние покоя и сохраняют жизнеспособность годами. Лиофилизированные или лиофилизированные чистые культуры, затем запечатанные и хранящиеся в темноте при 4 ° C в холодильниках. Центры сбора культур чаще всего используют метод сублимационной сушки.

6. Осмотическое давление

Способ действия: Использование высоких концентраций солей и сахаров для консервирования пищи основано на эффекте осмотического давления.Высокие концентрации этих веществ создают гипертоническую среду, которая заставляет воду покидать микробную клетку; этот эффект также называется плазмолизом. Потеря воды серьезно нарушает функцию клеток и в конечном итоге приводит к их гибели. Этот процесс похож на консервацию путем высушивания, поскольку оба метода лишают клетки влаги, необходимой для роста.

Применение осмотического давления: Использование сахарных желе, джемов и сиропов или растворов солей при консервировании мяса и проведении плазмолиза солений для большинства существующих организмов и предотвращения роста новых организмов.Однако некоторые галофильные организмы процветают в этих условиях и вызывают порчу, особенно солений, а некоторые грибы могут жить на поверхности варенья.

Ограничения: Как правило, плесневые грибки и дрожжи гораздо более способны расти, чем бактерии, в материалах с низкой влажностью или высоким осмотическим давлением. Это свойство плесени, иногда в сочетании с их способностью расти в кислых условиях, является причиной того, что плоды и зерна портятся плесенью, а не бактериями.Это также одна из причин, по которой плесень может образовывать плесень на влажной стене или занавеске для душа.

7. Электричество

В процессе стерилизации используются электрические токи высокой и низкой частоты. Прохождение тока через жидкость, содержащую микроорганизмы, убивает значительную часть микробной флоры жидкости. Поскольку полной стерилизации не удается добиться, использование электричества в процессе стерилизации было ограничено при пастеризации молока и фруктовых соков и дезинфекции воды.

B. Химические методы стерилизации

В лаборатории обычно используются различные нелетучие химические вещества для стерилизации использованной стеклянной посуды, стола, перчаток и т. Д. Основными целями использования таких химикатов являются для уничтожения потенциально опасных микроорганизмов, присутствующих на таких изделиях, а также для уменьшения количества грибковых спор в лабораторной атмосфере. Это широкие разновидности дезинфицирующих средств; некоторые важные из них:

3

Орган Тяжелые металлы

микробиостатический; он используется реже из-за его раздражающего пара.

Галогены

Хлор Хлор и его соединения

Работают как дезинфицирующее средство общего назначения и дезинфицирующее средство

hora

Антисептик

Спирты

Этил и изопропил

Кожный антисептик

Полезное дезинфицирующее средство для стерилизации поверхностей столешниц, неодушевленных предметов; orgnanomercurials как антисептики для кожи.

Моющие средства

Мыло Роккал и Зефиран

Дезинфицирующие средства для посуды и посуды; кожный антисептик.

Фенольные соединения

Лизол, крезол и др.

Бактерицидные агенты, эффективные против широкого спектра микроорганизмов.

Четвертичные аммониевые соединения

Алкилдиметилбензиламмоний хлорид и т. Д.

Кожный антисептик, дезинфицирующее средство для посуды.

Нитраты

Нитрат серебра

Дезинфицирующее средство для поверхности исследуемых материалов

Стерилизация — принятые методы (информационный лист)

Допустимые методы стерилизации

Информационный лист: Управление животных ресурсов предоставило набор руководящих документов (политики, инструкции и информационные листы) для использования при планировании процедур с животными в Университете Айовы.Этот информационный лист содержит текущее руководство по рекомендованному тестированию исследовательских биопрепаратов на патогены.

Назначение

Целью этого документа является предоставление руководства по обычно используемым методам стерилизации хирургических инструментов и других материалов для использования в протоколах для животных, утвержденных IACUC.

Допустимые методы полной стерилизации

  • Предпочтительный
    • Автоклав (высокое давление / температура)
  • Другое
    • Газообразный оксид этилена — для изделий, не выдерживающих высоких температур
    • Химическая / холодная стерилизация — для предметов, которые нельзя стерилизовать другими методами

Принятый метод повторной стерилизации между животными с использованием метода асептического наконечника для грызунов

  • Сухой жар (стерилизатор для сухих гранул)
    • ПРИМЕЧАНИЕ. Инструменты ДОЛЖНЫ быть полностью стерилизованы другим методом между хирургическими вмешательствами

Автоклавная стерилизация

  • Эффективность автоклавирования должна быть проверена с помощью интегрирующей полоски, помещенной внутри упаковки
    • Дополнительно рекомендуется заклеить упаковку автоклавной лентой
  • В автоклаве

  • используется пар с высокой температурой и давлением, который должен проникать в упаковку для достижения стерилизации.
    • Такие материалы, как муслиновая ткань и ткань из крепированной бумаги, позволяют пару проникать внутрь упаковки
    • Не следует использовать такие материалы, как алюминиевая фольга и вощеная бумага, поскольку пар не может проникнуть в них
  • Время выдержки в автоклаве зависит от типа автоклава.
    • Для гравитационных стерилизаторов обычно требуется выдержка при 121 ° C (250 ° F) в течение не менее 30 минут.
    • Для стерилизаторов с динамическим удалением воздуха обычно требуется выдержка при 132 ° C (270 ° F) в течение не менее 4 минут. [1]
    • Пакеты большего размера требуют больше времени для достижения необходимого уровня нагрева и давления
  • Автоклавная упаковка должна храниться в сухом, непыльном, хорошо вентилируемом помещении, предпочтительно в закрытом шкафу.
    • Срок хранения не определен, если упаковка хранится надлежащим образом (шкаф, ящик) и не промокает, не разрывается или не имеет каких-либо других событий, нарушающих ее целостность и стерильность

Стерилизация оксидом этилена [2]

  • ПРИМЕЧАНИЕ. Служба центральной стерилизации UIHC больше не выполняет стерилизацию оксидом этилена, и она не предоставляется где-либо еще на территории кампуса [3] , [4]
  • Используется для изделий, чувствительных к нагреванию и / или влаге
  • Эффективность зависит от концентрации газа, температуры, относительной влажности и времени воздействия
  • Предметы можно стерилизовать в их окончательной упаковке, но эффективность зависит от способности газа свободно диффундировать через них
  • Требуется аэрация для десорбции окиси этилена из камеры и предметов
    • Некоторым материалам, таким как определенные биосовместимые полимеры и гели, могут потребоваться недели для полного удаления газа из химического вещества.
    • Размещение любых материалов без достаточного времени и аэрации для десорбции может привести к реакции тканей и проблемам со здоровьем
  • Недостатки
    • Опасности — воспламеняющиеся, взрывоопасные, токсичные и канцерогенные
    • Продолжительность цикла
    • Стоимость

Химическая / холодная стерилизация

  • Примеры обычных коммерческих стерилизаторов и их активного ингредиента (ов):
    • ПРИМЕЧАНИЕ: Эта информация основана на имеющейся в настоящее время информации по состоянию на 27.05.20.Обратитесь к инструкциям производителя, чтобы узнать, как правильно приготовить и использовать.
    • CIDEX ® Раствор активированного диальдегида [5]: глутаральдегид
      • Активен до 14 дней после приготовления
      • Для стерилизации при комнатной температуре требуется 10 часов выдержки
    • Spor-Klenz ® : пероксид водорода и пероксиуксусная кислота
      • Концентрат холодного стерилизатора [6]
        • Разбавить очищенной водой до концентрации 1% об. / Об.
        • Использовать немедленно и не хранить
        • Для стерилизации при комнатной температуре требуется 11 часов выдержки
      • Готовый к использованию холодный стерилизатор [7]
        • Можно использовать повторно до 14 дней
        • 5.Для стерилизации при комнатной температуре требуется 5 часов выдержки
    • Спорицидин ® Раствор для стерилизации и дезинфекции [8]: глутаральдегид, фенол, фенат
      • Активен в течение 14 дней после приготовления
      • Для стерилизации при комнатной температуре требуется 12 часов выдержки
  • При использовании этих агентов необходимо соблюдать осторожность, чтобы гарантировать, что они используются с соответствующими мерами безопасности и что стерилизуемые предметы совместимы со стерилизующим средством
  • Факторы для эффективного и правильного использования холодной стерилизации:
    • Химические вещества должны классифицироваться как «стерилизующие».
      • Обычно используемые дезинфицирующие средства, такие как спирт, йодофор, четвертичный аммоний и фенольные соединения, не являются эффективными стерилизующими средствами и неприемлемы для использования на предметах (например,g., катетеры, инструменты), предназначенные для использования в хирургических процедурах выживания
    • Физические свойства стерилизуемых предметов должны быть гладкими и непроницаемыми для влаги
    • Все поверхности, как внутренние, так и внешние, должны подвергаться воздействию стерилизующего средства
    • Стерилизующий раствор должен быть чистым и свежим.
      • Дата приготовления должна быть указана на упаковке
    • Химически стерилизованные инструменты необходимо тщательно промыть как внутри, так и снаружи стерильным физиологическим раствором или стерильной водой перед использованием, чтобы избежать повреждения тканей.
    • Для поддержания стерильности с инструментами необходимо обращаться в асептических условиях (например, обращаться с инструментами в стерильных перчатках и помещать на стерильное поле)
  • Стандартные рабочие процедуры (СОП)

  • ДОЛЖНЫ быть вывешены в лаборатории при использовании методов химической стерилизации и должны содержать следующую информацию:
    • Используемый агент (т.е. активный ингредиент)
    • Как готовят стерилизующее средство
    • Срок действия стерилизующего средства после приготовления (срок годности)
    • Время воздействия, необходимое для стерилизации инструментов / принадлежностей
    • Как стерилизующий раствор удаляется перед использованием в асептических условиях
    • Шаблон

    • и пример СОП можно найти здесь: Стандартные рабочие процедуры (СОП) химической стерилизации
  • Проконсультируйтесь с ветеринаром OAR, если возникнут какие-либо вопросы, касающиеся использования химических / холодных стерилизаторов.

Стерилизация сухих гранул

  • Используется для стерилизации наконечников хирургических инструментов между несколькими операциями
  • Инструменты ДОЛЖНЫ быть полностью стерилизованы другим методом между хирургическими вмешательствами.
    • Хирургический сеанс включает операции, выполненные в тот же день
  • Стерилизатор

  • должен быть активирован минимум на 20 минут, чтобы достичь нужной температуры перед использованием [9]
  • Весь биологический мусор (e.грамм. кровь, ткань) необходимо удалить перед помещением инструментов в стерилизатор
  • Инструменты должны быть помещены в стерилизатор как минимум на 15 секунд, прежде чем будет достигнута стерилизация [10]
    • После извлечения инструментов из стерилизатора кончики станут ОЧЕНЬ ГОРЯЧИМИ
    • Им нужно дать остыть перед использованием, чтобы не обжечь животное
  • Стерилизованы только кончики инструментов, а ручки считаются загрязненными
    • Инструменты должны использоваться таким образом, чтобы кончики инструментов оставались стерильными.Подробную информацию о технике асептического наконечника см. В Руководстве по выживанию грызунов №
    • .

Последний раз редактировал IACUC 10.06.2020

ПРОВЕРКА МЕТОДОВ СУХОЙ ТЕПЛОВОЙ СТЕРИЛИЗАЦИИ

Об авторах:
Лила Дхар * 1 , Сурендер Джаландра
1 Сет Г.Л. Бихани, Колледж технического образования,
Институт фармацевтических наук и исследований лекарственных средств,
Гаганпат, Шри Ганганагар, Раджастан 33447
902 * ldbudania @ gmail.com

РЕФЕРАТ
Сухое тепло иногда используется для стерилизации вместо гораздо более эффективного влажного тепла, поскольку некоторые материалы чувствительны к влаге. Сухой жар часто используется для того, чтобы убедиться, что стекло и другое лабораторное оборудование не содержат пирогенных материалов. Процесс стерилизации в камере или туннеле с горячим воздухом является критически важным процессом, и в большинстве стран существует нормативное требование для подтверждения этого процесса. Валидация определяется как документированная процедура получения, записи и интерпретации результатов, чтобы гарантировать, что процесс стерилизации сухим жаром был и будет неизменно эффективным.Валидация сухожарового стерилизатора заключается в точном измерении температуры в критических точках стерилизационной камеры на протяжении всего процесса. В процессе сухого нагрева обычно используется температура от 250 ° C до 400 ° C в течение различного времени. Стерилизатор должен нагревать все части своей загрузки до заданной температуры в течение определенного периода времени, достаточного для достижения желаемой стерильности.

Идентификатор ссылки: PHARMATUTOR-ART-1578

ВВЕДЕНИЕ
Сухой жар — один из наиболее часто используемых методов стерилизации и / или депирогенизации фармацевтических компонентов и продуктов.Стерилизация сухим жаром часто используется для термостойких масел, мазей и порошков. Чаще всего депирогенизацию парентеральных контейнеров проводят в сушильном шкафу. Процесс депирогенизации также используется на некоторых термостабильных компонентах, стеклянных контейнерах, металлическом оборудовании и т. Д., Чтобы сделать изделие и конечный парентеральный продукт свободными от пирогенов. Оборудование, используемое для подачи сухого теплоносителя, должно быть аттестовано, чтобы гарантировать, что система способна обеспечивать стерильные и / или депирогенированные компоненты на воспроизводимой основе.Валидация процесса стерилизации сухим жаром и депирогенизации включает подходы и процедуры, аналогичные тем, которые используются для стерилизации паром. Эффективность любой термической обработки определяется конструкцией и источником тепла. Горячий воздух значительно менее эффективен в теплоносителе по сравнению с паром. Усилия по валидации должны включать распределение тепла, проникновение тепла, определение бионагрузки и пирозагрузки, целостность фильтра и проблемы с микробами / эндотоксинами.[Агаллоко Джеймс, Карлтон Фредерик Дж.]

ВИДЫ СТЕРИЛИЗАТОРОВ СУХОГО ТЕПЛА
Типы стерилизаторов сухого нагрева, обычно используемых в фармацевтической промышленности, включают стерилизаторы периодического действия с принудительной конвекцией, стерилизаторы туннельного инфракрасного излучения, стерилизаторы с принудительной конвекцией, стерилизаторы непрерывного действия, микроволновые и лазерные / плазменные стерилизаторы. [Шарма П.П.,]

Общие положения
Сегодня в фармацевтической промышленности используются два типа систем стерилизации сухим жаром.Это обычная печь с горячим воздухом и туннельная система. Основное различие между этими двумя системами в том, что касается валидации, заключается в переменной скорости ленты или конвейера в туннельной системе. Ключом к проверке стерилизатора сухого нагрева является подтверждение его повторяемости. Это означает, что установка может стабильно работать в заданном наборе условий для создания стерильных, апирогенных и твердых материалов. Повторяемость при стерилизации сухим жаром, очевидно, предполагает постоянство и надежность в достижении и поддержании желаемой температуры.Требуемая температура должна быть достигнута во всех областях камеры нагрева. В камере всегда будет место, представляющее холодное пятно; то есть область, которую труднее всего нагреть до желаемой температуры. Это холодное пятно должно быть идентифицировано, чтобы можно было провести валидационные исследования, включающие мониторинг термопар и микробиологические исследования. Если некоторые ключевые характеристики стерилизатора с сухим нагревом, соответствующие требованиям GMP, не контролируются, со временем холодное пятно внутри стерилизатора изменится, и ключевой элемент — повторяемость проверки — не будет достигнут.Характеристики GMP как для печи периодического действия, так и для туннельного стерилизатора должны контролироваться перед проведением каких-либо проверочных исследований. Без контроля этих характеристик процесса проверка или даже квалификация сухожарового стерилизатора — это пустая трата времени и денег.

Как и в любом процессе стерилизации, первый этап валидации сухожарового стерилизатора включает в себя квалификацию всего используемого оборудования и инструментов. Этот этап включает проверку и документирование всех инженерных сетей, воздуховодов, фильтров и регулирующих клапанов или переключателей для печи или туннельного блока, а также калибровку приборов, используемых для проверки и мониторинга процесса.Используются следующие инструменты:
1. Регистраторы температуры и термопары

2. Ванны с постоянной температурой

3. Амперметры

4. Монометры

5. Генераторы диоктилфталата

6. Счетчики частиц

7. Велометры

8. Тахометры

K e y Параметры процесса, которые необходимо контролировать перед валидацией сухожаровых стерилизаторов

Характеристики основного оборудования, которые необходимо проверить перед исследованиями калибровки и валидации

Валидационные исследования, проведенные на сухожаровых стерилизаторах, можно разделить на два основных компонента.Один компонент охватывает все физические процессы, которые должны быть проверены, такие как контроль температуры, уровни твердых частиц в воздухе и скорости ленты. Второй компонент включает в себя процесс уничтожения как микробных, так и пирогенных загрязнителей.

Фармакопея США рекомендует, чтобы проверка циклов стерилизации термостабильных компонентов включала вероятность выживания микробов 10K12 спор Bacillus subtilis. Он также рекомендует, чтобы для проверки циклов депирогенизации соответствующие предметы были заряжены как минимум 1000 ЕС очищенного эндотоксина, где тест LAL используется для демонстрации того, что эндотоксин был инактивирован до не более 1/1000 от исходного количества (3 -блог сокращения).Циклы больше не определяются минимальными требованиями к времени и температуре. Исторически циклы стерилизации сухим жаром определялись как 170 ° C в течение не менее двух часов, в то время как циклы депирогенизации определялись как минимум при 250 ° C в течение не менее 30 минут. Типичный цикл может использовать температуры в диапазоне от 1808 ° C до 300 ° C. Температуры в нижней части этого диапазона будут стерилизовать, в то время как более высокие температуры в диапазоне подходят для депирогенизации. Эффективность цикла также будет зависеть от времени цикла.Общее время завершения пакетного цикла часто превышает три часа, включая охлаждение загрузки. [Хьюго и Рассел]

СТЕРИЛИЗАЦИЯ СУХОЙ ТЕПЛОЙ
Считается, что сухой жар уничтожает микроорганизмы, вызывая окисление.

ВАЛИДАЦИЯ
Используются два типа систем стерилизации сухим жаром.

Обычный духовой шкаф с горячим воздухом

Туннельная система.

ПРОВЕРКА ПЕЧИ периодического действия
1. Определение баланса воздуха : Воздух должен быть уравновешен таким образом, чтобы положительное давление оказывалось на нестерильной стороне при открытии дверцы

2. Распределение тепла в пустой камере: Термопары должны располагаться в соответствии с определенной заранее определенной схемой. Повторяемость достижения температуры и идентификации холодного пятна может быть достигнута, если диапазон температур составляет ± 15 ° C во всех контролируемых точках. Также могут проводиться исследования распределения тепла в зависимости от переменных расходов воздуха.

3. Исследования проникновения тепла: Эти исследования должны быть разработаны для определения местоположения самой медленной точки нагрева внутри товара в различных местах тестовой загрузки в стерилизаторе.Термопары размещаются в товарах, расположенных в областях, которые могут оказать наибольшее сопротивление достижению желаемой температуры. Обычно три повторяющихся цикла выполняются при минимальной и максимальной температуре. Холодное пятно не должно двигаться во время повторных исследований. Можно изучить другие вариации цикла, влияющие на проникновение тепла в холодное пятно, и они могут включать (а) изменения испытательной нагрузки, (б) изменения заданного значения температуры и (в) изменения времени воздействия.

4. Механическая повторяемость : Во время всех этих исследований должна быть проверена механическая повторяемость с точки зрения скорости воздуха, постоянства температуры, а также надежности и чувствительности всех термостатов и приборов.

ТЕПЕРЬ ВЫ ТАКЖЕ МОЖЕТЕ РАЗМЕСТИТЬ СВОЮ СТАТЬЮ В ИНТЕРНЕТЕ.

ПОДАТЬ СВОЮ СТАТЬЮ / ПРОЕКТ НА [email protected]

Подпишитесь на уведомления Pharmatutor по электронной почте

УЗНАТЬ БОЛЬШЕ СТАТЬЕЙ В НАШЕЙ БАЗЕ

404 エ ラ ー (error404) |荏 原 製作 所

ご 指定 の URL が 見 つ か り ま せ ん で し た。 (404 エ ラ ー)

ご 指定 の URL が 見 つ か り ま せ ん で し た。
フ ァ イ ル が 削除 さ れ て か 、 ア ド レ ス が 変 更 れ て い る 可能性 す。
ペ ー ジ 上部 の 検 索 語 入 力 製子 な ど の キ ー ド を 入 力 し る か 、 、
以下 の リ ン ク か ら お 探 し く さ い。

Указанный URL не найден.(ошибка 404)

Указанный URL-адрес не найден.
Возможно, файл был удален или адрес был изменен.
Выполните поиск снова, введя ключевые слова, такие как название продукта, в поле ввода вверху страницы.
Пожалуйста, перейдите по ссылке ниже.

ไม่ พบ URL ที่ ระบุ (ข้อ ผิด พลาด 404)

ไม่ พบ URL ที่ ระบุ
ไฟล์ อาจ ถูก ลบ ไป แล้ว หรือ ที่ อยู่ อาจ เปลี่ยน ไป แล้ว
ค้นหา อีก ครั้ง โดย ป้อน คีย์เวิร์ด เช่น ชื่อ ผลิตภัณฑ์ ลง ใน ช่อง ข้อมูล ที่ ด้าน บน สุด ของ หน้า
กรุณา ไป ตาม ลิงก์ ด้าน ล่าง นี้

您 要 访问 的 网址。 (404 错误)

找不到 您 要 访问 的 网址。
文件 不 存在 、 或者 由于 路径 改变 而 导致 无法 该 网址。
请 在 网页 上方 的 检索 栏里 输入 制子 名 或 关键字 进行 搜索 , 或 从 进行 查找。

L’URL specificato non è stato trovato.(ошибка 404)

L’URL определенно не имеет статуса.
Il file potrebbe essere stato cancellato, o l’indirizzo potrebbe essere stato modificato.
Cerca di nuovo digitando le parole chiave, come ad esempio il nome di un prodotto, nel campo di insrimento на cima alla pagina.
Per favore, segui il link in basso.

O URL-адрес, указанный без контраста. (Erro 404)

O URL-адрес, указанный без контраста.
О arquivo pode ter sido apagado ou o endereço pode ter mudado.
Faça uma nova busca usando palavras-chaves como um nome de produto no campo de pesquisa no topo da página.
Siga o link abaixo, por Favor.

해당 URL 을 찾을 수 없습니다. (오류 404)

해당 URL 을 찾을 수 없습니다.
파일 이 삭제 되었거나 주소 가 변경 되었을 수 있습니다.
페이지 상단 입력란 에 제품명 등 의 키워드 를 입력 해 다시 검색 하시기 바랍니다.
아래 링크 에 접속 하세요.

URL лаконичный, тидак дитэмукан.(галат 404)

URL лаконичный тидак дитэмукан.
Berkas mungkin telah dihapus atau alamat mungkin telah diubah.
Cari lagi dengan memasukkan kata kunci seperti nama produk ke kolom inputan di puncak halaman.
Silakan ikuti tautan di bawah ini.

Không tìm thấy địa chỉ URL ã nêu. (Lỗi 404)

Không tìm thấy a chỉ URL ã nêu.
Tập tin này có thể đã bị xóa bỏ hoặc địa chỉ có thể ã thay đổi.
Хай thử lại bằng cách nhập từ khóa (chẳng hạn như tên sản phẩm) вао вонг nh np liệu ở trên cnng của trang.
Vui lòng truy cập vào ng dẫn dưới đây.

Обзор

по усовершенствованной технологии высокотемпературных измерений: Термометрия оптического волокна

В данной статье кратко рассматривается технология оптоволоконной термометрии для высокотемпературных измерений. Описываются принципы, характеристики, последние достижения и преимущества технологии.Приведены примеры использования технологии. Многие чернотельные, инфракрасные и флуоресцентные оптические термометры разработаны для практического применения.

1. Введение

Измерение температуры очень важно при изучении пожаров и горения. Обычно используются термопары, так как их принцип действия прост и удобен в использовании. Однако существуют некоторые ограничения [1] для измерения с помощью термопары максимальной измеряемой температуры, отклика, точности, стабильности и срока службы.Оптоволоконные термометры (OFT) [2–25] получили широкое распространение в последние десятилетия. Там температура измеряется фотонными сигналами. Эти устройства могут заменить существующие методы измерения температуры или расширить возможности измерения. Это связано с тем, что OFT обладают преимуществами долговременной стабильности, невосприимчивости к электромагнитным помехам, высокой чувствительностью, быстрым откликом и могут выдерживать жесткие условия окружающей среды.

Из всех разработанных ОФТ широко используются чернотельные и флюороскопические сенсоры.Датчики черного тела состоят из высокотемпературного оптического волокна с непрозрачной полостью, прикрепленной к измерительному наконечнику. Спектральный поток излучения, регистрируемый на конце волокна, связан с температурой полости через закон Планка. Температуру получают путем измерения спектральной интенсивности или распределения интенсивности.

Флюороскопические датчики имеют фотолюминесцентный материал, прикрепленный к активному концу оптического волокна. Чувствительный наконечник активируется импульсом возбуждения от импульсного лазера или импульсной лампы.Температуру можно определить по интенсивности и времени затухания (которое зависит от температуры) фотолюминесцентного сигнала. Флюороскопические датчики очень чувствительны, но их температурный диапазон ограничен свойствами материала. Как правило, интенсивность флуоресценции мала при высоких температурах из-за эффекта гашения. Между тем фон излучения черного тела усиливается при высоких температурах. Следовательно, отношение сигнал / шум (SNR) низкое, что ограничивает область применения измерений при высоких температурах.

Датчики черного тела в принципе могут работать в широком диапазоне температур. Однако интенсивность сигнала мала в области более низких температур, так как интенсивность излучения почти экспоненциально связана с температурой. Термометр имеет сильный сигнал яркости и более высокое разрешение в области более высоких температур. Поэтому чернотельные датчики обычно используются в высокотемпературных приложениях. Оптимальная температура измерения датчика OFT абсолютно черного тела обычно колеблется от 500 до 500 ° C, хотя было заявлено, что диапазон температур можно расширить до.

Для расширения диапазона измерений была разработана сложная схема OFT [12, 14], сочетающая преимущества как черного тела, так и флуоресцентного OFT. С другой стороны, было проведено множество исследований [15–21, 26] флуоресцентных материалов для высокотемпературного зондирования. Сообщалось об исследовании [21] термометрии на основе флуоресценции волоконно-оптического зонда на кристалле рубина, подвергнутого воздействию высоких температур. Результаты показали, что монокристаллический зонд (изготовленный из сапфирового волокна с легированием Cr 3+ ) мог непрерывно работать при температурах до.Может быть покрыт широкий диапазон измерения температуры от до с погрешностью приблизительно.

В этой статье будут рассмотрены чернотельные, флюороскопические и бесконтактные инфракрасные OFT. Предполагается, что у OFT есть потенциальные преимущества для использования при изучении огня и горения.

2. Черное тело OFT
2.1. Теоретические основы черного тела OFT

Черное тело OFT основано на законе излучения Планка, который описывает спектральное распределение яркости для идеального черного тела.Мощность излучения (), излучаемая на единицу площади поверхности и на единицу длины волны, определяется выражением

НИЗКОТЕМПЕРАТУРНАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ ЯВЛЯЕТСЯ ЭФФЕКТИВНЫМ ЗНАЧЕНИЕМ ДЛЯ

ОСНОВЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ

ОСНОВЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ Цели: заявить о важности стерилизации для ухода за пациентом. Обзор трех ключевых моментов процесса стерилизации. Описание используемых методов стерилизации, применение,

.

Подробнее

ОСНОВЫ УПАКОВКИ

ОСНОВЫ УПАКОВКИ Цели: Обзор нормативных требований к упаковке. Представить назначение, функции и основные характеристики упаковки. Описать варианты упаковки, их использование и

.

Подробнее

Нормы и стандарты

Нормы и стандарты Безопасная обработка инструментов от воздействия Роуз Сиви, MBA, BS, RN, CNOR, CRCST, CSPDT Цели обучения 1.Обсудить роль федеральных агентств в регулировании процедур обработки

Подробнее

Стандарт Австралии / Новой Зеландии

AS / NZS 4187: 2003 AS / NZS 4187 Стандарт Австралии / Новой Зеландии Очистка, дезинфекция и стерилизация медицинских и хирургических инструментов и оборудования многоразового использования, а также обслуживание связанных с ними сред в

Подробнее

ЧИСТКА И ДЕЗИФИКАЦИЯ

ЧИСТКА И ДЕЗИНФИКАЦИЯ Процедуры очистки и дезинфекции должны быть частью стандартных рабочих процедур, составляющих вашу программу безопасности пищевых продуктов.Неправильно очищенные и продезинфицированные поверхности допускают попадание вредных веществ

Подробнее

Биологические индикаторы и

& и БИ играют важную роль в мониторинге стерилизаторов, наряду с физическими и химическими показателями. Однако только БИ содержат живые споры, которые напрямую измеряют летальность стерилизации

.

Подробнее

Дезинфекция кухни

Дезинфекция кухни Урок 11 Обзор Дезинфекция кухни Время 30 минут Цель Объяснить, как правильно чистить и дезинфицировать кухню Цели По завершении этого урока сотрудники

Подробнее

Основные методы работы в автоклаве

Фундаментальные методы автоклавирования Версия 3, сентябрь 2010 г. Вероника Татаринова GSBmE University of NSW Brandy Nelson University of Kentucky Следующая информация предназначена для асептического / стерильного хирургического отделения,

Подробнее

Назад к основам: гибкая обработка эндоскопа 1.6 www.aornjournal.org/content/cme LISA SPRUCE, DNP, RN, CNS-CP, CNOR, ACNS, ACNP, FAAN

НЕПРЕРЫВНОЕ ОБРАЗОВАНИЕ Вернуться к основам: гибкая обработка эндоскопов 1.6 www.aornjournal.org/content/cme LISA SPRUCE, DNP, RN, CNS-CP, CNOR, ACNS, ACNP, FAAN Контактное время для продолжения обучения указано

Подробнее

Безопасность баллонов со сжатым газом

Безопасность баллонов со сжатым газом I.Задний план. В связи с особенностями газовых баллонов необходимо соблюдать особые меры предосторожности при хранении и обращении. Опасности, связанные со сжатыми газами, включают вытеснение кислорода,

Подробнее

Сан-Хосе РУКОВОДСТВО ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ

San josé РУКОВОДСТВО ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ Руководство по сборке и эксплуатации San josé 30 мбар — ПОРТАТИВНЫЙ ГАЗОВЫЙ БАРБЕКЮ 1. 2. 3. Неправильная установка, регулировка, изменение, обслуживание или техническое обслуживание может привести к травмам или повреждению имущества.

Подробнее

ПРОГРАММА БЕЗОПАСНОСТИ И ЗДОРОВЬЯ

НОМЕР ПРОГРАММЫ № СТРАНИЦЫ 05-005 10 ДАТА ВЫПУСКА ПЕРЕСМОТРА Редакция 2 01.11.2005 ПРОГРАММА БЕЗОПАСНОСТИ И ЗДОРОВЬЯ Вход в замкнутое пространство 1.0 ВВЕДЕНИЕ Вход в замкнутое пространство представляет собой серьезную опасность на рабочем месте, способную к

Подробнее

Безопасность баллонов со сжатым газом

Тренинг ISC по безопасности баллонов со сжатым газом стр. 1 Безопасность баллонов со сжатым газом Эта учебная программа адаптирована из онлайн-программы обучения OSHA на веб-сайте

OSHA государственного университета Оклахомы.

Подробнее

ОСНОВЫ ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ

ОСНОВЫ ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ Цели: Рассмотреть основные факторы, влияющие на очистку и обеззараживание хирургических устройств.Представьте основы ручной и автоматической очистки. Ознакомьтесь с различными

.

Подробнее

ramon 2.2 Radon Monitor инструкция

ramon 2.2 Radon Monitor manual I.) ОБЩЕЕ … Ваш ramon 2.2 Radon Monitor поставляется с блоком питания и инструкцией по эксплуатации. Перед использованием радонового монитора внимательно прочтите эту инструкцию

Подробнее

СТЕРИЛИЗАЦИЯ د СТЕРИЛИЗАЦИЯ

СТЕРИЛИЗАЦИЯ.د СТЕРИЛИЗАЦИЯ — это термин, относящийся к любому процессу, который устраняет (удаляет) или убивает все формы микробной жизни, включая инфекционные агенты (такие как грибы, бактерии, вирусы, споры

Подробнее

УХОД ЗА ВОДОНАГРЕВАТЕЛЕМ

http://waterheatertimer.org/troubleshoot-rheem-tankless-water-heater.html Осмотр водонагревателя УХОД ЗА ВАШИМ НАГРЕВАТЕЛЕМ Система вентиляции (только прямая вентиляция) Необходимо проверить систему вентиляции

Подробнее

Техник по медицинскому обеспечению

Отдел: Департамент по делам ветеранов Агентство: Управление здравоохранения ветеранов Номер объявления о вакансии: VX-MC-162359 Техник по медицинскому снабжению Диапазон заработной платы: 26 940.00-43 676,00 долларов США в год Series &

Подробнее

ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕПЛА И ХОЛОДА

ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕПЛА И ХОЛОДА ВВЕДЕНИЕ Тепло и холод — простые и очень эффективные терапевтические инструменты. Их можно использовать локально или по всему телу, а при правильном применении тепла и холода

Подробнее

АЛМАЗНЫЙ ПОРОШОК — МИКРОН

ПЕРЕСМОТР ПАСПОРТА БЕЗОПАСНОСТИ: 28.08.2015 АЛМАЗНЫЙ ПОРОШОК — МИКРОН 1.ИНФОРМАЦИЯ О ПРОДУКТЕ И КОМПАНИИ 1.1 ИДЕНТИФИКАТОР (И) ПРОДУКТА НАИМЕНОВАНИЕ ПРОДУКТА: АЛМАЗНЫЙ ПОРОШОК — МИКРОН МИКРОН 5 КАРАТ ЧАСТЬ № 100 КАРАТ ЧАСТЬ № МИКРОН

Подробнее

ACO Принципы очистки дренажа

Процедуры очистки ACO Принципы очистки дренажа Страница Введение 3 Принципы очистки 4 Процедуры очистки Принципы очистки ACO для дренажа Чистящие химические вещества 5 Ручная очистка дренажа

Подробнее

Изоляция из пеноматериала PolyMaster и устойчивость к плесени Заявление о плесени RetroFoam от природы устойчиво к росту плесени и не содержит целлюлозу или другие волокна, которые могут способствовать росту плесени.RetroFoam

Подробнее

Программа баллонов со сжатым газом

Департамент по процедурам охраны окружающей среды и безопасности Программа баллонов со сжатым газом Март 2010 Программа баллонов со сжатым газом Стр. 1 из 8 Содержание I. Введение II. III. IV. Сфера действия политики

Подробнее

Лаборатория 5: Свойства ферментов

Лаборатория 5: Свойства ферментов Технические задачи 1.Точно измеряйте и переносите растворы с помощью пипеток 2. Используйте спектрофотометр для изучения действия ферментов. 3. Правильно изобразите набор данных. Знание

Подробнее

ПРОЦЕДУРЫ РАЗРЕШЕНИЯ НА ГОРЯЧИЕ РАБОТЫ

ОХРАНА ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ И БЕЗОПАСНОСТЬ КОЛУМБИЙСКОГО УНИВЕРСИТЕТА ПРОЦЕДУРЫ РАЗРЕШЕНИЯ НА ГОРЯЧУЮ РАБОТУ МЕДИЦИНСКИЙ ЦЕНТР КОЛУМБИЙСКОГО УНИВЕРСИТЕТА февраль 2010 г. 1 СОДЕРЖАНИЕ A. ЦЕЛЬ 3 B. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ 3 C. ПОЛИТИКА И ПРОЦЕДУРЫ 3-4

Подробнее

Уборка и хранение материалов

29СФР 1926 г.20 (b) — Сокращение числа несчастных случаев, 29CFR 1926.21 — Обучение и обучение по вопросам безопасности 29CFR 1926.20 (a) — Небезопасные условия труда Уборка и хранение материалов 1. Прочтите соответствующую справочную информацию

Подробнее

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.