Посев крови бактериологический: что показывает анализ на гемокультуру, правила забора у взрослого

Содержание

Что показывает анализ крови на стерильность

Показания для проведения анализа

Основная цель анализа – выявить наличие вредоносных микроорганизмов, провоцирующих воспалительный процесс.

Диагност может назначить пациенту сдать кровь на микробиологическое исследование в следующих случаях:

  • если пациент страдает от специфической симптоматики, но медики длительное время не могут определить, что служит первоисточников патологического процесса;
  • медик предполагает наличие септической инфекции у обследуемого;
  • наличие осложнений, вызванных неграмотным хирургическим вмешательством;
  • постановка катетера во внутренние органы на длительное время;
  • человек периодически страдает от высокой температуры тела, но врачи не могут определить, что служит причиной такой реакции организма;
  • наличие в организме импланта, напрямую контактирующего с биологическими средами организма.

Абсолютным показанием к поведению тестирования является наличие искусственных клапанов миокарда. Чтобы получить достоверный результат анализа, придется выждать не менее 10 суток, поскольку для прорастания патогенных микроорганизмов потребуется несколько дней. 

Специалисты предупреждают, что скорость этого процесса зависит от типа возбудителя. Стоит отметить, что после забора биоматериала многим пациентам назначают прием антибиотиков (исходя из присутствующей симптоматики), но подобрать более грамотную и оптимальную схему лечения возможно только после получения данных гемотеста.

Кроме этого, показанием к назначению гемокультуры (это синоним исследования крови на стерильность) является существование особых факторов риска, которые могут привести к распространению инфекции в кровь. Это наличие:

  • постоянного катетера мочевого пузыря;
  • внутривенные катетеры или шунты, например, у пациентов, находящихся на хроническом гемодиализе;
  • фактором риска являются обширные полостные операции, и особенно повторные и многократные, например, поэтапные пересадки кожи в клинике ожоговой хирургии;

Длительное лечение антибиотиками также уменьшает защитные силы организма и способствует появлению резистентных штаммов микроорганизмов, которые могут быть довольно стойкими. Поэтому длительное лечение антимикробными средствами, которое не дает результата, также является показанием для проведения анализа крови на стерильность.

https://www.youtube.com/watch?v=_t2qBdtNnjc

Также показанием к проведению этого исследования являются результаты анализа крови, например, токсическая зернистость нейтрофилов, особенно на фоне клиники сепсиса, выраженная нейтропения и некоторые другие результаты исследований.

В настоящее время посев крови на стерильность, или гемокультура является «золотым стандартом» диагностики септических состояний. Кроме этого, анализ может выявить не только наличие микроорганизмов и бактерий, но также и грибков в кровяном русле, поэтому анализ крови на стерильность позволяет диагностировать и грибковый сепсис.

Основным показанием к данному виду анализа является необходимость выявления в крови патогенных микробов.

В здоровом состоянии кровь должна быть стерильна, и в ней не будут находиться болезнетворные бактерии.

Но, например, в случае хирургических вмешательств, затяжных болезней или при ослабленных защитных функциях организма эти бактерии могут бесконтрольно размножиться и причинить значительный вред человеку.

Поэтому, например, людям с ВИЧ нужно периодически проходить подобные обследования в профилактических целях.

Например, нередки случаи, когда при иммунодефиците люди становятся носителями микобактерий туберкулеза, как раз из-за неспособности организма самостоятельно справиться с внешними атаками, в то время как человек с неослабленным иммунитетом хорошо сам справится с подобными трудностями.

Некоторые бактерии сложно поддаются диагностике и могут быть выявлены только в ходе многократных исследований (эпидермальный стафилококк).

Сдавать кровь на исследование рекомендуется и перед прохождением назначенного курса терапии, чтобы результаты лечения не были искажены воздействием болезнетворных микроорганизмов.

Эффективность анализа на стерильность

Каждый человек хочет иметь крепкое здоровье и знать, что он не носитель какой-либо инфекции. Особенно важен анализ на стерильность для людей, которые являются донорами крови. Пожертвование – это отлично, но в этом случае нужно думать не только о своей безопасности, но и о безопасности реципиента. Поэтому, если вы регулярно сдаете кровь, вам также регулярно необходимо проходить такой контроль.

Эффективность анализа крови на стерильность доказана специалистами. Улучшена система скрининга доноров крови, например, введение анализов антител третьего и четвертого поколения и тестирование нуклеиновых кислот (NAT) 1, уменьшился риск передачи клинически значимых вирусных инфекций. Помимо этого, это простая проверка снизила риски для передачи бактериальных инфекций. Идеальный скрининг-тест должен обладать чрезвычайно высокой диагностической чувствительностью, коротким временем тестирования и высокой клинической эффективностью.

Бактериальные системы обнаружения, используемые для скрининга компонентов крови, давно применяются по всему миру. Большинство стран применяют такие методы культуры, как BacT/ALERT, BACTEC или Pall eBDS. Эти системы обладают высокой аналитической чувствительностью (менее 1 КОЕ / мл). Недостатком метода проверки крови доноров является длительность тестирования. В отличие от пациентов, которые проходят анализ несколько раз подряд для собственного лечения, кровь доноров проверяется единожды. Такая проверка занимает около семи дней.

Лучшие материалы месяца

  • Почему нельзя самостоятельно садиться на диету
  • Как сохранить свежесть овощей и фруктов: простые уловки
  • Чем перебить тягу к сладкому: 7 неожиданных продуктов
  • Ученые заявили, что молодость можно продлить

Есть подтвержденные случаи, когда после скрининга доноров крови на бактериальное обнаружение, сообщили о ложных результатах из-за ошибки выборки. Основываясь на низкой концентрации бактерий в конечном продукте, остаточная вероятность того, что объем образца, обработанный в системе культуры, не содержал бактериальных колоний, все еще присутствовал, хотя был инфицирован. Это происходит при недостаточно тщательном и длительном анализе крови.

Экспериментальные системы обнаружения бактерий подтверждены и для обычного скрининга крови. Они помогут обнаружить бактерии стафилококка, стрептококка, кишечные бактерии, дрожжевые грибки. Анализ на стерильность поможет определить, подходит ли вам антибиотик, который был выписан врачом ранее или нет. Преимуществом быстродействующих систем обнаружения бактерий является короткое время тестирования, которое позволяет собирать пробные образцы непосредственно перед началом лечения пациента.

Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru

Другие исследования на стерильность

Кроме посева на стерильность, чтобы выявить вид возбудителя и степень выраженности инфекционного процесса, можно параллельно с анализом крови использовать дополнительные бактериологические исследования.

Если микроорганизмы присутствуют в организме, их можно обнаружить при исследовании слюны, мочи, спинномозговой жидкости, а также в слизистых выделениях половых органов.

  • туберкулезные микобактерии высеиваются обычно в мокроте пациента;
  • бактериурия определяет грамположительную микрофлору, что указывает на наличие пиелонефрита и гломерулонефрита;
  • чтобы диагностировать менингит используют посев СМЖ и люмбальную пункцию.

Достоверность диагноза достигается при использовании развернутой картины болезни. За основу берутся результаты спектра всех лабораторных исследований.

Какие заболевания выявляются

За стерильность крови в человеческом организме отвечает иммунная система. Бактериемия (присутствие в крови бактерий) является свидетельством серьезного инфекционного заболевания, на наличие которого косвенно указывают происходящие патологические процессы.

Посев на стерильность помогает выявить:

  • гнойный менингит;
  • эндокардит;
  • септическое поражение;
  • пиодермию;
  • микобактерии туберкулеза;
  • кожные поражения гнойного характера;
  • остеомиелит.

Что показывает анализ крови на стерильностьЧто показывает анализ крови на стерильность

Патогенная микрофлора, попадая в кровоток, может стремительно распространяться по всему организму, затрагивая даже те органы, которые расположены далеко от места изначальной локации.

Присутствие любых организмов, выявленных во время исследования материала, сигнализирует о запущенной стадии заболевания.

Обычно на присутствие патогенных бактерий указывает большое содержание в крови лимфоцитов и наличие повышенной температуры. Во время анализа можно определить не только вид бактерий, но и определить терапию для конкретного вида заражения.

Как проводят бак посев на стерильность

Анализ производится в лаборатории путем взятия крови из вены на сгибе локтевого сустава. У ребенка берут кровь из пальца. Предварительно необходимо обработать кожу дезинфицирующим средством. При заборе крови пользуются одноразовым шприцем.

Берут 5-10 мл крови, помещают ее во флакон, в котором находится 50-100 мл питательной среды. Анализ переливают во флакон над горящей спиртовкой. Если нет возможности доставить больного в лабораторию, то анализ кладут в термостат и перевозят его на место исследования.

Чем раньше будет сделан бак посев, тем больше вероятности получить положительный результат.

Для того чтобы повысить вероятность положительного результата анализа, иногда врач назначает подкожное введение 1 мл раствора адреналина за 20 минут до анализа. При этом сокращается селезенка и бактерии попадают в кровяной поток.

При проведении бак посева предварительный результат получают через 3 дня, а окончательный результат может быть получен через 10 дней.

Главной целью назначения анализа на стерильность считается определение присутствия в организме патологических бактерий. После получения анализа специалист сможет подобрать необходимые лекарства и назначить эффективное лечение заболевания.

Возможно Вас заинтересуют Реклама на сайте ✆

Как берется анализ алгоритм проведения процедуры

Для получения достоверных результатов необходимо соблюдать определенные правила при заборе крови.

Как правильно взять у взрослого?

Рассмотрим алгоритм взятия крови у взрослого человека. Для проведения анализа требуется кровь, полученная из вены. Процедура проводится медсестрой, которая обязательно надевает стерильные перчатки. Перед этим участок кожи в месте инъекции обрабатывают 70% раствором спирта, после чего протирают 1-2% раствором йода в течение 30 секунд. Далее ждут полного высыхания дезинфицирующего средства. После чего прикасаться к коже пальцами для пальпации вены запрещено.

Что показывает анализ крови на стерильностьЧто показывает анализ крови на стерильность

Стерильным шприцем производят забор крови в объеме 10 мл. Если процедура проводится с флаконами с двойной средой, то флакон открывают над пламенем спиртовки. Иглу снимают с шприца и выливают кровь во флакон. Края флакона обжигают огнем и закрывают пробкой.

Биоматериал необходимо доставить в лабораторию как можно быстрее.

Особенности забора биоматериала у новорожденного ребенка

Забор крови у новорожденного будет отличаться от способа проведения у взрослого человека, в связи с анатомическими особенностями строения детского организма:

  1. Кровь берут в меньшем объеме – всего 5 мл.
  2. Для этого используют вакуумные пробирки и специальные иглы-бабочки.
  3. Для снижения болевых ощущений применяют автоматические ланцеты и микропробирки.
  4. Место инъекции обычно пяточная область.
  5. Обработку кожи проводят аналогично взрослым, но без использования раствора йода.

Кровь на стерильность что это такое

В повседневной жизни иногда встречаются состояния, когда у здорового человека микробы попадают в кровь. Примером является лечение зубов у стоматолога, когда небольшое количество нормальной микрофлоры полости рта на короткое время попадает в кровоток после стоматологических манипуляций.

При проведении хирургических операций, несмотря на всё соблюдение правил асептики, микроорганизмы в небольшом количестве способны проникать в кровоток. Это — транзиторная, или временная бактериемия, которая не влияет на здоровье. У пациента с сильным иммунитетом вся микробная контаминация крови вскоре исчезает, и кровь вновь становится стерильна.

Что показывает анализ крови на стерильность

Если же у пациента в организме существует постоянный гнойный очаг, например пневмония или эндокардит, то бактериемия может быть не одноразовой, а периодической, и тогда это состояние называется интермиттирующей бактериемией. Это гораздо более опасная ситуация, поскольку такой патологический «десант» может освоить новые «территории».

Наконец, в том случае, если микробы очень хорошо себя чувствуют в сосудистом русле и начинают там размножаться, то такая бактериемия является постоянной, и часто приводит к септикопиемии.

Септикопиемия — это состояние, при котором гноеродные микроорганизмы не только не погибают, но и интенсивно размножаются в крови. При этом возникают так называемые септикопиемические, или метастатические гнойные очаги на удалении от кровотока, в органах и тканях, где оседают микробные колонии. Так, при сепсисе может возникнуть абсцесс (отграниченный гнойный очаг) головного мозга, лёгкого или абсцесс почки вследствие гематогенного заноса или диссеминации возбудителей. В том случае, если иммунных сил организма не хватит, чтобы отграничить гнойное воспаление, которым является абсцесс, то возможно развитие разлитого воспаления, например гангрены легкого. Она протекает с чрезвычайной интоксикацией у ослабленных пациентов и часто приводит к летальному исходу.

В связи с постепенным старением населения и уменьшением степени иммунной защиты у пожилых, в связи с частым назначением различных инвазивных медицинских процедур (лапароскопия), риск проникновения микробов в кровь возрастает. Тем более этот риск связан с широким применением иммуносупрессивных препаратов, например, при трансплантации внутренних органов и при лечении злокачественных новообразований. Поэтому проникновение микробов в кровь диагностируется не так редко, как в прошлом веке. При подозрении на эти, и многие другие состояния, ведущие к септическим осложнениям, и требуется анализ на стерильность крови.

Большое значение для получения правильного результата имеет правильный сбор крови и правильная технология бактериологического исследования. Какие условия должен соблюдать пациент, чтобы это исследование было проведено грамотно?

Методика проведения

Что показывает анализ крови на стерильностьЧто показывает анализ крови на стерильностьАлгоритм проведения бак посева заключается в следующем:

  1. Полученный биоматериал наносят на специальную питательную среду и помещают в термостат для поддержания постоянной температуры 37 °С.
  2. Наблюдения проводят в течение 8 дней, ежедневно отмечая рост микроорганизмов, либо его отсутствие. Через несколько дней на питательной среде можно увидеть появление колоний микроорганизмов невооруженным глазом.
  3. После выделения культуры бактерий, их высевают на другую чашку с питательной средой и по контуру раскладывают специальные диски, смоченные растворами антибиотиков. Это проводится для определения чувствительности к определенным группам препаратов и назначения специфического лечения в дальнейшем.
  4. На основе изменений и роста микроорганизмов на 9 день дают заключение, которое будет являться результатом анализа.

Длительность проведения может составлять до 14 дней, что является единственным недостатком данной процедуры.

Осуществление процедуры у взрослых

Для постановки правильного диагноза необходима сдача венозной крови. В ней содержится наиболее достоверная информация о состоянии организма. У маленьких детей забор биоматериала проводят из наиболее доступных мест. Дело в том, что у ребенка достаточно тонкие кровеносные артерии и сосуды.

Внимание! Перед сдачей анализов, необходимо правильно подготовиться к забору крови. https://www.youtube.com/embed/AKfXMsbrn1k

При проведении процедуры необходимо соблюдать полную стерильность приборов и рук медперсонала. Место прокола тщательно обрабатывают медицинским спиртом. Для проведения забора используют одноразовые шприцы.

Далее пробирку с содержимым плотно закупориваю и отправляют в лабораторию для детального исследования. Здесь проводят уязвимость бактерий к антибиотикам и противовирусным препаратам.

Наличие патогенной микрофлоры можно обнаружить только при помощи специального микроскопа. Проводить подобную процедуру можно как в обычной поликлинике, так и в специальной лаборатории.

Кому необходимо пройти анализ

Снижение иммунитета и лихорадка могут свидетельствовать не о простуде, а о развитии инфекционной болезни. Поэтому, люди, которые чувствуют резкий упадок сил, сопровождающийся постоянными скачками температуры, должны пройти анализ на стерильность.

Тестирование необходимо в некоторых конкретных случаях:

  • плохое самочувствие пациента;
  • снижение иммунитета;
  • подозрение на туберкулез;
  • подозрение на сепсис или менингит;
  • стабильно высокая температура тела;
  • неэффективное лечение антибиотиками;
  • пациент является донором крови.

Неэффективное лечение антибиотиками чаще всего указывает на то, что вы лечитесь по неправильно поставленному диагнозу. Для того, чтобы не травмировать организм медикаментами, которые ему никак не помогут, необходимо сдать кровь на тестирование. Вполне возможно, что у вас несколько видов бактерий, и антибиотик убивает только один из них. В этом случае необходимо комплексное лечение.

Что показывает анализ крови на стерильностьЧто показывает анализ крови на стерильностьЕсли человек является донором, то ему обязательно нужно пройти данный анализ, чтоб не заразить реципиента. Инфекции, которые передаются через кровь – очень стойкие, поэтому вероятность того, что при переливании они передаются – очень высока.

Показания

Сдавать кровь на стерильность необходимо в следующих ситуациях:

  • Заболевания, невыясненной этиологии, с частыми подъемами температуры до высоких значений (выше 38°C).
  • Состояния, связанные с понижением температуры тела ниже 36°C).
  • Пациенты после обширных хирургических вмешательств, особенно с сердечно-сосудистыми патологиями.
  • Лица, имеющие искусственные клапаны в сердце.
  • Пациенты, использующие катетеры длительное время.
  • Значительное увеличение количества лейкоцитов в общем анализе крови.
  • Диагностика острых инфекционно-воспалительных заболеваний, таких как остеомиелит, эндокардит, артрит, а также пневмония различной степени тяжести.

При резких перепадах температуры тела в течение 2 и более дней, необходимо обратиться к специалисту для диагностики и выявления причины такого состояния.

Бак посев крови — алгоритм сбора крови. Показания нормы и расшифровка

Бак посев крови делается с целью выявления бактерий в материале. Микроскопическое исследование в данном случае не эффективно, поэтому применяется метод выращивания микроорганизмов. После того как будут обнаружены бактерии, необходимо будет провести тест на чувствительность к антибиотикам. Это позволяет узнать, посредством каких препаратов удается эффективно лечить инфекцию.

Подготовка

Чтобы бактериологическое исследование крови увенчалось успехом и показало достоверные результаты, сдавать материал необходимо несколько раз. Найденный микроорганизм можно выявить не только в крови, но также и в моче, кале.

Нужно соблюдать определенные принципы подготовки перед манипуляцией:

  • полностью откажитесь от спиртного примерно за двое суток до процедуры;
  • исключите из рациона всю вредную пищу;
  • за несколько часов нужно полностью отказаться от курения;
  • как правило, бак посев крови на инфекции производится натощак.

Если вы принимаете какие-то медикаменты, учтите обязательно этот момент и расскажите о нем доктору.

Алгоритм (техника) взятия анализа крови

Стоит соблюдать принципы асептики во избежание заражения. Если материал берется по всем правилам, в емкость с питательной средой поступят те бактерии, которые находились у больного в крови.

Правила забора крови:

  1. Берут материал из вены, при этом катетер не используется.
  2. Манипуляцию проводят медики в стерильных перчатках. Область пункции обрабатывается антисептическим средством.
  3. Кроме этого антисептиком нужно обработать крышку емкости с питательной средой.
  4. В момент забора используют только стерильные приспособления.
  5. В емкость вливается материал сквозь резиновую пробку.
  6. Культуру снабжают этикеткой с полной информацией о пациенте.

Забор крови для бактериологического исследования у детей проводится точно так же, как и у взрослых.

Показания для забора крови на бактериологическое исследование

Как сдавать анализ мы разобрались, теперь рассмотрим причины, по которым врачи рекомендуют его пациентам.

Основные показания, это заболевания менингит, туберкулез, заражения крови и прочее.

В ходе процедуры могут быть обнаружены разного рода инфекции и грибы. Это информативная методика установления разновидности возбудителя.

Единственным минусом процедуры выступает длительное ожидание результатов, что составляет примерно от трех дней до двух недель.

Стерильность крови рекомендована лицам, которые длительное время страдают от повышенной температуры. В обязательном порядке необходимо обследовать пациентов, у которых есть искусственные сердечные клапаны, и которые подвергались оперативным вмешательствам.

В категорию риска входят пациенты с ВИЧ статусом, что связано с их пониженным иммунитетом.

Норма и расшифровка результатов

Что показывает бак посев крови? Данные исследования классифицируют по таким критериям, как рост, чистый и смешанный рост бактерий.

Хорошими являются данные, при которых рост отсутствует. Это говорит о том, что кровь человека чиста. При чистом росте говорят о росте конкретного типа микроорганизмов. Такое наблюдается при сепсисе.

При комбинированном росте стоит интерпретировать наличие свыше двух типов бактерий.

Бактериологический посев крови (гемокультура) — Лабораторная диагностика в Москве: Анализ на наличие бактерий в крови — выполняется в лаборатории Клиники ЭндоМедЛаб

Алексеев Андрей Викторович

Врач клинической лабораторной диагностики,

Бакпосев крови

Бакпосев крови — то один из методов лабораторной диагностики, предполагающий посев крови на питательные среды. Последние могут быть жидкими полужидкими или твердыми – преимущественно это мясной бульон, агар, а также другие белковые или углеводные субстанции.

Показания для проведения анализа бакпосева крови

Используются для обнаружения и идентификации болезнетворных микробов, циркулирующих в крови. Причем в ходе посевов можно обнаружить лишь бактерии и некоторые виды грибов – вирусы, имеющие неклеточное строение, в ходе бакпосева не идентифицируются. Для этого есть другие методы исследования.

С помощью бакпосева можно идентифицировать различные виды палочек и кокков, среди которых кишечная палочка, протей, стафилококк, стрептококки, менингококки, пневмококки. Все эти микробы могут циркулировать в плазме крови в ничтожно малой концентрации. Обычная микроскопия препарата крови может ничего не дать в плане их обнаружения. Поэтому и используется культивирование микробов на различные питательные среды.

Бактериологический посев крови (гемокультуру) необходимо производить всем тяжелобольным с лихорадкой, ознобом, в случае подозрения на эндокардит, внутрисосудистую инфекцию или иммуносупрессию.

Методика выполнения бакпосева

Кровь для посева берут из локтевого сгиба пациента. При этом следует тщательно соблюдать меры предосторожности — работать в перчатках, пользоваться стерильным инструментарием, предварительно обработав кожу антисептиком. Эти меры предосторожности продиктованы не только безопасностью. Дело в том, что недостаточная чистота приведет к искажению результатов из-за того, что в кровь могут попасть микробы с окружающих кожных участков, грязных инструментов.

Необходимое количество набранной крови вводят шприцем в специальную пробирку через плотно притертую пробку, и сразу же направляют в лабораторию. В пробирке может находиться консервант – вещество, препятствующее свертыванию крови. Как правило, с момента забора крови до посева должно пройти не более получаса. В лаборатории кровь сеют на одну из питательных сред.

Питательные среды размещаются в пробирках или в чашках Петри – специальных плоских цилиндрических стеклянных сосудах. Далее питательная среда с микробной культурой выдерживается в термостате – специальном устройстве, обеспечивающем постоянную температуру и влажность, необходимую для успешного роста микробных колоний.
По прошествии необходимого времени – от нескольких суток до 2-х недель, оценивают результаты. Из выросших на питательных средах колоний готовят препарат, окрашивают его и рассматривают под микроскопом. Бакпосев обладает большой информативностью и избирательностью в плане идентификации бактерий, но требует наличия специального оборудования и профессиональных навыков медперсонала.

описание, нормы — «Online Диагноз»

Общее описание

Посев крови на стерильностьПосев крови на стерильность выполняется для определения бактериемии, которая указывает на серьезное инфекционное заболевание. Исследование показано для выявления патогенных микроорганизмов, которые в норме отсутствуют в кровеносном русле: стрептококк, синегнойная палочка, золотистый стафилококк, энтеробактерии, клебсиеллы, дрожжевые грибы. Возможно заражение эпидермальным стафилококком. Его можно обнаружить только многократным тестированием. Микробиологические посевы имеют значение для обследования пациентов с ослабленной иммунной системой. У пациентов с ВИЧ-инфекций в крови могут быть микобактерии туберкулеза. Для идентификации вида бактерий изучают свойства возбудителей: морфологические, тинкториальные (способность вступать в реакции с красителями), культуральные, биохимические, токсигенные, антигенные.

В норме кровь стерильна (не содержит бактерий). Стерильность поддерживается факторами иммунной системы. Наличие бактерий в крови (бактериемия) свидетельствует об инфекционном заболевании. Исследование позволяет оценить и чувствительность выделенной микрофлоры к антибиотикам.

Показания к исследованию

  • состояния, сопровождающихся многократными подъемами температуры;
  • хирургических вмешательства;
  • наличие искусственных клапанов сердца;
  • длительная катетеризация.

Подготовка к исследованию

  • посев необходимо проводить во время максимального подъема температуры;
  • посев необходимо проводить до начала специфического антибактериального лечения или, по крайней мере, через 12-24 часа после последнего введения препарата.

Как проводится исследование?

Посев крови на стерильностьКровь, взятую у больного в лаборатории, сеют на специальную питательную среду, благоприятную для роста бактерий, и оставляют в термостате при температуре 37°С-38°С. Через несколько суток, на поверхности питательной среды, рост бактерий становится виден невооруженным глазом — на ней появляются колонии. По внешнему виду колоний можно определить, какая бактерия вызвала заболевание. Если бактерия выявлена, то ее пересевают на новую среду в чашку Петри, по окружности которой раскладывают бумажные диски, смоченные в растворе различных антибиотиков. Чашка вновь помещается в термостат и через несколько суток вырастают новые колонии. Если вокруг одного из дисков роста не наблюдается, это будет свидетельство того, что бактерии гибнут или не могут развиваться в присутствии антибиотика, которым пропитан диск, и следовательно, назначение этого антибактериального препарата будет эффективно у пациента.

Диагнозы, подтверждаемые посевом

  • сепсис;
  • менингит;
  • пиодермия;
  • эндокардит;
  • туберкулез;
  • остеомиелит.

Нормы

В норме кровь стерильна, то есть не содержит бактерий.

  1. 1. Инфекционный эндокардит
  2. 2. Остеомиелит бедра
  3. 3. Остеомиелит костей голени
  4. 4. Остеомиелит пяточного бугра
  5. 5. Пиодермии
  6. 6. Острый бактериальный простатит
  1. Инфекционный эндокардит

    Наличие бактерий в крови (бактериемии) может свидетельствовать об инфекционном эндокардите.

  2. Остеомиелит бедра

    Наличие бактерий в крови (бактериемии) может свидетельствовать об остеомиелите.

  3. Остеомиелит костей голени

    Наличие бактерий в крови (бактериемии) может свидетельствовать об остеомиелите.

  4. Остеомиелит пяточного бугра

    Наличие бактерий в крови (бактериемии) может свидетельствовать об остеомиелите.

  5. Пиодермии

    Наличие бактерий в крови (бактериемии) может свидетельствовать о пиодермии.

Бактериологический посев крови — Likar.Info

Бактериологический посев крови

Что такое бактериологический посев, каким образом и с какой целью он проводится?

Зачем и как проводится бактериологический посев?

Бактериологический посев крови Основной целью бактериологического исследования крови является определение наличия бактерий в крови. Поскольку под микроскопом невозможно подтвердить или исключить бактериемию, из-за недостаточного количества бактерий, предварительно проводится выращивание (размножение) бактерий в специальной питательной среде, содержащей все необходимые элементы для быстрого роста бактерий.

Когда обнаруживается видимый рост бактерий, культуру, обогащенную бактериями, окрашивают и исследуют под микроскопом. Так проводится предварительная идентификация вида микроорганизмов, находящихся в крови. Для более точной идентификации требуется посев жидкой культуры на плотную среду (в чашке Петри). При таком исследовании можно увидеть, как растут колонии бактерий. С образцами колоний проводятся химические тесты, которые позволяют точно и окончательно выявить вид микроорганизма.

После выявления вида бактерий, присутствующих в крови, определяется их чувствительность к антибиотикам. Это необходимо для того, чтобы выяснить, с помощью какого лекарства можно бороться с выявленным видом бактерий наиболее эффективно.

Показания для проведения бактериологического посева крови

Врач-микробиолог Наталья Петрова: «Показанием проведению бактериологического анализа может быть подозрение на заражение крови; длительное время повышенная температура тела, по причине, которую не удается выяснить; подозрение на инфекционные заболевания (например, эпидемический менингит, стафилококковые и стрептококковые инфекции, кишечные инфекции). Поскольку однократное исследование крови может быть малорезультативным, поэтому могут быть проведены серии из 2 и более исследований за определенный промежуток времени. Утверждать, что возбудителем является какой-то конкретный микроорганизм, позволяет быстрое (48 часов) обнаружение микроорганизма, при неоднократном выделении его из крови или других видов исследуемого материала (мочи, мокроты и т.п.), кроме того, обнаружение этого микроорганизма одновременно на разных видах питательных средах».

Когда берут пробы для бактериального анализа крови?

Кровь для бактериологического посева необходимо сдавать до начала лечения антибиотиками, поскольку употребление антибиотиков может отсрочить или предотвратить рост бактерий, что приведет к ложноотрицательному результату. У пациентов с периодическим повышением температуры тела, кровь нужно брать в период, когда температура растет или сразу же после прохождения пика температуры. Именно в это время в крови находится максимальное количество бактерий. Во многих лабораториях специалисты рекомендуют сдать второй образец крови не позднее, чем через один час после первого, для того, чтобы увеличить шансы обнаружения бактерий.

Необходимый объем крови

Зачем и как проводится бактериологический посев? У больного с бактериемией в 1 мл крови может присутствовать всего одна микробная клетка, поэтому если в бутылку с питательной средой внести недостаточное количество крови, можно получить ложноотрицательный результат.

Парадоксально, однако получить ложноотрицательный результат можно и тогда, когда в питательную среду вносится слишком много крови. Так происходит потому, что кровь в большом количестве продолжает оказывать бактерицидное. Конечно же, существует компромисс между слишком малым объемом крови и избыточным объемом крови. Оптимальное разведение крови в питательной среде должно соответствовать соотношению 1:10, требуемый объем (обычно 5-10 мл), все зависит от того, какая именно питательная среда используется для анализа.

Техника выполнения бактериологического посева

При бактериологическом посеве нужно придерживаться асептической техники, чтобы исключить возможность бактериального загрязнения крови. Если образец взят согласно правилам, в бутылку с питательной средой попадут только те микроорганизмы, которые находится в крови больного.

Правила взятия крови для бактериологического посева:

  • Кровь следует брать из периферической вены, без использования катетера, чтобы исключить загрязнение.
  • Процедура выполняется в стерильных перчатках. Место венепункции смазывается антисептиком.
  • Также антисептиком дезинфицируется и крышка бутылки с питательной средой.
  • Кровь берется стерильным шприцем.
  • В бутылку кровь вносится через резиновую пробку. Снимать пробку с бутылки нельзя.
  • Культура крови снабжается этикеткой с данными о пациенте.

Результаты бактериологического посева крови делятся на следующие три группы:

  • Роста бактерий нет.
  • Чистый рост бактерий.
  • Смешанный рост бактерий.

Отсутствие роста бактерий: Нормальный результат, означающий, что кровь пациента стерильна.

Чистый рост бактерий: результат, означающий, что имеется рост одного вида бактерий, который был выделен из культуры. Получения такого результата следует ожидать, когда у пациента сепсис.

Смешанный рост: результат указывает на то, что из культуры было выделено более одного вида бактерий. Такое инфицирование крови случается редко. Чаще всего, смешанный рост бактерий является подтверждением того, что питательная среда была загрязнена.

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:

Ангиография: общие принципы и методика

Общий анализ крови

Исследование крови на стерильность на современном этапе

                Департамент  здравоохранения  Воронежской  области

 

           БУЗ  ВО  «Воронежская  областная  клиническая  больница  №1»

 

Исследование крови на стерильность

на современном этапе

Информационно-методическое  письмо  для  врачей-бактериологов

 

   Составители: главный внештатный специалист  по микробиологической диагностике

департамента здравоохранения Воронежской области, заведующий бактериологической лабораторией

БУЗ ВО ВОКБ №1   Е.В. Бондаренко

Врач-бактериолог БУЗ ВО ВОКБ№1 Т.М. Лапа

 

Воронеж

2015

 

Кровь — один из наиболее распространенных образцов биоматериала, исследуемых в бактериологической лаборатории. Исследование крови на стерильность является важнейшим методом лабораторного исследования у пациентов с определенными показаниями.

Основные показания для посева крови:

  • Лихорадка (более 38°C)
  • Гипотермия (менее 36°C)
  • Лейкоцитоз
  • Гранулоцитопения

Бактерии проникают в кровь экзогенным (например, при травме) и эндогенным (из очага инфекции) путями.

Бактериемия: Наличие бактерий в крови, подтвержденное результатами посева

 

  • Транзиторная бактериемия, когда происходит кратковременный выброс в кровь микроорганизмов под действием таких факторов, как физическая нагрузка, перегревание, переохлаждение. Подобные явления протекают обычно бессимптомно.
  • Интермиттирующая бактериемия, когда существует локальный очаг инфекции, например пневмония или внутрибрюшной абсцесс.
  • Продолжающаяся бактериемия проявляется внутрисосудистой

инфекцией, например, инфекционным эндокардитом или септическим тромбофлебитом.

Сепсис – это патологический процесс, в основе которого лежит реакция организма в виде генерализованного (системного) воспаления на инфекцию различной природы (бактериальную, вирусную, грибковую).

В последнее десятилетие в мире отмечается учащение случаев бактериемии и фунгемии. Это связано с развитием инвазивных медицинских вмешательств, старением населения, увеличением количества трансплантаций органов и костного мозга, увеличением количества более вирулентных и трудно поддающихся лечению микроорганизмов, более агрессивной внутрибольничной инфекцией.

Факторы риска, способствующие проникновению бактерий в кровяное русло и развитию бактериемии:

  • внутривенные катетеры
  • катетер мочевого пузыря
  • любые инвазивные процедуры
  • операционные вмешательства
  • нейтропения
  • терапия антибиотиками (эмпирическая), кортикостероидами, цитотоксическая                      

Гемокультивирование является в настоящее время «золотым стандартом» в диагностике септицемии

Принципы микробиологической диагностики

Точный диагноз устанавливается только при обнаружении возбудителей в крови пациентов. Важное условие — своевременный забор пробы. Для проведения анализа используют кровь непосредственно из венозного сосуда. Сбор пробы из постоянного внутривенного или внутриартериального катетеров допускается только в случаях подозрения на наличие катетер-ассоциированной инфекции или отсутствия возможности ее получения венопункцией.

  • Лихорадка и озноб начинается примерно через час после попадания микроорганизмов в кровоток
  • Чаще всего кровь забирается как можно скорее после приступа лихорадки или озноба при подозрении на инфекцию
  • Забор крови должен осуществляться по возможности до назначения антимикробной терапии.

Объем крови – один из наиболее значимых факторов в повышении чувствительности гемокультивирования. Считается, что риск случайной контаминации 1 отдельно взятой пробы крови составляет 3% (0,03).

Тогда вероятность случайной контаминации одновременно 2 проб составляет: 0,03*0,03=0,0009= 0,09%. Поэтому более информативно исследование 2 и более проб каждая объемом не менее 10мл.

Рекомендуемое число отбираемых проб крови в зависимости от предполагаемого заболевания по МУ 4.2.2039-05Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории:

 1) Острый сепсис, менингит, менингококоцемия, остеомиелит, артрит, острая пневмония,  пиелонефрит 2 пробы из двух сосудов или двух участков кровеносного сосуда перед началом антибактериальной терапии

2) Лихорадка неясного генеза 4 сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов (двух участков сосуда), затем через 24-36 ч. еще 2 пробы

3) При подозрениях на наличие эндокардита и вялотекущего сепсиса: при обострении 2 пробы из двух сосудов в течение первых 1 — 2 ч подъема температуры тела (не на пике температуры!)  до начала терапии;  при подостром и вялотекущем течении сначала 3 пробы с интервалом 15 мин. и более. Если все пробы отрицательны, на вторые сутки после посева собирают еще 3

4) у пациентов с эндокардитами, получающими антибиотики, собирают по 2 отдельные пробы в течение трех дней

5) У больных, в комплекс терапии которых включены антибиотики, собирают 6 проб в течение 48 ч; пробы необходимо собирать непосредственно перед введением следующей дозы препарата

6) при лихорадке неясного генеза сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов, затем через 24-36 часов еще 2 пробы

Минимальный набор сред для посева крови согласно положениям Приказа 535:

“Двойная среда” — скошенный во флаконе 1,7-2% питательный агар (150 мл) и 150 мл полужидкой среды, приготовленной на питательном бульоне с добавлением 15 г глюкозы и 0,15 г агара.

Среда для контроля стерильности” — стандартная тиогликолевая среда к которой  добавляют 15-20 г дрожжевого экстракта и агар 4,25-5 г на 1 литр к среде добавляют  0,001 г резазурина в качестве индикатора анаэробиоза.

 Необходимое оснащение для взятия крови:

  • Флаконы с питательными средами.
  • 70о  этиловый спирт;
  • 2% или 5% настойка йода
  • венозный жгут
  • резиновые (латексные, виниловые) перчатки
  • спиртовка (только при использовании флаконов со средами, изготовленными в лаборатории)

 Техника получения пробы крови. Сбор проб крови для посева производят 2 человека у постели больного или в процедурной.

— участок кожи над выбранным для пункции сосудом продезинфицировать: обработать кожу тампоном, смоченным 70%-м этиловым спиртом, затем другим тампоном, смоченным 1 — 2%-м раствором йода или другим дезинфектантом, разрешенным к применению для этих целей в установленном порядке, круговыми движениями, начиная от центра, в течение 30 с; подождать, пока высохнет обработанный участок. Не допускается пальпировать сосуд после обработки кожи перед введением иглы;

— при работе с флаконами с двойной средой: стерильным шприцем собрать у взрослых 10 мл крови, у детей — 5 мл; над пламенем спиртовки открыть флакон; внести кровь во флакон из шприца, предварительно сняв иглу; обжечь горлышко и пробку флакона в пламени спиртовки, закрыть флакон пробкой; осторожно, чтобы не замочить пробку флакона, перемешать его содержимое круговыми движениями.

Отобранный материал быстро доставляется в лабораторию.  Образцы крови замораживать нельзя! Микроскопию мазков крови проводят при подозрении на паразитарные инфекции (малярия, трипаносомоз), при бактериальных инфекциях это нецелесообразно, так как единственная бактерия, обнаруживаемая в мазках,-  Borreliarecurrentis. Посевы инкубируют при 37°С с ежедневным просмотром в течении 8 дней. При отсутствии видимого роста со всех сред кроме «двойной среды» среды для контроля стерильности делают высевы на кровяной агар и мазки на 3,5,8 дни. При отсутствия роста дают отрицательный ответ на 9-10 день. При наличии помутнения, образования хлопьев, крошек, необходимо произвести высев из флакона независимо от дня исследования.

 

Визуальные признаки роста гемокультур при посевах крови

 










Макроскопические 
изменения среды

Возможные микроорганизмы

Гемолиз

    Стрептококки, стафилококки,

    Listeria spp., клостридии, Bacillus spp.

Помутнение

     Аэробные грам(-) палочки, стафилококки, Bacteroides spp.

Газообразование

    Аэробные грам(-) палочки, анаэробы

Образование пленки

    Pseudomonas spp., Bacillus spp.,

    дрожжевые клетки

Образование хлопьев

    S.aureus

Видимые колонии («дымчатые»)

    Стафилококки, стрептококки

 

Причины отрицательных результатов:

— Локальная инфекция (защитные силы организма удерживают инфекцию в одном месте)

— Неактуальное время взятия материала (вероятность упустить интермиттирующую бактериемию )

     — Слишком маленький объем полученного материала

— Прием антибиотиков пациентом

 Идентификация выделенных бактерий при бактериемиях:

  • Значимы и часто встречаются — S.aureus, S.pneumoniae, E.coli и др. энтеробактерии, P.aeruginosa, C.albicans
  • Значимы —  S.pyogenes, S.agalactiae, L.monocytogenes, N.meningitidis, N.gonorrhoeae, H.influenzae, B.fragilis группа, Candida spp, Cryptococcus neoformans
  • Контаминанты или нет? (зависит от конкретных случаев)– КОС, зеленящие стрептококки, Propionibacterium acnes, Acinetobacter  calcoaceticus, Clostridium spp., Corynebacterium spp., Bacillus spp

Дополнительные критерии в пользу клинической значимости изолята:

— Быстрое выделение культуры – в течение первых 48 часов

— Выделение монокультуры

— Выделение одного и того же вида микроорганизма в разных пробах

— Выделение одного и того же вида микроорганизма из крови и других локусов

Помимо ручных методов существуют методы автоматизированного культивирования крови, которые являются более современными, более чувствительными. Самая известная  серия бактериологических анализаторов для посева крови на стерильность,- BDBACTEC.

Прибор Bactec предназначен для ускоренного обнаружения бактерий и грибов в клинических образцах крови. Образцы крови отбираются у пациентов и вносятся напрямую в оригинальные флаконы с питательной средой, после чего – по возможности незамедлительно – помещаются в рабочие станции приборов серии BD Bactec™ 9000. Наличие микроорганизмов в крови устанавливается с помощью высокочувствительной флуоресцентной технологии, основанной на индикации СО2, выделяемого в питательную среду растущими и интенсивно делящимися микроорганизмами. С помощью системы BD BACTEC 90% положительных результатов выявляются в первые 24 часа инкубации, что позволяет своевременно начать эмпирическую антибактериальную терапию либо внести изменения в действующую схему лекарственной терапии. Своевременная бактериологическая диагностика бактериемии значительно сокращает частоту возникновения септического шока и увеличивает выживаемость больных.

Флаконы для гемокультивирования выпускаются нескольких видов. Наиболее часто используются следующие:

  • Флаконы со средой для культивирования аэробов
  • Флаконы со средой для культивирования анаэробов

— содержат частицы латекса, адсорбирующие антибиотики из крови, а также способствующие лизису клеток крови и освобеждению внутриклеточных бактерий.

  • Флаконы со средой для культивирования детской крови

— предназначены для исследования малого объема крови до 3 мл, также содержат частицы латекса

  • Флаконы с селективной средой для выявления дрожжей и грибов

— содержат хлорамфеникол и тобрамицин для подавления роста сопутствующих бактерий, лизирующие вещества, способствующие освобождать из лейкоцитов фагоцитированные грибы.

Используется вакуумное взятие крови с использованием системы для забора крови  игла-бабочка. Под действием вакуума кровь втягивается через иглу  BD VacutainerTM  напрямую из вены в пробирки BD VacutainerTM и флаконы BD BactecTM и сразу же смешивается с питательной средой.

Традиционно отбор проб крови осуществляется одномоментно в аэробный (BD BACTEC™ PLUS+ Aerobic/F) и в анаэробный (BD BACTEC™ PLUS+ Anaerobic/F) флаконы. Альтернативный набор складывается из: а) аэробного флакона и дополнительного аэробного; б) анаэробного и/или Mycosis IC/F, и/или Myco F/Lytic флаконов (оба типа флаконов – для культивирования гемокультур грибов).

Оптимальный объем крови для гемокультивирования

  • Дети:
  • Новорожденные         1-2 мл крови/флакон (допустимый для посева объём крови – 0,5-5 мл)
  • Дети                                           2-5 мл/флакон
  • Подростки                               10-20 мл/флакон            
  • Взрослые:

         Одномоментно 20 -30 мл (по 10 мл во флакон) крови 2 или 3 раза в течение 24 ч

 








 ШАГ 1

  • Продезинфицируйте место венепункции 70%-ным раствором этилового спирта.
  • Круговыми движениями от центра к периферии продезинфицируйте место венепункции 1-10%-ным раствором йода или хлоргексидином
  • Дождитесь полного высыхания антисептика

 ШАГ 2

  • Промаркируйте подготовленные к посеву флаконы того или иного типа (с соответствующей задачам исследования питательной средой), указав на этикетке каждого флакона Ф.И.О. пациента и/или № истории болезни, время отбора пробы крови, № и/или название отделения
  • Удалите пластиковый колпачок и протрите резиновую пробку 70%-ным раствором этилового спирта

 ШАГ 3

  • Используйте  BD Vacutainer®  (367282 / 367284) – набор для отбора проб крови (игла -“бабочка” 21G / 23 /G, зелёная с защитной защелкой; 18-тисантиметровый катетер, Луер-адаптер с клапаном для отбора проб крови, 50 шт/упак.) с  адаптером для флаконов (364815; 250 шт/упак.)
  • Пропунктируйте вену
  • Вставьте флакон в держатель
  • Держите флакон строго вертикально

 

  • В первую очередь засевайте аэробный флакон
  • Под действием вакуума кровь начнет набираться во флакон самостоятельно.
  • Наполните флакон соответствующим количеством крови (в “детские” флаконы – 1-3 мл, [для новорожденных – 0,5-2 мл], во “взрослые” флаконы – 7-10 мл)
  • Извлеките флакон из держателя
  • Вставьте в держатель следующий флакон

 ШАГ 4

  • Приложите сухую стерильную салфетку к месту венепункции
  • Извлеките иглу из вены
  • Транспортируйте флаконы в лабораторию как можно скорее

 

При правильном заборе крови контаминация составляет не более 2-3 % всех гемокультур. Использование наборов для забора крови BD VacutainerTM существенно снижает степень контаминированности культур.

При наличии роста микроорганизма во флаконе анализатор оповещает персонал лаборатории с помощью световой индикации на передней панели прибора, а также с помощью звуковой индикации. Таким образом, нет необходимости делать высевы из всех флаконов, высев делается целенаправленно из положительного флакона.

 

Объем исследований и микропейзаж при гемокультивировании в бактериологических лабораториях ЛПУ Воронежской области.

 Общее количество проб крови для исследования на стерильность по Воронежской области составило 12515. В 2013г это число было гораздо меньше: 8406. Доля этих анализов по лечебно-профилактическим учреждениям показана в таблице:






Районные ЛПУ

15,8%

Областные ЛПУ

59,8%

Городские ЛПУ

24,4%

 

Общее количество положительных высевов из образцов крови по области 1245, что составило 9,95% , в 2013г 808, что составило 9,6%.

 







ЛПУ

Общее количество

Кол-во положительных анализов

Процент высеваемости

Районные ЛПУ

1987

160

8

Областные ЛПУ

7436

769

10,3

Городские ЛПУ

3092

316

10,2

 

Микропейзаж выделенных культур:

Наиболее часто из крови выделялись следующие культуры: S. аureus- 165, коагулазоотрицательные стафилококки- 639  (основная масса- S. epidermidis- 478), Enterococcus faecalis- 74, Pseudomonas sp- 59, Klebsiella- 54, E. coli-31, Enterococcus faecium 36. Среди грибов рода Candida чаще всего выделялись C. albicans и C. glabrata.

В небольшом количестве выделялись:  Enterobacter-18, Ps. aeruginosa 20, Acinetobacter 17, Streptococcus spp 20.

В количестве от 2 до 5 выделялись такие культуры, как Str.viridans, Str.   β-haemolyticus, Str pyogenes, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Candida tropicalis, Candida  krusei.

Все бактериологические лаборатории в Воронежской области, за исключением двух, исследуют кровь на стерильность ручными методами. Бактериологические анализаторы «Бактек» имеются в бактериологических лабораториях Воронежской областной клинической больницы №1 и в лаборатории Перинатального центра 1к. В результате анализа микробиологического мониторинга за 2011-2014гг в этих лабораториях отмечается  увеличение количества высеваемости культур микроорганизмов. До использования аппаратной технологии высеваемость микроорганизмов из крови в составляла в 2010-2012гг от 6 до 10%, при исследовании с помощью «BD Bactec 9050» в 2013г- 24,7%, в 2014г-26,9% у взрослых пациентов и у новорожденных в 2013гг 17,5%, в 2014г-20,3%.

Литература

1. «Руководство по медицинской микробиологии» под редакцией А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, Москва, 2013г

2. «Методы клинических лабораторных исследований». Справочное пособие под редакцией В.В. Меньшикова. Том 3 Клиническая микробиология. М, 2009.

3. «Лаборатория» журнал для врачей №5 2014г

4. «Клиническая микробиология» П.Р. Мари, И.Р. Шей,  краткое руководство, пер с англ., Москва, 2006г

5. Клиническая Микробиология и Антимикробная Химиотерапия
2013, том 15 (4).

 

 

 

Бактериологическое исследование

Бактериологическое исследование

Бактериологическое исследование – способ проверки биоматериала на наличие

возбудителя инфекционного заболевания. Метод бакпосева позволяет выявить и идентифицировать патогенный микроорганизм даже при относительно малых его концентрациях в тканях. Для этого исследуемые образцы высевают на питательные среды и культивируют для получения визуально видимых колоний возбудителя. Полученные штаммы бактерий типируют и проверяют на устойчивость к антибиотикам.

На заметку! Бактериологические методы исследования уступают по точности иммуноферментному анализу (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР), но в отличие от них, с высокой точностью определяют степень чувствительности выделенных штаммов бактерий к группам антибиотиков. Полученный результат позволяет подобрать максимально эффективное лечение и скорректировать дозы лекарств.

Процедура занимает несколько суток (48-72 часа). 

В каких случаях используют бактериологический метод

Исследование проводят для диагностики инфекционных заболеваний с хроническим (реже – острым) течением. Локализация и степень поражения может быть различной. Общие примеры:

  • ЗППП и инфекции мочевыделительной системы – хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз и др.;
  • кишечные инфекции – дизентерия, брюшной тиф, сальмонеллез;
  • хронические поражения органов дыхательной системы – синуситы, тонзиллиты, бронхиты, пневмонии;
  • гнойные процессы различной локализации, в том числе гнойничковые поражения кожи. В данном случае определение чувствительности микроорганизма к антибиотикам особенно актуально;
  • дисбактериоз слизистых структур – кишечника, половых органов, ротовой полости. Методика позволяет не только выявить патогенных и условно-патогенных возбудителей, но и сделать заключение о составе здоровой микрофлоры;
  • сепсис – общее заражение крови.

Последовательность действий и особенности методики

Для проведения бактериологического исследования необходимо выполнить сбор материала и культивировать его на питательных средах с последующей микроскопией полученных штаммов и проверкой чувствительности к антибиотикам.

Сбор материала

Биоматериалом для исследования могут служить кровь, моча, ликвор, мокрота, сперма, кал, мазки из глотки, влагалища, уретры, любые другие ткани и жидкости из области инфекционного процесса. Образцы собирают в асептических условиях, помещают в стерильную посуду и в течение 2-х часов доставляют в лабораторию. При необходимости пробы хранят при пониженных температурах.

Культивирование

Бактериологическое исследование

Культивирование проводят с применением механических или биологических методов. Механический подход с использованием стандартных искусственных сред – наиболее распространенный. В данном случае для высевания образцов используют жидкие и твердые питательные составы. Наиболее распространенные – агар, мясо-пептонный бульон.

Посев материала производят с помощью специальной петли или пастеровской пипетки, растирая полученный образец по поверхности или вводя его в толщу питательной среды. Выделение бактерий производят из чистых культур, которые получают повторным посевом ранее выращенных колоний на новую среду.

Биологические методы подразумевают использование специальных питательных сред, которые учитывают особенности микроорганизма, в частности, чувствительность к некоторым химическим веществам, в том числе антибиотикам. В некоторых случаях применяют метод заражения лабораторных животных или тканевых культур с отслеживанием патологических изменений. Такой подход актуален при крайне незначительном накоплении микроба в тканях человека – в этом случае его выделение посевом на питательных средах не дает результата.

Микроскопическое исследование

Микроскопическое исследование

Основной метод бактериологической диагностики – бактериоскопия. Она подразумевает визуальную оценку параметров микроорганизма под микроскопом. Для этого используют фиксированные и нефиксированные препараты.

Нефиксированные препараты позволяют исследовать живые образцы бактерий. Основные методы:

  • раздавленная капля – образец придавливают между предметным и покровным стеклами;
  • висячая капля – образец помещают в лунку на предметном стекле и герметично накрывают покровным.В качестве среды используют изотонический раствор или расплавленный агар. Методика позволяет наблюдать за живыми микроорганизмами в течение нескольких дней.

Фиксированные препараты используют для окрашивания с подробным изучением морфологических и некоторых биохимических параметров патогенов. Каплю бактериального состава размазывают по предметному стеклу и фиксируют пламенем горелки или специальными химическими составами.

Для определения свойств бактериальных препаратов используют ряд общих и специфических методик:

  • микроскопия – определение формы, размеров, окрашивания по Граму;
  • биохимические методы – исследование ферментативной способности микроорганизма к расщеплению тех или иных углеводов, аминокислот, метаболитов, в том числе способность к гемолизу, фибринолизу при попадании в кровь живых существ;
  • серологические методы идентификации – реакции агглютинации под воздействием специфической сыворотки и другие антигенные свойства;
  • биологические методы – заражение лабораторных ждивотных с проверкой патогенности и токсигенности взятых образцов, их устойчивости к антибиотикам.

Только совокупный анализ результатов всех методов диагностики – микроскопических, биохимических, серологических, биологических – дает объективный результат для вынесения точного диагноза.

Расшифровка результатов

Стандартный результат сводится к двум пунктам анализа:

  • качественный анализ с определением факта наличия/отсутствия определенного возбудителя;
  • количественный анализ с указанием числа микроорганизмов на единицу объема – выражают в КОЕ (колониеобразующие единицы). Чем выше этот показатель, тем сильнее бактериальное поражение организма данным возбудителем.

Внимание! Отрицательный результат является относительным и показывает отсутствие патогенных организмов лишь в отдельно взятой порции материала. Для большей объективности данных требуется повторное обследование.

Дополнительно указывают чувствительность микроорганизмов к основным классам антибактериальных средств – пенициллинам, тетрациклинам, цефалоспоринам, макролидам. Чем выше показатель чувствительности, тем успешнее будет лечение данным антибиотиком.

Минутку …

Включите файлы cookie и перезагрузите страницу.

Этот процесс автоматический. Ваш браузер в ближайшее время перенаправит вас на запрошенный контент.

Подождите до 5 секунд…

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! [ ]) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] +! ! []) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) — [] + []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (! ! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []))

+ ((! + [] + (! ! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! [] ) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] ) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) — [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! []))

+ ((! + [ ] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + ( !! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + ( !! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) +! ! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] — (!! [])))

+ ((! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] +! ! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [ ]) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) +! ! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! []) + ( + !! []) + (+ !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+ !! [ ]) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [ ] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) — []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [ ] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] —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

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) +! ! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] — (!! [] )) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [ ] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! [] ) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) — []) + ( ! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + ( !! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) — []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] +! ! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + ( + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] +! ! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] ) + (! + [] + (!! []) — []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) »

+ ( (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (+! ! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] ) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + []) + (! + [ ] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (! ! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] +! ! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + ( !! []) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []))

.

Культура крови: цель, процедура и риски

Культура крови

Культура крови — это тест, который проверяет наличие в крови инородных захватчиков, таких как бактерии, дрожжи и другие микроорганизмы. Наличие этих патогенов в кровотоке может быть признаком инфекции крови, состояния, известного как бактериемия. Положительный результат посева крови означает, что в вашей крови есть бактерии.

Этот тип инфекции поражает кровь, циркулирующую по всему телу. Бактерии, которые появляются на вашей коже, в легких, моче или желудочно-кишечном тракте, являются частыми источниками инфекций крови.

Инфекция может распространиться в вашу кровь и стать системной, если она тяжелая или если ваша иммунная система не в состоянии ее сдержать. Системная инфекция называется сепсисом.

Тест на посев крови включает простой забор крови. Лаборатория исследует образец крови и отправляет результаты вашему врачу, который использует результаты, чтобы определить, что необходимо для лечения любой инфекции.

Посев крови назначается, когда ваш врач подозревает, что у вас может быть инфекция крови.Важно пройти тест на инфекции крови, потому что они могут привести к серьезным осложнениям. Одним из таких осложнений заражения крови является сепсис.

При сепсисе патогены, вызывающие инфекцию в вашем кровотоке, нарушают нормальную защиту вашего организма и препятствуют нормальной работе вашей иммунной системы. Патогены также производят токсины, которые могут повредить ваши органы.

Результаты теста могут помочь вашему врачу определить, какой конкретный организм или бактерия вызывает инфекцию крови и как лучше с ней бороться.

Симптомы заражения крови и сепсиса

Вам следует позвонить в службу 911 или немедленно обратиться к врачу, если вы испытываете какие-либо симптомы заражения крови. К ним относятся:

  • озноб
  • умеренная или высокая температура
  • учащенное дыхание
  • учащенное сердцебиение или учащенное сердцебиение
  • чрезмерная усталость
  • мышечные боли
  • головная боль

Без лечения инфекция крови может прогрессировать до максимума тяжелая стадия, сепсис.Симптомы сепсиса включают перечисленные выше, а также признаки повреждения органов. Ниже приведены дополнительные симптомы сепсиса:

  • спутанность сознания
  • снижение количества мочи
  • головокружение
  • тошнота
  • пятнистая кожа

По мере прогрессирования инфекции могут развиваться более серьезные осложнения сепсиса. К ним могут относиться:

  • воспаление по всему телу
  • образование множества крошечных сгустков крови в мельчайших кровеносных сосудах
  • опасное падение артериального давления
  • отказ одного или нескольких органов

Факторы риска заражения крови

Кровь посевы делаются чаще для тех, кто подвержен более высокому риску развития инфекции крови.Вы подвергаетесь более высокому риску, если вам поставили диагноз:

Следующие ситуации также подвергают вас риску заражения крови:

  • Вы недавно перенесли инфекцию.
  • Вы недавно перенесли хирургическую операцию.
  • Вам сделали протез сердечного клапана.
  • Вы проходите иммуносупрессивную терапию.

Посев крови также чаще проводится у новорожденных и детей с лихорадкой, у которых может быть инфекция, но нет типичных признаков и симптомов сепсиса.Пожилые люди также подвержены более высокому риску заражения крови.

Посев крови для других состояний

Посев крови также можно использовать для выявления таких состояний, как эндокардит. Эндокардит — это заболевание, которое возникает, когда бактерии в кровотоке прилипают к сердечным клапанам. Это может быть опасно для жизни.

Осложнения, которые могут возникнуть при выполнении этого теста, возникают только при сдаче крови. Однако забор крови — это обычная процедура, которая редко вызывает серьезные побочные эффекты.

Риски сдачи крови включают:

  • кровотечение под кожей или гематома
  • чрезмерное кровотечение
  • обморок
  • инфекция

Сообщите своему врачу, какие лекарства вы принимаете, включая рецепты и питание. добавки. Они могут попросить вас прекратить прием определенных лекарств, которые могут повлиять на результаты посева крови.

Если вы опасаетесь игл, поговорите со своим врачом или медсестрой, чтобы обсудить способы облегчения вашего беспокойства.

Забор крови можно проводить в больнице, отделении неотложной помощи или специализированном испытательном центре. Посев крови редко проводится в амбулаторных условиях.

Для начала вашу кожу очищают, чтобы предотвратить заражение теста какими-либо микроорганизмами на коже. Затем медсестра или техник обычно наматывает на руку манжету или резинку, чтобы вены наполнились кровью и стали более заметными. Затем они используют одну иглу, чтобы взять несколько образцов крови из вашей руки.

Как правило, из разных вен берут несколько образцов крови, чтобы повысить вероятность обнаружения бактерий или грибков в кровотоке. Если вы взрослый, ваш врач или медицинская бригада обычно собирают от двух до трех образцов крови, которые часто берут во время разных посещений.

После розыгрыша медсестра или технический специалист закрывает место прокола марлей и повязкой. Затем образец крови отправляется в лабораторию, где он культивируется: каждый образец крови добавляется в бутылку с жидкостью, известной как бульон.Бульон стимулирует рост любых микроорганизмов, присутствующих в образце крови.

Если посев крови положительный, это означает, что у вас в крови бактериальная или дрожжевая инфекция. Результаты обычно помогают врачу определить конкретные бактерии или грибки, вызывающие инфекцию.

В зависимости от типа микроорганизма, обнаруженного в вашей крови, ваш врач проведет другой тест, называемый тестом на чувствительность или восприимчивость. Это помогает определить, какое конкретное лекарство лучше всего подействует против этого организма.Стандартной практикой является проведение теста на чувствительность после положительного результата посева крови. Это также можно сделать, когда инфекция не поддается лечению.

Если ваш врач подозревает, что у вас инфекция крови, он может сразу же начать лечение с помощью внутривенных антибиотиков широкого спектра действия. Это лекарство может начать бороться с широким спектром бактерий, пока вы ждете результатов посева крови или результатов теста на чувствительность.

Инфекции крови требуют немедленного лечения, обычно в больнице.Если развивается сепсис, это может быть опасно для жизни, особенно если у вас ослабленная иммунная система. Если у вас сепсис, вас госпитализируют, чтобы вылечились.

Инфекции крови могут привести к серьезным осложнениям, поэтому поговорите со своим врачом, если вы подвержены риску или у вас проявляются какие-либо симптомы. Любая лихорадка, продолжающаяся более трех дней, всегда должна быть оценена врачом или другим поставщиком медицинских услуг. Если у ребенка младше 3 месяцев поднялась температура, его следует немедленно показать врачу.

.

Минутку …

Включите файлы cookie и перезагрузите страницу.

Этот процесс автоматический. Ваш браузер в ближайшее время перенаправит вас на запрошенный контент.

Подождите до 5 секунд…

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((+ !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] +! ! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [] )) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (! ! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — [ ]) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []))

+ ( (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + ( ! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! [ ]) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) — [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [ ]) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) — []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((+ !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + ( ! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) — [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [ ]) — []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [ ] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] +! ! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! []) + ( ! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ]) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (! ! [])) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [ ])) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] — (!! [])))

+ (( ! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + ( !! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) +! ! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) —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

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] —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— (!! [])) + (! + [] + (!! []) — []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+! ! []) + (! + [] —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— []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] ))

.

Минутку …

Включите файлы cookie и перезагрузите страницу.

Этот процесс автоматический. Ваш браузер в ближайшее время перенаправит вас на запрошенный контент.

Подождите до 5 секунд…

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) +! ! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ( (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [ ] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ]) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [ ] + !! []) + (+ !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [ ] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ]) + (! + [] + (!! []) + !! []))

900 08 + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! []) + (! + [] —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— []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) — [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [] ) + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] —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— []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! [ ]) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) +! ! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + ( ! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! [])) » / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! []) + (+ !! []) + (! + [ ] + (!! []) — []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + ( !! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] +! ! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] — ( !! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) — [] + []) + ( ! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! []) — []) + (! + [] + (!! [] ) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! []))

+ ((! + [] + (! ! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! [] ) + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] ) + (! + [] — (!! [])) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [])) / + ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [ ] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! [ ]) — []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! []) + (! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! []) + (+ !! []) + (! + [] + (!! []) + !! []))

+ ((! + [] + (!! []) + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + !! [] + []) + (+ !! []) + (

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.