Подсчет тромбоцитов в мазке крови: Подсчет числа тромбоцитов (по Фонио)

Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)

Метод определения
метод Фонио (микроскопия окрашенного мазка).

Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация

Синонимы: Тромбоциты, микроскопия (метод Фонио).  

Manual Platelet Count (PLT count): Indirect Method by Fonio. 

Краткое описание теста «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)»  

Подсчет тромбоцитов входит в состав общего анализа крови и обычно проводится с помощью гематологического анализатора импедансным методом (см. тест № 5 Общий анализ крови). В лаборатории ИНВИТРО при всех результатах автоматического определения тромбоцитов менее 130х10³ клеток/мкл и более 550х10³ клеток/мкл врач дополнительно проводит микроскопию окрашенного мазка крови с подсчетом количества тромбоцитов по методу Фонио. При некоторых клинических состояниях (в том числе при выраженных тромбоцитопениях и тромбоцитозах, при мониторинге терапии) может быть целесообразным подсчет количества тромбоцитов по методу Фонио вне зависимости от концентрации тромбоцитов. Данное исследование решает эту задачу.  

С какой целью проводят исследование крови «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)» 

Исследование применяют с целью диагностики полицитемий, тромбоцитопений, тромбоцитозов, для мониторинга терапии, для контроля уровня тромбоцитов при приеме ряда лекарственных препаратов. 

Особенности теста «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)» 

Исследование «Тромбоциты, микроскопия» отдельно не выполняется, только в комплексе с тестом №5 «Общий анализ крови», где вместо результата с гематологического анализатора выдаются тромбоциты, подсчитанные по методу Фонио. 

Исследование выполняется только из венозной крови.

Литература

Основная литература

• Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. В 2 т. — М., ГЭОТАР-Медиа, 2012. 




• Льюис С.М., Бэйн Б., Бэйтс И. Практическая и лабораторная гематология. — М. ГЭОТАР-Медиа, 2009, 672 с.

Клинический анализ крови

Тромбоциты – форменные элементы крови, образующиеся в костном мозге. Это самые маленькие клетки крови (2-4 микрона в диаметре).  Основная их функция  – участие во всем процессе свертывания крови, начиная от образования первичного тромба в области повреждения кровеносных сосудов и заканчивая участием в процессах регулирования проницаемости и тонуса сосудов. В крови находится около 2/3 всех тромбоцитов, остальные депонируются в селезенке.

Важное условие для корректной работы системы свертывания — это нахождение в кровяном русле определенного количества зрелых тромбоцитов. Отклонения в любую сторону могут иметь неблагоприятные последствия. Норма тромбоцитов в крови отличается в зависимости от возраста и пола. Если их уровень понижен, появляется склонность к кровотечениям, свертываемость крови ухудшается, ее трудно остановить. Если содержание тромбоцитов превышает норму, кровь становится густой, есть риск образования тромбов и закупорки сосудов.

Подсчет количества тромбоцитов входит в состав общего анализа крови и обычно проводится с помощью гематологического анализатора импедансным методом. Но, обладая повышенной способностью к агрегации и адгезии, а также под влиянием антикоагулянта ЭДТА в пробирке, количество тромбоцитов может занижаться при измерении на анализаторах. Поэтому при всех результатах автоматического определения тромбоцитов менее 150х109 клеток/л врач дополнительно проводит микроскопию окрашенного мазка крови с подсчетом количества тромбоцитов по методу Фонио. При различных заболеваниях, сопровождающихся снижением или повышением количества тромбоцитов,   важным является  подсчет количества тромбоцитов по методу Фонио вне зависимости от концентрации тромбоцитов. Подсчет тромбоцитов по Фонио довольно точен. Метод Фонио является наиболее удобным.

 Подсчет тромбоцитов в мазке крови отдельно не выполняется, только в сочетании  с выполнением общего  анализа крови без или с  лейкоцитарной формулой, поскольку идет пересчет на общее количество эритроцитов

Показания к назначению:

• 
  Частые и обильные, длительные кровотечения после микротравм, лечения зубов, во время ОРВИ, менструации
• 
  Появление немотивируемых синяков
• 
  Хронические заболевания крови
• 
  Хронические заболевания печени
• 
  Хронические инфекционные заболевания
• 
  Контроль после удаления селезенки
• 
  Аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит)
• 
  Плановые оперативные вмешательства

Строго натощак. Необходимо воздержаться от приема пищи в течение 8-12 часов. За сутки перед сдачей — воздержаться от приема алкоголя, за 2 часа – исключить курение.

Повышенное содержание тромбоциты в крови:
первичный тромбоцитоз — злокачественные новообразования в костном мозге,
вторичный тромбоцитоз — удаления селезенки, обширные кровопотери, инфекционные заболевания, железодефицитная анемия, гемолиз, травма и злокачественные заболевания (реактивный тромбоцитоз, аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит).
Пониженное содержание тромбоцитов в крови:
влияние лекарственных препаратов, снижение синтеза клеток в костном мозге
увеличение скорости их использования (ДВС-синдром) или разрушения в селезенке
иммунная тромбоцитопеническая пурпура – аутоиммунное заболевание, когда вырабатываются антитела против своих же тромбоцитов, что приводит к их быстрой гибели. Это самая распространенная причина повышенного разрушения тромбоцитов. Хронические заболевания печени — гепатит, цирроз.

Клинические случаи тромбоцитопении — ФГБУ Поликлиника №2

С.В. Кулешова, А.А. Алтаева, Е.А.Кузнецова

Клинические случаи ложной и  истинной тромбоцитопении в амбулаторной практике.

ФГБУ «Поликлиника №2» Управления делами Президента РФ, 119146, Москва, Россия

Статья посвящена лабораторным нюансам диагностики тромбоцитопений в практике амбулаторно-поликлинического звена. На примере двух разных пациентов показана важность знаний базовых исследований в дифференциальной диагностике ложных и истинных тромбоцитопений.

Ключевые слова: тромбоцитопения, ЭДТА-зависимая тромбоцитопения, подсчёт тромбоцитов по Фонио.

В деятельности клинико-диагностической лаборатории  амбулаторно-поликлинического звена на долю общего анализа крови приходится до 30% от всех  выполненных анализов.

Обычно общий клинический анализ крови состоит из данных гематологического анализатора, а при отклонении в лейкоформуле – и дифференцированного подсчета лейкоцитов в мазке крови при световой микроскопии.

Сегодняшний уровень гематологических анализаторов позволяет выдавать до 70% результатов анализов без микроскопии мазка.

Тем не менее, врач  не должен слепо доверять лабораторным анализаторам, а должен быть последней инстанцией, после проверки и одобрения которой результаты будут валидированы.

В работе врача клинической лабораторной диагностики мелочей не бывает. В потоке работы выбрать из  данных гематологического анализатора те, которые нуждаются в дополнительных исследованиях, непросто. Примером необходимости широкого круга знаний и умений врача КДЛ может служить тромбоцитопения — снижение числа тромбоцитов в отсутствие иных отклонений при подсчете форменных элементов и в мазке крови. К тромбоцитопениям относят состояния, при которых количество тромбоцитов периферической крови составляет менее 150 х 109/л. Количество тромбоцитов 50х109/л еще позволяет проводить полостные операции при сохранении гемостаза. Количество тромбоцитов ≤ 20 х109/л. относится  к критическим величинам с точки зрения клинической лабораторной диагностики [1]. Таким пациентам , согласно национальному стандарту показана трансфузия тромбоцитного концентрата [2].  Для подсчёта количества тромбоцитов унифицированными признаны:

• подсчёт в крови с помощью гематологического анализатора;
• подсчёт в мазках по методу Фонио.

Снижение количества тромбоцитов в анализе крови может быть истинным и тогда потребует немедленных действий согласно тяжести тромбоцитопении. Снижение количества тромбоцитов в анализе крови может не быть истинным. Тогда оно будет отражать индивидуальные особенности пациента или будет следствием ошибки на преаналитическом этапе.  Кроме  истинных тромбоцитопений возможно снижение количества  тромбоцитов, которое  обычно возникает из-за несвоевременного пропускания крови через анализатор, либо из-за  спонтанной агрегации тромбоцитов. Ложные снижения количества тромбоцитов могут встречаться при широком спектре нарушений, таких как аутоиммунные заболевания, вирусные и бактериальные инфекции, хронические воспалительные заболевания. Спонтанная агрегация тромбоцитов может быть проявлением таких факторов как иммунологический (антитромбоцитарные антитела), химический (антикоагулянты) и физический (температурный). Венозная кровь предпочтительнее для проведения общего анализа крови. На сегодняшний день в качестве антикоагулянта используют калийные соли этилендиаминтетрауксусной кислоты – ЭДТА (ethylene-diamine-tetra-acetic acid). ЭДТА-зависимая тромбоцитопения является следствием взаимодействия антитромбоцитарных антител с антигенами тромбоцитов в присутствии ЭДТА и при воздействии низких температур.  По данным зарубежных авторов на долю ЭДТА-зависимой псевдотромбоцитопении  приходится от 0,07-0,11% от всех анализов крови [3].  ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения проявляется в уменьшении количества тромбоцитов, причем эти явления прогрессируют по мере увеличения времени, прошедшего после взятия крови. Чтобы избежать агрегации рекомендуется пропускать кровь через анализатор   в промежутке 0-5 мин. или через 1 час и более после взятия крови [4]. В промежутке 5 мин. — 1 час происходит временная агрегация тромбоцитов, что может привести к их ложному снижению в пробе крови. Непосредственно после взятия крови исключается возможность спонтанной агрегации тромбоцитов. 

Мы хотим продемонстрировать важность такой рутинной методики как подсчёт тромбоцитов по методу Фонио. А также двумя клиническими случаями подчеркнуть необходимость  для врача клинической лабораторной диагностики быть не только аналитиком , но и работать с микроскопом.

Первый клинический случай  привычен в амбулаторной практике.

Пациентка М., 1962 года рождения. Обратилась за справкой в бассейн в рамках ежегодной диспансеризации. На момент осмотра активно  жалоб не предъявляет. Общее состояние удовлетворительное. Температура тела 36.6°С. Сознание: ясное. Кожные покровы: розовые. Видимые слизистые розовые. Питание нормальное. Лимфоузлы: не увеличены. Щитовидная железа — не увеличена. Отеков нет. Костно-суставная система без патологии. Тоны звучные, ритм правильный. Патологические шумы не выслушиваются. ЧСС 68 в мин. САД 120/80 рт.ст. ДАД 120/80мм рт.ст Живот: не увеличен, участвует в дыхании, при пальпации мягкий, безболезненный. Печень не увеличена. Физиологические отправления в норме. Система мочевыделения:
Мочеиспускание не нарушено. Симптом поколачивания отрицательный с обеих сторон.

При выполнении общего анализа крови выявлено резкое снижение количества тромбоцитов – до 15х109/л.

Анализ  выполнялся на гематологическом анализаторе Сисмекс KX-21N ( Sysmex KX-21N ) производитель Roche Diagnostics (Швейцария). Препарат для микроскопии был приготовлен и окрашен на аппарате для автоматизированной окраски мазков крови Гематек (HemaTek) ,производитель Bayer Diagnostics. При подсчете лейкоформулы были обнаружены частые и большие  скопления тромбоцитов, что позволило предположить псевдотромбоцитопению. Пациентка была вызвана для повторного анализа крови. Был произведён забор крови и  приготовлены стекла для подсчёта тромбоцитов по Фонио. Унифицированный метод подсчёта в мазках крови (по Фонио) основан на подсчёте числа тромбоцитов в окрашенных мазках крови на 1000 эритроцитов с последующим расчётом на 1 мкл (или 1 л) крови, исходя из известного содержания в этом объеме количества эритроцитов [5].  Приготовленные, фиксированные и окрашенные препараты по Романовскому — Гимзе микроскопировали с иммерсионным объективом, подсчитывая количество тромбоцитов в тонких местах препарата, где эритроциты  расположены изолированно. В  каждом поле зрения  считали число эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок  до тех пор, пока не были просчитаны 1000 эритроцитов. Затем произвели пересчёт по количеству эритроцитов, полученному с анализатора.

Кровь пропустили через анализатор на 4 минуте :

Нормальное количество тромбоцитов подтвердил и подсчёт по Фонио – 235х109/л.

Данная псевдотромбоцитопения не несла геморрагического риска или риска тромбообразования для пациента.

Следующий пример является иллюстрацией истинной тромбоцитопении, подлежащей, согласно стандарту ведения больных Американского общества гематологов,  госпитализации для внутривенного введения иммуноглобулина и глюкокортикостероидов [6].   

Пациент Л, 1991 года рождения. Обратился в поликлинику к дерматовенерологу по поводу геморрагических высыпаний и кровянистых выделений из носа. Самочувствие удовлетворительное. Из анамнеза стало известно, что после длительного пребывания на морозе, в течение двух часов при температуре -24 0С самостоятельно профилактически начал принимать Парацетамол+Фенилэфрин+Фенирамин+Аскорбиновую кислоту. За два дня до обращения  появились первые высыпания, на коже ног, которые в течение  последующих дней распространились по всему телу.
Хронические заболевания отрицает. Вредные привычки отрицает. Аллергоанамнез не отягощен.

Объективное состояние больного: Состояние относительно удовлетворительное. Температура тела  36,1 С.
Кожные покровы обычной окраски, геморрагические высыпания по типу множественных петехий размером 1-3 мм. на коже туловища, конечностей, слизистой полости рта. Отеков нет. Периферические лимфоузлы не увеличены. Зев умеренно гиперемирован, налётов нет.
Система органов дыхания: Над легкими перкуторно легочный звук, при аускультации дыхание везикулярное, хрипов нет. Чд 16 в 1 мин.
Сердечно-сосудистая система: Тоны сердца звучные, ритмичные. Пульс равен чсс — 82 в 1 мин. АД 110/70 мм.рт.ст. Система органов пищеварения:
Язык влажный, обложен белым налетом. Живот мягкий, болезненный в правом и левом подреберьях. Печень + 2 см, болезненная при пальпации. Селезенка увеличена. Стул в норме. Система мочевыделения:
Мочеиспускание не нарушено. Симптом поколачивания отрицательный с обеих сторон.

Основные данные лабораторного исследования:

Общий анализ крови, проведенный на анализаторе Сисмекс KX-21N ( Sysmex KX-21N ) производитель Roche Diagnostics (Швейцария) выявил лейкопению, относительный лимфоцитоз и полное отсутствие тромбоцитов.

При подсчёте  тромбоцитов по методу Фонио их количество составило 4х109л.

На основании резко выраженной тромбоцитопении, клинической картины и анамнестических данных пациент был срочно госпитализирован в Центральную клиническую больницу УД ПРФ. Проведенные исследования крови и костного мозга выявили резко выраженные нарушения мегакариоцитопоэза и аутоиммунную природу тромбоцитопении. Был выставлен диагноз аутоиммунная тромбоцитопеническая пурпура.

Полагаем, что вышеизложенные примеры были полезны для повторения алгоритма проведения общего анализа крови и интерпретации  тромбоцитопений.

Если внутренний настрой  врача на то, что все тромбоцитопении являются ложными и не нуждаются в дополнительных исследованиях победит, то  жизнь следующего пациента окажется в опасности. Критические значения тромбоцитов должны быть среди других утвержденных в лаборатории критических лабораторных значений. И ответственность за них необходимо нести персонально врачу клинической лабораторной диагностики.

Внедрение новых технологий в лабораторную практику неизбежно, централизация лабораторной службы — мировая тенденция, но базовые знания и умения не должны уходить на второй план в повседневной работе врача клинической лабораторной диагностики.

• Национальный Стандарт Российской Федерации Технологи лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований ГОСТ Р 53079.3-2008  4.7.3

Nacional’nyj Standart Rossijskoj Federacii Tehnologi laboratornye klinicheskie. Obespechenie kachestva klinicheskih laboratornyh issledovanij GOST R 53079.3-2008  4.7.3

• Национальный Стандарт Российской Федерации Кровь донорская и ее компоненты. ГОСТ Р 53470-2009. 

Nacional’nyj Standart Rossijskoj Federacii Krov’ donorskaja i ee komponenty. GOST R 53470-2009

• Alan D.Michelson Platelets. Academic press.2012;989-1011.
• Методические рекомендации Гематологические анализаторы. Интерпретация анализа крови. 2007 .

Metodicheskie rekomendacii Gematologicheskie analizatory. Interpretacija analiza krovi. 2007 .

• Справочник. Лабораторные методы исследования в клинике. Под ред.В.В.Меньшикова. Медицина. 1987.

Spravochnik. Laboratornye metody issledovanija v klinike. Pod red.V.V.Men’shikova. Medicina. 1987.

• George J.N., Woolf S.H., Raskob G.E., Wasser J.S., Aledort L.M., Ballem P.J., et al. Idiopathic thrombocytopenic purpura: a practice guideline developed by explicit methods for the American Society of Hematology. Blood 1996;88:3—40.

1. Кулешова Светлана Вячеславовна, заведующая КДЛ ФГБУ «Поликлиника №2» УД П РФ , Москва, 119146, ул. 2-я Фрунзенская, д.4, (ассистент кафедры клинической лабораторной диагностики ФУВ РНИМУ им. Н.И.Пирогова) svkul@list.ru
2. Алтаева Александра Андреевна, канд.мед.наук, заведующая дерматовенерологическим кабинетом ФГБУ «Поликлиника №2» УД П РФ
3. Кузнецова Елена Алексеевна, врач КДО ФГБУ «Поликлиника №2» УД П РФ

Сдать анализ крови с подсчетом тромбоцитов по Фонио

Срок исполнения: 1 раб.дней

Синонимы (rus)

Тромбоциты, микроскопия

Тромбоциты (кровяные пластинки, бляшки Биццоцеро) – это форменные элементы крови, которые участвуют в формировании первичной тромбоцитарной пробки и фибринового сгустка в поврежденных кровеносных сосудах. Как недостаток, так и избыток этих кровяных клеток может привести к серьезным патологиям, поэтому для контроля их количества рекомендуется регулярно проводить профилактический подсчет тромбоцитов. Одним из наиболее информативных способов определения их количества является метод Фонио.9/л.

Если подсчет тромбоцитов по методу Фонио показал повышение их концентрации (тромбоцитоз), это может быть признаком острых и хронических воспалительных процессов, крупных травм, нарушения работы системы кроветворения, почечной недостаточности, аутоиммунных патологий, туберкулеза.

Опасность повышения тромбоцитов заключается в риске образования тромбов – кровяных сгустков, способных циркулировать с током крови по организму. Если такой сгусток закупоривает вену или артерию, возникает окклюзия (непроходимость) сосуда. В результате орган недополучает кислород, наступает ишемия и может развиться временное или постоянное нарушение его функций. Наиболее опасна легочная и мозговая тромбоэмболия, которые способны привести к инфаркту легкого и инсульту. Поэтому если пациент входит в группу риска формирования тромбов, ему необходимо регулярно сдавать анализ крови с подсчетом тромбоцитов по Фонио.    

Если при выполнении исследования было обнаружено снижение числа тромбоцитов, это может свидетельствовать об увеличении скорости их разрушения или развитии тромбоцитопенической пурпуры.9/л) во время беременности.  

Анализ крови на тромбоциты по Фонио в СПб

Чтобы сдать анализ крови с подсчетом тромбоцитов в Санкт-Петербурге по доступной цене, обращайтесь в лабораторию «Express Medical Laboratory». Исследование проводится 7 дней в неделю, поэтому вы можете узнать результат максимально быстро.  

ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (EDTA-PTCP) у пациентов с коронавирусной (COVID-19) пневмонией и гепатолиенальным шистосомозом S. Mansoni

После вспышки новой коронавирусной пневмонии (COVID-19) в декабре 2019 года, по данным Китая, частота тромбоцитопении, осложненной COVID-19, составляет около 5–36,2%.

Был описан случай в практике, когда был диагностирован EDTA-PCTP, осложненный COVID-19. Сначала этот случай был ошибочно диагностирован как истинная тромбоцитопения in vivo.

Случай произошел в госпитале автономного района Гуанси-Чжуан, Китай.

Пациентка 59-летняя женщина была госпитализирована в изолированное отделение с тяжелым типом пневмонии, вызванным SARS-CoV-2. Диагноз был подтвержден. На момент поступления количество тромбоцитов было в пределах нормы (100–400 × 109 / л). Несмотря на лечение противовирусными препаратами у пациента появилась одышка. Парциальное давление кислорода в артериальной крови / концентрация кислорода составляли 276 мм рт.ст., а уровень ИЛ-6 достигал 140,50 пг / мл, что указывало на тяжелое течение заболевания. Пациент был переведен в отделение интенсивной терапии. При этом количество тромбоцитов было в норме.  Через два дня результаты исследования образца крови в пробирках с ЭДТА показали внезапное низкое количество тромбоцитов 91 × 109 / л. С тех пор количество тромбоцитов постепенно уменьшалось.

Несмотря на самое низкое значение тромбоцитов 17 × 109 / л, у пациента не было признаков или симптомов кровотечения. Мазок периферической крови показал агрегацию тромбоцитов. Были собраны образцы крови как в пробирку с ЭДТА, так и в пробирку с цитратом натрия в один день. Количество тромбоцитов из пробирок с цитратом натрия было нормальным (118 × 109 / л), а из пробирок с ЭДТА было ниже — 17 × 109 / л. Таким образом, у пациента была диагностирована ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (EDTA-PCTP)

Данный феномен исчез через 17 дней, когда пациентка выздоровела. Возможная причина появления данного феномена заключается в том, что антитело коронавируса имеет эпитоп, связывающийся с антигеном тромбоцитов, что вызывает перекрестную реакцию антиген-антитело. Примечательно, что после антивирусной обработки антитела IgG / IgM к SARS-CoV-2 изменились с положительного на отрицательный, а также исчезли EDTA-PCTP.

Мнение специалиста:

ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (EDTA-PTCP) может встречаться как у здоровых людей, так и у пациентов с различными заболеваниями, такими как аутоиммунные заболевания, опухоли, инфекции. Ошибочная трактовка результатов исследований может привести к ошибочному диагнозу и к неправильному лечению пациента. Особенно это важно для пациентов с осложнённым течением заболевания.

В настоящее время в большинстве лабораторий для гематологических тестов используют преимущественно калиевые соли ЭДТА (К2ЭД-ТА, К3ЭДТА). При этом пробирки с цитратом натрия берутся параллельно при подозрении на EDTA-PTCP. Не исключается возможность пересмотра мазка периферической крови, поскольку это самый простой лабораторный тест. Однако для крупных лабораторий, с большим потоком проб ручной метод анализа может стать непреодолимой преградой из-за нехватки человеческих и временных ресурсов. В таком случае рекомендуется использовать современный парк оборудования, анализаторы, которые имеют специализированные каналы для точного подсчета количества тромбоцитов, а также их степень зрелости.

Шистосомоз (шистосоматоз) —тропическое паразитарное заболевание, вызываемое кровяными сосальщиками (трематодами) из рода Schistosoma. 

Симптомы шистосомоза определяются видом паразита (так, кишечный шистосомоз чаще всего вызывается гельминтом Schistosoma mansoni).

Кишечный шистосомоз может вызывать боли в области живота, диарею и появление крови в фекалиях. В запущенных случаях наблюдается увеличение печени, что часто связано с накоплением жидкости в брюшной полости и гипертензией абдоминальных кровяных сосудов. В таких случаях селезенка может быть увеличена.

При этом в крови у пациентов при гепатолиенальном шистосомозе может наблюдаться снижение количества тромбоцитов в образце крови. Этот in vitro феномен известен как ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (EDTA-PTCP) и связан с реакцией агглютинации тромбоцитов под воздействием антикоагулянтов. Распространенность EDTA-PCTP при шистосомозе неизвестна, но один случай был полностью описан. Целью исследователей из Института тропической медицины (Бразилия) было определить распространенность EDTA-PTCP у пациентов с гепатолиенальным шистосомозом и оценить альтернативные методы преодоления этой аналитической ошибки.

Для проведения эксперимента были собраны образцы крови от 56 пациентов с гепатолиенальным шистосомозом и 56 здоровых добровольцев. Подсчет тромбоцитов проводился с использованием стандартной микроскопии и автоматизированных (электрический импеданс) методов. Автоматический подсчет тромбоцитов и наличие сгустков тромбоцитов в мазках крови оценивали в пробах, собранных в пробирки с ЭДТА или цитратом натрия через 20 и 180 минут после сбора крови.

Результаты исследования показали, что ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения чаще встречалась у пациентов с шистосомозом, чем у здоровых добровольцев (8,92% против 0,00%, p <0,0285). Было обнаружено, что тромбоцитарные сгустки и PTCP наблюдались как в пробах, собранных в пробирки с ЭДТА, так и в пробах, собранных в пробирки с цитратом натрия.

На основании этого ученые сделали вывод, что использование пробирок с цитратом натрия не может применяться в качестве альтернативного метода.

Также исследователи рекомендуют проводить автоматический подсчет тромбоцитов в образцах крови от пациентов с гепатолиенальном шистосомозом сразу после взятия крови в пробирки с ЭДТА и проверять путем ручного подсчета в мазках крови.

Мнение специалиста:

Около 200 млн. человек во всем мире страдают хроническим шистосомозом. К эндемичным регионам относят не только Африку, Южную Америку, но и Дальний Восток, Юго-Восточную Азию.

ЭДТА-зависимая псевдотромбоцитопения (EDTA-PTCP), вызванная антикоагулянтами ЭДТА, является лабораторным феноменом и может привести к ошибочному диагнозу, что в конечном счете может привести к неправильному лечению пациента.

В настоящее время в абсолютном большинстве лабораторий для гематологических тестов используют преимущественно калиевые соли ЭДТА (К2ЭД-ТА, К3ЭДТА), так как они обеспечивают большую стабильность размера клеток крови и не разбавляют образец.

Действительно, в большинстве случаев лаборатория пересматривает мазки с помощью микроскопии, однако нужно помнить, что сейчас существуют специальные анализаторы, например, анализаторы типа Sysmex серии XN со специальным PLT-F каналом, который позволяет точно подсчитывать количество тромбоцитов, а также их степень зрелости. При этом можно использовать стандартные пробирки, необходимость пересматривать глазами мазки или использовать специальные/дополнительные пробирки – полностью исключена. Это особенно важно для крупных лабораторий, с большим потоком пациентов.

Анализ крови на тромбоциты — цены от 100 руб. в Краснодаре, 30 адресов

Стоимость тромбоцитов в Краснодаре

• количественно ~ 253р.28 цен
• морфология ~ 165р.3 цены

Цены: от 100р. до 442р.

Динамика цен

30 адресов, 31 цена, средняя цена 242р.

Подсчет тромбоцитов по Фонио | Медицинский центр «Широких сердец»

/

Услуги

/
/
/

Подсчет тромбоцитов по Фонио

Цены

Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)

Тромбоциты участвуют во всем процессе свертывания крови, начиная от образования первичного тромба в области повреждения кровеносных сосудов и заканчивая участием в процессах регулирования проницаемости и тонуса сосудов.

Подсчет максимально точного количества тромбоцитов осуществляется при помощи камеры Горяева и метода Фонио. Подсчет тромбоцитов по Фонио довольно точен. Метод Фонио является наиболее удобным именно при автоматическом подсчете.

Важное условие для корректной работы системы свертывания — это нахождение в кровяном русле определенного количества зрелых тромбоцитов. Отклонения в любую сторону могут иметь неблагоприятные последствия. Норма тромбоцитов в крови отличается в зависимости от возраста и пола. Если их уровень понижен, появляется склонность к кровотечениям, свертываемость крови ухудшается, ее трудно остановить. Если содержание тромбоцитов превышает норму, кровь становится густой, есть риск образования тромбов и закупорки сосудов.

Тромбоциты образуются в костном мозге из гигантских клеток — мегакариоцитов. По сути, они являются фрагментами этих клеток и представляют собой окруженные мембраной мелкие безъядерные бесцветные пластинки овальной или округлой формы, включающие гранулы. Диаметр тромбоцитов составляет от 2-х до 4-х мкм. Их принято называть клетками крови, как лейкоциты и эритроциты, хотя они таковыми не являются. Это постклеточные структуры, или бляшки Биццацеро (по имени итальянского ученого, который внес большой вклад в их изучение). В крови находится около 2/3 всех тромбоцитов, остальные содержатся в селезенке.
Функции кровяных пластинок

При повреждении сосудистой стенки сразу же происходит активация кровяных пластинок. Они приобретают шаровидную форму, на них появляются выросты, из-за чего они становятся похожими на звезду. Тромбоциты в активной форме способны к слипанию друг с другом (агрегации) и прилипанию к стенке сосуда (адгезии). В плазму крови они выделяют фермент, под действием которого растворимый фибриноген преобразуется в нерастворимый фибрин, который опутывает форменные элементы крови своими нитями, словно сетями. Образовавшийся тромб закрывает дефект в поврежденном сосуде. Тромбоциты принимают участие в растворении фибринового сгустка и поддерживают спазм поврежденных сосудов. Еще одна важная функция — это обеспечение питательными веществами клеток, которые выстилают внутреннюю поверхность кровеносных сосудов.

Показания к назначению исследования

• диагностика полицитемий, тромбоцитопений, тромбоцитозов;
• мониторинг терапии

Исследуемый материал

Венозная кровь

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом.9/л

Почему у нас

1. В основе работы лежит принцип единой комплексной системы диагностики и лечения.

2. Мы подбираем оптимальные программы, которые включают в себя комплекс всех необходимых обследований и анализов.

3. Наличие собственной лаборатории, что позволяет в кротчайшие сроки выполнять необходимые исследования.

4. Высокая квалификация специалистов!

5. Работаем с 8:00 до 21:00 по будням; 08:00 — 18:00 в субботу; 08:00 — 15:00 в воскресенье.

6. Консилиумный подход к лечению пациентов.

7. Возможность контроля лечения дистанционно.

8. Доступ ко всем обследованиям и результатам анализов в электронном виде в личном кабинете на нашем сайте.

9. Выдаем все виды справок: в бассейн, о состоянии здоровья, для поступления в ВУЗ и другие. ОФОРМЛЯЕМ санаторно-курортную карту, карту в детский сад и школ.

10. Возможен выезд на дом и забор крови на дому.

11. Все виды капельниц, инъекций, сосудистая терапия — в стерильном и комфортном процедурном кабинете — анатомические кресла — любимые фильмы, заботливый персонал, кислородотерапия.

12. Работаем в системе дополнительного медицинского страхования (ДМС) и на договорной основе.

Адреса наших филиалов:
г. Воронеж, ул. Владимира Невского, 19, ул. Пограничная, 2.

Предварительная запись по тел.: (473) 280-20-30

Подсчет тромбоцитов — обзор

V Выводы

Было опубликовано множество методов подсчета тромбоцитов, и количество альтернативных методов, несомненно, связано с трудностями при подсчете малых клеток, которые легко активируются, агрегируются и также трудно поддаются подсчету. избавиться от посторонних предметов. Для исследовательских или неспециализированных лабораторий ручной подсчет по-прежнему является наименее затратной и простой методикой, если нет доступа к большому гематологическому анализатору.В качестве альтернативы некоторые лаборатории вкладывают средства в небольшие анализаторы импеданса, которые обеспечивают быстрый и точный способ подсчета тромбоцитов. Недавняя разработка нового иммунологического метода подсчета тромбоцитов позволяет лабораториям, имеющим доступ к проточному цитометру, очень точно подсчитывать тромбоциты путем соотнесения либо с количеством эритроцитов (в цельной крови), либо с добавленными препаратами гранул (в цельной крови, PRP или очищенных тромбоцитах. препараты). Точный и точный подсчет тромбоцитов у пациентов с тяжелой тромбоцитопенией стал более важным в последние годы из-за увеличения числа цитотоксических препаратов, приводящих к длительной тромбоцитопении, и желания снизить частоту и порог переливания тромбоцитов (Глава 62).С развитием новых автоматизированных методов подсчета тромбоцитов и двумерного анализа с использованием светорассеяния или флуоресценции многие ограничения, существующие с так называемыми одномерными анализаторами (например, импеданс и однократное рассеяние света), уменьшаются. При двумерном анализе тромбоциты того же размера, что и эритроциты, должны быть включены в подсчет, а фрагменты эритроцитов, клеточный мусор и другие твердые частицы должны быть исключены. Альтернативные подходы к подсчету тромбоцитов с использованием иммунологических маркеров для однозначной идентификации тромбоцитов еще больше повысили точность подсчета.Метод проточной цитометрии для подсчета тромбоцитов был рекомендован в качестве потенциального эталонного метода и был предметом обзора экспертной группы ICSH по цитометрии. ^3,7,23,28

Полностью автоматизированный иммунологический метод, как на CELL-DYN 4000 или Sapphire (Abbott), имеет очевидные преимущества. Используя эталонный метод иммунологического подсчета тромбоцитов, производители всех гематологических анализаторов теперь смогут калибровать количество тромбоцитов с большей точностью. Программы внешнего контроля качества (например,g., NEQAS и CAP) теперь необходимо разработать подходящие стабилизированные и откалиброванные материалы для оценки точности подсчета при тромбоцитопении. Эти разработки приведут к отчетам о достоверном низком количестве тромбоцитов, на основании которых клиницисты могут с уверенностью принимать решения о лечении или переливании крови. Сравнительные исследования с использованием различных анализаторов и иммунологического учета будут способствовать переоценке текущих пороговых значений переливания тромбоцитов и могут привести к снижению порогового значения с 10 × 10 ⁹ / л до 5 × 10 ⁹ / л, как было предложено в прошлое. ^43–47 Большое многоцентровое исследование по сравнению неточности подсчета тромбоцитов анализаторами тока при тяжелой тромбоцитопении (по сравнению с эталонным методом проточной цитометрии) показало, что большинство анализаторов завышают подсчет, что может привести к недостаточной трансфузии тромбоцитов при любом установленном пороге. . ²⁴ Это исследование подчеркивает неточности гематологических анализаторов при подсчете тромбоцитов и еще раз подчеркивает необходимость внешнего контроля качества для улучшения калибровки анализатора для образцов с низким количеством тромбоцитов.Это также предполагает, что оптимальные пороговые значения для профилактических переливаний тромбоцитов следует пересмотреть. Современные методы оптического подсчета тромбоцитов могут не превосходить подсчет импеданса для всех групп пациентов. ⁴⁸

В будущем некоторые анализаторы могут вводить дополнительные параметры в технологию подсчета тромбоцитов. Например, надежный метод количественного определения незрелых или ретикулированных тромбоцитов может быть полезен для определения причины тромбоцитопении и, возможно, для уменьшения количества профилактических переливаний тромбоцитов, при условии корреляции с хорошо изученными клиническими ситуациями. ^38,39,40

В ближайшем будущем будет увеличиваться использование полных счетчиков крови в пунктах оказания медицинской помощи, которые могут определять надежные параметры эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. Chempaq (Chempaq A / S, Дания) уже производит два разных портативных мультиплатформенных гематологических анализатора, которые используют подсчет клеток импеданса и могут сообщать количество тромбоцитов. Микрожидкостное устройство на одноразовых чипах также недавно было разработано для подсчета клеток крови и тромбоцитов в образцах крови, взятых уколом пальца, и могло произвести революцию в быстрой диагностике многих гематологических заболеваний, включая тромбоцитопению, в месте оказания медицинской помощи. ⁴⁹

Обзор оценки тромбоцитов | Наблюдатель в медицинской лаборатории

Отвечая на ваши вопросы

Вопрос

Какой фактор вы используете при оценке слайда тромбоцитов?

Ответ

Оценка тромбоцитов (PLT) является неотъемлемой частью оценки мазка периферической крови. Оценка тромбоцитов помогает обеспечить точность автоматического подсчета тромбоцитов и / или предоставить количественный анализ тромбоцитов в мазке крови.Для надежной оценки тромбоцитов в мазке периферической крови важно, чтобы выполнялись следующие критерии образца:

Следующие факторы ответственны за сложность типирования антигена D:

• Макроскопически мазок должен демонстрировать постепенный переход от толстого к тонкому, заканчиваясь приемлемым краем пера без полос, волн или дырок. Если мазок приготовлен из образца с ЭДТА, в образце не должно быть сгустков.
• Микроскопически тромбоциты должны быть распределены равномерно, без комкования.
• Мазок должен иметь пятно надлежащего качества. Надлежащее качество окрашивания следует оценивать в соответствии с окрашиванием типа Романовского, используемым в процессе окрашивания, и окрашенные мазки должны иметь минимальное осажденное пятно или его отсутствие.

Процедура оценки тромбоцитов варьируется в зависимости от того, как подготовлен мазок (метод клина, полуавтоматический или автоматический), типа взятого образца (кровь с антикоагулянтом ЭДТА по сравнению с капилляром) и увеличения микроскопы окулярные и объективные части.Оценка PLT обычно выполняется с использованием 100-кратного масляного объектива в области мазка, где эритроциты (эритроциты) едва соприкасаются. Грубую оценку можно определить по количеству тромбоцитов на 100-кратное нефтеиммерсионное поле (OIF). В источниках указывается, что от восьми до 25 тромбоцитов на OIF коррелирует с нормальным количеством тромбоцитов.

Чтобы получить более точную оценку PLT, можно рассчитать отношение автоматического подсчета тромбоцитов к количеству тромбоцитов на поле масляной иммерсии.Этот расчет следует выполнять всякий раз, когда используется микроскоп другой марки из-за различий в поле обзора. Вот обзор того, как рассчитать коэффициент: ¹

1. Выполните 30 последовательных автоматических проб пациентов. Убедитесь, что QC PLT находится в пределах двух стандартных отклонений.
2. Приготовьте и нанесите мазок на каждый образец.
3. Для каждого мазка подсчитайте количество PLT в 10 последовательных OIF и разделите на 10, чтобы получить среднее количество на поле.
4. Разделите автоматический подсчет PLT на среднее количество PLT на поле для каждого образца.
5. Сложите числа, полученные на шаге четыре, и разделите на количество образцов (30), чтобы получить среднее отношение автоматизированных PLT к PLT на OIF.
6. Округление отношения к ближайшему целому числу. Например, если значение коэффициента составляет 15,0, одна пластина на нефтяное месторождение 15,0 x 10 ⁹ / л.
7. Рассчитайте среднее количество тромбоцитов на OIF и умножьте на коэффициент тромбоцитов.Следовательно, в среднем для 15 PLT на OIF расчет будет следующим: 15 x 15 = 225 x 10 ⁹ / L

Наша лаборатория предпочитает несколько более утомительную процедуру, которую мы называем косвенным подсчетом тромбоцитов. Когда количество тромбоцитов имеет отметку прибора или выходит за рамки наших критериев проверки, мы используем диск Миллера для определения количества тромбоцитов на 1000 эритроцитов. Общее количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов затем умножается на количество эритроцитов и делится на 1000 для преобразования единиц из 10 ¹² / л в 10 ⁹ / л.

Следовательно, при общем количестве 70 PLT на 1000 эритроцитов и количестве эритроцитов 4,10 x 10 ¹² / л расчеты будут:

количество эритроцитов / 1000 = 4,10 x 10 ⁹ / л
PLT / 1000 эритроцитов = 70
Непрямой PLT: 70 x 4,10 = 287 x 10 ⁹ / л

Этот тип расчета тромбоцитов помогает свести к минимуму отклонения, которые можно было бы увидеть у пациента с анемией или с повышенным количеством эритроцитов. ²

— Дебби Беннес, бакалавр наук, специалист по обучению MLT,
Гематопатология Морфология
Инструктор по лабораторной медицине и патологии
Mayo Clinic Rochester, MN

Список литературы

1. Stiene-Martin EA, Lotspeich-Steininger CA, Koepke JA.Клиническая гематология, 2-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Дж. Б. Липпинкотт-Рэйвен; 1992: 337.
2. Могадам Л. Применение диска Миллера для оценки и контроля качества подсчета тромбоцитов. Lab Med. 1980; 11: 131.

Брэд С. Карон, доктор медицины, доктор философии , доцент кафедры лабораторной медицины и патологии и директор больничных клинических лабораторий, тестирования в местах оказания помощи и услуг по флеботомии в клинике Мэйо в Рочестере, штат Миннесота.

без названия

% PDF-1.6
%
27 0 объект
/ M (D: 200