Биологический метод стерилизации: Биологическая стерилизация — МегаЛекции

Биологическая стерилизация — МегаЛекции

Биологическая стерилизация основана на применении антибиотиков. Этот метод используют при культивировании вирусов.

Контрольные вопросы

1. Что такое химическая стерилизация и когда ее используют?

2. Что такое биологическая стерилизация?

Основные способы стерилизации представлены в табл. 4.

Таблица 4. Основные способы стерилизации

¹ (Стерилизация неполная: в стерилизуемом материале сохраняются споры.)

² (Стерилизация неполная: в стерилизуемом материале сохраняются вирусы.)

Дезинфекция

В микробиологической практике применяют различные дезинфицирующие вещества: 3-5% растворы фенола, 5-10% растворы лизола, 1-5% растворы хлорамина, 3-6% растворы перекиси водорода, 1-5% растворы формалина, растворы сулемы в разведении 1:1000 (0,1%), 70° спирт и др.

Дезинфекции подвергают отработанный патологический материал (гной, кал, моча, мокрота, кровь, спинномозговая жидкость) перед сливом его в канализацию. Обеззараживание проводят сухой хлорной известью или 3-5% раствором хлорамина.

Загрязненные патологическим материалом или культурами микроорганизмов пипетки (градуированные и пастеровские), стеклянные шпатели, предметные и покровные стекла опускают на сутки в стеклянные банки с 3% раствором фенола или перекиси водорода.

По окончании работы с заразным материалом лаборант должен обработать дезинфицирующим раствором рабочее место и руки. Поверхность рабочего стола протирают кусочком ваты, смоченным 3% раствором фенола. Руки дезинфицируют 1% раствором хлорамина. Для этого ватный шарик или марлевую салфетку смачивают дезинфицирующим раствором и протирают левую кисть, потом правую, а затем моют руки теплой водой с мылом.

Выбор дезинфицирующего вещества, его концентрация и длительность воздействия (экспозиция) зависят от биологических свойств микроба и от той среды, в которой будет происходить контакт дезинфицирующего вещества с патогенными микроорганизмами. Например, сулема, фенол, спирты непригодны для обеззараживания белковых субстратов (гной, кровь, мокрота), так как под их влиянием происходит свертывание белков, а свернувшийся белок предохраняет микроорганизмы от воздействия дезинфицирующих веществ.

При дезинфекции материала, инфицированного споровыми формами микроорганизмов, применяют 5% раствор хлорамина, 1-2,5% растворы активированного хлорамина, 5-10% растворы формалина и другие вещества.

Дезинфекцию, которую проводят на протяжении всего дня по ходу работы, называют текущей, а по окончании работы — заключительной.

Дезинфицирующие вещества и прописи приготовления из них рабочих растворов. Хлорная известь — белый комковатый порошок с резким запахом хлора, в воде растворяется не полностью. Бактерицидный эффект зависит от содержания активного хлора, количество которого колеблется от 28 до 36%. Хлорная известь, содержащая менее 25% активного хлора, для дезинфекции непригодна.

При неправильном хранении хлорная известь разлагается и теряет часть активного хлора. Разложению способствуют тепло, влага, солнечный свет, поэтому хранить хлорную известь следует в сухом, темном месте, в плотно закрытой таре.

Сухую хлорную известь применяют для обеззараживания выделений человека и животных (из расчета 200 г на 1 л испражнений и 10 г на 1 л мочи).

Приготовление исходного 10% осветленного раствора хлорной извести. Берут 1 кг сухой хлорной извести, помещают в эмалированное ведро и измельчают. Затем заливают холодной водой до объема 10 л, хорошо перемешивают, закрывают крышкой и оставляют на сутки в прохладном месте. После этого образовавшийся 10% осветленный раствор осторожно сливают и отфильтровывают через несколько слоев марли или процеживают через плотную ткань. Хранят в бутылях из темного стекла, закрытых деревянной пробкой, в прохладном месте, не более 10 сут. Рабочие растворы необходимой концентрации готовят из основного раствора непосредственного перед их употреблением. Количество основного раствора, необходимое для приготовления 0,2-10% осветленных растворов хлорной извести, приведено в табл. 5.

Таблица 5. Схема приготовления растворов хлорной извести

Концентрацию осветленных растворов хлорной извести от 0,2 до 10% выбирают в зависимости от характера обеззараживаемого объекта и устойчивости возбудителя.

Хлорамин — кристаллическое вещество белого или желтоватого цвета, содержит 24-28% активного хлора. Хорошо растворяется в воде при комнатной температуре, поэтому растворы его готовят непосредственно перед дезинфекцией. Пользуются 0,2-10% растворами хлорамина. Соотношение между процентной концентрацией раствора и количеством хлорамина в граммах на 1 и 10 л приведено в табл. 6.

Таблица 6. Схема приготовления различных растворов хлорамина

Растворяют хлорамин в стеклянной или эмалированной посуде. При хранении растворов хлорамина в посуде из темного стекла с притертой пробкой их активность сохраняется до 15 сут.

Активированный хлорамин. Дезинфицирующие свойства хлорамина усиливаются при добавлении к нему активатора в соотношении 1:1 или 1:2. В качестве активатора используют аммонийные соединения — хлорид, сульфат, нитрат аммония. Применяется активированный хлорамин в концентрации 0,5, 1 и 2,5%. Готовят их непосредственно перед употреблением. Раздельно отвешивают хлорамин и соль аммония. Сначала растворяют в воде хлорамин, а затем прибавляют активатор.

Преимущество активированных растворов хлорамина перед обычными заключается в том, что при добавлении активатора ускоряется выделение активного хлора. Поэтому препарат губительно действует не только на вегетативные формы микроорганизмов, но и на их споры. Активированный хлорамин применяют в более низких концентрациях и при меньшей экспозиции.

Фенол (карболовая кислота) представляет собой бесцветные кристаллы игольчатой формы с резким характерным запахом. Под действием света, воздуха и влаги кристаллы приобретают малиново-красный цвет. Хранят в закрытых банках из темного стекла и в защищенном от света месте.

Фенол растворим в воде, спирте, эфире, жирных маслах. Обладая большой гигроскопичностью, поглощает из окружающей среды влагу и становится жидким. Жидкая карболовая кислота содержит 90% кристаллического фенола и 10% воды.

Применяют 3-5% водные растворы карболовой кислоты, приготовленные из кристаллического фенола и жидкой карболовой кислоты по схеме, приведенной в табл. 7. Активность фенола повышается при растворении его в горячей воде (40-50° С).

Таблица 7. Схема приготовления различных растворов карболовой кислоты

Внимание! Кристаллический фенол или жидкая карболовая кислота, попадая на кожу, могут вызвать ее раздражение, а в больших концентрациях — тяжелые ожоги. Поэтому обращаться с карболовой кислотой нужно с большой осторожностью. При изготовлении растворов следует надевать резиновые перчатки или в крайнем случае смазать руки вазелином.

В случае попадания карболовой кислоты на кожу необходимо немедленно смыть ее теплой водой с мылом или 40° этиловым спиртом.

Примечание. Для приготовления дезинфицирующих растворов фенола удобнее и безопаснее использовать жидкую карболовую кислоту.

Контрольные вопросы

1. Какие дезинфицирующие вещества применяют в микробиологической практике?

2. Опишите внешний вид и основные свойства хлорной извести, хлорамина, фенола.

3. Какие растворы дезинфицирующих веществ используют для обеззараживания материала, инфицированного споровыми формами микроорганизмов?

Задание

Приготовьте 2 л 5% рабочего раствора осветленной хлорной извести; 500 мл 3% раствора хлорамина, 300 мл 1% раствора активированного хлорамина.

Внимание! Прежде чем приступить к приготовлению растворов, сделайте расчеты.

Рекомендуемые страницы:

Воспользуйтесь поиском по сайту:

ТАБЛИЦА № 1. МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ — Студопедия

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ АНТИСЕПТИКОВ, ДЕЗИНФЕКТАНТОВ,

МЕТОДОВ СТЕРИЛИЗАЦИИ

Дезинфекция и стерилизация – мощные факторы воздействия внешней среды на микроорганизмы. Они применяются в виде комплекса мер асептики и антисептики в различных областях медицины, а также являются важнейшим звеном воздействия на механизм передачи инфекции при организации противоэпидемических мероприятий. Выбор того или иного способа дезинфекции или стерилизации определяется особенностями микрофлоры, а также качественными характеристиками объекта. Кроме того, важно знать, что успех тех или иных антимикробных воздействий (мероприятий) зависит от целого ряда факторов, действующих на микроорганизмы взаимосвязано (комплексно): концентрации, температуры, экспозиции и пр.

Знание общих принципов проведения того или иного вида дезинфекции или стерилизации как методов борьбы с инфекционным началом помогут правильно сделать выбор параметров обеззараживания объектов окружающей среды в каждой конкретной ситуации.

Прежде, чем приступить к освоению новой темы, ответьте устно на следующие вопросы:

1. В каких жизненных формах существуют некоторые виды патогенных бактерий в организме и во внешней среде?

2. Почему споры бактерий чрезвычайно устойчивы к воздействию факторов внешней среды?

3. Перечислите физическиефакторы внешней среды, воздействующие на микроорганизмы.

4. Назовите химическиефакторы внешней среды, влияющие на микроорганизмы.

5. Что такое «бактерицидное» и «бактериостатическое»действие факторов среды на микроорганизмы?

6. От каких факторов зависит бактерицидный или бактериостатический эффект физического или химического воздействия на микроорганизмы?

Чувствительность микроорганизмов к тем или иным воздействиям определяется рядом факторов: структурно-функциональными особенностями микроорганизма и его физиологическим состоянием, силой и продолжительностью воздействия, наличием сопутствующих факторов, усиливающих или ослабляющих антимикробную активность.

Наибольшей устойчивостью к различным воздействиям обладают споры бактерий, что объясняется их особым строением (толстая оболочка, гелеподобная концентрированная протоплазма, наличие дипиколиновой кислоты, высокое содержание кальция при пониженном содержании воды) и тем, что у спор практически отсутствует метаболизм. Повышенная устойчивость микобактерий туберкулеза обусловлена высоким содержанием в их клетках липидов и воска.

Следует отметить, что одно и то же воздействие может быть антимикробным в отношении одних микроорганизмов и в то же время стимулировать рост и размножение других. Так, кислород губителен для анаэробов, но стимулирует рост аэробных микроорганизмов, а применение антибактериальных антибиотиков может способствовать росту грибов.

АЛГОРИТМ ОСВОЕНИЯ НОВОЙ ТЕМЫ И ИНФОРМАЦИОННЫЙ БЛОК

ОПОРНЫЙ КОНСПЕКТ

ЧАСТЬ 1

1.1. Составьте словарь основных терминов и понятий темы, для чего выпишите эти термины и поясните их значение:

Антисептика– это различные способы обеззараживания объектов (ран, предметов), в том числе воздействие на инфекцию в организме больного посредством применения убивающих микробы химических веществ. Меры антисептики направлены в основном на уничтожение источника инфекции. Недостаток этого метода заключается во вредном воздействии химических веществ на организм, поэтому в настоящее время наиболее широко используются методы асептики.

Асептика –предупреждение заражения микроорганизмами какого-либо объекта путём обеззараживания всех окружающих предметов, соприкасающихся с ним. Наиболее широко асептика применяется в хирургии и связанных с ней медицинских специальностях, а также в бактериологической лаборатории. Методы асептики препятствуют распространению инфекции путём обеззараживания факторов передачи инфекции.

Стерилизация– полное уничтожение всех микроорганизмов (т.е. вегетативных клеток и спор) в каком-либо объекте. Выбор того или иного способа стерилизации определяется качеством и свойствами микрофлоры, а также качественными характеристиками объекта.

Дезинфекция – уничтожение или удаление вегетативных форм возбудителей инфекционных болезней из объектов внешней среды, которые могут послужить факторами передачи заразного начала.

1.2. Устноответьте на вопросы:

1) Чем отличается антисептика от асептики?

2) Укажите основной недостаток антисептики.

3) Чем отличается дезинфекция от стерилизации?

ЧАСТЬ 2

Методы стерилизации

Наиболее широко в медицине используются физические методы стерилизации, в основе которых лежит губительное действие на микроорганизмы таких факторов внешней среды, как температура и пар (тепловая стерилизация), излучение (лучевая стерилизация). Для химической стерилизации в основном используют бактерицидное действие на микробы газов — окиси этилена и формальдегида (газовая стерилизация). Иногда применяют холодную стерилизациюс использованием бактериальных фильтров. Выбор метода стерилизации зависит от качественных характеристик стерилизуемого объекта. (см. таблицу №1).

2.1. Внимательно изучите и оформите в тетради таблицу №1 «Методы стерилизации».

ТАБЛИЦА № 1. МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ

2.2. Прочитайте ВОПРОСЫ НА ПОНИМАНИЕ. Попытайтесь ответить на них, используя информацию из таблицы №1 «Методы стерилизации».

  В случае затруднения с ответами Вы можете обратиться к приложению №1.

Запишите вопросы и ответы, которые вызвали затруднения.

ВОПРОСЫ НА ПОНИМАНИЕ

1) Почему фламбированием можно стерилизовать только мелкие предметы?

2) Почему стерилизация кипячением считается неполной, если обрабатывают предметы, инфицированные споровыми формами микроорганизмов?

3) Эффективность автоклавирования (стерилизации перегретым паром под давлением) выше, чем стерилизация текучим паром или кипячением. Почему?

4) В каких случаях Вы предложили бы заменить дробную стерилизацию текучим паром тиндализацией?

5) Можно ли назвать профильтрованную через бактериальный фильтр воду из реки стерильной?

6) Почему для стерилизации питательных сред, жидкостей, масел газовая стерилизация не применяется?

7) Для надёжной стерилизации оборудования ультрафиолетовыми лучами применяется предстерилизационная обработка: влажная уборка с добавлением моющих средств. Почему?

Контроль стерилизации. Контроль объектов, подвергшихся стерилизации, как правило, заменяют контролем работы стерилизаторов с помощью физических, химических и биологических способов.

Физические методы предусматривают контроль работы приборов, характеризующих температуру, время, давление, позволяющих строго соблюдать установленный режим стерилизации, который обеспечивает гибель микробов. Например, в пробирку насыпают какое-либо вещество, плавящееся при температуре около 120 ⁰С — сера, бензойная кислота. Недостаток этого способа контроля состоит в том, что регистрируется только то, что порошок расплавился и, значит, необходимая температура достигнута, но нельзя быть уверенным, что она была такой на протяжении всего времени экспозиции.

Химический контроль осуществляется косвенно по изменению окраски химических индикаторов (индикаторных бумажек, порошков, жидкостей — бензойной кислоты, мочевины, запаянных в ампулы), которые помещаются на поверхности и в глубине стерилизуемого объекта. Метод имеет тот же недостаток что и физический.

Биологический контроль проводится путем помещения внутрь стерилизуемых предметов биотестов, приготовленных из термоустойчивых спорообразующих бактерий. Для проведения микробиологического контроля объектов, подвергшихся стерилизации, производят посевы кусочков материала, смывов с предметов на питательные среды, позволяющие обнаружить аэробные и анаэробные бактерии и грибы. Отсутствие роста после 48 часов инкубации в термостате свидетельствует о стерильности предмета. Недостаток метода в том, что ответ получаем только спустя 48 часов, а материал считается стерильным после автоклавирования в биксе в течение 48 часов. Значит, материал используются еще до получения ответа из бактериологической лаборатории.

ЧАСТЬ 3

Приемы и способы стерилизации в биотехнологии

Стерилизация (от лат. sterilis — бесплодный) — полное освобождение различных веществ, предметов от живых микроорганизмов. Среди физических факторов, влияющих на рост и размножение микроорганизмов, наибольшее значение имеет температура. Простейшим способом стерилизации является обжигание металлических и стеклянных предметов в пламени горелки.

Стерилизация сухим жаром производится в сушильных шкафах при 160-165 °С в течение двух часов. Таким методом стерилизуют лабораторную посуду, металлические предметы, некоторые порошкообразные, не портящиеся при нагревании вещества. Стерилизация водяным паром под давлением производят в автоклавах.

Насыщенный пар под давлением убивает микроорганизмы и споры быстрее, чем перегретый пар. Сухой воздух (жар) убивает микроорганизмы при более высокой температуре, чем водяной пар. Гибель клеток бактерий, грибов, дрожжей и вирусных частиц при стерилизации высокой температурой происходит либо в результате сгорания клеток, либо в результате коагуляции белковых структур микроорганизмов.

Основным недостатком термической стерилизации, несмотря на ее широкое практическое использование, следует считать неизбежные потери питательных свойств среды, поскольку при температурах, необходимых для стерилизации (120-150 °С), большинство субстратов, особенно углеводы, оказываются термически нестабильными.

Осмотическое давление отрицательно влияет на биохимическую активность микроорганизмов. Повышение концентрации солей задерживает развитие многих бактерий, однако есть виды, способные развиваться в присутствии концентрированных растворов солей, такие бактерии называют осмофильными (галофильными). Осмотическое давление в клетке регулирует цитоплазматическая мембрана.

При высоком осмотическом давлении окружающей среды происходит плазмолиз. Плазмолиз явление обратимое, и если понизить осмотическое давление окружающего микроорганизмы раствора, вода поступает внутрь клетки и возникает явление, противоположное плазмолизу.

Ультрафиолетовая компонента солнечного света является главной причиной гибели микробов в наружном воздухе.

Смертность микроорганизмов на открытом воздухе достигает 90-99 %, но зависит от вида микроорганизма и может варьировать от нескольких секунд до пары минут. Споры и некоторые виды бактерий окружающей среды имеют стойкость к воздействию солнечного света и могут переносить длительное облучение светом без особого вреда своему организму. Энергия ультрафиолетовой компоненты солнечного света вызывает повреждения микроорганизмов на клеточном и генетическом уровнях, тот же самый ущерб наносится людям, но он ограничен кожей и глазами.

Искусственные источники ультрафиолетового излучения (УФИ) используют гораздо более сконцентрированные уровни излучения, нежели те, что представлены в обычном солнечном свете. Ультрафиолетовые лучи распространяются по прямой и действуют преимущественно на нуклеиновые кислоты, оказывая на микроорганизмы как летальное, так и мутагенное воздействие. Бактерицидными свойствами обладают только те лучи, которые адсорбируются протоплазмой микроклетки.

Биофизическое действие УФИ на генетический или функциональный аппарат бактерий выглядит следующим образом: излучение вызывает деструктивно-модифицирующее повреждение ДНК, нарушает клеточное дыхание и синтез ДНК, что приводит к прекращению размножения и лизису микробных клеток. В нарушении синтеза ДНК основным является окисление сульфгидрильных групп, что вызывает инактивацию нуклеотидазы и гибель микробной клетки в первом или последующих поколениях.

Сила проникновения ультрафиолетовых лучей невелика. Тонкий слой стекла достаточен для того, чтобы не пропустить их. Действие лучей ограничивается поверхностью облучаемого предмета, его чистота имеет большое значение. УФИ высокоактивно, если микроорганизмы и частицы пыли расположены в один слой, при многослойном расположении верхние защищают нижележащие.

Защитная оболочка вокруг бактериальной клетки препятствует достижению антимикробного действия. В любой живой клетке существуют биохимические механизмы, способные полностью или частично восстанавливать исходную структуру поврежденной молекулы ДНК. Благодаря радиационному мутагенезу, уцелевшие микроорганизмы способны образовывать новые колонии с меньшей восприимчивостью к облучению.

Вероятностный характер стерилизации УФИ изучен в достаточной степени, существуют различные уравнения, характеризующие процесс отмирания бактерий. Эффективность биоцидного действия УФИ зависит от длины волны, интенсивности облучения, времени воздействия, видовой принадлежности обрабатываемых микроорганизмов, расстояния от источника, а также от состояния воздушной среды помещения: температуры; влажности; уровня запыленности; скорости потоков воздуха.

Метод заслуженно считается эффективным для обеззараживания поверхностей, при этом доказаны микробиологическое и экономическое преимущество УФИ или его эквивалентная эффективность химическим методам. При использовании ультрафиолетовых облучателей лимитирующим фактором является предельно допустимая доза облучения людей, а не доза, требуемая для уничтожения микроорганизмов в воздухе помещения.

Влияние ультразвуковых волн. Ультразвуком (УЗ) называются механические колебания с частотой, превышающей 18 кГц (18 000 колебаний в секунду). УЗ получают с помощью высокочастотного генератора, который превращает частоту электросети в электрический ток высокой частоты. Колебания электрического тока высокой частоты посредством пьезоэлектрического преобразователя превращаются в механические колебания, которые передаются в резервуар с жидкостью.

При частоте колебания 1 ,0-1,3 мГц в течение 10 мин оказывает бактерицидный эффект на клетки микроорганизмов. Ультразвук способствует разрыву клеточных стенок и мембран, повреждению флагеллина у подвижных форм микроорганизмов. Влияние ультразвука основано на механическом разрушении микроорганизмов в результате возникновения высокого давления внутри клетки. Это позволяет использовать его в качестве стерилизующего агента, а также применять для инактивации и дезинтеграции вирусов с целью получения антигенов и вирусных вакцин.

Стерилизация инфракрасными лучами. Инфракрасные, или тепловые, лучи составляют часть спектра световой радиации, простирающуюся от красного конца видимого спектра в область длинных волн. Источником инфракрасных лучей являются любые нагретые тела. Практически для этой цели могут быть использованы специальные зеркальные тепловые лампы накаливания, выпускаемые отечественной промышленностью.

Особенность передачи лучистой энергии заключается в том, что промежуточный слой воздуха между термоизлучателем и облучаемым материалом не нагревается и потери тепла в окружающую среду невелики. Различные типы бактерий в разной степени стойки к ультрафиолетовым излучениям. Так, особостойкими являются споры, многие из которых не теряют своих вегетативных свойств.

Высокая влажность воздуха повышает сопротивляемость бактерий, а в тонком слое воды на стерилизацию требуется примерно в десять раз больше энергии по сравнению с той, которая нужна для гибели тех же микроорганизмов в воздухе. С увеличением толщины слоя воды бактерицидные свойства ультрафиолетовых лучей приближаются к нулю.

Стерилизация озоном. Механизм инактивации воздушной микрофлоры озоном очень похож на действие озона в воде.

Сначала озон воздействует на оболочку микроорганизмов путем реакции с двойными связями липоидов. Затем, благодаря способности разрушать дегидрогеназы клетки, озон воздействует на ее дыхание. В результате нарушения проницаемости оболочки и изменения растворимости белков клетка лизируется. Обнаружено проникновение озона внутрь микробной клетки, вступление его в реакцию с веществами цитоплазмы и превращение замкнутого плазмида ДНК в открытую ДНК, что снижает пролиферацию бактерий.

Противовирусное действие озона связывается с разрушением вирусных частиц, инактивацией обратной транскриптазы и влиянием на способность вируса связываться с клеточными рецепторами. Капсулированные вирусы более чувствительны к действию озона. Это объясняется тем, что капсула содержит много липидов, которые легко взаимодействуют с озоном.

Наблюдается известное различие между разными видами микроорганизмов по их сопротивляемости действию озона. Довольно быстро погибают возбудители ангины, дифтерии, различные плесени. Как правило, наиболее устойчивы микробы, покрытые оболочкой, как например туберкулезная палочка и микробные споры. Эффективность стерилизующего действия озона зависит от его концентрации, экспозиции, температуры, влажности, вида микроорганизма, pH и исходной обсемененности обеззараживаемого воздуха.

Озон в низких концентрациях (около 0,2 мг/м3) не очень эффективен для уничтожения бактерий, так как они восстанавливаются спустя некоторое время после обработки. В этих случаях озон оказывает лишь поверхностное действие (контактируя с внешней оболочкой клетки) и незначительно проникает вглубь. Для полной инактивации микрофлоры помещения необходима высокая концентрация озона и длительное время для контакта с микроорганизмами. Оксиды азота усиливают бактерицидные свойства озона, которые в значительной степени зависят от влажности воздуха. При относительной влажности воздуха ниже 45 % озон почти не оказывает бактерицидного действия, а оптимум его активности лежит между 60-80 % влажности.

В профессиональных целях для стерилизации воздуха помещения в присутствии людей генератор озона служить не может, поскольку концентрация озона в несколько раз превышает ПДК для человека. Высокая концентрация выделяющегося озона приводит к деструкции. Таким образом, озонирование высокоэффективно для стерилизации поверхностей и воздушной среды помещения. Невозможность использования метода в присутствии людей и необходимость проводить обеззараживание в герметичном помещении серьезно ограничивает сферу его профессионального применения.

Воздействие химического агента. По химическому составу противомикробные антисептические вещества можно разделить на несколько групп. Например, галогены — препараты йода и хлора, они нарушают ферментативные структуры бактериальной клетки, угнетают гидролитическую и дегидрогеназную активность бактерий, инактивируют такие ферменты, как амилазы и протеазы.

Перекись водорода, перманганат калия, как и галогены, обладают окислительным действием. Кислоты и их соли, щелочи, спирты и альдегиды повреждают поверхностные структуры бактериальной клетки, клеточную стенку и мембраны, нарушая их избирательную проницаемость и другие функции. Соединения тяжелых металлов обладают антиферментным механизмом действия на бактериальную клетку, при этом изменяется структура дыхательных ферментов, и разобщаются процессы окисления и фосфорилирования в митохондриях.

 Красители обладают денатурирующим эффектом. К антисептическим химическим веществам относятся группы производных 8-оксихинолина и нитрофурана, которые также нарушают биосинтетические и ферментативные процессы в бактериальной клетке. К наиболее распространенным дезинфицирующим средствам относятся хлорсодержащие, фенольные, перекисные и аммониевые соединения.

Стерилизация твёрдых предметов, портящихся при нагревании (некоторые пластмассы, электронная аппаратура и др.), может быть осуществлена обработкой газами (например, окисью этилена в смеси с СО2 или бромистым метилом), спиртом, растворами сулемы.

Стерилизация растворов проводится также путем их пропускания через мелкопористые материалы, которые адсорбируют клетки микроорганизмов: каолин, асбест, фарфор и др. Широкое применение нашли мембранные фильтры их изготавливают из специально обработанной нитроцеллюлозы. Бактерии задерживаются пористыми перегородками не потому, что диаметр капиллярных ходов фильтра меньше, чем поперечник бактерий, а вследствие молекулярного притяжения и прилипания взвешенных тел к внутренним стенкам пор.

В принципе метод стерилизующей фильтрации является идеальным средством стерилизации лабильных, в том числе термически неустойчивых жидких и газовых сред, поскольку он может быть проведен при низкой температуре и требует лишь градиента давления по разные стороны мембраны.

Промышленная очистка и стерилизация воздуха. Как известно, в воздухе содержится взвешенных частиц до 109, в том числе микроорганизмов 0,8-10000 — 100000 на 1 м3. Среди микроорганизмов обнаружены бактерии и их споры, актиномицеты и аспоргенные дрожжи, вирусы и др. Наименьшие размеры, за исключением вирусов, имеют бактерии, диаметр которых 0,5-2,1 мкм и длина до 26 мкм.

Это требует при подготовке воздуха его стерилизации. Отечественный и зарубежный опыт показывает, что технологически и экономически оправданным является многоступенчатый способ продувания воздуха через волокнистые, зернистые или пористые материалы.

Для больших расходов воздуха широко распространена технологическая схема, представленная на рис. 7.15. Воздух на аэрацию в посевные и производственные ферментеры подается с помощью комрессора. Перед сжатием воздух проходит через масляный или сухой фильтры, где осуществляется его очистка от механических примесей. Нагретый в процессе компреммирования сжатый давлением 0,3 МПа воздух охлаждается в теплообменнике. После ресивера воздух охлаждается в теплообменнике для конденсации влаги. Выходящий из ресивера воздух нагревается в кожухотрубном аппарате.

Далее воздух проходит частичную очистку от микроорганизмов в фильтре грубой бактериальной очистки и полностью очищается от микроорганизмов в фильтре тонкой бактериальной очистки. Воздух, выходящий из ферментатора и инокулятора высушивается от влаги на фильтре, достигая расчетной допустимой концентрации микроорганизмов.

Рис. 7.15. Промышленная схема очистки воздуха: 1 — фильтр; 2 — компрессор; 3 — теплообменник; 4 — влагоотделитель; 5 — ресивер; 6 — теплообменник; 7 — головной фильтр (схема Н.А. Войнова)

Некоторые конструкции фильтров для биологической очистки воздуха представлены на рис. 7.16. Глубинный фильтр (рис. 7.16, а) представляет собой емкость, снабженную рубашкой с перфорированными решетками внутри. Между решетками укладывается волокнистый фильтрующий материал. В зависимости от напора сжатого воздуха плотность укладки стекловолокнистого фильтрующего материала составляет 100-500 кг/м.

Фильтр с тканью Петрянова (рис. 7.16, б) представляет собой стальной цилиндр с разъемной крышкой и коническим днищем. Внутри фильтра в трубной решетке на резьбе закреплены перфорированные цилиндры, обтянутые слоями ткани через которые проходит воздух и очищается. Фильтр стерилизуется паром с примесью формалина. Необходимая степень биологической очистки воздуха достигается при использовании в качестве фильтрующего материала пористых фильтрующих материалов. Фильтр такой конструкции представлен на рис. 7.16, в.

Известны эффективные металлокерамические фильтрующие элементы для очистки микробных частиц диаметром 0,3 мкм. Особенностью фильтрования с помощью этих элементов является тесная взаимосвязь между формой каналов фильтра с периодически изменяющимся диаметром сечения и скоростью движения воздушного потока в этих каналах. При движении воздуха через материал фильтра в нем возникают ультразвуковые колебания, приводящие к осаждению микроорганизмов на стенки фильтра. На основе фильтрующих металлокерамических элементов разработаны парные автоматические фильтрующие комплексы для грубой и тонкой биологической очистки воздуха.

Рис. 7.16. Схемы фильтров — а: 1 — корпус; 2 — крышка; 3 — решетки со слоем фильтрующего материала; 4 — днище; 5 — вход воздуха; 6 — выход воздуха; 7 — вход острого пара; 8, 9 — выход; б: 1 — корпус; 2 — фланец; 3 — фильтрующий фторопластовый элемент; 4 — прокладка; 5, 6 — вход и выход воздуха; в: 1 — корпус: 2 — крышка; 3 -


фильтр; 4, 5 — выход и вход воздуха (схемы Н.А. Войнова)

Отличительной особенностью таких комплексов является гарантированная микробиологическая надежность очистки и полная автоматизация их работы.

Н.А. Воинов, Т.Г. Волова

Опубликовал Константин Моканов

Стерилизация — это метод, обеспечивающий гибель в стерилизующем материале вегетативных и споровых патогенных и непатогенных микроорганизмов. С помощью стерилизации

Стерилизация — это метод, обеспечивающий гибель в стерилизующем материале вегетативных и споровых патогенных и непатогенных микроорганизмов. С помощью стерилизации, независимо от способа применения, достигают полного обеспложивания, что практически означает отсутствие признаков жизни на стерилизуемом объекте. Стерилизации должны подвергаться все изделия, соприкасающиеся с раневой поверхностью, контактирующие с кровью или инъекционными препаратами и отдельные виды медицинских инструментов, которые в процессе эксплуатации соприкасаются со слизистыми и могут вызвать ее повреждение.

Методы стерилизации:

• паровой;

• воздушный;

• химический;

• газовый.

Паровой метод стерилизации

Его применяют для изделий из коррозийно-стойких металлов, стекла, текстиля, резины. Стерилизацию производят насыщенным паром под избыточным давлением в паровом стерилизаторе — автоклаве.

Автоклав представляет собой котел с двойными стенками, между которыми находится водопаровая камера. В нее через воронку вливают воду. Образующийся пар проходит в стерилизационную камеру, где расположен стерилизуемый материал. Уровень воды определяют по водомерной трубе. Аппарат герметично закрывают крышкой, которую привинчивают болтами с гайками или центральным затвором. На крышке имеется манометр, стрелка которого указывает давление в аппарате. Снаружи аппарат покрыт кожухом. Под нижнюю часть аппарата подводят источник тепла для нагревания воды и образования пара. При заполнении аппарата паром давление в нем повышается и соответственно повышается температура. Пар проникает во все поры предмета, и содержащиеся в нем микробы погибают. Стерилизацию проводят в стерилизационных коробках (биксах), в двойной мягкой упаковке из бязи, пергамента, бумаги, мешочной непропитанной бумаге, мешочной влагопрочной.

Для контроля стерилизации в бикс закладывают ленту Винара, которая изменяет цвет до эталона.

Металлические биксы, применяемые для стерилизации, выпускают диаметром 16 см (малые биксы), 25 см (средние биксы) и 45 см (большие биксы). Наиболее распространены круглые биксы, но существуют и квадратные. В хирургическом отделении на 70—100 коек нужно иметь не менее 10 малых, 15 средних и 25 больших биксов. Чтобы пар мог проникнуть внутрь барабана, по окружности бикса проделаны отверстия, которые открываются или закрываются перемещением металлического ободка с окнами, соответствующими группам отверстий. Герметичность бикса обеспечивает зажимающее устройство, которое плотно прижимает ободок к стенке барабана. Исправность этого устройства надо проверять каждый раз перед укладкой в барабан перевязочного материала или белья, так как при нарушении герметичности содержимое бикса может инфицироваться. Укладка белья в биксы.

Биксы вытирают изнутри и снаружи 0,5%-ным раствором нашатырного спирта, затем отодвигают на боковой стенке бикса круговую пластинку, закрывающую боковые отверстия, откидывают крышку и выстилают дно и стенки бикса холщовым мешком, салфеткой, простыней. При укладке белья и перевязочного материала следует соблюдать раз и навсегда установленный порядок — это позволяет быстро и легко найти необходимое. Аккуратно сложенное белье укладывают секторально друг за другом в вертикальном положении, чтобы можно было вынуть из бикса любую вещь, не трогая остальные. Перевязочный материал также укладывают с таким расчетом, чтобы каждую пачку или пакет можно было извлечь отдельно. Когда бикс наполнен, края выстилающей простыни заворачивают один на другой поверх содержимого. В один из биксов поверх простыни закладывают халат, а на него несколько марлевых салфеток и полотенце. Это необходимо, чтобы, вымыв руки, операционная сестра могла их вытереть и надеть стерильный халат, не открывая остального белья и материала. На крышке каждого бикса должна быть привязана клеенчатая этикетка с перечнем всего, что в нем содержится, с датой стерилизации, указанием фамилии сестры, готовившей бикс. Закрыв крышку бикса, ее укрепляют имеющимся крючком на цепочке и прочно привязывают тесьмой, чтобы она случайно не открылась. В заключение проверяют, открыты ли боковые отверстия биксов.

Укладка бикса с марлевыми салфетками

Сначала укладывают большие салфетки — 6 пачек по 10 шт., затем средние салфетки — б пачек по 10 шт., сверху малые салфетки — 5 пачек по 20 шт.

Укладка бикса с шариками и тампонами

Сначала малые тампоны — 4 пачки по 5 шт., средние тампоны — 6 пачек по 10 шт., затем большие тампоны — 4 пачки по 10 шт, сверху марлевые шарики — 2 мешочка по 30 шт.

Смешанная загрузка: халат — 1 шт., простыня — 3 шт., полотенце — 3 пары, бахилы — 14.

Режимы и условия парового метода стерилизации.

1. При температуре 132 °С, давлении пара в стерилизационной камере 2 атм. в течение 20 мин рекомендуют стерилизацию для изделий из антикоррозийного материала, стекла, текстильных материалов.

2. При температуре 120 °С, давлении пара 1,1 атм. в течение 45 минут рекомендуют стерилизацию для изделий из резины и латекса, полимерных материалов.

Срок сохранения стерильности изделий, простерилизованных, в коробках без фильтров равен трем суткам, в стерилизационных биксах с фильтром — до 20 суток.

Воздушный метод стерилизации

Применим для изделий из резины силиконовой, металла, стекла. Стерилизацию проводят сухим горячим воздухом в воздушном стерилизаторе — сухожаровом шкафу.

Сухожаровой шкаф представляет собой электрический шкаф круглой или прямоугольной формы. Стерилизационная камера имеет сетки или лотки для размещения подвергаемых стерилизации предметов, термометр и специальное устройство для смешивания сухого и нагретого воздуха во время стерилизации. Нужную температуру устанавливают и поддерживают с помощью термоэлектрического реле. Перед стерилизацией из шкафа полностью удаляют влажный воздух, для чего при открытой дверце включают рубильники и нагревают камеру до 80 °С. После этого шкаф закрывают,и через 10—15 минут температура достигает 150—170 °С. Стерилизацию проводят в упаковке из бумаги непропитанной, бумаги мешочной влагопрочной или без упаковки в открытых емкостях.

Режимы стерилизации.

1. При температуре 180 °С в течение 60 минут для изделий из металла.

2. При температуре 100 °С в течение 150 минут.

Химический способ стерилизации.

Применяют для изделий из полимерных материалов, резины, стекла, коррозийно-стойких металлов — этот способ еще называют холодной стерилизацией. В настоящее время в качестве рабочих растворов используют 6%-ный раствор перекиси водорода и дезоксон-1. Стерилизацию проводят в закрытых емкостях из пластмассы или покрытых эмалью. Эмалевое покрытие должно быть без повреждений.

Режимы стерилизации.

1. Раствор 6%-ный перекиси водорода при температуре не менее 18 °С — 360 минут.

2. При температуре 50 °С — 180 минут.

Газовый метод стерилизации.

Применяют для обеззараживания оптики, кардиостимуляторов, стекла, металла, изделий из полимерных материалов. Стерилизацию проводят в стационарных газовых стерилизаторах. Эффективным средством является смесь окиси этилена и бромистого метана (смеси ОБ и ОКЭМБ). Стерилизацию проводят в упаковке из двух слоев полиэтиленовой пленки толщиной 0,06—0,2 мм, пергамента, бумаги мешочной влагопрочной. Доза газа 2000 мг/дм³ экспозиция — 240 ч. Срок хранения изделий, простерилизованных в полиэтиленовой упаковке, до пяти лет, в крафт-бумаге — 20 суток. Применяют стерилизацию парами 16%-ного формалина. С этой целью применяют специальный пароформалиновый стерилизатор. Применяют для изделий из резины, полимерных материалов, стекла. Условия проведения стерилизации и сроки сохранения стерильности идентичны стерилизации смесью ОБ и окисью этилена.

Обновлено: 2019-07-09 23:49:21

Петритест — микробиологические экспресс-тесты — Глава 4 ДЕЗИНФЕКЦИЯ И СТЕРИЛИЗАЦИЯ 4.1. Дезинфекция

Комплекс мероприятий, направленных на уничтожение па­тогенных, условно-патогенных микроорганизмов, грибов и ви­русов в объектах внешней среды, объединяются в понятие дезинфекции.

Основной задачей дезинфекции в сочетании с противоэпи­демическими мероприятиями, регламентированными приказами и положениями Министерства здравоохранения и Государственным санитарным эпидемиологическим надзором Россий­ской Федерации, является прерывание механизма передачи Возбудителя на его пути от источника или резервуара инфекции к здоровому организму.

В клинико-микробиологических лабораториях, в которых врачам и микробиологам приходится постоянно контактиро­вать с инфицированным и потенциально инфицированным патологическим материалом, выделять из него чистые культу­ры возбудителей различных инфекционных болезней и выполнять ряд микробиологических и серологических диагностичес­ких исследований для определения видовой принадлежности выделенного микроорганизма, дезинфекция приобретает осо­бенно большое значение с точки зрения профилактики зара­жения, возникновения случаев внутрибольничных инфекций и выноса возбудителя за пределы лабораторий.

Методы дезинфекции подразделяют на физические (терми­ческие, действие УФ-лучей) и химические. Выбор того или иного способа дезинфекции определяется конкретными условиями выполняемой работы, биологическими свойствами микроба-возбудителя, конструктивными особенностями обеззаражи­ваемого изделия и физико-химической спецификой материала, на поверхности или внутри которого содержится возбудитель.

В медицинских микробиологических лабораториях наиболее широкое применение в целях дезинфекции находят термичес­кие и химические методы обеззараживания.

Химические средства действуют на обеззараживаемые объ­екты более поверхностно, чем высокая температура, тем не менее на практике они значительно удобнее и доступнее, чем применение высокой температуры.

Кроме того, многие изделия, портящиеся под воздействием кипячения или сухого жара, переносят без ущерба действие химических дезинфектантов.

В качестве средств дезинфекции и предстерилизационной очистки используют только разрешенные в установленном по­рядке в Российской Федерации химические средства.

За последние 1,5–2 десятилетия арсенал химических средств дезинфекции увеличился в несколько десятков раз. Если ранее в распоряжении микробиологов в основном была хлорная из­весть и ее производные: осветленные растворы хлорной извес­ти, хлорамин, лизол и раствор фенола (карболовая кислота), то в настоящее время имеется несколько химических групп соединений, каждая из которых включает по нескольку дезин­фицирующих средств, обладающих различными свойствами.

Однако каждый из применяемых дезинфицирующих пре­паратов должен иметь разрешение к применению, зарегистри­рованное в установленном порядке Министерством здравоохранения Российской Федерации и Департаментом Госсанэпид­надзора Российской Федерации.

Наибольшее применение в микробиологической практике получили дезинфектанты отечественного и зарубежного про­изводства, относящиеся к следующим группам химических соединений.

• Дезинфицирующие средства на основе четвертичных аммо­ниевых соединений. По своему физико-химическому соста­ву и строению препараты этой группы очень удачно соче­тают в себе дезинфицирующие и моющие свойства. Они не имеют резкого запаха, не обладают аллергенным действием, не вызывают раздражения глаз и слизистых оболочек верх­них дыхательных путей. Основным действующим веществом этих средств является дидецилдиметиламмоний бромид (ДДАБ), который не содержит в своем составе фенольной группы, что резко снижает его токсичность. Четвертично-аммониевые соединения используются одновременно как мою­щие, дезодорирующие препараты, а также как средства пред­стерилизационной очистки медицинского инструментария.
• Альдегидсодержащая группа препаратов, действующим началом которой служат глутаровый или янтарный альдегид, с дополнением или без дополнения активно действующих веществ, таких как четвертично-аммонийные соли или по­верхностно-активные вещества (ПАВ), обладающие способ­ностью моющего, дезодорирующего и частично растворяю­щего действия. Дезинфектанты этой группы обладают ши­роким спектром активности: бактерицидным, туберкулоцидным, вирулоцидным (ВИЧ, гепатит) и фунгицидным. Препараты этой группы используются, как правило, для дезинфекции, совмещенной с предстерилизационной очист­кой. Однако их недостатком является то, что они фиксиру­ют на обрабатываемых объектах органические загрязнения и обладают сенсибилизирующим эффектом.
• Дезинфицирующие средства на базе полигуанидина, слож­ного органического вещества, большей частью в комплексе с другими дезинфицирующими средствами, обладают про­лонгированным действием, невысокой токсичностью и не вызывают коррозии металлов. Препараты этой группы обладают широким диапазоном бактерицидного действия, од­нако для его проявления в отношении ряда бактерий, в частности микобактерий туберкулеза и вирусов, эти средства должны использоваться в высоких концентрациях (1–2 %) действующего вещества; на спороносную микрофлору даже в высоких концентрациях препараты полигуанидина влия­ния не оказывают.
• Кислородсодержащие вещества с пергидролем (Н₂О₂) ис­пользуют большей частью с добавлением 0,5 % раствора моющего средства типа «Прогресс», «Астра» в целях дезин­фекции и предстерилизационной очистки инструментов. Для снижения коррозийного действия к смеси растворов перекиси водорода и моющего средства добавляют 1,4 % ингибитора коррозии олеата натрия (малотоксичное соеди­нение, относящееся к мылам). Рабочие растворы пергидро­ля используются иногда для влажной уборки помещения лаборатории.
• Группа спиртов – этанола, пропанола, изопропанола – на­ходит применение в дезинфекции в виде отдельных пре­паратов или в сочетании с другими дезинфицирующими средствами. Этиловый ректификованный спирт рекоменду­ется только для дезинфекции изделий из металла. Для из­делий из прочих материалов разрешены к применению дез­инфектанты на основе других спиртов с добавлением по­верхностно-активных веществ, обладающих детергентным свойством. Дезинфицирующие средства, содержащие спир­ты, фиксируют на обрабатываемых поверхностях загрязне­ния органического происхождения, которые приходится от­мывать проточной водой с применением ершей, щеток, марлевых или бязевых салфеток.
• До настоящего времени широкое применение находят хлорсодержащие препараты, в частности хлорамин Б, хлоргексидин, биглюконат, хлорина, хлорэффект, хлоросепт Б.

Несмотря на стойкий и резкий запах хлорсодержащих пре­паратов, раздражающее действие на слизистые оболочки верх­них дыхательных путей, они находят широкое применение в клинико-микробиологических лабораториях благодаря высо­кой бактерицидной активности для предварительной дезин­фекции патологического материала и использованных в работе культур микробов.

▲   Фенолсодержащие вещества в настоящее время в бакте­риологической практике применяются очень ограниченно. Фенол как дезинфектант запрещен для применения в лабо­ратории из-за высокой токсичности и сильного стойкого запаха.

В табл. 4.1 приведены в качестве примера несколько наи­более простых и распространенных дезинфектантов для предстерилизационной очистки изделий медицинского назначения: ножниц, скальпелей, изделий из стекла, резины и пластмасс.

Таблица 4.1. Средства предстерилизационной очистки

Примечание. Материалы из книги «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения». М., 2000 г. Утверждены руководителем Департамента Минздрава России 30.12.1998 г.                   №МУ-287-113.

С начала до конца рабочего дня в бактериологической ла­боратории врачи и лаборанты одновременно с повседневной работой: приемом клинического материала, первичным посевом, выделением чистых культур микроба – возбудителя и его идентификацией – ведут непрерывную, плановую работу по текущей дезинфекции, предусматривающую обеззараживание отработанного патологического материала, посуды, в которой он находился, исследованных культур микробов, пипеток, ин­струментов и пр.

При выборе дезинфектанта руководствуются Санитарными Правилами 1.2.731–99, составленными на основе биологичес­ких свойств предположительно находящегося в материале воз­будителя, возможной степени микробного обсеменения, кон­систенции и свойств среды, в которой потенциально находится Возбудитель (табл. 4.2).

Таблица 4.2. Обеззараживание поступивших на бактериологичес­кое исследование выделений больных

Для обеззараживания крови и ее сгустков используют 5 % раствор хлорамина Б или ХБ аналиты, получаемые электрохи­мическим методом на установках, разрешенных к производст­венному применению в установленном порядке. Дезинфици­рующие средства используют в соответствии с режимами, ука­занными в Методических указаниях, утвержденных Госсан­эпиднадзором России (1.01.97 г.) и Министерством здравоох­ранения Российской Федерации (1.01.97 г.). Вместо указанных дезинфектантов можно использовать 3 % осветленный раствор хлорной извести; 0,6 % осветленный раствор нейтрального гипохлорита кальция; 0,5 % раствор ДП-2.

При использовании дезинфицирующих и стерилизующих средств необходим систематический контроль стабильности концентраций их рабочих растворов.

В последние годы НПФ «ВИНАР» (Россия) разработаны новые виды изделий – индикаторные одноразовые полоски экспресс-контроля концентрации рабочих растворов дезинфи­цирующих и стерилизующих средств «Дезиконт», предназна­ченные для экспресс-контроля соблюдения концентраций ра­бочих растворов хлорамина, хлорной извести, гипохлорита на­трия, нейтрального анолита, перекиси водорода в лечебно-про­филактических учреждениях и дезстанциях.

Однако нельзя исключить возможности того, что среди ос­татков использованного материала находится кровь или ее сгустки, содержащие вирус иммунодефицита человека или ге­патита В и С.

В связи с этим наиболее целесообразно оставшуюся от первичных посевов кровь собрать в специальный бак, плотно закрыть его крышкой, запломбировать и сдать в стерилизацию.

Обеззараживание производят в паровом стерилизаторе (ав­токлаве) при температуре 132 °С, давлении 2 кгс/см2 в течение 60 мин[1].

Из числа разрешенных к применению дезинфектантов в контейнерах могут быть использованы 3 % раствор хлорамина Б или хлорамина ХБ, 0,25 % по активному хлору раствор гипохлорита натрия; аналит, 2 % раствор дексона-1 или дексона-4, 3 % раствор ПФК/1, 3 % раствор перекиси водорода с 0,5 % моющего средства, 3 % раствор пероксимеда, 10 % раствор Демоса. Использованные в работе предметные и покровные стекла подлежат обязательной дезинфекции, так как неодно­кратно отмечались случаи сохранения жизнеспособных микро­организмов в фиксированных и окрашенных мазках. В целях предстерилизационной обработки для стекол может быть ис­пользован тот же дезинфицирующий раствор, который приме­няется для дезинфекции остальных предметов. Однако приори­тетное значение имеет 96 % этиловый спирт с 3 % перекисью водорода.

Через 1–2 дня после накопления достаточного количества стекол в банке их с целью обезжиривания обрабатывают хро­мовой смесью; последняя, являясь сильным окислителем, раз­рушает органические вещества с образованием растворимых газообразных продуктов. Перед употреблением хромовую смесь подогревают до 45–50°С и заливают ею грязные стекла.

Приготовление хромовой смеси

Пропись первая. В колбу емкостью 200 мл наливают 150 мл концентрированной серной кислоты, туда же всыпают 25 г измельченного бихромата калия. Полученную смесь взбал­тывают и оставляют стоять до растворения. Через сутки раствор темно-оранжевого цвета может быть применен для мытья посуды. Перед употреблением смесь следует подо­греть до температуры 45–50 °С. Изменение темно-оранже­вого цвета хромовой смеси на темно-зеленый свидетельст­вует об ее непригодности.

Пропись вторая. В 500 мл дистиллированной воды раство­ряют 5 г неочищенного измельченного бихромата калия и затем, перемешивая жидкость, тонкой струей вливают ее в 500 мл концентрированной серной кислоты.

При приготовлении хромовой смеси и мытье ею посуды нужно надевать резиновые перчатки, так как попадание на кожу хромовой смеси вызывает болезненные ожоги; нельзя насасывать хромовую смесь в пипетки ртом; в хромовую смесь, содержащую кислоту, нельзя вливать воду.

Пробирки, чашки Петри с отработанным материалом сдают в стерилизационную для обеззараживания насыщенным паром при 126 °С под давлением 1,5 кгс/см2 в течение 60 мин для неспорообразующих форм микроорганизмов и при 132 °С, дав­лении 2 кгс/см2 в течение 90 мин для уничтожения споровых культур (СП 1.2.731-99).

Для предупреждения инфицирования окружающей среды перенос инфицированного материала (посуды и культур) для обеззараживания осуществляется в закрывающихся емкостях.

Все перечисленные мероприятия, не относящиеся непо­средственно к основным микробиологическим операциям, но постоянно сопутствующие им и определяющие чистоту мик­робиологического исследования, а, следовательно, и его досто­верность, составляют комплекс мероприятий текущей дезин­фекции, необходимый для микробиологических лабораторий.

Все работы с экспериментальными животными ведутся в боксах, оснащенных бактерицидными лампами, с участием двух сотрудников.

Перед входом в боксированное помещение сотрудники пе­реодеваются: надевают шапочку или косынку, заменяют меди­цинский халат на хирургический, доходящий до нижней трети голени, надевают резиновые перчатки, тапочки, а при необхо­димости – маски или респираторы. Инструментарий, приме­ненный в работе с лабораторными животными (шприцы многоразового пользования после вакцинации или заражения животных, взятия крови, инструменты для вскрытия), сдают в стерилизационную для обработки (кипячения, автоклавирования) или обрабатывают в боксе дезинфицирующими средства­ми. Режим дезинфекции определяется биологией возбудителя, который использовался в работе с экспериментальными жи­вотными (табл. 4.3).

Таблица 4.3. Обеззараживание инфицированных инструментов, использованных в работе с экспериментальными животными

Примечание. Приведенные материалы взяты из СП 1.2.731–99.

Трупы животных сжигают или автоклавируют в том же режиме, который использовали при обработке инструментов для их вскрытия.

[1] Цит. по: Медицинские лабораторные технологии: Справочник/Под ред. А.И.Карпищенко. – 2-е изд. – СПб.: Интермедика, 2002.–Т. 1. – С. 100.

Преимущества биологических индикаторов в процессе медицинской стерилизации

Стерилизация крайне важна для стоматологических кабинетов, больниц,
хирургические центры и многие другие медицинские учреждения по всему миру, потому что стерилизация
обеспечивает защиту медицинского персонала и пациента. Медицинские инструменты,
оборудование и имплантаты должны быть полностью стерильными, прежде чем их можно будет использовать. В
стерилизация медицинского оборудования имеет решающее значение для функционирования наших современных
система здравоохранения на всех уровнях.Стерилизация предотвращает перекрестное заражение
и улучшает результаты лечения пациентов.

Биологические индикаторы контролируют процесс стерилизации
и оборудование для обеспечения надлежащего функционирования процесса и оборудования
стерилизовать медицинское оборудование. По этой причине биологические индикаторы
один из важнейших компонентов процесса стерилизации.

Биологические индикаторы обычно считаются
высочайший стандарт контроля процесса стерилизации.Биологические
индикаторы используют бактериальные споры, заключенные в меньший контейнер, который
помещается внутрь стерилизатора. После прохождения процесса стерилизации
биологические индикаторы инкубируются, чтобы определить, есть ли споры бактерий.
выжил. Если все споры бактерий удалены, индикатор показывает
процесс стерилизации был эффективным, и медицинские предметы в стерилизаторе должны
не содержат микроорганизмов или содержат значительно меньше микроорганизмов.

Биологические индикаторы в медицине
Процесс стерилизации

• Как
  Определяете ли вы процесс мониторинга стерилизации?
• Как
  Работает ли химический мониторинг?
• Как
  Работает ли механический мониторинг?
• Как
  Работает ли биологический мониторинг?
• Что
  Действительно ли биологический индикатор стерилизации?
• Что
  Споры используются для создания биологических индикаторов при стерилизации паром?
• Почему
  Следует ли использовать биологические индикаторы?

Медицина не вошла бы в современную эпоху, если бы
не из-за нашей способности убивать патогены, которые создают проблемы со здоровьем
все население.Поскольку это такой важный аспект нашей медицинской системы,
Для контроля стерилизации требуются строгие процедуры обеспечения качества
процесс.

Как вы определяете
Процесс мониторинга стерилизации?

Стерилизация,
иногда называемое обеззараживанием, это 6-кратное сокращение жизни
организмов, возникающих при уменьшении в миллион раз. Другими словами,
стерилизация убивает микроскопические бактерии и патогены, чтобы предотвратить
распространение болезней человека.

Есть несколько
процессы, используемые для стерилизации; наиболее распространены окись этилена и пар.
Что касается стерилизации паром, то чаще всего используются следующие средства:
газовая плазма, перекись водорода и жидкая стерилизация. В последние годы
процесс стерилизации стал более эффективным, чем когда-либо, благодаря химическому
стерилизующий агент, такой как раствор глутаральдегида и раствор CIDEX OPA, a
высокий уровень
дезинфицирующий раствор
.Методы стерилизации различаются, но все они выполняют одну и ту же функцию: устранение любых
бактерии и другие микроорганизмы на поверхности. Как и следовало ожидать, все
формы стерилизации необходимо контролировать, чтобы убедиться, что все потенциальные
патогены успешно искореняются.

Стерилизация
На цикл могут влиять самые разные факторы. Опыт человека, оперирующего
техника может вступить в игру. Фактически, человеческая ошибка является причиной
большинство сбоев стерилизационной загрузки.Подготовка нагрузки может повлиять на цикл,
как и механическое состояние стерилизатора. Процесс стерилизации
должны контролироваться для обеспечения надежности и эффективности, а обслуживающий персонал должен
немедленно примите меры, если во время стерилизации прозвучит сигнал тревоги. В
предметы, необходимые для стерилизации, следует приобретать в надежных
медицинский
и хирургические принадлежности
магазин
известно, что несут качественные продукты. Медицинские учреждения, ориентированные на качество
стандарты уверенности, как правило, используют три типа показателей для мониторинга
стерилизация: химическая, механическая и биологическая.

В
биологический индикатор считается золотым стандартом стерилизации
мониторинг. При регулярном использовании в рамках стратегии долгосрочного мониторинга
биологические индикаторы обеспечивают уверенность в процессе стерилизации. Однако,
многие биологические индикаторы требуют длительной инкубации и, следовательно,
нельзя разумно использовать для каждого цикла (исключение составляет
индикатор быстрого считывания). Биологические индикаторы рекомендуется использовать на
еженедельно, и поэтому механические и химические методы являются частью
подход к обеспечению стерилизации.

Давайте
взгляните на другие формы мониторинга стерилизации, чтобы лучше
понимать важную роль, которую играют биологические индикаторы.

Как работает химический мониторинг
Работа?

Химическая
мониторинг описывает процесс использования специальных индикаторов (например, полосок,
вкладки и ленты), которые содержат химические вещества, которые вызывают изменение цвета как
реакция на высокие температуры (включая сухое тепло).При стерилизации это обычно
называется интегрирующим индикатором класса 5. Химические индикаторы должны быть
используется для каждой упаковки и каждого цикла, чтобы гарантировать, что содержимое
правильно стерилизовать. Химические индикаторы показали себя очень надежными в
проверка того, что условия, необходимые для стерилизации, были соблюдены, и
результаты появляются на индикаторе сразу после цикла (огромное преимущество
для стерильного технологического персонала).

Химическая
индикаторы также служат ярлыком для проверки того, что товары были обработаны
и безопасны для пациента.Если бы медицинский работник взял
только для того, чтобы обнаружить, что изменение цвета не произошло, это
означает неудачный тест. Ни при каких обстоятельствах нельзя использовать эти инструменты.
используемый.

Как работает механический мониторинг
Работа?

Механический
(физический) мониторинг описывает наблюдение за компонентами
стерилизатор как часть обычных мероприятий по контролю качества. Для каждой нагрузки
Пользователь проверяет датчики, дисплеи и таймеры единичного цикла.Вариации в этих
показания могут быть первым признаком того, что что-то не так с
стерилизатор.

Как работает биологический мониторинг
Работа?

Биологические
индикаторы используются в условиях медицинской стерилизации для измерения
эффективность процесса стерилизации и гарантия летальности
цикл. Биологические индикаторы иногда называют
жилая
индикаторы.
Этот термин не требует пояснений: биологический или живой
индикаторы — это живые организмы, которые чувствительны к изменениям и могут предоставить нам
с обратной связью о состоянии своего непосредственного окружения.Пример часто
Для объяснения концепции биоиндикаторов процитировано понятие растения, называемого
лишайники и их использование для измерения загрязнения воздуха. Лишайник очень чувствителен к
загрязняющих веществ в воздухе, таких как диоксид серы, и перестанет расти, если уровень
количество загрязнителей воздуха увеличивается. Таким образом, лишайники являются живым, естественным
биологический индикатор качества воздуха.

Что такое биологическое
Индикатор стерилизации?

В
установка медицинской стерилизации, биологические индикаторы не являются растениями; Oни
споры бактерий.И это не просто старые споры — это супер
мощные бактериальные споры, известные своей устойчивостью к стерилизации
процесс. Биологический индикатор, также известный как полоска спор, состоит из
особый тип материала, на котором были споры и эндоспоры бактерий
применяется. Полоски со спорами содержат в среднем один миллион спор бактерий.
Обычно помещаемый в нечто, известное как устройство проверки процесса,
Пораженный спорами материал перерабатывается вместе с другими предметами.Однажды
цикл завершен, полоска со спорами помещается либо во флакон, либо в стакан
ампулу запаивают и инкубируют в течение определенного периода времени. Как только указанный
время прошло, результаты теста биологического индикатора проверены на
посмотрите, не произошел ли рост спор. Если да, значит, хотя бы один
spore пережила процесс стерилизации, поэтому тест не прошел. Сегодня мы
иметь доступ к новым биологическим индикаторам с быстрым считыванием показаний, которые используют ферменты для
оцените полоску на предмет оставшихся спор, исключив необходимость в
период инкубации.

Биологические индикаторы
считаются предметом медицинского и хирургического снабжения. Один из биологических
индикаторы, наиболее часто встречающиеся в шкафу снабжения клиники, — это
3 млн
1261 Аттестат биологического индикатора
s и 3M
Attest 1292 Быстро считываемые биологические индикаторы
. Биологические индикаторы
используется вместе с устройством контроля процесса для контроля эффективности
паровой стерилизатор или автоклав вместе с помещениями биологической безопасности
шкафы и изоляторы.Устройство проверки процесса, которое содержит
биологический индикатор (и интегрирующий индикатор класса 5) необходимо включить в
самое сложное, труднодоступное место. Например, это будет самый нижний
полка рядом со сливом в камере стерилизатора или дно мусорного ведра
в комнате.

После
цикл стерилизации завершен, устройство проверки процесса
удалены, а биологические индикаторы отложены для результатов испытаний.На данном этапе,
метод биологического индикатора, который вы используете, определяет, как он будет
обработанный. Индикатор быстрого считывания использует реактивные ферменты для обеспечения
считывание результатов в течение одного-трех часов, и нет необходимости
инкубация (хотя некоторые могут выбрать инкубацию в качестве двойной проверки). Быстрый
считываемые индикаторы считаются эквивалентными стандартным биологическим индикаторам.
Если биологический индикатор раннего считывания не используется, его необходимо
капают в среду для роста с использованием асептической техники для
инкубация.

После периода
время (обычно от одного до трех дней) результаты теста появляются на
биологический
индикаторный инкубатор
а также
показать результат прохождения теста для этого цикла. Результаты можно сравнить
на полоски, не обработанные спорами, чтобы уменьшить неопределенность
полученные результаты. Каждый раз при положительном результате теста на споры стерилизатор необходимо
сразу проверил на неисправность и оспорил. Если второй положительный тест
происходит отключение стерилизатора и извлечение его из центрального
область обработки до тех пор, пока она не будет обслужена.

За
медицинские учреждения, нуждающиеся в стартовом комплекте, 3M делает
Стартовый комплект 3M Attest Monitoring для Steam. В этот комплект входит самое необходимое
необходимо для начала наблюдения за процессом стерилизации паром. В стартовый комплект входят:
(1) Рулон индикаторной ленты 3M 1322, (1) Коробка биологических индикаторов 3M 1262P, (1)
Инкубатор 3M 116, (1) мешок химических интеграторов 3M 1243B, (1) журнал 3M 1266
Книга и (1) Настенная диаграмма.

Из чего образуются споры
Биологические индикаторы при стерилизации паром?

Биологические
индикаторы, используемые для оценки парового стерилизатора (также известного как автоклав)
содержат споры Geobacillus stearothermophilus, Bacillus atrophaeus или
Bacillus subtilis.Эти споры используются, поскольку они особенно известны.
устойчив к смертельному воздействию влажного тепла. Давайте посмотрим на каждый из
эти споры.

Geobacillus Stearothermophilus

А
термофильный (теплолюбивый) вид бактерии, обитающей в почве. Штаммы
Geobacillus stearothermophilus, используемая для проверки стерилизации, может:
аэробно окисляющий монооксид углерода. В последние годы штамм, модифицированный
появилась флуоресцентная метка, которая дает показание результатов за одну десятую
необходимое время.Интересный факт: Geobacillus stearothermophilus отвечает за
вызывая порчу пищи.

Bacillus Atrophaeus

Бациллы
atrophaeus — это вид бактерий с черной пигментацией, часто используемых в
область биомедицины. Интересный факт: Bacillus atrophaeus является одним из бактериальных
штаммы, используемые в программе США по биологическому оружию, прекращенной в 1969 году.

Bacillus Subtilis

Иногда
называется сенной палочкой или травяной палочкой, этот вид встречается в почве и
пищеварительный тракт человека и других млекопитающих.Bacillus subtilis — эндоспора
с стержневой формой и прочной внешней оболочкой, которая позволяет ему выдерживать
в самых экстремальных условиях. Интересный факт: используется подтип Bacillus subtilis
в процессе ферментации, чтобы приготовить липкое японское блюдо с сильным ароматом
называется
натто .

Почему мы должны использовать
Биологические индикаторы?

В
Центры по контролю за заболеваниями рекомендуют, чтобы процесс стерилизации был
мониторинг биологических индикаторов, как минимум, еженедельно.Эксперт
от Ассоциации по развитию медицинского оборудования (AAMI)
описывает биологический мониторинг как «краеугольный камень вашей стерилизации
программа обеспечения качества ». Биологические индикаторы говорят нам,
цикл стерилизации адекватно уничтожил микробные загрязнители в
Это невозможно сделать только с помощью химического и механического мониторинга.

За
стерилизаторы, обрабатывающие несколько загрузок каждый день, ежедневное использование биологических
индикаторы — один из наиболее эффективных способов выявления ранних неисправностей или
ошибки, значительно снижающие риск для пациента.Центральные процессоры и другие
в медицинских учреждениях целесообразно использовать биологические индикаторы в качестве
общепринятая практика. Поистине, никакие другие индикаторы не приблизились к точности
полоски со спорами для непосредственного подтверждения летальности стерилизации
процесс.

Важность биологических
Индикаторы

Биологические индикаторы
являются неотъемлемой и необходимой частью трехстороннего подхода к мониторингу
процесс стерилизации оборудования и
хирургический
инструменты
.Механический
индикаторы обычно являются наиболее очевидными и обычными индикаторами. Химическая
индикаторы измеряют среду внутри автоклава (или другую дезинфекцию
единица), чтобы обеспечить соблюдение условий, смертельных для микробиологии, например
высокая температура. Биологические индикаторы — единственный способ
знать, с точки зрения доказательства, что бактерии были уничтожены
процесс стерилизации.

Биологические
индикаторы, также известные как полоски со спорами, следует использовать не реже одного раза в неделю.
оспорить цикл стерилизации.Стандартные биологические индикаторы не
предоставляют результаты в режиме реального времени, так как для них требуется 24-48-часовой инкубационный период.
Для тех, кто ищет более быстрый вариант, существуют типы биологических
индикаторы, которые могут дать результаты за один час, например этот
3M Аттестат
1291 Биологические индикаторы быстрого считывания.
Любого типа
биологического индикатора, который вы выбираете для своей клиники, используя эти индикаторы
вы помогаете снизить риск заражения — и сокращаете связанные с этим расходы
при борьбе с инфекцией — просто соблюдая стандарты ухода за стерильными
обработка.

Многие компании производят биологические. 3M Аттест биологический
индикаторы используются в самых разных медицинских и стоматологических учреждениях
Мир. Хотя биологические индикаторы 3M Attest широко используются, биологические индикаторы Crosstex
индикаторы также широко используются. В
Crosstex
ConFirm 24 Биологические индикаторы Steam
можно использовать в большинстве инкубаторов
включая большинство инкубаторов 3M Attest.

Комбинированный тест
Пакеты

Некоторые линейки продуктов, такие как 3M Attest, производят комбинацию
упаковка с биологическим индикатором и химическим интегратором.В
3 млн
Тестовый пакет Attest Rapid 5 Steam Plus 41382
специально разработан для
представляют собой серьезную проблему для процесса стерилизации паром, как и
Набор полотенец AAMI 16. 3M Attest Rapid 5 Steam Plus Test Pack 41382 — это
набор для тестирования биологических индикаторов, содержащий
3 млн
Быстро считываемый биологический индикатор Attest 1292
и 3M
Соответствует парохимическому интегратору SteriGage 1243.

Что такое Боуи-Дик
Контрольная работа?

Тест Боуи-Дика — это стандартизированный тест, который обеспечивает
весь воздух удаляется из вакуумного стерилизатора, и стерилизатор не
есть утечки воздуха.Тест Боуи-Дика не является биологическим индикатором. В
Тест Боуи-Дика следует проводить каждый день перед использованием стерилизатора. В
Тест Боуи-Дика показывает цветовой индикатор, успешно ли стерилизатор проходит или не проходит.
тест. Тест Боуи-Дика не дает никакой информации относительно
конкретная причина неудачного теста.

Тестовые наборы Боуи-Дика обычно продаются пачками, а некоторые
словно
3 млн
Соответствует тесту Боуи-Дика 00135LF
иметь лист раннего предупреждения, который выявляет
потенциальные проблемы до того, как они появятся в тестовом листе.

Для получения дополнительной информации о выборе лучшего биологического
индикаторы и другие принадлежности для стерилизации, обратитесь в USA Medical and Surgical
Поставки. Позвоните нам по бесплатному телефону 888-215-0718 или отправьте электронное письмо на
[email protected].

.

Оценка химических и биологических последствий методов стерилизации почвы

1 Cspin J. Env. Si. 27, т. 5 № 2 с. 87 ~ 91 Авторские права y Университет Гилна, Принте, И. Ирн [Ресерх] CJES Cspin Journl of Environmentl Sienes Evlution Гемилинологические последовательности методов стерилизации почвы S.Rzvi rr, A. Lkzin * Soil Siene Deprtment, Agriulturl Collge, Ferowsi University of Mshh, Mshh, Mshh, Irn * Соответствующий E-mil: РЕФЕРАТ Стерилизуйте почвы, часто используемые для исследования экспериментов по сорбции ксеноиоти в иотионе. . Они также используются для очистки азотных носителей и удаления иологилфторов. В этом контексте применяются различные методы стерилизации почвы, такие как обработка, фумигация и воздействие ультрафиолетового и мирового излучения на свойства почвы (чистота почвы, электрическая активность, обмен веществ, оптильность, экстренный азот, не образующий олоний элемент). ) Были разоблачены всевозможные онтиции.Все методы стерилизации в значительной степени (t P <0,5) снижают физическую элетрильность (EC), оптильность (OD), удаление азота для нестерилизации частиц почвы. Результаты показывают, что использование наиболее эффективных методов устранения миорорганизмов почвы и ультрафиолетового орошения является менее эффективным. Эти побочные эффекты, вероятно, были связаны с высвобождением органических организмов из человеческих организмов - мироорганизмов. Ключевые слова: автоматизация, колониеобразующая единица, фумигация, мировое орошение, стерилизация почвы, ультрафиолетовое орошение.ВВЕДЕНИЕ Стерилизация почвы, вмешательство или борьба с большинством почвенных или вредных организмов, таких как сорняки, зебры, немто, грибы, болезни (Nutter, 1957). Существуют разные методы стерилизации почвы, которые влияют на мирофильтрацию почв (Trevors, 1996; Shw, 1998). Чаще всего это включает в себя утолвинг, гематоксилин, фумигацию хлороформом, оксид этилена или пропилена, ультрафиолетовое и мировоззрение. Поскольку эти методы относительно разные с точки зрения свойств и полезности, они являются наиболее эффективным методом стерилизации, который значительно меняется от одной ситуации к другой.Он сообщает, что методы стерилизации почвы, как правило, улучшают ее физико-химические свойства. Например, этилен-н-пропиленоксидный оксид стерилизует кислород с помощью 2-го водорода органического вещества, вызывая инверсию органического вещества почвы (Do et l., 1982; Wolf et l., 1989; Negre et l., 1995). Эти воздействия влияют на сорбционную активность объединений с функциональными группами, чья реактивность к органам чувствительна к физическому элементу (Do et al., 1982) или организму. Gmm irrition использует эполимеризацию рогиртов, таких как целлюлоза, не содержащие водород, и гидроксильные рилы, которые реагируют на окислители, чтобы уравновесить содержание углерода (Puri n Brrlough, 1993).Дженкинсон и Паулсон (1985) сообщают о фумигации хлороформом почвы с использованием 1N K 2SO4. . Множество различных факторов, таких как токсичность, жалость, остаточная нагрузка, жизнеспособность методов лечения, имеют важное значение в онлайн-версии или

.

2 88 выбор метода стерилизации почв.Из-за того, что оборудование требует много времени, некоторые стерильные средства требуют больше времени, чем другие. Например, споры терила более устойчивы к горячей стерилизации, чем к растворению, поэтому мне необходимо ввести влажные участки почвы на 1-2 года, чтобы дать спорам возможность прорасти перед горячей стерилизацией. Стоимость гемил, лор и оборудования, включая уровень токсичности, должна снизиться при выполнении операции стерилизации шланга. Хотя стерилизация почвы не является важным процессом в некоторых научных экспериментах, тем не менее, нет сообщений о гемилениологических последствиях стерилизации почв на луговых почвах Ирна.Таким образом, задача данного резерва заключалась в изучении воздействия четырех различных методов стерилизации почвы (утолвинга, фумигации хлороформом и воздействия ультрафиолетового и мировидного полей) на некоторые свойства почвогрунтов. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Образцы почвы Образцы почвы удаляли с высоты 25 м высоты Hplmi, отверстия сита (2 мм), в местах хранения при температуре 4 ° C, пока не был проведен анализ. Экспериментальное проектирование nlytil proeures Пять образцов были взяты из почвы (с 3 реплитами для примера). Один набор образцов остался без образцов контроля (C).Сеоновый набор образцов был утолщен (AU) в течение 15 мин (121 o C, 15 psi). Другой набор образцов подвергался воздействию микроволнового излучения (МВт) на полную мощность (11 Вт) (Wng et al., 21). Четвертый набор образцов был приготовлен в вакууме с хлороформом (CHCl 3) впор в течение 24 часов (FU). Первую серию образцов подвергали ультрафиолетовому облучению (УФ) в течение 45 минут в потоке 1 мин. Несомненно, влажность всех пятен была определена, когда они были покрыты стерильной алюминиевой фольгой. Образец 2 г / мм смеси для обработки с 5 мл истилля воды выдерживали в течение 15 минут после разрушения слоя почвы в течение 3 часов, после чего определяли степень загрязнения почвы (ph) и элетрильность (EC) частиц почвы в течение 15 минут. 1: 2.5 почвенная взвесь с помощью EC n ph-метра. Экстремальный метод окисления хрома калия из Vne et al., (1987) n Dll (1979). Ихромт потссия (1 мл, 1 н.) В 7 мл онтрита H 2 SO 4 превращали в 5 мл экстрактов, содержащихся в растворе ихромта калия, и титровали сульфатом железа (0,5 N) с использованием комплекса о-феннтролина и железа. инициатор. Экстремальный азот определял пищеварение Миро-Кьелля (Pe et l., 1982; Dvison et l., 1989). Ction exhnge pity (CEC) измеряли с помощью метода Chopmn (1956).Опти- мальность 5 M K 2 SO 4 экстерьеров различных воздействий определяется размером 42 нм. Чтобы исследовать различные эффекты лечения на популяции, это лечение проводилось серьезно на Nutrient gr. Количество олониеобразующих единиц (КОЕ) всех участков определяется периоиллией. Сттистиллический анализ. Значения иферена между методами лечения были проанализированы одним методом ANOVA. Лечение проводилось с использованием ДНК-теста в наименее значимом иферен-тесте на стр. 5. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Влияние различных воздействий на свойства гемилиниологила почвы Повышение эффективности воздействия на метод стерилизации почвы.Оптимальность почвенного раствора от 57 до 343, соответственно, для ухода за грунтом. Тем не менее, все методы лечения, за исключением ультрафиолетового облучения, используют значительный инсульт (стр. 5) для улучшения оптичности в тюрьме для контроля (рис. 1). Желтоватые сучья, вероятно, были гумифицированными омпонами (Purin Brrlough, 1993) в связи с отсутствием оптильности во всех попытках эполимеризации рогиртов с уровнем углерода. Похоже, что высокая температура и давление в штоке приводят к достижению максимального результата в отношении надежности.Аппрейле

3 Rzvi rr & Lkzin 89 часть экстрагированных веществ происходит из бесцветных фракций почвенного органического вещества, что соответствует очистке Puri n Brrlough (1993) и Islm n Weil (1998). Оптильность (42 нм) Рис. 1. Влияние различных методов стерилизации почвы на оптильность. Если следовать последующему письму, то это не имеет существенного значения, если оно не имеет значения P <.5. C = ontrol, AU = utolving, MW = mirowve irrition, FU = hloroform fumigtion n UV = ultr violet irrition. Релиз экстрима следует за пттерном, похожим на оптильность. Экстрагент различных методов лечения от 494 до 1155 мг / кг для лечения и лечения, соответственно, был особенно значимым (стр. 5) для всех процедур в тюрьме для контроля легких (рис. 2). Как указано выше, этот фактор, связанный с высвобождением органических организмов, предположительно происходит из-за человеческих микроорганизмов. Slonius et l., (1967) n Do et l., (1982) также основали и другие источники, выделяющие растворенные организмы из частиц почвы. Высокая температура и давление в стержне из-за значительного воздействия на промывки C, но при этом сохраняется высокая степень вытеснения в процессе фумигации при длительном воздействии хлороформа vpor (24 часа), который убивает мироорганизмы, но не освобождает их. Ифферент между факторами экстрима мировоззрения и ультрафиолетового истощения не имел значения (p> 0,5). В данном случае кажется, что время для этих обработок невелико, и в результате мы получаем низкий уровень вредных воздействий, достигнутый с помощью чистых дезинфицирующих средств.Точно так же почти во всех процедурах присутствуют методы экстрагирования азота в тюрьме для контроля (рис. 3). Автоматические процедуры фумигации не были существенно различающимися (P <0,5). Повышение содержания азота в не содержащихся в нем компонентах почвы требует более высоких энергозатрат по сравнению с углеродом. Высокая температура в течение длительного времени в процессе дезинфекции, по-видимому, приводит к высвобождению большого количества экстренного азота в тюрьме для контроля ультрафиолетовых и солнечных лучей. Экстритлер (мг кг -1) Рис. 2.Влияние различных методов стерилизации почвы на вытяжку 5 M K2SO4. Если следовать этой букве, то это не существенно, если t P <0,5. C = ontrol, AU = utolving, MW = mirowve irrition, FU = hloroform fumigtion, n UV = ultr violet irrition. Экстренный азот (мг кг -1) Рис. 3. Воздействие различных методов стерилизации почвы K2SO4- экстрагированный азот. Если следовать за этой буквой, это не значит, что если t P <0,5. C = ontrol, AU = utolving, MW = mirowve irrition, FU = hloroform fumigtion, n UV = ultr violet irrition.Почти все пациенты используют значительный приток энергии (P <0,5) в тюрьме для контроля (рис. 4). Элек- трильность почвенных пятен в утол- ве, фумигации и мировоззрении существенно не различалась (P <0,5). Клив различных компонентов в увлажнении и устранении недостатков, благодаря которым эти препараты высвобождают разные ионы в препаратах

.

4 9 Экстратный почвенный раствор не приводит к увеличению электричества.Слониус и др., (1967) так же основывают стерильные почвы, имеют более высокую элетрильность в тюрьмах, чтобы не стерилизовать почвенные пятна. ЭК (с м -1) Рис. 4. Влияние различных методов стерилизации почвы на электрическую активность (ЭК). Если следовать за этой буквой, это не значит, что если t P <0,5. C = ontrol, AU = utolving, MW = mirowve irrition, FU = hloroform fumigtion, n UV = ultr violet irrition. Ph почвы значительно снижает y utolving, фумигацию n mirowve irrition tretments (стр.5) до контроля. Автолинг h наибольшее влияние на ph; тем не менее, различия между фумигацией и мировым истощением не были значительными (P <.5) (рис.5). Однако это повреждение в различных воздействиях, которые я получил в результате растворения органических веществ, является причиной воздействия эрозии эпена на жалость почв. В этой связи влияние изменения рН на поверхностную гидрофильность почвенного органического происхождения усиливается. Слониус и др. (1967) основали исследование pH щелочной почвы, тогда как Вольф и др. (1989) не сообщают об изменении pH для утоленных почв. ph Рис. 5. Влияние различных методов стерилизации почвы на тел. Если следовать последующему письму, то это не имеет существенного значения, если оно не имеет значения P <.5. C = онтрол, AU = ультрафиолетовое облучение, MW = мировое облучение, FU = фумигирование хлороформом, n УФ = ультрафиолетовое облучение. Обработка Обработка Повышение стрилизации почвы Влияние различных методов стерилизации на обменный курс (CEC) не следует за предыдущей точкой (рис. 6). Все методы лечения используют значительную интенсивность (P <0,5) для обмена жалостью в тюрьме на контроль, но различия между фумигацией и ультрафиолетовым истощением не были значительными (стр. 5), в то время как эти процедуры вызывали наивысшую степень обмена жалости. Возможно, что с помощью других методов фумигации в ультрафиолетовых обработках, увеличивающая количество почв, это может привести к замене этих обработок.ЕКО (моль кг -1) Рис. 6. Влияние различных методов стерилизации почвы на обменный курс. Если следовать за этой буквой, это не значит, что если t P <0,5. C = ontrol, AU = utolving, MW = mirowve irrition, FU = hloroform fumigtion, n UV = ultr violet irrition. Результаты олониеобразующей единицы (КОЕ) различных обработок стерилизации почвы показали, что различия между ними на нестерилизованных образцах почвы были значительными (p <0,5). Единицы, образующие олонию, могут составлять от до одного грамма почвы для обработки почвы, соответственно, однако, после мировой фумигации грязь (рис.7). КОЕ.1 8 гр -1 почвы Рис. 7. Влияние различных методов стерилизации почвы на олониевообразующий элемент. Если следовать за этой буквой, это не значит, что если t P <0,5. C = ontrol, AU = utolving, MW = mirowve irrition, FU = hloroform fumigtion, n UV = ultr violet irrition. Третментс Третментс

5 Rzvi rr & Lkzin 91 Оказалось, что все меры были эффективными при повторном использовании мироилов в данном исследовании, и это был самый сильный метод.Несмотря на ограниченность этих методов, они все еще создают благоприятные условия для снятия гемилниологичных изменений, применяемых в методах стерилизации, особенно с более надежной информацией. Похоже, что дальнейшие исследования необходимы для изучения физических последовательностей методов стерилизации почвы. БЛАГОДАРНОСТИ Авторы выражают благодарность персоналу отделения Soil Siene Deprtment Университета Феровси МШХ за их постоянную работу в полевых условиях. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ Dll, R.C. (1979) Простой способ определения общей активности в почвах и металлах, Anlyst.14, До, T.H., Mrx, D.B., Lvy, T.H. n Drgun, J. (1982) Effet, n sttistil evlution, стерилизация почвы на линейных изотермах сорбции iурона. Почва Si. Так. Am. J. 46, Dvison, E.A., Ekert, R.W., Hrt, S.C. n Firestone, M.K. (1989) Направленное извлечение мирофильтрованного азота из лесных и лесных почв Калифорнии. Soil Bio. Biohem. 21, Islm, K.R. n Weil, R.R. (1998) Мировое орошение почвы для рутинных измерений мирофильтрованного рона. Биол. Плодородный. Почвы. 27, Negre, M., Gennri, M., Crehio, C. n Ruggiero, P.(1995) Эффект стерилизации этиленоксидом почвенного органического вещества, спетросопиннизованный при сорбции ифуорфена. Почва Сиена. 159, Наттер, Г. (1957) Стерилизация почвы на газоне. USGA Journal n Turf mngement. pp Pe, G.M., Mkown, C.T., n Volk, R.J. (1982) Сведение к минимуму повторного образования нитрата при переваривании многих тканей стволовых клеток. Plnt Physiology. 69, Powlson, D.S. и Jenkinson, D.S. (1985) Фумигация хлороформом при выделении почвенного азота: влияние времени фумигации при температуре. Soil Bio. Biohem.17, Puri, G. n Brrlough, D. (1993) Сочетание мироверации 245 МГц с фумигацией-вытяжкой хлороформом для оценки азота мирофильтрата почвы с использованием Н-лелинга. Soil Bio. Biohem. 25, Слониус, П.О., Джонсон, Дж. Б. и Чсе, Ф. Э. (1967) Тюрьма утолвен-г-мм-ирритовых почв для экспериментов по окрашиванию мироилом. Pl. Soil 27, Shw, L.J. (1999) Повторное введение нестерильной обработки почвы утольвом для исследований сорбции ксенооти и иоэгрции. Почва Эо. J. 11, Trevors, J.T. (1996) Стерилизация против мирофильтрации почв.Журнал Mioiol. Методы. 26, Vne, E., Brookes, P.C. n Jenkinson, D.S. (1987) Измерения мирофильтрации в лесных почвах, использование метода фумигации хлороформом в сильно почвах. Soil Biol. Biohem. 19, Wng, W.J., Dll, R.C. n Муай, П.В. 21.Развитие методики мировоззрения для измерения мирофильтрации почвы. Почва Sie. Так. Am. J. 65, Wolf, D.C., Do, T.H., Sott, H.D. n Lvy, T.L. (1989) Влияние методов стерилизации на свойства селете мироиологил, физил и хемил. Среда. Qul. Дж.18,

.