Диагностика болезнь виллебранда: Attention Required! | Cloudflare

Диагностика болезни Виллебранда 1-го типа

Болезнь Виллебранда является наиболее часто встречающимся наследственным заболеванием свертывающей системы крови. Выделяют 3 основных типа заболевания и несколько подтипов внутри 2-го типа, которые связаны с качественным или количественным дефицитом фактора Виллебранда. Статистически доказано, что до 85% диагностированных случаев относятся к болезни Виллебранда 1-го типа. Несмотря на успехи, достигнутые в диагностике этого распространенного заболевания, а также большое количество доступных лабораторных тестов, объективизация болезни Виллебранда связана со значительными трудностями. Классическим проявлением болезни Виллебранда принято считать кожно-слизистые кровотечения в личном и семейном анамнезе, которые при установленном диагнозе обычно коррелируют с тяжестью заболевания. Для оценки кровотечений используется стандартизированный опросник. Обычно данных анамнеза недостаточно для того, чтобы доказать наличие заболевания, в связи с чем требуется проведение серии лабораторных исследований. Ряд рутинных тестов, выполняемых при нарушениях системы гемостаза, имеют недостатки и не всегда являются специфичными. На сегодняшний день существуют 3 основных теста, которые используют для диагностики болезни Виллебранда: исследование антигена фактора Виллебранда (VWF:Ag), исследование активности фактора VIII (FVIII:C), исследование ристоцитин-кофакторной активности (VWF:RCo). Некоторое время назад появились сведения о том, что тест коллагенсвязывающей способности фактора Виллебранда (VWF:CBA) может оценить адгезивную активность фактора Виллебранда и его взаимодействие с субэндотелиальным коллагеном благодаря уникальной структуре строения. Данная методика применялась как альтернативный или дополнительный тест к исследованию VWF:RCo. За последние несколько лет проведены исследования, в результате которых стало известно, что при болезни Виллебранда VWF:CBA реагирует в ряде случаев быстрее других факторов свертывающей системы крови. Наряду с тестом VWF:CBA широкой популярностью обладает генетическое тестирование, которое оказывается информативным в некоторых клинических ситуациях, но далеко не всегда, поэтому роль его до конца не изучена. Ожидается, что по мере дальнейшего изучения болезни Виллебранда и собственно самого фактора Виллебранда произойдет очередной скачок в диагностике и лечении такого уникального явления, открытого в 1926 г. Эриком фон Виллебрандом.

Сапаркина М. В., Колосков А. В., Филиппова О. И., Столица А.А. Нарушение функции тромбоцитов, как причина геморрагического диатеза у женщин. Medline.ru. Российский биомедицинский журнал. 2012;13(3):841–52.

Болезнь Виллебранда | Интернет-издание «Новости медицины и фармации»

В 1926 году в Хельсинки профессор Эрик фон Виллебранд (E.А. von Willebrand, 1926) опубликовал свою первую работу о наследственной форме повышенной кровоточивости, которую он наблюдал у нескольких членов семьи с Foglo. Из геморрагических проявлений у них преобладали: носовые, десневые, луночные кровотечения, меноррагии, повышенная кровоточивость из мелких ранок, кровоизлияния в суставы наблюдались сравнительно редко. В настоящее время известно, что заболевание обусловлено различными количественными и качественными дефектами синтеза фактора Виллебранда (FW), который выполняет в системе гемостаза две основные функции: инициирует адгезию тромбоцитов к поврежденной стенке сосуда и стабилизирует циркулирующий фактор свертывания VIII (фVIII) за счет комплексообразования с ним.

Установлено, что ген, контролирующий синтез FW, расположен на коротком плече 12-й хромосомы. Соответствующая информационная РНК состоит из 8500–9000 нуклеотидов и кодирует полипептидную цепь из 2813 аминокислотных остатков, которая представляет собой белок-предшественник FW, пре- проFW, подвергающийся в эндоплазматическом ретикулуме первоначальной гликолизации и димеризации. Затем отщепляется сигнальный пептид из 22 аминокислотных остатков с образованием проFW. Последующие гликолизация, сульфатация и мультимеризация FW происходят в аппарате Гольджи. Прополипептид, состоящий из 741 аминокислотного остатка, также известный как антиген II FW, отщепляется от аминоконца полипептидной цепи, способствуя мультимеризации, с образованием зрелой молекулы, которая содержит 2050 аминокислотных остатков. FW синтезируется в клетках сосудистого эндотелия и в мегакариоцитах. Белок, синтезируемый эндотелиальными клетками, хранится в так называемых тельцах Weible — Palade и высвобождается в плазму и субэндотелий. 75–85 % всего циркулирующего FW — эндотелиального происхождения, 15–25 % происходит из мегакариоцитов и хранится в агранулах циркулирующих тромбоцитов.

Фактор Виллебранда выполняет две основные функции в нормальном гемостазе: является кофактором адгезии тромбоцитов к поврежденной стенке сосуда и их агрегации и служит белком-носителем для прокоагулянта — фVIII. Особенно важна роль фактора Виллебранда в адгезии и агрегации тромбоцитов при высоком напряжении сдвига крови (при повреждении мелких артерий и артериол). В реакциях сосудисто-тромбоцитарного взаимодействия участвует фактор Виллебранда, находящийся в плазме, а также высвобождающийся из эндотелия и секретируемый тромбоцитами. В результате связывания фактора Виллебранда с рецептором тромбоцитов GPlb происходит их активация и агрегация.

Тромбоцитарный рецептор GPIIb/IIIa, который открывается после активации тромбоцитов, играет важную роль в последующих тромбоцитарных реакциях. GPIIb/IIIa имеет сайт для связывания с тетрапептидом адгезивных протеинов: фибриногена, фибронектина, фактора Виллебранда. Локальное высвобождение фактора Виллебранда из эндотелиальных клеток и тромбоцитов может создавать высокую концентрацию протеина, состоящего главным образом из больших мультимеров, которые имеют наибольшее сродство к GPIIb/IIIa. Тромбоцитарный фактор Виллебранда, высвобождающийся из активированных кровяных пластинок, имеет большое значение в их агрегации.

Фактор Виллебранда является белком-носителем фVIII в плазме и защищает этот очень лабильный протеин от расщепления. Он не только стабилизирует фVIII в циркуляции, но, по-видимому, способствует увеличению его секреции. Вероятно, этим можно объяснить вторичное повышение фVIII после инфузий концентратов фактора Виллебранда больным с тяжелой формой болезни Виллебранда, тип 3.

Классификация болезни Виллебранда

В зависимости от характера нарушений фактора Виллебранда выделяют три основных типа болезни Виллебранда:

— тип 1 — частичный количественный дефицит фактора Виллебранда;

— тип 2 — качественные изменения структуры и функции фактора Виллебранда. Существует около 20 подтипов, важнейшие из них — 2А, 2В, 2М, 2N;

— тип 3 — полное отсутствие фактора Виллебранда.

Каждой из этих категорий соответствуют определенные патофизиологические механизмы, которые в значительной степени коррелируют с клиническими особенностями и терапевтическими требованиями.

Болезнь Виллебранда, тип 1

Тип 1 болезни Виллебранда отмечается у 70–80 % пациентов, имеет аутосомно-доминантный тип наследования. Для этого типа характерен частичный дефицит протеина фактора Виллебранда (его уровень в плазме составляет < 50 % нормы), в результате чего нарушается свертываемость крови и увеличивается длительность кровотечения. При этом структура и функция протеина не нарушается. В рамках типа 1 выделяют 3 подтипа болезни в зависимости от количества и функциональной активности тромбоцитарного FW. Тип 1 platelet normal — нормальное содержание и функциональная активность тромбоцитарного FW. Тип 1 platelet low — снижено содержание FW в тромбоцитах, их функциональная активность не нарушена. Тип 1 platelet discordant — нормальный уровень тромбоцитарного FW, но его функциональная активность снижена.

Для лечения болезни Виллебранда 1-го типа наиболее эффективен десмопрессин. Он стимулирует высвобождение в кровоток FW, участвующего в формировании кровяных сгустков для остановки кровотечения. Десмопрессин доступен в виде высококонцентрированного назального спрея или раствора для инъекций.

Пациентам с 1-м типом болезни Виллебранда, у которых десмопрессин не оказывает эффекта, рекомендуется заместительная терапия концентратом FW. Заместительная терапия необходима в случае тяжелого кровотечения или перед операцией, с целью предотвращения кровотечения.

В настоящее время одобренным для использования при болезни Виллебранда является только плазменный концентрат фактора VIII, в котором содержится FW.

Болезнь Виллебранда, тип 2А

Тип 2А встречается примерно у 15–30 % людей с болезнью Виллебранда и характеризуется отсутствием гемостатически активных больших мультимеров FW в плазме и тромбоцитах, вследствие чего нарушается процесс адгезии тромбоцитов при высоком напряжении сдвига крови (при повреждении мелких артерий и артериол), кофактором которой является FW. Возможны доминантный и рецессивный типы наследования этой формы заболевания. Доминантный вариант наследования типа 2А — наиболее часто встречающаяся форма.

Для лечения применяется десмопрессин, но он эффективен не у всех пациентов с болезнью Виллебранда типа 2А. Как уже указывалось выше, он стимулирует высвобождение в кровоток FW, участвующего в формировании кровяных сгустков для остановки кровотечения. Однако пациенты с болезнью Виллебранда типа 2А имеют неполные протеины FW в результате недостатка мультимеров HMWM. Десмопрессин должен быть протестирован перед его использованием для лечения кровотечения. Побочные эффекты десмопрессина включают покраснение лица, головную боль и изменения артериального давления. Он также может вызывать задержку воды в организме. При слишком частом использовании десмопрессин может оказаться неэффективным. По этим причинам пациентам нужно рекомендовать уменьшить объем потребляемой жидкости и кратность применения десмопрессина до одной дозы в день.

Для людей с типом 2А болезни Виллебранда альтернативой лечения перед хирургической операцией или при серьезном кровотечении является заместительная терапия концентратом плазменного фактора VIII, который содержит фактор Виллебранда и обработан с удалением определенных вирусов.

Болезнь Виллебранда, тип 2B

Тип 2В обусловлен мутациями в домене А1 FW, который содержит сайт связывания FW с гликопротеином 1b тромбоцитов. Характеризуется повышенной аффинностью мутантных форм FW к тромбоцитарному рецептору GPlb. Очевидно, это является причиной связывания больших мультимеров FW с тромбоцитами in vivo, что ведет к снижению количества и тех и других. Высокомолекулярных мультимеров в плазме обычно нет, их можно обнаружить лишь в тромбоцитах и эндотелиальных клетках. Оставшиеся в плазме мультимеры не обладают полноценным гемостатическим эффектом, поэтому пациенты страдают повышенной кровоточивостью.

Тип 2В наблюдается примерно у 15–30 % людей с болезнью Виллебранда и наследуется как доминантный признак. При данном типе может наблюдаться транзиторная тромбоцитопения, усиливающаяся при оперативных вмешательствах, беременности и лечении синтетическим аналогом вазопрессина DDAVP. При неправильном диагностировании тип 2В может быть расценен как аутоиммунная тромбоцитопения.

Лечение. Заместительная терапия концентратом плазменного фактора VIII, который содержит фактор Виллебранда, является выбором лечения для пациентов с типом 2В.

Десмопрессин обычно не рекомендуется людям с типом 2В, так как может привести к чрезмерному образованию сгустков, дефициту тромбоцитов или, возможно, ухудшит симптомы кровотечения. Однако, по данным некоторых исследований, в отдельных случаях при типе 2В десмопрессин может быть эффективен.

Тип 2М обусловлен мутацией, которая локализуется внутри домена А1 и нарушает связь FW с тромбоцитарным гликопротеином 1b. Мультимерная структура протеина не нарушена.

Тип 2N характеризуется нормальными уровнем и мультимерной структурой фактора Виллебранда, но низкой активностью фVIII в плазме, ниже 25 %. Заболевание часто протекает под видом легкой формы гемофилии А, но наследуется не как рецессивный, сцепленный с X-хромосомой, а как аутосомно-доминантный признак. Низкий уровень фVIII вызван укорочением его периода полураспада в плазме, так как нарушена связь фVIII с FW. Распространенность типа 2N точно не известна, так как некоторые случаи заболевания диагностируются как легкая форма гемофилии А.

Болезнь Виллебранда, тип 3

Тип 3 болезни Виллебранда — самая редкая форма, затрагивающая только 1 или 2 человек на миллион. При типе 3 болезни Виллебранда кровь не свертывается правильно из-за того, что имеется почти полный дефицит протеина FW. Люди с типом 3 болезни могут также иметь недостаток другого важного протеина крови, известного как фактор VIII. Дефицит фактора VIII является причиной гемофилии А.

Тип 3 болезни Виллебранда обусловлен нарушением биосинтеза FW и характеризуется практически полным его отсутствием в плазме и тромбоцитах. Наследуется тип 3 по аутосомно-рецессивному пути и проявляется только у гомозигот с одинаковыми мутантными аллелями или двойных (смешанных) гетерозигот с двумя различными мутантными аллелями. Больные имеют одинаковые (гомозиготы) или различные (гетерозиготы) повреждения обоих аллелей. Уровень фVIII обычно < 10 %, редко может быть < 1 %, при этом возможны спонтанные гемартрозы и кровоизлияния в мягкие ткани. Родственники больных, являющиеся гетерозиготами, могут иметь нормальный или умерено сниженный уровень FW. В большинстве случаев у гетерозигот нет клинической симптоматики, но у отдельных лиц возможны незначительные проявления кровоточивости. Патофизиология типа 3 принципиально не отличается от патофизиологии типа 1 болезни Виллебранда, так как оба они относятся к формам с количественным дефицитом FW. Однако тип 3 выделен в отдельную категорию, потому что симптомы заболевания очень тяжелые и применяемая больным терапия существенно отличается от таковой при типе 1 болезни Виллебранда. В 7,5–9,5 % случаев у больных типом 3 могут появляться аллоантитела к FW. При их появлении терапия препаратами плазмы, содержащими FW, становится неэффективной.

Клинические проявления болезни Виллебранда

Носовые кровотечения, меноррагии, кровотечения из слизистых полости рта, легкое образование синяков, кровотечения после удаления зубов и послеоперационные считаются самыми частыми симптомами болезни Виллебранда. Желудочно-кишечные кровотечения встречаются относительно редко и могут быть связаны с ангиодисплазией. Более половины пациентов в слаборазвитых странах имеют гемартрозы и гематомы, подобно больным гемофилией. Проявления кровоточивости обычно варьируют от легких до средней степени тяжести, но иногда бывают опасными для жизни, особенно у больных с типом 3 и у некоторых пациентов с типом 2 болезни Виллебранда. Симптомы и тяжесть течения могут быть различными у членов одной семьи и меняются в разное время у одних и тех же людей.

Аутосомный тип наследования предполагает одинаковую частоту генной трансмиссии у пациентов обоих полов, но физиологические состояния женского организма, такие как menses, беременность, роды, способствуют более частому проявлению симптомов повышенной кровоточивости среди женщин. По данным различных исследований, женщины составляют примерно 60 % пациентов с болезнью Виллебранда.

Около 65 % женщин с болезнью Виллебранда страдают меноррагиями, кровопотеря составляет > 80 мл за менструальный цикл. Женщины с меноррагиями в контрольной группе составляют 9–14 %.

В период беременности уровни факторов VIII и Виллебранда значительно повышаются, поэтому вероятность кровотечений у пациенток без сопутствующей гинекологической патологии довольно низка. Опасность развития маточных кровотечений особенно высока у женщин со спонтанными выкидышами и медицинскими абортами в первом триместре беременности, когда уровни факторов VIII и Виллебранда еще довольно низки. Роды у женщин с болезнью Виллебранда связаны со значительной кровопотерей. У большинства больных, исключая пациенток с типом 3, уровни факторов VIII и Виллебранда в течение беременности повышаются. Содержание этих факторов составляет > 50 %, и риск геморрагии в родах невысокий. После родов концентрации факторов VIII и Виллебранда максимально снижаются в течение нескольких (5–7) дней, у некоторых до 3 недель, и риск массивных кровотечений возрастает, по данным разных авторов, до 20–25 %. Поэтому пациенткам с болезнью Виллебранда рекомендуется наблюдаться у врача в течение 3 недель после родов. Тромбоцитопения в период беременности может встречаться при типе 2В болезни Виллебранда. Осложнения в виде маточных кровотечений могут быть предотвращены путем профилактического введения концентратов факторов VIII и Виллебранда или десмопрессина в инъекционной форме (введение последнего противопоказано при типе 2В).

Лечение. Заместительная терапия концентратом FW — первый выбор лечения для пациентов с типом 3 болезни Виллебранда. Предпочтительным типом концентрата FW является плазменный концентрат фактора VIII, в котором содержится фактор Виллебранда.

Диагностика болезни Виллебранда

Диагностика болезни Виллебранда базируется на изучении семейного анамнеза, клинических проявлений, результатов лабораторных исследований и молекулярно-генетических аспектов.

Лабораторная диагностика болезни Виллебранда включает следующие тесты: длительность кровотечения по Айви (или в модификации Шитиковой), фактор VIII — коагуляционная активность фVIII в плазме, антиген FW (плазменный антиген FW), ристоцетин-кофакторная активность (функциональная активность FW в плазме, плазма пациента и смесь нормальных тромбоцитов), РЦПА — ристоцитининдуцированная активность тромбоцитов (функциональная активность FW, связанная с тромбоцитами больного), мультимерный анализ. Мультимерный анализ необходимо проводить только после установления диагноза болезни Виллебранда. При обследовании больных необходимо учитывать, что очень многие негенетические факторы, такие как физическая нагрузка, стресс, инфекции, уровень гормонов (тиреоидные гормоны, эстрогены), повышают уровни FW, поэтому при пограничных показателях FW необходимо повторять обследования у пациентов с легкими формами заболевания. Также известно, что уровень фVIII и FW в плазме людей с группой крови 0(1) значительно ниже, чем с группами А(2) и В(3), этот факт надо учитывать при постановке диагноза больным с пограничными показателями фVIII и FW.

Примером болезни Виллебранда 3-го типа может быть заболевание ребенка, которого мы наблюдали на базе Хмельницкой областной детской больницы. Больная Л., 1995 г.р., находится под наблюдением врачей гематологического отделения областной детской больницы с 2001 г. Считает себя больной с раннего возраста, когда стали появляться синяки на коже туловища и конечностей. С 3 лет появились частые и обильные носовые кровотечения, а с 5-летнего возраста — гемартрозы правого голеностопного, затем правого плечевого суставов. В 2001 году лечилась в стационаре с диагнозом «дезагрегационная тромбоцитопатия». После лечения состояние девочки оставалось прежним, но родители за медицинской помощью не обращались. В 2005 году девочка обратилась к гематологу областной детской больницы с жалобами на частые носовые кровотечения, гемартрозы правого голеностопного и правого плечевого суставов. На основании увеличения времени кровотечения больше 9 мин, увеличения времени свертывания крови больше 12 мин, удлинения АЧТВ до 56,6 с (норма — до 32,6 с), нарушения потребления протромбина заподозрена болезнь Виллебранда. Тогда же девочка была направлена во Львовский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови, где на основании определения активности фактора Виллебранда, который был меньше 1 % (норма — 50–150 %), и определения активности фактора VIII — 6,64 % (норма — 60–100 %) был установлен диагноз болезни Виллебранда, тип 3.

С 2007 г. начались менструации, которые сразу же приняли характер меноррагий, продолжавшихся до 30–35 дней и сопровождавшихся развитием анемии. Больной проводилось лечение свежезамороженной плазмой, e-аминокапроновой кислотой. В результате лечения удавалось добиться лишь прекращения очередного маточного кровотечения.

В настоящее время девочка получает профилактическое введение плазменного концентрата фактора VIII, в котором содержится фактор Виллебранда. После назначения профилактического введения менструации стали регулярными — по 5 дней через 28 дней. Геморрагический диатез сохранялся в виде единичных синяков на коже. 

Болезнь Виллебранда — наследственный геморрагический диатез, характеризующийся увеличением времени кровотечения, дефицитом фактора VIII, снижением адгезивности тромбоцитов и аутосомным типом наследования. Заместительная терапия концентратом FW является терапией первой линии для пациентов с типом 3 болезни Виллебранда. Предпочтительным типом концентрата FW является плазменный концентрат фактора VIII, в котором содержится фактор Виллебранда.

Лечение болезни Виллебранда | Ведущие доктора | Лучшие клиники | Отзывы

Генетическое заболевание Виллебранда представляет собой патологию, характеризующуюся периодическими кровотечениями сходными с гемофилией, включая глазные кровотечения. Передается данное заболевание аутосомно-доминантным способом, т.е. по наследству. В чрезвычайно редких случаях заболевание может иметь приобретенный характер.

В офтальмологических клиниках Германии, Израиля, Австрии, США, Финляндии и Швейцарии пациентов, страдающих глазными кровотечениями, лечат довольно эффективно на основе восстановления свертываемости крови по фактору Виллебранда.

Очень важно понимать, что течение болезни может прогрессировать, а следовательно состояние больного будет ухудшатся, либо оставаться на прежнем уровне в течение какого-то времени, а потому лечение нужно начинать контролировать как только оно стало проявляться.

Преимущества лечения болезни Виллебранда за границей

Лечение болезни Виллебранда за рубежом в первую очередь направлено на нормализацию всех нарушенных гемостатических функций, включая трасфузионную терапию, введение гемпрепаратов с комплексом фактора VIII, в том числе фактора Виллебранда.

Эффективное медикаментозное лечение болезни Виллберанда за границей позволяет устранить, иногда только на время, глазные и  другие кровотечения, которые могут быть достаточно опасными. Все лечение направлено на максимально достижимый по длительности период нормализации при помощи инновационных методик, включая применение синтетического аналога вазопрессина.

Диагностика болезни Виллебранда за границей

Пациенты рекомендуемых нами клиник с частыми гемофильными кровотечениями подлежат полному и всестороннему обследованию, поскольку сама болезнь не имеет ярко выраженной симптоматики. Кроме того диагностика может быть весьма затруднена при отсутствии опытного гематолога или необходимого оборудования. Именно поэтому диагностику данного заболевания стоит проходить в нижеперечисленных киниках, которые качественно и точно проводят анализы крови с определением фактора Виллебранда, ристоцетина кофактора активности, VII фактора свертываемости крови, мультимеров фактора Виллебранда, а также тестирование функции тромбоцитов. Иногда при наличии болезни Виллебранда возникает необходимость также проводить обследование ближайших членов семьи.

Организация лечения болезни Виллебранда за границей

Если Вам необходимо качественное лечение и диагностика офтальмологических заболеваний за рубежом и в частности, если Вы хотите знать о лечении такой болезни как заболевание Виллебранда, то Вы попали в самое подходящее место!

Квалифицированные специалисты нашей компании окажут Вам помощь по выбору конкретного медицинского центра или доктора. Мы занимаемся планированием  и организацией поездок в клиники Германии, Израиля, Австрии, США, Финляндии и Швейцарии.

Сотрудничество с «Пациент Менеджмент» позволит вам сосредоточится на восстановлении собственного здоровья, не отвлекаясь на посторонние дела. А, как известно, выигранное время в лечении – это всегда лучшие шансы на полное выздоровление!

Болезнь Виллебранда у собак: причины, симптомы, диагностика, лечение и прогноз

Содержание статьи

Болезнь Виллебранда (ангиогемофилия) — нарушение свертываемости крови, которое характеризуется внезапными кровотечениями. Это наследственное поражение крови, обусловленное слабым фактором Виллебранда.

Этот фактор не что иное, как двухкомпонентный белок крови. Он выделяет эндотелиальные клетки разного размера, курсирующие в плазме крови. Этот белок склеивает тромбоциты и субэндотелиальные клетки в местах повреждения сосудов. Образуются сгустки, которые останавливают кровотечение.

Если этого белка мало или он малоактивен, такие сгустки не успевают сформироваться. Поэтому образуются кровотечения.

Причины

Болезнь возникает у кобелей и у сук. Главная причина возникновения синдрома Виллебранда — наследственность.

В 1996 году профессор Эрик Адольф фон Виллебранд обнаружил мутацию белка крови у собак. Этот белок был назван фактор Виллебранда. Именно он передается по наследству.

Заболевание развивается только при присутствии мутационного белка в крови. Он неспособен нормально вырабатывать клетки, нужные для образования сгустков.

Какие породы подвержены

Подвержены болезни:

• доберманы и пинчеры — в 60% случаев;
• шелти — 30%;
• шотландские терьеры — 10-15%.

У собак всех пород это распространенное заболевание. Но всего 54 породы склонны к данной патологии больше других. Известные породы:

• доберман;
• золотистый ретривер;
• немецкая овчарка;
• пинчер;
• ротвеллер;
• пудель;
• бассет-хаунд.

Симптомы

Главные симптомы — носовые и точечные подкожные кровоизлияния, превышение крови в моче, кровоточивость десен.

Симптомы похожи на признаки гемофилии, поэтому иногда синдром Виллебранда называют псевдогемофилией.

Интенсивность выделения крови зависит от степени заболевания, тяжести течения. При легкой форме истечения крови незначительные. При тяжелых сильные, вплоть до летального исхода.

В отдельных случаях синдром болезни проходит бессимптомно. Иногда всю жизнь у собаки нет признаков. И только при травме или хирургическом вмешательстве возникают длительные, непроходящие кровотечения.

Диагностика в ветклинике

Чтобы установить точный диагноз, проводится несколько исследований. Самое простое — тест на свертываемость крови. Для этого надрезается слизистая оболочка на губе. Однако данный тест может говорить и о других патологиях. Поэтому он не очень информативен.

Точная диагностика состоит в выявлении антител к белку. Также иногда проводится ДНК-тест, когда выявляется ген мутации фактора Виллебранда. Для этого нужна кровь и мазок изо рта.

Лечение и прогноз

Прогноз зависит от того, насколько нарушена свертываемость крови. Если отсутствуют травмы, значит, собака живет нормальной жизнью. Но незаметные и долгие кровотечения особенно опасны, например, в легких, мозге.

Лечение сводится к переливанию, если потеряно много крови. В других случаях вводится плазма с большим количеством белка перед операциями или после травмы.

Назначается десмопрессин ацетат, который продуцирует нужный белок. Также он помогает ослабить и уменьшить длительность кровотечения. Но у некоторых собак возникает непереносимость этого препарата.

При данном заболевании категорически нельзя использовать транквилизаторы, аспирин и другие разжижающие кровь препараты.

Что делать в домашних условиях

Дома создать такую обстановку, чтобы собака не могла травмироваться. Строго следить за этим на прогулке.

Если все-таки появилось капельное кровоизлияние, прикладывается бинт и немного сдавливается место кровотечения.

При сильном кровоизлиянии наложить давящую повязку и немедленно доставить собаку к ветеринару.

Всегда иметь в домашней аптечке плазму крови.

Возможные осложнения

Поскольку ангиогемофилия трудно диагностируемая болезнь, возникают осложнения.

Если патология не вовремя замечена, при травмах длительно выделяется кровь, что приводит к смерти. При хирургических манипуляциях возможно кровотечение в больших объемах. Хирург должен как можно скорее зашить сосуды.

Опасен синдром Виллебранда скрытыми кровоизлияниями. Особенно в мозге, легких.

Профилактика

Профилактика сводится к тому, чтобы оберегать питомца от возможных травм. Не делать плановых операций (купирование ушей и хвоста, кастрация).

Поскольку болезнь наследственная, не допускать к разведению больных собак. Обязательно узнавать у заводчиков здоровье щенка и родителей. Но каких-то конкретных мер профилактики провести невозможно.

Синдром Виллебранда трудно диагностируется, поэтому сложно предупреждается. Чем скорее обнаружена болезнь, тем лучше хозяин подготовлен к ее проявлениям.

Поэтому при любом внезапном кровотечении нужно животное показать ветеринару. Тогда будет известно, болезнь это или нет.

Интересные темы

ТРОМБОЗ ГЛУБОКИХ ВЕН У ПАЦИЕНТКИ С БОЛЕЗНЬЮ ВИЛЛЕБРАНДА | Елыкомов

1. Лихачева Е.А. Полянская Т.Ю., Зоренко В.Ю. Международный опыт диагностики и лечения болезни Виллебранда. Гематология и трансфузиология 2013;58(4):45–9. [Likhachyova E.A., Polyanskaya T.Yu., Zorenko V.Yu. International experience of diagnosis and treatment of von Willebrand disease. Gematologiya i transfuziologiya = Gematology and Transfusiology 2013;58(4):45–9. (In Russ.)].

2. Мамаев А.Н., Тимошенский В.И. Носовые кровотечения (основы патогенеза и дифференцированной терапии при геморрагических заболеваниях и синдромах). Тверь: Триада, 2007. [Mamaev A.N., Timoshenskiy V.I. Nosebleeds (the foundations of pathogenesis and differentiated therapy at hemorrhagic diseases and syndromes). Tver’: Triada, 2007. (In Russ.)].

3. Змачинский В.А. Диагностика и лечение болезни Виллебранда. Здравоохранение 2012;(4):66–8. [Zmachinskiy V.A. Diagnosis and treatment of von Willebrand disease. Zdravookhranenie = Health 2012;(4):66–8. (In Russ.)].

4. Girolami A., Tezza F., Scapin M. et al. Arterial and venous thrombosis in patients with von Villebrand disease: a critical review of the literature. J Thromb Thrombolysis 2006;21(2):175–8.

5. Franchini M., Krampera M., Veneri D. Deep venous thrombosis after orthopedic surgery in a patients with type 1 von Willebrand disease and mutations in the MTHFR and beta-fibrinogen genes. Thromb Haemost 2003;90(5):963–4.

6. Franchini M. Thrombotic complications in von Willebrand disease. Hematology 2006;11(1):49–52.

7. Mannucci P.M. Venous thromboembolism in von Willebrands disease. Thromb Haemost 2002;88(3):378–9.

8. Клинические рекомендации (протоколы лечения) «Профилактика тромбоэмболических синдромов». ГОСТ Р 56377–2015 (утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации от 31.03.2015 № 201-ст). М.: Стандартинформ, 2015. [Clinical recommendations (treatment protocols) “Prevention of thromboembolic syndromes”. GOST R 56377–2015 (approved and promulgated by Order of the Federal Agency for technical regulation and Metrology of the Russian Federation from 31.03.2015 No. 201st). Moscow: Standartinform, 2015. (In Russ.)].

9. Галстян Г.М., Васильев С.А., Галузяк В.С. и др. Тромбоэмболия легочной артерии при болезни Виллебранда. Терапевтический архив 2005;77(12):33–9. [Galstyan G.M., Vasil’ev S.A., Galuzyak V.S. at al. Thromboembolism of the pulmonary artery in von Willebrand disease. Terapevticheskiyarkhiv = Therapeutic Archive 2005;77(12): 33–9. (In Russ.)].

№AN7013VWD, Болезнь фон Виллебранда 1-го типа (von Willebrand Disease, vWD type I) для собак и кошек: показатели, норма

Cамое часто встречающиеся нарушение свёртываемости крови у собак. Это заболевание развивается при наличии дефицита в крови одного из факторов свертываемости – фактора Виллебранда, который представляет собой разноразмерный белок, синтезирующийся мегакариоцитами и эндотелиальными клетками. Он необходим для нормальной адгезии тромбоцитов на поврежденных стенках сосудов. Фактор Виллебранда также действует как переносчик фактора свертывания VIII (FVIII-C), обеспечивая стабильность FVIII-C в циркуляции, путём предотвращения протеазоопосредованной деградации. Болезнь фон Виллебранда типа 1 – аномально низкая концентрация структурно нормального фактора Виллебранда. Тип 1 – самый часто встречающийся (более 95% от всех случаев).

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Клинические признаки включают в себя: кровотечения на слизистых оболочках (кровоточивость десен, носовое кровотечение), гематурия. Возможны длительные кровотечения при купировании ушей, купировании хвоста, стрижке когтей. В большинстве случаев болезни фон Виллебранда у собак снижение активности фактора VIII-C является умеренным, результаты тестов на коагуляцию, таких как активированное частичное тромбопластиновое время и активированное время свертывания, будут находится в пределах нормы.

Породы: Австралийский лабрадудль (Коббердог), Австралийский терьер, Барбет, Бассет-хаунд, Бернедудель, Бернский зенненхунд (Бернская овчарка), Бразильский терьер, Вельш-корги кардиган, Вельш-корги пемброк, Вест-хайленд-уайт-терьер, Вольфшпиц (Кеесхонд), Голдендудль, Доберман, Дрентская куропаточная собака (Дрентский партийсхонд), Золотистый ретривер, Ирландский сеттер (красный и красно-белый), Кавапу, Керри-блю терьер, Кокапу, Котон-де-тулеар (Мадагаскарский бишон), Кромфорлендер, Лабродудль ориджинал, Мальтипу, Манчестер-терьер, Немецкая овчарка, Ньюфипу, Папийон, Пинчер (Немецкий пинчер), Пудель (все разновидности), Ротвейлер, Стабихун, Фален, Цвергпинчер, Цвергшнауцер.

Сроки исполнения: 16 рабочих дней (плюс 1-2 дня для регионов).

Исследуемый аналит: сухая кровь.

Метод исследования: —

Показания: выявить носителей заболевания с целью исключения из воспроизводства.

Противопоказания: не известны.

Подготовка пациента: не требуется.

Метод отбора: венепункция.

Преаналитика: после заполнения направительного бланка, к нему необходимо прикрепить копию родословной животного. При отсутствии родословной предоставляется копия метрики животного.

Порядок действий:

1. Подготовить чистую бумажную или марлевую салфетку, сложенную в несколько слоев (салфетка должна быть без пропиток и красителей).
2. Обработать участок кожи перед венепункцией перекисью водорода, затем спиртом. Подождать 1-2 минуты (для испарения спирта).
3. Набрать кровь из вены при помощи шприца (не менее 0,5 мл).
4. Положить заранее приготовленную салфетку на непромокаемый материал и, направив конец иглы в центр салфетки, медленно выпустить кровь до образования пятна диаметром 2-2,5 см.
5. Дождаться полного высыхания крови при комнатной температуре до формирования корки (1 час).
6. После высыхания сложить салфетку с пятном крови в бумажный конверт, подписать Ф.И.О. владельца и кличку животного.
7. Заполнить ВСЕ строки направительного бланка и указать код клиента!
8. Стабильность образца: не ограничена.
9. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃…+8℃ (синий пакет).

Интерпретация результата: —

Форма выдачи результата: —

Список источников:

1. Breed Predispositions to Disease in Dogs and Cats, 3rd Edition. by Alex Gough, Alison Thomas, Dan O’Neill January 2018;
2. Genetics and the Behavior of Domestic Animals, 2nd Edition. by Temple Grandin, Mark J. Deesing June 2013.

Ветеринарные гистологические исследования

В 1996 году ученые генетической лаборатории VetGen, США, в сотрудничестве с Университетом штата Мичиган, гордо объявили об открытии мутации, которая вызывает болезнь Виллебранда типа I у собак.

Болезнь Виллебранда типа I наиболее распространена у собак, порядка 95% всех случаем заболевания. Она характеризуется аномально низкой продукцией белка в крови, который называется фактором Виллебранда и играет ключевую роль в сложном процессе свёртывания, возникающем при повреждении кровеносного сосуда. Течение болезни Виллебранда типа I у собак, предрасположенных к этому заболеванию пород, происходит в лёгкой форме, в отличие от тяжёлой формы болезни Виллебранда типа III, которая встречается у шотландских терьеров и шотландских овчарок.

У собак, у которых встречается тяжёлая формы болезни, болезнь Виллебранда типа III, фактор Виллебранда вообще не обнаруживается в крови.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ТЕСТ РЕКОМЕНДОВАН

• для заводчиков породы
• для будущих владельцев породы
• для ветеринарных специалистов

Проведение ДНК теста позволяет принимать обоснованные решения по искоренению гена заболевания фон Виллебранда при разведении собак.

Болезнь фон Виллебранда (Von Willebrand’s Disease) является самым часто встречающимся нарушением свёртываемости у собак.

Это заболевание развивается при наличии в крови дефектного фактора Виллебранда или его дефицита в крови.

Фактор Виллебранда, это крупный мультимерный (разноразмерный) белок, синтезирующийся эндотелиальными клетками и мегакариоцитами. Фактор Виллебранда необходим для нормальной адгезии тромбоцитов. Мультимеры фактора Виллебранда разного размера (мелкие, средние и крупные) циркулируют в плазме. Самые крупные мультимеры белка гемостатически наиболее активны и первыми откладываются в тельцах Вейбеля-Палада в эндотелиальных клетках сосудов. Фактор Виллебранда также действует как переносчик фактора свертывания VIII (FVIII-C), обеспечивая стабильность FVIII-C в циркуляции путём предотвращения протеазоопосредованной деградации.

Болезнь фон Виллебранда делится на 3 типа на основании наличия качественных или количественных дефектов фактора Виллебранда.

Болезнь фон Виллебранда типа 1 объединяет пациентов, у которых наблюдается аномально низкие концентрации структурно нормального фактора Виллебранда. Это самый часто встречающийся тип болезни фон Виллебранда у собак (более 95% от всех случаев).

Тип 2 объединяет пациентов со структурным нарушением фактора Виллебранда. Тип 2 редко встречается у собак.

Тип 3 (который также часто называют «тяжелый тип 1») объединяет пациентов, у которых не обнаруживается Фактор Виллебранда. Этот тип также редко встречается у собак.

Практически все случаи болезни фон Виллебрандта у собак относятся к типу 1. Только у немецких короткошерстных пойнтеров и немецких жесткошерстных пойнтеров был описан тип 2. Болезнь фон Виллебранда 3 типа была описана у скотч-терьеров, шелти, голландских койкерхондье и чесапик бэй ретриверов.

Общие клинические признаки включают кровотечения на слизистой, изначально проявляющиеся как кровоточивость десен, носовое кровотечение, а также гематурия. Также частыми проявлениями являются длительное кровотечение при купировании хвоста, купировании ушей или стрижке когтей. Фактор Виллебранда циркулирует как комплекс с фактором VIII-C, белком, дефицит которого наблюдается при гемофилии A. Активность фактора VIII-C обычно сильно снижена при тяжёлых формах болезни фон Виллебранда, однако в большинстве случаев болезни фон Виллебранда у собак снижение активности фактора VIII-C является лёгким или умеренным, и результаты тестов на коагуляцию, таких как активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) и активированное время свертывания (АВС), находятся в пределах нормы. Поскольку Фактор Виллебранда важен при регуляции адгезии тромбоцитов к субэндотелиальным поверхностям, клиническая картина является классической для симптомов, наблюдаемых при тромбоцитарных заболеваниях (кровоизлияния на слизистой или коже).

Собак, у которых проявляется геморрагический диатез при отсутствии аномалий скрининговых тестов на коагуляцию или тромбоцитопении, следует тестировать на болезнь фон Виллебранда.

Болезнь фон Виллебрандта у различных пород собак

Порода собак

Свободны от носительства

Носители

Больные собаки

Бернский зенненхунд

84%

15%

1%

Доберман

28%

48%

24%

Манчестер-терьер

60%

36%

4%

Вельш-корги пемброк

59%

35%

6%

Независимая ветеринарная лаборатория ПОИСК предлагает генетический тест на болезнь фон Виллебранда 1 типа.

1. Окончательный результат исследования: Тест будет однозначно классифицировать собак предрасположенных пород на носителей, больных и свободных от мутации животных.
2. Тест проводится однократно: В лаборатории проводится исследование мутации ДНК, каждая собака должна быть проверена только один раз в своей жизни.
3. Простота при отборе материала и отправке: просто сделать мазок с внутренней стороны щеки собаки с помощью цитощетки. Соскоб нужно повторить дважды, затем цитощетку направить в лабораторию с курьером или почтой.

Материал для исследования: буккальный эпителий, а также кровь, отобранная в пробирку с К3ЭДТА.

Тест предназначен для собак следующих пород: бернский зенненхунд, котон де тулеар (мадагаскарский бишон), доберман пинчер, дрентская куропаточная собака, немецкий пинчер, керри-блю-терьер, манчестерский терьер, папильон, вельш корги пемброк, пудель, стабихун.

Тест однозначно определяет собак вышеуказанных пород как больных, носителей и здоровых. Хотя у носителей и проявляется некоторое снижение количества фактора Виллебранда в плазме, этого недостаточно, чтобы у собаки развивалась характерная клиническая картина. Также следует отметить, что статус «больной», полученный в результате проведения данного теста, означает, что у животного присутствует две мутантные аллели, но само заболевание клинически проявляется не всегда. В случае болезни Виллебранда 1 типа «больные» животные очевидно имеют риск развития заболевания, но у них могут наблюдаться, а могут и не наблюдаться, тяжелые случаи кровотечений.

Анализ подхода

, оценка уровня и функции vWF, времени кровотечения, PT и aPTT

Как мы ставим точный диагноз болезни фон Виллебранда

Основные моменты

•

Болезнь фон Виллебранда — распространенное аутосомно наследуемое геморрагическое заболевание.

•

Диагностика заболевания может быть сложным процессом, требующим нескольких шагов.

•

Положительный анамнез кровотечения у пациента является обязательным для начала лабораторных анализов.

•

Предоставляется алгоритм для диагностики заболевания с помощью лабораторных анализов.

•

Приведено описание генетических тестов, в основном ориентированных на качественные варианты.

Abstract

Болезнь фон Виллебранда (БВ) — распространенное аутосомно наследуемое геморрагическое заболевание, в основном связанное с кожно-слизистыми кровотечениями.БВ возникает из-за количественных (тип 1 и 3) или качественных (тип 2) дефектов фактора фон Виллебранда (VWF), большого мультимерного гликопротеина плазмы, который играет важную роль в гемостазе. VWF необходим для обеспечения адгезии и агрегации тромбоцитов в местах повреждения сосудов в условиях высокого напряжения сдвига. VWF также несет фактор свертывания крови VIII (FVIII), продлевая его период полужизни и концентрируя его на участке поврежденного эндотелия. Диагноз VWD, в соответствии с рекомендациями Международного общества по тромбозу и гемостазу, требует нескольких анализов, которые необходимы для оценки способности VWF взаимодействовать с несколькими лигандами, например.грамм. гликопротеин тромбоцитов Ibα, коллаген и FVIII. Таким образом, дифференциальная диагностика пациентов с БВ типа 1, 2A, 2B, 2M, 2N или 3 является прерогативой специализированных лабораторий, где обычно проводятся специальные тесты, такие как мультимерный анализ или индуцированная ристоцетином агглютинация тромбоцитов. С другой стороны, базовая идентификация пациентов с VWD в настоящее время возможна во многих лабораториях гемостаза благодаря доступности автоматизированных тестов, которые измеряют в плазме пациентов уровни антигена VWF и его тромбоцитозависимую активность.Тем не менее, лабораторное исследование на БВ у субъекта, направленного по поводу геморрагической тенденции, следует начинать только после того, как лечащий врач, после оценки его / ее личного и семейного анамнеза кровотечений, подтвердит подозрение на БВ. Цель этой рукописи — дать обзор сложного процесса, ведущего к диагностике БВ.

Ключевые слова

Фактор Виллерана

Болезнь фон Виллебранда

Диагноз

Хроническое заболевание

Острое кровотечение

Бремя болезни

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Просмотреть полный текст 90v210 © Else Ltd.Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

Собачья болезнь фон Виллебранда | Колледж ветеринарной медицины Корнельского университета

Доберман

1. Фон
2. Клинические признаки
3. Уход
4. Лабораторная диагностика
5. Рекомендации по наследованию и разведению
6. Сводки по породам

Фон

Болезнь фон Виллебранда (сокращенно vWD) — наследственное нарушение свертываемости крови, вызванное недостатком белка фактора фон Виллебранда (vWF).Этот белок циркулирует в кровотоке и должен присутствовать в месте повреждения кровеносного сосуда, чтобы контролировать кровотечение из этого сосуда. Болезнь фон Виллебранда — отдельное заболевание, это не гемофилия.

Классификация

Существует три варианта или формы vWD (типы 1,2,3), определяемые количеством и структурой плазменного фактора фон Виллебранда (сокращенно vWF) у пораженных собак. Внутри каждой породы преобладает одна форма vWD. Характерные биохимические и клинические данные были описаны для ряда пород с высокой распространенностью и / или тяжелыми формами vWD.

Клинические признаки

Клинические признаки vWD варьируются от легкой до тяжелой тенденции к кровотечениям.Собаки могут «нести» признак vWD, не проявляя тенденции к кровотечению. Тяжелая форма БВ вызывает спонтанное кровотечение из носа, рта, мочевыводящих, репродуктивных или кишечных трактов. После операции может возникнуть неконтролируемое кровотечение. Удаление Dewclaw и прорезывание зубов может вызвать чрезмерное кровотечение у щенков, пораженных vWD. Инфекции, эндокринные расстройства и прием некоторых лекарств могут усугубить признаки кровотечения у собак, страдающих vWD.

Шетландская овчарка, пораженная вирусом
тяжелая (тип 3) vWD

Сильный синяк по линии разреза после
овариогистерэктомия (стерилизация).Синяк произошел в
году.
несмотря на предоперационное переливание.

Уход

Лечение сильного кровотечения требует переливания продуктов собачьей крови. Нет никаких лекарств, витаминов, гормонов или диетических модификаций, которые могут вызвать выработку vWF. Кровотечение при незначительных травмах можно остановить с помощью швов, повязок или клея для ран. Больным собакам нельзя давать лекарства, которые нарушают нормальные механизмы свертывания крови. Эти препараты включают аспирин, антибиотики сульфатного типа и гепарин.

Лабораторная диагностика

Лабораторная диагностика vWD чаще всего основана на результатах анализа антигена фактора фон Виллебранда (сокращенно vWF: Ag). Этот тест измеряет количество или концентрацию vWF в образце крови. Раздел сравнительной коагуляции сообщает результат каждой собаки как% vWF: Ag по сравнению со 100% стандартом. Собаки с низким vWF: Ag в плазме (ниже 50%) подвержены риску передачи или выражения признака vWD. В целом, у собак с наиболее тяжелым поражением наблюдается заметное снижение плазменного vWF: Ag со значениями менее 15%.

Методы, используемые для отбора, обработки и отправки образцов, важны для получения точных результатов. Образцы, содержащие сгустки или гемолиз (разрушение эритроцитов), с наибольшей вероятностью дадут неточные или невоспроизводимые результаты. Использование стандартной техники отбора проб обеспечивает оптимальное качество пробы.

У нормальных здоровых собак уровни vWF в плазме колеблются изо дня в день. Это колебание усиливается во время беременности или течки у сук, а также у любой собаки, страдающей системным заболеванием (особенно заболеванием печени или воспалительными заболеваниями).Исходные значения vWF: Ag являются более точными генетическими предикторами статуса vWD, поэтому образцы для генетического скрининга следует брать от здоровых собак и сук, не беременных или не охваченных течкой. Щенков можно брать в возрасте от 6 до 8 недель.

Диагностические диапазоны vWF: Ag используются для идентификации собак, пораженных vWD, и в качестве вспомогательного средства для прогнозирования генетического статуса признака vWD у бессимптомных собак.

Считается, что у собак, проходящих тестирование в нормальном диапазоне, отсутствует признак vWD, и они имеют низкий риск выражения или передачи vWD.

Собаки, находящиеся в пограничном диапазоне, не могут быть точно классифицированы как носители или чистые на основе этого измерения. Это область перекрытия плазменного vWF: Ag, где некоторые люди светлые, а некоторые носители vWD. Во втором тесте некоторые собаки попадают в нормальный или ненормальный диапазон, что позволяет предсказать их генетический статус. Тестовая вязка может быть проведена путем вязки собаки пограничного ареала с хорошо тестируемым чистым партнером. Если пограничный родитель чист от vWD, то предполагается, что все щенки в помете будут чистыми.Наличие 1 или более щенков аномального ареала указывает на то, что пограничный родитель является носителем vWD. Ожидается, что собаки, проходящие тестирование в пограничном диапазоне, не будут иметь склонности к кровотечениям. Они не нуждаются в ограничении деятельности или особом управлении.

Собаки, проходящие тестирование в аномальном диапазоне, считаются носителями признака vWD. Они подвержены риску передачи аномального гена vWF потомству, а некоторые из них проявляют склонность к кровотечениям. Собаки, пораженные наиболее тяжелой формой vWD (vWD типа 3), имеют очень низкие значения vWF: Ag (1% или меньше).Собаки с тяжелыми заболеваниями не должны подвергаться хирургическим вмешательствам без переливания крови.

Наследование

Паттерны наследования и экспрессии vWD различаются между породами. Все самцы и самки имеют 2 гена vWF, один унаследован от матери, а другой — от отца. У многих пород присутствие 1 аномального гена vWF оказывается достаточным, чтобы вызвать аномальное кровотечение у некоторых (но не у всех) собак. Собаки, имеющие 2 аномальных гена, экспрессируют самые тяжелые формы vWD.

Рекомендации по разведению. Используйте диагностические диапазоны vWD в качестве руководства для снижения распространенности vWD в семье или линии, не дискриминируя всех собак этой линии.Скрининг на vWD гарантирует, что не родятся сильно пораженные щенки.

Собаки, у которых тест находится в нормальном диапазоне (vWF: Ag более 70%), идеально подходят для использования в программах разведения. Предполагается, что от вязок между двумя родителями, чистыми от vWD, будут рождены только чистые щенки с vWD. Тестирование потомства (тестирование родителей и всего помета) полезно для подтверждения прогнозируемого генетического статуса на основе одного значения vWF: Ag. Тестирование потомства может помочь прояснить статус родителя пограничного ареала.

В некоторых случаях собаки, которые тестируются в аномальном диапазоне vWD (при условии, что они не проявляют склонности к кровотечениям), также могут использоваться для разведения.Носителей следует разводить с чистыми потомками и, в идеале, с подтвержденными потомками. Некоторые щенки в этих вязках будут в нормальном диапазоне. При увеличении числа спариваний от ясных до чистых в последующих поколениях доля носителей vWD в линии будет постепенно уменьшаться без потери желаемых признаков. Спаривание носителя с носителем нежелательно, потому что эти скрещивания, вероятно, приводят к наиболее тяжелой форме vWD у потомства. Не разводите собак с аномальными или чрезмерными кровотечениями.

Сводки по породам

Бернский зенненхунд

Доберман

немецкая овчарка

золотистый ретривер

Лабрадор ретривер

Болезнь фон Виллебранда: симптомы, причины, лечение

Обзор

Что такое болезнь фон Виллебранда?

Болезнь фон Виллебранда (БВ) — это нарушение свертываемости крови, при котором кровь плохо свертывается.Он передается по наследству, то есть передается от родителей к их детям.

Люди с болезнью фон Виллебранда иногда испытывают более сильное, чем обычно, кровотечение в результате травмы, хирургического вмешательства, а у женщин — менструального цикла и родов. Это кровотечение может вызвать проблемы со здоровьем, включая боль и анемию (низкое количество эритроцитов). В редких случаях кровотечение может привести к летальному исходу.

Насколько распространена болезнь фон Виллебранда?

Болезнь фон Виллебранда — наиболее распространенный тип нарушения свертываемости крови в США.S. Это похоже на другое заболевание крови, называемое гемофилией, хотя обычно оно менее тяжелое, чем гемофилия. Болезнь фон Виллебранда поражает 1% населения США. Встречается как у мужчин, так и у женщин.

Симптомы и причины

Что вызывает болезнь фон Виллебранда?

Проблемы с белком в крови вызывают болезнь фон Виллебранда.Этот белок, известный как фактор фон Виллебранда (VWF), помогает свертыванию крови.

В некоторых случаях в крови слишком мало VWF. В других случаях белок имеет дефект. В обоих этих сценариях нарушается способность крови к правильному свертыванию. Множество генных мутаций вызывают либо снижение продукции VWF, либо образование аномально функционирующего VWF. Хотя причина этих мутаций неизвестна, аномальный ген передается от одного поколения к другому.

Каковы симптомы болезни фон Виллебранда?

У многих людей с болезнью фон Виллебранда заболевание протекает в легкой форме и протекает бессимптомно.Симптомы в более тяжелых случаях включают:

• Сильное кровотечение после травмы или операции
• Легкие синяки
• Частые носовые кровотечения
• Обильные менструальные кровотечения у женщин
• Длительное кровотечение десен после стоматологического вмешательства
• Кровь в стуле или моче

Диагностика и тесты

Как врачи диагностируют болезнь фон Виллебранда?

Чтобы диагностировать болезнь фон Виллебранда, ваш врач спросит о вашем семейном анамнезе, чтобы узнать, есть ли у кого-либо из родственников нарушения свертываемости крови.Анализы крови подтверждают диагноз болезни фон Виллебранда. Один тест проверяет уровень и активность фактора фон Виллебранда (VWF) в крови. Ваш врач может также проверить вашу кровь, чтобы измерить время свертывания и функцию тромбоцитов.

Люди обычно сдают один и тот же анализ крови несколько раз, чтобы подтвердить болезнь фон Виллебранда. Врачи часто проводят повторные тесты, потому что уровни VWF в крови могут изменяться в зависимости от различных факторов, включая уровни гормонов.

Какие бывают типы болезни фон Виллебранда?

Врачи подразделяют болезнь фон Виллебранда на 3 основных типа.Иногда требуется сложное лабораторное тестирование, чтобы определить тип дефекта VWF, который у вас есть, что затем позволяет классифицировать тип VWD:

• Тип 1: Люди с этим типом имеют низкий уровень VWF в крови. Это наиболее распространенный тип болезни Виллебранда. Большинство людей с типом 1 испытывают легкие симптомы кровотечения или совсем не испытывают их.
• Тип 2: В этом типе VWF имеет дефект, из-за которого он не может работать должным образом. Симптомы кровотечения могут быть легкими или умеренными.
• Тип 3: Самый тяжелый и редкий тип болезни фон Виллебранда. Люди с этим типом обычно не имеют VWF или имеют очень небольшое количество VWF. Симптомы могут быть серьезными, но ваш врач может помочь с ними справиться.

Ведение и лечение

Какие общие методы лечения болезни фон Виллебранда?

Лечение болезни фон Виллебранда зависит от тяжести состояния.Всякое лечение направлено на предотвращение эпизодов чрезмерного кровотечения. Врачи используют несколько подходов к лечению этого состояния. В их числе:

• Десмопрессин: Врачи прописывают этот гормон для повышения уровня фактора фон Виллебранда (VWF) в крови. Его вводят в вену или вдыхают через нос. Эта терапия является наиболее распространенным методом лечения болезни Виллебранда.
• Инфузии VWF: В зависимости от типа болезни фон Виллебранда инфузии VWF необходимы при эпизодах кровотечения и, чаще, при хирургических вмешательствах.Некоторые пациенты с тяжелыми формами болезни фон Виллебранда получают регулярные инфузии VWF или профилактическую терапию для поддержания нормального уровня белка VWF в крови.
• Антифибринолитики: Эти препараты предотвращают разрушение тромбов. Иногда врачи назначают их перед стоматологическим лечением и женщинам с обильным менструальным кровотечением.
• Противозачаточные таблетки: Содержание эстрогена в этих таблетках вызывает повышение уровня VWF в крови и, таким образом, обеспечивает некоторую защиту у женщин с обильным менструальным кровотечением.Эстрогеновая терапия не подходит мужчинам с болезнью Виллебранда.

Каковы общие осложнения или побочные эффекты болезни фон Виллебранда?

Женщины чаще, чем мужчины, испытывают осложнения от болезни фон Виллебранда. Аномальное кровотечение может вызвать проблемы с менструальным циклом и после родов.

Люди с тяжелой болезнью фон Виллебранда (тип 3) могут испытывать сильную боль и отек, если кровотечение происходит в их суставах или мягких тканях.В крайних случаях без лечения обильное кровотечение может привести к летальному исходу.

Профилактика

Можно ли предотвратить болезнь фон Виллебранда?

Поскольку болезнь фон Виллебранда обычно передается по наследству, ее нельзя предотвратить.

Перспективы / Прогноз

Каковы перспективы для людей с болезнью фон Виллебранда?

Болезнь фон Виллебранда — это пожизненное заболевание.Большинству людей, страдающих этим заболеванием, это не мешает вести активный образ жизни. Обычно ее нужно решать только после серьезной травмы или если вам нужна операция.

Лечение при необходимости и регулярное посещение врача — лучший способ убедиться, что болезнь фон Виллебранда не мешает вести здоровый образ жизни.

Жить с

Когда мне следует вызвать врача?

Обратитесь к врачу, если у вас длительное кровотечение или кровотечение, которое трудно остановить.Женщинам с болезнью фон Виллебранда следует поговорить со своим врачом при рассмотрении вопроса о беременности. Ваш врач может порекомендовать меры предосторожности, чтобы снизить риск осложнений.

Диагностика болезни фон Виллебранда | HOA

Ранняя диагностика болезни фон Виллебранда (VWD) важна для того, чтобы убедиться, что вы лечитесь и можете жить нормальной активной жизнью.

Иногда БВ диагностировать сложно. Люди с БВ 1 или 2 типа могут не иметь серьезных проблем с кровотечением.Таким образом, они не могут быть диагностированы, если у них нет сильного кровотечения после операции или какой-либо другой травмы.

С другой стороны, БВ 3-го типа может вызывать серьезные проблемы с кровотечением в младенчестве и детстве. Итак, детям с БВ 3-го типа обычно ставят диагноз в течение первого года жизни.

Чтобы узнать, есть ли у вас VWD, ваш врач изучит вашу историю болезни и результаты медицинского осмотра и анализов.

История болезни

Ваш врач, скорее всего, задаст вопросы о вашей истории болезни и истории болезни вашей семьи.Он может спросить о:

• Любое кровотечение из небольшой раны, которое длилось более 15 минут или возобновилось в течение первых 7 дней после травмы.
• Любое продолжительное, сильное или повторяющееся кровотечение, потребовавшее медицинской помощи после операции или удаления зубов.
• Любой синяк с незначительной травмой или без видимой травмы, особенно если вы можете почувствовать шишку под синяком.
• Любое носовое кровотечение, возникшее по неизвестной причине и продолжающееся более 10 минут, несмотря на давление на нос, или любое носовое кровотечение, требующее медицинской помощи.
• Кровь в стуле по неизвестной причине.
• Любое обильное менструальное кровотечение (для женщин). Это кровотечение обычно сопровождается образованием сгустков или длится более 7-10 дней.
• Любые мышечные или суставные кровотечения в анамнезе.
• Любые принимаемые вами лекарства, которые могут вызвать кровотечение или увеличить риск кровотечения. Примеры включают аспирин и другие нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП), клопидогрель, варфарин или гепарин.
• Любая история болезни печени или почек, болезни крови или костного мозга, а также повышенного или пониженного количества тромбоцитов в крови.

Физический экзамен

Ваш врач проведет медицинский осмотр на предмет необычных синяков или других признаков недавнего кровотечения. Он или она также будет искать признаки заболевания печени или анемии (низкое количество эритроцитов).

Диагностические тесты

Ни один тест не может диагностировать БВ. Ваш врач может порекомендовать один или несколько анализов крови для диагностики заболевания. Эти тесты могут включать:

• Антиген фактора фон Виллебранда. Этот тест измеряет количество фактора фон Виллебранда в вашей крови.
• Активность кофактора фактора фон Виллебранда ристоцетина (ris-to-SEE-tin). Этот тест показывает, насколько хорошо работает ваш фактор фон Виллебранда.
• Фактор VIII свертывающая активность. Этот тест проверяет свертывающую активность фактора VIII. У некоторых людей с БВ уровень активности фактора VIII низкий, у других — нормальный.
• Мультимеры фактора фон Виллебранда. Этот тест выполняется, если один или несколько из первых трех тестов не соответствуют норме. Он показывает структуру вашего фактора фон Виллебранда.Этот тест помогает вашему врачу определить, какой у вас тип VWD.
• Тест функции тромбоцитов. Этот тест определяет, насколько хорошо работают ваши тромбоциты.

Вы можете пройти эти тесты несколько раз, чтобы подтвердить диагноз. Ваш врач также может направить вас к гематологу для подтверждения диагноза и последующего лечения. Гематолог — это врач, специализирующийся на диагностике и лечении заболеваний крови.

Источник: Национальный институт сердца, легких и крови, Национальные институты здравоохранения.

Лабораторная диагностика болезни фон Виллебранда

Обзор

Болезнь фон Виллебранда (VWD) — это нарушение свертываемости крови, вызванное либо количественными (тип 1 и 3), либо качественными (тип 2) дефектами фактора фон Виллебранда (VWF). Ни один из доступных тестов не дает соответствующей информации о различных функциях VWF, а лабораторный диагноз VWD основан на группе тестов, включая измерение коагулянтной активности фактора VIII (FVIIIC), уровней антигена VWF (VWF: Ag), VWF. активность, измеренная с помощью активности кофактора ристоцетина (VWF: RCo), коллаген-связывающей активности VWF (VWF: CB), мультимерного анализа VWF, индуцированной ристоцетином агглютинации тромбоцитов (RIPA), анализа связывания фактора VIII уровни пропептидов VWF и VWF в плазме.Из-за неоднородности дефектов VWF и переменных, влияющих на уровни VWF, правильная диагностика типов и подтипов иногда может быть затруднена, но это очень важно для терапии. Кроме того, анализ RCo и тест RIPA основаны на агглютинации тромбоцитов в реакции с нефизиологическим антибиотиком ристоцетином. Эти тесты также имеют низкую чувствительность и их трудно стандартизировать. Следовательно, для диагностики БВ требуется несколько анализов (тестов), и важно знать, каким подводным камням подвергаются эти тесты с точки зрения диагноза.В этой статье лабораторная диагностика пациентов с БВ типа 1, 2A, 2B, 2M, 2N и 3 будет объяснена с использованием модифицированного алгоритма, который впервые был предложен в руководствах по диагностике и лечению БВ в Италии.

Ключевые слова

Фактор Виллебранда, болезнь Виллебранда, классификация, подтипы

Болезнь фон Виллебранда (БВ) — это нарушение свертываемости крови, вызванное количественными или качественными дефектами фактора фон Виллебранда (БВ).VWF представляет собой высокомолекулярный гликопротеин, который играет важную роль на ранних этапах гемостаза, способствуя адгезии тромбоцитов к субэндотелию и агрегации тромбоцитов в условиях высокого напряжения сдвига. ¹ VWF также является переносчиком фактора VIII (FVIII) в плазме, и дефицит или отклонение от нормы VWF также приводит к нарушению свертывания крови. За счет нековалентного взаимодействия между VWF и FVIII, FVIII защищен от связывания с поверхностями мембран и протеолитической атаки множеством сериновых протеаз, включая активированный протеин C. ² В большинстве случаев БВ является врожденным заболеванием, передающимся по аутосомно-доминантному типу. Пациенты с VWD могли иметь склонность к легким, умеренным или тяжелым кровотечениям с детства, обычно пропорционально степени дефекта VWF. Унаследованный VWD был разделен на три типа, которые отражают его патофизиологию. БВ типа 1 характеризуется частичным количественным дефицитом ФВ. Это наиболее распространенный тип с распространенностью около 80%. Вовлеченные механизмы включают снижение синтеза и секреции VWF или увеличение клиренса VWF из плазмы. ³ Лечение простое, так как 1-деамино-8-D-аргинин вазопрессин (DDAVP) вызывает высвобождение структурно нормального VWF из эндотелиальных хранилищ. Однако у пациентов с повышенным клиренсом VWF лечение DDAVP не будет эффективным, поскольку VWF в плазме очень быстро выводится из кровотока. Следовательно, важно диагностировать пациентов с повышенным клиренсом VWF.
VWD типа 3 является наименее распространенным подтипом и отражает практически полное отсутствие VWF. Опять же, лечение DDAVP неэффективно при БВ 3-го типа.В настоящее время предпочтительным методом лечения БВ 3-го типа, а также большинства БВ 2-го типа является трансфузионная терапия концентратами FVIII / VWF, полученными из плазмы. ³
VWD типа 2 — это количественный дефект, который подразделяется на четыре подтипа (2A, 2B, 2M и 2N VWD). Тип 2A относится к вариантам со сниженной зависимой от тромбоцитов функцией и связан с отсутствием мультимеров HMW; тип 2B относится к вариантам с повышенным сродством к гликопротеину тромбоцитов 1bα; тип 2M относится к вариантам со сниженной зависимой от тромбоцитов функцией, не вызванной отсутствием мультимеров HMW; а тип 2N относится к вариантам со значительно сниженным сродством к FVIII.Лечение DDAVP не рекомендуется пациентам с VWD 2 типа, так как оно только увеличивает дисфункциональный VWF.
БВ тромбоцитарного типа (PT-VWD) — редкое аутосомно-доминантное кровотечение. Генетический дефект находится в тромбоцитах, а не в VWF, и заболевание характеризуется аномально высоким сродством связывания тромбоцитов с VWF, аналогичным VWD типа 2B. ⁴ Таким образом, большинству людей с БВ-БВ ошибочно диагностируется БВ типа 2В. Однако они могут потребовать другого терапевтического лечения, поэтому дискриминация имеет клиническое значение.Спектр и степень тяжести VWD широки, от нескольких сомнительных геморрагических симптомов до тяжелых угрожающих жизни эпизодов кровотечений. Это связано не только с гетерогенным геном VWF, который может нарушать его гемостатическую функцию, но и с влиянием других генов (например, генов групп крови ABO). ⁶ Кроме того, многие приобретенные состояния — физиологические (стресс, беременность) или патологические (воспаление) — могут вызывать колебания уровня VWF). ⁶ Эта сильно изменчивая клиническая картина и наличие множества различных дефектов в молекуле VWF усложняют диагностику VWD. ⁶ Руководство по диагностике и лечению VWD в Италии ⁷ предлагает использование алгоритма (см. Рисунок 1 ). Мы приняли и изменили это руководство в нашем испытательном центре VWD.

Лабораторная диагностика болезни фон Виллебранда

Сбор проб

Образцы крови необходимо собирать в пробирки, содержащие 0,105 М цитрата натрия в соотношении 1: 9 с кровью. Бедная тромбоцитами плазма (PPP) готовится центрифугированием цельной крови при 2000 g в течение 20 минут при комнатной температуре.Образцы должны храниться сразу после центрифугирования в полипропиленовых пробирках при -70ºC до анализа. Важно отметить, что криопреципитат может образоваться, если образцы плазмы хранятся при температуре выше -70ºC. Криопреципитат содержит большое количество VWF, особенно HMW-мультимеров. ⁸ Все тесты должны выполняться на исходных аликвотах, которые не были предварительно разморожены, а образцы плазмы следует разморозить до 37 ° C перед выполнением диагностических тестов. Следует проявлять особую осторожность, чтобы гарантировать отсутствие криопреципитата в образцах; поэтому перед проведением испытаний его необходимо растворить, так как это повлияет на результаты. ⁸

Отборочные тесты

Скрининговые тесты на нарушения свертываемости крови включают количество тромбоцитов, время кровотечения, протромбиновое время (ПВ) и активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), уровни фактора VIII в плазме и группу крови пациента. Эти тесты обычно проводятся в обычной лаборатории свертывания крови.

Лабораторные испытания

Первая линия тестов включает концентрацию VWF в плазме (VWF: Ag), анализ кофактора ристоцетина (VWF: RCo) и анализ связывания коллагена (VWF: CB).VWF: Ag измеряется с помощью иммуноферментного анализа (ELISA). Планшет для ELISA покрыт специфическим кроличьим антителом против человеческого VWF, которое улавливает VWF, подлежащий измерению. Измеряемую плазму добавляют в разведениях 1:50 и 1: 100 в блокирующем буфере. После этого добавляют кроличьи антитела против человеческого VWF, конъюгированные с пероксидазой. Это антитело связывается с оставшимися свободными антигенными детерминантами VWF, впоследствии образуя «сэндвич». Связанный фермент пероксидаза выявляется по его активности в заранее определенное время на субстрате ортофенилендиамина (OPD) в присутствии перекиси водорода.После остановки реакции сильной кислотой интенсивность окрашивания напрямую зависит от концентрации VWF, изначально присутствующей в образце плазмы. Стандартная кривая калиброванной человеческой плазмы используется в качестве стандарта, по которому измеряется плазма пациента.
Анализ RCo проводят с фиксированными формалином промытыми тромбоцитами в агрегометре с программным обеспечением, подходящим для этого теста. Промытые тромбоциты, фиксированные формалином, можно приобрести в продаже или можно самостоятельно приготовить из нормальной богатой тромбоцитами плазмы (PRP).Промытые тромбоциты не агглютинируют в присутствии антибиотика ристоцетина, если нормальная плазма не добавлена ​​в качестве источника VWF. Агглютинация следует кривой доза-ответ, которая зависит от количества добавленного в плазму VWF. Обычно используются концентрации в плазме 1: 2 и 1: 4 в трисбуферированном физиологическом растворе (TBS). Стандартная кривая калиброванной человеческой плазмы используется в качестве стандарта, по которому измеряется плазма пациента. Другой функциональный анализ, который все больше лабораторий начали использовать за последние семь лет, — это анализ связывания коллагена (CBA) VWF. ⁹ CBA основан на способности HMW-мультимеров VWF предпочтительно связываться с коллагеном. Это анализ на основе ELISA, в котором разведения плазмы пациента (сопоставимые с разведением VWF: Ag 1:50 и 1: 100) добавляются в покрытый коллагеном планшет для ELISA. Тип коллагена кажется важным, но все еще существуют разногласия по поводу того, какой тип коллагена использовать (тип 1, тип 3 или их комбинация). ¹⁰ Количество связанного VWF определяется с использованием антитела против пероксидазы хрена (HRP), конъюгированного с VWF.Значения выражены в Ед / дл или процентах. Стандартная кривая калиброванной человеческой плазмы используется в качестве стандарта, по которому измеряется плазма пациента. Было показано, что этот анализ чувствителен к распознаванию VWD типов 1, 2A и 2B. ¹¹ Casonato et al. ¹² продемонстрировали, что CBA был последовательно более чувствителен к представлению мультимеров большого и среднего размера VWF, чем анализ RCo. Сниженные значения CBA у пациентов с типом 2A и 2B более устойчивы, чем в анализе RCo.Однако CBA нечувствителен к пациентам с БВ типа 2M. ¹³
Для диагностики подтипов типа 2 выполняются модели индуцированной ристоцетином агглютинации тромбоцитов (RIPA) и мультимера VWF. RIPA измеряется путем смешивания различных концентраций ристоцетина в диапазоне от 0,2 до 2 мг / мл с шагом 0,1 мг / мл с PRP пациента в агрегометре. Результаты выражаются как концентрация ристоцетина (мг / мл), способная вызывать 30% агглютинацию. Исследования смешивания RIPA выполняются, чтобы различать VWD типа 2B и PT-VWD.Короче говоря, PRP и PRP пациента от контрольного человека центрифугируются и осторожно ресуспендируются до 200 × 106 тромбоцитов на миллилитр следующим образом: тромбоциты пациента / плазма пациента; нормальные тромбоциты / нормальная плазма; контроль тромбоцитов / плазмы пациента; и тромбоциты пациента / нормальная плазма. К каждой суспензии тромбоцитов добавляют различные концентрации ристоцетина, и агглютинацию измеряют с помощью агрегометра, аналогично анализу RIPA. ⁵ PT-VWD диагностируется, когда исследования смешивания RIPA подтвердили происхождение тромбоцитов.Мультимерная структура VWF в плазме определяется высокочувствительным и быстрым методом, первоначально описанным Krizek и Rick в 2000 году. ¹⁴ Этот метод использует погруженный горизонтальный электрофорез в агарозном геле с последующим переносом VWF на поливинилидинфторидную мембрану и иммунолокализацию и люминографическая визуализация мультимерного паттерна VWF. Этот метод отличает тип 1 от типа 2A и 2B VWD. Плотность мультимеров с высокой, средней и низкой молекулярной массой каждого рисунка мультимеров определяется с использованием системы гель-документации. ¹⁵ Паттерны мультимера VWF из нормальной плазмы и VWD типов 1, 2A, 2B и 2M показаны на Рис. 2 , а графики плотности на Рис. 3 .
Способность плазменного VWF связывать экзогенный FVIII измеряется с помощью ELISA. Микропланшет (Maxisorp, Nunc, Дания) покрывают путем инкубации в течение двух дней при 4 ° C кроличьим поликлональным античеловеческим VWF. После промывания буфером TBS, содержащим 0,1% бычий сывороточный альбумин (BSA) и 0,05% Tween, лунки насыщают TBS, содержащим 3% BSA.Затем добавляют 100 мкл серийных разведений плазмы пациентов и нормальной объединенной плазмы и инкубируют в течение ночи при 4 ° C. Каждый образец пациента тестируется в шести серийных разведениях, первое из которых доводят до 5% уровня антигена VWF. После удаления эндогенного FVIII с использованием 350 ммоль / л CaCl ₂ (дважды в течение 10 минут) в каждую лунку добавляют 70 мЕ рекомбинантного FVIII. После инкубации в течение двух часов при 37 ° C и промывки связанный FVIII количественно определяют с использованием 1 мкг / мл конъюгированного с пероксидазой овечьего поликлонального антитела против FVIII человека.После промывания иммобилизованный VWF измеряют с использованием кроличьих поликлональных антител против человеческого VWF, конъюгированных с пероксидазой. Цвет проявляется путем добавления OPD, а оптическая плотность определяется при 490 нм. Две контрольные кривые устанавливаются параллельно. Один предназначен для количественного определения иммобилизованного VWF, а другой — для количественного определения связанного rFVIII. Для каждого разведения плазмы значения связанного rFVIII наносят на график в зависимости от количества иммобилизованного VWF. Наклоны полученных линий регрессии отражают связывающую способность VWF с FVIII. ¹⁶
Уровень пропептида VWF (VWF: pp) в плазме пациента также измеряется с помощью ELISA. Лунки для микротитрования покрывают антителом CLB-Pro 35 и инкубируют с образцом плазмы. Затем лунки промывают и связанный белок, содержащий пропептид, обнаруживают с помощью CLB-Pro 14.3, связанного с пероксидазой. Калибраторы для анализа VWF: пропептид используются для создания стандартной кривой, по которой измеряется плазма пациента. ¹⁷

Диагноз болезни фон Виллебранда

Алгоритм, используемый для лабораторной диагностики БВ, представлен на рис. 1 .Пропорциональное снижение как VWF: Ag, так и VWF: RCo при соотношении RCo / Ag> 0,7, а также пропорциональное снижение как VWF: Ag, так и VWF: CB при соотношении CB / Ag> 0,7 предполагают БВ 1 типа. Если диагностирован VWD 1 типа, важно определить скорость выведения VWF; следовательно, выполняется VWF: pp. Если соотношение между VWF: pp и VWF: Ag больше двух, у этого пациента подозревается повышенная скорость клиренса VWF.
Если соотношение RCo / Ag и / или CB / Ag составляет 1,2 мг / мл).Мультимерный анализ в плазме необходим, чтобы различать БВ типа 2А (отсутствие наибольших и промежуточных мультимеров) и БВ типа 2М (присутствуют все мультимеры). VWF: CB обычно нормален при БВ типа 2M из-за присутствия мультимеров HMW, за исключением случаев, когда дефект связывания коллагена диагностируется у пациентов с БВ типа 2M. При БВ типа 1 соотношение между факторами VIII и VWF: Ag всегда согласовано. Когда это соотношение не соответствует уровню фактора VIII

Заключение

Мы изложили систематический способ диагностики БВ.Этот алгоритм также рекомендован Международным обществом тромбозов и гемостаза (ISTH). Важно отметить, что соотношение RCo / Ag и CB / Ag необходимо для различения БВ типа 1 и типа 2.
CBA чрезвычайно чувствителен при распознавании типа 1 и типов 2A и 2B VWD. ¹¹ Однако, напротив, тест RCo имеет низкую чувствительность 50%, ¹⁸ , что трудно стандартизировать, ¹⁹ и не имеет физиологического аналога; тем не менее, он остается стандартным методом измерения активности ФВ, одобренным Комитетом по стандартизации ISTH.Casonato et al. ¹² продемонстрировали, что VWF: CB был последовательно более чувствителен к большим и промежуточным представлениям VWF-мультимера, чем VWF: RCo. Ни у одного из обследованных пациентов с БВ типа 1 не наблюдалось более сильного снижения CBA, чем уровней Ag, чего не было в случае анализа RCo. Снижение значений CBA у пациентов с типом 2A и 2B было более устойчивым, чем у пациентов с анализом RCo. VWF: CB является нормальным для пациентов с VWD типа 2M из-за присутствия HMW-мультимеров. Это помогает в диагностике БВ типа 2M.
Механизмы, вовлеченные в VWD типа 1, включают снижение синтеза и секреции VWF или увеличение клиренса VWF из плазмы. ²⁰ У пациентов с повышенным клиренсом VWF лечение DDAVP не будет эффективным, поскольку VWF в плазме выводится из кровотока очень быстро. Соотношение между уровнями пропептида и антигена используется как показатель клиренса VWF у этих пациентов. ³
Тест RIPA необходим, чтобы различать VWD типа 2B и типа 2A.Также важно проводить тест RIPA с концентрацией ристоцетина от 0,2 до 2 мг / мл с шагом 0,1 мг / мл. Это обеспечит диапазон концентраций для определения максимального значения агглютинации 30%. В настоящее время тест RIPA, который используется в большинстве лабораторий в развивающихся странах, проводится только с тремя концентрациями ристоцетина (0,5, 1 и 1,25 мг / мл). Иногда бывает сложно определить, повышается или понижается RIPA только на трех значениях. Laffan et al. ²¹ также обнаружил, что RIPA является нормальным у пациентов с VWF: значение RCo менее 30%. Они обнаружили, что RIPA снижается только при тяжелых формах VWD. Когда RIPA увеличивается и подозревается тип 2B, важно выполнить исследования смешивания RIPA, чтобы отличить PT-VWD от VWF типа 2B.
Мультимерный анализ VWF в плазме необходим для различения подтипов VWD 2 типа. Наш метод включает в себя быструю обработку, простоту приготовления геля, высокую чувствительность к низким концентрациям VWF и устранение радиоактивности. ¹⁵ БВ типа 2N можно заподозрить в случае несовпадения значений фактора VIII. В типичных случаях типа 2N уровень FVIII обычно составляет менее 20%. ²² Диагноз БВ типа 2N должен быть подтвержден с помощью анализа связывания FVIII. Поскольку БВ является настолько сложным для диагностики заболеванием, этот систематический подход делает диагностику БВ более точной, что имеет жизненно важное значение для лечения этого заболевания. Однако в этом диагностическом процессе есть подводные камни, которые связаны с ограничениями чувствительности, воспроизводимости и межлабораторной вариабельности тестов RCo и RIPA на основе агглютинации. ²³
В заключение, крайне важно использовать систематический метод диагностики БВ. Каждое лабораторное испытание составляет лишь один фрагмент диагностической головоломки, поэтому необходимо собрать все части головоломки вместе, чтобы получить полную диагностическую картину. ■

Болезнь фон Виллебранда тип 1: диагноз в поисках болезни | Кровь

Нормальный диапазон уровня VWF широк, 95% значений находятся между 50% и 200% от среднего, 5,6, и большая часть этих вариаций необъяснима.На генетические компоненты приходится около 30% 7–60% 8 дисперсии ФВ в плазме, а группа крови АВО является одной из основных генетических детерминант уровня ФВ. Средний уровень VWF для людей с группой крови O на 25-35% ниже, чем у людей с группой крови A, B или AB, 5 и тип ABO составляет примерно 30% генетической изменчивости VWF.9 Хотя нулевые мутации в ген VWF действительно оказывает значительное влияние на средний уровень VWF, диапазон у гетерозигот значительно перекрывается с диапазоном у здоровых людей.В типичном исследовании облигатные носители VWD типа 3 имели средний уровень VWF 46% и диапазон от 11% до 116% от нормы.6 Среди 37 субъектов, гетерозиготных по той же мутации сдвига рамки считывания (2680delC), средний уровень VWF составлял 46% с диапазоном от 13% до 110% от нормы.10 Кроме того, нулевые мутации VWF относительно редки, с частотой не более 0,002 в зависимости от распространенности VWD типа 3,11 и, следовательно, не могут вносить значительный вклад в наблюдаемые вариации на уровне VWF. Определенные общие полиморфизмы в промоторе VWF коррелируют с изменениями среднего уровня VWF, но эти эффекты незначительны.Например, среди людей с группой крови O однонуклеотидный полиморфизм -1793G> C связан со средними уровнями VWF 77% для генотипа C / C, 86% для генотипа G / C и 93% для генотипа G / G. Поскольку аллель -1793C имеет частоту приблизительно 0,65 среди канадских доноров крови, он вносит значительный, но умеренный вклад в наблюдаемые вариации уровней ФВ в плазме. не сцеплен с локусом VWF , и уровень VWF не позволяет надежно отличить здоровых людей от носителей нулевых мутаций VWF .

Дефицит

VWF может вызвать кровотечение, но кровотечение имеет множество причин, оно очень распространено и не имеет конкретных симптомов. Обследования здоровых людей из контрольной группы сообщают о чрезмерных кровотечениях из носа у 5–39%, кровоточивости десен от 7 до 51%, синяках от 12 до 24%, кровотечениях из незначительных ран от 0,2 до 2%, кровотечениях после удаления зубов от 1 до 1%. 13%, кровотечение после тонзиллэктомии — от 2,4% до 11%, послеоперационное кровотечение — от 1,4% до 6%, послеродовое кровотечение — от 6% до 23% и меноррагия — от 23% до 44%.13–16 Обычно эти очень распространенные симптомы не значимы с медицинской точки зрения, но они часто являются основанием для диагностики кровоточащего диатеза, соответствующего БВ. Используя наименьшее значение, представленное в любом исследовании для каждого симптома, и предполагая, что симптомы независимы, 25% мужчин и 46% женщин будут иметь по крайней мере один симптом кровотечения. (Вероятность, P, , что у человека не будет симптомов кровотечения, является произведением вероятностей того, что каждый симптом будет отсутствовать. Тогда вероятность наличия хотя бы одного симптома составляет 1 — P.) Предположение о том, что симптомы кровотечения независимы, не подтверждено напрямую. Однако в одном исследовании многомерный анализ выявил лишь умеренную тенденцию к группированию симптомов у пациентов с диагностированным нарушением свертываемости крови, и о такой тенденции не сообщалось для контрольной группы14. Симптомы кровотечения консервативно можно принять за 25%. Я использовал нижнее значение 25%, оцененное для мужчин, что похоже на минимальную зарегистрированную распространенность одного симптома меноррагии у женщин.Поскольку это значение относительно велико, кровотечение и низкий VWF часто связаны случайно.