Электрофорез при: Электрофорез с медикаментозными средствами, гомеопатическими препаратами

Электрофорез | Поликлиника ЦКБ РЖД-Медицина

Электрофорез лекарственных веществ – особый электрофармакологический метод, основанный на сочетанном использовании постоянного тока и вводимых с его помощью лекарственных веществ. Из электрических токов для лекарственного электрофореза применяются гальванический (в 80-85 %), диадинамические, синусоидальные модулированные (в выпрямленном режиме), прямоугольный импульсный и флюктуирующий (форма № 3) токи.

Механизм физиологического воздействия

При электрофорезе лекарственные вещества в организм проникают через выводные протоки потовых и сальных желез, межклеточные промежутки, волосяные фолликулы и в меньшей степени – чресклеточно. Во время процедуры лекарственные вещества проникают неглубоко: сразу после элекрофореза основная часть лекарства обнаруживается в эпидермисе и дерме, создавая депо. Однако от процедуры к процедуре глубина электрогенного перемещения вводимого препарата возрастает. К тому же следует иметь в виду, что за счет диффузии часть лекарственных веществ быстро достигает кровеносных и лимфатических сосудов, разносясь ко всем органам и тканям. Весьма важно, что из кровотока лекарственные вещества вторично поступают преимущественно в органы и ткани, расположенные в зоне проведения процедуры. Это обосновывает целесообразность использования лекарственного электрофореза для лечения как поверхностно, так и глубоко расположенных патологических процессов, а также заболеваний внутренних органов.

Действие лекарственного электрофореза как электрофармакологического метода складывается из сочетанного действия физического фактора (гальванический или другие токи) и введенного лекарственного вещества. Ответная реакция организма при этом не является простой суммацией эффектов, вызванных этими двумя факторами, составляющими единый терапевтический комплекс. Она значительно сложнее и разнообразнее. Важно помнить, что действие вводимых электрофорезом лекарств развивается несколькими путями (рефлекторное, местное и гуморальное) и, варьируя технику и методику проведения процедуры, ими можно управлять.

Особенности и достоинства лекарственного электрофореза:

1. Лекарственные вещества, вводимые электрофорезом, задерживаются в поверхностных слоях кожи и образуют здесь так называемое кожное депо ионов. В нем лекарства могут сохраняться от 12-24 ч до 15-20 суток (адреналин, цинк, медь и др.). Задержка введенных веществ в кожном депо способствует их более длительному действию и медленному выведению из организма.

2. Метод лекарственного электрофореза позволяет создавать высокую локальную (в патологическом очаге) концентрацию препарата, не насыщая им весь организм. Согласно имеющимся данным, после электрофореза содержание лекарств в тканях области воздействия в несколько раз выше, чем после общепринятых способов введения той же дозы препарата.

3. В отличие от инъекционных способов введения электрофорез позволяет доставить лекарства к патологическому очагу, в котором имеются нарушения микроциркуляции и регионарного кровообращения в виде капиллярного стаза, тромбоза сосудов, инфильтрации и некроза. Такие патологические очаги плохо поддаются лечению традиционными фармакотерапевтическими методами, т.к. поступление лекарственных веществ в них затруднено. При электрофорезе же лекарственные вещества могут поступать в патологический очаг не только гематогенным, но и электрогенным путем.

4. При электрофорезе побочные и аллергические реакции наблюдаются во много раз реже, чем при пероральном или парентеральном применении этих же лекарств. Уменьшение или полное отсутствие побочных реакций при электрофорезе обусловлено рядом причин: невысокой концентрацией лекарства в крови; введением их в наиболее чистом виде; положительным влиянием физического фактора на общую реактивность и иммунобиологический статус организма и др

5. При электрофорезе в организм вводятся только те лекарственные ионы или ингредиенты лекарств, на терапевтическое действие которых рассчитывают. Противоионы и различные примеси, которые могут тормозить действие основного лекарственного иона, в организм при этом не попадают, а остаются на прокладке.

6. В соответствии с сущностью метода при электрофорезе в организм лекарства поступают в виде ионов. И это очень важно, т.к. в ионной форме лекарства значительно активнее, чем в молекулярной, в которой они вводятся при обычных способах их применения.

7. Многих пациентов, прежде всего детей, пожилых пациентов привлекает абсолютная безболезненность метода при его правильном проведении.

8. При лекарственном электрофорезе исключается введение в организм растворителя. Это немаловажное достоинство метода, ибо вводимый при других способах лекарственной терапии растворитель деформирует кожу, нарушает микроциркуляцию и метаболизм в ней, может служить причиной развития постинъекционных инфильтратов.

9. При всей важности приведенных выше особенностей метода все же основным достоинством лекарственного электрофореза, думается, является то, что лекарственное вещество здесь действует на фоне различных, имеющих терапевтическое значение изменений, вызываемых используемым электрическим током. Именно благодаря этому отчетливое специфическое и выраженное лечебное действие вводимых электрофорезом лекарств проявляется при более низких концентрациях, которые при обычных путях их введения были бы малоэффективны.

Продолжительность процедуры зависит от локализации воздействия и вида используемого тока. При общих и сегментарно-рефлекторных методиках она обычно не превышает 15-20 мин, а при местных процедурах – 30-40 мин. Использование флюктуирующих или синусоидальных модулированных токов (в выпрямленном режиме) требует некоторого уменьшения продолжительности лекарственного электрофореза, а при проведении его по методике электросна длительность воздействия, наоборот, обычно удлиняется. Курс лечения лекарственным электрофорезом в зависимости от тяжести состояния больного может быть различным по продолжительности: от 10-12 до 16-20 процедур, проводимых ежедневно или через день.

Показания:

Для лекарственного электрофореза определяются фармакотерапевтическими свойствами вводимого препарата, а также показаниями к использованию физического фактора (гальванического или других постоянных токов). В связи с широким перечнем лекарств, пригодных для электрофореза, и разнообразием используемых электрических токов показания для назначения метода весьма разнообразны.

В принципе трудно найти заболевание, при котором не мог бы быть назначен лекарственный электрофорез. Наиболее целесообразно лекарственный электрофорез применять при тех заболеваниях, при которых показаны как лекарственные вещества, так и используемый при этом электрический ток.

Противопоказания:

• индивидуальная непереносимость лекарственного вещества,
• противопоказания к использованию лекарства и самого электрического тока

СТОИМОСТЬ УСЛУГ

Запись по телефонам:
+7 (499) 262-11-29, +7 (499) 262-93-61

Физиотерапевтическое отделение
Центральная поликлиника ОАО «РЖД»
Москва, ул. Новая Басманная, д. 5

Организм ребенка так хрупок! В отличие от взрослого, он гораздо более чувствителен к воздействию негативных факторов. Иммунитет малышей не всегда может справиться с различными вредоносными бактериями, угрожающими здоровью. По этой причине детки болеют гораздо чаще взрослых.

При такой чувствительности организма и лечить малышей гораздо труднее, чем взрослых людей. Некоторые препараты вызывают у них аллергию, а многие вообще противопоказаны. С другой стороны, повышенная чувствительность детского организма является плюсом. У ребенка более нежная кожа, в мягких тканях содержится больше воды, более восприимчива нервная система – это значит, что некоторые виды лечения оказывают на ребенка лучший эффект, чем на взрослого. Например, физиотерапия.

Преимущества физиотерапии

Физиотерапия — лечение с помощью природных и искусственно созданных физических факторов. К физиотерапевтическим процедурам относится грязелечение, водолечение, гирудотерапия, ингаляции, магнитотерапия, светотерапия, теплотерапия и др.

Конечно, по времени и силе воздействия на организм проведение таких процедур ребенку и взрослому человеку должно отличаться. Современные аппараты для проведения физиотерапии позволяют при необходимости усиливать и уменьшать интенсивность и продолжительность воздействия, при этом выбирать нужные области – «мишени» и действовать прицельно. 

Не будем преувеличивать, что физиотерапия – это панацея нашего времени. Но физиопроцедуры действительно помогают справляться с великим множеством заболеваний различных органов и систем организма. Особенно большое значение физиолечение имеет для детишек. Некоторые патологии у ребенка можно вылечить исключительно с помощью физиопроцедур, без применения различных лекарственных препаратов.

Чтокрайне важно – процедуры физиотерапии не только устраняют симптомы, но и воздействуют на причину развития заболевания, за счет чего организм полностью восстанавливается, и закрепляются стойкие долговременные результаты.

Помимо оказания лечебного эффекта, физиопроцедуры проводят и с профилактической целью. Они помогают организму крепнуть, повышают иммунитет, делая ребенка менее уязвимым к различным заболеваниям.

Начинать проведение физиотерапевтических процедур можно уже после первых двух недель жизни ребенка, предварительно проконсультировавшись с доктором, так как некоторые виды физиотерапии имеют свои противопоказания. 

Какие заболевания лечатся при помощи физиотерапии?

Физиотерапевтические методы лечения используются в лечении следующих заболеваний у детей: 

• заболеваний ЛОР-органов: синуситы, аденоидиты, риниты, отиты, тонзиллиты;
• заболеваний опорно-двигательной системы: нарушения осанки, сколиозы, плосковальгусная установка стоп;
• забоеваний нервной системы;
• в дерматологии и аллергологии: атопический дерматит, респираторный аллергоз, поллиноз, аллергический ринит;
• заболеваний органов зрения: близорукость, спазм аккомодации, дальнозоркость и др.

Какой эффект от физиотерапии получит Ваш ребенок?

Для каждого маленького пациента в каждом конкретном случае будет максимально эффективна «своя» физиопроцедура. Однако если говорить в общем о физиотерапии, то кратко можно охарактеризовать этот вид лечения очень просто.

Физиопроцедуры обладают обезболивающим, противоотечным и противовоспалительным свойствами. Физиопроедуры помогают улучшить лимфодренаж, циркуляцию крови, повысить иммунитет. Максимального эффекта можно добиться, если проводить физиотерапию в сочетании с фитотерапией, мануальной терапией или массажем.

Электрофорез – эффективная и популярная физиотерапевтическая процедура

Электрофорез как метод физиотерапии популярен более 50-ти лет. За это время его основной принцип работы – использование постоянного тока и растворов лекарственных препаратов для ввода под кожу – не изменился, а только улучшился за счет модернизации аппаратов. При этом под кожу вводится не столько сам препарат, сколько его ионы, которые легче усваиваются и минимизируют аллергические реакции.

Незаменим электрофорез при различных заболеваниях у детей. Его рекомендует педиатр или узкий специалист после осмотра и получения результатов анализов, а назначает врач-физиотерапевт. Весомое преимущество, что электрофорез может назначаться детям от 1 месяца.

Проведение процедур в Первом детском медицинском центре проводится исключительно под контролем опытного врача-физиотерапевта и среднего медицинского персонала.

В каких заболеваниях помогает электрофорез как метод физиотерапии?

• Нарушение опорно-двигательного аппарата;
• Частые бронхиты острой и хронической формы, бронхиальная астма;
• Плеврит, трахеит;
• Нарушение работы нервной системы.

Также электрофорез как метод физиотерапии помогает в восстановлении после оперативных вмешательств и когда необходима реабилитация после растяжений, ушибов, вывихов, переломов.

Среди дополнительных преимуществ в методике выделяют рассасывание рубцов, уменьшение боли и очага воспаления, быстрая регенерация тканей.

Как правило, если диагностируется острый или хронический бронхит, тогда электрофорез как метод физиотерапии назначается как дополнительное средство к медикаментозному лечению, но с его помощью удается добиться высоких положительных результатов и закрепить полученный результат надолго.

Традиционно процедуры назначаются несколько раз в год в полном курсе из 10–12 сеансов, которые проводятся ежедневно или через день. При этом врачи центра постоянно контролируют самочувствие ребенка и его реакцию на введение препарата через кожу.

Электрофорез как метод физиотерапии требует постоянного контроля над мощностью аппарата, а также количеством лекарственного средства, которое вводится через кожу и активно воздействует на проблемные органы и системы.

С какого возраста назначаются процедуры?

Начиная с 1-ого месяца при показаниях. Первые улучшения уже заметны после первых 3–5 процедур. Максимальная концентрация препарата, который вводится методом электрофореза для лечения плеврита, трахеита или воспаления наблюдается спустя 13–15 часов после введения. Это позволяет организму накапливать его и противостоять заболеванию.

Для поддержания организма в норме, а также с профилактическими целями электрофорез как метод физиотерапии назначает 1–2 раза в год для воздействия на проблемные зоны. Дополнительно с помощью аппаратного воздействия также можно лечить глазные заболевания, например, миопию.

Препарат вводится в том месте, где необходима помощь, при этом существуют определенные ограничения для расположение электродов: область сердца.

Во время сеанса дети не капризничают, поскольку им оказывает внимание медицинский персонал, занимая их игрушками и рассказами. Проведение электрофореза как метода физиотерапии в центре разрешено вместе с родителями. Преимущество в том, что весь аппаратный комплекс лицензированный.

Комфортное и безболезненное лечение обеспечивает ввод препарата без инъекций; за счет гальванического тока улучшается кровоток, нормализуется давление, повышается тонус организма и его защитные свойства. Постепенно удается свести к минимуму проявления бронхоэктатической болезни, уменьшить частоту острых или хронических бронхитов.

Записаться к Врачу

УВЧ в детской физиотерапии

УВЧ (ультравысокочастотная терапия) — метод детской физиотерапии, при котором применяется воздействие…

Магнитотерапия в детской физиотерапии – эффективность и надежность

Магнитотерапия является одной из популярных процедур в детской физиотерапии. Магнитотерапия — метод лечебного…

ДМВ-физиотерапия: что это такое, как проводится и эффекты от процедуры

Детская физиотерапия в Саратове представлена широким спектром проводимых процедур. В данной статье мы…

Топ-5 наивных мифов о физиотерапии: разбираемся и развенчиваем

Достаточно часто, особенно от людей, которые никак не связаны с медициной, можно услышать, что физиотерапия…

Физиотерапия при ЗРР. Нормализация речевого развития у ребенка

Задержка речевого развития – не приговор, и если вовремя обратиться к профильным специалистам, сформировать…

Физиотерапия в педиатрии – помощь каждому ребенку

На разных возрастных этапах ребенку нужна комплексная детская физиотерапия для того, чтобы устранить…

Врач-физиотерапевт – кто это? Какие заболевания лечит физиотерапевт?

Детский врач-физиотерапевт – специалист с дипломом о высшем медицинском образовании, который не просто…

Амплипульстерапия как вид физиолечения заболеваний опорно-двигательной системы

Ответ на вопрос, чтo тaкoe aмплипyльcтepaпия, стоит начать с того, что это один из видов физиотерапии,…

Главные принципы физиопроцедур для детей

После назначения педиатра или узкопрофильных специалистов, детская физиотерапия должна на определенное…

Физиотерапия для детей

— Когда используется физиотерапия: во время острого периода болезни, подострый период или только с реабилитационной…

Первый детский медицинский центр

Здоровье детей – спокойствие родителей!

Поделиться в соцсетях:

Физиотерапевтическое отделение Магнитотерапия.

Электрофорез. Лазеролечение. Ингаляции. Дарсонвализация. Косметологический массаж. Лечение суставов. Лечение грыжи. Лечение дорсопатии. Лечение спондилеза. Спондилоартроз. Лечение протрузий. Лечение искривлений позвоночника. Лечение сколиоза. Роликовый массаж. Лимфодренажный массаж.

Физиотерапевтическое отделение поликлиники №6

Составление Договора на получение платной медицинской услуги и предварительная оплата за назначенный врачом курс лечения производятся в кассе поликлиники, кабинет №203 (2 этаж).
За дополнительной информацией обратитесь в кассу поликлиники +7 (8552) 51-10-88 или по телефону +7 (8552) 51-50-50. Возможен подбор времени, удобного для Вас. Договор на получение платной медицинской услуги и оплата производится в кассе поликлиники, кабинет №203 (2 этаж).
 

Услуги физиотерапевтического отделения

Физиотерапевтическое отделение является структурным подразделением ГАУЗ «Городская поликлиника №6» и функционирует с 1986 года.

Исламова Сария Саббуховна – заведующая физиотерапевтическим отделением – врач-физиотерапевт. Окончила в 1984 году лечебный факультет Казанского государственного медицинского института. Имеет сертификаты по специальностям «Физиотерапия», «Лечебная физкультура» и «Рефлексотерапия», врач высшей квалификационной категории по специальности «Физиотерапия», дважды победитель городских конкурсов врачей: в 2009 году в номинации «Лучший врач-реабилитолог» и 2015 году в номинации «Лучший врач-специалист поликлиники». Организует работу в отделении, ведет прием пациентов, проводит иглорефлексотерапию.

В 2016 году поликлиника удостоена диплома 2 степени в Республиканском конкурсе «Лучшие товары и услуги Республики Татарстан» в номинации «Восстановительное лечение пациентов в условиях физиотерапевтического отделения поликлиники».

Специальная подготовка медицинского персонала физиотерапевтического отделения и современное оборудование обеспечивают высокое качество таких лечебных процедур как низкочастотная магнитотерапия, лекарственный электрофорез, лазеротерапия, дарсонвализация, ультратонтерапия, биоптронтерапия, ДДТ- и СМТ-терапия, УВЧ-терапия, индуктотермия, ультразвуковая терапия, парафино-озокеритолечение, ультрафиолетовое облучение местное и общее, медицинский массаж, лечебная физкультура, кислородный коктейль.

На лечебные процедуры в физиотерапевтическом отделении пациенты поступают по направлениям от лечащих врачей или врача-физиотерапевта. Лечение назначается после врачебного осмотра, с учетом индивидуальных особенностей организма, состояния больного, показаний и противопоказаний к назначению тех или иных физических факторов.
 

Обзор по отдельным видам лечения, проводимым в отделении.

Теплолечение (парафино-озокеритолечение)

Наличие парафино-озокеритолечения является преимуществом нашего отделения среди других поликлиник города. Парафин (смесь углеводородов, получаемых при перегонке нефти) и озокерит (природный горный воск) способствуют рассасыванию воспалительных инфильтратов, рубцов и спаек, оказывают болеутоляющий эффект, стимулируют регенераторные процессы. Особенно широко используем данное лечение для восстановления функции суставов после перенесенных травм, при артрозах, артритах, заболеваниях позвоночника, периферических нервов, при бесплодии, при хронических воспалительных заболеваниях внутренних органов, рубцово-спаечных процессах.

Биоптронтерапия

С приобретением в 2013 году аппарата Биптрон Про 1 появилась возможность использовать в лечебной практике фототерапию полихроматическим поляризованным светом – биоптронтерапию. Аппарат генерирует видимую и инфракрасную часть спектра солнечного света (от 480 до 3400 нм), исключая ультрафиолетовый диапазон, что обеспечивает его безопасность для глаз и кожи. Успех в лечении различных заболеваний с использованием этого прибора объясняется, прежде всего, тем, что он оказывает биостимулирующее, регенерирующее, противоболевое, противовоспалительное, противоотечное воздействие на организм, повышает иммунитет и улучшает качество лечения. С успехом применяем биоптронтерапию для лечения послеоперационных и посттравматических ран, инфильтратов, язв, дегенеративные и дистрофические заболевания суставов и позвоночника, воспалительных заболеваний лор-органов, невритов, невралгии, гиполактации у кормящих матерей, бесплодии, воспалительных заболеваниях половых органов, эрозии шейки матки, экземе, герпесе, синдроме хронической усталости и других.

Аппаратное вытяжение позвоночника с аппаратом «Ормед»

С 2002 года в отделении широко используется аппарат «Ормед». Это автоматизированный многофункциональный комплекс для   вытяжения позвоночника и вибрационного массажа.

Основными действующими факторами комплекса «Ормед» являются дозированное осевое вытяжение и локально-вибрационное механическое паравертебральное воздействие на позвоночный столб с помощью обкатывающих роликов-массажеров. Его особенность – это многокомпонентное одновременное воздействие на позвоночник (вытяжение, вибромассаж, обогрев, виброкоррекция), в результате которого происходит усиление взаимодействия физических факторов, что формирует новые лечебные эффекты. Данный сочетанный метод лечения заболеваний позвоночника, используемый на многофункциональном комплексе одновременно, в виде одной процедуры, можно рассматривать сегодня как новое направление в вертеброневрологии. Аппарат пассивной механотерапии эффективен при профилактике и лечении заболеваний у больных с неврологическими проявлениями шейного, грудного и поясничного остеохондроза, а также при сколиозах. «Ормед» способствует вправлению протрузий (выпадений) и грыж межпозвоночных дисков и тем самым дает возможность избежать хирургического вмешательства.

Кислородный коктейль

С введением в лечебную практику кислородного коктейля появилась возможность оздоравливать больных с заболеваниями органов дыхания, желудочно-кишечного тракта, с патологией сердечно-сосудистой системы.

Кислородный коктейль — вкусная стойкая пена, состоящая из тысячи мелких пузырьков, наполненных кислородом. Готовится она на основе осветленного сока и пищевого желатина. Кислород всасывается в кровь и циркулирует в ней в растворенном виде. За счет этого быстрее и проще поступает в органы и ткани. Кислородный коктейль предупреждает и лечит целый ряд болезней органов дыхания, ишемическую болезнь сердца, гипертонию, энцефалопатии, язвенную болезнь желудка и 12-перстной кишки, гастриты, холецистит, гепатит, нарушения мозгового кровообращения, анемии, повышает иммунитет, улучшает умственную и физическую работоспособность. Особенно коктейль показан беременным женщинам для повышения гемоглобина в крови и предупреждения внутриутробной гипоксии плода.

Иглорефлексотерапия (ИРТ) — это древнекитайский метод воздействия с помощью металлических игл на биологически активные точки организма. Всего на теле человека имеется более 660 активных точек, из которых специалист выбирает те или иные в зависимости от характера заболевания.  «Активные» точки – это наиболее доступные участки тела, через которые мы проникаем в энергетические каналы (меридианы) и нормализуем их функцию.

В процессе иглотерапии нормализуется деятельность нервной системы, улучшается кровоток и питание всех органов и тканей, стимулируется иммунитет. Особенно иглотерапия оказывает обезболивающее и успокаивающее действия. Данный метод лечения признан эффективным в лечении ряда заболеваний. Таких как остеохондрозы, невралгии, в том числе невралгии тройничного нерва, радикулиты, плече-лопаточный периартрит, неврит седалищного нерва и другие. С успехом иглотерапия используется при лечении аллергических состояний (вазомоторного ринита, бронхиальной астмы), гипертонии, неврастении, нарушений сна, табачной зависимости.

Диадинамотерапия (ДДТ) – метод электролечения, при котором на организм больного воздействуют низкочастотными полусинусоидальной формы импульсными токами (частотой 50 и 100 Гц). Наиболее характерными клиническими эффектами являются обезболивающий и противоотечный. ДДТ-терапия улучшает кровоток, трофические процессы в тканях и функциональное состояние нервно-мышечного аппарата, поэтому часто применяется при остеохондрозах, артрозах, травмах, заболеваниях периферической нервной системы и других.

Лекарственный электрофорез представляет собой метод сочетанного воздействия на организм постоянного электрического поля и лекарственного вещества. Введение лекарственных веществ методом электрофореза имеет ряд преимуществ по сравнению с обычными способами их использования: лекарство поступает в виде ионов, что повышает его фармакологическую активность; образование «кожного депо» увеличивает продолжительность действия лекарственного вещества; высокая концентрация лекарственного вещества создается непосредственно в области очага; не раздражается слизистая оболочка желудочно-кишечного тракта;

В результате лечения нормализуется состояние центральной и вегетативной нервной систем, улучшаются крово- и лимфообращение, обменные процессы. Данный метод используется при лечении многих органов и систем организма.

Дарсонвализация –лечебный метод, в основе которого лежит локальное воздействие переменным высокочастотным импульсным током.
Дарсонвализация оказывает: обезболивающий и противозудный эффект; улучшает кровоток, лимфоотток; снижает артериальное давление; повышает тонус стенок вен, уменьшает венозный стаз и усиливает венозный отток; стимулирует обменные и трофико-регенераторные процессы; повышает тургор и эластичность кожи; усиливает рост волос; оказывает бактерицидное действие. Дарсонвализация эффективна для снятия боли при невралгии тройничного нерва, межреберной невралгии, остеохондрозах, невритах, головной боли напряжения, нарушении сна, варикозном расширении вен нижних конечностей, при трофических язвах, незаживающих ранах, при очаговом облысение головы, дерматите, угревой сыпи, морщинах и др.

Ультразвуковая терапия – это применение с лечебной целью механических колебаний ультравысокой частоты.   Ультразвук оказывает: болеутоляющее, антиспастическое, сосудорасширяющее, рассасывающее, противовоспалительное действие. С успехом применяется при лечении рубцов, спаек, контрактур суставов, заболеваний ЛОР-органов, хронического бронхита, пневмонии, остеохондроза, инфильтратов, лактостаза (застоя молока) и др.

Ультравысокочастотная терапия (УВЧ-терапия) — это воздействие на организм с лечебно-профилактической целью электрического поля ультравысокой частоты. УВЧ -токи оказывают: противовоспалительное и противоотечное действие, снижают артериальное давление, ускоряют регенерацию поврежденных тканей, стимулируют эндокринную систему, дают обезболивающий эффект, им присуще антиспастическое действие на гладкую мускулатуру внутренних органов.
УВЧ-терапия имеет широкое применение в лечебной практике.

Противопоказана УВЧ-терапия при беременности, наличие кардиостимулятора, при кровотечении, осумкованных гнойных процессах, наличие металла в зоне воздействия.
 

Индуктотермия – это высокочастотная магнитотерапия, оказывает успокаивающее и болеутоляющее действие, усиливает кровообращение и лимфоотток, улучшает кровоснабжение внутренних органов, улучшает обменно-трофические процессы, нормализует секреторную активность внутренних органов, особенно благоприятно воздействует на вентиляционно-дренажную функцию бронхов, улучшает отделение мокроты, снимает бронхоспазм и ликвидирует воспалительные изменения в бронхолегочной системе, стимулирует фильтрационную функцию почек, воздействуя на область надпочечников, усиливает синтез глюкокортикоидов магнитное поле способствует расслаблению мышц, снятию их спазма, повышает функциональную активность суставов.

Основными показаниями индуктотермии являются: воспалительные процессы в различных органах, травмы и заболевания опорно-двигательного аппарата, бронхиальная астма, заболевания периферической нервной системы (остеохондрозы, люмбоишиалгия, плекситы, невриты и др. )

Противопоказан данный метод лечения при беременности, острых гнойно-воспалительных заболеваниях, кровотечении, при наличие металлических предметов и кардиостимулятора, опухолях и общем тяжелом состоянии.
 

Низкочастотная магнитотерапия

Данный метод широко применяем при лечении больных с острыми и хроническими заболеваниями сердечно-сосудистой, бронхолегочной, нервной, опорно-двигательной систем. С помощью данного аппарата можно проводить процедуры одновременно двум больным, а также воздействовать на большие участки тела. Магнитотерапия — это наиболее используемый метод лечения, так как к нему мало противопоказаний (можем использовать при наличии металла и доброкачественных опухолей в области воздействия, больным пожилым с хроническими компенсированными заболеваниями). Магнитотерапия противопоказана при наличии искусственного кардиостимулятора, наклонности к кровотечениям, при беременности.

Ультрафиолетовое облучение (УФО)

Ультрафиолетовые лучи проникают в ткани на глубину 0,6—1 мм, не вызывают ощущение тепла и поглощаются преимущественно эпидермисом. Обычно через 2—8 часов после облучения появляется покраснение с резкими очертаниями — световая эритема. Эритема держится несколько дней, затем постепенно бледнеет (при этом наблюдается набухание клеток эпидермиса и его утолщение). Через 4-5 дней после ультрафиолетового облучения появляется шелушение, и часть рогового слоя отпадает, на месте воздействия появляется пигментация (загар). При УФО образуются биологически активные вещества (гистамин, ацетилхолин), они всасываются в кровь, оказывают вторичное гуморальное действие на тонус сосудов, мышц, нервных рецепторов и обменные процессы.

Ультрафиолетовое излучение показано при лечении: острых, в том числе гнойных, воспалительных процессов лор-органов; ран и язв, ожогов и отморожений, инфильтратов, остеомиелита, артритов, воспалительных заболеваний органов дыхания, периферической нервной системы.

Лазеротерапия — это использование с лечебной целью низкоэнергетического лазерного излучения. Лазеротерапия улучшает кровоток и лимфоотток, стимулирует регенерацию тканей, оказывает противовоспалительный эффект, повышает иммунитет. Применяется при лечении трофических язв, длительно незаживающих ран, тромбофлебита, переломов костей, артрозов, артритов, пяточной шпоры, эпикондилита; бронхита, пневмонии, бронхиальной астмы, язвенной болезни желудка и 12-типерстной кишки; остеохондрозов, неврита лицевого и тройничного нервов, воспалительных заболеваний ЛОР-органов и другие.

Медицинский массаж

Массаж оказывает многообразное физиологическое воздействие на организм и применяется при заболеваниях многих органов и систем вне обострения: опорно-двигательной, нервной систем, органов дыхания и др. Для желающих получить лечение платно с 8.00 до 18.00 часов ежедневно, кроме субботы и воскресенья, работает кабинет массажа №506. Больные направляются на массаж лечащими врачами или врачом-физиотерапевтом.

Лечебная физкультура (ЛФК)

Лечебная физкультура является неотъемлемой частью комплексного лечения многих заболеваний. В отделении организовано проведение групповых занятий лечебной физкультуры для больных с остеохондрозами, с опущением внутренних органов и для беременных женщин с 30-ти недельного срока беременности. В зале механотерапии проводится восстановительное лечение больных после перенесенных травм верхних и нижних конечностей в постиммобилизационном периоде (после снятия гипсовой повязки, лонгеты или бандажа), после операций на суставах, в том числе, после эндопротезирования. Механотерапия способствует улучшению или восстановлению функции тугоподвижных суставов при артрозах, ревматоидном артрите, после перенесенного нарушения мозгового кровообращения (инсульта), при невритах периферических нервов верхних и нижних конечностей.

Лечебную физкультуру (механотерапию) больным назначают лечащие врачи, после консультативного приема врача по лечебной физкультуре они направляются для занятий в соответствующие кабинеты. Также врач по ЛФК оказывает консультативную помощь больным для самостоятельного занятия на дому.

Часть процедур в отделении проводятся на платной основе.  Согласно Федеральному закону 323 ст.37 медицинская помощь оказывается на основе стандартов медицинской помощи, утвержденных приказами Министерства здравоохранения РФ. Те виды лечения, которые не входят в стандарты оказания медицинской помощи, не финансируются, являются дополнительными и по желанию пациентов проводятся платно. Также платно могут получить лечение в отделении пациенты, не имеющие медицинский полис или не прикрепленные к поликлинике; пациенты по направлениям или рекомендациям специалистов других лечебных учреждений или частных клиник города, Республики и других регионов; пациенты, самостоятельно обратившиеся в отделение для получения медицинских услуг по их желанию. Для получения направления на лечебные процедуры необходимо обратиться к лечащим врачам или к врачу-физиотерапевту.

Специалисты физиотерапевтического отделения

Договор на получение платной медицинской услуги и оплата производится в кассе поликлиники, кабинет №201 (2 этаж).
За дополнительной информацией обратитесь в кассу поликлиники +7 (8552) 51-10-88 или по телефону +7 (8552) 51-50-50.

Правила поведения пациентов в физиотерапевтическом отделении.

1. Факт ознакомления с правилами скрепляется подписью пациента в направлении.

2. Пациент несет ответственность за достоверность сообщенной информации врачу или медсестре кабинета о состоянии своего здоровья. Пациент должен предоставить следующие сведения:

— страдает ли онкологическими заболеваниями, имеет ли доброкачественные опухоли (кисту, полип, липому, миому, аденому и другие),

— страдает ли эпилепсией,

— страдает ли непереносимостью электрического тока,

— наличие кардиостимулятора,

— наличие операции с применением металлических конструкций, танталовых швов, пулевых или осколочных ранений.

— для женщин репродуктивного периода — наличие беременности. На весь период физиотерапии необходима контрацепция.

3. Получив направление от врача необходимо предварительно записаться на процедуры в кабинете. На лечение следует приходить в назначенное время; иметь чистую простыню, сменную обувь или бахилы, обувь можно в пакете взять с собой в кабинку. При неявке на процедуру в назначенный день и время без предупреждения, пациент снимается с лечения.

4. В случае плохого самочувствия перед процедурой и во время процедуры пациент обязан сообщить об этом медицинской сестре.

5. Не разрешается принимать физиотерапию в дни проведения ФЛГ, рентген, КТ, МРТ, в дни стрессовых нагрузок. Во время менструаций не разрешается принимать процедуры на живот и пояснично-крестцовую область.

6. Не разрешается принимать физиотерапию в нетрезвом виде.

7. Не заходить в кабинет без приглашения медсестры. Нельзя касаться пациентов, получающих процедуры. Категорически запрещается во время процедуры вставать, менять положение, прикасаться к аппарату, проводам, щиткам, розеткам.

8. Перед процедурой снять металлические предметы (ювелирные изделия, часы др.), их хранить в своей сумке. За эти изделия сотрудники отделения ответственности не несут.

9. До процедуры, необходим отдых в течении 7-10 минут, а после процедуры — в течение 15-30 минут.

10. В отделении следует соблюдать тишину.

11. При дарсонвализации волосистой части головы волосы должны быть сухими, чистыми, не обработаны лаком, гелями. Кожа должна быть сухой, без мазей и кремов.

12. При светолечении (УФО, лазер, биоптрон) обязательна защита глаз: на луч не смотреть, одеть защитные очки (УФО), снять контактные линзы и закрыть глаза (при биоптронтерапии области лица).

13. Во время процедур не разрешается пользоваться сотовым телефоном.

14. Физиолечение не проводится натощак и не ранее, чем через 1 час после еды.

15. Пациент, принимающий лечение обязан соблюдать правила личной гигиены: чисто вымыт и чисто одет.

Соблюдение правил является залогом успешного лечения!

Договор на получение платной медицинской услуги и оплата производится в кассе поликлиники, кабинет №203 (2 этаж).
За дополнительной информацией обратитесь в кассу поликлиники +7 (8552) 51-10-88 или по телефону +7 (8552) 51-50-50.

Электрофорез в лечении ЛОР-заболеваний | Наши услуги

Электрофорез — один из вариантов физиотерапевтического лечения электрическим током, с его помощью в патологическом очаге можно создать высокую концентрацию лекарственных веществ.

Практически очень мало заболеваний при которых электрофорез не может быть использован. Лекарственный электрофорез применяется в терапии неврологических, терапевтических, хирургических, гинекологических, а также в травматологии, педиатрии и стоматологии.

Преимущества

• эффективно
• безболезненность процедуры
• прологированное действие лекарственных веществ в созданном депо
• поступление лекарственных препаратов в чистом виде минуя желудочно-кишечный тракт
• под воздействием самого гальванического тока происходит расширение кровеносных сосудов, усиление кровотока, быстрее проходят процессы регенерации.

Показания к применению в лечении ЛОР-заболеваний

Электрофорез — надежный, испытанный десятилетиями помощник врача в борьбе с заболеваниями ЛОР органов. Лекарственный электрофорез широко применяется при лечении ЛОР-заболеваний:

• ринит
• фарингит
• тонзиллит
• отит
• гайморит
• фронтит.

Противопоказания

Лекарственный электрофорез – достаточно универсальный и доступный способ физиолечения, но у него имеется ряд противопоказаний. К ним относятся:

• опухоли любой локализации и этиологии
• сердечная недостаточность
• наличие искусственного водителя ритма (кардиостимулятор)
• воспалительный процесс в фазе обострения
• повышенная температура тела
• бронхиальная астма (тяжелая форма)
• нарушения свертываемости крови (повышенная кровоточивость, склонность к кровотечениям)
• кожные патологии (экзема, дерматит)
• нарушение чувствительности кожных покровов
• механические повреждения в области наложения лекарственных прокладок (ранки, порезы, ссадины)
• непереносимость электрического тока
• аллергия на лекарственный препарат, который требуется ввести с помощью электрофореза.

Оториноларинголог, гирудотерапевт

Стаж работы 25 лет

Старшая медицинская сестра

Стаж работы 30 лет

» Электрофорез

Лекарственный электрофорез – физиотерапевтический метод введения в организм лекарственных веществ (через кожу или слизистые оболочки) с помощью постоянного электрического тока.

Терапевтический эффект электрофореза:

Улучшение кровообращения.
Стимуляция лимфообращения.
Активация трофических процессов
Увеличение в тканях АТФ и кислорода.
Оказывает противовоспалительное и рассасывающее действие.
Стимулирует регенерацию костной ткани.

Преимущества лечения методом лекарственного электрофореза:

введение лекарства в организм в малых, но достаточно эффективных дозах
возможность создать депо лекарственного вещества в коже на 1-3 суток, из которого препарат будет медленно поступать в организм
возможность создания высокой местной концентрации лекарства без насыщения им лимфы, крови и других сред организма
возможность введения вещества непосредственно в очаг воспаления
не раздражает слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта
благотворное влияние слабого электрического тока на клеточный иммунитет

Показания к электрофорезу:

Неврология: невриты, невралгии, нейромиозит, радикулит, неврозы, неврастения, мигрень, органические заболевания центральной нервной системы
Кардиология: гипертоническая болезнь Iи II стадии, хроническая ишемическая болезнь сердца вне обострения
Терапия: острый и хронический бронхиты, пневмония, бронхиальная астма
ЛОР: отит, тонзиллит, гайморит, фарингит
Гинекология: эндометриоз, эрозия шейки матки, кольпит, цервицит, эндометрит
Урология: цистит, простатит, пиелонефрит
Гастроэнтерология: колиты, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, гастрит с повышенной и пониженной секрецией, холецистит, дискинезия желчного пузыря
Хирургия: послеоперационные раны, последствия ожогов
Дерматология: себорея, постугревые рубцы, купероз

Противопоказания к лечению:

лихорадка, индивидуальная непереносимость тока, нарушение целостности кожного покрова, экзема, острый дерматит, острые гнойные заболевания, тяжелые нарушения кровообращения, злокачественные опухоли, вторая половина беременности, туберкулез, аллергия на вводимое лекарство.

Электрофорез в стоматологии.

Показания для электрофореза в стоматологии:

Хронические воспалительные процессы.
Гингивиты.
Пародонтиты.
Пародонтоз.
Заболевания зубов (кариес, некариозные поражения, пульпиты, периодонтиты).
Заболевания слюнных желез.

Электрофорез при заболеваниях опорно-двигательного аппарата.

Наиболее часто встречающимся заболеванием ОДА является деформирующий остеоартроз и хронический спондиллез, а также посттравматические артрозы и артрозо-артриты, при которых чаще всего страдают крупные суставы нижних конечностей (коленный, голеностопный, тазобедренный).

При деформирующем остеоартрозе, хроническом спондиллезе и посттравматических артрозах коленного, голеностопного, локтевого, плечевого, лучезапястного суставов, мелких суставов кистей и стоп в фазе обострения применяется электрофорез местноанестезирующих средств, анальгетиков и противовоспалительных средств (новокаина, анальгина, баралгина, салицилата натрия). Вне периода обострения больным артрозами показан электрофорез средств, улучшающих состояние и питание суставных хрящей и околосуставных тканей, местное кровообращение (сера, цинк, литий, йод, никотиновая кислота, экстракт алоэ, лечебная грязь или грязевые отжимы).
Методики лекарственного электрофореза:

• Гальванизация.
• Электрофорез новокаина.
• Электрофорез анальгина, баралгина
• Двуполярный электрофорез новокаина и анальгина.
• Электрофорез серы.
• Электрофорез алоэ
• Электрофорез бишофита.

Электрофорез при бронхите

Хронический бронхит – это воспалительное заболевание дыхательных путей, характеризующееся диффузным неаллергическим воспалением бронхов. Хронический бронхит представляет собой, как правило, необратимое поражение бронхов, которое нередко приводит к прогрессирующим нарушениям функции дыхания и кровообращения. Хронический бронхит – одно из самых распространенных заболеваний в мире.
В качестве дополнительного метода лечения хронического бронхита достаточно хорошо зарекомендовал себя лекарственный электрофорез . Такое положение электрофорез занял благодаря своим положительным свойствам – возможность создания высокой концентрации лекарственного препарата в очаге воспаления, без насыщения им организма в целом.
Методики лекарственного электрофореза:

• Электрофорез с эуфиллином
• Электрофорез с гепарином
• Электрофорез с мирамистином
• Электрофорез с хлоридом кальция

Пройти процедуры электрофореза и/или гальванизации при различных заболеваниях вы можете в кабинете физиотерапии медицинского центра «ЗДРАВГОРОД». Наши специалисты работают на хорошо зарекомендовавшем себя аппарате «Поток-1», оборудованном всеми необходимыми электродами для физиотерапевтического воздействия. Подробности выполнения методики электрофореза, показания и противопоказания Вы можете узнать у специалистов медицинского центра «ЗДРАВГОРОД»

Оценка лечебного эффекта эндоназального электрофореза с метилэтилпиридинолом при частичной атрофии зрительного нерва | Разумовская

1. Никифоров А.С. Нейроофтальмология. Москва: 2008:228. [Nikiforov A.S. Nejrooftal’mologija. Moscow: 2008:228. (In Russ.)]

2. Тахчиди Х.П., Иойлева Е.Э., Дугинов А.Г., Зеленцов С.Н. Клинико-функциональные результаты комбинировнного метода лечения атрофии зрительного нерва. Офтальмохирургия. 2009;3:25–30. [Tahchidi H.P., Ioyleva E.E., Duginov A.G., Zelentsov S.N. Clinical and functional results of the combined method of treating optic atrophy. Ophthalmosurgery=Oftal’mokhirurgiya. 2009;3:25–30. (In Russ.)]

3. Либман Е. С., Шахова Е. В. Слепота и инвалидность вследствие патологии органа зрения в России. Вестник офтальмологии. 2006;1:35–37. [Libman E. S., Shahova E. V. Blindness and disability due to pathology of the organ of vision in Russia. Annals of Ophthalmology =Vestnik oftal’mologiiю 2006;1:35–37. (In Russ.)]

4. Athappilly G., Pelak V.S., Mandava N., Bennett J.L. Ischemic optic neuropathy. Neurol. Res. 2008; 30(8):794–800. DOI: 10.1179/174313208X319107

5. Boor K., Kovács K., Rózsa A., Pánczél G., Szilvássy I., Gács G. Posterior ischemic optic neuropathy. Ideggyogy Sz. 2009;62(5–6):191–4.

6. Hayreh S.S. Pathogenesis of nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy. Arch. Ophthalmol. 2009;127(8):1082–4.

7. Unsold R. Anterior ischemic optic neuropathy: Etiology, pathogenetic mechanisms and therapy. Ophthalmologe. 2008;105(9):867–82. DOI: 10.1007/s00347-008-1814-z

8. Мезенцева В.С. Современные подходы к лечению частичной атрофии зрительного нерва физическими факторами (обзор литературы). Точка зрения. Восток — Запад. Российская офтальмология онлайн. 2016;2(101–103). [Mezenceva V.S. Modern approaches to the treatment of partial atrophy of the optic nerve by physical factors (literature review). Point of view. East—West. Russian ophthalmology online=Tochka zrenija. Vostok — Zapad. 2016;2(101–103). (In Russ.)] DOI: 10.25276/2410-1257

9. Каменских Т.Г., Егоров Е.А., Серянов Ю. В. Исследование транспорта лекарственных препаратов, используемых в лечении частичной атрофии зрительного нерва, под влиянием физиовоздействий. Российский медицинский журнал. Клиническая офтальмология. 2007;8(2):45–47. [Kamenskikh T.G., Egorov E.A., Seryanov Yu. V. A study of the transport of drugs used in the treatment of partial optic nerve atrophy, under the influence of physical activity. Russian Medical Journal. Clinical ophthalmology=Rossiyskiy meditsinskiy zhurnal. Klinicheskaya oftal’mologiya. 2007;8(2):45–47. (In Russ. )]

10. Непомнящих В.А. Клеточные биорегуляторы в комплексной терапии глазных болезней. Монография руководство. Москва: РегБиоМед, 2010:67, 87–89. [Nepomnjashhih V.A. Cellular bioregulators in the complex therapy of eye diseases. Moscow: RegBioMed, 2010:67, 87–89. (in Russ.)]

11. Гаваа Лувсан. Традиционные и современные аспекты восточной рефлексотерапии. 3е изд. Москва: Наука, 1992. [Gavaa Luvsan. Traditional and modern aspects of oriental reflexology. 3rd ed. Moscow: Science. (In Russ.)]

12. Иглоукалывание; под общей редакцией Хоанг Бао Тяу, Ла Куанг Ниеп. Москва: Медицина, 1989. [Acupuncture; under the general editorship of Hoang Bao Tiau, La Quang Niep. Moscow: Medicine, 1989. (In Russ.)]

13. Seiff S.R. High dose corticosteroids for treatment of visial loss due to the indirect injury to the optic nerve. Ophthalmic surgery lasers. 1990; 21:389–95.

14. Atkins E.J., Bruce B.B., Newman N.J., Biousse V. Translation of clinical studies to clinical practice: survey on the treatment of nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy. Am. J. Ophthalmol. 2009;148(5):809. DOI: 10.1016/j.ajo.2009.07.003

15. Jung C.S. Visual function in anterior ischemic optic neuropathy: effect of Vision Restoration Therapy a pilot study. Neurol. Sci. 2008;268(1–2):145–9. DOI: 10.1016/j.jns.2007.12.001

16. Дугинов А.Г., Иойлева Е.Э., Шацких А.В., Зеленцов С.Н., Диденко Т.В. Экспериментально клиническое обоснование комбинированного метода лечения частичной атрофии зрительного нерва. Офтальмохирургия. 2008;(5):24–28. [Duginov A.G., Iojleva E.Je., SHackih A.V., Zelncov S.N., Didenko T.V. Experimental clinical substantiation of the combined method of treatment of partial atrophy of the optic nerve. Ophthalmosurgery=Oftal’mokhirurgiya. 2008;(5):24–28. (In Russ.)]

17. Долгова И.Г., Малишевская Т.Н., Лазарева А.С., Антипина Н.А., Малишевская О.И., Комольцева Е.А. Опыт применения препарата Танакан методом эндоназального электрофореза в лечении больных первичной открытоугольной глаукомой. Эффективная фармакотерапия. Офтальмология. 2014;1(30). [Dolgova I.G., Malishevskaja T.N., Lazareva A.S., Antipina N.A., Malishevskaja O.I., Komol’ceva E.A. The experience of using Tanakan by the method of endonasal electrophoresis in the treatment of patients with primary open-angle glaucoma. Effective pharmacotherapy. Ophthalmology=Effektivnaya farmakoterapiya. Oftal’mologiya. 2014;1(30). (In Russ.)]

18. Морозова Н.В., Новиков Д.П., Соколов В.О., Флоренцева С.С. Эффективность лечения ВМД сухой формы методом эндоназального электрофореза препаратом Ретиналамин. Офтальмологические ведомости. 2009;2(3):40–45. [Morozova N.V., Novikov D.P., Sokolov V.O., Florenceva S.S. The effectiveness of treatment of AMD dry form by the method of endonasal electrophoresis with Retinalamin. Ophthalmology journal=Oftal’mologicheskie vedomosti. 2009;2(3):40– 45. (In Russ.)]

19. Рахимкулов А.С., Борисова Н.А., Качемаев В.П. Результаты лечения начальных форм сосудистых заболеваний головного мозга с использованием йодобромных ванн и церулоплазмина. Медицинский Вестник Башкортостана. 2014;9(3):88–91. [Rakhimkulov A.S., Borisova N.A., Kachemaev V.P. Results of treatment of initial forms of cerebrovascular diseases using iodide-bromine baths and ceruloplasmin. Bashkortostan Medical Journal=Meditsinskii Vestnik Bashkortostana. 2014;9(3):88–91. (In Russ.)]

20. Разумовский М.И., Колюка О.Е., Разумовская А.М. Оценка трудовых возможностей инвалидов по зрению комплексным электрофизиологическим и офтальмоэргономическим методом. Офтальмология. 2014;11(1):52–56. [Razumovskij M.I., Koljuka O.E., Razumovskaja A.M. Assessment of the work ability of the visually impaired by a complex electrophysiological and ophthalmoergonomic method. Оphthalmology in Russia=Oftal’mologiya. 2014;11(1):52–56. (In Russ.)] DOI: http://dx.doi.org/10.18008/1816-5095-2014-1-58-61

21. Разумовский М.И., Разумовская А.М. Оценка зрительных возможностей в трудовом процессе инвалидов по зрению. Офтальмология. 2014;11(1):58–61. [Razumovskij M.I., Razumovskaja A.M. Assessment of visual opportunities in the work process of the visually impaired. Оphthalmology in Russia=Oftal’mologiya 2014;11(1): 58–61. (In Russ. )] http://dx.doi.org/10.18008/1816-5095-2014-1-58-61

22. Пономаренко Г.Н. Инновационные технологии физиотерапии. Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. 2009;4:3- 8. [Ponomarenko G.N., Innovative technologies of physiotherapy. Problems of Balneology, Physiotherapy, and Exercise Therapy=Voprosy kurortologii, fizioterapii i lechebnoi fizicheskoi kul’tury. 2009;4:3–8. (In Russ.)]

Электрофорез в агарозном геле | Bio-Rad

Электрофорез в агарозном геле на ДНК, РНК или белок

Электрофорез в агарозном геле чаще всего используется для разделения смесей фрагментов ДНК различного размера, обычно после расщепления рестрикционными ферментами или ПЦР. Электрофорез в агарозном геле также можно использовать для разделения молекул РНК, если принять меры, чтобы избежать деградации РНК; в некоторых ограниченных применениях пептиды или белки также могут быть очищены электрофорезом в агарозном геле. Нуклеиновые кислоты обычно разделены по длине, хотя наличие или отсутствие вторичных структур, таких как те, которые наблюдаются в плазмидах с различной степенью суперспирализации ДНК, также влияет на скорость миграции во время электрофореза в агарозном геле.

Хотя электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE) может обеспечить более высокое разрешение, чем электрофорез в агарозном геле (то есть PAGE может обеспечить более чистое разделение молекул разного размера), электрофорез в агарозном геле имеет несколько важных преимуществ: один гель может разделить гораздо более широкий В диапазоне молекулярных размеров нуклеиновые кислоты легко визуализировать с помощью флуоресцентного окрашивания, а выделение полос ДНК для последующей очистки и использования проще и эффективнее.

Использование готовых агарозных гелей

Использование готовых агарозных гелей дает множество преимуществ. Основные преимущества сборных гелей включают в себя как скорость, так и уверенность в постоянных условиях работы при разных нагрузках и между экспериментами. Такая согласованность особенно полезна при проверке небольших изменений или сравнении большого числа образцов.

Готовые агарозные гели Bio-Rad обеспечивают разделение с высоким разрешением фрагментов ДНК длиной от 20 до 20 000 п.н. Готовые агарозные гели доступны с буфером ТАЕ или ТВЕ, 1% или 3% агарозы, с бромидом этидия или без него, и в диапазоне конфигураций лунок, от 8 лунок до 4 рядов по 26 лунок.Отобранные готовые агарозные гели доступны с интервалом между лунками, который разработан для высокопроизводительной загрузки с помощью многоканальной пипетки. Готовые агарозные гели Bio-Rad доступны в размерах, которые подходят для многих распространенных систем горизонтального гель-электрофореза, включая все системы горизонтального гель-электрофореза Bio-Rad.

Готовые агарозные гели ReadyAgarose ™

поставляются в готовых к загрузке прозрачных для УФ-излучения беговых лотках с люминесцентной нумерацией лунок, удобной функцией для идентификации образцов с большим количеством образцов или сложной схемой загрузки. Лотки также имеют флуоресцентную линейку вдоль одной стороны для удобного измерения миграции полос.

Еще одним преимуществом использования готовых гелей Bio-Rad для электрофореза в агарозном геле является то, что движущийся лоток фиксируется в коробках с гелем Mini-Sub cell GT. При использовании этой системы агарозные гели не могут сдвигаться во время загрузки образца, закрытия контейнера крышкой или на начальных этапах электрофореза. Система фиксирующих лотков предотвращает потерю образцов из лунок, а полосы остаются резкими, потому что все образцы остаются ограниченными в лунках до электрофореза в геле.

Гели агарозы в классе

Электрофорез в агарозном геле является отличным обучающим инструментом для учащихся лабораторных классов от средней школы до начальной школы. Широкий спектр практических занятий, включающих электрофорез в агарозном геле, подходит для обычных классов и может быть нацелен на множество различных уровней. Темы могут варьироваться от изучения молекулярного сита для определения красителей, используемых в конфетах, до клонирования или анализа продуктов ПЦР.

Bio-Rad предлагает широкий ассортимент продуктов для электрофореза в агарозном геле, а также постоянно растущее количество наборов, которые предоставляют как образовательные, так и развлекательные возможности. Доступна большая библиотека вспомогательных материалов, включая руководства, учебные планы и другие ресурсы, которые помогут в преподавании теории и практики молекулярной биологии в различных приложениях. Образовательные скидки доступны для квалифицированных преподавателей.

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
  браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файлах cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Гель-электрофорез — Conduct Science

1. Электрофорез в крахмальном геле

Крахмал гели первый гель, используемый в качестве матрицы носителя для зонного электрофореза. Гели крахмала получали с использованием растворимого картофельного крахмала в концентрации примерно 10-16% (мас. / Об.) В рабочем буфере для электрофореза. Раствор крахмала вскоре кипятили и разливали в пластиковый лоток с прорезями или прорезями наверху для нанесения образца. После электрофореза гель окрашивают совместимыми красителями, чтобы визуализировать картину разделения. ^[5] В настоящее время крахмальные гели были заменены агарозными и полиакриламидными гелями, которые имеют меньше вариаций от партии к партии, чем картофельный крахмал. ^[9]

2. Электрофорез в агарозном геле

Агароза — это природный линейный полисахарид, выделенный из агара с красными водорослями. Он состоит из чередующихся цепей 1,3-связанной β-D-галактозы и 1,4-связанной 3,6-ангидрогалактозы. Гель агарозы готовят так же, как гель крахмала, с использованием лотка для литья, содержащего гребешок, который формирует прорези или лунки для каждого образца. Концентрация агарозы определяет разрешающую способность электрофореза: чем выше концентрация, тем больше разрешающая способность. ^[9] Электрофорез в агарозном геле — это предпочтительная матрица для электрофоретического разделения линейных фрагментов нуклеиновых кислот. Обычно он подходит для разделения фрагментов ДНК в диапазоне от 100 пар оснований до 20 пар оснований. ^[7] Более крупные фрагменты ДНК обычно разделяют с помощью гель-электрофореза в импульсном поле, модифицированной версии гель-электрофореза. ^[8]

Применение электрофореза в агарозном геле

Помимо нуклеиновых кислот, электрофорез в агарозном геле применяется для электрофоретического разделения белков.Низкая концентрация агарозного геля может быть использована для изоэлектрической фокусировки (IEF), формы электрофореза, который разделяет амфотерные молекулы на основе их изоэлектрической точки (pI). ^[8] Недавно была разработана система агарозного геля в сочетании с додецилсульфатом натрия (SDS) для разделения крупных белков в диапазоне от 200 до 4000 кДа. ^[2]

3. Электрофорез в полиакриламидном геле

Полиакриламид относится к продукту полимеризации мономеров акриламида в присутствии бисакриламида (N, N-метилен-бисакриламида), сшивающего агента.Реакция катализируется персульфатом аммония (APS) и N, N, N ’, N’-тетраметилендиамином (TEMED), а концентрация полиакриламидного геля зависит от пропорции мономера акриламида и сшивающего агента, бисакриламида. ^[3] Для отливки полиакриламидного геля раствор для полимеризации наливают между двумя вертикальными стеклянными пластинами, которые размещены параллельно и герметично закрыты внизу, или стеклянной кассетой. Для вертикальной гелевой системы гребешок помещается поверх геля для создания лунок для образцов, в которые наносится и концентрируется отдельный образец.В горизонтальной гелевой системе образцы обычно наносят на поверхность полоски фильтровальной бумаги или других материалов, которые помещают непосредственно поверх геля. ^[8-9]

Применение электрофореза в полиакриламидном геле

Полиакриламидные гели применимы для электрофоретического разделения как нуклеиновых кислот, так и белков. Что касается нуклеиновых кислот, агарозные гели предпочтительнее из-за токсичности неполимеризованных полиакриламидных гелей и сложности получения полиакриламидных гелей.Тем не менее, полиакриламидные гели можно модифицировать для достижения более высокого разрешения. ^[8] Денатурирующий полиакриламидный гель, например, способен различать одноцепочечные молекулы ДНК, которые отличаются только одним нуклеотидом, что позволяет применять его для секвенирования Maxam-Gilbert и Sanger. ^[9]

Для белков полиакриламидные гели являются нормой для электрофоретического разделения, потому что они более приспособлены для учета нескольких аспектов характеристики белков.Например, белки можно различать на основе различий в их естественной структуре с использованием неденатурирующих или природных полиакриламидных гелей. ^[9] И наоборот, электрофоретическое разделение белков в зависимости от их размера достигается в полиакриламидных гелях с более высоким процентным содержанием (10-20%) с додецилсульфатом натрия (SDS), который денатурирует белки, позволяя белкам мигрировать на основе размер, а не телосложение. ^[8]

Электрофорез на практике: Руководство по методам и применению разделения ДНК и белков, 5-е издание

Предисловие XIX

Аббревиатуры, символы, единицы измерения XXI

Предисловие XXV

Часть I Основы 1

Введение 1

Принцип 1

Области применения 3

Образец 3

Electosndos 5

Список литературы 6

1 Электрофорез 7

1.1 Общие 7

1.1.1 Электрофорез в свободном растворе 7

1.1.2 Электрофорез в поддерживающей среде 12

1.1.3 Гель-электрофорез 13

1.1.3.1 Типы гелей 13

1.1.3.2 Приборы для гель-электрофореза 17

1.1.3.3 Условия тока и напряжения 17

1.1.4 Источник питания 19

1.1.5 Разделительные камеры 20

1.1.5.1 Вертикальные системы 20

1.1.5.2 Горизонтальные системы 21

1.1.2.2 Электрофорез в неограничивающих гелях 25

1.2.1 Электрофорез в агарозном геле 25

1. 2.1.1 Зонный электрофорез 25

1.2.1.2 Иммуноэлектрофорез 26

1.2.1.3 Аффинный электрофорез 27

1.2.2 Электрофорез с низким молекулярным молекулярным весом 28

1.3 Электрофорез в рестриктивных гелях 28

1.3.1 График Фергюсона 28

1.3.2 Электрофорез в агарозном геле 29

1.3.2.1 Белки 29

1.3.2.2 Нуклеиновые кислоты 29

1.3.3 Гель-электрофорез в импульсном поле 30

1.3.4 Электрофорез нуклеиновых кислот в полиакриламидном геле 32

1.3.4.1 Секвенирование ДНК 32

1.3.4.2 ДНК Типирование 34

1.3.4.3 Методы обнаружения мутаций 35

1.3.4.4 Денатурирующий ПААГ микросателлитов 37

1.3.4.5 Двумерный электрофорез ДНК 37

1.3.5 Электрофорез белков в полиакриламидном геле 37

1.3.5.1 Дисковый электрофорез 37

1.3.5.2 Градиентный гель-электрофорез 39

1.3.5.3 SDS-электрофорез 40

1.3.5.4 Катионный детергентный электрофорез 47

1.3.5.5 Голубой природный электрофорез 47

48 1. 3.5.6 Повторно гидратированный полиакриламид

1.3.5.7 Методы двумерного электрофореза 49

1.3.5.8 GeLC-MS 50

Ссылки 51

2 Изотахофорез 57

2.1 Миграция с той же скоростью 57

2.2 Разделение «ионной цепи» 59

2.3 Эффект резкости зоны 59

2.4 Эффект регулирования концентрации 59

2.5 Количественный анализ 60

Ссылки 61

3 Изоэлектрическая фокусировка 63

3.1 Принципы 63

3.2 Гели для IEF 65

3.2.1 Полиакриламидные гели 65

3.2.2 Агарозные гели 67

3.3 Температура 68

3.4 Управление градиентом pH 68

3.5 Виды градиентов pH 69

3.5.1 Амфолиты свободного носителя 69

3.5.1.1 Электродные растворы 70

3.5.1.2 Денатурация IEF: IEF мочевины 71

3.5.1.3 IEF сепаратора 72

3.5.1.4 Явление плато 73

3.5.1.5 Рабочий процесс теста IEF амфолита-носителя 73

3.5.2 Иммобилизованные градиенты pH (IPG) 73

3. 5.2.1 Приготовление иммобилизованных градиентов pH 75

3.5.2.2 Применение иммобилизованных градиентов pH 76

3.6 Обнаружение белка в гелях ИЭФ 77

3.7 Препаративное изоэлектрическое фокусирование 77

3.7.1 ИЭФ амфолита-носителя в геле 77

3.7.2 ИЭФ амфолита-носителя в свободном растворе 78

3.7.3 Иммобилизованные градиенты pH 78

3.7.3.1 Изоэлектрические мембраны 78

3.7.3.2 Off-Gel IEF 79

3.8 Анализ кривой титрования 80

Ссылки 82

4 Двумерный электрофорез высокого разрешения 85

4.1 ИЭФ в полосах с иммобилизованным градиентом pH 85

4.1.1 Длина полосок 86

4.1.2 Типы градиентов pH 86

4.1.3 Влияние солей и буферных ионов на разделение 87

4.1.4 Основные градиенты IPG 88

4.1.5 Преимущества полосок с иммобилизованным градиентом pH в 2D-электрофорезе 89

4.1.6 Регидратация полосок IPG 90

4.1.6.1 Основные градиенты pH 90

4. 1.6.2 Поднос для повторного использования 91

4.1.6.3 Покровная жидкость 91

4.1.6.4 Время регидратации 92

4.1.7 Нанесение образца на полоски IPG 92

4.1.8 Условия IEF 95

4.1.8.1 Электроды 95

4.1.8.2 Температура 95

4.1.8.3 Электрические условия 95

4.1.8.4 Время 96

4.1.9 Приборы 96

4.1.9.1 Принадлежность лотка для полосок 97

4.1.9.2 Специальные инструменты для полосок IPG 97

4.1.9.3 Запуск IEF в полосах IPG 97

4.2 SDS-PAGE 98

4.2.1 Уравновешивание полос IPG 98

4.2.2 Технические концепции для второго измерения (SDS-PAGE) 99

4.2.2.1 Вертикальные установки 99

4.2.2.2 Горизонтальная установка -up 99

4.2.3 Типы гелей 101

4.2.3.1 Размеры гелей 101

4.2.3.2 Вертикальные гели 101

4.2.3.3 Горизонтальные гели 102

4.2.4 Гелевые отливки 102

4.2.4.1 Гели для Несколько вертикальных систем 102

4. 2.4.2 Гели для горизонтальных систем 104

4.2.5 Запуск гелей SDS 105

4.2.5.1 Вертикальные системы 105

4.2.5.2 Горизонтальные системы 106

4.3 Протеомика 106

Ссылки 108

5 Приготовление образцов белка 111

5.1 Методы количественного определения белка 111

5.2 Приготовление исходных образцов 112

5.3 Образцы для SDS-электрофореза 113

5.3.1 SDS-обработка 113

5.3.1.1 Невосстанавливающая обработка SDS 114

5.3.1.2 Сокращение обработки SDS 115

5.3.1.3 Сокращение обработки SDS с последующим алкилированием 116

5.3.2 Очистка и обогащение белком 117

5.3.2.1 Осаждение 117

5.3 .2.2 Обогащение белка с помощью аффинных шариков 118

5.4 Образцы для 2D PAGE высокого разрешения 118

5.4.1 Промывание клеток 119

5.4.2 Разрушение клеток 119

5.4.3 Сбор и хранение образцов 119

5.4.4 Инактивация протеазы 122

5.4.5 Инактивация фосфатазы 122

5. 4.6 Щелочные условия 123

5.4.7 Удаление загрязняющих веществ 123

5.4.7.1 Методы осаждения 123

5.4.7.2 Аффинные шарики 125

5.4.8 Префракционирование 125

5.4.8.1 Истощение высоконасыщенных белков 125

5.4.8.2 Equalizer Technology 125

5.4.8.3 Подготовка клеточных органелл 126

5.4.8.4 Префракционирование по изоэлектрическим точкам 126

5.4.9 Особый случай: растительные белки 127

Ссылки 127

6 Обнаружение белков 131

6.1 Фиксация 131

6.1.1 Гели IEF 132

6.1.2 Агарозные гели 132

6.1.3 Полиакриламидные гели SDS 132

6.2 Методы последующего окрашивания 133

6.2.1 Органические красители 133

6.2.1.1 Монодисперсное окрашивание кумасси бриллиантовым синим 133

6.2.1.2 Окрашивание коллоидным кумасси бриллиантовым синим 133

6.2.1.3 Окрашивание кислотным фиолетовым 17 для гелей IEF 134

6.2.2 Окрашивание серебром 134

6. 2.2.1 Окрашивание коллоидным серебром 134

6.2.2.2 Окрашивание нитратом серебра 134

6.2.2.3 Окрашивание аммиакальным серебром 135

6.2.3 Отрицательное окрашивание 136

6.2.3.1 Окрашивание медью 136

6.2.3.2 Окрашивание имидазолом цинком 136

6.2.4 Флуоресцентное окрашивание 136

6.2.5 Специфическое обнаружение 138

6.2.5.1 Белки с посттрансляционными модификациями 138

6.2.5.2 Изоферменты 139

6.2.6 Технология без окрашивания 140

6.3 Предварительная маркировка 140

6.3.1 Предварительная маркировка флуоресцентными метками 140

6.3. 2 Радиоактивная маркировка живых клеток 141

6.3.3 Маркировка стабильными изотопами 141

6.4 Дифференциальный гель-электрофорез (DIGE) 143

6.4.1 Маркировка с минимальным содержанием лизина 143

6.4.2 Маркировка насыщения цистеином 144

6.4.3 Внутренний стандарт 146

6.4.4 Схема эксперимента 147

6.4. 5 Основные преимущества 2D DIGE 147

6.4.6 Специфическая маркировка белков клеточной поверхности 148

6.4.7 Сравнительный флуоресцентный гель-электрофорез 148

6.5 Визуализация, анализ изображений, выбор пятен 149

6.5.1 Количественная оценка 149

6.5.1.1 Предварительные требования для количественной оценки 149

6.5.1.2 Критические проблемы количественной оценки 150

6.5.2 Системы формирования изображений 151

6.5.2.1 Оптическая плотность 152

6.5.2.2 Денситометрия 152

6.5.2.3 Камеры CCD 153

6.5.3 Анализ изображения 154

6.5.3.1 Программное обеспечение для одномерного геля 155

6.5.3.2 Программное обеспечение для двумерного геля 156

6.5.4 Идентификация и характеристика белков 158

6.5.4.1 Выборка 159

Ссылки 160

7 Блоттинг 165

7 .1 Методы переноса 165

7.1.1 Диффузионный блоттинг 165

7.1.2 Капиллярный блоттинг 165

7. 1.3 Блоттинг под давлением 166

7.1.4 Вакуумный блоттинг 167

7.1.5 Электрофоретический блоттинг 168

7.1.5.1 Резервуар Блоттинг 168

7.1.5.2 Полусухой блоттинг 169

7.1.5.3 Электрофоретический блоттинг пленочных гелей 171

7.2 Мембраны для блоттинга 171

7.3 Буферы для электрофоретического переноса 172

7.3.1 Белки 172

7.3.1.1 Бак-блоттинг 172

7.3.1.2 Полусухой блоттинг 173

7.3.2 Нуклеиновые кислоты 174

7.3.2.1 Бак-блоттинг 174

7.3.2.2 Полусухой блоттинг 174

9000 174 9000 Общее окрашивание

7,5 Блокирование 175

7,6 Специфическое обнаружение 175

7.6.1 Гибридизация 175

7.6.2 Ферментный блоттинг 176

7.6.3 Иммуноблоттинг 176

7.6.4 Лектиновый блоттинг 179

7.6.5 Стриппинг, повторное зондирование 179

7.6.6 Двойной блоттинг 180

7.7 Секвенирование белков 180

7.8 Проблемы переноса 180

7.9 Электроэлюирование белков из гелей 181

Ссылки 183

Часть II Оборудование и методы

Оборудование 187

Методы 187

Малые молекулы 187

Белки 187

ДНК 188

Приборы 188

Принадлежности 189

Расходные материалы 190

80005 Расходные материалы

80004

10 Химическая промышленность 195

10. 1 Реагенты 195

Метод 1 СТРАНИЦА красителей 197

M1.1 Подготовка образца 197

Базовые растворы M1.2 197

M1.3 Подготовка кассеты для заливки 198

M1.3.1 Прокладка 198

M1.3.2 Паз -Former 198

M1.3.3 Сборка гелевой кассеты 199

M1.4 Отливка ультратонких слоев гелей 200

M1.5 Электрофоретическое разделение 201

M1.5.1 Удаление геля из кассеты 201

Метод 2 Агароза и иммуноэлектрофорез 205

M2.1 Подготовка образца 205

Исходные растворы M2.2 206

M2.3 Подготовка гелей 206

M2.3.1 Электрофорез в агарозном геле 206

M2.3.1.1 Подготовка формирователя щелей 207

M2.3.1.2 Сборка гелевой кассеты 207

M2.3.2 Гели для иммуноэлектрофореза 209

M2.3.2.1 Вырубка лунок и желобов для образцов 210

Электрофорез M2.4 211

M2.4.1 Метод Грабара – Вильямса 212

9000.4.2 Laurell Technique 212

Обнаружение белка M2.5 214

M2. 5.1 Окрашивание Кумасси (электрофорез на агарозе) 214

M2.5.2 Иммунофиксация агарозного электрофореза 214

M2.5000

M2.5000 M2.5000 Иммуноэлекторальная окраска 215 Окрашивание серебром 215

Ссылки 216

Метод 3 Анализ кривой титрования 217

M3.1 Подготовка образцов 217

Базовые растворы M3.2 217

M3.3 Подготовка холостых гелей 218

M3.3.1 Подготовка литейной кассеты 218

M3.3.2 Сборка гелевой кассеты 219

M3.3.3 Заполнение гелевой кассеты 220

M3.3.4 Удаление геля из кассеты 221

M3.3.5 Промывка геля 221

M3 .4 Анализ кривой титрования 222

M3.4.1 Восстановление регидратируемого геля 222

M3.4.2 Формирование градиента pH 222

M3.4.3 Нативный электрофорез в спектре pH 223

M3.5 Кумасси и окрашивание серебром 224 9000

м3.5.1 Коллоидное окрашивание кумасси 224

M3.5.2 Кислотно-фиолетовое 17 окрашивание 224

M3.5.3 Пятиминутное окрашивание высохших гелей серебром 225

M3. 6 Интерпретация кривых 225

Ссылки 227

Метод 4 Native PICAGE -Буферы 229

M4.1 Подготовка образца 230

Исходные растворы M4.2 230

M4.3 Подготовка пустых гелей 231

M4.3.1 Щелевой формирователь 231

M4.3.2 Сборка литейной кассеты 232

M4.3.3 Растворы для полимеризации 233

M4.3.4 Заполнение кассеты с охлажденным гелем 234

M4.3.5 Удаление геля с литейной кассеты 234

M4.3.6 Промывка геля 234

M4.4 Электрофорез 235

M4.4.1 Регидратация в амфотерных буферах 235

M4.5 Кумасси и окрашивание серебром 240

M4.5.1 Коллоидное окрашивание кумасси 240

M4.5.2 Кислотно-фиолетовый 17 окрашивание 240

M4.5.3 Пятиминутное эталонное окрашивание серебром 0006 9000 241 9 242

Метод 5 Агароза IEF 243

M5.1 Подготовка проб 243

M5.2 Подготовка агарозного геля 244

M5.2.1 Создание гидрофобной проставки 244

M5.2.2 Сборка кассеты для литья 244

M5. 2.3 Подготовка электродных растворов 246

M5.3 Изоэлектрическая фокусировка 247

Обнаружение белка M5.4 249

M5.4.1 Окрашивание кумасси синим 249

M5.4.2 Иммунофиксация 249

M5.4.3 Окрашивание серебром 250

Ссылки 251

Метод 6 PAGI M6.1 Пример подготовки 253

M6.2 маточных растворов 254

M6.3 Подготовка незаполненных Гели 254

M6.3.1 Изготовление Распорные плиты гидрофобной 254

M6.3.2 Сборка Кастинг Cassette 255

M6.3.3 Заполнение Кассета с гелем 256

M6.3.4 Удаление геля с литейной кассеты 257

M6.3.5 Промывание геля 257

M6.4 Изоэлектрическая фокусировка 257

M6.4.1 Раствор для регидратации с амфолитами-носителями (SERVALYT ™, Pharmalyte ™) 257

M6.4.2 Восстановление геля 257

M6.4.3 Разделение белков 259

M6.4.4 Нанесение образца 259

M6.5 Окрашивание кумасси и серебром 260

M6.5.1 Коллоидное окрашивание кумасси 260

M6. 5.2 Кислотно-фиолетовое пятно 17 261

M6.5.3 Пятиминутное окрашивание серебром высушенных гелей 261

M6.5.4 Наиболее чувствительная процедура окрашивания серебром для IEF 262

M6.6 Перспективы 264

Ссылки 266

Метод 7 Горизонтальная SDS-страница 267

М7.1 Подготовка образца 267

M7.1.1 Невосстанавливающая обработка SDS 267

M7.1.2 Сокращение обработки SDS 268

M7.1.3 Сокращение обработки SDS с помощью алкилирования 268

M7.2 Предварительная маркировка флуоресцентным красителем 269

M7.2.1 Маркировка

M7.2.2 Обнаружение 269

Исходные растворы M7.3 для приготовления геля 270

M7.4 Подготовка кассеты для заливки 271

M7.4.1 Подготовка формирователя паза 271

M7.4.2 Сборка литейной кассеты 272

M7.5 Градиентный гель 273

M7.5.1 Заливка градиента 273

M7.6 Электрофорез 277

M7.6.1 Подготовка разделительной камеры 277

M7.6.2 Размещение геля на Охлаждающая пластина 277

M7. 6.3 Электрофорез 278

M7.7 Обнаружение белка 279

M7.7.1 Горячее окрашивание кумасси 279

M7.7.2 Коллоидное окрашивание 280

M7.7.2.1 Базовые растворы 280

M7.7.2.2 Раствор для фиксации 280

M7.7.2.3 Окрашивающий раствор 280

M7.7.2.4 Процедура окрашивания 281

M7.7.3 Обратимое имидазол-цинковое отрицательное окрашивание 281

M7.7.4 Окрашивание серебром 281

M7. 7.4.1 Синее тонирование 282

M7.7.5 Флуоресцентное окрашивание с помощью SERVA Purple 283

M7.7.5.1 Стандартные растворы 283

M7.7.5.2 Протокол окрашивания 283

M7.7.5.3 Обнаружение 284

M7. 8 Блоттинг 284

M7.9 Перспективы 285

Характеристики геля M7.9.1 285

M7.9.2 Электрофорез SDS в промытых и регидратированных гелях 285

M7.9.3 Дисковый электрофорез SDS в регидратированном и селективно уравновешенном геле 285

M7.9.4 Pep 287

Метод 8 Вертикальный СТРАНИЦА 289

M8. 1 Подготовка проб и предварительная маркировка 290

Исходные растворы M8.2 для SDS-PAGE 290

M8.3 Литье в отдельный гель 291

M8.3.1 Прерывистые SDS-полиакриламидные гели 292

M8.3.2 Гели с градиентом пористости 293

M8.4 Множественное литье геля 295

M8.4.1 Множественные прерывистые полиакриламидные гели SDS 296

M8.4.2 Множественные гели SDS Gradient

.5 Электрофорез 299

M8.5.1 Условия работы 300

M8.6 SDS-электрофорез малых пептидов 301

M8.7 Blue Native PAGE 303

M8.8 Двумерный электрофорез 306

M8.9 Электрофорез ДНК 307

M8.10 Гели с длительным сроком хранения 308

M8.11 Обнаружение белка 308

M8.12 Подготовка стеклянных пластин со связующим силаном 308

M8.12.1 Покрытие стеклянной пластины связующим силаном 309

M8.12.2 Удаление геля и связующего силана со стеклянной пластины 309

Ссылки 310

Метод 9 Полусухой блоттинг белков 311

M9. 1 Буферы для переноса 313

M9.2 Техническая процедура 314

M9 .2.1 Гели без поддерживающей пленки 315

M9.2.2 Гели на пленочной основе 315

M9.2.2.1 Использование нитроцеллюлозной (NC) мембраны для блоттинга 316

M9.2.2.2 Использование мембраны для блоттинга из ПВДФ 316

M9.2.2. 3 Перенос из отрезных гелей 317

M9.3 Окрашивание блоттинговых мембран 318

Ссылки 320

Метод 10 ИЭФ в иммобилизованных градиентах pH 321

M10.1 Подготовка образца 322

Базовые растворы M10.2 322

M10.3 Immobiline Рецепты 323

M10.3.1 выполненная на заказ pH Градиенты 323

M10.4 Подготовка литья Cassette 327

M10.4.1 делая проставку Гидрофобный 327

M10.4.2 Сборка Кастинг Cassette 327

M10. 5 Приготовление гелей с градиентом pH 328

M10.5.1 Заливка градиента 328

M10.5.1.1 Установка устройства для заливки 328

M10.5.1.2 Заполнение кассеты 329

M10. 5.1.3 Промывка геля 331

M10.5.1.4 Хранение 332

M10.5.1.5 Регидратация 332

M10.6 Изоэлектрическая фокусировка 332

M10.6.1 Размещение геля на охлаждающей пластине 332

M10.6.2 Образец нанесения 335

M10.6.3 Электродные растворы 335

M10.6.4 Условия фокусировки 335

M10.6.5 Измерение градиента pH 336

Окрашивание M10.7 336

M10.7.1 Коллоидное окрашивание кумасси 336

M10.7.2 Кислотно-фиолетовый 17 Окрашивание 337

.7.3 Процедура окрашивания 337

M10.7.4 Серебряное окрашивание 337

M10.7.5 Практический совет 337

M10.8 Стратегии фокусировки IPG 337

Ссылки 339

Метод 11 2D-электрофорез высокого разрешения 341

Образец M11.1 Подготовка 342

M11.1.1 Очистка образца 343

M11.2 Предварительная маркировка белков флуоресцентными красителями 346

M11.2.1 Маркировка одного образца 346

M11.2.2 Маркировка DIGE 347

M11. 2.2.1 Схема эксперимента 347

M11.2.2.2 Подготовка образца 347

M11.2.2.3 Восстановление CyDyes 348

M11.2.2.4 Минимальная маркировка лизинов 349

M11.2.2.5 Маркировка насыщения цистеинов 350

M11.2.2.6 Подготовка к загрузке образцов на полоски IPG 351

M11.2.2.7 Обнаружение пятен DIGE 352

Исходные растворы M11.3 для приготовления геля 352

M11.4 Подготовка Гели 354

M11.4.1 Полоски IPG 354

M11.4.2 Полиакриламидные гели SDS 358

M11.5 Условия разделения 359

M11.5.1 Первое измерение (IPG-IEF) 359

M11.5.1.1 IPG-IEF с обычным оборудованием 360

M11.5.1.2 IPG-IEF с набором лент IPG (рисунок) 360

M11.5.1.3 IPG-IEF в отдельных керамических лотках 362

M11.5.1.4 Оборудование и лотки для загрузки стаканов 363

M11.5.2 Уравновешивание 366

M11.5.3 Второе измерение (электрофорез SDS) 366

M11.5.3.1 Вертикальные гели 366

M11.5.3.2 Горизонтальные гели 367

M11. 6 Процедуры окрашивания 370

M11.6.1 Окрашивание множественных гелей 371

M11.6.2 Коллоидное окрашивание кумасси 371

M11.6.2.1 Базовые растворы 371

M11.6.2.2 Fixation Solution 372

M11.6.2.3 Окрашивающий раствор 372

M11.6.2.4 Процедура окрашивания: 372

M11.6.3 Обратимое имидазол-цинковое отрицательное окрашивание 372

M11.6.4 Окрашивание серебром 373

M11.6.4.1 Масс-спектрометрический анализ пятен, окрашенных серебром 374

M11.6.4.2 Синее тонирование 374

M11.6.5 Флуоресцентное окрашивание с помощью SERVA Purple 374

M11.6.5.1 Исходные растворы 374

M11.6.5.2 Протокол окрашивания 375

M11.6.5.3 Обнаружение 376

Ссылки 377

Фрагменты ДНК метода 12 379

Базовые растворы M12.1 380

M12.2 Подготовка гелей 381

M12.3 Подготовка образцов 385

M12.4 Электрофорез 386

M12.5 Окрашивание серебром 391

Приложение Устранение неисправностей 393

A1. 1 Частые ошибки 393

A1.1.1 Ошибки при расчете фактора сшивки полиакриламидного геля 393

A1.1.2 Температура и время полимеризации полиакриламидного геля 393

A1.1.3 Создание агрегатов в образцах SDS 394

A1.1.4 Титрование рабочего буфера в SDS-электрофорезе 394

A1.1.5 Неполное удаление PBS из клеток 395

A1.1.6 Чрезмерная фокусировка полосок IPG в 2D PAGE 395

A1.1.6.1 Деградация белка в основных градиентах pH 395

A1.1.6.2 «Эффект тиомочевины» 395

A1.2 Изоэлектрическое фокусирование 396

A1.2.1 PAGIEF с амфолитами-носителями 396

A1.2.2 IEF агарозы с амфолитами-носителями 402

A1.2.3 Иммобилизованные градиенты pH 405

A1.3 SDS-электрофорез

4000.3.1 Горизонтальный SDS-PAGE 410

A1.3.2 Вертикальный PAGE 418

A1.4 Двумерный электрофорез 419

A1.5 Полусухой блоттинг 426

A1.6 ДНК-электрофорез 431

Индекс 435

Электрофорез для вестерн-блоттинг | Abcam

Приготовление гелей для ПААГ

Полиакриламидные гели образуются в результате полимеризации двух соединений, акриламида и N , N ‘-метиленбисакриламида (кратко бис). Бис представляет собой сшивающий агент для гелей. Полимеризация инициируется добавлением персульфата аммония (APS) вместе с DMAP или TEMED. Гели представляют собой нейтральные гидрофильные трехмерные сети из длинных углеводородов, поперечно сшитых метиленовыми группами.

Разделение молекул внутри геля определяется относительным размером пор, образующихся внутри геля. Размер пор геля определяется двумя факторами: общим количеством присутствующего акриламида (обозначенным как% T) и количеством сшивающего агента (% C).По мере увеличения общего количества акриламида размер пор уменьшается. При сшивании 5% C дает наименьший размер пор. Любое увеличение или уменьшение% C увеличивает размер пор.

гелей можно приобрести в готовом виде или изготовить в лаборатории (рецепты можно найти в лабораторных справочниках) и ознакомиться с нашим руководством по химии гелей и буферам.

В лаборатории Abcam используются гели из линейки Optiblot. В любом случае тщательно выбирайте процентное содержание геля, так как это определит скорость миграции и степень разделения между белками.

Чем меньше размер интересующего белка, тем выше процентное содержание акриламида / бис. Чем больше размер интересующего белка, тем ниже процентное содержание акриламида / бис.

Ниже приводится приблизительное руководство по выбору подходящего процентного содержания геля в зависимости от размера белка. Также доступны градиентные гели.

5%

Размер белка	Процент гелевого акриламида
4–40 кДа	20%
12–45 кДа	15%
15–100 кДа	10%
25–200 кДа	8%

Акриламид — мощный кумулятивный нейротоксин: всегда надевайте перчатки.

Поместите гели в резервуар для электрофореза в соответствии с инструкциями производителя и погрузите в буфер для миграции.

---

Положительные контроли

Лизат положительного контроля можно использовать для демонстрации того, что протокол является эффективным и правильным, и что антитело распознает целевой белок, который может отсутствовать в экспериментальных образцах.

Мы настоятельно рекомендуем использовать лизат положительного контроля при настройке нового эксперимента; это сразу придаст вам уверенности в протоколе.

---

Маркеры молекулярной массы

Ряд маркеров молекулярной массы позволит определить размер белка (см. Ниже), а также позволит вам контролировать ход электрофоретического анализа. В продаже имеется ряд маркеров молекулярной массы.

У нас есть следующие маркеры молекулярной массы:

Маркер молекулярной массы (ab48854)
Prism Protein Ladder (10-175 кДа) (ab115832)
Prism Ultra Protein Ladder (10-180 кДа) (ab116027)
Prism Ultra Белковая лестница (10-245 кДа) (ab116028)
Prism Ultra Protein Ladder (3. 5-245 кДа) (ab116029)

Загрузка образцов и прогон геля

Используйте специальные наконечники для загрузки геля или микрошприц, чтобы загрузить весь образец в лунки. Старайтесь не касаться дна лунок кончиком, так как это создаст искаженную полосу.

Никогда не переполняйте колодцы. Это может привести к плохим данным и плохо разрешенным полосам, если пробы попадут в соседние скважины.

Загрузите 20–40 мкг общего белка на лунку мини-геля.

Гели следует погрузить в буфер для миграции, обычно содержащий SDS, за исключением электрофореза в нативном геле.

Стандартный буфер миграции (также называемый рабочим буфером) для PAGE представляет собой 1x Трис-глицин:

25 мМ Трис-основание
190 мМ глицин
0,1% SDS
Проверьте pH; оно должно быть около 8,3.

Запустите гель в течение рекомендованного времени в соответствии с инструкциями производителя; это может варьироваться от машины к машине (от 1 часа до ночи в зависимости от напряжения).

Когда краситель (фронт миграции) достигнет дна геля, выключите питание. В этот момент белки будут медленно элюироваться из геля, поэтому не храните гель; немедленно приступить к передаче.

Элементы управления загрузкой

Элементы управления загрузкой необходимы для обеспечения того, чтобы дорожки в вашем геле были равномерно загружены образцом, особенно когда необходимо проводить сравнение уровней экспрессии белка в разных образцах. Они также полезны для проверки равномерного перехода от геля к мембране по всему гелю.

Если даже загрузка или перенос не произошли, полосы контроля загрузки можно использовать для количественного определения количества белка на каждой дорожке.Для качественной работы публикаций абсолютно необходимо использовать контроль загрузки.

Посетите наше руководство по контролю загрузки.

В следующей таблице содержится информация об общих средствах контроля загрузки:

экспрессия антимикробного скелета

может варьироваться в зависимости от экспрессии 911икробного

к1190 антимиотические препараты (Sangrajang S et al. , 1998; Prasad V et al. , 2000).

Изменения в условиях роста клеток и взаимодействия с компонентами внеклеточного матрикса могут происходить после синтеза белка актина (Farmer et al. , 1983).

TBP

Ядерная ДНК удален.

Мембрана

911-Na90

Контроль нагрузки	Тип образца	Молекулярный вес	Осторожно
Винкулин	Целые клетки	125 кДа		90 Циклофилин	Целые клетки	24 кДа
GAPDH	Целые клетки	35 кДа	Некоторые физиологические факторы, такие как гипоксия и диабет, увеличивают экспрессию GAPDH в определенных типах клеток.
Кофилин	Целые клетки Ядерные Мембрана Цитоскелет	19 кДа
Альфа-тубулин	Целые клетки Цитоскелет
Бета тубулин	Целые клетки Цитоскелет	50 кДа	Экспрессия тубулина может варьироваться в зависимости от устойчивости к противомикробным и антимиотическим препаратам (Sangrajang S et al ., 1998; Prasad V et al. , 2000).
Актин	Целые клетки Цитоскелет	42 кДа
Бета-актин	Образцы цельных мышц Цитоскелет	40 кДа Не подходит для скелета
VDAC1 / Porin	Митохондриальный	30 кДа
ЦОГ IV	Митохондриальный	20 кДа	16X IV белки такого же размера.
HSP60	Митохондриальная Мембрана	60 кДа
Ламин B1	Ядерный	66 кДа	Не подходит для образцов, где удалена ядерная оболочка.
HDAC1	Ядерная	55 кДа
YY1	Ядерная	45 кДа
PCNA	Ядерный	30 кДа
Cdk4	Ядерный Мембрана	34 кДа 911-Na90	11090
Трансферрин	Сыворотка	75 кДа

25.

2: Изоэлектрические точки и электрофорез

Объективы

После заполнения этого раздела вы сможете:

1. изобразить преобладающую форму данной аминокислоты в растворе с известным pH, учитывая изоэлектрическую точку аминокислоты.
2. кратко описывают, как смесь аминокислот может быть разделена электрофорезом на бумаге.

Ключевые термины

Убедитесь, что вы можете определить и использовать в контексте следующие ключевые термины.

• электрофорез
• изоэлектрическая точка

Поскольку аминокислоты, а также пептиды и белки включают в себя как кислотные, так и основные функциональные группы, преобладающие молекулярные частицы, присутствующие в водном растворе, будут зависеть от pH раствора.-]} \]

Кривая титрования аланина на рисунке \ (\ PageIndex {2} \) демонстрирует эту взаимосвязь. При pH ниже 2 протонируются как карбоксилатная, так и аминная функции, поэтому молекула аланина имеет общий положительный заряд. При pH более 10 амин существует как нейтральное основание, а карбоксил как его сопряженное основание, поэтому молекула аланина имеет чистый отрицательный заряд. При промежуточных значениях pH концентрация цвиттер-иона увеличивается, а при характерном pH, называемом изоэлектрической точкой ( pI ), отрицательно и положительно заряженные молекулярные частицы присутствуют в равных концентрациях.Такое поведение является общим для простых (дифункциональных) аминокислот. Начиная с полностью протонированного состояния, кислотные функции pK _a находятся в диапазоне от 1,8 до 2,4 для -CO ₂ H и от 8,8 до 9,7 для -NH ₃ ⁽⁺⁾ . Изоэлектрические точки находятся в диапазоне от 5,5 до 6,2. Кривые титрования показывают нейтрализацию этих кислот добавлением основания и изменение pH во время титрования.

Рисунок \ (\ PageIndex {1} \): кривые титрования для многих других аминокислот можно изучить на полезном сайте, предоставленном Университетом Вирджинии в Шарлоттсвилле.

Распределение заряженных частиц в образце может быть показано экспериментально, наблюдая за движением молекул растворенного вещества в электрическом поле, используя метод электрофореза (Рисунок \ (\ PageIndex {2} \)). Для таких экспериментов ионный буферный раствор включается в твердый матричный слой, состоящий из бумаги или сшитого желатиноподобного вещества. Небольшое количество образца аминокислоты, пептида или белка помещается рядом с центром полоски матрицы, и к концам полоски прикладывается электрический потенциал, как показано на следующей диаграмме.Твердая структура матрицы замедляет диффузию растворенных молекул, которые останутся там, где они вставлены, если только на них не действует электростатический потенциал.

Рисунок \ (\ PageIndex {2} \): В показанном здесь примере четыре различных аминокислоты исследуются одновременно в буферной среде с pH 6,00. Чтобы увидеть результат этого эксперимента, щелкните иллюстрацию. Обратите внимание, что цвета на дисплее являются лишь удобной справочной информацией, поскольку эти аминокислоты бесцветны.

При pH 6.00 аланин и изолейцин существуют в среднем как нейтральные цвиттерионные молекулы и не подвержены влиянию электрического поля. Аргинин — основная аминокислота. Обе основные функции существуют в виде «ониевых» конъюгированных кислот в матрице с pH 6,00. Поэтому растворенные молекулы аргинина несут избыточный положительный заряд и движутся к катоду. Две карбоксильные функции в аспарагиновой кислоте ионизируются при pH 6,00, и отрицательно заряженные молекулы растворенного вещества движутся к аноду в электрическом поле.Структуры для всех этих видов показаны справа от дисплея.

Должно быть ясно, что результат этого эксперимента критически зависит от pH матричного буфера. Если бы мы повторили электрофорез этих соединений при pH 3,80, аспарагиновая кислота осталась бы в исходной точке, а другие аминокислоты переместились бы к катоду. Игнорируя различия в размере и форме молекул, аргинин будет двигаться в два раза быстрее, чем аланин и изолейцин, потому что его растворенные молекулы в среднем будут нести двойной положительный заряд.

Как отмечалось ранее, кривые титрования простых аминокислот имеют две точки перегиба, одну из-за сильнокислой карбоксильной группы (pK _a ¹ = от 1,8 до 2,4), а другую — для менее кислой аммонийной функции (pK _a ² = от 8,8 до 9,7). Для пролина из 2º-аминокислот pK _a ² составляет 10,6, что отражает большую основность 2º-аминов.

Таблица \ (\ PageIndex {1} \): значения pKa полифункциональных аминокислот

Аминокислота	α-CO 2 H pK a 1	α-NH 3 pK a 2	Боковая цепь pK a 3	pI
Аргинин	2. 1	9,0	12,5	10,8
Аспарагиновая кислота	2,1	9,8	3,9	3,0
Цистеин	1,7	10,4	8,3	5,0
Глутаминовая кислота	2.2	9,7	4,3	3,2
Гистидин	1,8	9,2	6,0	7,6
Лизин	2,2	9,0	10,5	9,8
Тирозин	2,2	9. 1	10,1	5,7

Некоторые аминокислоты имеют дополнительные кислотные или основные функции в своих боковых цепях. Эти соединения перечислены в таблице \ (\ PageIndex {1} \). Третий pK _a , представляющий кислотность или основность дополнительной функции, указан в четвертом столбце таблицы. Значения pI этих аминокислот (последний столбец) часто сильно отличаются от указанных выше для более простых членов. Как и ожидалось, такие соединения демонстрируют три точки перегиба на своих кривых титрования, что иллюстрируется титрованием аргинина и аспарагиновой кислоты (рисунок \ (\ PageIndex {3} \)).Для каждого из этих соединений возможны четыре возможных заряженных вида, один из которых не имеет полного заряда. Формулы для этих веществ написаны справа от кривых титрования вместе с pH, при котором ожидается преобладание каждого из них. Очень высокий pH, необходимый для удаления последнего кислотного протона из аргинина, отражает исключительно высокую основность гуанидинового фрагмента на конце боковой цепи.

Рисунок \ (\ PageIndex {3} \)

Изоэлектрическая точка

Изоэлектрическая точка, pI , представляет собой pH водного раствора аминокислоты (или пептида), при котором молекулы в среднем не имеют суммарного заряда.Другими словами, положительно заряженные группы точно уравновешиваются отрицательно заряженными группами. Для простых аминокислот, таких как аланин, pI представляет собой среднее значение pK _— карбоксильной (2,34) и аммонийной (9,69) групп. Таким образом, вычисленное значение pI для аланина составляет: (2,34 + 9,69) / 2 = 6,02, экспериментально определенное значение. Если дополнительные кислотные или основные группы присутствуют в качестве функций боковой цепи, pI представляет собой среднее значение pK _и двух наиболее похожих кислот.Чтобы помочь в определении сходства, мы определяем два класса кислот. Первый состоит из кислот, которые являются нейтральными в своей протонированной форме (например, CO ₂ H & SH). Вторая включает кислоты, которые в своем протонированном состоянии имеют положительный заряд (например, -NH ₃ ⁺ ). В случае аспарагиновой кислоты аналогичными кислотами являются альфа-карбоксильная функция (pK _a = 2,1) и карбоксильная функция боковой цепи (pK _a = 3,9), поэтому pI = (2,1 + 3,9) / 2 = 3,0. Для аргинина аналогичные кислоты представляют собой виды гуанидиния на боковой цепи (pK _a = 12.5) и альфа-аммониевой функции (pK _a = 9,0), поэтому вычисленное значение pI = (12,5 + 9,0) / 2 = 10,75

Авторы и авторство

Электрофорез общего белка

| Колледж ветеринарной медицины Корнельского университета

Эта процедура разделяет белки сыворотки и биологических жидкостей (например, перитонеальной жидкости, мочи) на составляющие альбумин и глобулины. Электрофорез показан для определения основного характера гиперглобулинемии или при подозрении на множественную миелому у пациента.Типы иммуноглобулинов, вызывающие гиперглобулинемию, могут предоставить полезную диагностическую информацию. Это менее полезно для оценки иммунодефицитов; индивидуальное количественное определение иммуноглобулинов дает больше информации при этих расстройствах. В настоящее время в Корнельском университете мы используем капиллярный электрофорез для электрофореза белков. Это очень чувствительный метод, который разделяет белки на несколько фракций, которые зависят от вида. Для простоты отчетности мы приводим результаты не для отдельных фракций, а для объединенных фракций, например.грамм. альбумин, a1, a2, общий a, b1, b2, общий b и g. Мы также предоставляем интерпретирующие комментарии к нашим электрофореграммам.

Компоненты для электрофореза

Электрофореграмма разделяет белковую фракцию сыворотки или плазмы на составляющие компоненты, включая альбумин и глобулины. Существует три фракции глобулина: альфа, бета и гамма.

Общий белок

Это измеряется на Modular P с использованием биуретового метода (сыворотка, плазма, биологические жидкости) или турбидометрии (спинномозговая жидкость, моча). Общая концентрация белка необходима для получения абсолютных значений (а не только процентов) белковых компонентов.

Альбумин

Альбумин является первым пиком на электрофореграмме и обычно представляет собой высокий тонкий пик. Концентрация альбумина у ELP обычно ниже, чем у Modular P.

Альфа (а) глобулины

Они мигрируют вместе с альбумином и синтезируются в печени. Они включают белки-реагенты острой фазы, макроглобулин α-2 и гаптоглобулин.У большинства видов а-глобулины можно разделить на два основных компонента, а1 и а2, хотя у некоторых видов или отдельных животных присутствуют дополнительные подразделения.

Бета (b) глобулины

Они мигрируют между g- и a-глобулинами. Обычно они вырабатываются в печени и включают фибриноген (плазма), трансферрин и компоненты комплемента. Подобно α-глобулинам, β-глобулины можно разделить на два основных компонента (b1 и b2) у большинства видов, хотя очевидны и другие подразделения (например,грамм. собаки обычно имеют b1a и b1b).

Гамма (г) глобулины

Он включает иммуноглобулины, IgG, IgA и IgM и является самым дальним от альбумина пиком. На самом деле IgA и IgM часто мигрируют в позднюю b- (b2-область) или раннюю g-область. Форма g-пика предоставляет диагностическую информацию. Широкий пик указывает на поликлональную гаммопатию (см. Панель B ниже), которая обычно возникает из-за антигенной стимуляции и не является специфической для заболевания. Высокий острый пик в g-области или поздней b-области совместим с моноклональной гаммопатией.Моноклональные пики обычно связаны с опухолевыми заболеваниями, например множественная миелома, В-клеточная лимфома или В-клеточный хронический лимфоцитарный лейкоз. В редких случаях воспалительные или инфекционные заболевания могут проявляться узким гамма-пиком, который бывает трудно отличить от истинной неопластической моноклональной гаммапатии. Это более правильно назвать «ограниченной олигоклональной» гаммопатией, и о ней сообщалось при различных заболеваниях, таких как Ehrlichia, Leishmania, FIV, FIP и других заболеваниях.

Различные модели электрофореграммы в сыворотке
Панель A: Нормальная электрофореграмма в агарозном геле у собаки.Самый высокий пик слева — это альбумин, за которым следуют a1 (2 пика), a2 (2 пика), b1 (2 пика b1a и b1b), b2 и g (последний плоский пик).
Панель B: Сыворотка кошки, инфицированной вирусом инфекционного перитонита кошек (FIPV). Наблюдается увеличение α-2-глобулинов (стрелка), что указывает на острую фазу реакции реагентов и поликлональную гаммопатию (стрелка). Эти результаты типичны, но не специфичны для инфекции FIPV (их можно увидеть при других воспалительных состояниях).
Панель C: Сыворотка собаки с множественной миеломой.В g-области есть высокий узкий пик, указывающий на моноклональную гаммапатию (стрелка). Концентрация альбумина также снижается (по сравнению с нормальной собакой на панели A).

Электрофорез белков сыворотки

Сыворотка является предпочтительным образцом для электрофореза. Фибриноген (в гепаринизированных образцах) дает моноклональный пик в b-области, что влияет на интерпретацию в образцах плазмы. Мы установили собственные эталонные интервалы для собак, кошек, лошадей, крупного рогатого скота и альпак.Поэтому ненормальные результаты у этих видов будут отмечены. Кроме того, мы всегда предоставляем сам снимок электрофореграммы, а не только письменный отчет.

Электрофорез белков жидкости организма

Электрофорез можно проводить с жидкостями организма, такими как перитонеальная жидкость. Обычно это делается у кошек с выделениями из брюшной полости для подтверждения диагноза инфекции вируса инфекционного перитонита кошек. При этом заболевании в брюшной полости может развиться экссудативный выпот.Электрофоретические характеристики жидкости аналогичны результатам сыворотки, поскольку выпот вызван васкулитом. Поэтому сыворотку и жидкость следует сдавать на электрофорез одновременно. Оба обычно показывают увеличение альфа-глобулинов (острофазовый ответ) и поликлональную гаммопатию (широкое увеличение гамма-глобулинов). Повышение уровня g-глобулинов в жидкости указывает на инфекцию FIPV (см. Изображение ниже). Электрофорез также может проводиться на образцах спинномозговой жидкости, однако обычно это не делается, поскольку требуются большие объемы спинномозговой жидкости.Белка в спинномозговой жидкости обычно слишком мало для работы с ELP без концентрации. Для проведения электрофореза нам необходимо минимум 600 мг / дл белка. Для концентрирования спинномозговой жидкости требуется не менее 5-10 мл жидкости, которую невозможно получить у многих животных.

Электрофорез белков мочи

Электрофореграммы сыворотки и мочи кошки с множественной миеломой. Моноклональный пик наблюдается в g-области сыворотки. Подобный моноклональный пик с низким содержанием альбумина наблюдается в моче. Это подтверждает протеинурию Бенс-Джонса.Моноклональным белком был IgG.

Электрофорез можно проводить в моче, но, как и в спинномозговой жидкости, для этого требуется концентрирование, поскольку содержание белка в моче обычно довольно низкое (для проведения электрофореза нам требуется минимум 600 мг / дл белка).