Мокрота под микроскопом: Микроскопическое исследование мокроты: как сдавать и расшифровка

Бактериоскопическое исследование мокроты — Исследование мокроты

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

1. Предметные и покровные стекла.
2. Шпатели и иглы.
3. Смесь Никифорова.
4. Газовая или спиртовая горелка.
5. Пастеровская пипетка с резиновым баллончиком.
6. Водяная баня с мостиком.
7. Иммерсионное масло.
8. Микроскоп.
9. Фильтровальная бумага.
10. Пинцеты Корне.
11. Бумажки Синева.
12. Основной фуксин.
13. 96° этиловый спирт.
14. Фенол.
15. Глицерин.
16. Концентрированная соляная кислота.
17. Метиленовая синька.
18. Дистиллированная вода.
19. Генцианвиолет.
20. Реактив Люголя.
21. Едкий натр (NaOH).
22. Бензин или ксилол.

Приготовление препаратов для бактериоскопического исследования

Для бактериоскопического исследования готовят обычно два препарата: один для обнаружения микобактерий туберкулеза и другой для обнаружения прочих микроорганизмов. Для первого препарата отбирают те же частицы, которые были предназначены для микроскопии, для второго — гнойные частицы. Взятый материал распределяют по предметному стеклу до получения достаточно тонкой ажурной сеточки (материал на первом стекле распределяют на 2/3 его поверхности, на втором — в центре).

Оба препарата фиксируют троекратным проведением над пламенем горелки. Первый препарат окрашивают по Цилю — Нильсену, второй — по Граму.

Окраска препаратов для бактериоскопического ис¬следования по Цилю-Нильсену и Граму

Окраска по Цилю-Нильсену

Для окраски препаратов по Цилю-Нильсену необходимы следующие краски и реактивы:

1. Фуксин Циля: основного фуксина 1 г, глицерина 4 капли, этилового спирта 96° 10 мл, карболовой кислоты (5% раствор фенола) 5 мл, дистиллированной воды 90 мл. К фуксину, помещенному в фарфоровую ступку, прибавляют глицерин, хорошо растирают, постепенно приливают карболовую кислоту, спирт и воду. Фильтруют.
2. 3% раствор солянокислого спирта: 3 мл концентрированной соляной кислоты удельного веса 1,19 и 97 мл 96° этилового спирта.
3. 0,2 % водный раствор метиленовой синьки — 1 г метиленовой синьки растворяют в 500 мл дистиллирован- вой воды.   

Техника окраски. На фиксированный препарат кладут полоску фильтровальной бумаги (уже и короче предметного стекла), на которую наливают в избытке фуксин Циля. Затем препарат нагревают до появления паров (достаточно троекратно медленно провести его над пламенем горелки), дают ему остыть в течение 3-5 минут, сбрасывают с помощью пинцета бумажку, промывают препарат водой и наливают на него 3% раствор солянокислого спирта для обесцвечивания на 20 секунд. После этого препарат промывают водой и вновь повторяют обесцвечивание. Материал должен быть серовато-розового цвета. Затем на препарат на 20-30 секунд наливают 1: 500 водный раствор метиленовой синьки, краску сливают, препарат промывают водой и высушивают, установив в вертикальном положении на полоску фильтровальной бумаги.

Высушенный препарат рассматривают под микроскопом с иммерсией, с поднятым конденсором.

В препарате микобактерии туберкулеза (рис. 60) красного цвета, нежные, тонкие, слегка изогнутые, иногда зернистые. Иногда обнаруживают микобактерип туберкулеза в виде так называемых осколков (в составе тетрады Эрлиха).

Рис. 60. Микобактерии туберкулеза в мокроте. 1 — окраска по Цилю-Нильсену, 2 — в люминесцентном микроскопе.

Все остальные элементы, в том числе и другие микроорганизмы, окрашены в синий цвет. С целью обнаружения мпкобактерий туберкулеза препарат тщательно исследуют, продвигая от одного продольного края к другому и поперек мазка. Во всех сомнительных случаях рекомендуют обработать препараты жавелевой водой
Результат исследования оформляют, используя следующую формулировку: «микобактерип туберкулеза не обнаружены» или «микобактерип туберкулеза обнаружены», и отмечают приблизительное их количество, например, «единичные в препарате», «единичные в поле зрения» и т. д.

В настоящее время находит все большее распространение люминесцентный способ обнаружения микобактерий туберкулеза в мокроте. Микобактерип туберкулеза имеют золотисто-желтое свечение на черном фоне препарата (рис. 60, 2).

В тех случаях, когда количество микобактерий туберкулеза в мокроте незначительно, для их обнаружения применяют метод обогащения (флотация), который состоит в следующем. В бутылку с нешироким горлышком (емкостью 250 мл) помещают 12-20 мл мокроты, добавляют равный объем 0,5% раствора КОН и встряхивают 5-10 минут. Затем приливают около 10 мл дистиллированной воды и 0,5-1 мл бензина или ксилола, взбалтывают 10-15 минут и доливают дистиллированную воду гак, чтобы горлышко бутылки было заполнено. Смесь оставляют на 1-2 часа до образования на поверхности жидкости сливкообразного слоя. На два предметных стекла, заранее расположенных на мостике над водяной баней, нагретой до 60-65°, каплями, с помощью пастеровской пипетки, 5-6 раз наносят сливкообразный слой, каждый раз после подсыхания предыдущей капли. Мазки окрашивают фуксином Циля на водяной бане (без дополнительной фиксации) в течение 10 минут, промывают водой, 3-4 минуты обесцвечивают 3% раствором солянокислого спирта, вновь обмывают водой, докрашивают 0,2% водным раствором метиленовой синьки, высушивают и исследуют под микроскопом.

Окраска по Граму

Для окраски препаратов по Граму требуются следующие краски и реактивы:

1. Разведенный фуксин Циля (фуксин Пфейффера): 1 часть фуксина Циля + 9 частей дистиллированной воды.
2. Реактив Люголя.
3. 1 % спиртовой раствор генцианвиолета — 1 г генцианвиолета растворяют в 100 мл 96° этилового спирта. Этот раствор краски можно заменить бумажкой, приготовленной по методу Синева (белую фильтровальную бумажку пропитывают 1% спиртовым раствором генцианвиолета, затем высушивают и разрезают на мелкие квадратики соответственно размеру мазка).

Техника окраски. На фиксированный препарат накладывают бумажку Синева и смачивают ее водой (при отсутствии бумажки Синева ее заменяют белой фильтровальной бумажкой, на которую наносят несколько капель 1% спиртового раствора генцианвнолета). Через 1-2 минуты бумажку сбрасывают и на препарат наливают 1-2 капли реактива Люголя. Через 1-2 минуты препарат обесцвечивают 1-2 каплями 96° этилового спирта до появления бледно-серой окраски материала, смывают водой, на 10-15 секунд наносят сруксин Пфейффера, после чего вновь смывают водой и высушивают. В препаратах могут быть обнаружены (рис. 61) стафилококки, стрептококки, диплококки, палочки Пфейффера, спирохеты Плаута-Венсана, актиномицеты и другие микроорганизмы.

Рис. 61. Различные микроорганизмы в мокроте: диплококки (1), палочки Пфейффера (2), стрептококки (3), стафилококки (4), диплобациллы Фридлендера (5), симбиоз Венсана (6), мицелий актиномицет (7).

Обеззараживание мокроты, посуды и предметов, бывших в соприкосновении с ней

После проведенного исследования мокроту сжигают или обеззараживают. Последнее достигается следующими способами: а) автоклавированием в течение одного часа при 1,5 атм.; б) кипячением в течение одного часа в 1-2% растворе соды; в) обработкой 5% раствором лизола, карболовой кислоты или смесью, состоящей из равных объемов 5% раствора хлорамина и 5% раствора сернокислого аммония, в течение 12-24 часов. После обеззараживания посуду тщательно моют водой и высушивают.

Металлические предметы (шпатели, иглы) обеззараживают прокаливанием над огнем. Во избежание переноса микроорганизмов из одной порции мокроты в другую шпатель и иглу немедленно прокаливают после отбора соответствующих частиц.

Покровные стекла опускают в небольшую плоскую чашечку с 40% раствором серной кислоты на 12-24 часа. Затем кислоту сливают, а стекла неоднократно промывают водопроводной и дистиллированной водой. Вымытые стекла высушивают и используют для последующих исследований.

Презентация по теме «Микроскопическое исследование мокроты»

Инфоурок
›

Биология
›Презентации›Презентация по теме «Микроскопическое исследование мокроты»

Описание презентации по отдельным слайдам:

1 слайд

Описание слайда:

ГБУ ПОО «Астраханский Базовый Медицинский Колледж» «Микроскопическое исследование мокроты»  

2 слайд

Описание слайда:

Микроскопическое исследование Мокроты Приготовление и изучение нативных препаратов Микроскопическое исследование состоит из изучения нативных и окрашенных препаратов. Полноценность исследования мокроты целиком зависит от правильного приготовления и количества просмотренных препаратов.

3 слайд

Описание слайда:

Мокроту, помещенную в чашки Петри, рассматривают на белом и черном фоне. Узким шпателем и иглой (можно пользоваться деревянными лучинами) выбирают различные составные части мокроты (комочки гноя, слизи, крови, тканевые клочки).

4 слайд

Описание слайда:

Необходимо также брать для исследования все частицы, отличающиеся формой, окраской, плотностью от фона мокроты. Отобранный материал помещают на предметное стекло и накрывают покровным.

5 слайд

Описание слайда:

Количество материала, взятого для одного препарата, должно быть таково, чтобы мокрота не выходила за пределы покровного стекла. Если мокрота имеет вязкую или тягучую консистенцию, то на покровное стекло слегка надавливают, чтобы материал распределился равномерно тонким слоем.

6 слайд

Описание слайда:

Препараты сначала рассматривают под малым увеличением (объектив 8, окуляр 7), затем под большим (объектив 40, окуляр 7) увеличением микроскопа.

7 слайд

Описание слайда:

Просмотр под малым увеличением дает ориентировочное представление о качестве выбранного материала, о количестве тех или иных клеток и других образований, позволяет быстрее обнаружить элементы, встречающиеся в мокроте в небольшом количестве (эластические волокна, спирали Куршмана, комплексы опухолевых клеток и др.)

8 слайд

Описание слайда:

Просмотр с большим увеличением необходим для детального исследования материала. Следует учитывать, что элементы в мокроте распределяются всегда неравномерно, поэтому необходимо тщательное исследование серии препаратов.

9 слайд

Описание слайда:

Если при исследовании нативного препарата возникает необходимость в его окраске, то под контролем микроскопа покровное стекло снимают, перемещая в одну сторону, а предметное стекло – в другую, и отмечают стеклографом на обратной стороне препарата интересующий участок. Затем препарат высушивают и окрашивают.

10 слайд

Описание слайда:

Элементы мокроты, которые обнаруживаются в нативном препарате, можно разделить на три основные группы: клеточные, 2) волокнистые, 3) кристаллические.

11 слайд

Описание слайда:

КЛЕТОЧНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ Лейкоциты всегда содержатся в мокроте в большем или меньшем количестве в зависимости от характера мокроты. Чем больше гноя в мокроте, тем больше лейкоцитов. Лейкоциты – круглые клетки диаметров от 10-12 до 15 мкм с плохо различимым ядром и однородной обильной зернистостью.

12 слайд

Описание слайда:

Они могут быть хорошо сохранившимся или в различных стадиях дегенерации. Определение видов лейкоцитов производят в окрашенном препарате

13 слайд

Описание слайда:

Эозинофилы распознаются в нативном препарате по более темной окраске и наличию в цитоплазме четкой, крупной, одинаковой, обильной, темной, преломляющей свет зернистости. Распределяются они в препаратах неравномерно, часто в виде больших скоплений в отдельных участках.

14 слайд

Описание слайда:

Эозинофилы встречаются при бронхиальной астме и других аллергических состояниях, при наличии гельминтов, эхинококке легкого, эозинофильных инфильтратах, злокачественных новообразованиях

15 слайд

Описание слайда:

Эозинофилы встречаются при бронхиальной астме и других аллергических состояниях, при наличии гельминтов, эхинококке легкого, эозинофильных инфильтратов, злокачественных новообразованиях

16 слайд

Описание слайда:

Эритроциты имеют вид дисков желтоватого цвета. Единичные эритроциты могут встречаться в любой мокроте. В большом количестве обнаруживаются в кровянистой мокроте при легочном кровотечении, инфаркте легкого, туберкулезе, застое в малом круге кровообращения, новообразованиях легкого и др.

17 слайд

Описание слайда:

Клетки плоского эпителия попадают в мокроту со слизистой полости рта. Единичные клетки плоского эпителия встречаются всегда.

18 слайд

Описание слайда:

Большое число клеток говорит о примеси слюны или о недостаточном туалете полости рта перед сбором мокроты для исследования, особенно при наличии зубных протезов или воспалительных явлениях в ротовой полости.

19 слайд

Описание слайда:

Цилиндрический мерцательный эпителий выстилает слизистую оболочку трахеи и бронхов. Клетки имеют удлиненную, клиновидную, цилиндрическую, реже овальную форму, расширенную у апикального конца, обращенного в просвет бронха, суженную у основания.

20 слайд

Описание слайда:

В клетках может определяться овальное ядро, расположенное эксцентрично, ближе к базальной части клетки. На расширенном конце клетки нередко видны реснички, в свежей мокроте они могут двигаться.

21 слайд

Описание слайда:

Клетки цилиндрического эпителия располагаются одиночно, группами, иногда большими скоплениями. Клетки мерцательного эпителия в большом количестве обнаруживаются при остром приступе бронхиальной астмы, остром бронхите, острых катаральных поражениях верхних дыхательных путей, новообразованиях легкого.

22 слайд

Описание слайда:

Альвеолярные макрофаги – клетки гистиоцитарной системы. Они имеют округлую или овальную форму, размер от 15 до 20-25 мкм, эксцентрично расположенное ядро, вакуолизированную цитоплазму, содержащую различные включения темно-бурого цвета.

23 слайд

Описание слайда:

В препаратах располагаются в виде скоплений. Встречаются при различных воспалительных процессах в бронхах и легочной ткани (пневмониях, бронхитах, профессиональных заболеваниях легких). При хронических заболеваниях выявляются жироперерожденные макрофаги (клетки с жировой дистрофией, липофаги). Это клетки округлой формы, цитоплазма которых заполнена каплями жира.

24 слайд

Описание слайда:

При добавлении к препарату судана ІІІ капли жира окрашиваются в оранжевый цвет. Скопления таких клеток встречаются при злокачественных новообразованиях, туберкулезе, эхинококке легкого, актиномикозе и др.

25 слайд

Описание слайда:

Пылевые клетки (кониофаги) с фагоцитированными частицами пыли, угля часто выявляются у людей с профессиональными заболеваниями легких (у курильщиков, работников табачной, мукомольной промышленности).

26 слайд

Описание слайда:

Сидерофаги – альвеолярные макрофаги, содержащие гемосидерин и имеющие в цитоплазме золотисто-желтые включения. С достоверностью их определяют реакцией на берлинскую лазурь. С препарата, в котором были обнаружены альвеолярные макрофаги с желтыми или золотисто-желтыми включениями , снимают покровное стекло и слегка подсушивают на воздухе.

27 слайд

Описание слайда:

Затем на препарат наливают 1-2 капли 30 г/л раствора хлористоводородной кислоты (HCl) и 1-2 капли 50 г/л раствора желтой кровяной соли. Можно готовить смесь из равных частей этих реактивов в пробирке.

28 слайд

Описание слайда:

Препарат покрывают покровным стеклом и через 8-10 мин микроскопируют под большим увеличением. При наличии гемосидерина альвеолярные макрофаги окрашиваются в сине-зеленый (голубой) цвет.

29 слайд

Описание слайда:

Сидерофаги обнаруживают в мокроте при застойных явлениях в легком, инфарктах легкого, кровоизлияниях.

30 слайд

Описание слайда:

Волокнистые образования Эластические волокна являются элементами соединительной ткани и встречаются в мокроте при деструктивных процессах в легких. В нативном препарате эластические волокна имеют вид извитых, блестящих, тонких, нежных волокон равномерной толщины на всем протяжении, складывающихся пучками.

31 слайд

Описание слайда:

Иногда рисунок их повторяет строение альвеолярной ткани. Как правило, располагаются на фоне лейкоцитов и детрита. Обнаруживаются при туберкулезе, абсцессе, новообразованиях легких, гангрене легкого.

32 слайд

Описание слайда:

При кавернозном туберкулезе в результате отложения на волокна жировых кислот и мыл они становятся грубыми, толстыми, имеют названия коралловидных. Обнаруживаются редко. При обработке из 100 г/л раствором едкой щелочи мыла растворяются и выявляются обычного вида эластичные волокна.

33 слайд

Описание слайда:

Обызвествленные эластические волокна – грубые, толстые, пропитанные солями извести палочковидные образования. Обломки их имеют вид пунктирной линии, состоящей из сероватых, преломляющих свет палочек.

34 слайд

Описание слайда:

Обнаруживают в мокроте при распаде туберкулёзного очага и носят названия тетрады Эрлиха и включают: обызвествленные эластические волокна; 2) аморфные соли извести; 3) кристаллы холестерина; 4)микобактерии туберкулеза (КУБ)

35 слайд

Описание слайда:

Спирали Куршмана – уплотненные, закрученные в спираль образования из слизи. Центральная осевая нить резко преломляют свет, выглядит блестящей спиралью. По периферии слизь лежит более свободно и образует так называемую мантию.

36 слайд

Описание слайда:

Величина их может быть различной. Иногда они видны микроскопически. Спирали образуются при наличии спазма или сдавления бронхов, содержащих вязкий слизистый секрет, откашливаемый с трудом. Часто они обнаруживаются в мокроте больных бронхиальной астмой или опухоли легкого.

37 слайд

Описание слайда:

Кристаллические образования Кристаллы Шарко-Лейдена имеют вид вытянутых, блестящих бесцветных ромбов с заостренными концами различной величины, напоминающих стрелку магнитного компаса. Образуются из распадающихся эозинофилов.

38 слайд

Описание слайда:

Свежевыделенная мокрота часто не содержит кристаллов Шарко-Лейдена, они появляются в ней через 24 ч. Характерно присутствие этих кристаллов при бронхиальной астме не только на высоте приступа, но и в межприступном периоде. Они встречаются также при глистных поражениях легких.

39 слайд

Описание слайда:

Кристаллы гематоидина имеют форму ромбов, иногда иголок золотисто-желтого цвета. Являются продуктом распада гемоглобина, образуются в глубине гематом и обширных кровоизлияний, в некротизированной ткани.

40 слайд

Описание слайда:

В препаратах мокроты располагаются на фоне детрита, эластических волокон, в некротизированных тканевых клочках.

41 слайд

Описание слайда:

Кристаллы холестерина имеют вид бесцветных табличек четырехугольной формы с обломанным углом в виде ступенек, образуются при распаде жироперерожденных клеток, при задержке мокроты в полостях, располагаются на фоне детрита, нередко в сочетании с эластическими волокнами.

42 слайд

Описание слайда:

Встречаются при туберкулезе, новообразованиях, абсцессе легкого, гангрене легкого, эхинококкозе

43 слайд

Описание слайда:

Исследование окрашенных препаратов Для исследования морфологии клеточных элементов мокроты используют окраску по Романовскому и Папенгейму. При окраске мокроты этим методом необходимо учитывать ее характер (если много слизи, толстый препарат – окраска более продолжительная).

44 слайд

Описание слайда:

При подозрении на наличие злокачественного новообразования экспозиция окраски сокращается. В окрашенных препаратах дифференцируются следующие клеточные элементы.

45 слайд

Описание слайда:

Нейтрофилы составляют основную массу лейкоцитов. Представляют собой округлые, иногда неправильной формы клетки 8 – 13 мкм с сегментированным ядром и зернистой цитоплазмой. От нейтрофилов крови они отличаются менее правильной формой, нечеткими очертаниями, часто имеют распавшееся на отдельные фрагменты ядро.

46 слайд

Описание слайда:

Дегенеративно измененные нейтрофилы чаще встречаются в гнойной мокроте при абсцессе, туберкулезе легкого, бронхоэктазах. Уменьшение их обычно связанно с клиническим улучшением.

47 слайд

Описание слайда:

Эозинофилы в мокроте встречаются в виде отдельных клеток, иногда скоплениями. Они имеют округлую форму (10-14 мкм). Ядро двухсегментное, иногда круглое. Цитоплазма заполнена крупной, одинакового размера ярко-розовой зернистостью.

48 слайд

Описание слайда:

Иногда при бронхиальной астме эозинофилы в скоплениях разрушаются и видны в виде массы эозинофильных зерен, среди которых можно обнаружить отдельные сохранившиеся клетки.

49 слайд

Описание слайда:

Лимфоциты – клетки круглой формы (7-14 мкм), ядро заполняет большую часть клетки, цитоплазма узким ободком окружает ядро, иногда в виде полумесяца.

50 слайд

Описание слайда:

Базофилы (тучные клетки) имеют круглую форму, размеры 8-10мкм, с ядром чаще неопределенной лапчатой формы, заполненные крупной темно – фиолетовой (базофильной) зернистостью, густо покрывающей ядро.

51 слайд

Описание слайда:

Гистиоциты Ядро округлое или овальное, располагается чаще эксцентрично, окрашивается неинтенсивно. Отдельные клетки имеют бобовидные или палочковидные ядра. Цитоплазма слабобазофильная, часто вакуолизированная.

52 слайд

Описание слайда:

Альвеолярные макрофаги круглой и овальной формы, диаметром 10-30 мкм. Ядро имеет бобовидную, округлую, иногда палочковидную форму и небольшие размеры относительной широкой цитоплазмы. Хроматин ядра мелкозернистый, однородный.

53 слайд

Описание слайда:

Гигантские многоядерные клетки хронического воспаления(клетки инородных тел). Ядра округлые, одинаковые по величине, с нежным сетчатым рисунком хроматина. Ядра распределены в цитоплазме равномерно или собраны в центре клетки. Цитоплазма обильная, базофильная. Границы клеток четкие.

54 слайд

Описание слайда:

В одной клетке может быть два или более ядер. Цитоплазма пенистая, бледно-голубого или розового цвета с отчетливыми контурами. Эти клетки при обильных включениях могут окрашиваться в бурый, коричневый или черный цвет.

55 слайд

Описание слайда:

Эпителиоидные клетки. Форма их овальная, реже округлая. Ядра бобовидные, грушевидные, овальные или вытянутые, почкообразные, с четкими контурами. Хроматин мелкоточечный, нежный, равномерно распределенный.

56 слайд

Описание слайда:

Цитоплазма умеренно выраженная, светлая, базофильная, иногда слегка вакуолизированная, часто с неточными контурами. Являясь элементами туберкулезной гранулемы, эпителиоидные клетки присутствуют в мокроте при туберкулезе, саркоидозе.

57 слайд

Описание слайда:

Клетки Пирогова-Лангханса. Гигантские многоядерные клетки, содержат до 20 и более ядер. Ядра почти не отличаются от ядер эпителиоидных клеток. Имеют вытянутую форму, нежную структуру хроматина, располагаются в виде частокола на периферии клетки, иногда на одном ее половине.

58 слайд

Описание слайда:

Цитоплазма обширная, бледно-г

Лабораторная диагностика мокроты в СЗЦДМ

Патологическое отделяемое из дыхательных путей называется мокротой. Это секреторный продукт, который выделяется клетками эпителия и скапливается на стенках органов дыхания. В норме мокрота отсутствует, а секрет, который производит дыхательная система — проглатывается. Во время болезни его становится слишком много и он откашливается.

Исследование мокроты необходимо при наличии патологического процесса в легких и бронхах. Анализ позволит определить причины патологии, стадию процесса и характер болезни. Это исследование назначается в динамике, что позволяет оценить адекватность терапии и корректировать её, при необходимости.

Лечащий врач может назначить анализ мокроты, если есть длительный кашель, хронический патологический процесс в органах дыхательной системы, при неясности диагностической картины.

Виды исследования мокроты

Различают следующие виды исследования мокроты:

• 
  Макроскопическое

• 
  Микроскопическое

• 
  Микробиологическое

• 
  Химическое.

Перейти к анализам

Макроскопический анализ позволяет оценить общие свойства и характер мокроты. Оценивается количество мокроты, её консистенция, цвет, запах. Также, изучаются примеси, их характер и количество, различные волокна. Можно определить гной, слизистые частицы, серозную жидкость, элементы гнилостного процесса или распада тканей, кровь, волокна фибрина. Данные элементы могут отсутствовать, встречаться по одному или в комбинациях друг с другом.

Микроскопический анализ дает более точной представление о составе мокроты. Увеличение позволяет определить наличие клеток, элементов тканей. Это могут быть следы эпителия, лейкоциты, эозинофилы

Посев мокроты | определение посева мокроты по Медицинскому словарю

Посев мокроты

Определение

Мокрота — это материал, откашливаемый из легких и отхаркиваемый (выплевывающийся) через рот. Посев мокроты проводится для поиска и идентификации микроорганизма, вызывающего инфекцию нижних дыхательных путей, такую ​​как пневмония (инфекция легких). При обнаружении микроорганизма проводится дополнительное тестирование, чтобы определить, какие антибиотики будут эффективны при лечении инфекции.

Цель

Человек с лихорадкой и непрекращающимся кашлем, который выделяет гнойоподобный материал и / или кровь, может иметь инфекцию нижних дыхательных путей. Инфекции легких и бронхов вызываются несколькими типами микроорганизмов, включая бактерии, грибы (плесень и дрожжи) и вирусы. Рентген грудной клетки дает визуальное свидетельство инфекции; в культуре может расти микроорганизм, вызывающий инфекцию. Микроорганизм выращивают в лаборатории, чтобы его можно было идентифицировать и протестировать на его реакцию на лекарства, такие как противогрибковые и антибиотики.

Описание

В зависимости от клинического состояния пациента врач определяет, какая группа микроорганизмов может вызывать инфекцию, а затем назначает один или несколько конкретных типов культур: бактериальные, вирусные или грибковые (для дрожжей и плесени). ). Для всех типов культур мокрота должна быть собрана в стерильный контейнер. Образец мокроты необходимо собирать осторожно, чтобы бактерии, которые обычно живут во рту и слюне, не загрязняли мокроту и не усложняли процесс определения причины возбудителя инфекции. Попав в лабораторию, с каждым типом культуры обращаются по-разному.

Бактериальная культура

Часть мокроты смазывают на предметном стекле микроскопа для окрашивания по Граму. Другая часть распределяется по поверхности нескольких различных типов планшетов для культивирования и помещается в инкубатор при температуре тела на один-два дня.

Окрашивание по Граму выполняется путем окрашивания предметного стекла пурпурными и красными пятнами с последующим исследованием его под микроскопом. Окрашивание по Граму проверяет, не содержит ли образец слюны или материала изо рта.Если видно много эпителиальных (кожных) клеток и мало лейкоцитов, образец не является чистой мокротой и не подходит для посева. В зависимости от политики лаборатории, образец может быть отклонен, и потребуется новый образец. Если обнаружено много лейкоцитов и бактерий одного типа, это раннее подтверждение инфекции. Цвет пятен, обнаруженных бактериями (пурпурный или красный), их форма (например, круглая или прямоугольная) и их размер дают ценные ключи к их идентичности и помогают врачу предсказать, какие антибиотики могут работать лучше всего, прежде чем будет проведен весь тест. завершено.Бактерии, окрашивающие пурпурный цвет, называются грамположительными; те, которые окрашиваются в красный цвет, называются грамотрицательными.

Во время инкубации бактерии, присутствующие в образце мокроты, размножаются и появляются на чашках в виде видимых колоний. Бактерии идентифицируются по внешнему виду их колоний, по результатам биохимических тестов и окрашиванием по Граму части колонии.

Также проводится тест на чувствительность, также называемый тестом на чувствительность к антибиотикам. Бактерии тестируются против различных антибиотиков, чтобы определить, какие из них будут лечить инфекцию, убивая бактерии.

Первоначальный результат окрашивания по Граму доступен в тот же день или менее чем через час по запросу врача. Ранний отчет, известный как предварительный отчет, обычно доступен через один день. В этом отчете будет указано, были ли обнаружены какие-либо бактерии, и если да, то их окраска по Граму будет видна — например, грамотрицательная палочка или грамположительные кокки. Окончательный отчет, обычно доступный в течение одного-трех дней, включает полную идентификацию и оценку количества бактерий, а также список антибиотиков, к которым они чувствительны.

Культивирование грибов

Для поиска плесени или дрожжей проводится посев грибов. Образец мокроты выкладывают на специальные чашки для культивирования, которые стимулируют рост плесени и дрожжей. Различные биохимические тесты и окраски используются для выявления плесени и дрожжей. Посев на грибки может занять несколько недель.

Вирусная культура

Вирусы — частая причина пневмонии. Для вирусной культуры мокрота смешивается с коммерчески полученными клетками животных в пробирке. Характерные изменения клеток, вызванные растущим вирусом, помогают идентифицировать вирус.Время завершения вирусной культуры зависит от типа вируса. Это может занять от нескольких дней до нескольких недель.

Особые процедуры

Туберкулез вызывается медленнорастущей бактерией под названием Mycobacterium tuberculosis . Поскольку его нелегко вырастить при использовании обычных методов культивирования, для выращивания и идентификации этих бактерий используются специальные процедуры. Когда образец мокроты на туберкулез впервые попадает в лабораторию, небольшая часть мокроты размазывается по предметному стеклу микроскопа и окрашивается специальным красителем, называемым кислотостойким красителем.Окрашенную мокроту исследуют под микроскопом на наличие туберкулезных организмов, которые улавливают пятно, делая их видимыми. Этот мазок представляет собой быстрое обследование организма и позволяет врачу получить предварительное заключение в течение 24 часов.

Для посева на туберкулез части мокроты размазывают и помещают в специальные чашки для культивирования и пробирки с бульоном, способствующие росту организма. Рост в бульоне происходит быстрее, чем на чашках с культурой. Доступны инструменты, которые могут обнаруживать рост бульона, что еще больше ускоряет процесс.Рост и идентификация могут занять от двух до четырех недель.

Другие микроорганизмы, вызывающие различные типы инфекций нижних дыхательных путей, также требуют специальных процедур культивирования для роста и идентификации. Mycoplasma pneumonia вызывает легкую или умеренную форму пневмонии, обычно называемую ходячей пневмонией; Bordetella pertussis вызывает коклюш; Legionella pneumophila , болезнь легионеров; Chlamydia pneumoniae , атипичная пневмония; и Chlamydia psittaci , лихорадка попугаев. Pneumocystis carinii вызывает пневмонию у людей с ослабленной иммунной системой, например у людей со СПИДом. Этот организм не растет в культуре. При подозрении на пневмонию, вызванную этим микроорганизмом, на мокроту делают специальные окрашивания. Диагноз основывается на результатах этих пятен, симптомах пациента и истории болезни.

Посев мокроты также называется посевом мокроты и чувствительностью.

Возможно, что посев мокроты в конечном итоге будет заменен в диагностике туберкулеза более новыми молекулярными методами. Эти передовые методы ускоряют диагностический процесс, а также повышают его точность. По состоянию на конец 2002 года четыре молекулярных метода все чаще используются в лабораториях по всему миру для диагностики туберкулеза. Они включают полимеразную цепную реакцию для обнаружения микобактериальной ДНК в образцах от пациентов; зонды нуклеиновой кислоты для идентификации микобактерий в культуре; анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов для сравнения различных штаммов ТБ для эпидемиологических исследований; и генетическое тестирование чувствительности для выявления устойчивых к лекарствам штаммов микобактерий.

Препарат

Образец для посева следует собрать до начала приема антибиотиков. Антибиотики в организме человека могут препятствовать росту микроорганизмов, присутствующих в мокроте, в культуре.

Лучшее время для сбора мокроты — рано утром, прежде чем есть или пить. Пациенту следует сначала прополоскать рот водой, чтобы уменьшить количество бактерий во рту и разбавить слюну. При глубоком кашле пациент должен откашливать мокроту из груди.Глубокие вдохи и опускание головы помогают вывести мокроту. Мокроту нельзя держать во рту, а сразу сплюнуть в стерильную емкость. При туберкулезе врач может попросить пациента собирать образцы мокроты три раза подряд утром.

Если откашливание мокроты затруднено, медицинский работник может попросить пациента вдохнуть стерильный физиологический раствор, произведенный небулайзером. Этот распыляемый физиологический раствор покрывает дыхательные пути, разжижая мокроту и облегчая откашливание.Мокрота также может быть собрана врачом во время процедуры бронхоскопии. Однако бронхоскопия не считается рентабельным способом получения полезного образца. Если есть подозрение на туберкулез, сбор мокроты следует проводить в изоляторе, а все лечащие медицинские работники должны носить маски.

Помимо специальных мер предосторожности при сборе мокроты при подозрении на туберкулез, работники больничных лабораторий должны проявлять особую осторожность, чтобы дезактивировать неокрашенные препараты мазка, которые могут содержать M. туберкулез . По состоянию на 2002 год наиболее эффективным методом дезактивации является использование 5% раствора фенола в этаноле.

Нормальные результаты

Мокрота здорового человека не будет расти при посеве. Однако смесь микроорганизмов, обычно обнаруживаемых во рту и слюне человека, часто загрязняет культуру. Если эти микроорганизмы растут в культуре, они могут быть зарегистрированы как обычное загрязнение флоры.

Отклонения от нормы

Присутствие бактерий и лейкоцитов на окраске по Граму и выделение микроорганизма из культуры, кроме контаминации нормальной флорой, свидетельствует об инфекции нижних дыхательных путей.

Ключевые термины

Кислотостойкое окрашивание — Специальное окрашивание, предназначенное для микроскопической идентификации бактерий, вызывающих туберкулез. Культура — лабораторный тест, проводимый для выявления микроорганизмов, вызывающих инфекцию. Окраска по Граму — Микроскопическое исследование части бактериальной колонии или образца из очага инфекции после того, как она была окрашена специальными красителями. Некоторые бактерии подхватывают и удерживают пурпурное пятно; эти бактерии называются грамположительными.Другие бактерии теряют пурпурное пятно и сохраняют красное пятно; эти бактерии называются грамотрицательными. Цвет бактерий, в дополнение к их размеру и форме, дает ключ к разгадке идентичности бактерий. Нормальная флора — Смесь бактерий, обычно обнаруживаемых на определенных участках тела. Тест на чувствительность — Тест, определяющий, какие антибиотики убивают бактерии, выделенные из культуры. Мокрота — Материал откашливается из нижних дыхательных путей и отхаркивается через рот.Микроорганизмы, обычно выделяемые из мокроты, включают: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus, Legionella pneumophila, Mycoplasma pneumonia, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Bordetella pertussis и Escherichia coli.

Ресурсы

Книги

Бирс, Марк Х., доктор медицины, и Роберт Берков, доктор медицины, редакторы. «Инфекционные заболевания, вызываемые микобактериями». В «Руководство по диагностике и терапии Merck» . Станция Уайтхаус, Нью-Джерси: Исследовательские лаборатории Мерк, 2004.

Бирс, Марк Х., доктор медицины, и Роберт Берков, доктор медицины, редакторы. «Пневмония.» В «Руководство по диагностике и терапии Merck» . Станция Уайтхаус, Нью-Джерси: Исследовательские лаборатории Мерк, 2004.

Периодические издания

Чедор П., К. Тханг, Д. Х. Нолан и др. «Метод инактивации и фиксации неокрашенных препаратов мазка Mycobacterium tuberculosis для повышения лабораторной безопасности». Журнал клинической микробиологии 40 (ноябрь 2002 г.): 4077-4080.

МакВильямс, Т., A.U. Wells, A.C. Harrison и др. «Индуцированная мокрота и бронхоскопия в диагностике туберкулеза легких». Thorax 57 (декабрь 2002 г.): 1010-1014.

Su, W. J. «Последние достижения в молекулярной диагностике туберкулеза». Журнал микробиологии, иммунологии и инфекций 35 (декабрь 2002 г. ): 209-214.

Wattal, C. «Улучшение бактериологической диагностики туберкулеза». Индийский журнал педиатрии 69, Приложение 1 (ноябрь 2002 г.): S11-S19.

Организации

Американская ассоциация легких. 432 Park Avenue South, New York, NY 10016. (800) LUNG-USA. www.lungusa.org .

Национальный институт сердца, легких и крови (NHLBI). P.O. Box 30105, Bethesda, MD 20824-0105. (301) 592-8573. www.nhlbi.nih.gov .

Гейл Энциклопедия медицины. Copyright 2008 The Gale Group, Inc. Все права защищены.

Как пользоваться микроскопом

Типы
Микроскопов

Свет
Микроскоп — модели, используемые в большинстве школ, используют составные линзы для увеличения объектов.Линзы изгибают или преломляют свет, чтобы объект под ними казался ближе. Обычные увеличения: 40x, 100x, 400x

Стереоскоп — этот микроскоп позволяет в бинокль (два глаза) рассматривать более крупные образцы.

Сканирование
Электронный микроскоп — позволяет ученым видеть Вселенную, слишком маленькую, чтобы быть
видно в световой микроскоп. SEM не используют световые волны; они используют электроны (отрицательно
заряженные электрические частицы), чтобы увеличивать объекты до двух миллионов раз.

Трансмиссия
Электронный микроскоп — также использует электроны, но вместо сканирования поверхности
(как и в случае с SEM) электроны проходят через очень тонкие образцы.

Детали микроскопа

Викторина
Назовите части микроскопа сами! | Распечатайте пустой микроскоп для маркировки

Увеличение

Ваш
микроскоп имеет 3 увеличения: сканирующее, низкое и высокое.Каждая цель будет иметь
написано увеличение. В дополнение к этому окулярная линза (окуляр) имеет
увеличение. Общее увеличение окуляра x объектива

Общие процедуры

1.Убедитесь, что все рюкзаки и хлам убраны из проходов.
2. Подключите микроскоп
к удлинителям. Для каждого ряда столов используется один и тот же шнур.
3. Храните с обернутым шнуром вокруг микроскопа и со щелчком сканирующего объектива.

4. Держите за основание и за руку обеими руками.

Фокусировка
Образцы

1. Всегда начинайте со сканирующего объектива . Скорее всего, вы сможете увидеть
кое-что об этой настройке. Используйте ручку грубой настройки для фокусировки, изображение может быть маленьким на
это увеличение, но вы не сможете найти его на высоких увеличениях без
это первый шаг.Не используйте сценические зажимы, попробуйте перемещать слайд, пока не
найти что-то.

2. После того, как вы сосредоточились на сканировании, переключитесь на с низким энергопотреблением. Используйте грубую ручку
перефокусировать. Опять же, если вы не сосредоточились на этом уровне, вы не сможете
перейти на следующий уровень.

3. Теперь переключитесь на High Power . (Если у вас толстый слайд или слайд без
крышкой, НЕ используйте объектив с большим увеличением). На этом этапе используйте ТОЛЬКО штраф
Ручка регулировки для фокусировки образцов.

4.
Если образец слишком светлый или слишком темный, попробуйте отрегулировать диафрагму.
5.
Если вы видите линию в поле зрения, попробуйте повернуть окуляр, линия должна
переехать. Это потому, что это указатель, и он полезен для указания вещей вашему
партнер по лаборатории или учитель.

Чертеж
Образцы

1.
Используйте карандаш — вы можете стереть и заштриховать области
2. Все рисунки должны включать
четкие и правильные метки (и быть достаточно большими, чтобы можно было рассмотреть детали). Рисунки должны
быть помеченным именем образца и увеличением.
3. Этикетки должны быть написаны
на внешней стороне круга. Круг обозначает поле обзора, если смотреть сквозь
В окуляре образцы следует рисовать в масштабе. Если ваш образец принимает
убедитесь, что ваш рисунок отражает это.

Пример:

Изготовление
Мокрая установка

1.
Возьмите тонкий ломтик того, что у вас есть. Если ваш образец тоже
толщиной, то покровное стекло будет качаться на поверхности образца, как качели, и
вы не сможете просмотреть его в режиме высокой мощности.

2.
Нанесите ОДНУ каплю воды прямо на образец. Если налить слишком много воды,
тогда покровное стекло будет плавать на поверхности воды, что затруднит рисование
образец, потому что они могут действительно уплыть. (Плюс слишком много воды грязно)

3.
Поместите покровное стекло под углом 45 градусов (приблизительно) так, чтобы один край касался
каплю воды, а затем осторожно отпустите. При правильном выполнении покровное
отлично ложатся на образец.

Как окрасить слайд

1.Нанесите одну каплю морилки (йода, метиленового синего … их много видов) на
край покровного стекла.

2.
Поместите плоский край бумажного полотенца на противоположную сторону покровного стекла.
Бумажное полотенце вытянет воду из-под покровного стекла, и сцепление
воды вытянет пятно под предметное стекло.

3.
Как только пятно покроет область, содержащую образец, все готово.
Пятно не обязательно должно находиться под всем покровным стеклом. Если пятно не осталось
накройте по мере необходимости, возьмите новое бумажное полотенце и добавьте еще пятна, пока оно не исчезнет.

4.
Обязательно вытрите излишки пятна бумажным полотенцем.

Очистка

1.
Храните микроскопы со сканирующим объективом на месте.
2. Оберните шнуры и
покровные микроскопы.
3. Вымойте предметные стекла в раковинах и высушите, поместив их.
обратно в слайд-боксы, чтобы использовать их позже.
4. Выбросьте покровные стекла.

Поиск и устранение неисправностей

Иногда у вас могут возникнуть проблемы с работой с микроскопом. Вот несколько общих проблем и решений.

1. Изображение слишком темное! Настроить
диафрагмы, убедитесь, что ваш свет включен.

2.
В моем поле обзора есть пятно, даже когда я перемещаю слайд, пятно остается
в том же месте! Ваш
линза грязная. Используйте бумагу для линз и только бумагу для линз, чтобы тщательно очистить объектив.
и глазная линза. Окулярную линзу можно снять, чтобы очистить внутреннюю часть.

3. Я ничего не вижу при большом увеличении! Помните
шаги, если вы не можете сфокусироваться под сканированием

Наблюдение за бактериями под световым микроскопом — Microbehunter Microscopy

Подпишитесь, чтобы получать самые новые видео:

Можно ли увидеть бактерии с помощью сложного микроскопа? Ответ — осторожное «да, но».Вообще говоря, теоретически и практически возможно увидеть живые и неокрашенные бактерии с помощью составных световых микроскопов, в том числе тех микроскопов, которые используются в образовательных целях в школах. Однако есть несколько моментов, которые следует учитывать.

Почему бактерии трудно увидеть

Бактерии трудно увидеть в светлопольный микроскоп по нескольким причинам:

• Они маленькие: Чтобы увидеть их форму, необходимо использовать увеличение примерно от 400x до 1000x.Оптика должна быть хорошей, чтобы правильно разрешить их при таком увеличении.
• Сложно сфокусировать: При большом увеличении бактериальные клетки будут плавать в фокусе и расфокусироваться, особенно если слой воды между покровным стеклом и предметным стеклом слишком толстый.
• Они прозрачные: Бактерии проявляют свой цвет только в том случае, если они присутствуют в колонии. Отдельные клетки, присутствующие на слайде, прозрачны. Обычная светлопольная оптика покажет бактерии, только если закрыть ирисовую диафрагму конденсатора.Это происходит из-за разницы в показателе преломления воды и бактериальных клеток.
• Трудно распознать: Неподготовленному глазу могут быть проблемы с отличием бактерий от мелкой пыли и грязи, присутствующей на предметном стекле. Некоторые бактерии также образуют скопления, поэтому отдельные клетки трудно увидеть.

Исследовательские организации и продвинутые любители используют фазово-контрастную оптику для обнаружения бактерий. Эта система преобразует разницу показателей преломления бактерий в яркость.Затем прозрачные бактерии можно увидеть темными на ярком фоне. В светлом поле закрытие ирисовой диафрагмы конденсатора также приведет к тому, что бактерии будут казаться темнее, но в то же время появятся артефакты («полосы») вокруг отдельных клеток. Это из-за дифракции света. Одна из возможностей — окрасить бактерии, но в этом случае процесс закрепления и окрашивания может привести к появлению других артефактов, и это убьет бактерии.

Что такое безопасный источник бактерий?

В развлекательных или образовательных целях нельзя использовать испорченную пищу или (не дай бог!) Использовать бактерии, полученные из человеческого тела и выращенные на чашках с агаром.Риски просто не стоят того, особенно при работе со студентами. Другие источники, такие как почва или перегной, имеют другие недостатки. Примеси затрудняют отделение бактерий от других частиц, особенно если используется светопольная оптика. Скорее рекомендую использовать йогурт. Должны быть видны маленькие круглые клетки (кокки), которые также могут встречаться парами. Также можно соскрести некоторые бактериальные клетки с некоторых видов сыра. Brevibacterium можно найти, например, на сыре Лимбургер.Однако следует знать, что в некоторых сырах используется комбинация бактерий и грибков, и что более крупные грибковые клетки могут перевешивать бактерии.

Какое самое простое решение для обнаружения бактерий?

Коммерческий слайд, показывающий окрашенные спиралевидные бактерии.

Самый простой и наименее сложный способ рассмотреть бактерии с помощью светового микроскопа — купить подготовленное постоянное предметное стекло. Затем бактерии окрашиваются в достаточно высокой концентрации.На изображении выше показаны бактерии такого слайда.

В качестве альтернативы вы можете съесть какую-нибудь пищу, на которой естественным образом растут бактерии, например йогурт. Вы не должны портить пищу, чтобы увидеть бактерии, так как вы не знаете, какие бактерии вы затем выращиваете, и это может быть опасно для здоровья.

Таким образом, существуют более простые (а может быть, и более интересные) образцы для наблюдения, чем бактерии. Если вы хотите увидеть отдельные клетки, то я рекомендую начать с дрожжевых суспензий.Эти эукариотические клетки намного больше, и их легче идентифицировать.

Дополнительная литература

Коронавирус под микроскопом: более пристальный взгляд на смертельный патоген

Вирусы крошечные — вам придется разделить один миллиметр на линейке на миллион частей, чтобы с удобством измерить один.

Новый коронавирус 2019 года (2019-nCoV), ранее не идентифицированный патоген, который убил сотни людей в Китае и заразил трех человек в Индии (по состоянию на 3 февраля 2020 года), ничем не отличается.

В последние дни исследователи опубликовали изображения с микроскопа, позволяющие более внимательно изучить 2019-nCoV, распространение которого на нескольких континентах было объявлено чрезвычайной ситуацией в области общественного здравоохранения, имеющей международное значение.

На фотографии ниже, сделанной с медицинского факультета LKS Гонконгского университета, показаны копии нового коронавируса, выделяемые с поверхности инфицированной клетки. Единица измерения, которую вы видите в нижнем левом углу, — микрометр, одна тысячная миллиметра.

Вирусы имеют диаметр от 20 нанометров (нанометр составляет тысячную микрометра) и до 1 микрометра.

«Каждая инфицированная клетка производит тысячи новых инфекционных вирусных частиц, которые могут инфицировать новые клетки», — говорится в сообщении Гонконгского университета в Twitter ( @hkumed ).

Тонкие электронные микрофотографии нового коронавируса 2019 года, выращенного в клетках Гонконгского университета. Изображение от Джона Николлса, Лео Пуна и Малика Пейриса, Университет Гонконга (опубликовано в Twitter / @ hkumed 3 февраля 2020 г.)

Исследователи из австралийского института Доэрти выпустили видео, демонстрирующее новый коронавирус в культуре клеток.

Майк Каттон, заместитель директора института, сказал, что тесты на антитела на основе выращенного в лаборатории вируса могут помочь определить его охват и уровень смертности, а также измерить эффективность пробной вакцины, согласно заявлению, опубликованному 29 января.

Вот 15- второе видео на YouTube, плюс скриншоты.

Исследователи из Института инфекций и иммунитета Питера Доэрти в Мельбурне, Австралия, вырастили новый коронавирус из образца пациента. (Изображения: YouTube / Doherty Institute.Монтаж сделан командой дизайнеров ITGD / Викас Вашишт)

Коронавирусы получили свое название от шипованных белков на их поверхности, которые создают эффект, аналогичный солнечной короне — той части атмосферы Солнца, которая видна во время полного солнечного затмения. Корона означает «корона» на латыни.

Взгляните на следующие изображения: визуализация коронавируса, созданная Центрами по контролю и профилактике заболеваний США (CDC), настоящая фотография разновидности коронавируса (вирус птичьего инфекционного бронхита) и полное солнечное затмение.

Изображения (слева): (1) CDC. (2) CDC / Фред Мерфи; Сильвия Уитфилд. (3) НАСА / Обри Джеминьяни. Монтаж выполнен командой дизайнеров ITGD / Викас Вашишт.

Поскольку власти Индии работают над сдерживанием распространения вируса, остерегайтесь ложной или вводящей в заблуждение информации, распространяемой в социальных сетях. Доверяйте и делитесь надежной информацией из таких источников, как Всемирная организация здравоохранения (Twitter: @WHO ) и Министерство здравоохранения и благополучия семьи Индии (Twitter: @MoHFW_INDIA ).

Также посетите веб-сайт India Today для получения новостей и обновлений. Щелкните здесь, чтобы прочитать наше руководство для граждан Индии, или здесь, чтобы получить полное визуальное руководство по 2019-nCoV.

Забавы с микробиологией (в чем дело?): Strongyloides stercoralis Revisited (мокрота)

Паразит (нематода)

Хотя у меня уже была публикация 2010 года о Strongyloides stercoralis, я решил добавить отдельную публикацию для этого случая, поскольку он отличается тем, что червь был получен не из образца фекалий, а из образца мокроты.Именно эти повороты делают микробиологию одновременно увлекательной и сложной.

Проницательный коллега исследовал обычный посев мокроты на бактериальные патогены у этого пациента, когда он уловил подсказку, которую многие могли упустить. Небольшие петляющие «нити» (из-за отсутствия лучшего описания) бактерий, выходящих из первичного разрастания (см. Фото ниже). Он сразу понял, что это могло быть свидетельством присутствия червя. Жизнеспособный (живой) червь, если он присутствует в образце мокроты, будет инокулирован в агаровую среду вместе с респираторными бактериями.Они могут ползать, как дождевой червь по мокрому тротуару. Когда они перемещаются по тарелке, они вытягивают бактерии, которые прилипли к их бокам, и откладывают их по пути, свидетельствуя о своих путешествиях. При продолжающейся инкубации отдельные депонированные бактерии вырастают в колонии, описывающие путь червей.

вверху (стрелки); Пластина с шоколадным агаром, засеянная образцом мокроты, показывающая любопытные петлевые следы бактерий, которые были отложены червем, мигрирующим по пластине во время инкубации.Заметив это любопытное свидетельство, на следующее утро пластину исследовали под микроскопом, однако червь, оставивший эти следы, не был обнаружен.

Strongyloides stercoralis может мигрировать из желудочно-кишечного тракта и проходить через легкие. Червя можно откашливать и / или повторно проглотить, чтобы повторно заразить пациента. Лечащий врач отметил, что у этого пациента возникла рвота «кофейной гущей» (гематемезис). Это частично переваренная мокрота с оттенком крови, которая откашливается или, возможно, проглатывается, а затем откашливается.Он имеет вид влажной кофейной гущи, отсюда и описание. Образец мокроты, полученный нашей лабораторией, больше не имел такого вида кофейной гущи. Нашим пациентом был пожилой джентльмен с несколькими другими заболеваниями, которые здесь не упоминаются.

На этом граммовом пятне мокроты видны два червя Strongyloides stercoralis — один скрученный, а другой прямо над ним. Фон усеивают белые кровяные тельца.
Обратите внимание на микронную полосу в правом верхнем углу. (DMD-108 Microscope X100)

Те же черви, что и выше (Gram Stain X1000)

Другой червь Strongyloides stercoralis (обратите внимание на полосатую текстуру тела)
(Gram Stain of Sputum — DMD-108 Microscope: X1000)

Front end of worm с видимой щечной полостью.
Сравните размер с присутствующими грамотрицательными бациллами.
(Окрашивание по Граму мокроты — микроскоп DMD-108 X1000)

Strongyloides stercoralis в изоляте мокроты, окрашенном железом гематолксиином.
(DMD-108 Microscope X1000)

Два червя Strongyloides stercoralis, обнаруженные в этом окрашенном гематоксилином железе препарате полученного образца мокроты. Присутствуют многочисленные лейкоциты.
(DMD-108 Microscope X100) После запроса дополнительных образцов образцов (и образца кала для интереса) были также обнаружены яйца Strongyloides stercoralis, содержащие развивающиеся личинки.
Выше; Присутствуют и червь, и яйцо, причем на одном конце яйца тянется какой-то случайный материал. (Концентрат образца мокроты DMD-108 Microscope X100)

То же яйцо, что и выше, с посторонним материалом, уходящим в нижний правый угол
(DMD-108 Microscope X400)

Другое яйцо Strongyloides stercoralis, содержащее развивающиеся личинки
(Концентрат — DMD-108 Microscope X400 )

Червь Strongyloides stercoralis в мокроте.
(Концентрат — DMD-108 X400)

В лабораторию был получен образец стула, однако диагноз уже был поставлен, исходя из тех довольно незаметных следов, оставленных червем на среде с бактериальным агаром.

Для получения дополнительной информации о клинических симптомах, диагностике и т. Д., Пожалуйста, обратитесь к моему предыдущему посту, расположенному здесь; Strongyloides stercoralis
Вернуться к началу (Самые свежие сообщения)

МИКРОСКОПИЯ ОБРАЗЦОВ МАТЕРИАЛА MicroDok microbiology

AIM: Выявить присутствие гнойных клеток и преобладающих бактерий в образцах мокроты в качестве вспомогательного средства в диагностике инфекций нижних дыхательных путей, таких как пневмония или бронхопневмония.

МАТЕРИАЛ / АППАРАТ: Образец мокроты, предметное стекло, микроскоп, иммерсионное масло, посевная петля, горелка Бунзена, кусок палочки.

МЕТОД / ПРОЦЕДУРА:

1. Перенесите гнойную часть образца мокроты на чистое предметное стекло с помощью стерилизованной посевной петли или куска чистой палочки.
2. Сделайте тонкий мазок гнойной мокроты на предметном стекле.
3. Поместите слайд в безопасное место вдали от пыли, чтобы он высох.
4. Тепло зафиксируйте пятно на предметном стекле, трижды пропустив его над пламенем горелки Бунзена.
5. Выполните окрашивание по Граму.
6. Дайте слайду, окрашенному по Граму, высохнуть.
7. Добавьте каплю иммерсионного масла на предметное стекло.
8. Изучите / понаблюдайте за окрашенным предметным стеклом под микроскопом, используя линзу объектива × 100 / масляная иммерсия.
9. Обратите внимание на гнойные клетки и преобладающие бактерии в мазке.

ОТЧЕТНОСТЬ О РЕЗУЛЬТАТЕ:

Опишите и сообщите внешний вид образца мокроты.Внешний вид образца мокроты можно описать с помощью любого из следующих параметров:

• Гнойный: зеленый цвет, в основном гной.
• Слизисто-гнойный: зеленый цвет с гноем и слизью.
• Слизистая: в основном слизистая.
• Слизисто-слюнная: слизистая с небольшим количеством слюны.
• Кровь: Мокрота, содержащая некоторое количество крови.

ПРИМЕЧАНИЕ: Наличие крови в образце мокроты может быть связано с парагонимозом, вызванным паразитом Paragonimus westermani . P. westermani — легочная двуустка человека, поражающая легкие.

Внимательно изучите предметное стекло под микроскопом и обратите особое внимание на:

• Капсулированный грамположительный диплококк (например, Streptococcus pneumoniae ).
• грамположительных кокков в группах (например, Staphylococcus aureus ).
• Капсулированные грамотрицательные палочки (например, Klebsiella pneumoniae ).
• Грамотрицательные палочки и коккобациллы (e.грамм. Haemophilus influenzae ).
• Грамотрицательные диплококки, которые обычно обнаруживаются в гнойных клетках и между ними (например, Moraxella catarrhalis ).