Neisseria flava что это такое: Нейссерии: возбудители гонореи и менингита

Нейссерии: возбудители гонореи и менингита

Нейссерии (Neisseria) — род грамотрицательных кокковидных бактерий. Своё название род Neisseria получил в честь немецкого дерматовенеролога и бактериолога Альберта Людвига Нейссера (1855-1916), который открыл возбудителя гонореи (1879 г.).

Род Neisseria включает в себя патогенные для человека виды нейссерий: возбудителя гонореи (Neisseria gonorrhoeae) и возбудителя менингита (Neisseria meningitidis). Традиционно Neisseria gonorrhoeae часто называют гонококком, а Neisseria meningitidis — менингококком.

Также у человека выделяют непатогенные виды нейссерий, обитающих на слизистых оболочках: Neisseria sicca, Neisseria mucosa, Neisseria perflava.

Гонококковая инфекция (гонорея)

Гонорея относится к инфекциям, передаваемым половым путем (ИППП).

Neisseria gonorrhoeae — грамотрицательная бактерия, принадлежащей к семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.

Возбудитель гонореи, как и возбудитель урогенитального хламидиоза (Chlamydia trachomatis), имеет высокую тропность к цилиндрическому эпителию, поэтому поражает цервикальный канал, эндометрий, маточные трубы, уретру.

Неосложненная гонорея у мужчин протекает чаще всего в форме острого гнойного или гнойно-слизистого уретрита. Признаками гонореи у женщин является цервицит с гнойно-слизистыми выделениями. При аногенитальных и орогенитальных контактах возможно развитие проктита или фарингита.

Симптомы и проявления гонококковой инфекции, за небольшим исключением, неспецифичны, для постановки диагноза необходимы лабораторные исследования для выявления возбудителя гонореи.

У мужчин до 15% случаев гонококковой инфекции может протекать без клинической симптоматики, а у 5-10% не сопровождается и лабораторными признаками уретрита. У женщин доля бессимптомных форм гонореи может достигать 45-55%.

Как при клинически выраженных, так и при малосимптомных формах гонококковой инфекции при отсутствии лечения высок риск развития осложнений. У мужчин осложнениями гонореи являются стриктуры уретры, простатит, орхоэпидидимит; у женщин — эндометрит, сальпингит, сальпингоофорит, пельвиоперитонит, тубоовариальный абсцесс, внематочная беременность, трубное бесплодие.

Своевременно проведенное лабораторное исследование позволяет вовремя поставить диагноз и предотвратить развитие осложнений.

Менингококковая инфекция (менингит)

Возбудителем менингококковой инфекции (менингита) является Neisseria meningitidis (менингококк).

Менингококковая инфекция – острое инфекционное заболевание, протекающее в виде острого назофарингита, гнойного менингита и менингококкцемии.

Штаммы менингококка в зависимости от химического строения капсулы делятся на группы: А, В, С, X, Y, Z, W-135, 29-E, H, I, K, L. Более чем 90% случаев генерализованных форм менингококковой инфекции  обусловлены штаммами групп А, В и С, значительно реже – штаммами групп X, Y и W-135, остальные группы не представляют эпидемиологического интереса.

Менингококковая инфекция поражает лиц всех возрастов, но чаще (70%) болеют дети. Показатель летальности при менингите составляет в среднем 10%, что определяет высокую социальную значимость заболевания.

Колонизируя заднюю стенку носоглотки человека, менингококк может долгое время не вызывать заболевание. В этом случае, при отсутствии симптомов, его обнаружение возможно только в результате лабораторного обследования. Часто назофарингит предшествует развитию менингита.

Менингит – воспаление оболочки головного и/или спинного мозга. Говоря «менингит» обычно подразумевают воспаление именно мягкой мозговой оболочки, так как эта патология встречается чаще других. К симптомам менингита относят:

• общеинфекционные симптомы – озноб, повышение температуры тела до 40-42°, учащение пульса и частоты дыхания;
• менингеальный синдром – напряжение мышц туловища и конечностей, гиперестезия, повышенная чувствительность к звуковым, световым и болевым стимулам, болевые феномены (болезненность при надавливании на глазные яблоки, в точках выхода тройничного нерва), симптомы Кернига и Брудзинского;
• общемозговые симптомы – тошнота, рвота «фонтаном», не приносящая облегчение, головная боль, нарушение сознания (психомоторное возбуждение), головокружение, судороги и др.

При менингите, обусловленном именно Neisseria meningitidis, показательным симптомом является сыпь. Она носит геморрагических характер и «звёздчатую» форму. Начинается с бедер и ягодиц, распространяется по телу. Появление сыпи на лице – неблагоприятный признак.

Лабораторная диагностика генерализованной формы менингококковой инфекции (менингита) включает микроскопию биологического материала, посев биоматериала с дальнейшей культуральной и биохимической идентификацией возбудителя, определением чувствительности к антибиотикам; обнаружение специфических антител методом РПГА.

Дифференциальная диагностика болей в горле

И.Б. АНГОТОЕВА, к.м.н., кафедра оториноларингологии Российской медицинской академии последипломного образования

Боль в горле — это жалоба, с которой довольно часто обращаются пациенты к лор-врачу и терапевту. Однако боль в горле не всегда означает ангину или другое воспалительное заболевание ротоглотки. Это утверждение имеет практическое значение, поскольку, как надеется автор, оно поможет врачу провести дифференциальный диагноз заболеваний, при которых может возникнуть боль в горле. В конечном итоге, если удалось правильно поставить диагноз, предоставляется возможность оказать квалифицированную помощь.

 

Чаще всего боль в горле беспокоит пациентов с острой респираторной вирусной инфекцией (ОРВИ). Боль в горле при ОРВИ обычно невыраженная, в основном пациенты жалуются на першение в горле или несильные боли при глотании. Боли в горле при ОРВИ сопровождаются кашлем и насморком. Причем важным моментом является то обстоятельство, что начало заболевания проявляется в носовой полости, только затем присоединяются боли в горле.

Этиологическая диагностика затруднена, особенно в рутинной практике. Врач на первичном приеме не может точно сказать, каким вирусом вызвана данная инфекция у конкретного пациента. Имея лишь время для сбора жалоб и анамнеза, при классической клинической картине, врач может предположить влияние того или иного вируса, с которым он имеет дело. В этом положении практические врачи вынуждены опираться на данные литературы. В большинстве случаев (20—30%) не удается точно идентифицировать вирус, вызвавший заболевание у данного человека, даже прибегнув к помощи вирусологической лаборатории. Данные успешной верификации диагноза на 1-е место в этиологии ОРВИ верхних дыхательных путей ставят риновирусы (30—50%). Надо отметить, что вирус гриппа вызывает только от 5 до 15% случаев от всех ОРВИ [3]. В то же время этиологическое лечение ОРВИ существует в основном против вирусов гриппа. Это объясняет неудачи при эмпирическом выборе противовирусных препаратов. Поэтому приходится проводить симптоматическое лечение, основой которого являются препараты местного применения. Препаратами выбора при болях в горле при ОРВИ являются антисептики. При выраженных болях в горле применяют препараты, содержащие нестероидные противовоспалительные препараты. В некоторых случаях возможно применение препарата Эреспал, оказывающего комплексное воздействие на организм: антигистаминное, противоспалительное, спазмолитическое.

Ангина — это инфекционное заболевание, с преимущественным поражением небных миндалин, которое чаще всего вызывается стрептококковой инфекцией (Streptococcus pyogenes). Однако причиной возникновения ангины могут быть грибы, вирусы и другие бактериальные агенты:

•    Staphylococcus aureus,

•    Diplococcus pneumoniae,

•    Cory-nebacterium diphtheriae,

•    Bordetella pertussis,

•    Haemophilus influenzae,

•    Neisseria species.

Путь распространения инфекции: воздушно-капельный (при чиханье и кашле больного, а также через посуду и другие бытовые предметы). Инкубационный период 1—2 дня.

Виды ангин:

1. Катаральная ангина (рис. 1) — характеризуется гиперемией слизистой оболочки небных миндалин

.

Катаральную ангину стоит отличать от респираторно-вирусной инфекции, при которой гиперемия и отек слизистой оболочки преимущественно наблюдаются на задней стенке глотки, а не на небных миндалинах (рис. 2).

Кроме того, при ангине пациент не будет жаловаться на кашель и насморк, а при ОРВИ чаще всего заболевание начинается с насморка, а першение и боли в горле присоединяются позже. Если пациент остается без лечения, то катаральная ангина может перейти в фолликулярную и даже в лакунарную ангины.

2. Фолликулярная ангина характеризуется более выраженными болями в горле и гнойным воспалением в лакунах, которое выглядит как четко очерченные островки (рис. 3). Боль в горле интенсивная при глотании.

3. При лакунарной ангине небные миндалины покрыты грязно-желтым налетом. Боль в горле давящего характера, глотание затруднено меньше. Общее состояние страдает меньше, чем при фолликулярной ангине (рис. 4).

Клиника ангины:

•    боли в горле разной интенсивности (от незначительных болей при глотании до выраженных, при которых затруднен прием пищи),

•     лихорадка — фебрильные цифры,

•    лимфаденит — увеличение шейных лимфоузлов по передней поверхности кивательной мышцы.

Характерно острое начало, как правило, после переохлаждения, сначала возникает боль в горле и повышается температура тела. Страдает общее состояние пациента: ощущение ломоты в мышцах, слабость, головная боль.

Лечение ангины предполагает применение системной антибиотикотерапии и местных средств.

При решении вопроса о системной антибиотикотерапии руководствуются следующими критериями:

•    фебрильная лихорадка,

•    воспалительный экссудат в лакунах миндалин,

•    увеличение передних шейных лимфоузлов,

•    отсутствие насморка и кашля,

•    положительный тест на стрептококк.

 Наличие двух или трех вышеперечисленных критериев является показанием к назначению системной антибактериальной терапии [4].

При назначении местной терапии врач находится перед большим выбором лекарственных препаратов. Если разбираться в их многообразии, то следует отметить следующие группы (табл. 1):

•    антисептики,

•    антибиотики,

•    нестероидные противовоспалительные препараты,

•    иммуностимуляторы,

•    растительные антисептики.

Местная терапия при ангине средней степени и тяжелой степени тяжести назначается дополнительно к системной антибиотикотерапии. В качестве монотерапии местные препараты используются только при легкой степени тяжести.

При ангине логично назначать антисептики, антибиотики. При выраженных болях назначают нестероидные противовоспалительные препараты, но не более 3 дней, и у препаратов имеется суточное ограничение до 4—5 раз в день.

 
Инфекционный мононуклеоз — инфекционное заболевание, вызванное вирусом Эпштейна — Барр, проявляющееся поражением ретикулоэндотелиальной и лимфатической систем.

Симптомы инфекционного мононуклеоза:

•    лихорадка,

•    тонзиллит (рис. 5),

•    полиаденит — увеличиваются не только шейные лимфоузлы, но и подмышечные и паховые лимфоузлы,

•    увеличение печени и селезенки,

•    лейкоцитоз с преобладанием базофильных мононуклеаров.

 

Заболевание начинается с лихорадки и болей в горле. Общее состояние в ряде случаев страдает очень сильно. Пациенты жалуются на плохое самочувствие, упадок сил, снижение аппетита. Боли в горле могут носить у взрослых интенсивный характер. Затем увеличиваются лимфоузлы, лихорадка разнообразна по характеру и продолжительности. Возможно возобновление лихорадки после уменьшения цифр температуры тела. У пациентов, которым была назначена системная антибиотикотерапия, особенно аминопенициллины, появляется сыпь. Поэтому для раннего выявления инфекционного мононуклеоза необходимо провести общий анализ крови, в котором могут быть обнаружены мононуклеары, но это не специфическая реакция организма. Повышение этих клеток может быть и при других вирусных инфекциях. Необходимо использовать обнаружение в крови IgM, который является показателем острой фазы заболевания, появляется одновременно с клиническими симптомами и сохраняется в течение 1—2 мес. IgG обнаруживается в течение жизни у всех пациентов, перенесших инфекционный мононуклеоз. Его исследование значимо только для проведения эпидемиологических исследований [5].

Для местного лечения инфекционного мононуклеоза препаратами выбора являются антисептики.

Однако боль в горле не всегда вызывается воспалительными заболеваниями глотки. Боль в горле может быть вызвана хроническим фарингитом на фоне ларингофарингеального рефлюкса (ЛФР). Этот термин был предложен в 1991 г. J. Koufman. Ларингофарингеальный рефлюкс — это обратный ток жидкости из желудочно-кишечного тракта на слизистую оболочку гортани и глотки. Это самое частое проявление экстраэзофагеального рефлюкса [1].

Клинические проявления ЛФР:

•    першение в горле,

•    чувство инородного тела или «комка», который пациент не может проглотить,

•    постоянное покашливание,

•    обилие слизи в ротоглотке и гортаноглотке,

•    налет на языке,

•    кровоточивость десен,

•    афты,

•    отпечатки зубов на языке,

•    несоответствие выраженности симптомов, которые предъявляет пациент (например, очень сильные боли в горле) и фарингоскопической картины,

•    симптомы, связанные с неприятными ощущениями в ушах, которые не фиксируются объективно (от «хлопков» в ушах до заложенности уха),

•    несоответствие выраженности симптомов со стороны гортани, осиплость вплоть до афонии и ларингоскопической картины,

•    неэффективность системной антибиотикотерапии при болях в горле.

Если боль в горле не очень интенсивная, больше першение, иногда сопровождается кашлем и наблюдаются вышеперечисленные клинические симптомы, то можно говорить о ЛФР. Для уточнения диагноза возможно провести анкетирование пациента. Анкета «Индекс симптомов рефлюкса» (J. Koufman) переведена на русский язык, ее валидность доказана, анкета обладает высокой чувствительностью. Пациенту необходимо оценить нижеперечисленные симптомы: 0 — отсутствие симптома, 5 — мучительно на столько, на сколько можно представить (табл. 2).

Все баллы суммируются, и в зависимости от суммы осуществляется интерпретация полученных данных: от 0 до 9 баллов — рефлюкс желудочного содержимого в гортань и пищевод являлся сомнительным и не учитывается при терапии данного пациента; от 9 до 13 баллов — диагноз ГЭРБ является вероятным и требует подтверждения дополнительными клиническими методиками; при сумме выше 13 баллов — диагноз лор-формы ГЭРБ расценивается как несомненный.

Назначение антисептических и антибактериальных препаратов пациентам, у которых по анкете ИСР более 13 баллов не только не помогает, но и вызывает ухудшение состояния и усиление симптомов. Таких пациентов необходимо направить к гастроэнтерологу. Препаратами скорой помощи для таких пациентов являются антациды.

Приведем клинический пример из практики доктора О.Н. Романовой, к.м.н., который показывает ценность культурального посева с небных миндалин. Пациент М., 40 лет, обратился за помощью к оториноларингологу с болями в горле. При фарингоскопии были обнаружены гнойные налеты на миндалинах (рис. 7). Был назначен защищенный пенициллин как первая линия при эмпирическом назначении системных антибиотиков. Недельный курс этого антибиотика не был успешен, но к моменту оценки курса лечения был готов культуральный посев с небных миндалин и выявлено, что ангину вызвала Pseudomonas aeruginosa (крайне редкая ситуация). При назначении курса ципрофлоксацина ангина у данного пациента разрешилась.

Таким образом, боль в горле не всегда возникает при воспалительных заболеваниях ротоглотки. Врачу на приеме нельзя забывать:

•    о проведении стрептотеста при всех острых состояниях ротоглотки,

•     проведении культурального посева с небных миндалин при ангине,

•     проведении анкетирования с использованием ИСР,

•     проведении общего анализа крови,

•    проведении общего анализа мочи (для исключения генерализованных стрептококковых инфекций),

•     проведении биохимического анализа крови (антистрептолизин О, С-реактивный белок, ревматоидный фактор).

Тщательное выполнение всех пунктов вышеприведенного алгоритма важно для достижения хороших результатов лечения и профилактики осложнений.

Литература

1.    Koufman JA. The otolaryngologic manifestations of gastroesophageal reflux disease (GERD): a clinical investigation of 225 patients using ambulatory 24-hour pH monitoring and an experimental investigation of the role of acid and pepsin in the development of laryngeal injury. Laryngoscope, 1991, 101 (53): 1-78.

2.    Lund VJ, Grouin JM, Eccles R, Bouter C, Chabolle F. Efficacy of fusafungine in acute rhinopharyngitis: a pooled analysis. Rhinology, 2004, 42(4): 207-212.

3.    Бартлетт Дж. Инфекции дыхательных путей. Пер. с англ. М.: Бином, 2000: 192.

4.    Шпынев К.В., Кречиков В.А. Современные подходы к диагностике стрептококкового фарингита. КМАХ, 2007, 9 (1).

5.    Шувалова Е.П. Инфекционные болезни: учебник. М.: Медицина, 2005.

Источник: Медицинский совет, № 15, 2014

Neisseria — Neisseria — qaz.wiki

Род бактерий

Neisseria — это большой род бактерий , колонизирующих слизистые оболочки многих животных. Из 11 видов, населяющих людей, только два являются патогенами : N. meningitidis и N. gonorrhoeae . Большинство гонококковых инфекций протекает бессимптомно и проходит самостоятельно, а эпидемические штаммы менингококка могут переноситься> 95% населения, где распространенность системного заболевания составляет <1%.

Виды Neisseria — это грамотрицательные бактерии, входящие в состав протеобактерий , большой группы грамотрицательных форм. Neisseria diplococci напоминает кофейные зерна при микроскопическом рассмотрении.

История

Рода Neisseria назван в честь немецкого бактериолога Альберта Нейсер , который в 1879 году открыл свой первый пример, гонококки , патоген , который вызывает гонорею заболевания людей. Нейссер также стал соавтором патогена, вызывающего проказу , Mycobacterium leprae . Эти открытия стали возможными благодаря разработке новых методов окрашивания, которые он помог разработать.

Классификация

Патогены

Виды паразитических бактерий этого рода (семейство Neisseriaceae) растут парами, а иногда и тетрадными, и лучше всего развиваются при температуре 98,6 ° F (37 ° C) в организме животного или в сыворотке.

В род входят:

Эти два вида обладают способностью «преодолевать» барьер. Местные цитокины в этой области секретируются, чтобы вызвать иммунный ответ . Однако нейтрофилы не могут выполнять свою работу из-за способности Neisseria вторгаться и реплицироваться внутри нейтрофилов , а также избегать фагоцитоза и уничтожаться комплементом , сопротивляясь опсонизации антителами, которые нацелены на патоген для разрушения. Виды Neisseria также способны изменять свои антигены, чтобы избежать захвата процессом, называемым антигенной изменчивостью , который наблюдается в основном в молекулах, расположенных на поверхности. В патогенных видов , наряду с некоторыми синантропных видов, имеют тип IV фимбрии , которые служат несколько функций для этого организма. Некоторые функции пилей типа IV включают: опосредование прикрепления к различным клеткам и тканям, подергивание подвижности, естественную компетентность, формирование микроколоний , обширную фазу внутри напряжения и антигенную изменчивость.

Бактерии Neisseria также являются важным фактором на ранних стадиях развития бляшек у собак.

Филогенетическое дерево выбранных видов Neisseria , основанное на конкатенации последовательностей ДНК всех 896 основных генов Neisseria, от Marri et al. 2010 г.

Непатогены

Этот род также включает несколько видов, которые считаются комменсальными или непатогенными:

Однако некоторые из них могут быть связаны с болезнью.

Биохимическая идентификация

Все важные с медицинской точки зрения виды Neisseria положительны как на каталазу, так и на оксидазу . Различные виды Neisseria можно идентифицировать по набору сахаров, из которых они производят кислоту. Например, N. gonorrhoeae производит кислоту только из глюкозы , а N. meningitidis производит кислоту как из глюкозы, так и из мальтозы .

Капсула из полисахарида. N. meningitidis имеет полисахаридную капсулу, которая окружает внешнюю мембрану бактерии и защищает от растворимых иммунных эффекторных механизмов в сыворотке . Считается, что он является важным фактором вирулентности бактерий. У N. gonorrhoeae такой капсулы нет.

В отличие от большинства других грамотрицательных бактерий, которые обладают липополисахарида (LPS), как патогенные и синантропных видов Neisseria имеют lipooligosaccharide (ЛОС) , который состоит из основного полисахарида и липида А . Он действует как эндотоксин , защищает от антимикробных пептидов и прикрепляется к рецептору асиалогликопротеина на эпителии уретры . LOS оказывает сильное стимулирующее действие на иммунную систему человека. ЛОС — сиалилирование ( с помощью фермента Lst) предотвращает фагоцитоз с помощью нейтрофилов и комплемента осаждения. Модификация LOS фосфоэтаноламином (ферментом LptA) обеспечивает устойчивость к антимикробным пептидам и комплементу. Штаммы одного и того же вида обладают способностью продуцировать разные гликоформы LOS .

Геномы

Полностью секвенированы геномы как минимум 10 видов Neisseria . Наиболее изученными видами являются N. meningitidis с более чем 70 штаммами и N. gonorrhoeae с как минимум 10 полностью секвенированными штаммами. Другие полные геномы доступны для Н. elongata , Н. lactamica , и Н. weaveri . Полногеномные последовательности доступны для сотен других видов и штаммов. N. meningitidis кодирует от 2440 до 2854 белков, тогда как N. gonorrhoeae кодирует от 2603 до 2871 белка. N. weaveri (штамм NCTC 13585) имеет наименьший из известных геномов — всего 2060 кодируемых белков, хотя , как сообщается, у N. meningitidis MC58 всего 2049 генов. Геномы в целом очень похожи. Например, если сравнить геном N. gonorrhoeae (штамм FA1090) с геномом N. meningitidis (штамм h54 / 76), 68% их генов являются общими.

Приобретение железа

Железо абсолютно необходимо всем формам жизни, играя решающую роль в ряде важных процессов. Свободное железо , по крайней мере то, что было бы легко доступно микробным патогенам, у животных практически не существует. У позвоночных большая часть железа хранится внутри клеток в комплексе с ферритином или гемоглобином . Внеклеточное железо содержится в жидкостях организма в комплексе с трансферрином или лактоферрином .

Патогены приобретают железо двумя разными способами

1. Поглощение железа, опосредованное сидерофором, превосходит трансферрин и / или лактоферрин за связывание железа. Затем связанные с железом сидерофоры попадают в бактерию через специфические рецепторы.
2. Прямое поглощение связанных с железом белков хозяина включает бактерии, обладающие высоким сродством к трансферрину, лактоферрину и гемоглобину (подход, используемый патогенными видами Neiserria ).

Рецепторы : HmbRm, HpuA и HpuB являются рецепторами гаптоглобина-гемоглобина . LbpAB — это рецептор лактоферрина человека. TbpAB (Tbp1-Tbp2) является рецептором трансферрина человека. Все эти рецепторы используются для приобретения железа как патогенными, так и комменсальными видами.

Вакцина

Заболевания, вызываемые N. meningitidis и N. gonorrhoeae, представляют собой серьезные проблемы для здоровья во всем мире, борьба с которыми во многом зависит от доступности и широкого использования комплексных менингококковых и гонококковых вакцин. Разработка нейссериальных вакцин была сложной задачей из-за природы этих организмов, в частности, гетерогенности , вариабельности и / или низкой иммуногенности компонентов их внешней поверхности. Являясь чисто человеческими патогенными микроорганизмами, они в высокой степени адаптированы к среде хозяина, но разработали несколько механизмов, позволяющих приспосабливаться к изменяющимся микросредам и избегать уничтожения иммунной системой хозяина . В настоящее время менингококковые инфекции серогрупп A, B, C, Y и W-135 можно предотвратить с помощью вакцин. Однако перспектива разработки вакцины против гонококка далека.

Устойчивость к антибиотикам

Приобретение устойчивости к цефалоспорину у N. gonorrhoeae , в частности устойчивости к цефтриаксону, значительно усложнило лечение гонореи, при этом гонококк теперь классифицируется как « супербактерия ».

Генетическая трансформация

Генетическая трансформация — это процесс, с помощью которого бактериальная клетка-реципиент берет ДНК из соседней клетки и интегрирует эту ДНК в геном реципиента путем рекомбинации . У N. meningitidis и N. gonorrhoeae трансформация ДНК требует наличия коротких последовательностей ДНК (9-10 мономеров, находящихся в кодирующих областях) донорной ДНК. Эти последовательности называются последовательностями захвата ДНК (DUS). Специфическое распознавание DUS опосредуется пилином IV типа. Davidsen et al. сообщили, что у N. meningitidis и N. gonorrhoeae DUS встречаются со значительно более высокой плотностью в генах, участвующих в репарации и рекомбинации ДНК (а также в рестрикционной модификации и репликации ), чем в других аннотированных группах генов. Эти авторы предположили, что избыточное представительство DUS в генах репарации и рекомбинации ДНК может отражать преимущество поддержания целостности механизма репарации и рекомбинации ДНК за счет предпочтительного использования генов поддержания генома, которые могут заменить их поврежденные аналоги в клетке-реципиенте. Caugant и Maiden отметили, что распределение DUS согласуется с рекомбинацией, которая в первую очередь является механизмом репарации генома, который иногда может приводить к генерации разнообразия, которое даже в более редких случаях является адаптивным. Это также было предложено Michod et al. что важным преимуществом трансформации N. gonorrhoeae является рекомбинационная репарация окислительных повреждений ДНК, вызванных окислительной атакой фагоцитарных клеток хозяина .

Международная конференция по патогенным

нейссериям

Международная Патогенные Neisseria конференция (IPNC), происходящий раз в два года, является форумом для презентации передовых исследований по всем аспектам рода Neisseria . Это включает иммунологию, вакцинологию, физиологию и метаболизм N. meningitidis , N. gonorrhoeae и комменсальных видов. Первый IPNC был проведен в 1978 году, а последний — в сентябре 2016 года. Обычно конференц-связь переключается между Северной Америкой и Европой, но впервые она прошла в Австралии в 2006 году, где располагалась площадка. в Кэрнсе .

Рекомендации

Бактериологическое исследование отделяемого верхних дыхательных путей на микрофлору с определением чувствительности к антибиотикам (количественный метод)

АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:

355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:

355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-68-89 (факс)

Посмотреть подробнее

Клиника семейного врача:

355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-50-60 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Невинномысский филиал:

357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1

(86554) 95-777, 8-962-400-57-10 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :

369000, г. Черкесск, ул. Умара Алиева 31

8(8782) 26-48-02, +7-988-700-81-06 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :

358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47

8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:

355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:

355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9

8 (8652) 316-847 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :

355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77

8(8652) 951-943 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:

358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).

8(988) 099-15-55 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Нормы для бактериологии

Mechanisms of the formation of Neisseria gonorrhoeae resistance to cephalosporins | KOZHUSHNAYA

The authors provide a review of the present-day literature data on the issues of studying the mechanisms of the formation of Neisseria gonorrhoeae resistance to third-generation cephalosporins. Studies in this field are needed in connection with the occurrence of strains resistant to third-generation cephalosporins as well as low-sensitivity strains. The authors emphasize the importance of mutations in porB, penA, mtrR, penB and ponA genes in the development of Neisseria gonorrhoeae resistance to β-lactam antibiotics and describe the prospects of studying the mosaic structure of the penA gene encoding the РВР2 protein as well as spatial structure of this protein.

Keywords

Neisseria gonorrhoeae, penA, mtrR, penB, ponA, Neisseria gonorrhoeae, antimicrobial drugs, resistance, cephalosporins, porB, penA, mtrR, penB, ponA genes, mosaic structure of the penA gene .

Одним из важных условий успешной терапии гонококковой инфекции является определение чувствительности возбудителя N. gonorrhoeae, выделенного от больного, к антимикробным препаратам (АМп). Однако на практике при первичном обследовании пациента это исследование ввиду его трудоемкости и длительности либо отсутствия в медицинской организации налаженной культуральной диагностики гонококковой инфекции нередко не проводится, что вызы вает необходимость определения антимикробных препаратов выбора для терапии гонококковой инфекции. Следует отметить, что в последние десятилетия в связи с возникновением устойчивости N. gonorrhoeae к АМп и широким распространением штаммов N. gonorrhoeae, резистентных к различным группам АМп, происходит смена препаратов выбора, применяемых для лечения гонококковой инфекции. Так, в 1987 г. на смену пенициллину, а затем и тетрациклинам приш © Н.В. Фриго и соавт., 2012 Vestn Dermatol Venerol 2012; 5: 44—51. Контактная информация: [email protected] Обзор литературы А 45 ли фторхинолоны и цефалоспорины третьего поколения [1]. Однако с середины 1990-х годов прошлого века начали появляться сообщения о неудачах в лечении гонококковой инфекции с применением фторхинолов и участившихся случаях резистентности к ним штаммов N. gonorrhoeae [2—4]. Широкое распространение резистентности N. gonorrhoeae к фторхинолонам привело к их исключению из схем эмпирической терапии гонококковой инфекции в странах Европы и США [5, 6]. С 2010 г. на основании результатов многолетнего мониторинга резистентности N. gonorrhoeae к АМп, проводившегося на территории Российской федерации при научно-методическом и организационном руководстве Государственного научного центра дерматовенерологии и косметологии Минздрава России, фторхинолоны были исключены из схем терапии гонококковой инфекции на территории Рф [7]. препаратами выбора, рекомендуемыми для лечения гонококковой инфекции, в настоящее время являются цефалоспорины третьего поколения [8, 9], в частности цефтриаксон и цефиксим [10]. Однако в последние годы все чаще появляются сообщения о выявлении штаммов N. gonorrhoeae со сниженным уровнем чувствительности к цефалоспоринам [11—16]. первые случаи неудачного лечения гонококковой инфекции цефалоспоринами третьего поколения были описаны в начале 2000 г. [17, 18], а в 2011 г. был впервые выделен резистентный к цефалоспоринам штамм N. gonorrhoeae [19]. Имеющихся к настоящему времени данных вполне достаточно, чтобы понять важность и необходимость исследований, направленных на выяснение молекулярных механизмов развития такой устойчивости. представление об этих механизмах должно быть учтено при создании АМп как той же биохимической группы, так и принципиально новых. цефалоспорины, как и пенициллины, по своей структуре относятся к большой группе β-лактамов, и снижение чувствительности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам может быть связано с общими для β-лактамов механизмами развития резистентности [20]. К настоящему времени уже известны различные молекулярные механизмы устойчивости N. gonorrhoeae к пенициллинам; возможно, некоторые из них могут играть важную роль и в снижении чувствительности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам. Можно предположить, что в результате продолжительного применения различных АМп у N. gonorrhoeae, как и у многих других микроорганизмов, сформировались два основных пути формирования антибиотико-резистентности: приобретение новых для бактерии генов — детерминант резистентности и изменения в собственном геноме. Новые для бактерий гены резистентности переносятся с помощью подвижных генетических элементов — плазмид и транспозонов в результате их горизонтального переноса. чаще все го с подвижными элементами передаются и гены ферментов, инактивирующих антибиотики. К изменению собственного генома относится появление мутаций в генах, кодирующих мишени действия антибиотиков, систему эффлюкса, а также пориновых каналов [21]. устойчивость N. gonorrhoeae к пенициллинам чаще всего обусловлена наличием гена пенициллиназы (TEM-1 β-лактамазы), кодирующего фермент, разрушающий β-лактамное кольцо антибиотика [9, 22]. Однако следует отметить, что цефалоспориназа, характерная для некоторых других микроорганизмов [23], у N. gonorrhoeae до сих пор не обнаружена [24]. К хромосомным механизмам формирования устойчивости N. gonorrhoeae к β-лактамам относят в первую очередь появление мутаций в генах ponA и penA, приводящих к снижению аффинности пенициллинсвязы-вающих белков [25]. Изменение нуклеотидного состава в гене ponA приводит к замене аминокислоты Leu на pro в положении 421 белковой цепи [26], а инсер-ция трех нуклеотидов в гене penA приводит к появлению аминокислоты Asp в положении 345 [27]. помимо модификации белков-мишеней причиной формирования устойчивости N. gonorrhoeae к β-лактамам может быть изменение проницаемости клеточной стенки и/или системы эффлюкса. при этом важную роль в развитии резистентности играют специфические мутации в промотере и кодирующей части гена mtrR, посредством которых через снятие репрессии увеличивается число MtrC-MtrD-MtrE-помп эффлюкса [28]. увеличение количества помп эф-флюкса приводит к развитию устойчивости микроорганизмов к некоторым гидрофильным антибиотикам, в том числе и к пенициллинам [29]. Еще одной молекулой, участвующей в формировании устойчивости N. gonorrhoeae к пенициллину, является белок наружной мембраны — порин porb1b. Мутации в кодирующем его гене penB приводят к снижению проницаемости мембраны для гидрофильных антибиотиков [30]. Однако эти мутации не повышают резистентность микроорганизма к β-лактамам при отсутствии мутации в гене mtrR. это дает основания предполагать, что MtrC-MtrD-MtrE-помпа и porb1b, работая совместно, вызывают повышение устойчивости N. gonorrhoeae к пенициллину путем ограничения концентрации антибиотика в периплазме микроорганизма [31]. помимо перечисленных выше механизмов устойчивости N. gonorrhoeae к пенициллинам можно добавить, что мутации или делеция гена pilQ2 (ранее называвшегося penC) повышают пенициллиноустойчи-вость N. gonorrhoeae, если при этом присутствуют детерминанты устойчивости в генах penA, mtrR и penB. это происходит предположительно потому, что pilQ формирует во внешней мембране N. gonorrhoeae поры, через которые антибиотики диффундируют в пери 46 к № 5, 2012 плазму [32]. Однако роль мутаций в гене pilQ в возникновении резистентности N. gonorrhoeae к β-лактамам окончательно не установлена [33]. В настоящее время группы ученых из японии, США и Австралии ведут исследования молекулярно-генетических механизмов устойчивости N. gonorrhoeae к цефалоспоринам, и из всех вышеописанных механизмов особое место отводится роли пенициллинсвязываю-щего белка РВР2. Большое значение для понимания механизмов развития резистентности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам имеет работа M. ito и соавт. [34], подробно изучивших взаимосвязь снижения чувствительности N. gonorrhoeae к цефиксиму и мозаичной структуры гена penA, кодирующего белок РВР2, которая, как полагают, является результатом межвидовой генетической рекомбинации N. gonorrhoeae, N. cinera и N. per-flava. Наличие мозаичности в структуре РВР2 у штаммов N. gonorrhoeae со сниженной чувствительностью к цефалоспоринам отмечалась и ранее [25], но именно в исследовании М. ito и соавт. был проведен ее тщательный анализ. Кроме того, М. ito и соавт. было предложено классифицировать все полученные последовательности белка РВР2 на группы, исходя из расположения мутаций в гене penA, т. е. по характеру мозаичности гена. этой классификацией многие исследователи пользуются до сих пор [12, 35], однако становится ясно, что для развития антибиотикорези-стентности имеет значение не сам факт мозаичности, а наличие конкретных мутаций, возможные варианты сочетаний и их количество. пока не ясно, какие именно мутации РВР2 определяют снижение чувствительности к цефалоспоринам у штаммов N. gonorrhoeae. Так, в исследовании В. whiley и соавт., направленном на выявление мутаций в белковой цепи РВР2 у штаммов N. gonorrhoeae, выделенных в период с 1988 по 2005 г., было показано, что 22 из 25 штаммов с мутацией A501v в белковой цепи, отнесенных к Xiii типу по ito, имели сниженную чувствительность к цеф-триаксону [35]. Анализ показал, что такая мутация повышает минимальную подавляющую концентрацию (МпК) цефиксима и других цефалоспоринов в 2—4 раза [36]. Согласно работам М. ito и соавт. [34] и R. Lindberg и соавт. [33], замена аминокислоты в позиции 501 также присутствовала у некоторых гонококков со сниженной чувствительностью к цеф-триаксону, но не была отнесена к какой-либо группе по характеру расположения мутаций. В экспериментах S. Takahata и соавт. [36] отмечалось, что основной мутацией в гене penA, приводящей к изменению структуры РВР2 и двух- или четырехкратному увеличению резистентности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам, является мутация, приводящая к замене глицина на серин в положении 545 белковой цепи (G545S). замена изолейцина в положении 312 на метионин (i312M) и валина в позиции 316 белковой цепи на треонин (v316T) в присутствии мутации G545S снижала чувствительность N. gonorrhoeae к цефикси-му, цефибутену и цефподоксиму еще в 4 раза. Таким образом, важную роль для развития резистентности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам, по-видимому, могут играть мутации, приводящие к следующим аминокислотным заменам в РВР2: G545S, i312M, v316T, A501v. позднее группой исследователей под руководством J. Tomberg был проведен ряд экспериментов, которые подтвердили ключевую роль четырех аминокислотных замен, описанных S. Takahata, в развитии антибиотикоустойчивости N. gonorrhoeae, в особенности по отношению к цефиксиму [10]. Вместе с тем было установлено, что наличие только трех ключевых мутаций в гене penA, приводящих к заменам аминокислот, а именно G545S, i312M, и v316T, обеспечивает штамму N. gonorrhoeae FA19 (дикий тип) относительно невысокое повышение МпК пенициллина, цефтриаксона и цефиксима (в 1,5, 1,5 и 3,5 раза соответственно). этот факт позволил предположить, что способность данных мутаций существенно повышать устойчивость N. gonorrhoeae к β-лактамным антибиотикам зависит от присутствия других мутаций в мозаичных аллелях penA. Авторами также было подтверждено значение мутации, приводящей к замене аминокислоты в положении 501 белковой цепи (A501v), которая до сих пор была обнаружена только в гене penA, не имеющем мозаичной структуры [35,37,38]. эксперимент по переносу мозаичного аллеля гена penA с мутацией, приводящей к замене аминокислоты в положении 501 белковой цепи (A501v), в изолят N. gonorrhoeae с хромосомно-обусловленной устойчивостью к пенициллину привел к повышению МпК цефтриаксона и цефиксима до пограничного уровня (0,4 и 1,2 г/мл соответственно). полученные результаты еще раз показали большую значимость возникновения данной мутации в гене penA N. gonorrhoeae, так как она является строго специфичной именно для N. gonorrhoeae и до сих пор не обнаружена у других представителей Neisseria spр. Скорее всего, данная мутация является результатом реакции микроорганизма на селективное давление, оказываемое цефалоспоринами — антимикробными препаратами широкого спектра действия. это предположение подтверждается и сообщениями S. Takahata и соавт. о спонтанном возникновении мутации A501v при проведении экспериментов по трансформации штаммов N. gonorrhoeae [36]. В исследованиях J. Tomberg и соавт. была обозначена еще одна мутация — N512Y, которая вносит вклад в снижение чувствительности гонококка к цефа-лоспоринам [10]. большинство исследователей считают, что значительную роль в развитии устойчивости N. gonorrhoeae к β-лактамам, в частности к цефало- ■ Вестник дерматологии и венерологии Обзор литературы А 47 споринам, играет инсерция Asp-345 [33—35]. Ее значение для снижения чувствительности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам отмечается и в работе М. Ito и со-авт. [34]. Однако для оценки вклада того или иного изменения молекулярной структуры генов и белков в развитие устойчивости микроорганизма к антибиотику помимо аминокислотной последовательности важно знать пространственную структуру белка. Недавно группой ученых из США [39] была получена третичная структура белка РВР2. проведенное исследование было направлено на выяснение роли отдельных мутаций РВР2 в развитии устойчивости N. gonorrhoeae к пенициллину, однако полученные результаты и выводы вполне могут быть применены и при анализе механизмов развития резистентности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам ввиду сходства молекул этих антибиотиков (рис. 1). В структуре РВР2 выделяют два домена: N-концевой (терминальный) и С-терминальный транспептидазный (или пенициллинсвязывающий) (рис. 2). Такая структура характерна для всех РВР белков. N-терминальный домен вытянут, имеет длину около 45 ангстрем и состоит из нескольких β-тяжей и субдомена, включающего короткие тяжи и небольшие спирали. функциональная роль этого домена остается неясной. Высказано предположение, что он может способствовать правильной ориентации каталитической части фермента от цитоплазматической мембраны к пептидогликановому субстрату, так как подобная функция описана для С-домена белка РВР5 E. coli [40]. Транспептидазный домен также может быть разделен на две составляющие его части: α- и α/β-субдомены с расположенным в углублении между ними активным центром фермента. Интересной особенностью этого фрагмента является выступающая β-складчатая структура, располагающаяся по ходу аминокислотной цепи между спиралями α2 и α4. В белках РВР2, выделенных из резистентных штаммов N. gonorrhoeae, в подавляющем большинстве случаев именно на этом участке обнаруживается инсер-ция аспаргиновой кислоты (Asp-345a) [41]. Мутации в С-терминальном домене, которые могут привести к снижению чувствительности N. gonorrhoeae к β-лактамам, должны располагаться на участках, формирующих активный центр, либо в непосредственной близости от него, чтобы иметь возможность влиять на архитектуру активного центра. С другой стороны, привнесенные изменения должны приводить к снижению реакционной способности фермента в отношении антибиотика, не нарушая при этом его нормальной функции, т. е. транспептидазной активности. Среди подобных мутаций в белковой цепи РВР2 авторы отмечают четыре основных: три из них — F504L, A510v и A516G — расположены в β4 или в разорванной петле между β4 и β3, еще одна — p551S — находится в спирали α11, которая лежит на С-конце белка (рис. 3). предполагается, что последняя мутация может играть важную роль в формировании устойчивости N. gonorrhoeae к пенициллину, так как по сравнению с РВР2 штамма N. gonorrhoeae дикого типа она в 3 раза снижает уровень ацилирования РВР2, в то время как аминокислотные замены F504L, A510v и A516G оказывают незначительное влияние (менее чем двукратное снижение ацилирования). Вместе с тем присутствие одновременно двух мутаций — F504L и p551S — снижает уровень ацилирования РВР2 почти таким же образом, что и четыре мутации одновременно. полученные результаты позволили предположить, что именно эти две мутации С-домена (F504L и p551S) вносят основной вклад в развитие устойчивости N. gonorrhoeae к пенициллину. Мутантный белок РВР2 имеет более низкую температуру плавления по сравнению с белком дикого типа, следовательно, мутации, связанные с устойчивостью N. gonorrhoeae к пенициллину, вносят в структуру белка некоторый дестабилизирующий эффект. B HH H С — N — С- С’ /Ch4 CH С — COOH H R2. ч У O OH A H H S R С O O С N N Рис. 1. Структурная организация молекул пенициллина (А), цефалоспорина (B) 48 к № 5, 2012 J Рис. 2. Структура РВР2 N. gonorrhoeae (цит. по: [39]) I Рис. 3. Расположение мутаций, связанных с устойчивостью к пенициллину, в структуре РВР2 [39]. Трехмерная структура транспептидазного домена РВР2, отражающая расположение мутаций вокруг активного центра фермента (содержит модель пенициллина в связанной форме). Мутации отмечены черными кружками ■ Вестник дерматологии и венерологии Обзор литературы А 49 Неожиданностью оказалось то, что четыре мутации в С-концевом домене РВР2, снижающие уровень ацилирования белка почти в 5 раз, оказывают лишь незначительное влияние на его архитектуру. это наблюдение можно объяснить двумя причинами: 1) мутации ведут к таким небольшим изменениям в структуре белка, что они не заметны на рентгенограмме, но вносят существенные изменения в кинетику, или 2) разные конформационные состояния фермента, имеющие разную ацилирующую активность, находятся в динамическом равновесии. Наличие мутаций смещает это равновесие в сторону дереактивации белка. Наблюдать эти состояния, используя метод кристаллографии, невозможно из-за того, что мутантный белок и белок дикого типа кристаллизуются только в одном, одинаковом конформационном состоянии. Расположение мутаций вблизи активного центра фермента, влияющих на изменение чувствительности микроорганизма к антибиотику, не является уникальным для белка РВР2 N. gonorrhoeae. Такое явление описано для ацетилхолинэстеразы Drosophila [42], протеазы HIv-1 [43], цитохрома Р450 Candida albicans [44] и некоторых других ферментов патогенных микроорганизмов. Таким образом можно предположить, что такое расположение мутаций является общей распространенной тенденцией при формировании устойчивости микроорганизмов к АМп. Интересной особенностью именно РВР2 N. gonorrhoeae оказалось то, что две аминокислотные замены располагаются на участке между β3 и β4 белковыми структурами, что подчеркивает важность этого региона. значение другой мутации — инсерции аспарагиновой кислоты в положении 345 аминокислотной последовательности — отмечается многими исследователями, поскольку она наиболее часто встречается в белках, выделенных из резистентных как к пенициллину, так и к цефалоспоринам штаммов N. gonorrhoeae [41]. Несмотря на то что эта мутация может снижать эффективность действия пенициллина (белка в отношении к пенициллину) более чем в 25 раз, в присутствии других мутаций ее эффективность резко снижается (снижение сродства к пенициллину только в 2 раза) [45]. Тот же эффект наблюдается для мутаций в С-терминальном домене. эти данные позволяют предположить, что эти два типа изменений — Asp-345a и С-терминальные мутации — антагонистичны друг другу. Мутации в С-терминальном домене РВР2 N. gonorrhoeae, обусловливающие устойчивость N. gonorrhoeae к пенициллину, оказывают незначительное влияние на структуру самого белка в отличие от механизмов, наблюдающихся у РВР2 S. pneumoniae, когда практически на всех уровнях организации белковой молекулы происходят серьезные перестройки [46]. подобный механизм, при котором отдельные мутации не влияют на основную функцию фермента, но оказывают существенное влияние на его взаимоотношения с АМп, может являться одним из путей эволюции антибиотикорезистентности патогенных микроорганизмов. присутствие мутации Asp-345a существенно влияет не только на активность фермента в отношении пенициллина, но и на структуру его молекулы. Такая инсерция не ведет к драматическим для белка и его основной функции последствиям потому, что введенная аминокислота замещает практически идентичную, которая находится в позиции 346 и восстанавливает все или почти все водородные связи, в которых та была задействована. Таким образом, не всякая инсерция может иметь место в данной позиции и баланс между развитием устойчивости к пенициллину и сохранением транспептидазной активности фермента весьма деликатен. Штаммы N. gonorrhoeae со сниженной чувствительностью к цефалоспоринам могут иметь полирези-стентный фенотип. почти всегда они проявляют устойчивость к пенициллинам, что вполне объяснимо, хотя могут быть нечувствительны и к другим группам антибиотиков [47]. появление полирезистентных штаммов N. gonorrhoeae связывают в основном с Азиатско-Тихоокеанским регионом, а точнее с японией. Так, в 2000 г. в японии был выделен штамм N. gonorrhoeae со сниженной чувствительностью к цефтриаксону [48]. Анализ чувствительности данного штамма к АМп показал, что он устойчив к действию пенициллина, тетрациклина, азитромицина и ципрофлоксацина. при этом в геноме штамма были обнаружены генетические детерминанты такой резистентности, т. е. мутации в генах penA, ponA, mtrR, penB, gyrA и parC. В 2001 г. четыре штамма N. gonorrhoeae, резистентные к пенициллину, тетрациклину и ципрофлоксаци-ну и при этом имеющие сниженную чувствительность к цефиксиму, были выделены и на Гавайских островах [49]. предполагается, что они могли быть занесены из японии, так как штаммы со сходным спектром анти-биотикорезистентности были получены там двумя годами ранее [18]. В 2011 г. в японии был выделен штамм N. gonorrhoeae (Н041) с самым высоким уровнем устойчивости к цефалоспоринам: МпК цефтриаксона составила 2—4 г/мл, что в 4—8 раз выше соответствующего показателя у штаммов, описанных ранее [19]. Выделенный штамм оказался устойчивым к различным β-лактамным антибиотикам, фторхинолонам, макролидам, тетрациклинам, триметоприм-сульфа-метоксазолину, хлорамфениколу и нитрофурантои-ну, однако диско-диффузионный метод определения чувствительности штамма N. gonorrhoeae к АМп выявил наличие его чувствительности к спектиномици-ну [50]. Штамму Н041 был присвоен новый NG-MAST сиквенс-тип (ST4220) и MLST сиквенс-тип (ST7363), были также генотипически охарактеризованы все основные детерминанты резистентности. Большинство 50 к № 5, 2012 мутаций в ключевых генах, ответственных за развитие антибиотикорезистентности (porB, penA, mtrR, penB, ponA1 (L421P), pilQ), были описаны у ранее выделенных штаммов N. gonorrhoeae со сниженной чувствительностью к цефалоспоринам, за исключением 12 аминокислотных замен в pbp2. Одна из этих мутаций (T486i) была обнаружена ранее в штаммах N. meningitidis и N. flavescens, а еще четыре — A311 v, v316p, L328T и T484S — были выявлены у Neisseria spр. впервые. Исходя из вышеизложенного можно сделать вывод о том, что в структуре РВР2 N. gonorrhoeae за устойчивость к пенициллину и цефалоспоринам отвечают изменения, возникающие на одних и тех же участках аминокислотной цепи. И хотя пока не ясно, какие конкретно мутации в гене, кодирующем данные участки, приводят к снижению чувствительности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам, можно с высокой долей вероятности обозначить «ключевые места» в последовательности белка, изменения в которых могут иметь важное значение для развития резистентности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам: это переход β3-структуры в β4, спирали а11 и а2, а также определенная как β2с-структура, несущая инсерцию Asp-345а. Все они окружают активный центр фермента и могут оказывать влияние на его архитектуру. В настоящее время не прекращаются исследования, направленные как на выявление штаммов N. gonorrhoeae со сниженной чувствительностью к це-фалоспоринам и анализ путей их распространения, так и на изучение молекулярных механизмов развития устойчивости к этой группе АМп. Можно надеяться, что в скором времени будут установлены локализация и характер ключевых мутаций, приводящих к развитию резистентности N. gonorrhoeae к цефалоспоринам, что позволит определить пути повышения эффективности антибиотикотерапии при лечении гонококковой инфекции.

1. Watkins R.C., Hambrick E., Greene J. et al. Penicillinase producing Neisseria gonorrhoeae inia subset of nonemergent patients: I. A trend in the Washington, DC Area. J Natl Med Assoc 1991; 83: 8: 710—712.
2. Deguchi T., Yasuda M., Saito I. et al. Quinolone-resistant Neisseria gonorrhoeae. J Infect Che-mother 1997; 3: 73—84.
3. Fenton K.A., Ison C., Johnson A.P. et al. Ciprofloxacin resistance in Neisseria gonorrhoeae in England and Wales in 2002. Lancet 2003; 361: 1867—1869.
4. Dan M. The use of fluoroquinolones in gonorrhoea: the increasing problem of resistance. Expert Opin Pharmacother 2004; 5: 829—854.
5. Centers for Disease Control and Prevention. Sexually Transmitted Diseases Treatment Guidelines, 2010. Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR) 2010; 59 (RR-12): 1—114.
6. Bignell C. 2009 European (IUSTI/WHO) guideline on the diagnosis and treatment of gonorrhoea in adults. International journal of STD & AIDS 2009; 20 (7): 453—7.
7. Резистентность возбудителей ИППП к антибактериальным препаратам. Информационный бюллетень. М: ООО «ДЭКС-ПРЕСС», 2010.
8. Ison C.A., Mouton J.W., Jones K. et al. Which cephalosporin for gonorrhoea? Sex Transm Infect 2004; 80: 386—388.
9. Jakopanec I., Borgen K., Aavitsland P. The epidemiology of gonorrhoea in Norway, 1993— 2007: past victories, future challenges. BMC Infectious Diseases 2009; 9: 3. Литература
10. Tomberg J., Unemo M., Davies C. Nicholas R.A. Molecular and structural analysis of mosaic variants of penicillin-binding protein 2 conferring decreased susceptibility to expanded-spectrum cephalosporins in Neisseria gonorrhoeae: role of epistatic mutations. Biochemistry 2010; 49 (37): 8062—8070.
11. Ito M., Yasuda M., Yokoi S. et al. Remarkable increase in Central Japan in 2001-2002 of Neisseria gonorrhoeae isolates with decreased susceptibility to penicillin, tetracycline, oral cephalosporins, and fluoroquinolones. Anti-microb Agents Chemother 2004 Aug; 48: 8: 3185—3187.
12. Lo J.Y., Ho K.M., Leung A.O. et al. Ceftibuten resistance and treatment failure of Neisseria gonorrhoeae infection. Antimicrob Agents Che-mother 2008; 52 (10): 3564—3567.
13. Bala M., Ray K., Gupta S.M. et al. Changing trends of antimicrobial susceptibility patterns of Neisseria gonorrhoeae in India and the emergence of ceftriaxone less susceptible N. gonorrhoeae strains. J Antimicrob Chemother 2007; 60 (3): 582—586.
14. Ochiai S., Sekiguchi S., Hayashi A. et al. Decreased affinity of mosaic-structure recombinant penicillin-binding protein 2 for oral cephalosporins in Neisseria gonorrhoeae. J Antimicrob Chemother 2007; 60 (1): 54—60.
15. Schwebke J.R., Whittington W., Rice R.J. et al. Trends in susceptibility of Neisseria gonorrhoeae to ceftriaxone from 1985 through 1991. Antimicrob Agents Chemother. 1995; 39 (4): 917—920.
16. GRASP Steering Group. The Gonococcal Resistance to Antimicrobials Surveillance Programme (GRASP) Year 2007 report. London: Health Protection Agency; 2008. Available from: http://www.hpa.org.uk/web/HPAwebFile/ HPAweb_C/1221117895841 [Last accessed 8 Dec 2008]
17. Akasaka S, Muratani T, Yamada Y et al. Emergence of cephem- and aztreonam-high-resistant Neisseria gonorrhoeae that does not produce beta-lactamase. J Infect Chemother 2001; 7: 49—50.
18. Muratani T., Akasaka S., Kobayashi T. et al. Outbreak of cefozopran (penicillin, oral cephems, and aztreonam)-resistant Neisseria gonorrhoeae in Japan. Antimicrob Agents Chemother 2001; 45: 3603—3606.
19. Ohnishi, M., Saika T., Hoshina S. et al. Ceftriaxone-resistant Neisseria gonorrhoeae, Japan. Emerg Infect Dis 2011; 17: 148—149.
20. Ison C.A., Bindayna K.M., Woodford N. et al. Penicillin and cephalosporin resistance in gonococci. Genitourin Med 1990; 66: 351—356.
21. Сидоренко C.B., Тишков В.И. Молекулярные основы резистентности к антибиотикам. Успехи биологической химии 2004; 44: 263—306.
22. Phillips I. Beta-lactamase-producing, penicillin-resistant gonococcus. Lancet 1976; 2: 656—657.
23. Nordmann P., Mammeri H. Extended-spectrum cephalosporinases: structure, detection and epidemiology. Future Microbiol 2007; 2: 297—307.
24. Barry P.M., Klausner J.D. The use of cephalosporins for gonorrhea: the impending problem of resistance. Expert Opin Pharmacother 2009; 10 (4): 555—577.
25. Ameyama S., Onodera S., Takahata M. et al. Mosaic-like structure of penicillin-binding protein 2 gene (penA) in clinical isolates of Neisseria gonorrhoeae with reduced susceptibility to cefixime. Antimicrob Agents Chemother 2002; 46 (12): 3744—3749.
26. Ropp P.A., M. Hu, M. Olesky et al. Mutations in ponA, the gene encoding penicillin-binding protein 1, and a novel locus, penC, are required for high-level chromosomally mediated penicillin resistance in Neisseria gonorrhoeae. Antimicrob Agents Chemother 2002; 46: 769—777.
27. Brannigan J.A., Tirodimos I. A., Zhang Q. Y. et al. Insertion of an extra amino acid is the main cause of the low affinity of penicillin-binding protein 2 in penicillin-resistant strains of Neisseria gonorrhoeae. Mol Microbiol 1990; 4: 913—919.
28. Zarantonelli L., G. Borthagaray, E.H. Lee, et al. Decreased azithromycin susceptibility of Neisseria gonorrhoeae due to mtrR mutations. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 2468— 2472.
29. Hagman K.E., Pan W., Spratt B.G. et al. Resistance of Neisseria gonorrhoeae to antimicrobial hydrophobic agents is modulated by the mtrRCDE efflux system. Microbiology 1995; 141: 611—622.
30. Olesky M., M. Hobbs, R.A. Nicholas. Identification and analysis of amino acid mutations in porin IB that mediate intermediate-level resistance to penicillin and tetracycline in Neisseria gonorrhoeae. Antimicrob Agents Chemother 2002; 46: 2811—2820.
31. Olesky M., Zhao S., Rosenberg R. L. et al. Porin-mediated antibiotic resistance in Neisseria gonorrhoeae: ion, solute, and antibiotic permeation through PIB proteins with penB mutations. J Bacteriol 2006; 188: 2300—2308.
32. Zhao S., Tobiason D.M., Hu M. et al. The penC mutation conferring antibiotic resistance in Neisseria gonorrhoeae arises from a mutation in the PilQ secretin that interferes with multimer stability. Mol Microbiol 2005; 57: 1238—1251.
33. Lindberg R., Fredlund H., Nicholas R. et al. Neisseria gonorrhoeae Isolates with reduced susceptibility to cefixime and ceftriaxone: association with genetic polymorphisms in penA, mtrR, porB1b, and ponA. Antimicrob Agents Chemother 2007; 51: (6): 2117—2122.
34. Ito M., Deguchi T., Mizutani K. et al. Emergence and spread of Neisseria gonorrhoeae clinical isolates harboring mosaic-like structure of penicillin-binding protein 2 in Central Japan. Antimicrob Agents Chemother 2005; 49 (1): 137—143.
35. Whiley D., Limnios E. A., Ray S. et al. Diversity of penA alterations and subtypes in Neisseria gonorrhoeae strains from Sydney, Australia, that are less susceptible to ceftriaxone. Antimicrob Agents Chemother 2007; 51: 9: 3111 —3116.
36. Takahata S., Senju N., Osaki Y. et al. Amino acid substitutions in mosaic penicillin-binding protein 2 associated with reduced susceptibility to cefixime in clinical isolates of Neisseria gonorrhoeae. Antimicrob Agents Chemother 2006; 50 (11): 3638—3645.
37. Osaka, K., Takakura, T., Narukawa, K. et al. Analysis of amino acid sequences of penicillin-binding protein 2 in clinical isolates of Neisseria gonorrhoeae with reduced susceptibility to cefixime and ceftriaxone. J Infect Chemother 2008; 14: 195—203.
38. Lee S.G., Lee H., Jeong S.H. et al. Various penA mutations together with mtrR, porB and ponA mutations in Neisseria gonorrhoeae isolates with reduced susceptibility to cefixime or ceftriaxone. J Antimicrob Chemother 2010; 65, 669—675.
39. Powell A.J., Tomberg J., Deacon A.M. et al. Crystal structures of penicillin-binding protein 2 from penicillin-susceptible and -resistant strains of Neisseria gonorrhoeae reveal an unexpectedly subtle mechanism for antibiotic resistance. J Biol Chem 2009; 284: (2): 1202—1212.
40. Davies C., White S.W., Nicholas R.A. Crystal structure of a deacylation-defective mutant of penicillin-binding protein 5 at 2.3-A resolution. J Biol Chem 2001; 276, 616—623.
41. Dowson C.G., Jephcott A.E., Gough K.R. et al. Penicillin-binding protein 2 genes of nonbeta-lactamase-producing, penicillin-resistant strains of Neisseria gonorrhoeae. Mol Microbiol 1989; 3: 35—41.
42. Harel M., Kryger G., Rosenberry T. L. et al. Three-dimensional structures of Drosophila melanogaster acetylcholinesterase and of its complexes with two potent inhibitors. Protein Sci 2000; 9: 1063—1072.
43. Muzammil S., Ross P., Freire E. A major role for a set of non-active site mutations in the development of HIV-1 protease drug resistance. Biochemistry 2003; 42, 631—638.
44. Podust L.M., Poulos T.L., Waterman M.R. Crystal structure of cytochrome P450 14alpha -sterol demethylase (CYP51) from Mycobacterium tuberculosis in complex with azole inhibitors. Proc Natl Acad Sci U. S. A. 2001; 98: 3068—3073.
45. Brannigan J.A., Tirodimos I.A., Zhang Q.Y. et al. Insertion of an extra amino acid is the main cause of the low affinity of penicillin-binding protein 2 in penicillin-resistant strains of Neisseria gonorrhoeae. Mol Microbiol 1990; 4: 913—919.
46. Pernot L., Chesnel L., Le Gouellec A. et al. A PBP2x from a clinical isolate of Streptococcus pneumoniae exhibits an alternative mechanism for reduction of susceptibility to beta-lactam antibiotics. J Biol Chem 2004; 279, 16463—16470.
47. Tapsall J. Multidrug-resistant Neisseria gonorrhoeae. CMAJ; 2009; 180 (3): 268—269.
48. Tanaka M., Nakayama H., Huruya K. et al. Analysis of mutations within multiple genes associated with resistance in a clinical isolate of Neisseria gonorrhoeae with reduced ceftriaxone susceptibility that shows a multidrug-resistant phenotype. Int J Antimicrob Agents 2006; 27: 20—26.
49. Wang S.A., Lee M.V., O’Connor N. et al. Multidrug-resistant Neisseria gonorrhoeae with decreased susceptibility to cefixime— Hawaii 2001. Clin Infect Dis 2003; 37 (6): 849—852.
50. Ohnishi M., Golparian D., Shimuta K. et al. Is Neisseria gonorrhoeae Initiating a Future Era of Untreatable Gonorrhea.: Detailed Characterization of the First Strain with High-Level Resistance to Ceftriaxone. Antimicrob Agents Chemother; 55: 7: 3538—3545.

Views

Abstract — 528

PDF (Russian) — 319

PlumX

Article Metrics

Dimensions

Refbacks

• There are currently no refbacks.

Neisseria — Википедия

Neisseria (лат.) (Нейссерии^{[источник не указан 1062 дня]}) — род бактерий из семейства Neisseriaceae типа протеобактерий. Грамотрицательные диплококки, под микроскопом напоминают кофейные зёрна.

Род назван в честь Альберта Людвига Сигизмунда Нейссера (1855—1916), немецкого врача, открывшего возбудителя гонореи (позже этот вид получил название Neisseria gonorrhoeae).

Содержание

• 1 Патогенные представители рода
• 2 Примечания
• 3 Ссылки
  • 3.1 Научные ссылки
  • 3.2 Научные базы данных

Патогенные представители рода

Род включает много патогенов человека, например:

• Neisseria gonorrhoeae (Zopf 1885) Trevisan 1885 typus — Гонококк
• Neisseria meningitidis (Albrecht and Ghon 1901) Murray 1929 — Менингококк, один из возбудителей бактериального менингита и причина менингококкового сепсиса.

Род также включает много условно патогенных видов, например:

• Neisseria cinerea
• Neisseria elongata
• Neisseria flavescens
• Neisseria lactamica
• Neisseria mucosa
• Neisseria polysaccharea
• Neisseria sicca
• Neisseria subflava

Примечания

К распространению вида бактерий Neisseria приводят генетические дефекты в «поздних» компонентах системы комплемента — С5-С9.^[1]

1. ↑ Недоспасов С.А. Врожденный иммунитет и его механизмы. — Научный мир, 2012. — С. 49. — 100 с. — ISBN 978-5-91522-306-5.

Ссылки

• Ryan KJ; Ray CG (editors). Sherris Medical Microbiology. — 4th ed. — McGraw Hill, 2004. — ISBN ISBN 0-8385-8529-9.
• Недоспасов С.А. Врожденный иммунитет и его механизмы. — Научный мир, 2012. — ISBN 978-5-91522-306-5.

Научные ссылки

• Ссылки на PubMed для Neisseria
• Ссылки на PubMed Central для Neisseria
• Ссылки на Google Scholar для Neisseria

Научные базы данных

• Искать таксономию в NCBI для Neisseria
• Искать в Tree of Life таксономию для Neisseria
• Искать в Species2000 страницы о Neisseria
• Страница в MicrobeWiki о Neisseria

Тест на снижение содержания нитратов

— Гонорея

Среди людей Neisseria и родственных видов три вида — N. mucosa , M. catarrhalis и K. denitrificans снижают содержание нитратов. Тест восстановления нитратов является важным тестом для различения N. gonorrhoeae и K. denitrificans , особенно когда штаммы K. denitrificans оказываются грамотрицательными диплококками в окрашенных мазках.

Принцип

Виды бактерий можно дифференцировать на основе их способности восстанавливать нитраты до нитритов или азотистых газов.Среди Neisseriaceae человеческого происхождения штаммы Neisseria mucosa , Moraxella catarrhalis и Kingella denitrificans снижают содержание нитратов. Штаммы M. catarrhalis и K. denitrificans были ошибочно идентифицированы как N. gonorrhoeae . Тест на снижение содержания нитратов позволяет дифференцировать эти виды, которые являются нитрат-положительными, и N. gonorrhoeae (нитрат-отрицательными). У некоторых видов снижение содержания нитратов может сопровождаться анаэробным дыханием.

Биохимический путь восстановления нитратов показан на рисунке 1. Нитрат восстанавливается до нитрита, который затем может быть восстановлен до оксида азота, закиси азота или азота (рисунок 1).

Рисунок l. Путь восстановления нитратов.

Тест восстановления нитратов основан на обнаружении нитритов в среде после инкубации с организмом. Если нитрит присутствует в среде, он будет реагировать с сульфаниловой кислотой (нитратный реагент A) с образованием бесцветного комплекса (нитрит-сульфаниловая кислота).Этот комплекс затем будет давать красный осадок (пронтозил), когда затем в тест добавляется нитратный реагент B (альфа-нафтиламин), как показано на рисунке 2.

Рисунок 2. Схематическое изображение обнаружения нитрита в среде.

Красный цвет в среде будет только в том случае, если в среде присутствует нитрит. Отсутствие красного цвета в среде после добавления сульфаниловой кислоты и альфа-нафтиламина означает только то, что в среде нет нитрита. Этому наблюдению может быть два объяснения.

• Нитрат, возможно, не был восстановлен; штамм нитратотрицательный.
• Нитрат мог быть восстановлен до нитрита, который затем был полностью восстановлен до оксида азота, закиси азота или азота, которые не будут реагировать с реагентами, которые реагируют с нитритом; штамм нитрат-положительный.

Любая тестовая среда, дающая отрицательный результат после добавления нитратных реагентов, должна быть дополнительно протестирована, чтобы определить, какая из двух интерпретаций является точной.

Успешное выполнение теста на снижение содержания нитратов зависит от выполнения теста в правильных условиях.

1. Реакция будет происходить лучше всего, если базовая среда поддерживает рост организма . Однако, хотя некоторые виды Neisseria плохо растут в бульонной среде, тест восстановления нитратов может быть успешно проведен в среде, которая не поддерживает рост, путем сильного инокуляции среды для обеспечения достаточного количества предварительно сформированного фермента для протекания реакции.
2. Нитратная реакция происходит только в анаэробных условиях . Нитратсодержащая среда распределяется в пробирки для получения низкого отношения площади поверхности к глубине, которое ограничивает диффузию кислорода в среду, например, 5 мл среды распределяется в пробирке диаметром 13 мм. Neisseria и родственные виды используют кислород в среде и быстро создают анаэробные условия, которые идеально подходят для восстановления нитратов.

Тест восстановления нитратов проводят в среде, содержащей 0.2% нитрат калия. В среду интенсивно засевают чистую культуру подозреваемого организма и инкубируют при температуре от 35 ° C до 36,5 ° C в течение 48 часов. в инкубаторе с добавлением углекислого газа или без него.

Восстановление нитратов обнаруживается с помощью реагентов Грисса Ллосвея, сульфаниловой кислоты и альфа-нафтиламина. Сульфаниловая кислота (нитратный реагент A) добавляется к инкубационной смеси и образует комплекс (нитрит-сульфаниловая кислота) с любым нитритом, присутствующим в среде. Когда альфа-нафтиламин (нитратный реагент B) добавляется в инкубируемую среду, образуется красный осадок (пронтозил) с любым комплексом нитрит-сульфаниловая кислота, присутствующим в среде.

Об организме может быть сообщено как о нитрат-положительном, если в среде появляется красный цвет после добавления нитратных реагентов A и B в среду , что указывает на то, что организм восстановил нитрат до нитрита.

Отсутствие красного цвета после добавления обоих реагентов автоматически не означает, что организм не может восстанавливать нитраты. . Штаммы могли восстановить нитрат до нитрита, а затем полностью восстановить нитрит до азотистых газов, которые не обнаруживаются при добавлении нитратных реагентов A и B в среду.Если среда не меняет цвет после добавления сульфаниловой кислоты и альфа-нафтиламина, в инкубируемую среду добавляют небольшое количество («острие ножа») цинковой пыли. Цинковая пыль будет катализировать химическое восстановление нитрата до нитрита. Таким образом, если нитрат не был восстановлен организмами, то есть они являются нитрат-отрицательными, он будет восстановлен цинковой пылью, и в течение 15 минут в инкубируемой среде появится красный цвет. Если после добавления цинковой пыли в инкубируемой среде не появляется окраска, это означает, что организмы не только восстановили нитрат до нитрита, но и восстановили нитрит до азотистых газов; эти организмы также нитрат-положительны.

Хотя нитратная среда поставляется с перевернутыми трубками Дарема для обнаружения добычи газа, добыча газа не регистрируется для видов Neisseria . Хотя некоторые вещества могут восстанавливать нитраты, а не нитриты, до азотистых газов, газ может не накапливаться в трубке. Накопление газа зависит от скорости его добычи. Когда газ выделяется очень медленно, он может растворяться в среде и не накапливаться в трубке Дарема.

Требования к образцам

Оптимальный образец: Чистая культура подозрительного грамотрицательного оксидазо-положительного диплококка ( Neisseria spp.или M. catarrhalis ) на шоколадном агаре, инкубированном в атмосфере, обогащенной диоксидом углерода, при температуре от 35 ° C до 36,5 ° C в течение 18-24 часов.

Неприемлемый образец: Культуры изолятов на шоколадном агаре, инкубированные в атмосфере, обогащенной диоксидом углерода, при температуре от 35 ° C до 36,5 ° C в течение более 24 часов.

Компрометирующие факторы, влияющие на результаты испытаний:

• Тестовая среда должна быть засеяна достаточно сильно, чтобы могла происходить реакция с предварительно сформированными ферментами.Недостаточный посевной материал может не позволить организмам использовать кислород для создания анаэробных условий, в которых может происходить восстановление нитратов.
• Слишком много цинковой пыли, добавленной в инкубируемую пробирку, может привести к очень быстрому восстановлению нитратов, помимо нитрита, до азотистых газов, так что нитрит не будет обнаружен.

Стабильность образца: Обнаружение восстановления нитратов для Neisseria и родственных видов зависит от присутствия предварительно сформированных ферментов.

• Тесты следует проводить только с посевным материалом, полученным из 24-часовых культур.
• Нитратная среда должна быть засеяна в течение 30 мин. удаления культуры из инкубатора; длительное воздействие на культуру при комнатной температуре может привести к снижению активности ферментов.

Среда / Реагенты

Среда: Нитратный бульон (Сердечный инфузионный бульон, содержащий 0,2% нитрата калия)

Сердечный настой (Difco), 25,0 г
Нитрат калия, 2,0 г
Вода дистиллированная, 1000,0 мл

1. Растворите ингредиенты в дистиллированной воде; довести раствор до pH 7.0.
2. Распределите аликвоты бульона по 5 мл в пробирки размером 16 x 100 мм с газовыми вставками (пробирки Durham, 6 x 50 мм).
3. Автоклав на 15 мин при 121 ° C.

Храните среду при температуре от 4 ° C до 10 ° C (в холодильнике) до использования. Перед посевом нагрейте среду до комнатной температуры.

Реагенты: Раствор сульфаниловой кислоты (нитратный реагент A): 0,8% в 5N уксусной кислоте
Химическое название: 4-аминобензолсульфоновая кислота
Храните нитратный реагент A при температуре от 15 ° C до 30 ° C (комнатная температура) до 3 месяцев, в темноте.Реагенты можно хранить в таре из темно-коричневого стекла; бутылки можно обернуть алюминиевой фольгой для обеспечения темноты.

Раствор альфа-нафтиламина (нитратный реагент B): 0,6% в 5N уксусной кислоте
Химическое название: N, N-диметил-1 нафтиламин
Храните нитратный реагент B при температуре от 2 ° C до 8 ° C (в холодильнике) до 3 месяцев в темный. Реагенты можно хранить в таре из темно-коричневого стекла; бутылки можно обернуть алюминиевой фольгой для обеспечения темноты.

Цинковый порошок, Степень реактивности: Хранить при комнатной температуре (от 15 ° C до 30 ° C)

Предупреждение: Уксусная кислота вызывает коррозию.Контакт с кожей может вызвать волдыри и ожоги. В случае контакта немедленно промыть глаза и кожу большим количеством воды (не менее 15 мин.)

Контроль качества / Процедура испытаний

Штаммы контроля качества:

• Нитратредуктаза-положительный контроль: Kingella denitrificans , CDC 10 236
• Нитратредуктаза-отрицательный контроль: Neisseria gonorrhoeae , ATCC 43069

Штаммы QC хранятся при -70 ° C в растворе трипсинового соевого бульона, содержащего 20% глицерина.Реакцию контрольных штаммов следует подтверждать во время приготовления замороженных запасов. Штаммы QC могут храниться при -70 ° C до 2 лет.

Процедура:

Штаммы

QC тестируются так же, как и клинические изоляты. Штаммы QC следует пересеять по крайней мере один раз после первоначальной культуры из замороженного образца перед проведением теста. Клинические изоляты можно пересеять из селективной среды или очищенных субкультур. Убедитесь, что культуры чистые.

1. Разморозьте флаконы с контрольными штаммами, хранящиеся при -70 ° C.
2. Нанесите штрихи на чашки с шоколадным агаром или агаром для ГХ с добавками для выделения. Инкубируйте при температуре от 35 ° C до 36,5 ° C в атмосфере, обогащенной диоксидом углерода, в течение 18–24 часов.

3. С помощью стерильного тампона приготовьте тяжелую суспензию хорошо изолированных колоний из чистой культуры изолята, инкубированной на шоколадной среде при температуре от 35 ° C до 36,5 ° C в атмосфере, обогащенной диоксидом углерода, в течение 18–24 часов. Засейте тестовую среду, чтобы получить сильную мутность.

   Примечание: штаммов N. gonorrhoeae и некоторых других Neisseria spp. может не расти в этой среде. Таким образом, реакция может зависеть от предварительно образованного фермента.

4. Инкубируйте инокулированную среду и пробирку с незасеянной контрольной средой при температуре от 35 ° C до 36,5 ° C в атмосфере, обогащенной диоксидом углерода, в течение 48 часов.

5. Через 48 ч. После инкубации добавьте с помощью пипеток Пастера 5 капель реагента №A, а затем по 5 капель реагента №B в каждую пробирку.Хорошо встряхните пробирку для смешивания реагентов со средой.

   Проверьте суспензию на розово-красный цвет, который должен проявиться в течение нескольких минут, если среда еще теплая. Реакция может занять немного больше времени, если среда на момент добавления реагентов холодная.

   Если суспензия станет розово-красной перед добавлением порошка Zn, ректификация положительна и испытание завершено. Не выполнять шаг 4.

   Реакции, наблюдаемые с неинокулированной контрольной средой, а также с нитрат-отрицательными и нитрат-положительными изолятами, показаны на рисунках 3, 4 и 5 соответственно.

6. Если суспензия бесцветная после добавления реагентов A и B, добавьте в среду небольшое количество (4–5 мг; «острый острие ножа») цинковой пыли. Энергично встряхните пробирку и дайте ей постоять при комнатной температуре 10-15 мин.

   Если среда остается бесцветной после добавления порошка Zn, результат теста положительный.
   Если среда становится розовой после добавления порошка Zn, результат отрицательный.

7. Считайте и запишите результаты.

Рисунок 3. Реакция , наблюдаемая с неинокулированной нитратной средой.

Рис. 4. Реакция , наблюдаемая с нитрат-отрицательными видами.

Рисунок 5. Реакции , наблюдаемые с нитрат-положительными видами.

График контроля качества:

• Тест контроля качества нитратредуктазы проводится каждый день, когда тестируются клинические изоляты.

Проблемы и решения

Тест на восстановление нитратов может дать ложноотрицательные или ложноположительные результаты, если среда не получена точно или тест не выполнен точно. Реакция в этом тесте зависит от ряда факторов.

• Неспособность определить розовый цвет в контрольной пробирке неинокулированной среды после добавления цинковой пыли может быть связана (1) с средой, не содержащей нитратов, или (2) с добавлением слишком большого количества цинковой пыли, которая катализирует восстановление нитрата. помимо нитритов до азотистых газов.Самое простое решение — получить больше нитратной среды, убедившись, что нитрат был добавлен в базовую среду. В качестве альтернативы инокулируйте среду штаммом положительного контроля, но проверьте реакцию после более короткого времени инкубации; штаммы N. mucosa будут давать положительную нитритную реакцию через несколько часов инкубации. Если подтверждено, что среда содержит нитраты, повторите тест, пока не определите правильное количество цинковой пыли для добавления. Очень важно узнать, сколько цинковой пыли добавить в тест.Добавление слишком большого количества цинковой пыли может привести к ложноположительному результату.
• Если после добавления в среду нитратных реагентов A и B в неинокулированной контрольной среде обнаруживается розовый цвет, среда загрязнена нитритом. Единственное решение — получить новую партию среды, не загрязненной нитритами.
• В среде, содержащей нитрат, неспособность штамма положительного контроля, Kingella denitrificans дать положительную реакцию, будет происходить только в том случае, если штамм не K.Денитрификанс . Еще раз проверьте идентичность положительного контрольного штамма. Выберите новую культуру контрольного штамма и повторите тест. Аналогичным образом, если положительный тест на нитратредуктазу получен с отрицательным контрольным штаммом N. gonorrhoeae , либо отрицательный контрольный штамм не является N. gonorrhoeae , либо культура загрязнена нитрат-положительным организмом. Еще раз проверьте чистоту и идентичность эталонного штамма гонококков. Повторите тест с чистой культурой подтвержденной культуры Н.gonorrhoeae .
• Реакция восстановления нитратов указывает на способность организмов восстанавливать нитраты, реакция, которая происходит только в анаэробных условиях; реакция не произойдет, если организмы будут получать постоянный кислород. Таким образом, реакция может не происходить в неподвижных культурах (особенно медленнорастущих видов), в которых среда распределена мелкими слоями, которые позволяют кислороду диффундировать в среду. Чтобы определить, присутствует ли в среде кислород, можно добавить в среду каплю оксидазного реагента.Если среда становится пурпурной, среда содержит кислород и реакция восстановления нитратов может не произойти. Если среда остается бесцветной, значит, она не содержит кислорода и может быть проведен тест на восстановление нитратов. Было отмечено, что клеток N. gonorrhoeae быстро потребляют кислород, если в среду инокулируют достаточное количество клеток. Если реактив оксидазы добавлен примерно после 1-2 часов инкубации, среда останется прозрачной. Поскольку оксидазный реагент убивает гонококки, присутствующие в среде, среда постепенно станет пурпурной, начиная с верха пробирки, по мере того, как кислород диффундирует в среду.Если среда распределяется в тюбиках других размеров, чем предложенные выше, убедитесь, что отношение площади поверхности к глубине, по крайней мере, равно или меньше, чем предложенные выше. Если диаметр трубки, в которую распределяется среда, больше, чем описанный выше, используйте больший объем среды для поддержания того же отношения площади поверхности к глубине.

• Реакция восстановления нитратов может не произойти, если среда, в которой проводится тест, не позволяет нормальному росту организма.Однако испытание можно проводить в среде, которая не поддерживает рост организмов, если инокулят достаточно плотный, чтобы предварительно сформированные ферменты могли исчерпать существующий запас кислорода и восстановить нитрат с большей скоростью, чем та, с которой кислород диффундирует в Средняя.

  Примечание: Чтобы проверить, что кислород был удален из среды, добавьте 2–3 капли реактива оксидазы в дубликат засеянной среды. Если кислород был должным образом удален из среды, реагент оксидазы не станет пурпурным сразу.Если среда содержит растворенный кислород, реагент оксидазы станет пурпурным. Также обратите внимание, что тест на восстановление нитратов можно проводить в среде, в которую был добавлен оксидазный реагент.

• При добавлении Реагента А в тестовую среду нитрит, образующийся в результате восстановления нитрата, будет образовывать комплекс с сульфаниловой кислотой, в результате чего образуется красный осадок с альфа-нафтиламином в Реагенте B. тестовая среда показывает, что нитрит присутствует в результате восстановления нитрата.Однако отсутствие красного цвета после добавления реагентов A и B не обязательно означает, что нитрат не восстановился. Отсутствие красного цвета может означать (1) то, что нитрат не восстановился, или (2) что нитрит, образовавшийся в результате восстановления нитрата, сам был восстановлен до азотистых газов. Чтобы определить, снизился ли уровень нитрита, поместите небольшое количество цинковой пыли в инкубационную смесь, если она бесцветная после добавления реагентов A и B.Цинковая пыль катализирует восстановление нитрата до нитрита; красный цвет должен развиться в среде, которая все еще содержит невосстановленный нитрат. Однако важно не добавлять слишком много цинковой пыли; избыток цинковой пыли будет катализировать восстановление нитрита, производимого из этого нитрата, что приведет к бесцветной среде и неправильной интерпретации теста как положительного (ложноположительный результат).
• Положительный тест на нитратредуктазу получен с отрицательным контрольным штаммом, Н.gonorrhoeae , после добавления цинковой пыли указывает на то, что содержание нитрата снизилось до уровня, превышающего нитрит, вероятно, из-за добавления слишком большого количества цинковой пыли в испытание. Повторите тест, убедившись, что добавлено очень мало цинковой пыли. Розовый цвет, указывающий на то, что организм не восстановил нитрат, может занять от 10 до 15 минут. развивать. Не добавляйте цинковую пыль! Подождите, пока цвет проявится. Если в течение 30 минут цвет не изменился, расценивайте тест как положительный.

Ограничения теста

Если испытание выполнено правильно и штаммы для контроля качества дают соответствующие результаты, для этого испытания не должно быть ограничений.Необходимо следить за тем, чтобы все компоненты теста выполнялись должным образом.

Невозможно определить род или вид только на основании теста на снижение содержания нитратов.

Результаты, интерпретация и отчетность

Изоляты могут быть зарегистрированы как Нитрат-положительные , если нитрит (розовый цвет) обнаружен в инокулированной среде после добавления реагентов A и B или , если цвет не обнаружен в среде после добавления цинковой пыли.

Изоляты

могут быть указаны как Нитрат-отрицательные , если нитрит не обнаружен (без изменения цвета) после добавления реагентов A и B, или , если после добавления цинковой пыли в инокулированную среду появляется розовый цвет.

Библиография

Knapp JS, Clark VL. Анаэробный рост Neisseria gonorrhoeae в сочетании с восстановлением нитрита. Инфекция Иммун 1984; 46: 176-181.

Скерман ВБД. 1967. С. 218 — 220.Руководство по определению родов бактерий. Компания Williams & Wilkins Co., Балтимор, Мэриленд.

Тест ферментного субстрата — Гонорея

Производство трех ферментов — гликозидазы (бета-галактозидаза) и двух аминопептидаз (гамма-глутамиламинопептидаза и гидроксипролиламинопептидаза) — было использовано для дифференциации между Neisseria и родственными видами, выделенными на селективной среде для N. gonorrhoeae .

Хотя этот тест легко выполнить, негонококковые изоляты, включая комменсал Neisseria spp.и K. denitrificans , которые могут расти на селективных средах, могут быть ошибочно идентифицированы как N. gonorrhoeae , если не будут выполнены дополнительные тесты. Тесты на ферментный субстрат не должны использоваться в качестве единственного теста для идентификации N. gonorrhoeae , особенно если такая идентификация может иметь судебно-медицинские последствия.

Принцип

Gonochek II — это пробирочный тест, предназначенный для различения Neisseria lactamica , N.meningitidis , N. gonorrhoeae и Moraxella catarrhalis . Ферменты, продуцируемые этими видами, обнаруживаются в одном тесте путем производства окрашенных конечных продуктов из бесцветных субстратов. Бета-галактозидаза, продуцируемая штаммами N. lactamica , гидролизует 5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактозид (BCIG) с образованием продукта синего цвета. N. meningitidis продуцирует гамма-глутамиламинопептидазу, которая гидролизует гамма-глутамил-п-нитроанилид (GPNA) с высвобождением желтого конечного продукта п-нитроанилина.Гидроксипролиламинопептидаза, продуцируемая штаммами N. gonorrhoeae , гидролизует производное бета-нафтиламиновой кислоты (пролил-4-метоксинафтиламид [PMNA]) и высвобождает свободное производное бета-нафтиламина, которое затем образует комплекс с солью диазония с образованием красно-розового цвета. . M. catarrhalis не содержит ни одного из этих ферментов; следовательно, штаммы M. catarrhalis не вызывают отчетливого изменения цвета в этом тесте.

Требования к образцам

Оптимальный образец: Хорошо изолированные колонии в течение 24-48 часов.чистая культура на шоколадной (или эквивалентной) среде грамотрицательных, оксидазоположительных диплококков, выделенных на селективной среде (модифицированная среда Тайера-Мартина или эквивалентная среда) для N. gonorrhoeae .

Неприемлемый образец:

• 24-48 ч. культуры, выращенные на селективных средах для гонококков, без демонстрации чистоты путем пассажа на неселективной среде;
• Культуры более 48 ч. выращивать на неселективной среде, даже если они изолированы на селективной среде;
• Культуры организмов, не являющихся грамотрицательными оксидазоположительными диплококками.

Компрометирующие факторы, влияющие на результаты теста: Тест должен быть засеян чистой культурой изолята.

• Загрязнение другими штаммами может привести к ошибочным результатам, если контаминирующий штамм (ы) продуцирует любой из трех ферментов, обнаруживаемых в этом тесте.
• «Разбавление» инокулята штаммом, не продуцирующим фермент, обнаруженный в этом тесте, может привести к невозможности обнаружения фермента, продуцируемого изолятом neisseria.
• Активность ферментов может быть снижена / отсутствовать в культурах, инкубированных более 48 часов., особенно если клетки автолизируются. Используйте только хорошо изолированные колонии в течение 24-48 часов. культура для посева теста.

Стабильность образца:

• Тест необходимо провести в течение 30 мин. снятия культуры из инкубатора. Активность фермента может снижаться со временем при удалении культуры из инкубатора до комнатной температуры.

Среда / Реагенты

Гоночек-II: Тест на коммерческий ферментный субстрат

Условия хранения: Хранить в темноте при температуре от 0C до 8C (в холодильнике).

Срок годности: Не использовать по истечении срока годности или если субстрат явно влажный.

Контроль качества / Процедура испытаний

Штаммы контроля качества:

• Neisseria gonorrhoeae , штамм ATCC 19424
• Neisseria meningitidis , штамм ATCC 13077
• Neisseria lactamica , штамм ATCC 23970
• Moraxella catarrhalis , штамм ATCC 25238

Штаммы QC хранятся при -70 ° C в растворе трипсинового соевого бульона, содержащего 20% глицерина.Реакцию контрольных штаммов следует подтверждать во время приготовления замороженных запасов. Штаммы QC могут храниться при -70 ° C в течение 2 лет.

Процедура:

Клинические изоляты и штаммы контроля качества тестируются таким же образом в соответствии с инструкциями производителя. Штаммы QC следует пересеять по крайней мере один раз после первоначальной культуры из замороженного образца перед проведением теста.

1. Засейте штаммы штрихами на чашки с шоколадным агаром (или эквивалентной средой) для выделения.Инкубируйте чашки при температуре от 35 ° C до 36,5 ° C в атмосфере, обогащенной диоксидом углерода (5%), в течение 18-24 часов. Подтвердите, что культуры чистые.
2. Перед использованием дайте тестам нагреться до комнатной температуры.
3. Удалить попарно красные полупрозрачные пробки с трубки Гоночек-II.
4. Используйте пипетку для переноса без консервантов и нанесите в пробирку 4 капли PBS.
5. Используя деревянную палочку-аппликатор, соберите эквивалент 5-10 свежих колоний среднего и большого размера аналогичной морфологии и хорошо эмульгируйте в PBS в пробирке Gonochek-II.Наилучшие результаты будут получены при росте из хорошо изолированных колоний, которые не подверглись лизису.
6. Закройте трубку парой стопоров.
7. Инкубируйте пробирку с крышкой в ​​инкубаторе от 35 ° C до 36,5 ° C (или тепловом блоке) в течение 30 мин.

8. Считайте цвет суспензии в пробирках через 30 мин. инкубация. В настоящее время могут быть идентифицированы штаммы N. meningitidis И N. lactamica (Рисунок 1).

   Если суспензия клеток в пробирке синего цвета, организм Н.lactamica .
   Если суспензия клеток в пробирке желтого цвета, организм N. meningitidis .

   Рис. 1. Принципиальная схема теста на ферментный субстрат.

   Если на этом этапе выполняется идентификация , проверка завершена. Не переходите к шагу 9 .

   Если на этапе 8 не наблюдалось изменения цвета в суспензии клеток, , изолят не был идентифицирован; перейдите к шагу 9.

9. Если цвет суспензии клеток не изменился, с пробирки снимают обе крышки (красный и прозрачный). Красный колпачок, отделенный от прозрачного колпачка (который выбрасывается), вставляется в пробирку, и пробирка несколько раз переворачивается, чтобы привести суспензию клеток в контакт с субстратом, содержащимся на нижней стороне красного колпачка (Рисунок 1). . Верните трубку в вертикальное положение. Жидкость станет красно-розовой, останется бесцветной или бледно-желтой.

   Если суспензия клеток становится розово-красной, организм вырабатывает гидроксипролиламинопептидазу и может быть идентифицирован предположительно как N.gonorrhoeae .
   Если суспензия клеток не изменилась по цвету или стала бледно-желтой, организмом является M. catarrhalis .

10. Считайте и запишите результаты теста.

График контроля качества:

• Контрольные испытания «Гоночек-II» проводятся при получении продукции от производителя.

Проблемы и решения

Если штаммы QC дают неправильные реакции, возможно, штаммы были неправильно маркированы.Подготовьте новые замороженные запасы штаммов QC, идентифицированных другими методами. Подтвердите реакции штаммов QC в тесте на ферментный субстрат во время приготовления новых штаммов QC.

Тестируйте только оксидазоположительные, грамотрицательные диплококки, выделенные на селективной среде, например, среде Мартина-Льюиса. Штаммы, выделенные на неселективных средах, могут быть протестированы только в том случае, если подтверждена их устойчивость к колистину по их способности расти на селективных средах.

Консерванты в PBS могут влиять на ферментативные реакции; используйте только PBS без консервантов.

Не тестируйте организмы, которые были выращены только на неселективных средах, таких как шоколадный агар, без подтверждения устойчивости к колистину.

Тесты на ферментный субстрат

не следует использовать в качестве единственного теста для идентификации N. gonorrhoeae , особенно если такая идентификация может иметь судебно-медицинские последствия.

Некоторые штаммы N. mucosa и N. perflava могут вызывать бледно-желтые реакции, свидетельствующие о продуцировании гамма-глутамиламинопептидазы.Пигментированные штаммы, которые продуцируют гамма-глутамиламинопептидазу, должны быть протестированы для выявления моделей продуцирования кислоты, прежде чем идентифицироваться как N. meningitidis .

Ограничения теста

Использование Гоночек-II должно быть ограничено тестированием штаммов грамотрицательных, оксидазоположительных диплококков, выделенных на гонококковых селективных средах, или изолятов, устойчивость которых к колистину была подтверждена независимо.

Поскольку K. denitrificans и несколько Neisseria и родственные виды.которые дают положительную реакцию на гидроксипролиламинопептидазу, были выделены и могут расти на селективной гонококковой среде при субкультивировании, подтвержденная идентификация N. gonorrhoeae не может быть сделана только на основании положительной реакции на гидроксипролиламинопептидазу в тесте на ферментный субстрат . Перед подтвержденной идентификацией N. gonorrhoeae необходимо провести дополнительные тесты.

Дополнительные тесты для различения Н.gonorrhoeae и родственные виды, продуцирующие гидроксипролиламинопептидазу

Тесты ферментного субстрата

следует использовать для идентификации только тех штаммов, которые растут на селективной среде для N. gonorrhoeae . Однако штаммы K. denitrificans обычно выделяют на селективных средах, а штаммы нескольких комменсалов Neisseria ( N. cinerea , N. polysaccharea , N. subflava biovar perflava) иногда выделяют на них. СМИ.Таким образом, в целях пояснения, реакции всех Neisseria и родственных видов человеческого происхождения включены в эту таблицу вместе с дифференциальными тестами, которые могут использоваться для точной идентификации этих видов.

Таблица 1. Дифференциальные характеристики человека Neisseria и родственных видов, которые продуцируют гидроксипролиламинопептидазу в тестах на ферментный субстрат.

Сокращения: G, глюкоза; М, мальтоза; L, лактоза; S, сахароза; +, большинство штаммов положительное; -, большинство штаммов отрицательные; GND, грамотрицательные диплококки; GNC, грамотрицательные коккобациллы; GNR, грамотрицательные стержни; R — устойчивый к колистину; (R), большинство штаммов восприимчивы, но некоторые штаммы известны как устойчивые к колистину; S, наиболее восприимчивые штаммы; не исключает возможности того, что некоторые штаммы могут быть устойчивыми.
* Морфология клеток может быть подтверждена тестом на удлинение клеток.

Результаты, интерпретация и отчетность

Хотя тесты с ферментным субстратом продаются как подтверждающий тест для идентификации N. gonorrhoeae , выделенных на селективной среде для гонококков, несколько Neisseria и родственные им виды могут быть выделены на селективных средах. Эти виды включают, в первую очередь, но не исключительно, K. denitrificans , N.cinerea , N. polysaccharea и N. subflava biovar perflava.

Ожидаемые результаты теста Gonochek II показаны на рисунке 1. Подтвержденные идентификации грамотрицательных, оксидазо-положительных диплококков, выделенных на гонококковой селективной среде, могут быть выполнены на основе теста с субстратом фермента для:

• N. lactamica (бета-галактозидаза-положительный),
• N. meningitidis (положительный по гамма-глутамиламинопептидазе) и
• М.catarrhalis (реакции нет)

Если изолят положительный по гидроксипролиламинопептидазе:

Поскольку штаммы нескольких видов Neisseria и родственных видов, которые могут быть выделены на селективной среде для гонококков, продуцируют пролиламинопептидазу, можно сделать предположительную идентификацию N. gonorrhoeae только на основании результатов теста на ферментный субстрат. Дополнительные тесты, которые могут помочь в точной идентификации изолята, показаны в таблице 1.

Если отчет «Предположительный N. gonorrhoeae » сделан на основании идентификации только с помощью теста на ферментный субстрат, важно, чтобы клиницист, получающий этот отчет, понимал, что для подтверждения этой идентификации могут потребоваться дополнительные тесты.

Ввиду потенциальных серьезных медицинских, юридических и социальных последствий сообщения об изоляте как N. gonorrhoeae , рекомендуется проводить дополнительные тесты одновременно с тестом на ферментный субстрат или сразу после него, чтобы сообщить о подтвержденном результате, а не о результатах. предполагаемая идентификация, которая может привести к возбуждению расследования сексуального посягательства или надругательства.

Библиография

D’Amato RF, Enriques LA, Tomforde KN, Singerman E. Быстрая идентификация Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis с использованием ферментативных профилей. J Clin Microbiol 1978; 7: 77-81.

Вставка продукта. Пробирки GonochekTM-II, E-Y Laboratories Inc., Сан-Матео. Велборн П.П., Уеда CT, Эллисон-Биранг Н. Оценка GONOCHEK II как системы быстрой идентификации патогенных видов Neisseria .Дж. Клин Микробиол 1984; 20: 680-683.

Knapp JS. Исторические перспективы и идентификация Neisseria и родственных видов. Clin Microbiol Rev 1988; 1: 415-431.

Knapp JS, Totten PA, Mulks MH, Minshew BH. Характеристика Neisseria cinerea , непатогенного вида, выделенного на среде Мартина-Льюиса, селективного в отношении патогенных Neisseria spp. Дж. Клин Микробиол 1984; 19: 63-67.

Neisseria flava — microbewiki

Классификация

Таксоны высшего порядка

Бактерии-протеобактерии-β-протеобактерии-Neisseriales-Neisseriaceae-Neisseria
^[1]

Виды

  Neisseria flava  штамм NRL 30 008  [2]  

Некоторые авторы и некоторая старая литература могут ссылаться на «Н.flava »как« Diplococcus pharyngis flavus »группа I, хромогенная группа I, хромогенная группа 4, штамм Fb,« Neisseria pharynges »,« N. subflava »и« N. subflava (биоварфлава) » ^[4] .

Описание и значение

«Н. flava »- сахаролитические, грамотрицательные, оксидазоположительные, диплококковые бактерии ^[3] . Организм является одним из комменсальных растений, населяющих ротоглотку и носоглотку. «Н. flava »считается непатогенным видом Neisseria, но также может быть условно-патогенным микроорганизмом у человека.В начале 1900-х годов классификация сахаролитических комменсалов Neisseria spp. были основаны на морфологии клеток и их способах производства кислоты из углеводов ^[4] . Однако из-за неспособности методов идентификации четко различать комменсальные виды Neisseria, N. flava »,« Н. перфлава »и« Н. subflava »позже были объединены в один вид« N. subflava »(биовары) и« N. flava »может называться« N. subflava »биовар« flava » ^[3] .Бактерии можно культивировать традиционно на шоколаде, кровяном агаре и питательном агаре при 22 ° C и 35 ° C соответственно ^[4] .
Биохимические и культурные характеристики «Н. flava »включают ^[5] .;

• Неспособность производить полисахарид из сахарозы
• Производство кислоты из фруктозы (положительный результат на фруктозу)
• Производство аммиака из пептона
• Чувствительность к колистину (не может расти на гонококковых селективных средах)
• Способность восстанавливать нитриты (NO2)
• Колонии плоские, пигментированные, непрозрачные, с матовым видом.

Neisseriae — одна из самых распространенных комменсальных флоры человека, которая в редких случаях может вызывать патогенез у человека, поэтому важно понять, является ли непатогенный комменсал Neisseria ”Spp.может способствовать патогенности патогенных штаммов, как показано в «N. gonorrhoeae »и« N. meningitidis ».

Рис. 1. Электронная микрофотография «Н. субфлава »с диплококковой структурой ^[3]

Структура генома

С помощью платформы illumine Hiseq 2000 геном «N. flava »(штамм NRL 30,008) был секвенирован с размером генома 243,7 Мбит / с с 49% содержанием GC. ^[2] .

Строение клетки и обмен веществ

Как и другие грамотрицательные бактерии, «N.flava »имеет субкапсулярную клеточную оболочку, состоящую из внешней мембраны (OM), одного тонкого слоя пептидогликана и внутренней клеточной мембраны ^[3] . Липополисахаридный (LPS) компонент OM фактически является липоолигосахаридом (LOS) ^[6] . В патогенных штаммах LOS представляет собой гликолипид внешней мембраны, который, как обнаружено, связан с уклонением, прикреплением, инвазией и опосредованием токсического повреждения хозяина. LOS состоит из O-антигена, олигосахарида ядра и липида-A.Было установлено три типа ядер-олигосахаридов, Тип-I — III, которые можно отличить от непатогенных видов Neisseria от патогенных. «Н. flava »обладают R-конфигурацией липополисахарида (ЛПС) и корового олигосахарида типа II, состоящего из D-глюкозы (3 моль), 2-дезокси-2-амино-D-глюкозы (2 моль), L-рамнозы (1 моль). ), L-глицеро-D-манногептоза (мкмоль) и этаноламин (мкмоль) ^[7] .
Было проведено много обширных исследований по изучению экспрессии пилей Neisserial в комменсальной «Neisseria».Пили можно увидеть в «Н. flava »под электронной микрофотографией ^[8] . Однако организм не реагировал на моноклональные антитела, специфичные к эпитопу SM1, которые распознают пили класса I, что позволяет предположить, что этот вид может иметь пили другого типа, отличные от кучи патогенных штаммов ^{[8] [9]} .
В настоящее время количество прямых исследований метаболизма Neisseria ограничено. Однако в лабораторных условиях «Н. flava »способен восстанавливать нитрит (NO2) и окислительно использовать углеводы (глюкозу, мальтозу, фруктозу, но не сахарозу и лактозу) в качестве источников энергии (4).Для достаточного роста в синтетической среде «Н. flava »требует биотина, глутаминовой кислоты, пяти аминокислот (цистеина, изолейцина, глутаминовой кислоты, фенилаланина и пролина) и лактата. Подобен грамположительным аэробным бактериям «N. flava »выделяет большое количество аммиака при выращивании в присутствии аминокислот ^[10] .

Экология

Как и другие виды Neisseria, N. flava »представляет собой аэробные β-протеобактерии ^[3] . Организм обитает в верхних дыхательных путях человека ^[3] .Нет обширного исследования «Н. flava »и диапазон его хозяев, однако этот организм был идентифицирован в ротоглотке макак-резус, что позволяет предположить, что этот вид не является хозяином, ограничивающимся только человеком ^[11] .

Патология

«Н. flava »редко было зарегистрировано как вызывающее бактериальный эндокардит ^[12] . Однако было показано, что поражение сердца является основной предрасположенностью к инфекции. Также была зарегистрирована причинная связь этого микроорганизма с менингитом и инфекцией половых путей ^[13] .Для будущих исследований представляет интерес изучить стратегии, которые этот организм мог бы использовать для побега из своих обычных мест обитания, уклонения от систем иммунного надзора хозяина и противостояния им, а также того, может ли этот организм легко колонизировать эти другие ткани по сравнению с его обычными местами обитания. .
Приобретение железа необходимо для выживания микроорганизмов. В организме человека-хозяина гем является основным источником железа для микроорганизмов, населяющих человеческий организм. Гомолог гемоксигеназы (HmuO) был идентифицирован из шести изолятов Neisseria, включая N.flava » ^[14] . Это было первое открытие гена «hmuO», идентифицированного у грамотрицательных бактерий. Открытие показало, что окислительное расщепление порфирина является важным этапом утилизации гема у Neisseria, и это может быть еще одним механизмом приобретения железа некоторыми бактериями. Помимо ассимиляции гем-железа, продукты разложения гема под действием HmuO, в основном биливердин и CO, также обеспечивают защиту от окислительного повреждения и токсичности гема. Восстановление биливердина может служить мощным антиоксидантом, в то время как CO связывается с эукариотической гуанилилциклазой. может увеличить доступность внутриклеточного цГМФ.HemO-зависимая деградация гема может нарушать функцию полиморфно-ядерных лейкоцитов и кровеносных систем хозяина, что может способствовать развитию инфекции у женщин в начале менструального периода ^[14] .

Применение в биотехнологии

Помимо его использования в качестве одного из репрезентативных комменсальных видов «Neisseria», существует ограниченное использование этого вида как такового. Однако есть ряд свидетельств, которые предполагают, что численность и микробное разнообразие комменсальной Neisseria коррелируют с некоторыми заболеваниями человека ^[15] , ^[16] , ^[17] , ^[18] .И что профиль орального микробиома комменсала Neisseria потенциально может быть использован в качестве биомаркеров заболеваний человека ^[11] .

Текущие исследования

Было показано, что Neisseria способны обмениваться своим генетическим материалом как внутри, так и между видами ^[19] , ^[20] , ^[21] , ^[22] . Примеры, которые опосредуют событие генетического обмена, такие как горизонтальный перенос гена посредством трансформации плазмиды и последовательности поглощения ДНК, которые позволяют гомологичную рекомбинацию генетического материала из внеклеточной среды.Сравнительный анализ последовательности комменсалов Neisseria spp. указали, что комменсальные виды обладают большим набором генов вирулентности. Ряд данных свидетельствует о том, что непатогенные «Neisseriaceae» обладают гомологичными генами вирулентности, обнаруженными в патогенных штаммах, таких как ген «opa» и липоолигосахарид, которые являются одними из важных факторов вирулентности, ответственных за уклонение хозяина от иммунитета ^[23] . Было показано, что «Н. flava »обладают двумя копиями гена« opa », адгезивных белков, которые составляют большую часть внешней мембраны, которые имеют сильную гомологию с генами opa, обнаруженными в патогенных штаммах« Neisseria » ^[24] , ^[25] .Варианты гомологичных генов, которые являются общими для патогенных и непатогенных штаммов, могут служить резервуаром для вариантов генов, устойчивых к вирулентности и / или противомикробным препаратам, которые могут косвенно способствовать патогенному потенциалу обоих штаммов. Были подняты вопросы, почему комменсал не вызывает патогенез? и как они избегают систем иммунного надзора хозяина, учитывая репертуар генов вирулентности?

Список литературы

1. [1]
2. [2]
3. (2015) Глава 5 — Микробы слизистой оболочки полости рта, стр. 95-107, Атлас микробиологии полости рта doi: https: // doi.org / 10.1016 / B978-0-12-802234-4.00005-7. Академик Пресс, Оксфорд.
4. Knapp JS. (1988) Исторические перспективы и идентификация Neisseria и родственных видов. Обзоры клинической микробиологии 1 : 415-431.
5. Кнапп Дж. С., Крюк Е. В., 3-й. (1988) Распространенность и устойчивость Neisseria cinerea и других видов Neisseria spp. у взрослых. J Clin Microbiol 26 : 896-900.
6. Никайдо Х. (1999) Микродерматология: клеточная поверхность во взаимодействии микробов с внешним миром. Журнал бактериологии 181 : 4-8.7. Джонсон К.Г., Перри М.Б., Макдональд И.Дж. (1976) Исследования клеточных и свободных липополисахаридов из Neisseria canis и N. subflava. Может J Microbiol 22 : 189-96.
8. Ахо Э.Л., Мерфи Г.Л., Кэннон Дж.Г. (1987) Распределение специфических последовательностей ДНК среди патогенных и комменсальных видов Neisseria. Заражение иммунной 55 : 1009-13.
9. Hung M.C., Christodoulides M. (2013) Биология Neisseria Adhesins. Биология 2 : 1054-1109.
10. Макдональд Эй Джей, Джонсон К.Г. (1975) Питательные потребности некоторых непатогенных Neisseria, выращенных на простых синтетических средах.Может J Microbiol 21 : 1198-204.
11. Лю Джи, Тан СМ, Эксли Р.М. (2015) Непатогенные Neisseria: представители многочисленного, разнообразного рода с множеством ареалов обитания. Микробиология 161 : 1297-1312.
12. Скотт Р.М. (1971) Бактериальный эндокардит, вызванный Neisseria flava. Журнал педиатрии 78 : 673-675.
13. AP. (1983) Патогенный потенциал комменсальных видов Neisseria. Журнал клинической патологии 36 : 213-223.
14. Жу В., Вилкс А., Стожилькович И. (2000) Деградация гема у грамотрицательных бактерий: продукт гена hemO Neisseriae — гемоксигеназа.(Статистические данные включены). Журнал бактериологии 182 : 6783.
15. Кертис Майкл А., Зенобия К., Дарво Ричард П. Связь микробиотии полости рта с пародонтальным здоровьем и заболеванием. Клеточный хозяин и микроб 10 : 302-306.
16. Филкинс Л.М., Хэмптон Т.Х., Гиффорд А.Х., Гросс М.Дж., Хоган Д.А., Согин М.Л., Моррисон Х.Г., Пастер Б.Дж., О’Тул Г.А. (2012) Распространенность стрептококков и увеличение полимикробного разнообразия, связанное с устойчивостью пациентов с муковисцидозом. Журнал бактериологии 194 : 4709-4717.17. Саид Х.С., Суда В., Накагоме С., Чинен Х., Осима К., Ким С., Кимура Р., Ираха А., Исида Х., Фудзита Дж., Мано С., Морита Х., Дохи Т., Оота Х, Хаттори М. (2014) Дисбактериоз слюнной микробиоты при воспалительном заболевании кишечника и его связь с оральными иммунологическими биомаркерами. Исследования ДНК 21 : 15-25.
18. Фаррелл Дж.Дж., Чжан Л., Чжоу Х., Чиа Д., Элашофф Д., Акин Д., Пастер Б.Дж., Джошипура К., Вонг Д.Т.В. (2011) Вариации микробиоты полости рта связаны с заболеваниями поджелудочной железы, включая рак поджелудочной железы.Кишечник.
19. Marri PR, Paniscus M, Weyand NJ, Rendón MA, Calton CM, Hernández DR, Higashi DL, Sodergren E., Weinstock GM, Rounsley SD, So M. 2010. Секвенирование генома выявляет широко распространенный обмен генами вирулентности среди видов Neisseria человека. PLOS ONE 5 : e11835.
20. Чжоу Дж., Боулер Л.Д., Спратт Б.Г. 1997. Межвидовая рекомбинация и филогенетические искажения в генах глутаминсинтетазы и шикиматдегидрогеназы Neisseria meningitidis и комменсальных видов Neisseria. Молекулярная микробиология 23 : 799-812.21. ван Пассель М.В.Дж., ван дер Энде А., Барт А. 2006. Разнообразие плазмид в Neisseriae. Инфекция и иммунитет 74 : 4892.
22. Эйл Э., Чжоу Дж., Смит Дж. М., Спратт Б. Г.. 1996. Сравнение нуклеотидных последовательностей генов theadk andrecA патогенных и комменсальных видов Neisseria: доказательства обширной межвидовой рекомбинации внутри ADK. Журнал молекулярной эволюции 43 : 631-640.
23. Толеман М., Ахо Е., Вирджи М. (2001) Экспрессия патоген-подобных адгезинов Opa в комменсальных Neisseria: генетический и функциональный анализ.Клеточная микробиология 3 : 33-44.
24. Вольф К., Стерн А. (1995) Идентификация и характеристика конкретных последовательностей, кодирующих белки, связанные с патогенностью, в геноме комменсальных видов Neisseria. Письма о микробиологии FEMS 125 : 255-263.
25. Робертс М.К., Чанг В.О., Роу Д., Ся М., Маркес К., Бортагарай Г., Уиттингтон В.Л., Холмс К.К. (1999) Устойчивые к эритромицину Neisseria gonorrhoeae и Oral Commensal Neisseria spp. Несут известные гены метилазы рРНК. Противомикробные препараты и химиотерапия 43 : 1367.

Эта страница написана <Паватом Лаохамонтонкулом (43895212)> для курса MICR3004, семестр 2, 2017

Neisseria flava — microbewiki

Классификация

Таксоны высшего порядка

Бактерии-протеобактерии-β-протеобактерии-Neisseriales-Neisseriaceae-Neisseria
^[1]

Виды

  Neisseria flava  штамм NRL 30 008  [2]  

Некоторые авторы и некоторая старая литература могут ссылаться на «Н.flava »как« Diplococcus pharyngis flavus »группа I, хромогенная группа I, хромогенная группа 4, штамм Fb,« Neisseria pharynges »,« N. subflava »и« N. subflava (биоварфлава) » ^[4] .

Описание и значение

«Н. flava »- сахаролитические, грамотрицательные, оксидазоположительные, диплококковые бактерии ^[3] . Организм является одним из комменсальных растений, населяющих ротоглотку и носоглотку. «Н. flava »считается непатогенным видом Neisseria, но также может быть условно-патогенным микроорганизмом у человека.В начале 1900-х годов классификация сахаролитических комменсалов Neisseria spp. были основаны на морфологии клеток и их способах производства кислоты из углеводов ^[4] . Однако из-за неспособности методов идентификации четко различать комменсальные виды Neisseria, N. flava »,« Н. перфлава »и« Н. subflava »позже были объединены в один вид« N. subflava »(биовары) и« N. flava »может называться« N. subflava »биовар« flava » ^[3] .Бактерии можно культивировать традиционно на шоколаде, кровяном агаре и питательном агаре при 22 ° C и 35 ° C соответственно ^[4] .
Биохимические и культурные характеристики «Н. flava »включают ^[5] .;

• Неспособность производить полисахарид из сахарозы
• Производство кислоты из фруктозы (положительный результат на фруктозу)
• Производство аммиака из пептона
• Чувствительность к колистину (не может расти на гонококковых селективных средах)
• Способность восстанавливать нитриты (NO2)
• Колонии плоские, пигментированные, непрозрачные, с матовым видом.

Neisseriae — одна из самых распространенных комменсальных флоры человека, которая в редких случаях может вызывать патогенез у человека, поэтому важно понять, является ли непатогенный комменсал Neisseria ”Spp.может способствовать патогенности патогенных штаммов, как показано в «N. gonorrhoeae »и« N. meningitidis ».

Рис. 1. Электронная микрофотография «Н. субфлава »с диплококковой структурой ^[3]

Структура генома

С помощью платформы illumine Hiseq 2000 геном «N. flava »(штамм NRL 30,008) был секвенирован с размером генома 243,7 Мбит / с с 49% содержанием GC. ^[2] .

Строение клетки и обмен веществ

Как и другие грамотрицательные бактерии, «N.flava »имеет субкапсулярную клеточную оболочку, состоящую из внешней мембраны (OM), одного тонкого слоя пептидогликана и внутренней клеточной мембраны ^[3] . Липополисахаридный (LPS) компонент OM фактически является липоолигосахаридом (LOS) ^[6] . В патогенных штаммах LOS представляет собой гликолипид внешней мембраны, который, как обнаружено, связан с уклонением, прикреплением, инвазией и опосредованием токсического повреждения хозяина. LOS состоит из O-антигена, олигосахарида ядра и липида-A.Было установлено три типа ядер-олигосахаридов, Тип-I — III, которые можно отличить от непатогенных видов Neisseria от патогенных. «Н. flava »обладают R-конфигурацией липополисахарида (ЛПС) и корового олигосахарида типа II, состоящего из D-глюкозы (3 моль), 2-дезокси-2-амино-D-глюкозы (2 моль), L-рамнозы (1 моль). ), L-глицеро-D-манногептоза (мкмоль) и этаноламин (мкмоль) ^[7] .
Было проведено много обширных исследований по изучению экспрессии пилей Neisserial в комменсальной «Neisseria».Пили можно увидеть в «Н. flava »под электронной микрофотографией ^[8] . Однако организм не реагировал на моноклональные антитела, специфичные к эпитопу SM1, которые распознают пили класса I, что позволяет предположить, что этот вид может иметь пили другого типа, отличные от кучи патогенных штаммов ^{[8] [9]} .
В настоящее время количество прямых исследований метаболизма Neisseria ограничено. Однако в лабораторных условиях «Н. flava »способен восстанавливать нитрит (NO2) и окислительно использовать углеводы (глюкозу, мальтозу, фруктозу, но не сахарозу и лактозу) в качестве источников энергии (4).Для достаточного роста в синтетической среде «Н. flava »требует биотина, глутаминовой кислоты, пяти аминокислот (цистеина, изолейцина, глутаминовой кислоты, фенилаланина и пролина) и лактата. Подобен грамположительным аэробным бактериям «N. flava »выделяет большое количество аммиака при выращивании в присутствии аминокислот ^[10] .

Экология

Как и другие виды Neisseria, N. flava »представляет собой аэробные β-протеобактерии ^[3] . Организм обитает в верхних дыхательных путях человека ^[3] .Нет обширного исследования «Н. flava »и диапазон его хозяев, однако этот организм был идентифицирован в ротоглотке макак-резус, что позволяет предположить, что этот вид не является хозяином, ограничивающимся только человеком ^[11] .

Патология

«Н. flava »редко было зарегистрировано как вызывающее бактериальный эндокардит ^[12] . Однако было показано, что поражение сердца является основной предрасположенностью к инфекции. Также была зарегистрирована причинная связь этого микроорганизма с менингитом и инфекцией половых путей ^[13] .Для будущих исследований представляет интерес изучить стратегии, которые этот организм мог бы использовать для побега из своих обычных мест обитания, уклонения от систем иммунного надзора хозяина и противостояния им, а также того, может ли этот организм легко колонизировать эти другие ткани по сравнению с его обычными местами обитания. .
Приобретение железа необходимо для выживания микроорганизмов. В организме человека-хозяина гем является основным источником железа для микроорганизмов, населяющих человеческий организм. Гомолог гемоксигеназы (HmuO) был идентифицирован из шести изолятов Neisseria, включая N.flava » ^[14] . Это было первое открытие гена «hmuO», идентифицированного у грамотрицательных бактерий. Открытие показало, что окислительное расщепление порфирина является важным этапом утилизации гема у Neisseria, и это может быть еще одним механизмом приобретения железа некоторыми бактериями. Помимо ассимиляции гем-железа, продукты разложения гема под действием HmuO, в основном биливердин и CO, также обеспечивают защиту от окислительного повреждения и токсичности гема. Восстановление биливердина может служить мощным антиоксидантом, в то время как CO связывается с эукариотической гуанилилциклазой. может увеличить доступность внутриклеточного цГМФ.HemO-зависимая деградация гема может нарушать функцию полиморфно-ядерных лейкоцитов и кровеносных систем хозяина, что может способствовать развитию инфекции у женщин в начале менструального периода ^[14] .

Применение в биотехнологии

Помимо его использования в качестве одного из репрезентативных комменсальных видов «Neisseria», существует ограниченное использование этого вида как такового. Однако есть ряд свидетельств, которые предполагают, что численность и микробное разнообразие комменсальной Neisseria коррелируют с некоторыми заболеваниями человека ^[15] , ^[16] , ^[17] , ^[18] .И что профиль орального микробиома комменсала Neisseria потенциально может быть использован в качестве биомаркеров заболеваний человека ^[11] .

Текущие исследования

Было показано, что Neisseria способны обмениваться своим генетическим материалом как внутри, так и между видами ^[19] , ^[20] , ^[21] , ^[22] . Примеры, которые опосредуют событие генетического обмена, такие как горизонтальный перенос гена посредством трансформации плазмиды и последовательности поглощения ДНК, которые позволяют гомологичную рекомбинацию генетического материала из внеклеточной среды.Сравнительный анализ последовательности комменсалов Neisseria spp. указали, что комменсальные виды обладают большим набором генов вирулентности. Ряд данных свидетельствует о том, что непатогенные «Neisseriaceae» обладают гомологичными генами вирулентности, обнаруженными в патогенных штаммах, таких как ген «opa» и липоолигосахарид, которые являются одними из важных факторов вирулентности, ответственных за уклонение хозяина от иммунитета ^[23] . Было показано, что «Н. flava »обладают двумя копиями гена« opa », адгезивных белков, которые составляют большую часть внешней мембраны, которые имеют сильную гомологию с генами opa, обнаруженными в патогенных штаммах« Neisseria » ^[24] , ^[25] .Варианты гомологичных генов, которые являются общими для патогенных и непатогенных штаммов, могут служить резервуаром для вариантов генов, устойчивых к вирулентности и / или противомикробным препаратам, которые могут косвенно способствовать патогенному потенциалу обоих штаммов. Были подняты вопросы, почему комменсал не вызывает патогенез? и как они избегают систем иммунного надзора хозяина, учитывая репертуар генов вирулентности?

Список литературы

1. [1]
2. [2]
3. (2015) Глава 5 — Микробы слизистой оболочки полости рта, стр. 95-107, Атлас микробиологии полости рта doi: https: // doi.org / 10.1016 / B978-0-12-802234-4.00005-7. Академик Пресс, Оксфорд.
4. Knapp JS. (1988) Исторические перспективы и идентификация Neisseria и родственных видов. Обзоры клинической микробиологии 1 : 415-431.
5. Кнапп Дж. С., Крюк Е. В., 3-й. (1988) Распространенность и устойчивость Neisseria cinerea и других видов Neisseria spp. у взрослых. J Clin Microbiol 26 : 896-900.
6. Никайдо Х. (1999) Микродерматология: клеточная поверхность во взаимодействии микробов с внешним миром. Журнал бактериологии 181 : 4-8.7. Джонсон К.Г., Перри М.Б., Макдональд И.Дж. (1976) Исследования клеточных и свободных липополисахаридов из Neisseria canis и N. subflava. Может J Microbiol 22 : 189-96.
8. Ахо Э.Л., Мерфи Г.Л., Кэннон Дж.Г. (1987) Распределение специфических последовательностей ДНК среди патогенных и комменсальных видов Neisseria. Заражение иммунной 55 : 1009-13.
9. Hung M.C., Christodoulides M. (2013) Биология Neisseria Adhesins. Биология 2 : 1054-1109.
10. Макдональд Эй Джей, Джонсон К.Г. (1975) Питательные потребности некоторых непатогенных Neisseria, выращенных на простых синтетических средах.Может J Microbiol 21 : 1198-204.
11. Лю Джи, Тан СМ, Эксли Р.М. (2015) Непатогенные Neisseria: представители многочисленного, разнообразного рода с множеством ареалов обитания. Микробиология 161 : 1297-1312.
12. Скотт Р.М. (1971) Бактериальный эндокардит, вызванный Neisseria flava. Журнал педиатрии 78 : 673-675.
13. AP. (1983) Патогенный потенциал комменсальных видов Neisseria. Журнал клинической патологии 36 : 213-223.
14. Жу В., Вилкс А., Стожилькович И. (2000) Деградация гема у грамотрицательных бактерий: продукт гена hemO Neisseriae — гемоксигеназа.(Статистические данные включены). Журнал бактериологии 182 : 6783.
15. Кертис Майкл А., Зенобия К., Дарво Ричард П. Связь микробиотии полости рта с пародонтальным здоровьем и заболеванием. Клеточный хозяин и микроб 10 : 302-306.
16. Филкинс Л.М., Хэмптон Т.Х., Гиффорд А.Х., Гросс М.Дж., Хоган Д.А., Согин М.Л., Моррисон Х.Г., Пастер Б.Дж., О’Тул Г.А. (2012) Распространенность стрептококков и увеличение полимикробного разнообразия, связанное с устойчивостью пациентов с муковисцидозом. Журнал бактериологии 194 : 4709-4717.17. Саид Х.С., Суда В., Накагоме С., Чинен Х., Осима К., Ким С., Кимура Р., Ираха А., Исида Х., Фудзита Дж., Мано С., Морита Х., Дохи Т., Оота Х, Хаттори М. (2014) Дисбактериоз слюнной микробиоты при воспалительном заболевании кишечника и его связь с оральными иммунологическими биомаркерами. Исследования ДНК 21 : 15-25.
18. Фаррелл Дж.Дж., Чжан Л., Чжоу Х., Чиа Д., Элашофф Д., Акин Д., Пастер Б.Дж., Джошипура К., Вонг Д.Т.В. (2011) Вариации микробиоты полости рта связаны с заболеваниями поджелудочной железы, включая рак поджелудочной железы.Кишечник.
19. Marri PR, Paniscus M, Weyand NJ, Rendón MA, Calton CM, Hernández DR, Higashi DL, Sodergren E., Weinstock GM, Rounsley SD, So M. 2010. Секвенирование генома выявляет широко распространенный обмен генами вирулентности среди видов Neisseria человека. PLOS ONE 5 : e11835.
20. Чжоу Дж., Боулер Л.Д., Спратт Б.Г. 1997. Межвидовая рекомбинация и филогенетические искажения в генах глутаминсинтетазы и шикиматдегидрогеназы Neisseria meningitidis и комменсальных видов Neisseria. Молекулярная микробиология 23 : 799-812.21. ван Пассель М.В.Дж., ван дер Энде А., Барт А. 2006. Разнообразие плазмид в Neisseriae. Инфекция и иммунитет 74 : 4892.
22. Эйл Э., Чжоу Дж., Смит Дж. М., Спратт Б. Г.. 1996. Сравнение нуклеотидных последовательностей генов theadk andrecA патогенных и комменсальных видов Neisseria: доказательства обширной межвидовой рекомбинации внутри ADK. Журнал молекулярной эволюции 43 : 631-640.
23. Толеман М., Ахо Е., Вирджи М. (2001) Экспрессия патоген-подобных адгезинов Opa в комменсальных Neisseria: генетический и функциональный анализ.Клеточная микробиология 3 : 33-44.
24. Вольф К., Стерн А. (1995) Идентификация и характеристика конкретных последовательностей, кодирующих белки, связанные с патогенностью, в геноме комменсальных видов Neisseria. Письма о микробиологии FEMS 125 : 255-263.
25. Робертс М.К., Чанг В.О., Роу Д., Ся М., Маркес К., Бортагарай Г., Уиттингтон В.Л., Холмс К.К. (1999) Устойчивые к эритромицину Neisseria gonorrhoeae и Oral Commensal Neisseria spp. Несут известные гены метилазы рРНК. Противомикробные препараты и химиотерапия 43 : 1367.

Эта страница написана <Паватом Лаохамонтонкулом (43895212)> для курса MICR3004, семестр 2, 2017

% PDF-1.4
%
72 0 объект
>
эндобдж
73 0 объект
> поток
2003-07-11T13: 07: 36Z2021-04-16T13: 21: 34-07: 002021-04-16T13: 21: 34-07: 00Apex PDFWriteruuid: 2619a7b1-1dd2-11b2-0a00-5a08271d5700uuid: 2619a7b5-1dd2-11b2 -0a00-bf0000000000приложение / pdf
конечный поток
эндобдж
1 0 obj
>
эндобдж
4 0 obj
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
8 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
12 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
16 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
20 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
24 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
28 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
32 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
36 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
40 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
44 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
48 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
52 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
56 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
60 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
64 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
68 0 объект
> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
эндобдж
107 0 объект
[109 0 R]
эндобдж
108 0 объект
> поток
HWnF} SR ^ R2
& j8 [TnRa (_? X + `] = + ¼ @ h2Yl =.WW #, b} (DVI (/ ׈ b} zs {} n} w ߮-) k VDVDXC4q͑R7bt | ‘Fcp8> | @ h @ $ B ڱ wJ.5bEI9.MT; {Y @, ޴ t ޡ` \ b &’ nk% [T ߻ Py˃SѤ $ Y {* Ur ~ AEӢHtY | D [`8? 7MY ~» 9m04h2d ~ ƽu ~ x ‘{M ݏ ~ ([U {1t # F MF; d 态 b̝e ?? 6G {kkvHá! Rț4 $ # 2 $] Lnkw7J` ܹ0 i!
`̨Y1> —
EUl І05 «4
0C @ s @ «x.> EP.bbHXU ݠ% 42 WFď7 ސ MLqNfs / PJB

Менингит, вызванный Neisseria subflava: отчет о болезни и обзор | Клинические инфекционные заболевания

Neisseria subflava , сапрофитный организм, который часто встречается в носоглотке и мочеполовых путях, является редкой причиной инвазивных заболеваний у взрослых и детей [1–6].К нечастым системным инфекциям, связанным с этим микроорганизмом, относятся менингит [1], эндокардит [4], глазные инфекции [4], артрит [4] и бактериемия [7]. Здесь мы описываем молодую женщину с постмиелографическим менингитом, вызванным N. subflava , которую мы лечили недавно.

Женщина 27 лет поступила в клинику на миелографию. В возрасте 2 лет ей диагностировали синдром Марфана. За семь месяцев до госпитализации был выполнен задний артродез L4 – L5.У нее возникла сильная боль в пояснице после операции, при которой была проведена миелография, которая выявила только удлинение дурального мешка. Через 24 часа после миелографии, которая была проведена персоналом без масок, у пациента внезапно появилась сильная головная боль, тошнота, рвота и жар. Температура 39 ° C, артериальное давление 120/70 мм рт. При физикальном обследовании выявлено ригидность затылочной кости с признаками Кернига и Брудзинского. Очаговых неврологических признаков не было. Остальные результаты физикального обследования не заметны.

Количество лейкоцитов 10 400 / мм ³ (81% полиморфно-ядерных лейкоцитов и 11% лимфоцитов). Коагуляция нормальная. КТ черепа была нормальной. Анализ CSF показал соотношение глюкозы CSF / сыворотки 0,15, содержание белка 9,9 г / л и количество лейкоцитов 2688 клеток / мм ³ (с 95% полиморфно-ядерными лейкоцитами). В мазке ЦСЖ, окрашенном по Граму, никаких организмов не обнаружено.

Через 48 часов после люмбальной пункции посев спинномозговой жидкости выявил несколько колоний оксидазо-положительных грамотрицательных диплококков.Организм был идентифицирован как N. subflava API NH (Bio-Mérieux, Лион, Франция) и отрицательным тестом на восстановление нитратов. МИК были следующими: пенициллин G, 1 мкг / мл; цефотаксим, <0,06 мкг / мл; рифампицин, 1 мкг / мл: и ципрофлоксацин, <0,06 мкг / мл. Культуры крови были отрицательными. Пациенту вводили цефотаксим внутривенно по 12 г / сут в течение 14 дней. Она прошла без осложнений в больнице, и ее выписали в добром здравии.

Мы обнаружили 8 хорошо задокументированных случаев менингита (NsM), вызванного N. subflava , в литературе с 1966 г. [1–6].Клинические характеристики этих случаев показаны в таблице 1. Только пациент, описанный здесь, ранее перенес инвазивную процедуру в качестве предрасполагающего состояния. Мазок ЦСЖ, окрашенный по Граму, выявил грамотрицательные кокки у 6 пациентов (66,6%). Культура CSF была положительной у 8 пациентов (88,8%), культура крови у 5 пациентов (55,5%) и 1 пациент (11,1%) имела положительную культуру трахеального экссудата. У пяти пациентов (55,5%) во время пребывания в больнице развились осложнения неврологического характера (судороги у 1 пациента, внутричерепное кровоизлияние у другого) или экстраневрологического характера (петехиальная сыпь или кровоизлияния у 1 пациента и синдром Уотерхауса-Фридериксена у другого), и 1 пациент развились осложнения обоих типов.Антибактериальная терапия показана 8 пациентам. Сообщалось, что четыре из 7 изолятов чувствительны к пенициллину (случаи 1–3 и 7), тогда как 3 изолята сообщали об устойчивости к пенициллину (случаи 4, 5 и настоящий отчет). Трое из 9 пациентов умерли, летальность составила 33,3%. Двое (66,6%) из 6 выживших имели осложнения при выписке из больницы, у одного были неврологические последствия (хронические судороги), а у другого — остаточные кровоизлияния в сетчатку.

Потому что Н.subflava обычно входит в состав флоры носоглотки, можно ожидать, что у большинства пациентов, у которых был обнаружен первичный экстраменингеальный очаг инфекции, были инфекции верхних дыхательных путей или ушей, носа и горла [1–6]. Представленная здесь пациентка необычна, так как после миелографии у нее был менингит. Бактериальный менингит после миелографии не является необычным осложнением этой инвазивной процедуры, но обычно участвуют микроорганизмы нормальной флоры кожи, такие как стрептококки и стафилококки [8].Однако патогенным механизмом, который может играть роль в развитии бактериального менингита после люмбальной пункции, является заражение через капли ротоглоточного секрета персонала, присутствующего во время люмбальной пункции [8]. Этот путь передачи был зарегистрирован ранее в случаях пневмококкового менингита [8] и подтверждается тем фактом, что во время процедуры обычно не надевают лицевую маску [8]. В литературе не сообщалось о предыдущих случаях менингита после люмбальной пункции, вызванного N. subflava , но обычное присутствие этого микроорганизма в нормальной флоре полости рта предполагает, что это возможный путь заражения.

Хромогенные Neisseriae раньше были полностью чувствительны к пенициллину [9]. Однако до того, что наблюдалось с Neisseria meningitidis , некоторые из сапрофитов Neisseriae были менее чувствительны к пенициллину [9]. Это согласуется с выводами настоящего обзора, согласно которому изоляты N. subflava , вызывающие менингит в последние годы, показали пониженную чувствительность к пенициллину. В стандартных дозах (т. Е. 250 000 Ед / кг / сут) пенициллин обеспечивает уровни в спинномозговой жидкости ~ 1 мкг / мкл, уровень, который обычно превышает МИК для чувствительных Н.subflava изолируется многократно [5]. Однако, учитывая возможность снижения восприимчивости к пенициллину в случаях менингита, вызванного сапрофитами Neisseriae , эмпирическая терапия цефалоспоринами третьего поколения была бы наиболее целесообразной [4, 5].

Список литературы

1,.

Neisseria subflava как причина менингита и сепсиса у детей

,

JAMA

,

1966

, т.

195

(стр.

133

—

5

) 2,,,,.

Une neisseria comnsale (Neisseria perflava) responsable d’un cas de méningite

,

Presse Med

,

1970

, vol.

78

стр.

2284

3,,.

Инфекции Neisseria subflava — бактериологические аспекты двух случаев

,

Yonsei Med J

,

1975

, vol.

16

(стр.

44

—

9

) 4,.

Значение негонококковых, неменингококковых Изолятов Neisseria из посевов крови

,

Rev Infect Dis

,

1984

, vol.

6

(стр.

181

—

8

) 5,,.

Neisseria subflava Бактериемия и менингит у ребенка: описание случая и обзор литературы

,

Pediatr Infect Dis

,

1985

, vol.

4

(стр.

286

—

8

) 6,,,,.

Менингит новорожденных Neisseria subflava

,

An Esp Pediatr

,

1988

, vol.

29

(стр.

475

—

6

) 7,,,,.

Бактериемия Neisseria subflava у пациента с нейтропенией

,

Arch Intern Med

,

1996

, vol.

156

(стр.

1762

—

5

) 8,,,,.

Ятрогенный стрептококковый менингит

,

Clin Infect Dis

,

1994

, vol.

19

(стр.

356

—

7

) 9,,, et al.

Neisseria lactamica и Neisseria polysaccharea как возможные источники устойчивости менингококков к β-лактамам путем генетической трансформации

,

Противомикробные агенты Chemother

,

1990

, vol.

34

(стр.

2269

—

72

)

Рисунки и таблицы

Таблица 1

Характеристика больных менингитом, вызванным Neisseria subflava.

Таблица 1

Характеристика больных менингитом, вызванным Neisseria subflava.

© 2000 Американского общества инфекционистов

Живая культура Neisseria flava Ward’s®

Положения и условия

Спасибо, что посетили наш сайт.Эти условия использования применимы к веб-сайтам США, Канады и Пуэрто-Рико (далее «Веб-сайт»), которыми управляет VWR («Компания»). Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Все пользователи веб-сайта подчиняются следующим условиям использования веб-сайта (эти «Условия использования»). Пожалуйста, внимательно прочтите эти Условия использования перед доступом или использованием любой части веб-сайта. Заходя на веб-сайт или используя его, вы соглашаетесь с тем, что прочитали, поняли и соглашаетесь соблюдать настоящие Условия использования с поправками, которые время от времени вносятся, а также Политику конфиденциальности компании, которая настоящим включена в настоящие Условия. использования. Если вы не желаете соглашаться с настоящими Условиями использования, не открывайте и не используйте какие-либо части веб-сайта.

Компания может пересматривать и обновлять настоящие Условия использования в любое время без предварительного уведомления, разместив измененные условия на веб-сайте. Продолжение использования вами веб-сайта означает, что вы принимаете и соглашаетесь с пересмотренными Условиями использования.Если вы не согласны с Условиями использования (в которые время от времени вносятся поправки) или недовольны Веб-сайтом, ваше единственное и исключительное средство правовой защиты — прекратить использование Веб-сайта.

Использование сайта

Информация, содержащаяся на этом веб-сайте, предназначена только для информационных целей. Хотя считается, что информация верна на момент публикации, вам следует самостоятельно определить ее пригодность для вашего использования. Не все продукты или услуги, описанные на этом веб-сайте, доступны во всех юрисдикциях или для всех потенциальных клиентов, и ничто в настоящем документе не предназначено как предложение или ходатайство в какой-либо юрисдикции или какому-либо потенциальному покупателю, где такое предложение или продажа не соответствует требованиям.

Приобретение товаров и услуг

Настоящие Условия и положения распространяются только на использование веб-сайта. Обратите внимание, что условия, касающиеся обслуживания, продаж продуктов, рекламных акций и других связанных мероприятий, можно найти по адресу https://us.vwr.com/store/content/externalContentPage.jsp?path=/en_US/about_vwr_terms_and_conditions.jsp , и эти условия регулируют любые покупки продуктов или услуг у Компании.

Интерактивные функции

Веб-сайт может содержать службы досок объявлений, области чата, группы новостей, форумы, сообщества, личные веб-страницы, календари и / или другие средства сообщения или связи, предназначенные для того, чтобы вы могли общаться с общественностью в целом или с группой ( вместе «Функция сообщества»).Вы соглашаетесь использовать функцию сообщества только для публикации, отправки и получения сообщений и материалов, которые являются надлежащими и относятся к конкретной функции сообщества. Вы соглашаетесь использовать веб-сайт только в законных целях.

A. В частности, вы соглашаетесь не делать ничего из следующего при использовании функции сообщества:

1. Опорочить, оскорбить, преследовать, преследовать, угрожать или иным образом нарушать законные права (например, право на неприкосновенность частной жизни и гласность) других.
2. Публикация, размещение, загрузка, распространение или распространение любых неуместных, непристойных, дискредитирующих, нарушающих права, непристойных, непристойных или незаконных тем, названий, материалов или информации.
3. Загружайте файлы, содержащие программное обеспечение или другие материалы, защищенные законами об интеллектуальной собственности (или правами на неприкосновенность частной жизни), если только вы не владеете или не контролируете права на них или не получили все необходимое согласие.
4. Загрузите файлы, содержащие вирусы, поврежденные файлы или любое другое подобное программное обеспечение или программы, которые могут повредить работу чужого компьютера.
5. Перехватить или попытаться перехватить электронную почту, не предназначенную для вас.
6. Рекламировать или предлагать продавать или покупать какие-либо товары или услуги для любых деловых целей, если такая функция сообщества специально не разрешает такие сообщения.
7. Проводите или рассылайте опросы, конкурсы, финансовые пирамиды или письма счастья.
8. Загрузите любой файл, опубликованный другим пользователем функции сообщества, который, как вы знаете или разумно должен знать, не может распространяться на законных основаниях таким образом или что у вас есть договорное обязательство сохранять конфиденциальность (несмотря на его доступность на веб-сайте).
9. Подделывать или удалять любые ссылки на автора, юридические или другие надлежащие уведомления, обозначения собственности или ярлыки происхождения или источника программного обеспечения или других материалов, содержащихся в загружаемом файле.
10. Представление ложной информации о принадлежности к какому-либо лицу или организации.
11. Участвовать в любых других действиях, которые ограничивают или препятствуют использованию Веб-сайта кем-либо или которые, по мнению Компании, могут нанести вред Компании или пользователям Веб-сайта или подвергнуть их ответственности.
12. Нарушать любые применимые законы или постановления или нарушать любой кодекс поведения или другие руководящие принципы, которые могут быть применимы к какой-либо конкретной функции Сообщества.
13. Собирать или иным образом собирать информацию о других, включая адреса электронной почты, без их согласия.

B. Вы понимаете и признаете, что несете ответственность за любой контент, который вы отправляете, вы, а не Компания, несете полную ответственность за такой контент, включая его законность, надежность и уместность. Если вы публикуете сообщения от имени или от имени вашего работодателя или другого юридического лица, вы заявляете и гарантируете, что у вас есть на это право. Загружая или иным образом передавая материалы в любую часть веб-сайта, вы гарантируете, что эти материалы являются вашими собственными или находятся в общественном достоянии или иным образом свободны от проприетарных или иных ограничений, и что вы имеете право размещать их на веб-сайте.Кроме того, загружая или иным образом передавая материал в любую область веб-сайта, вы предоставляете Компании безотзывное, бесплатное право во всем мире на публикацию, воспроизведение, использование, адаптацию, редактирование и / или изменение таких материалов любым способом, в любые и все средства массовой информации, известные в настоящее время или обнаруженные в будущем во всем мире, в том числе в Интернете и World Wide Web, для рекламных, коммерческих, торговых и рекламных целей, без дополнительных ограничений или компенсации, если это не запрещено законом, и без уведомления, проверки или одобрения.

C. Компания оставляет за собой право, но не принимает на себя никакой ответственности (1) удалить любые материалы, размещенные на веб-сайте, которые Компания по своему собственному усмотрению сочтет несовместимыми с вышеуказанными обязательствами или иным образом неприемлемыми по любой причине. ; и (2) прекратить доступ любого пользователя ко всему или части веб-сайта. Однако Компания не может ни просмотреть все материалы до того, как они будут размещены на веб-сайте, ни обеспечить быстрое удаление нежелательных материалов после их размещения.Соответственно, Компания не несет ответственности за какие-либо действия или бездействие в отношении передач, сообщений или контента, предоставленных третьими сторонами. Компания оставляет за собой право предпринимать любые действия, которые она сочтет необходимыми для защиты личной безопасности пользователей этого веб-сайта и общественности; тем не менее, Компания не несет ответственности перед кем-либо за выполнение или невыполнение действий, описанных в этом параграфе.

D. Несоблюдение вами положений пунктов (A) или (B) выше может привести к прекращению вашего доступа к веб-сайту и может повлечь за собой гражданскую и / или уголовную ответственность.

Особое примечание о содержании функций сообщества

Любой контент и / или мнения, загруженные, выраженные или отправленные с помощью любой функции сообщества или любого другого общедоступного раздела веб-сайта (включая области, защищенные паролем), а также все статьи и ответы на вопросы, кроме контента, явно разрешенного Компания, являются исключительно мнениями и ответственностью лица, представляющего их, и не обязательно отражают мнение Компании.Например, любое рекомендованное или предлагаемое использование продуктов или услуг, доступных от Компании, которое публикуется через функцию сообщества, не является признаком одобрения или рекомендации со стороны Компании. Если вы решите следовать какой-либо такой рекомендации, вы делаете это на свой страх и риск.

Ссылки на сторонние сайты

Веб-сайт может содержать ссылки на другие веб-сайты в Интернете. Компания не несет ответственности за контент, продукты, услуги или методы любых сторонних веб-сайтов, включая, помимо прочего, сайты, связанные с Веб-сайтом или с него, сайты, созданные на Веб-сайте, или стороннюю рекламу, и не делает заявлений относительно их качество, содержание или точность.Наличие ссылок с веб-сайта на любой сторонний веб-сайт не означает, что мы одобряем, поддерживаем или рекомендуем этот веб-сайт. Мы отказываемся от всех гарантий, явных или подразумеваемых, в отношении точности, законности, надежности или действительности любого контента на любых сторонних веб-сайтах. Вы используете сторонние веб-сайты на свой страх и риск и в соответствии с условиями использования таких веб-сайтов.

Права собственности на контент

Вы признаете и соглашаетесь с тем, что все содержимое веб-сайта (включая всю информацию, данные, программное обеспечение, графику, текст, изображения, логотипы и / или другие материалы), а также его дизайн, выбор, сбор, расположение и сборка являются являются собственностью Компании и защищены законами США и международными законами об интеллектуальной собственности.Вы имеете право использовать содержимое веб-сайта только в личных или законных деловых целях. Вы не можете копировать, изменять, создавать производные работы, публично демонстрировать или исполнять, переиздавать, хранить, передавать, распространять, удалять, удалять, дополнять, добавлять, участвовать в передаче, лицензировать или продавать какие-либо материалы в Интернете. Сайт без предварительного письменного согласия Компании, за исключением: (а) временного хранения копий таких материалов в ОЗУ, (б) хранения файлов, которые автоматически кэшируются вашим веб-браузером в целях улучшения отображения, и (в) печати разумного количество страниц веб-сайта; в каждом случае при условии, что вы не изменяете и не удаляете какие-либо уведомления об авторских правах или других правах собственности, включенные в такие материалы.Ни название, ни какие-либо права интеллектуальной собственности на любую информацию или материалы на веб-сайте не передаются вам, а остаются за Компанией или соответствующим владельцем такого контента.

Товарные знаки

Название и логотип компании, а также все связанные названия, логотипы, названия продуктов и услуг, появляющиеся на веб-сайте, являются товарными знаками компании и / или соответствующих сторонних поставщиков. Их нельзя использовать или повторно отображать без предварительного письменного согласия Компании.

Отказ от ответственности

Компания не несет никакой ответственности за материалы, информацию и мнения, предоставленные или доступные через Веб-сайт («Контент сайта»). Вы полагаетесь на Контент сайта исключительно на свой страх и риск. Компания не несет никакой ответственности за травмы или убытки, возникшие в результате использования любого Контента Сайта.
ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА И ПРОДУКТЫ И УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ИЛИ ДОСТУПНЫЕ ЧЕРЕЗ САЙТ, ПРЕДОСТАВЛЯЮТСЯ НА УСЛОВИЯХ «КАК ЕСТЬ» И «ПО ДОСТУПНОСТИ», СО ВСЕМИ ОТКАЗАМИ.КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ДАЕТ НИКАКИХ ГАРАНТИЙ ИЛИ ЗАЯВЛЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ КАЧЕСТВА, ТОЧНОСТИ ИЛИ ДОСТУПНОСТИ ВЕБ-САЙТА. В частности, НО БЕЗ ОГРАНИЧЕНИЯ ВЫШЕИЗЛОЖЕННОГО, НИ КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ГАРАНТИРУЕТ ИЛИ ЗАЯВЛЯЕТ, ЧТО ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА ИЛИ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ САЙТ, БУДУТ ТОЧНЫМИ, НАДЕЖНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ЧТО ДЕФЕКТЫ БУДУТ ИСПРАВЛЕНЫ; ЧТО ВЕБ-САЙТ ИЛИ СЕРВЕР, ДЕЛАЮЩИЙ ЕГО ДОСТУПНЫМ, СВОБОДНЫ ОТ ВИРУСОВ ИЛИ ДРУГИХ ВРЕДНЫХ КОМПОНЕНТОВ; ИНАЧЕ ВЕБ-САЙТ ОТВЕЧАЕТ ВАШИМ ПОТРЕБНОСТЯМ ИЛИ ОЖИДАНИЯМ.КОМПАНИЯ ОТКАЗЫВАЕТСЯ ОТ ВСЕХ ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ, ВКЛЮЧАЯ ЛЮБЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ, ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ И НЕ НАРУШЕНИЯ.
НИ ПРИ КАКИХ ОБСТОЯТЕЛЬСТВАХ КОМПАНИЯ ИЛИ ЕЕ ЛИЦЕНЗИАРЫ ИЛИ ПОДРЯДЧИКИ НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА ЛЮБЫЕ УБЫТКИ ЛЮБОГО ВИДА, ПРИ КАКИХ-ЛИБО ЮРИДИЧЕСКИХ ТЕОРИЯХ, ВЫЗВАННЫЕ ИЛИ В СВЯЗИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВАМИ ИЛИ НЕВОЗМОЖНОСТЬЮ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖИМОЕ САЙТА, ЛЮБЫЕ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ ВЕБ-САЙТ ИЛИ ЛЮБОЙ САЙТ, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ПРЯМЫЙ, КОСВЕННЫЙ, СЛУЧАЙНЫЙ, СПЕЦИАЛЬНЫЙ, КОСВЕННЫЙ ИЛИ КАРАТЕЛЬНЫЙ УБЫТК, ВКЛЮЧАЯ, НО НЕ ОГРАНИЧИВАЯСЬ, ЛИЧНЫЕ ТРАВМЫ, ПОТЕРЯ ПРИБЫЛИ ИЛИ УБЫТКОВ , ВИРУСЫ, УДАЛЕНИЕ ФАЙЛОВ ИЛИ ЭЛЕКТРОННЫХ СООБЩЕНИЙ, ИЛИ ОШИБКИ, УПУЩЕНИЯ ИЛИ ДРУГИЕ НЕТОЧНОСТИ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ СОДЕРЖАНИИ САЙТА ИЛИ УСЛУГ, НЕОБХОДИМО ЛИ КОМПАНИЯ ИЛИ НЕОБХОДИМО ЛИ ПРЕДОСТАВЛЕНИЕ КОМПАНИИ ВОЗМОЖНОСТИ ЛЮБЫЕ ТАКИЕ УБЫТКИ, ЕСЛИ НЕ ЗАПРЕЩЕНЫ ПРИМЕНИМЫМ ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВОМ.

Компенсация

Вы соглашаетесь возместить и обезопасить Компанию и ее должностных лиц, директоров, агентов, сотрудников и других лиц, участвующих в работе Веб-сайта, от любых обязательств, расходов, убытков и издержек, включая разумные гонорары адвокатам, возникающих в результате любое нарушение вами настоящих Условий использования, использование вами Веб-сайта или любых продуктов, услуг или информации, полученных с Веб-сайта или через него, ваше подключение к Веб-сайту, любой контент, который вы отправляете на Веб-сайт через любые Функция сообщества или нарушение вами каких-либо прав другого лица.

Применимое право; Международное использование

Настоящие условия регулируются и толкуются в соответствии с законами штата Пенсильвания без учета каких-либо принципов коллизионного права. Вы соглашаетесь с тем, что любые судебные иски или иски, вытекающие из настоящих Условий использования или связанные с ними, будут подаваться исключительно в суды штата или федеральные суды, расположенные в Пенсильвании, и вы тем самым соглашаетесь и подчиняетесь личной юрисдикции таких судов для цели судебного разбирательства по любому подобному действию.
Настоящие Условия использования применимы к пользователям в США, Канаде и Пуэрто-Рико. Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Если вы решите получить доступ к этому веб-сайту из-за пределов указанных юрисдикций, а не использовать доступные международные сайты, вы соглашаетесь с настоящими Условиями использования и тем, что такие условия будут регулироваться и толковаться в соответствии с законами США и штата. Пенсильвании и что мы не делаем никаких заявлений о том, что материалы или услуги на этом веб-сайте подходят или доступны для использования в этих других юрисдикциях.В любом случае все пользователи несут ответственность за соблюдение местных законов.

Общие условия

Настоящие Условия использования, в которые время от времени могут вноситься поправки, представляют собой полное соглашение и понимание между вами и нами, регулирующее использование вами Веб-сайта. Наша неспособность реализовать или обеспечить соблюдение какого-либо права или положения Условий использования не означает отказ от такого права или положения. Если какое-либо положение Условий использования будет признано судом компетентной юрисдикции недействительным, вы, тем не менее, соглашаетесь с тем, что суд должен попытаться реализовать намерения сторон, отраженные в этом положении и других положениях Условия использования остаются в силе.Ни ваши деловые отношения или поведение между вами и Компанией, ни какая-либо торговая практика не может считаться изменением настоящих Условий использования. Вы соглашаетесь с тем, что независимо от какого-либо закона или закона об обратном, любые претензии или основания для иска, вытекающие из или связанные с использованием Сайта или Условий использования, должны быть поданы в течение одного (1) года после такой претензии или причины. иска возникла или будет навсегда запрещена. Любые права, прямо не предоставленные в настоящем документе, сохраняются за Компанией.Мы можем прекратить ваш доступ или приостановить доступ любого пользователя ко всему сайту или его части без предварительного уведомления за любое поведение, которое мы, по нашему собственному усмотрению, считаем нарушением любого применимого законодательства или наносящим ущерб интересам другого пользователя. , стороннего поставщика, поставщика услуг или нас. Любые вопросы, касающиеся настоящих Условий использования, следует направлять по адресу [email protected].

Жалобы на нарушение авторских прав

Мы уважаем чужую интеллектуальную собственность и просим наших пользователей поступать так же.Если вы считаете, что ваша работа была скопирована и доступна на Сайте способом, который представляет собой нарушение авторских прав, вы можете уведомить нас, предоставив нашему агенту по авторским правам следующую информацию:

• электронная или физическая подпись лица, уполномоченного действовать от имени правообладателя;

• описание работы, защищенной авторским правом, в отношении которой были нарушены ваши претензии;

• идентификация URL-адреса или другого конкретного места на Сайте, где находится материал, который, по вашему мнению, нарушает авторские права;

• ваш адрес, номер телефона и адрес электронной почты;

• заявление, что у вас есть добросовестное предположение, что спорное использование не разрешено владельцем авторского права, его агентом или законом; а также

• ваше заявление, сделанное под страхом наказания за лжесвидетельство, о том, что приведенная выше информация в вашем уведомлении является точной и что вы являетесь владельцем авторских прав или уполномочены действовать от имени владельца авторских прав.