Пцр инфекции: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

Анализы на инфекции — ПЦР, ИППП, ВИЧ, гепатит, сифилис, вирусы — Лаборатория Прогрессивные Медицинские Технологии в Челябинске

В независимой лаборатории «Прогрессивные Медицинские Технологии» вы можете выполнить широкий перечень лабораторных тестов, направленных на выявление инфекционных заболеваний человека.

Определение специфических антител — иммуноглобулинов классов A, M, G в крови c использованием методов  иммуноферментного анализа (ИФА) или иммунохемилюминесцентного анализа, позволяет выявить факт инфицированности, текущий инфекционный процесс, перенесенную инфекцию, напряженность иммунитета после вакцинации. 

Определение ДНК возбудителя в исследуемом материале  методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (анализ ПЦР Real-Time) — современный метод молекулярной диагностики, способный быстро и с высокой точностью выявить инфекцию даже в случае присутствия в образце единичных возбудителей.

В некоторых случаях для диагностики инфекции достаточным  является только определение антител или ДНК, либо возможности лабораторной диагностики ограничены одним методом. Комплексная диагностика с использованием  2 лабораторных методов дает врачу максимально полную информацию о наличии инфекции, стадии инфекционного процесса и рисках передачи инфекции.

Для диагностики инфекций, передающихся половым путем (анализ ИППП), лаборатория предлагает как отдельные тесты, так и комплексные исследования, позволяющие при минимальных затратах провести полное обследование.

Цены

Уважаемые клиенты! Обращаем Ваше внимание: стоимость услуги проведения медицинских анализов складывается из стоимости исследований и стоимости взятия биологического материала. Сроки выполнения исследований рассчитываются с момента поступления биоматериала в лабораторию.

Лаборатория

Мы работаем на лабораторном оборудовании ведущих мировых производителей, которое обеспечивает максимально точные результаты в кратчайшие сроки.

Наши преимущества

Быстро

Точно

Надежно

Отзывы

Автор: Владимир

Отзыв: Сдавал анализ на гепатит, вежливый персонал, никаких лишних вопросов, все быстро

Автор: Антонина

Отзыв: Сдавала анализ на ЗППП, благодарна медперсоналу за деликатность

Автор: Николай

Отзыв: Детский кал на инфекции можно сдать в течение всего дня и в выходные, это очень удобно.

ПЦР (диагностика инфекций)

ПЦР Chlamydia trachomatis (соскоб)

ПЦР коклюш: bordetella pertussis (мазок из зева)

ПЦР ureaplasma spp (urealyticum+parvum) с дифференциацией вида и количественно (соскоб)

ПЦР Mycoplasma genitalium (соскоб)

ПЦР Вирус простого герпеса 1, 2 тип (соскоб)

ОнкоГенетика. BRCA. Риск развития рака молочной железы

ПЦР Генетика метаболизма фолатов (кровь)

Генетика репродукции. Мужское бесплодие. Делекции AZF-локуса

Исследование клеща на 4 инфекции

ДНК ВПЧ высокого онкогенного риска (количественное определение типов ВПЧ)

HLA-типирование 2 класса

Врожденная тромбофилия при невынашивании беременности

Выявление РНК вирусов гриппа А и В

Гемохроматоз, определение мутаций (HFE: 187C>G, HFE: 845G>A)

ДНК Возбудителя гранулоцитарного анаплазмоза человека (ДНК А.phagocytophilum) (кровь)

ДНК Возбудителя гранулоцитарного анаплазмоза человека (ДНК А.phagocytophilum) (ликвор)

ДНК Микобактерии туберкулеза (кровь)

ДНК Микобактерии туберкулеза (ликвор)

ДНК Микобактерии туберкулеза (мокрота)

ДНК Микобактерии туберкулеза (соскоб)

ПЦР «Андрофлор Скрин»

ПЦР «Андрофлор»

ПЦР «Фемофлор Скрин» (соскоб)

ПЦР Candida albicans (соскоб)

ПЦР Gardnerella vaginlis (сокоб)

ПЦР Mycoplasma hominis (соскоб)

ПЦР Neisseria gonorrhoeae (соскоб)

ПЦР Toxoplasma gondii (кровь)

ПЦР Toxoplasma gondii (соскоб)

ПЦР Trichomonas vaginalis (соскоб)

ПЦР Вирус варицелла зостер (кровь)

ПЦР Вирус гепатита D (кровь)

ПЦР Вирус гепатита А (кровь)

ПЦР Вирус гепатита В (количественный ) (кровь)

ПЦР Вирус гепатита В (кровь)

ПЦР Вирус гепатита С (качественный ультрачувствительный)

ПЦР Вирус гепатита С (количественный ультрачувствительный)

ПЦР Вирус гепатита С (количественный) (кровь)

ПЦР Вирус гепатита С (кровь)

ПЦР Вирус герпеса 6 тип (кровь)

ПЦР вирус папилломы 16, 18 тип (соскоб)

ПЦР Вирус простого герпеса 1, 2 тип (кровь)

ПЦР Вирус Эпштейн-Барр (кровь)

ПЦР Вирусные кишечные инфекции (РНК Rotavirus/Norovirus/Astrovirus)

ПЦР Гельмо-скрин (кал)

ПЦР Генетика метаболизма лактозы

ПЦР Генотипирование вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска (21 тип, Квант 21)

ПЦР Диагностика синдрома Жильбера (мутация гена UGT 1)

ПЦР ДНК листерии (Listeria monocytogenes) (кровь)

ПЦР ДНК листерии (Listeria monocytogenes) (соскоб)

ПЦР Комплексное исследование Neisseria gonorrhoeae/Chlamydia trachomatis/Mycoplasma genitalium

ПЦР Комплексное исследованиеChlamydia trachomatis/ ureaplasma urealyticum+parvum/ Mycoplasma

ПЦР Определение РНК норовирусов 2 геногруппы (Norovirus GII)

ПЦР Прото-скрин (кал)

ПЦР РНК ротавирусов (Rotavirus) А (кал)

ПЦР Типирование вируса гепатита С (кровь)

ПЦР Типирование гриппа А (h2N1, h4N2)

ПЦР Фемофлор 16 (соскоб)

ПЦР Фемофлор 8 (соскоб)

ПЦР Флороценоз (Gardnerella vaginalis/Lactobacillus species количественное определение)

ПЦР Флороценоз (комплекс)

ПЦР Флороценоз/Аэробы(ДНК энтеробактерий (семейства Enterobacteriaceae)

ПЦР Флороценоз/Кандиды (ДНК С.albicans, C. glabrata, C.crusei,C.parapsilosis, C.tropicalis кол-но)

ПЦР Флороценоз/Микоплазмы (ДНК Ureaplasma urealyticum/Parvum/Mycoplasma hominis количественно)

ПЦР Цитомегаловирус (кровь)

ПЦР Цитомегаловирус (соскоб)

ПЦР Энтеровирусы, определение РНК в кале

ПЦР-скрининг Острые кишечные инфекции

РНК Вируса клещевого энцефалита (РНК TBEV) (кровь)

РНК Вируса клещевого энцефалита (РНК TBEV) (ликвор)

РНК Возбудителей моноцитарного эрлихиоза человека (E. chaffeensis и E. muris) (кровь)

РНК Возбудителей моноцитарного эрлихиоза человека (E.chaffeensis и E.muris) (ликвор)

РНК Возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов (B.burgdorferi sl) (кровь)

РНК Возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов (B.burgdorferi sl) (ликвор)

Тромбофилические мутации (минимальная панель: Фактор II (протромбин), Фактор V (лейденская мутация

Тромбофилические мутации (расширенная панель: FGB, ITGA2, ITGB3, Фактор II,V,VII,XIII)

Целиакия: Типирование HLA DQ2/DQ8

Чувствительность к варфарину

Анализ ПЦР — точная диагностика инфекций

Полимеразная цепная реакция (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) – искусственный процесс, в ходе которого многократно копируются определенные участки ДНК (РНК). Метод изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.

Области применения ПЦР чрезвычайно широки. Особое место ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.

Диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. «Иглой» является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).

Открытие этого метода – выдающееся событие в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике подняться на качественно новый уровень.

Основы ПЦР

Основа метода — многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуального обнаружения. При этом многократно копируется только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.

Кроме того, исследование позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификации личности и др.

ПЦР в диагностике инфекционных болезней

Сегодня ПЦР-диагностика инфекций — один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для анализа искомого возбудителя.

Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть, когда в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими). Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и одобрен клинически. Этот метод позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.

Анализ методом ПЦР особенно актуален при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами — возбудителями инфекций, передаваемых половым путём (Хламидия, качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК;  Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.

Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить факт наличия генетического материала возбудителя инфекции, но и определить его количество. Определение количества возбудителей важно для принятия решения о лечении, его способах и длительности, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК).

В лаборатории CMD разработан формат ПЦР исследования «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.

ПЦР-диагностика гепатитов

Известно как минимум 5 вирусов, которые способны вызывать поражение печени — возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса. Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться.

Быстро и точно определить возбудителя – первоочередная задача врача. Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно. Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции – важный шаг в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

ПЦР в диагностике ВИЧ-инфекции

Для выявления ВИЧ-инфекции в условиях лаборатории используется серологическая диагностика — обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Затем следует подтверждение положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность данного подхода достигает 99% и более.

Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:

1. Неэффективность в период «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
2. Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
3. Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
4. Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).

Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. В «Методических рекомендациях о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» сказано: «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серологического окна», используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.

В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.

Где сдать анализ методом ПЦР?

Вы можете сдать анализ методом ПЦР в офисе CMD, обратитесь к разделу сайта «Где сдать анализы».

ПЦР-диагностика

ПЦР ( Полимеразная цепная реакция )  Если попытаться описать ПЦР-диагностику в трёх словах, то это, совершенно определённо, будут слова ТОЧНО, НАДЁЖНО, БЫСТРО. На сегодняшний день, ПЦР-диагностика является самым точным и чувствительным методом выявления инфекционных  и генетических заболеваний. За 30 лет, с момента своего появления в 1983 году, этот уникальный метод уверенно завоевал весь мир, принеся своему изобретателю Кэрри Мюллису, Нобелевскую премию в области химии за 1993 год. Изящность, простота исполнения, непревзойденные показатели чувствительности и специфичности принесли новому методу небывалую, но абсолютно заслуженную популярность.

Диагностика инфекционных заболеваний, в том числе вызванных трудно культивируемыми микроорганизмами, их генотипирование, оценка вирулентности (степень болезнетворности), определение устойчивости микрофлоры к антибиотикам, пренатальная диагностика генетических заболеваний, биоконтроль препаратов крови — вот неполный перечень направлений, где с успехом применяется ПЦР.

Достоинства ПЦР-диагностики:

• Высочайшая специфичность – В процессе анализа в исследуемом материале выделяется фрагмент ДНК, специфичный (присущий) только конкретному возбудителю —  бактерии или вирусу. Этот участок ДНК уникален и не характерен ни для одной другой инфекции на Земле. Можно говорить, что специфичность метода достигает 100% или близка к этому. Это позволяет в одном и том же материале, проводить одновременный поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба качеству.
• Высочайшая чувствительность –  Метод ПЦР позволяет выявить одну-единственную болезнетворную бактерию среди миллиардов других, предоставив через несколько часов, 50 миллиардов ее копий! Он работает там, где другие методы: микроскопический, бактериологический, иммуноферментный, бессильны. Достоверный диагноз при помощи ПЦР можно ставить по 10 — 100 возбудителям в пробе, в то время как для других тестов эта цифра составляет 1000 — 1000 000.
• Оперативность —  Постановка реакции занимает всего несколько часов, т.к. не требуется искусственное выращивание возбудителя. Процесс максимально автоматизирован. Таким образом, вся диагностика, от момента сдачи материала на анализ до получения результата, отнимет один день.
• Прямое определение возбудителей инфекционных заболеваний – методом  ПЦР определяют возбудителя, а не реакцию на его внедрение со стороны организма. Таким образом, появилась возможность точно диагностировать заболевание еще в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических или лабораторных признаков болезни.
• Абсолютная универсальность — ПЦР позволяет обнаруживать любые ДНК и РНК, даже когда бессильны другие методы. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем. Для ПЦР-исследования может применяться практически любые материалы, в том числе недоступные для исследования другими методами: слизь, моча, кровь, сыворотка, мокрота, эякулят, соскоб эпителиальных клеток, почва и т.д.

Описание метода

Думается, пришло время, перейти от восторженных эпитетов и хвалебных речей к описанию, собственно ПЦР метода. И постараться сделать это так, чтобы даже максимально далёкий от молекулярной биологии читатель, смог оценить красоту и изящество метода, а заодно уяснить за что же, собственно, дают Нобелевскую премию…. 

Для начала, нужно понять сущность решаемой задачи и основную проблему, мешающую нам всё устроить легко и просто….

Уже задолго до начала 80-х годов учёным биологам было ясно, что анализ генетической информации содержащеёся в хромосомах любой живой (да и не вполне живой, тоже) клетки, позволяет однозначно определить хозяина этих клеток. Это относится, как к человеку и животным, так и к мельчайшим бактериям и вирусам – без исключений. Вся генетическая  информация записана внутри ДНК.   Так вот, решаемая в ту пору  задача формулировалась весьма просто — хорошо бы найти метод, который позволил бы извлекать из клетки  ДНК, и идентифицировать ее по принципу: «Это ДНК вируса гриппа, это — стафилококка, а это — хламидии». Тогда, взяв у человека каплю крови, мокроту, мочу и т.д., можно было бы легко установить, не содержатся ли в этих биологических пробах возбудители инфекций.  Но… Во-первых, выделить ДНК из клеток неповрежденной практически невозможно — она рвется в произвольных местах, и даже  выделяя её 100 раз из 100 одинаковых клеток, мы получим  тысячи кусков генов во фрагментах разной длины. Ясно, что ни сравнивать, ни анализировать тут будет нечего. Во-вторых, даже если каким-то чудом удастся выделить и безошибочно определять ДНК возбудителя инфекции, сложности остаются. Ведь ДНК, например, вируса, содержится в пробе, среди миллиардов других клеток,  в таких ничтожных количествах, что её запросто можно не заметить, и получить отрицательный результат вместо положительного. Можно, конечно, искусственно вырастить культуру для увеличения объема вирусной ДНК, но, во-первых, не все возбудители болезней хорошо культивируются в искусственных условиях, и, во-вторых, на это требуется значительное время…

Теперь нам пора разобраться с мироустройством, и начать называть вещи своими именами.  Итак, что же это такое ДНК и РНК,  как это всё устроено и из чего состоит ?

Каждая клетка любого живого существа (животного, растения, человека, бактерии, вируса) имеет хромосомы. Хромосомы – это хранители генетической информации, которые содержат всю последовательность генов каждого конкретного живого существа, его геном.  Каждая хромосома состоит из двух нитей ДНК, закрученных в спираль друг относительно друга. Это весьма напоминает винтовую лестницу, «перила» которой удерживаются вместе за счёт «ступенек». 

ДНК (ДезоксирибоНуклеиновая Кислота) имея чрезвычайно сложную структуру, тем не менее,  строится из достаточно простых структурных компонентов, тех самых «ступенек»  – нуклеотидов.

Нуклеотиды бывают 5-и видов :

• Тимин (Thymine)      ( T )
• Аденин (Adenine)    ( A )
• Гуанин (Guaninne)   ( G )
• Цитозин (Citosine)   ( C )
• Урацил (Uracil)         ( U )

Нуклеотиды располагаются друг за другом в строгой индивидуальной последовательности, образуя гены. Один ген может состоять из 20-200 таких нуклеотидов. Например, наш  ген, определяющий выработку инсулина, состоит из 60 пар нуклеотидов.

«Ступеньки» в нашей «лестнице», на самом деле не целые, а состоят из 2-х половинок – 2-х разных нуклеотидов.  Но всё дело в том, что половинки не могут соединяться, как попало, а только особыми «комплементарными» парами. Комплементарность – это точное взаимное соответствие и взаимное дополнение. Если хотите — единство противоположностей!  Нуклеотиды обладают свойством комплементарности,  т.е. сцепляться друг с другом могут только нуклеотиды, входящие в одну комплементарную пару. Никакие другие связи в природе не возможны. Это весьма напоминает поведение магнитов, когда южный полюс легко сцепляется с северным, а попытки соединить юг с югом и север с севером обречены на провал… Здесь тоже самое, только полюсов не два, а четыре (попробуйте это себе представить). Свойство комплементарности — ключевое в методе ПЦР.

Комплементарными являются пары Тимин — Аденин  и Гуанин – Цитозин.

Практически это означает, что напротив аденина (A) в одной цепочке ДНК, в другой цепочке обязательно стоит тимин (T), а напротив гуанина (G) – цитозин (C). Схематически  всё это выглядит следующим образом:

Кроме ДНК, точно такую же структуру имеет РНК ( рибонуклеиновая кислота ), отличающаяся от ДНК тем, что вместо тимина в ней используется урацил и комплементарная пара имеет вид A — U.

РНК – является хранителем генетической информации у некоторых вирусов, которые называются ретровирусами. Наиболее известный и активно изучаемый представитель этого поганого семейства  —  ВИЧ.

Чтобы представить сложность структуры ДНК и РНК, вдумайтесь в следующий факт: если развернуть спираль ДНК, её длина окажется около ста восьмидесяти сантиметров. Не смотря на то, что размеры клетки исчисляются микронами, из-за очень специфической плотной упаковки спирали, ядро клетки свободно вмещает десятки хромосом.

Итак, пора переходить к решению задачи. 

Рассматривая поставленную выше задачу, мы уже увидели две основных проблемы на пути к её решению. Понятно, что с одной стороны, выискивать клетку возбудителя инфекции среди миллионов клеток крови – занятие достаточно бесперспективное, если не сказать бестолковое, а с другой стороны,  выделять ДНК из клеток » в рукопашную» – тоже не вариант, из-за опасности  порвать на кусочки, всё что мы с таким трудом отыскали… Поэтому, нам очень помог бы какой-нибудь метод, позволяющий активно размножать ДНК, но делающий это только с определёнными, «избранными» экземплярами. Это позволит увеличивать концентрацию интересующей культуры до уровней, безошибочно определяемых и не требующих длительного поиска. 

Вот этим чудо-методом и стал метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).  В основе метода ПЦР лежит природный процесс — комплементарное достраивание ДНК матрицы, осуществляемое с помощью фермента ДНК-полимеразы. Эта реакция носит название репликации ДНК.  Так это звучит сухим академическим языком. Но мы задались целью, объяснить Вам всё, буквально, «на пальцах», а потому продолжим свой рассказ о том, как всё происходит.

На первом этапе реакции надо разъединить двойную нить ДНК. Этот процесс называется денатурацией и проходит при температуре 93 — 95 градусов Цельсия. Уже через 30 — 40 секунд связи нуклеотидов разрываются и вместо двойной цепи получаются две одиночные.

Надо заметить, что если после этого, снова, просто понизить температуру, то разделившиеся половинки достаточно быстро находят друг друга и всё возвращается, практически, к исходному состоянию. Следовательно, нам надо не дать соединиться половинкам интересующей нас ДНК. Как этому помешать? – приставить на её место (хотя бы временно) что-то, что точно соответствует небольшому фрагменту ДНК и в точности повторяет комплементарную последовательность небольшой цепочки нуклеотидов. Тогда, место на половинке-основании окажется занято, при попытке присоединения, свойство комплементарности окажется нарушено, и вторая половинка не сможет прицепиться на своё «законное» место. Это «что-то» названное праймером,  синтезируется в научной или промышленной лаборатории и представляет собой цепочку синтетических нуклеотидов (олигонуклеотидов), расположенных в таком же порядке, как и у того вируса (бактерии и так далее), на который делается анализ. Например, если делают анализ на хламидии, то праймер соответствует специфическому участку гена, кодирующего главный белок наружной мембраны (МОМР) Chlamydia trachomatis.

Итак, вторая стадия — присоединение праймеров к ДНК (также называется отжигом)  длится от 20 до 60 секунд. Температура отжига равна 50 — 65 градусам (для каждого вида возбудителей, т.е. для каждого праймера, она своя).

На этом этапе мы уже разделили ДНК на две половинки и не даём им соединиться. Теперь самое время достроить каждую половинку до полноценной ДНК. Но температура, при которой это должно произойти, очень высока, по меркам молекулярной биологии  – более 70 градусов (выше температуры отжига). Проблема была решена благодаря открытию уникального фермента taq-ДНК-полимеразы, содержащегося у бактерий, обитающих в гейзерах. Особенность этого фермента заключается в его исключительной термостойкости (период полужизни при 95 градусах составляет 40 минут) и высокой рабочей температуре — оптимум работы 72градуса. В клетках, фермент ДНК-полимеразы отвечает за копирование и «ремонт» ДНК и способен удлинять короткие нуклеотидные цепочки праймеров, последовательно присоединяя к одному из концов праймера дополнительные нуклеотиды, таким образом, достраивая цепь до конца. Так ДНК копирует саму себя.

Третий этап — достраивание цепей ДНК. Комплементарное достраивание цепей ДНК происходит от конца к концу цепи в противоположных направлениях, начиная с участков присоединения праймеров. Материалом для синтеза новых цепей ДНК служат добавляемые в раствор «кирпичики» — все те же производные аденина, гуанина, цитозина и тимина. Процесс синтеза катализируется ферментом термостабильной ДНК-полимеразой (Taq-полимеразой) и проходит при температуре 70 — 72 градуса. Время протекания синтеза зависит от длины достраиваемого фрагмента и обычно принимается равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований.

Теперь мы имеем две двойные цепочки ДНК вместо одной, исходной.

Ну а дальше процесс повторяется. Опять температура повышается до 93 — 95 градусов, цепочки разъединяются… и так далее. Обычно за 1 — 2 часа при наличии вирусной ДНК ее становится столько, что не заметить ее, даже при стандартном методе обнаружения становится просто нереально.

Схематично, это выглядит так:

Подведём итог: каждый цикл ПЦР состоит из трех стадий. В первую стадию (денатурация) происходит так называемое раскручивание ДНК – то есть разделение связанных между собой двух цепей ДНК. Во вторую (отжиг) — происходит присоединение праймера к участку нити ДНК. И, наконец, в заключительной третьей стадии, «фермент-строитель»  достраивает нити, восстанавливая ДНК.   В настоящее время весь этот сложный процесс протекает в одной пробирке и состоит из повторяющихся циклов размножения (амплификаций) определяемой ДНК с целью получения большого количества копий, которые могут быть, затем выявлены обычными методами. То есть из одной нити ДНК мы получаем сотни тысяч или миллионы копий.

Детекция и Real-Time PCR

Полимеразная цепная реакция требует быстрой смены температур, ведь идет она в три этапа. Поначалу для каждой стадии использовали отдельную водяную баню, что сильно увеличивало время получения результата. Поставить «на поток» метод помогли специальные автоматические термостаты — амплификаторы, в которых изменение температуры происходит по заданной программе. Современный амплификатор – сложный электронный прибор, не только управляющий циклами амплификации и поддерживающий необходимые температуры, но и делающий количественные замеры после каждого цикла.

Эта технология называется «Real-Time PCR», или ПЦР в реальном времени. В её основе лежит принцип флуоресцентной детекции продуктов ПЦР непосредственно в ходе амплификации. Детекция продуктов амплификации проводится прямо в реакционной среде через стенки или крышку закрытой пробирки.

Для этого в состав реакционной смеси, наряду с праймерами  и другими компонентами реакции, добавлены специальные флуоресцентные метки (зонды). Флуоресцентный зонд выполнен по той же технологии, что и праймер и отличается он него тем, что на одном его конце прикреплена флуоресцентная молекула (флуорофор), а на другом конце расположена специальная молекула-гаситель флуоресценции. За счёт близости гасителя, энергия поглощаемая флуорофором не вызывает флуоресцентного свечения, а целиком передаётся гасителю. При этом, при облучении смеси ультрафиолетом, флуоресцентный отклик полностью отсутствует.

Дальше всё происходит, так же, как было описано выше:

• В ходе ПЦР при повышении температуры происходит денатурация ДНК с распадом на две половинки.
• Зонд вместе с праймерами присоединяется к комплементарному участку ДНК.
• В процессе восстановления и синтеза новой цепи ДНК, фермент ДНК-полимеразы расщепляет этот зонд и разрушает его. При этом флуорофор и гаситель освобождаются, расстояние между ними увеличивается и эффект гашения перестаёт работать. Теперь при облучении смеси ультрафиолетом, мы получим устойчивый флуоресцентный сигнал-отклик от флуорофора.

Изготавливая молекулы флуорофора с разным цветом свечения можно проводить  одновременный поиск разных возбудителей в одной пробирке.

Большинство используемых сегодня, для ПЦР диагностики, амплификаторов , относится к классу автоматических, высокоскоростных многофункциональных Real Time аппаратов. Они позволяют проводить множественный ПЦР анализ  до 5 мишеней (цветных флуоресцентных красителей) в 96 пробирках одновременно. Это полностью автоматические термоциклеры со встроенным оптическим блоком и возможностью детекции накопления продуктов амплификации непосредственно в пробирке во время протекания реакции. Весь процесс амплификации протекает в закрытых одноразовых пробирках, считывание происходит через прозрачные стенки пробирок, без их открытия. Например, на фото CFX96 Touch, производства американской компании  Bio-Rad

Особенности и недостатки метода

Безусловно, ПЦР не идеальный метод, и у него имеются свои недостатки. Но они напрямую связаны с его достоинствами и с тем, что называется «человеческим фактором».

• ПЦР – высокотехнологичный метод, требующий соблюдения строжайших правил устройства и оснащения  лаборатории. Достаточно сказать, что на рабочем месте, где происходит приготовление и раскапывание смесей по пробиркам, должен быть установлен фильтр биологической очистки со степенью более 99%.  Это связано с тем, что в воздухе постоянно присутствует невероятный коктейль из фрагментов ДНК всевозможных живых организмов. И если в процессе подготовки к проведению реакции, образец будет загрязнен — возможно «ложное срабатывание».
• С другой стороны, далеко не всегда положительный результат ПЦР означает наличие заболевания. Например, человек пролечился от какого-либо заболевания, но погибший и уже не опасный возбудитель (фактически его останки) будет еще некоторое время находиться среди клеток крови и «разбираться на запчасти» защитной системой организма. Если в этот момент сделать ПЦР – результат окажется положительным.
• Другой вариант – это отрицательный результат ПЦР при наличии даже явной клинической картины. Одна из наиболее возможных причин – материал для исследования был взят «не оттуда». Образец должен брать квалифицированный врач, строго следуя инструкции, которую ему дает лаборатория.
• При создании праймеров используют специфичный для данного микроорганизма фрагмент ДНК, наименее подверженный изменениям. Он выбирается из так называемой высоко консервативной области ДНК. Но изменчивость микроорганизмов может приводить к тому, что некоторые генотипы или штаммы исследуемого возбудителя могут приобретать и накапливать мутации в амплифицируемом (клонируемом) участке генома, и становиться неуловимыми для данного праймера, и тест-системы, в целом. Таким образом, различные тест-системы — одна из причин, почему анализы, сделанные в разных лабораториях и в разных клиниках «одним и тем же» методом ПЦР могут показывать разные результаты. Чтобы максимально избежать ошибок по вине мутаций, современные стандарты качества, регламентируют объем испытаний тест-системы, прежде чем она попадет на рынок и будет использована для диагностики. Эти испытания включают проверку на перекрестные реакции, а также тестирование всех известных штаммов определяемого возбудителя.

Полный список исследований методом ПЦР и цену на них  можно посмотреть в разделе «Прейскурант»
 

ПЦР-диагностика (мазок, соскоб из урогенитального тракта) — сдать анализы в Москве. Научный центр «ЭФиС»

Диагностика методом ПЦР — Комплексы медицинских анализов и их цен в KDL

Алергология. ImmunoCAP. Индивидуальные аллергены, IgE

Аллергокомпоненты ImmunoCAP

Аллергокомпоненты деревьев

Аллергокомпоненты животных и птиц

Аллергокомпоненты плесени

Аллергокомпоненты трав

Пищевые аллергокомпоненты

Аллергология. ImmunoCAP. Комплексные исследования IgE (результат по каждому аллергену)

Аллергология. ImmunoCAP. Панели аллергенов IgE, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. ImmunoCAP. Фадиатоп

Аллергология. Immulite. Индивидуальные аллергены

Аллергены гельминтов, IgE

Аллергены грибов (кандида и плесневых), IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены клещей домашней пыли, IgE

Аллергены лекарств и химических веществ, IgE

Аллергены насекомых, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены ткани, IgE

Аллергены трав, IgE

Бактериальные аллегены (стафилококк), IgE

Пищевые аллергены, IgE

Пищевые аллергены, IgG

Аллергология. Immulite. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Immulite. Панели аллергенов, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергены деревьев, IgE (панель)

Аллергены животных и птиц, IgE (панель)

Аллергены трав, IgE (панель)

Ингаляционные аллергены, IgE (панель)

Пищевые аллергены, IgE (панель)

Аллергология. Immulite. Панели пищевых аллергенов IgG (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. ImmunoCAP. Индивидуальные аллергены, IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены трав, IgE

Пищевые аллергены, IgE

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Местные анестетики, IgE

Биохимические исследования крови

Диагностика анемий

Липидный обмен

Обмен белков

Обмен пигментов

Обмен углеводов

Специфические белки

Ферменты

Электролиты и микроэлементы

Биохимические исследования мочи

Разовая порция мочи

Суточная порция мочи

Витамины, аминокислоты, жирные кислоты

Гематология

Гемостаз (коагулограмма)

Генетические исследования

HLA-типирование

Исследование генетических полиморфизмов методом пиросеквенирования

Исследование генетических полиморфизмов методом ПЦР

Молекулярно-генетический анализ мужского бесплодия

Гистологические исследования

Гистологические исследования лаборатории UNIM

Гормоны биологических жидкостей

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Гормоны крови

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Маркеры остеопороза

Пренатальная диагностика

Ренин-альдостероновая система

Тесты репродукции

Функция органов пищеварения

Функция щитовидной железы

Гормоны мочи

Диагностика методом ПЦР

COVID-19

Андрофлор, иследование биоценоза (муж)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы группы герпеса

Возбудитель туберкулеза

ВПЧ (вирус папилломы человека)

Грибы рода кандида

Листерии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Стрептококки (вкл. S.agalactie)

Токсоплазма

Урогенитальные инфекции, ИППП

Урогенитальные инфекции, комплексные исследования

Урогенитальные инфекции, условные патогены

Фемофлор, исследование биоценоза (жен)

Флороценоз, иследование биоценоза (жен)

Цитомегаловирус

Диагностика методом ПЦР, кал

Кишечные инфекции

Диагностика методом ПЦР, клещ

Клещевые инфекции

Диагностика методом ПЦР, кровь.

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус краснухи

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

ВИЧ

Возбудитель туберкулеза

Гепатит D

Гепатит G

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит С

Листерии

Парвовирус

Токсоплазма

Цитомегаловирус

Жидкостная цитология

Изосерология

Иммуногистохимические исследования

Иммунологические исследования

Иммунограмма (клеточный иммунитет)

Интерфероновый статус, базовое исследование

Интерфероновый статус, чувствительность к препаратам

Оценка гуморального иммунитета

Специальные иммунологические исследования

Исследование абортуса

Исследование мочевого камня

Исследование парапротеинов. Скрининг и иммунофиксация

Исследования слюны

Исследования слюны

Комплексные исследования

Лекарственный мониторинг

Маркеры аутоиммунных заболеваний

Антифосфолипидный синдром (АФС)

Аутоиммунные заболевания легких и сердца

Аутоиммунные неврологические заболевания

Аутоиммунные поражения ЖКТ и целиакия

Аутоиммунные поражения печени

Аутоиммунные поражения почек и васкулиты

Аутоиммунные эндокринопатии и бесплодие

Диагностика артритов

Пузырные дерматозы

Системные ревматические заболевания

Эли-тесты

Микробиологические исследования (посевы)

Посев крови на стерильность

Посев на гемофильную палочку

Посев на грибы (Candida)

Посев на грибы (возбудители микозов кожи и ногтей)

Посев на дифтерию

Посев на микоплазмы и уреаплазмы

Посев на пиогенный стрептококк

Посев на стафилококк

Посевы кала

Посевы мочи

Посевы на микрофлору (конъюнктива)

Посевы на микрофлору (отделяемое)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт женщины)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт мужчины)

Посевы на микрофлору ЛОР-органы)

Ускоренные посевы с расширенной антибиотикограммой

Неинвазивная диагностика болезней печени

Программы неинвазивной диагностики болезней печени

Неинвазивный пренатальный ДНК-тест (НИПТ)

Неинвазивный пренатальный тест (пол/резус плода)

Общеклинические исследования

Исследование назального секрета

Исследование секрета простаты

Исследования кала

Исследования мочи

Исследования эякулята

Микроскопическое исследование биологических жидкостей

Микроскопия на наличие патогенных грибов и паразитов

Микроскопия отделяемого урогенитального тракта

Онкогематология

Иммунофенотипирование при лимфопролиферативных заболеваниях

Миелограмма

Молекулярная диагностика миелопролиферативных заболеваний

Цитохимические исследования клеток крови и костного мозга

Онкогенетика

Онкомаркеры

Пищевая непереносимость, IgG4

Полногеномные исследования и панели наследственных заболеваний

Пренатальный скрининг

Серологические маркеры инфекций

Аденовирус

Бруцеллез

Вирус HTLV

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Коксаки

Вирус кори

Вирус краснухи

Вирус эпидемического паротита

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы простого герпеса I и II типа

ВИЧ

Гепатит D

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит Е

Гепатит С

Грибковые инфекции

Дифтерия

Кишечные инфекции

Клещевые инфекции

Коклюш и паракоклюш

Коронавирус

Менингококк

Паразитарные инвазии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Сифилис

Столбняк

Токсоплазма

Туберкулез

Урогенитальные инфекции

Хеликобактер

Цитомегаловирус

Специализированные лабораторные исследования.

Дыхательный тест

Микробиоценоз по Осипову

Тяжелые металлы и микроэлементы

Тяжелые металлы и микроэлементы в волосах

Тяжелые металлы и микроэлементы в крови

Тяжелые металлы и микроэлементы в моче

Услуги

Выезд на дом

ЭКГ

Установление родства

Химико-токсикологические исследования

Хромосомный микроматричный анализ

Цитогенетические исследования

Цитологические исследования

Чекап

ПЦР исследования — Медицинский центр «КОНСУЛЬТАНТ»

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.
Это самый современный метод молекулярной биологии.
В настоящее время метод амплификации нуклеиновых кислот (НК) полимеразной цепной реакцией (ПЦР) уже достаточно широко используется в нашем центре как эффективный инструмент лабораторной диагностики.

Лаборатория оснащена необходимым современным оборудованием для ПЦР. В наличии имеется Амплификатор с детекцией в режиме реального времени CFX 96 Touch. Данный прибор относится к новейшей линейке приборов компании BIO-RAD (США) — амплификаторам серии 1000. Он занимает одно из лидирующих мест на рынке ПЦР-диагностики. Позволяет проводить мультиплексный анализ до 5 мишеней (5 инфекций в одной пробирке) в 96 пробах одновременно. Также имеется амплификатор АЛА ¼ производства Латвии. При помощи данного прибора проводится исследование по «конечной точке», т.е. на наличие ДНК/РНК возбудителя (без определения количества). Диагностические наборы реагентов для выявления и количественного определения ДНК/РНК возбудителей урогенитальных инфекций, гепатитов и пневмоний приобретаются в ООО «ИнтерЛабСервис» г. Москва.

Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК или РНК бактерии или вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека: моча, плазма крови, мокрота, соскоб эпителиальных клеток, сок простаты, околоплодные воды, плевральная жидкость.

При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), у мужчин и женщин с помощью стерильного зонда из половых органов делается соскоб из шейки матки, влагалища или соскоб из уретры (мочеиспускательного канала), моча.

При обследовании на инфекции (герпетические инфекции, ЦМВИ, гепатиты В, С, Д) на ПЦР забирают кровь.

При обследовании на вирусы Эпштейн-Барра, Цитомегаловирус и Герпес 6-го типа в качестве материала забираются кровь из вены, слюна или соскоб из ротовой полости.

Перечень исследований:

1.Определение ДНК вируса гепатита В (HBV) в плазме крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Аналитические показатели

Определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК вируса гепатита В. Специфичность определения — 100%. Чувствительность определения — 50 МЕ/мл.

2. Количественное определение ДНК вируса гепатита В (HBV) (оценка вирусной нагрузки) в плазме крови методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Аналитические показатели

Определяемый фрагмент – специфический участок ДНК вируса гепатита В. Клиническая специфичность теста: 100%. Чувствительность теста составляет 75 МЕ/мл.

Количественная характеристика содержания ДНК гепатита В в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии.

3. Определение РНК вируса гепатита С (HСV) в плазме крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Аналитические показатели

Определяемый фрагмент — специфичный участок РНК вируса гепатита С. Специфичность определения — 100%. Чувствительность определения – 50 МЕ/мл.

В острую фазу гепатита С РНК вируса выявляют в крови уже через 1-2 недели после инфицирования, т.5 МЕ/мл наряду с определением генотипа вируса является независимым и наиболее информативным параметром прогнозирования эффективности лечения. Снижение концентрации РНК гепатита С к третьему дню от начала терапии на 85% является быстрым и точным параметром для предсказания эффективности терапии, приводящей к раннему вирусологическому ответу.

5. Определение РНК вируса гепатита D (НDV) в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Вирус гепатита D передаётся парентеральным путём и обнаруживается только у лиц, инфицированных вирусом гепатита В. Развивающийся в этом случае хронический гепатит, протекает очень тяжело, c массивным поражением печени, часто сопровождается отёками и асцитом.

Аналитические показатели

Определяемый фрагмент — специфичный участок РНК вируса гепатита D. Специфичность определения — 100%. Чувствительность определения — 50 МЕ/мл.

6. Определение ДНК вируса простого герпеса (HSV) I типа (губного или лабиального) и II типа (генитального) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Вирусы простого герпеса 1-го (ВПГ-1) типа и 2-го (ВПГ-2) типа относят к семейству герпесвирусов (Herpesviridae), общим свойством которых является постоянное персистирование в организме после инфицирования. Попадают в организм через слизистые (обычно «входные ворота» для ВПГ-1 – слизистые ротовой полости и носоглотки, для ВПГ-2 – слизистые половых органов). Клинические проявления герпетической инфекции в любой форме (высыпания на коже и слизистых оболочках, симптомы поражения нервных клеток и др.), как правило, свидетельствуют о снижении иммунитета. Первичная герпетическая инфекция и реактивация инфекции (в гораздо меньшей степени) в период беременности могут вызывать патологию беременности, внутриутробное инфицирование плода или инфицирование ребенка во время родов.

7. Определение ДНК Цитомегаловируса (CMV) в крови и соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Цитомегаловирус – широко распространённый вирус семейства герпесвирусов. После окончания острого периода инфекция цитомегаловирусом обычно переходит в латентную форму, из которой может реактивироваться. Цитомегаловирус относят к так называемым оппортунистическим инфекциям: выраженные клинические проявления CMV-инфекции отмечаются чаще всего у пациентов с врождёнными или приобретенными иммунодефицитами (в том числе вследствие ВИЧ-инфекции, применения иммунодепрессантов при трансплантации органов и др.), а также на фоне физиологических иммунодефицитных состояний (дети первых 3 — 5 лет жизни, беременные).

Первичная инфекция или (в меньшей степени) реактивации инфекции в период беременности связаны с риском внутриутробной инфекции, опасной для развития плода. Проявления инфекции зависят от особенностей иммунитета матери, вирулентности и локализации вируса. В целях выявления возможной инфицированности организма цитомегаловирусом, оценки риска возникновения острой инфекции, распознавания первичной инфекции целесообразно выявление вирусной ДНК методом ПЦР.

Важно! CMV-инфекция входит в группу TORCH-инфекций (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях — Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes), считающихся потенциально опасными для развития ребёнка. Лабораторное обследование на TORCH-инфекции наиболее целесообразно проводить за 2 — 3 месяца до планируемой беременности. Это даёт возможность предпринять необходимые лечебные или профилактические меры, и служит точкой сравнения с результатами обследований во время беременности.

8. Качественное обнаружение ДНК вируса папилломы человека (HPV) 14 типов высокого онкогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 52, 58, 59, 67 в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта.

Вирус папилломы человека (ВПЧ) может быть причиной возникновения рака гениталий у женщин и плоскоклеточного рака у мужчин и женщин. Доказано, что этот вирус является причиной возникновения остроконечных кондилом, кондилом и новообразований шейки матки. Различные виды ВПЧ являются причиной различных поражений. Некоторые из них являются факторами высокого онкогенного риска.

Формат выдачи результата включает суммарный ответ по всем указанным типам ВПЧ-обнаружено/не обнаружено. Результат ОБНАРУЖЕНО следует интерпретировать как наличие в образце специфических участков ДНК одного или нескольких типов ВПЧ без указания конкретного типа (16 тип идентифицируется). Результат НЕ ОБНАРУЖЕНО следует интерпретировать как отсутствие в образце специфических участков ДНК ВПЧ всех указанных типов.

9. Определение ДНК возбудителя гонореи (Neisseria gonorrhoeae) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Гонорея — венерическое заболевание вызывается грамотрицательным диплококком — Neisseria gonorrhoeae. Передаётся половым путем, поражая преимущественно слизистые оболочки мочеполовой системы.

У мужчин возбудитель гонореи является причиной уретритов, стриктуры уретры, эпидидимита, простатита, орхита и других заболеваний яичек и его придатков.

У женщин проявляется как уретрит, бартолинит, эндоцервицит, эндометрит, сальпингит и пельвиоперитонит. Симптомы хронической гонореи у женщин могут быть минимальными, заболевание трудно диагностируется.

Новорожденные могут заразиться гонореей при прохождении ребёнка через родовые пути матери (бленнорея новорожденных).

10. Определение ДНК гарднереллы (Gardnerella vaginalis) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Гарднереллёз (бактериальный вагиноз) чаще выявляется у женщин детородного возраста. Заболевание возникает как следствие резкого нарушения баланса микрофлоры влагалища: преобладающие в норме лактобактерии замещаются анаэробными микроорганизмами. Гарднереллёз может являться причиной осложнений беременности: воспалительных заболеваний, маточных кровотечений, послеродового эндометрита, пневмонии у новорождённых.

11. Качественное определение ДНК микоплазмы (Mycoplasma genitalium) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Mycoplasma genitalium – микроорганизм, обладающий высокой патогенностью по отношению к клеткам эпителия мочеполовых органов человека, обладает высокой контагиозностью, то есть почти всегда передается половому партнеру. Часто являться причиной негонококкового уретрита и простатита, патологии беременности и плода, бесплодия у женщин и мужчин. Микоплазма гениталиум способна прикрепляться к сперматозоидам и снижать их функциональность (в том числе подвижность), а это может приводить к развитию мужского бесплодия. У женщин этот возбудитель все чаще выявляется при острых эндометритах и аднекситах – воспалениях матки с придатками. Установлено, что Mycoplasma genitalium может вызывать трубное бесплодие у женщин.

12. Определение ДНК Mycoplasma pneumoniae в соскобе эпителиальных клеток из ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

13. Определение ДНК Chlamydia pneumoniae в соскобе эпителиальных клеток из ротоглотки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Микоплазменная и/или хламидийная пневмония. Атипичные микроорганизмы, вызывающие пневмонию, составляют от 8 до 25% случаев заболевания. В половине случаев ошибочно диагностируются бронхит, трахеит или ОРЗ. Поэтому диагностика микроплазменной и хламидийной пневмоний основывается в первую очередь на выявлении с помощью полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

14. Определение ДНК микоплазмы (Mycoplasma hominis) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

В настоящее время микоплазмы принято считать условно-патогенными микробами.

Микоплазмы передаются половым путём, могут являться причиной негонококкового уретрита и простатита, воспалительных заболеваний, патологии беременности и плода, бесплодия у женщин и мужчин. Эти микроорганизмы можно обнаружить, по разным данным, у 15-50% здоровых женщин.

15. Определение ДНК yреаплазмы (Ureaplasma urealyticum/parvum) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Уреаплазмы в настоящее время принято считать условно-патогенными микробами. Уреаплазмы передаются при половых контактах, могут являться причиной негонококкового уретрита и простатита, воспалительных заболеваний, патологии беременности и плода, бесплодия у женщин и мужчин.

16. Определение ДНК хламидии (Chlamydia trachomatis) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Хламидии — облигатные внутриклеточные паразиты, передающиеся преимущественно половым путём, и вызывающие хламидиоз (в первую очередь, поражения слизистых оболочек половых путей, конъюнктивиты). Достаточно широко распространённая инфекция, может протекать бессимптомно, часто переходит в хроническую форму, сопровождается различными осложнениями, которые иногда у женщин являются причиной бесплодия и невынашивания беременности.

Особенности жизненного цикла Chlamydia trachomatis приводят к частому возникновению персистирующей формы инфекции, малочувствительной к терапии. Реактивация инфекции может произойти под действием изменения иммунного или гормонального статуса, травмы, операции, стресса. У Chlamydia trachomatis низкая иммуногенность, вследствие чего у 50% инфицированных людей антитела не обнаруживаются. Поэтому (особенно в сомнительных случаях, при отсутствии антител к хламидии) микроорганизм выявляют только высокочувствительным и специфичным прямым методом – ПЦР.

17. Определение ДНК Кандиды (Candida albicans) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального кожи методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Кандиды выявляются на слизистых оболочках полости рта и желудочно-кишечного тракта у 30-50% здоровых людей и на слизистых оболочках гениталий у 20-30% здоровых женщин. При этом важно различать кандидоз и колонизацию слизистых оболочек и кожи. Микозы обычно развиваются у пациентов с различными нарушениями в системе противоинфекционной защиты (факторами риска).

18. Определение ДНК трихомонады (Trichomonas vaginalis) в соскобах эпителиальных клеток урогенитального тракта, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Трихомониаз — заболевание мочеполового тракта. Trichomonas vaginalis относится к роду простейших жгутиковых, является строгим облигатным паразитом человека. Это одно из самых частых заболеваний, передающихся половым путем. У мужчин поражается уретра, предстательная железа и семенные пузырьки, у женщин – влагалище, шейка матки и уретра.

19. Определение ДНК вируса Эпштейн-Барра (Epstein-Barr virus) в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Вирус Эпштейн-Барр — является наиболее частой причиной инфекционного мононуклеоза у молодых людей. Характеризуется лихорадкой, недомоганием, фарингитом, лимфоаденопатией и лимфоцитозом. Вирус передается оральным (через слюну) и половым путем.

20. Определение ДНК вируса герпеса 6 типа в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Вирус герпеса 6 типа вызывает у детей (в возрасте младше 2,5 лет) внезапную экзантему. В начале высыпания появляются на спине и шее, затем на руках и ногах, на лице сыпь отсутствует. У некоторых заболевших детей лихорадка может приводить к эпилептическим припадкам. Вирус передается оральным и аэрозольным путем. Аналитическая чувствительность тестов для урогенитальных инфекций составляет 1х103 ГЭ/мл.

21. Тест «ФЛОРОЦЕНОЗ».Комплексная оценка условно-патогенной
и патогенной (NCMT) микрофлоры

Тест ФЛОРОЦЕНОЗ позволяет комплексно оценить состав биотопа влагалища у женщины репродуктивного возраста и с учетом остроты и риска возникновения осложнений в кратчайшие сроки поможет поставить этиологический диагноз, который позволит назначить эффективную терапию.

В тесте проводится дифференциальная диагностика следующих заболеваний:

• Бактериальный вагиноз
  (выявление ДНК и определение соотношения Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae, Lactobacillus spp. и Bacteria spp. в количественном формате)
• Аэробный вагинит
  (выявление ДНК и определение соотношения Enterobacteriaceae, Staphylococcus spp., Streptococcus spp. с Lactobacillus spp. и Bacteria spp. в количественном формате)
• Кандидозный вульвовагинит
  (выявление ДНК Candida albicans, Candida glabrata, Candida krusei, Candida parapsilosis/ tropicalis в количественном формате)
• Условно – патогенные микоплазмы
  (выявление ДНК Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum в количественном формате)
• Патогены
  (выявление ДНК Neisseria gonorrhoeae, ДНК Chlamydia trachomatis, ДНК Mycoplasma genitalium и ДНК Trichomonas vaginalis в количественном формате)

Материал для исследования – мазок из влагалища.

Срок исполнения 4 дня.

Исследование проводиться:

• Только женщинам репродуктивного возраста.
• через 3-4 недели после последнего применения антибактериальных/антисептических препаратов.
• За 24 часа до взятия биоматериала не рекомендуется совершать половой акт, спринцевание влагалища и другие инвазивные манипуляции.

Нарушения микрофлоры влагалища широко распространены. К примеру, БВ встречается у 30-40% женщин, ВВК – у 20-45% женщин репродуктивного возраста.

Тест Флороценоз рекомендован при:

Задать вопрос специалисту Вы можете по следующим электронным адресам: [email protected], [email protected].

Первичная цилиарная дискинезия — NORD (Национальная организация редких заболеваний)

УЧЕБНИКИ
Бартолони Л. Первичная цилиарная дискинезия. В: Руководство NORD по редким заболеваниям, Филадельфия, Пенсильвания: Липпинкотт, Уильямс и Уилкинс; 2003: 675.

СТАТЬИ В ЖУРНАЛЕ
Boon M, Vermeulen FL, Gysemans W, et al. Корреляция структуры и функции легких у пациентов с первичной цилиарной дискинезией, Торакс, 2015; 70: 339-45.

Lobo J, Zariwala MA, Noone PG Первичная цилиарная дискинезия.Semin Respir Crit Care Med. 2015; 36: 169-79.

Вернер C, Оннебринк JG, Омран H Диагностика и лечение первичной цилиарной дискинезии. Реснички 2015; 4: 2

Lucas JS, Burgess A, Mitchison HM, et al. Диагностика и лечение первичной цилиарной дискинезии. Arch Dis Child. 2014; 99: 850-6.

Лукас Дж. Л., Ли М. В. Диагностика первичной цилиарной дискинезии: в поисках золотого стандарта. Eur Respir. 2014; Дж. 44: 1418-22.

Шапиро А.Дж., Дэвис С.Д., Ферколь Т.Ф. и др. Латеральные дефекты, отличные от situs inversus totalis, при первичной цилиарной дискинезии: понимание situs ambiguus и гетеротаксии.Сундук 2014; 146: 1176-86.

Ноулз М.Р., Дэниэлс Л.А., Дэвис С.Д. и др. Первичная цилиарная дискинезия: последние достижения в диагностике, генетике и характеристике клинических заболеваний. Am J Respir Crit Care Med. 2013; 188: 913-22.

Ли М.В., Хазуча М.Дж., Чавла К.К. и др. Стандартизация назального измерения оксида азота как теста на первичную цилиарную дискинезию. Энн Ам Торак Соц 2013; 10: 574-81.

Ли М.В., Питтман Дж. Э., Карсон Дж. Л. и др. Клинико-генетические аспекты первичной цилиарной дискинезии / синдрома Картагенера.Genet Med. 2009; 11 (7): 473-87.

Кеннеди М.П., ​​Омран Х., Ли М.В. и др. Врожденный порок сердца и другие гетеротаксические дефекты в большой группе пациентов с первичной цилиарной дискинезией. Тираж. 2007; 115 (22): 2814-21.

Заривала М.А., Ноулз М.Р., Омран Х. Генетические дефекты в структуре и функции ресничек. Энн Рев Физиол. 2007; 69: 423-450.

Брюкнер М. Гетеротаксия, врожденный порок сердца и первичная цилиарная дискинезия. Тираж. 2007; 115 (22): 2793-5.

Badano JL, Mitsuma N, Beales PL и др.Цилиопатии: новый класс генетических заболеваний человека. Анну Рев Геномис Хум Генет. 2006; 7: 125-148.

Van’s Gravesande KS, Omran H. Первичная цилиарная дискинезия: клинические проявления, диагностика и генетика. Ann Med. 2005; 37: 439-49.

Карлен Б., Стенрам У. Первичная цилиарная дискинезия: обзор. Ultrastruct Pathol. 2005; 29: 217-20.

Noone PG Leigh MW Sannuti A, et al. Первичная цилиарная дискинезия: диагностические и фенотипические особенности. Am J Respir Crit Care Med. 2004; 169: 459-67.

Афзелиус Б.А. Заболевания, связанные с ресничками. J Pathol. 2004; 204: 470-7.

ИНТЕРНЕТ
Заривала М.А., Ноулз М.Р., Ли М.В. Первичная цилиарная дискинезия. 24 января 2007 г. [Обновлено 28 февраля 2013 г.]. В: Pagon RA, Adam MP, Ardinger HH, et al., Редакторы. GeneReviews [Интернет]. Сиэтл (Вашингтон): Вашингтонский университет, Сиэтл; 1993-2015 гг. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1122/ По состоянию на 19 мая 2015 г.

Первичная цилиарная дискинезия (PCD)

О первичной цилиарной дискинезии (ПЦД)

Ключевые факты о первичной цилиарной дискинезии

• Первичная цилиарная дискинезия (ПЦД) является наследственным (называемым генетическим ) состоянием.
• У людей с PCD есть изменения (называемые мутациями , ) в генах, которые контролируют крошечные, похожие на волосы структуры, называемые ресничками , которые защищают легкие и другие ткани.
• Когда реснички не работают должным образом, пораженный человек предрасположен к инфекциям в ушах, носовых пазухах и легких.
• Со временем в легких развивается бронхоэктатическая болезнь.
• Около половины пораженных людей имеют зеркальное отражение органов — состояние, называемое situs inversus .

Первичная цилиарная дискинезия (ПЦД) — это редкое генетическое заболевание, которое может приводить к хроническим инфекциям уха и носовых пазух, легочным заболеваниям, situs inversus и проблемам с фертильностью.

Как PCD влияет на ваш организм

Реснички — это крошечные, похожие на волосы структуры, которые «очищают» ткани, выстилающие уши, нос и дыхательные пути, и выполняют важные функции в других частях тела. У людей с PCD отсутствует строительный белок в ресничках, что приводит к неправильному биению ресничек.Эти реснички не могут очистить легкие от вдыхаемых частиц и бактерий.

Насколько серьезна первичная цилиарная дискинезия?

По оценкам,

PCD встречается примерно у 1 из 15 000–20 000 человек во всем мире, хотя это заболевание еще недостаточно изучено. PCD имеет множество симптомов, но наиболее серьезным из них является бронхоэктазия, которая может вызвать серьезное заболевание легких и даже дыхательную недостаточность. Этим людям может потребоваться кислородная терапия, дыхательные аппараты (так называемые аппараты ИВЛ , ) или даже трансплантация легких.

У людей с PCD скапливается слизь, что делает их предрасположенными к инфекциям дыхательных путей (хронический «влажный» кашель, бронхит или пневмония). Заболевания легких могут прогрессировать со временем и усугубляться дымом и другими воздействиями окружающей среды. Это приводит к инфекции, отеку ( воспаление ) и возможному повреждению легких, известному как бронхоэктазы.

Симптомы PCD

Симптомы обычно возникают либо вскоре после рождения (например, «неонатальная» пневмония), либо в раннем детстве и сохраняются на протяжении всей жизни.

Наиболее частыми симптомами болезни легких, вызванной PCD, являются:

• Влажный кашель с рождения или в младенчестве, со слизью или без слизи, длящийся в течение длительного времени;
• Одышка;
• Хрип или свист при дыхании;
• Рецидивирующие простуды грудной клетки;
• Астма, не поддающаяся обычному лечению;
• Инфекции среднего уха; и
• Хронические инфекции носа, густой носовой дренаж или синусит.

Другой симптом PCD — проблемы со слухом, вызванные хроническим повреждением среднего уха. Situs inversus , при котором органы в теле перевернуты (например, сердце справа, печень слева), является еще одним симптомом. Дети с PCD могут родиться с сердечными заболеваниями из-за аномальных сердечных клапанов или кровеносных сосудов. Женщины могут испытывать трудности с беременностью или иметь трубную беременность. Большинство мужчин бесплодны, потому что их сперма не плавает должным образом.

Что вызывает PCD?

PCD вызывается наследованием аномальной копии гена PCD от обоих родителей.Вы не можете «заразиться» PCD от кого-то другого. PCD может возникать у людей, у которых нет семейной истории болезни, потому что люди с только 1 аномальным геном PCD (называемые носителями ), как правило, здоровы.

Не у всех, кто наследует PCD, будут одинаковые симптомы или тяжесть заболевания. Некоторые генные мутации встречаются чаще, чем другие, и могут быть связаны с вашим этническим происхождением. Исследователи работают над тем, чтобы узнать больше о причинах PCD.

Каковы факторы риска PCD?

Гены ваших родителей определяют, подвержены ли вы риску заболевания PCD.Вы подвергаетесь риску только в том случае, если оба родителя имеют 1 или более мутаций гена PCD . Однако, поскольку это часто неизвестно, любой человек с вышеупомянутыми симптомами должен рассмотреть возможность тестирования на ПКС.

У вас может быть более высокий риск развития PCD, если вы:

• Дым;
• Имейте прямой контакт с людьми, страдающими простудой или инфекцией грудной клетки;
• Не делайте соответствующих вакцин, например прививки от гриппа;
• Плохо питаетесь и не ведете активный образ жизни; или
• Не практикуйте хорошее очищение дыхательных путей.

Диагностика PCD

PCD может быть сначала диагностирован как астма, хронический бронхит, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), связанная с курением, или бронхоэктазия неизвестной причины. Поскольку PCD передается по наследству, также важно учитывать вашу семейную историю болезни легких, носовых пазух или уха или situs inversus .

Когда вам следует обратиться к врачу?

Поговорите со своим врачом, если у вас есть семейный анамнез PCD, вам был поставлен диагноз бронхоэктаз, situs inversus, или у вас есть какие-либо из вышеперечисленных симптомов.Вам также может потребоваться обратиться к специалисту по легким или пульмонологу .

Первым шагом в диагностике PCD для вашего лечащего врача является сбор подробного медицинского анамнеза с последующим тщательным медицинским осмотром и специальными тестами. Эти тесты включают:

На этом этапе ваш провайдер может поставить диагноз. В противном случае могут потребоваться более конкретные тесты.

Хотя нет доказательств важности ранней диагностики, она может быть полезной, как и при других хронических заболеваниях.Ранняя диагностика PCD важна, потому что необходимо раннее лечение, чтобы помочь замедлить течение заболевания легких, связанного с PCD.

Обработка PCD

Хотя никакого специального лечения не помогает ресничкам работать должным образом, существуют методы лечения эффектов, которые PCD оказывает на пациентов. Эти процедуры включают:

• Антибиотики для лечения инфекций легких или носовых пазух;
• Методы очистки дыхательных путей, включая методы дыхания и кашля, обычно с помощью физиотерапии или устройств очистки дыхательных путей.Эти техники необходимо выполнять часто, чтобы легкие оставались чистыми; и
• Новые лекарства, которые используются в научных исследованиях.

Управляющий PCD

Наиболее важными шагами для управления PCD являются:

• Регулярно посещайте своего врача;
• Сдать анализ функции легких и мокроты на наличие инфекций;
• Практикуйте регулярную эффективную очистку дыхательных путей; и
• Соблюдайте правила здоровья и следуйте советам врача.

Инфекции могут происходить от одного раза в несколько лет до нескольких раз в год. Эти инфекции обычно нужно лечить антибиотиками. Вы можете остаться дома или отправиться в больницу, если инфекция окажется более серьезной. В больнице вам, скорее всего, удастся очистить дыхательные пути с помощью физиотерапии.

Возможно, вам потребуется обратиться к врачу по лечению ушей, горла и носа (ЛОР), если проблемы с носовыми пазухами и ушами трудно поддаются лечению. ЛОР может порекомендовать методы очистки носа и носовых пазух или даже операцию.Иногда, даже при самом лучшем уходе, PCD может привести к тяжелому заболеванию легких, которое требует более интенсивного лечения. Вам может потребоваться кислородная терапия ночью или во время физических упражнений. При тяжелом течении болезни вам может потребоваться устройство, которое поможет вам с дыханием. Некоторым пациентам, у которых легкие сильно ухудшаются, их лечащий врач может предложить трансплантацию легких.

ресурсов

Американская ассоциация легких рекомендует пациентам и лицам, осуществляющим уход, присоединиться к сообществу поддержки «Жизнь с легочными заболеваниями», чтобы общаться с другими людьми, страдающими этим заболеванием.

Узнайте у своего поставщика медицинских услуг о группах поддержки заболеваний легких в вашем районе или поищите в Интернете ближайший к вам клуб Better Breathers Club.

Вопросы, которые следует задать своему врачу

Делая записи перед визитом и взяв с собой доверенного члена семьи или друга, вы можете помочь вам на первой встрече с вашим поставщиком медицинских услуг.

Ниже приведены некоторые вопросы, которые помогут вам обсудить PCD с вашим поставщиком медицинских услуг:

• Можно мне PCD?
• Что мне нужно делать, чтобы оставаться максимально здоровым как можно дольше, особенно мои легкие?
• Не могли бы вы подробнее рассказать о «очистке дыхательных путей»?
• Есть ли у меня инфекции, требующие лечения?
• Могу ли я иметь детей? Если да, будет ли у них PCD?

% PDF-1.4
%
275 0 объект
>
эндобдж

xref
275 80
0000000016 00000 н.
0000002611 00000 н.
0000002784 00000 н.
0000002819 00000 н.
0000005762 00000 н.
0000005789 00000 н.
0000005942 00000 н.
0000006403 00000 п.
0000006664 00000 н.
0000007188 00000 н.
0000007693 00000 п.
0000008128 00000 н.
0000008381 00000 п.
0000008495 00000 н.
0000008543 00000 н.
0000014371 00000 п.
0000020238 00000 п.
0000025162 00000 п.
0000030539 00000 п.
0000031211 00000 п.
0000031458 00000 п.
0000031962 00000 п.
0000031989 00000 п.
0000032400 00000 п.
0000032512 00000 п.
0000032643 00000 п.
0000033062 00000 п.
0000033318 00000 п.
0000033827 00000 п.
0000039634 00000 п.
0000039661 00000 п.
0000039975 00000 п.
0000040115 00000 п.
0000045516 00000 п.
0000045693 00000 п.
0000045829 00000 п.
0000046215 00000 п.
0000046394 00000 п.
0000046563 00000 п.
0000046732 00000 н.
0000050593 00000 п.
0000055024 00000 п.
0000055207 00000 п.
0000067324 00000 п.
0000067571 00000 п.
0000070382 00000 п.
0000080237 00000 п.
0000080323 00000 п.
0000080393 00000 п.
0000091092 00000 п.
0000091655 00000 п.
0000091916 00000 п.
0000101217 00000 н.
0000114224 00000 н.
0000114340 00000 н.
0000114410 00000 н.
0000114479 00000 н.
0000114732 00000 н.
0000114815 00000 н.
0000114870 00000 н.
0000114948 00000 н.
0000115767 00000 н.
0000115886 00000 н.
0000115956 00000 н.
0000116049 00000 н.
0000123430 00000 н.
0000123697 00000 н.
0000123979 00000 н.
0000124006 00000 н.
0000124402 00000 н.
0000125861 00000 н.
0000126183 00000 н.
0000126556 00000 н.
0000135680 00000 н.
0000135719 00000 п.
0000174280 00000 н.
0000174319 00000 н.
0000176653 00000 н.
0000002430 00000 н.
0000001896 00000 н.
трейлер
] / Назад 581100 / XRefStm 2430 >>
startxref
0
%% EOF

354 0 объект
> поток
ч ތ ХСАВАР НАЕЗЛ1Ф.[Hz «] M9m3 \ L} M # bS |» $] [F «cZ5E; 1W ښ fD ֓ IHi’R` a% U ފ ֞› * ׮׫ O> zSL3_Fg.c
] rLuI

Первичная цилиарная дискинезия | Детская больница Филадельфии

Первичная цилиарная дискинезия (ПЦД) — редкое наследственное заболевание, вызванное дефектами структуры и / или функции ресничек. Реснички — это крошечные волоскоподобные структуры, которые необходимы для перемещения жидкостей и частиц в различных частях тела, включая дыхательные пути.

Если есть дефекты ресничек, выстилающих дыхательные пути, организм не может изгнать инородный материал и очистить слизь.Это может привести к легочным осложнениям, включая частые инфекции легких, ушей, горла и носовых пазух.

Люди с PCD могут иметь постоянные или рецидивирующие инфекции, которые могут значительно ухудшить качество их жизни и иногда приводить к необратимым повреждениям и опасным для жизни осложнениям.

Около половины пациентов с PCD имеют дефекты латеральности (например, situs inversus totalis, когда сердце появляется с правой стороны грудной клетки, а не с левой). Когда дефекты ресничек сопровождаются триадой обратного сидения, хроническим синуситом и бронхоэктазией (расширением мелких дыхательных путей), это состояние известно как синдром Картагенера.

PCD характеризуется рецидивирующими респираторными инфекциями, такими как бронхит и / или пневмония. Другие признаки, которые могут указывать на PCD, включают:

• Хронический кашель
• Дыхательный дистресс у новорожденного
• Хроническое свистящее дыхание
• Избыточная слизь
• Сложность очистки от слизи
• Хроническая заложенность носа
• Рецидивирующие инфекции среднего уха
• Рецидивирующие симптомы простуды

Только генетическое тестирование или идентификация дефектов ресничек под трансмиссионным электронным микроскопом (требующие биопсии) являются специфическими и окончательными для диагностики PCD.Однако существует общее согласие относительно клинических критериев, используемых для диагностики первичной цилиарной дискинезии. Диагностика PCD требует наличия одного или комбинации общих признаков и симптомов:

Заболевания ушей, носовых пазух и легких:

• Хронический кашель
• Дыхательная недостаточность в период новорожденности
• Хроническое свистящее дыхание
• Рецидивирующие инфекции, такие как бронхит и пневмония
• Избыточная слизь
• Сложность очистки от слизи
• Хроническая заложенность носа
• Рецидивирующие инфекции среднего уха
• Рецидивирующие симптомы простуды

Нарушение размещения органов грудной клетки и брюшной полости:

• Situs inversus totalis, или обратное зеркальное отображение всех внутренних органов, состояние, при котором все органы обычно функционируют нормально, находясь в положении зеркального отображения
• Situs неоднозначный, или гетеротаксия, состояние, характеризующееся образованием определенных органов на противоположной стороне тела

Другие потенциальные индикаторы PCD:

• Дигитальные дубинки, характеризующиеся увеличением пальцев рук и / или ног из-за увеличения соединительной ткани вокруг ногтей
• Специфические ультраструктурные дефекты ресничек, идентифицированные с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ).Этот «золотой стандарт» диагностического теста первичной цилиарной дискинезии требует биопсии ресничной ткани дыхательных путей, обычно взятой кисточкой или соскобом носа или трахеи
• Положительный клинический генетический тест на PCD
• Необычно низкие уровни оксида азота в носу также могут быть индикатором PCD

В настоящее время нет лекарства от первичной цилиарной дискинезии. Конечная цель лечения пациентов с PCD — замедлить прогрессирование заболевания.Врачи также будут пытаться поддерживать здоровье дыхательных путей и лечить заболевания легких и верхних дыхательных путей. Текущее обращение включает:

• Лечение инфекций носовых пазух и ушей с помощью промывки носа солевым раствором, противовоспалительных спреев для носа и хирургии носа / носовых пазух
• Предотвращение и отсрочение прогрессирующих и / или прогрессирующих заболеваний легких с помощью очистки дыхательных путей, бронходилататоров, муколитиков, антибиотиков и стероидов
• Мониторинг здоровья дыхательных путей с помощью посева мокроты, бронхоскопии, визуализации и исследования функции легких

Детям, проходящим лечение в Центре PCD Детской больницы Филадельфии, будет оказана помощь всего спектра педиатров, в том числе экспертов нашего отделения отоларингологии, также известного как уха, носа и горла (ЛОР), и генетики.

Первичная дискинезия ресничек: MedlinePlus Genetics

Первичная дискинезия ресничек — это заболевание, характеризующееся хроническими инфекциями дыхательных путей, неправильным расположением внутренних органов и невозможностью иметь детей (бесплодие). Признаки и симптомы этого состояния вызваны аномальными ресничками и жгутиками. Реснички — это микроскопические пальцеобразные выступы, которые выступают из поверхности клеток. Они находятся в слизистой оболочке дыхательных путей, репродуктивной системы и других органов и тканей.Жгутики представляют собой хвостовые структуры, похожие на реснички, которые продвигают сперматозоиды вперед.

В дыхательных путях реснички скоординированно движутся вперед и назад, перемещая слизь к глотке. Это движение слизи помогает удалить жидкость, бактерии и частицы из легких. Большинство детей с первичной цилиарной дискинезией испытывают проблемы с дыханием при рождении, что говорит о том, что реснички играют важную роль в выводе фетальной жидкости из легких. Начиная с раннего детства, у больных часто развиваются инфекции дыхательных путей.Без правильно функционирующих ресничек в дыхательных путях бактерии остаются в дыхательных путях и вызывают инфекцию. Люди с первичной цилиарной дискинезией также имеют круглогодичную заложенность носа и хронический кашель. Хронические инфекции дыхательных путей могут привести к состоянию, называемому бронхоэктазией, которое повреждает проходы, называемые бронхами, ведущие от дыхательного горла к легким, и может вызвать опасные для жизни проблемы с дыханием.

Некоторые люди с первичной цилиарной дискинезией имеют неправильное расположение органов в груди и животе.Эти аномалии возникают на ранних этапах эмбрионального развития, когда устанавливаются различия между левой и правой сторонами тела. Около 50 процентов людей с первичной цилиарной дискинезией имеют зеркальное отражение внутренних органов (situs inversus totalis). Например, у этих людей сердце находится с правой стороны тела, а не с левой. Situs inversus totalis не вызывает видимых проблем со здоровьем. Когда у человека с первичной цилиарной дискинезией возникает situs inversus totalis, часто говорят, что у него синдром Картагенера.

Примерно 12 процентов людей с первичной цилиарной дискинезией имеют состояние, известное как синдром гетеротаксии или situs ambiguus, которое характеризуется аномалиями сердца, печени, кишечника или селезенки. Эти органы могут быть структурно ненормальными или неправильно расположены. Кроме того, у пораженных людей может отсутствовать селезенка (аспления) или быть множественными селезенками (полиспления). Синдром гетеротаксии возникает из-за проблем с установлением левой и правой сторон тела во время эмбрионального развития.Тяжесть гетеротаксии широко варьируется среди пораженных людей.

Первичная дискинезия ресничек также может привести к бесплодию. Энергичные движения жгутиков необходимы для продвижения сперматозоидов к женской яйцеклетке. Поскольку их сперматозоиды не двигаются должным образом, мужчины с первичной цилиарной дискинезией обычно не могут иметь детей. Бесплодие возникает у некоторых пораженных женщин и, вероятно, связано с аномальными ресничками в маточных трубах.

Еще одним признаком первичной цилиарной дискинезии являются рецидивирующие инфекции уха (средний отит), особенно у детей раннего возраста.При отсутствии лечения средний отит может привести к необратимой потере слуха. Инфекции уха, вероятно, связаны с аномальными ресничками внутреннего уха.

Редко у людей с первичной цилиарной дискинезией наблюдается накопление жидкости в головном мозге (гидроцефалия), вероятно, из-за аномальных ресничек головного мозга.

Первичная цилиарная дискинезия | CS Mott Children’s Hospital

Первичная цилиарная дискинезия (ПЦД), иногда называемая синдромом неподвижных ресничек или синдромом Картегенера, — это редкое заболевание легких, которое вызывает частые инфекции легких, носовых пазух и ушей, хронический кашель и, в конечном итоге, рубцевание легких (бронхоэктазы).

PCD вызывается дефектом ресничек, которые представляют собой микроскопические волосовидные структуры на поверхности клеток дыхательных путей. Реснички отвечают за избавление от слизи, бактерий и частиц. Когда реснички не построены должным образом, слизь, бактерии и частицы застревают в легких, пазухах и внутреннем ухе. Это может привести к ряду респираторных осложнений, включая частые инфекции легких, ушей, горла и носовых пазух. Неисправные реснички также могут привести к ненормальному вращению сердца и внутренних органов, а также затруднить беременность.

Детская больница C.S. Mott обеспечивает комплексную диагностику и лечение детей, подростков и взрослых с PCD. В нашу команду детских пульмонологов входят специалисты в области окончательной диагностики PCD, а также специалисты по индивидуальному уходу за детьми с этим редким заболеванием.

Симптомы первичной цилиарной дискинезии

• Хронический кашель
• Хроническая заложенность носа и носовых пазух
• Проблемы с дыханием в анамнезе на первом месяце жизни
• Situs inversus (аномальное вращение сердца и внутренних органов, наблюдается примерно у половины всех пациентов с диагнозом PCD)

Диагностика первичной цилиарной дискинезии

Симптомы PCD могут напоминать симптомы других состояний, от аллергии до других хронических респираторных заболеваний.Точный, окончательный диагноз имеет решающее значение для обеспечения оптимального лечения детей с PCD. В нашу команду пульмонологов входят преподаватели, специализирующиеся на диагностике и лечении этого редкого состояния и обладающие особой квалификацией для постановки правильного диагноза.

Наличие некоторых или всех вышеперечисленных симптомов может указывать на диагноз PCD, который подтверждается диагностическим тестированием. Наиболее важные диагностические тесты:

• Назальное исследование оксида азота: у людей с PCD очень мало газа оксида азота (NO) в носу и носовых пазухах.Тест на оксид азота — очень чувствительный способ диагностики PCD.
• Электронная микроскопия: чистя внутреннюю часть носа пациента, мы можем собирать клетки и исследовать их под электронным микроскопом, чтобы увидеть, правильно ли устроены реснички.
• Генетическое тестирование: дефекты структуры ресничек вызваны мутацией в одном из многих генов, ответственных за нормальное производство белков ресничек. Генетические тесты становятся все более доступными и могут быть важным способом диагностики PCD.

Лечение первичной цилиарной дискинезии

Пациентам с PCD требуется ежедневное дыхание и физиотерапия грудной клетки, а также антибиотики для лечения инфекции. К сожалению, лекарства от PCD нет. Но с помощью регулярных посещений врачей и тестирования функции легких мы можем оставаться в курсе болезни и помогать пациентам жить счастливой и активной жизнью.

Выбор программы лечения PCD

Поскольку это очень редкое заболевание, в стране очень мало больниц, у которых есть инструменты и опыт, необходимые для диагностики и лечения PCD.Под руководством крупнейшей педиатрической пульмонологической команды в Мичигане мы сотрудничаем с детскими отоларингологами и педиатрическими генетиками, чтобы обеспечить многопрофильную, скоординированную помощь детям и семьям, живущим с PCD.

Кроме того, мы работаем с другими центрами PCD по всей стране, чтобы продвигать исследования и клинические испытания, которые могут привести к лучшему уходу за детьми с PCD.

Сделайте следующий шаг:

Чтобы записаться на прием к нашей группе по первичной цилиарной дискинезии по телефону , позвоните нам по телефону 734-764-4123.

Что такое первичная цилиарная дискинезия (ПЦД)?

Первичная цилиарная дискинезия (ПЦД) — это редкое наследственное долгосрочное заболевание, с которым рождаются дети.

Дети с PCD имеют проблемы со скоплением слизи, что приводит к отеку дыхательных путей и инфекциям в дыхательных путях и ушах. Дети с PCD страдают этим заболеванием всю жизнь.

Как PCD влияет на организм?

Трубы внутри наших легких (дыхательные пути) содержат железы, вырабатывающие слизь.Это помогает задерживать пыль и микробы. Слизь очищается крошечными волосками, называемыми ресничками, которые выстилают дыхательные пути в легких, носу и ушах.

Если у вашего ребенка PCD, реснички не работают должным образом. Это приводит к скоплению слизи, вызывая отек и инфекцию легких и ушей.

Взросление с PCD

Сыновья Фионы страдают первичной цилиарной дискинезией.

Прочитать их историю

Если у вашего ребенка PCD, обратитесь в группу поддержки семьи PCD для получения поддержки и информации.

Осложнения PCD

Половина людей с PCD имеет «обратное положение». Это означает, что органы в груди и животе находятся на противоположной стороне тела от обычного. PCD также может вызывать проблемы со слухом и бесплодие.

Чем раньше вашему ребенку будет поставлен диагноз PCD, тем раньше его можно будет лечить, чтобы предотвратить или отсрочить повреждение легких и повысить шансы на нормальную продолжительность жизни.

Что вызывает PCD?

PCD вызывается проблемами с дефектными генами.На сегодняшний день идентифицировано более 40 различных генов, вызывающих PCD. Гены несут инструкции (например, код) для создания белков в ресничках. Они кодируют то, как выглядят реснички, как они работают и как движутся. Неисправный ген означает, что реснички не работают нормально. Это означает, что слизь не выводится из организма должным образом.

Есть ли способ предотвратить PCD?

Нет, ничего нельзя сделать для предотвращения PCD. Но даже если это невозможно предотвратить, ранняя диагностика и лечение могут предотвратить необратимое повреждение легких при PCD.

Генетическое тестирование на PCD

Поскольку PCD вызывается проблемами с генами, существует множество исследований в области генетического тестирования. В настоящее время генетическое тестирование позволяет выявить только некоторые формы PCD. Ситуация улучшается по мере проведения дополнительных исследований, и считается, что в настоящее время около 80% людей с PCD можно диагностировать с помощью генетических тестов крови. Все время выявляются новые гены.

Каковы признаки PCD у детей?

У большинства людей с PCD симптомы появляются с рождения или в раннем младенчестве.Три четверти детей с PCD имеют проблемы с дыханием. Эти дети будут нуждаться в кислороде в течение нескольких дней или недель после рождения.

Другие признаки PCD вызваны инфекцией и опухолью в легких и ушах. У вашего ребенка может быть:

• Постоянная заложенность носа или насморк
• Постоянный влажный кашель, даже когда хорошо
• Проблемы со слухом — это затрагивает половину всех детей с PCD
• хрипы или затрудненное дыхание
• дубинка — припухлость на концах пальцев

Как диагностируется PCD?

Несмотря на то, что у большинства младенцев симптомы появляются с рождения, диагноз PCD может быть установлен гораздо позже.Это потому, что PCD трудно диагностировать. Ваш врач может подумать, что есть другое объяснение симптомов вашего ребенка.

Но важно, чтобы вашему ребенку поставили диагноз как можно раньше. Ознакомьтесь с нашей информацией о том, как пойти к врачу, чтобы помочь вам получить максимум от приема.

Если ваш терапевт, педиатр или другой врач-специалист считает, что у вашего ребенка PCD, они направят его к группе специалистов. Ваш ребенок будет либо осмотрен в клинике, либо специалист может посетить центр, расположенный ближе к вашему дому.Они сделают анализы, чтобы подтвердить диагноз.

Диагностические тесты для PCD

Будет исследован образец воздуха, которым выдыхает ваш ребенок. Это называется назальным измерением оксида азота (назального NO).

Если ваш ребенок достаточно взрослый, его могут попросить задержать дыхание, но тест можно проводить и при нормальном дыхании.

Если назальный тест на NO низкий, может потребоваться проведение дополнительных анализов, чтобы подтвердить диагноз PCD:

• Будет взят образец ресничек из носа вашего ребенка.Это называется носовой щеточной биопсией или чисткой носа. Это делается в специализированном центре. Образец будет изучен под микроскопом, чтобы увидеть движение ресничек или крошечных волосков на поверхности этих клеток.
• Во многих случаях генетические анализы крови могут выявить гены, связанные с PCD.

Другие тесты для детей с подозрением на PCD

Они содержат полезную информацию и включают:

• Тест, чтобы узнать, насколько хорошо работают легкие вашего ребенка — тест функции легких или спирометрия
• Рентген грудной клетки
• компьютерная томография или компьютерная томография

Вашему ребенку может потребоваться общий наркоз, чтобы его легкие можно было исследовать в небольшую камеру.Этот тест называется бронхоскопией. Во время этого исследования можно брать пробы из дыхательных путей вашего ребенка с помощью небольшой щетки, называемой бронхоскопической щеткой — этот тест называется биопсией бронхов.

Далее: как лечить PCD?

.