Пробу манту: Туберкулиновая проба Манту

Эксперт: проба Манту часто дает ложноположительные результаты из-за аллергической реакции — Общество

МОСКВА, 28 марта. /ТАСС/. Результат пробы Манту часто бывает ложноположительным из-за аллергической реакции, поэтому следует сделать выбор в пользу препарата, позволяющего отличить аллергию от инфицирования. Такое мнение в воскресенье высказала главный внештатный специалист-фтизиатр Минздрава России, директор ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний» Минздрава России Ирина Васильева радиостанции «Говорит Москва».

«Сейчас век такой, что многие дети аллергики. Проба Манту может реагировать на аллергию, по пробе Манту часто выявляются ложноположительные реакции. Вот почему в практику вошел новый тест — аллерген туберкулезный рекомбинантный (диаскинтест — прим. ТАСС), который как раз позволяет отдифференцировать, аллергическая это реакция или истинное инфицирование», — сказала она.

Васильева пояснила, что в случаях, когда диаметр уплотнения после применения диаскинтеста составляет порядка 25 мм, велика вероятность, что человек инфицирован именно туберкулезными микробактериями.

Туберкулез — инфекционное заболевание человека, а также животных. Болезнь передается воздушно-капельным путем и протекает, как правило, в скрытой форме, но в некоторых случаях приобретает открытую, активную форму. Степень риска развития туберкулеза у зараженных составляет 5-15%. Однако она значительно выше у людей с ослабленным иммунитетом, диабетом, недостаточностью питания, курящих. Так, у ВИЧ-инфицированных вероятность возникновения активной формы туберкулеза возрастает в 20-30 раз.

Для профилактики туберкулеза используют скрининговые программы для выявления заболевания в его скрытой форме, в том числе проводят флюорографию, а также проводят медицинский осмотр и вакцинацию. Лечение туберкулеза производится с помощью антибиотиков, однако одной из основных проблем в настоящее время является появление штаммов бактерий, потерявших восприимчивость к существующим лекарствам.

цена, запись на пробу Манту взрослым и детям в Москве

В России отмечается высокая заболеваемость туберкулезом. Это очень опасное заболевание. Для того, чтобы уберечь себя и детей от этой болезни и ее осложнений, не забывайте о туберкулинодиагностике.

Для проведения внутрикожных туберкулиновых проб в Международном медицинском центре ОН КЛИНИК применяют препараты только от надежных производителей. Мы следим за сроком годности вакцин.

Записаться на пробу Манту взрослым и детям можно по телефону, связавшись с нашими администраторами. Также можно заполнить онлайн форму на данной странице ниже, эта услуга круглосуточная. Вам перезвонят и расскажут, сколько стоит туберкулинодиагностика. Мы работаем без выходных.

Чтобы поставить Манту, к нам легко добраться как на личном, так и на общественном транспорте.

Реакция Манту

Реакция Манту (туберкулиновая проба) – это важнейший метод выявления туберкулеза. Проба позволяет обнаружить инфицированность микобактериями туберкулеза и вовремя начать лечение. Если пациент, которому сделали пробу Манту, является носителем туберкулезной палочки, результат исследования будет положительным, с появлением характерных признаков.

Туберкулинодиагностика показана всем детям, начиная с первого года жизни. Взрослым людям пробу Манту делают реже, но в некоторых случаях эта манипуляция может быть назначена и взрослому человеку.

В процессе проведения реакции Манту врач делает укол в область руки для ввода туберкулина – натурального антигена, полученного из микобактерий. После внедрения в организм с «вражеским агентом» тут же начинают бороться лимфоциты. Если ранее им приходилось сталкиваться с болезнетворной туберкулезной палочкой, реакция будет бурной и проявится в виде большого и красного плотного пятна в месте введения туберкулина. Если же пациент не контактировал с возбудителями туберкулеза, реакция будет нулевой или малозаметной.

При положительной реакции пациенту предлагают дополнительные виды диагностики и берут его под медицинский контроль.

Где можно сделать пробу Манту в Москве

Сделать Манту ребенку и взрослым можно как в районной поликлинике, так платно и во многих частных клиниках. Но в поликлинике Вы столкнетесь с очередями и необходимостью приезжать на прием тогда, когда это удобно врачам. Там никто не сможет гарантировать, что Вашему ребенку и Вам врач уделит столько времени, сколько это необходимо.

При обращении в частные клиники тоже необходимо быть осторожным – многие медицинские учреждения пытаются сэкономить и не соблюдают условия транспортировки, хранения и введения препаратов для пробы Манту. Это чревато получением недостоверных результатов.

Выбирайте медцентры, которые давно работают на рынке России. Один из таких медцентров – ОН КЛИНИК, который работает на российском рынке более 23 лет. За это время он успел завоевать доверие тысяч пациентов.

Наши плюсы:

Реакция Манту: норма

После ввода туберкулина на месте пробы образуется папула («пуговка»), размер которой указывает на реакцию иммунитета на микобактерии туберкулеза. Примерно на третий день врач оценивает результат пробы и измеряет папулу. В норме ее диаметр не превышает 5 миллиметров.

Если воспаление будет выявлено, Вам предложат дополнительную диагностику.

Ложноположительный результат при Манту

Иногда большая папула образуется не вследствие инфицирования пациента микобактериями туберкулеза, а по другим причинам.

Факторы, которые влияют на результаты после проведения Манту:

• аллергия;




• инфекционные заболевания;




• хронические заболевания;




• индивидуальная реакция иммунной системы;




• период менструации.

Ложноположительный результат также встречается в тех случаях, когда в клинике не соблюдают правил транспортировки и хранения туберкулина.

При положительной реакции Манту не стоит самостоятельно ставить себе диагноз, интерпретацией результатов должен заниматься только врач.

Здоровье – самое ценное, что у нас есть. Берегите себя!

Видео с участием врачей

Лебедь Д.Н., терапевт. Вакцинация в ОН КЛИНИК.

Школьный медработник с коронавирусом делала пробу Манту детям илекского села Яман

В селе Яман Илекского района разгорается нешуточный скандал. К нам в редакцию обратились родители почти 100 учеников, которые разом оказались на карантине. По словам родителей, учителя Ямановской школы насильно, без возможности согласовать с родителями, увели детей из стен школы в местный медпункт на пробу Манту. Некоторые дети хотели позвонить домой, чтобы предупредить взрослых и получить от них согласие, на что учительница Бажикова Жанна Николаевна разозлилась и кому-то даже якобы ответила: «Замолчи, быстро пошла!». В итоге детям сделаны пробы Манту без согласования с родителями. Но это, как оказалось, не самое страшное. Делавшая их медработник Ларина Галина Алексеевна, на которой не было ни маски, ни перчаток, через 2 часа после работы с детьми якобы получила положительный результат анализа на COVID-19. Медработник сдал тест, не знает результатов, но идёт ставить пробы Манту детям?!! Кто теперь понесёт наказание за эту грубейшую халатность, спрашивают родители. Ответит ли за это директор школы Демкина Оксана Валентиновна, которая несёт ответственность за учеников своей школы, когда они там находятся? И будет ли отвечать за свою халатность медработник Ларина Галина Алексеевна?
Известно, что директор школы и медработник написали объяснительные. Идёт проверка. Мы обратились за комментариями в минздрав и минобр региона. Заместитель министра образования региона Нина Гордеева сказала, что без согласия родителей школа не имеет права делать никакие прививки, включая пробу Манту. В минздраве чётко не смогли ответить на вопрос, почему нельзя было приступить к работе с детьми после получения тестов на коронавирус у медработника. У истории будет продолжение. Мы за ней следим.

Расписание работы процедурного кабинета (Диаскинтест, проба Манту, Т-СПОТ, анализы)

Уважаемые пациенты! Записаться на анализ Т-SPOT и Диаскинтест вы можете по многоканальному телефону колл-центра: 8 (812) 775-75-55

Для детского приема: необходимо наличие свидетельства о рождении ребенка, сертификата профилактических прививок и паспорта сопровождающего.

Для взрослого приема: необходимо наличие паспорта.

  Расписание работы детского процедурного кабинета ФГБУ «СПб НИИФ» Минздрава России» 2-й Муринский пр. д.12к3

  Расписание работы кабинета иммунодиагностики для взрослых амбулаторно-консультативного отделения

ФГБУ «СПб НИИФ» Минздрава России ул.Политехническая д.32 лит. «Х»

Расписание работы кабинета иммунодиагностики для взрослых амбулаторно-консультативного отделения
ФГБУ «СПб НИИФ» Минздрава России Лиговский пр. 2-4 (с 28 июня 2021 года и до уведомления, прием пациентов не осуществляется)

Проведение, чтение и интерпретация туберкулиновой кожной пробы — Руководство для национальных программ борьбы с туберкулезом по ведению туберкулеза у детей

В этом приложении содержится информация о проведении, чтении и интерпретации туберкулиновой кожной пробы (TST).

TST — это внутрикожная инъекция комбинации микобактериальных антигенов, которая вызывает иммунный ответ (гиперчувствительность замедленного типа), выраженный уплотнением, которое может измеряться в миллиметрах.

Стандартный метод выявления людей, инфицированных M. tuberculosis — ТКП по методу Манту. Множественные пункционные тесты не следует использовать, поскольку эти тесты ненадежны (поскольку количество туберкулина, вводимого внутрикожно, невозможно точно контролировать).

В этом приложении описывается, как проводить, читать и интерпретировать TST с использованием 5 туберкулиновых единиц (TU) туберкулина PPD-S. Альтернативой 5 ЕД туберкулина PPD-S является 2 ЕД туберкулина PPD RT 23.

Введение

1. Найдите и очистите место инъекции на 5–10 см (2–4 дюйма) ниже локтевого сустава

   • Положите предплечье ладонью вверх на твердую, хорошо освещенную поверхность.

   • Выберите место без препятствий (например, шрамов, язв, вен) для размещения и чтения.

   • Очистите участок тампоном со спиртом.

2. Приготовьте шприц

   • Проверьте срок годности на флаконе и убедитесь, что флакон содержит туберкулин PPD-S (5 ЕД / 0,1 мл).

   • Используйте одноразовый туберкулиновый шприц с короткой (от до ½ дюйма) иглой 27 размера с коротким скосом.

   • Очистите верхнюю часть флакона стерильным тампоном.

   • Наполните шприц 0,1 мл туберкулина.

3. • Медленно вставьте иглу скосом вверх под углом 5–15 °.

   • Фаска иглы должна быть видна чуть ниже поверхности кожи.

4. Проверьте место инъекции

   • После инъекции должен появиться плоский внутрикожный волдырь диаметром 8–10 мм. Если нет, повторите инъекцию в участок на расстоянии не менее 5 см (2 дюймов) от исходного участка.

5. Запись информации

   • Запишите всю информацию, требуемую вашим учреждением для документации (например, дату и время проведения теста, расположение места инъекции, номер партии туберкулина).

Рисунок A3.1

Проведение туберкулиновой кожной пробы по методу Манту.

Чтение

Результаты должны быть прочитаны между 48 и 72 часами после введения.Пациента, который не вернется в течение 72 часов, вероятно, потребуется перенести на другую ТКП.

1. Осмотрите место инъекции

   • Осмотрите место инъекции при хорошем освещении и измерьте уплотнение (утолщение кожи), а не покраснение (покраснение кожи).

2. Индурация пальпата

3. Отметка уплотнения

4. Измерьте диаметр уплотнения с помощью прозрачной гибкой линейки

   • Поместите «0» линейки на внутреннем левом крае уплотнение.

   • Считайте показания линейки на внутреннем правом крае уплотнения (используйте нижнее измерение, если оно находится между двумя градациями на миллиметровой шкале).

5. Записываемый диаметр уплотнения

   • Не записывать как «положительный» или «отрицательный».

   • Записывайте только измерения в миллиметрах.

   • Если уплотнения нет, укажите 0 мм.

Интерпретация

Интерпретация TST зависит от двух факторов:

—

диаметр уплотнения;

—

риск заражения человека туберкулезом и прогрессирования заболевания в случае инфицирования.

Индурация диаметром ≥5 мм считается положительной у:

—

ВИЧ-положительных детей;

—

детей с тяжелой недостаточностью питания (с клиническими признаками маразма или квашиоркора).

Индурация диаметром ≥10 мм считается положительной у:

—

всех остальных детей (независимо от того, получили ли они вакцинацию БЦЖ).

Причины ложноотрицательных и ложноположительных тестов TST перечислены в.

Таблица A3.1

Причины ложноотрицательных и ложноположительных туберкулиновых кожных проб.

Список литературы

1.

Руководство для национальных программ борьбы с туберкулезом по ведению туберкулеза у детей. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2006. (WHO / HTM / TB / 2006.371) [PubMed: 17044200]

Пример вопроса Naplex по пробе Манту

Что из следующего является / является ложноположительной реакцией на туберкулиновую кожную пробу? [Выбрать все подходящие варианты]

a.Инфекция нетуберкулезными микобактериями
b. Кожная анергия
c. Предыдущая вакцинация БЦЖ
d. Очень старая туберкулезная инфекция
e. Недавняя вакцинация живым вирусом

Ответ: (а, в). Туберкулиновая кожная проба Манту (ТКП) — это стандартный метод определения того, инфицирован ли человек Mycobacterium tuberculosis. Надежное администрирование и чтение TST требует стандартизации процедур, обучения, надзора и практики.

TST выполняется путем ввода 0.1 мл очищенного производного белка туберкулина (PPD) во внутреннюю поверхность предплечья. Инъекцию следует производить туберкулиновым шприцем кончиком иглы вверх. TST — это внутрикожная инъекция. При правильном размещении инъекция должна вызвать бледное возвышение кожи (волдырь) от 6 до 10 мм в диаметре.

Реакцию кожной пробы следует читать между 48 и 72 часами после введения. Пациенту, который не вернется в течение 72 часов, необходимо будет перенести еще один кожный тест.

Реакцию следует измерять в миллиметрах уплотнения (пальпируемого, приподнятого, уплотненного участка или припухлости). Читателю не следует измерять эритему (покраснение). Диаметр уплотненной области следует измерять поперек предплечья (перпендикулярно длинной оси).

Интерпретация кожной пробы зависит от двух факторов:

1. Измерение уплотнения в миллиметрах
2. Риск заражения туберкулезом и прогрессирования заболевания в случае инфицирования

Что такое ложноположительные реакции?

Некоторые люди могут реагировать на TST, даже если они не инфицированы M.туберкулез. Причины этих ложноположительных реакций могут включать, помимо прочего, следующее:

1. Инфекция нетуберкулезными микобактериями
2. Предыдущая вакцинация БЦЖ
3. Неправильный метод проведения TST
4. Неправильная интерпретация реакция
5. Использован неправильный флакон с антигеном

Что такое ложноотрицательные реакции?

Некоторые люди могут не реагировать на ТКП, даже если они инфицированы M. tuberculosis. Причины этих ложноотрицательных реакций могут включать, помимо прочего, следующее:

1.Кожная анергия (анергия — это неспособность реагировать на кожные пробы из-за ослабленной иммунной системы)
2. Недавняя инфекция ТБ (в течение 8-10 недель после заражения)
3. Очень старая инфекция ТБ (много лет)
4. Очень молодой возраст (менее 6 месяцев)
5. Недавняя вакцинация живым вирусом (например, корь и оспа)
6. Преодоление туберкулеза
7. Некоторые вирусные заболевания (например, корь и ветряная оспа)
8. Неправильный метод ТКП администрирование
9. Неправильная интерпретация реакции

Попробуйте наш Naplex QBank.www.pharmacyexam.com ** Обратите внимание: вопросы этого типа не будут отображаться в MPJE. Мы просто пишем в группу MPJE для получения знаний.

QuantiFERON-TB Gold — QuantiFERON

Что такое QuantiFERON-TB Gold?

QuantiFERON-TB Gold (QFT) — это простой анализ крови, помогающий обнаружить Mycobacterium tuberculosis , бактерии, вызывающие туберкулез (ТБ). QFT — это анализ высвобождения гамма-интерферона (IFN-γ), широко известный как IGRA, и является современной альтернативой туберкулиновой кожной пробе (TST, PPD или Mantoux).В отличие от TST, QFT — это контролируемый лабораторный тест, который требует только одного посещения пациента и не зависит от предыдущей вакцинации Bacille Calmette-Guerin (BCG).

QFT является высокоспецифичным и чувствительным: положительный результат с большой вероятностью указывает на истинное заражение M. tuberculosis . Однако, как и TST и другие IGRA, QFT не может отличить активный туберкулез от латентной туберкулезной инфекции и предназначен для использования с оценкой риска, рентгенографией и другими медицинскими и диагностическими оценками.Как и любое другое диагностическое средство, QFT не может заменить клиническую оценку.

Руководящие принципы Центров по контролю за заболеваниями США (CDC) рекомендуют использовать IGRA во всех ситуациях, в которых исторически использовалась TST, при этом IGRA является предпочтительным тестом для людей, которые были вакцинированы БЦЖ или вряд ли вернутся для чтения TST (1 ).

Преимущество QFT — три пробирки, один четкий результат

QFT использует уникальные пробирки для забора крови, которые позволяют немедленно подвергнуть жизнеспособные лимфоциты крови высокоспецифическим антигенам ТБ (ESAT-6 / CFP-10 / TB-7.7 (р4)) и контрольные образцы, нанесенные на внутреннюю поверхность пробирок. Воздействие антигена вызывает количественный иммунный ответ, помогающий в диагностике инфекции ТБ.

Пустая трубка

Отрицательный контроль для поправки на фон IFN-γ

Пробирка с антигеном ТБ

Для определения ответа CD4 + Т-лимфоцитов на антигены ТБ

Трубка с митогеном

Низкий ответ может указывать на неспособность генерировать IFN-γ

QFT — это наиболее клинически испытанный и проверенный тест IGRA.

QuantiFERON-TB Gold — это наиболее клинически протестированный и проверенный IGRA из доступных (2). Более 30 миллионов тестов QFT было продано в более чем 130 странах, в том числе более 7 миллионов в 2015 году. Доверяйте единственному анализу крови на туберкулезную инфекцию, который предлагает:

• Наиболее точные и воспроизводимые результаты по туберкулезной инфекции
• Доверие более 1200 клинических и научных исследований
• Удобная и объективная технология ELISA
• Тестирование за одно посещение

QFT обеспечивает простой сбор крови и удобный рабочий процесс

QFT использует сбор цельной крови, чтобы сделать инкубацию Т-клеток простой и быстрой.После взятия крови образец необходимо инкубировать, что может происходить на месте или в испытательной лаборатории, что обеспечивает полную гибкость и удобство вашей практики.

Преимущества технологии QuantiFERON

• Использование цельной крови в QFT делает инкубацию Т-клеток простой и быстрой и сокращает трудозатраты
• Отсутствие утомительного выделения, промывки, подсчета, разбавления или культивирования лимфоцитов
• Технология, разработанная для клинического скрининга большого количества образцов, обеспечивающая стандарты, контроли и воспроизводимость анализа, необходимые для клинической диагностики

Туберкулезные региональные учебные центры

Ценные ресурсы можно получить в Центрах по контролю и профилактике заболеваний США (CDC). Подразделение CDC по ликвидации туберкулеза профинансировало пять региональных центров обучения и медицинских консультаций (RTMCC).Эти центры предоставляют обучение, техническую помощь, медицинские консультации и разработку учебных материалов для противотуберкулезных программ и поставщиков медицинских услуг (3). Чтобы узнать больше о RTMCC, который охватывает ваш регион, посетите www.cdc.gov/tb/education/rtmc/default.htm.

Загрузить брошюру QuantiFERON-TB Gold

Запросить дополнительную информацию

Свяжитесь с нами

Список литературы

1. Центры по контролю и профилактике заболеваний.(2010) Обновленное руководство по использованию тестов высвобождения гамма-интерферона для выявления инфекции Mycobacterium tuberculosis — США. MMWR 59 (RR05), 1.
2. www.gnowee.net. Справочная библиотека QuantiFERON: (по состоянию на 13 апреля 2017 г.).
3. Центры по контролю заболеваний, Региональные учебные и медицинские консультационные центры (RTMCC), веб-сайт. www.cdc.gov/tb/education/rtmc/ default.html. (по состоянию на 13 апреля 2017 г.).

Тестирование на ТБ — правда о ТБ

Если ваш терапевт подозревает, что у вас может быть ТБ, он отправит вас на тестирование.Если у вас есть туберкулез, лучше узнать об этом как можно скорее. Отсрочка лечения увеличивает вероятность того, что у вас могут развиться долгосрочные проблемы со здоровьем, и может подвергнуть риску близких вам людей.

Виды тестов на туберкулез

Существует ряд тестов, позволяющих определить, есть ли у вас туберкулез, например анализ мокроты, посев и рентген.

Рентген грудной клетки

Рентген грудной клетки может показать повреждение ваших легких, но вам могут потребоваться дополнительные тесты, чтобы доказать, что у вас туберкулез, например, анализы мокроты и посева или сканирование.

Исследование мокроты

Лаборатория будет использовать микроскоп для исследования мокроты (мокроты), которую вы откашливаете. Если в мокроте есть микробы туберкулеза, у вас туберкулез легких или горла (туберкулез легких). Этот тест также помогает врачам понять, насколько вы заразны.

Биопсия

Если есть подозрение, что у вас туберкулез, но не легкие или горло, врач может взять биопсию для проверки на туберкулез. Это небольшой образец ткани или жидкости, взятый из того места, где предположительно находится туберкулез.

Тест на культуру

Этот тест использует вашу мокроту или образец ткани для выращивания любых бактерий туберкулеза, которые могут там присутствовать. Он сообщает врачам, насколько вы заразны и устойчив ли ваш туберкулез к каким-либо антибиотикам. Это помогает убедиться, что они назначат вам комбинацию лекарств, которые будут вас лечить. Поскольку культура туберкулеза растет медленно, для получения некоторых результатов может потребоваться до восьми недель.

Тестирование на латентный TB

Если вы проходите тестирование на латентный туберкулез, вам могут быть предложены два типа тестов:

Кожная проба на туберкулез

Кожная проба (также называемая пробой Манту) — это инъекция небольшого количества экстракта туберкулина под кожу предплечья.Если вы подвергались воздействию бактерий туберкулеза в прошлом, ваша кожа может стать приподнятой и красной, что может означать положительный результат. Обычно это не болезненно, но может вызывать зуд. Вы также можете получить положительный результат, если прошли вакцинацию против туберкулеза (так называемая БЦЖ).

Тест ИГРА

Анализ высвобождения гамма-интерферона (IGRA) — это анализ крови, с помощью которого можно диагностировать латентный ТБ по клеткам иммунной системы в крови.

Вполне вероятно, что вам также понадобится рентген грудной клетки и оценка у врача или медсестры-специалиста.

Обследование перед вакцинацией БЦЖ

Перед вакцинацией БЦЖ людям делают кожную пробу (также называемую пробой Манту). Это инъекция небольшого количества экстракта туберкулина под кожу предплечья. Если результат теста отрицательный, вам могут назначить БЦЖ в течение следующих трех месяцев.

Узнайте больше о диагностике туберкулеза в нашей информационной брошюре для пациентов, туберкулез и его диагноз

Прочтите, чтобы узнать о лечении туберкулеза

Временная динамика внутрикожного цитокинового ответа на туберкулин у крупного рогатого скота, вакцинированного БЦЖ Mycobacterium bovis, с использованием пробоотборных микроигл

Изготовление пробоотборных микроигл каждая длиной 1400 мкм, распределенная в виде ромба на круглой области размером 1 см

² .Вся пластырь имеет диаметр 20 мм и изготовлен из медицинской нержавеющей стали. Изготовленная на заказ опора из ПТФЭ / силикона (Septa 27236, Sigma) была прикреплена к задней части каждого пластыря с микроиглами с помощью суперклея для простоты использования и обеспечения равномерного введения игл в образцы кожи. Для создания участков SMN иглы были функционализированы гидрогелевым покрытием на основе альгината, как описано ранее ¹⁰ . Вкратце, после обработки кислородной плазмой (10 мин, кислородная плазма мощностью 18 Вт, произведенная плазменным очистителем PDC-32G) 200 мкл 0.01 мас.% Раствор поли (L-лизина) (150–300 кДа, Sigma, P4832) был нанесен пипеткой и высушен на каждой микроигле с образованием адсорбированного слоя, который впоследствии будет способствовать электростатической адгезии альгинатного гидрогеля. Объем 200 мкл раствора альгината (1,16 мг альгината (молекулярная масса: 150–250 кДа, вязкость: 100–300 мПа.с, соотношение Г / М: ≥ 1, эндотоксины: ≤ 100 EU / г; PRONOVA SLG100, FMC) BioPolymer) и 4,66 мг сахарозы (Sigma) в 200 мкл воды) пипеткой наносили на каждую матрицу микроигл и сушили на воздухе при 25 ° C в течение не менее 4 часов.Наконец, 200 мкл сшивающего раствора (20 мМ CaCl ₂ ) пипеткой наносили на каждый пластырь и сушили при 25 ° C в течение не менее 12 часов. Для визуализации слоя пробы альгинат смешивали с 10 мкл синего красителя Эванса (10 мг / мл, Sigma) перед нанесением покрытия на матрицу микроигл.

Нанесение SMN на эксплантаты ткани кожи крупного рогатого скота

Образцы ткани кожи из области шеи (такой же, как место инъекции туберкулина) животных были получены на скотобойне, инспектированной Министерством сельского хозяйства США в Центральной Пенсильвании.Ткань на короткое время промывали 70% этанолом на месте, а затем транспортировали в PBS (на льду) в лабораторию. По прибытии в лабораторию ткань хранилась в среде DMEM (с пенициллином-стрептомицином) при 4 ° C до использования. После бритья кожных эксплантатов SMN прижимали к эксплантированной коже путем легкого надавливания пальцами и поддерживали адгезию с помощью водонепроницаемой ленты 3 M Nexcare. Обработанную кожу окрашивали трипановым синим для проникновения иглы. Через 30 минут при 37 ° C SMN осторожно удаляли с эксплантата кожи и погружали в 200 мкл PBS, содержащего 100 мМ EDTA, и инкубировали при 37 ° C на шейкере при 150 об / мин в течение 30 минут.Супернатант собирали и количественно определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA, R&D Systems, DY5930) на иммуноглобулин G (IgG).

Иммунизация телят БЦЖ

Эксперименты проводились в соответствии с лицензией на проект Министерства внутренних дел Великобритании, предоставленной в соответствии с Законом о животных (научные процедуры), и после одобрения экспериментов местным советом по надзору за благополучием и этикой животных. Все процедуры для животных в Агентстве по охране здоровья животных и растений (APHA) были одобрены Советом APHA по защите животных и этике (AWERB) в соответствии с соответствующими руководящими принципами и правилами, и все авторы соблюдали рекомендации ARRIVE.Телята (трехмесячного возраста, самцы, голштино-фризские породы или их кроссы) были получены из британских стад в Зоне низкого риска, официально свободных от туберкулеза. Их вакцинировали подкожно 1–4 × 10 ⁶ КОЕ БЦЖ, датский штамм SSI 1331 (AJ Vaccine, Копенгаген, Дания). Образцы крови были взяты до вакцинации и через 6 недель после вакцинации. Кожные тесты и сбор ISF SMN проводились через 6 недель после вакцинации.

Однократная цервикальная кожная туберкулиновая проба (SCT) и процедура отбора проб

PPD-B (3000 МЕ / мл, Thermo Fisher, Schlieren, Швейцария) вводили внутрикожно в стандартный участок SCT (участок 1, рис.1D) на шее вакцинированных телят и увеличение кожной реакции, измеренное через 72 часа. Во время инъекции SCT одинаковые количества и объемы PPD-B вводились в участок 2 (рис. 1D) на обоих участках шеи. Образцы из этих участков отбирали с помощью микроигл для отбора проб в течение 10 мин. Перед инъекцией PPD-B участки для взятия пробы были тщательно выбриты. Животные были случайным образом разделены на две группы по 5 телят. Одна группа была взята путем нанесения SMN на участок 2 на одной стороне шеи без инъекции PPD-B (T0), и на участок 2, который получил PPD-B, на другой стороне шеи, через 48 часов после PPD- Инъекция B (T48).Второй группе телят инъецировали PPD-B в участок 2 с обеих сторон их шеи и отбирали пробы таким же образом через 24 и 72 часа после инъекции туберкулина (T24, T72), ISF элюировали из SMN, как описано выше. Этот протокол инъекции был настроен так, чтобы у каждого животного брали пробы только один раз на каждом участке с помощью микроигл. Пилотное исследование показало, что SMN не останутся в коже, если не будет оказываться какое-либо давление в течение всего времени отбора проб.

Анализ высвобождения гамма-интерферона (IGRA)

Была собрана гепаринизированная кровь и аликвоты 0.25 мл помещали в 96-луночные планшеты. Добавляли антиген (0,025 мл / лунку), а именно бычий PPD (PPD-B, конечная концентрация анализа 300 МЕ / мл), птичий PPD (PPD-A, конечная концентрация анализа 250 МЕ / мл), Pokeweed Mitogen в качестве положительного контроля ( Конечная концентрация 10 мкг / мл) и контроль без антигена (только среда) в течение 20 часов при 37 ° C в присутствии 5% CO ₂ , после чего клеточные супернатанты удаляли и хранили при -80 ° C до тех пор, пока они не потребовались. . Количественное определение IFN-γ в супернатанте культуры цельной крови определяли с использованием коммерчески доступного набора для твердофазного иммуноферментного анализа BOVIGAM (ELISA) (Thermo Fisher, США).Результаты выражали как оптическую плотность при 450 нм (OD ₄₅₀ ) для культур, стимулированных PPD бычьего туберкулина (PPD-B), и OD ₄₅₀ для культур без антигена.

Мультиплексный анализ бычьих цитокинов / хемокинов

Цитокины / хемокины в интерстициальной жидкости и образцах плазмы были количественно определены с использованием индивидуализированного мультиплексора для крупного рогатого скота (MILLIPLEX MAP Custom Bovine Cytokine / Chemokine Magnetic Bead Premixed 15 plex Panel, Merck 16 plex Panel, Merck 16 plex Panel, Merck 16 plex Panel) .Образцы промежуточной жидкости без плазмы и без ЭДТА (после замены буфера с использованием колонок Zeba Spin Desalting Columns, Thermo Fisher) размораживали, смешивали и центрифугировали при 1000 g в течение 10 мин. После разведения плазмы (1: 2 и 1:10 в буфере для анализа, входящем в набор) и интерстициальной жидкости [1: 2 в RPMI 1640/20% FCS (Gibco Life Technologies, Великобритания)] 25 мкл каждого образца обрабатывали в дубликаты (интерстициальная жидкость) или два разных разведения (плазма) в соответствии с инструкциями производителя и проанализированы на Luminex 200 для определения IL-1α, IL-1β, IL-1RA, IL-2, IL-4, IL-6, IL- 8, IL-10, IL-17A, IFN-γ, TNF-α, CCL2 (MCP-1), CCL3 (MIP-1α), CCL4 (MIP-1ß) и CXCL10 (IP-10).Программное обеспечение для построения кривой иммуноанализа Belysa использовали для расчета концентраций по данным средней интенсивности флуоресценции (MFI). На графиках показаны только значения ≥ нижнего предела количественного определения (LLoQ; определяется программным обеспечением). Для образцов интерстициальной жидкости общее количество цитокинов рассчитывали с использованием конечного объема образца, полученного при элюировании с помощью микроигл для отбора образцов.

Статистический анализ

Статистический анализ проводился с использованием Prism v7 (GraphPad San Diego, CA, USA).Ответы на IGRA и цитокины крови анализировали с помощью парных двусторонних t-критериев. Ответы кожных проб между участками 1 проанализированы с помощью U-критерия Манна – Уитни (двусторонний). Временное развитие цитокиновых и хемокиновых ответов в ISFs оценивали с помощью двустороннего теста Краскела-Уоллиса с применением пост-теста Данна. Уровень значимости (альфа) был установлен на уровне 5%.

Формат отчета об испытаниях Манту — заполнение онлайн, для печати, заполняемое, пустое

Комментарии и справка по формату отчета tb

Видеоинструкция и помощь по заполнению и заполнению протокола испытания Манту

Инструкции и справка по образцу формы отчета об испытании ТБ

Важно, чтобы кожная проба у человека с 2 туберкулезом была сделана правильно и четко читалась. Для этого нужна практика. Ваши навыки проведения теста. Считывание результатов и правильное реагирование. необходимые материалы и оборудование встретиться с клиентом, чтобы объяснить результаты теста получить информированное согласие и убедиться, что нет противопоказаний для проведения теста, ответить на любые вопросы и убедиться, что клиент может вернуться в течение 48-72 часов, чтобы начать считывание кожного теста с руки гигиена, затем проверьте, хранился ли туберкулин в соответствии с инструкциями и не просрочен, составьте ровно 0.1 миллилитр туберкулезного препарата очистите место инъекции спиртовым тампоном и дайте высохнуть скосом иглы вверх вставьте иглу под углом 15 градусов чуть ниже поверхности кожи, вы почувствуете некоторое сопротивление, поскольку туберкулин вводится правильно. в результате инъекции образуется колесо диаметром от 6 до 10 миллиметров, если колесо такого размера не появляется, испытание необходимо повторить на расстоянии 5-10 сантиметров от первого участка или на противоположной руке утилизируйте иглу в контейнере для биологически опасных материалов, осторожно промокните любую кровь ватным тампоном не давите на колесо и не накрывайте место пластырем. снимите перчатки, выполните гигиену рук и заполните необходимую документацию. Наблюдайте за клиентом в течение 15 минут на предмет возможной аллергической реакции. Прочтите кожные пробы по телевизору через 48-72 часа. вводят туберкулоид. Начните с гигиены рук при хорошем освещении. Осмотрите руку клиента. Слегка пальпируйте участок, чтобы нащупать твердый приподнятый и плотный отек. n длительность документа равняется нулю миллиметрам, если длительность обнаружена, расположите края продолжительности на поперечной оси рычага в том же направлении, что и ремешок часов, используйте шариковую ручку, удерживаемую под углом 45 градусов, чтобы отметить внешние края по продолжительности ручка будет останавливаться на границе продолжительности использовать штангенциркуль для измерения диаметра документа по продолжительности в миллиметрах уплотнения покраснение может возникать с уплотнениями или без них и не включается в измерительный документ любые пузыри с или без по продолжительности это может указывать на аллергическую чувствительность. Рекомендуется соблюдать осторожность в отношении последующего тестирования. Полная документация результата кожной пробы. Предоставьте запись для клиента, если необходимо, сообщите клиенту о любых следующих шагах. проконсультируется с вами относительно значимости показаний длительностью от 0 до 4 миллиметров. Считается положительным, если у клиента ВИЧ. инфекция с подавлением иммунитета и вероятность заражения ТБ высока, например, клиент из группы с высокой распространенностью ТБ-инфекции находится в тесном контакте с активным заразным пациентом или имеет ненормальный рентген грудной клетки продолжительностью от 5 до 9 лет. миллиметры считаются положительными, если они есть у клиента…

Mycobacterium Tuberculosis — Часть 2 — Проба Манту, TT, туберкулиновая кожная проба — Labpedia.net

22 сентября 2020 г.

Образец

• Этот тест проводится на коже пациента.

Показания

1. Для диагностики подозрения на туберкулез.
2. Скрининг людей из группы риска, таких как:
   1. Медицинский работник.
   2. Иммигрант в зону повышенного риска.
   3. Потребитель наркотиков IV.
   4. Пациенты с повышенным риском развития активного туберкулеза.
3. Таким образом, этот TT должен быть нацелен на группу высокого риска, называемую целевым туберкулиновым тестированием, а не на людей с низким риском, называемых скрининговым тестом.

Патофизиология Mycobacterium Tuberculosis:

1. Туберкулез — вторая ведущая причина смерти в мире.
   1. Ежегодно умирает около 3 миллионов человек.
   2. 7% всех смертей происходят во всем мире.
   3. Глобальная эпидемия может усугубиться из-за лекарственно-устойчивых организмов и ВИЧ-инфицированных.
2. Микобактерии широко распространены в нашем мире, их называют кислотоустойчивыми бациллами, потому что они сопротивляются обесцвечиванию после протравливания сильной кислотой.
   1. Свойство окрашивания связано с составом клеточной стенки, которая имеет высокое содержание липидов.
   2. Кислотостойкость является результатом образования комплексов между красителем и миколовой кислотой, одним из липидов клеточной стенки.
3. Лабораторные характеристики Mycobacterium tuberculosis:
   1. Это слабые грамположительные организмы.
   2. M. tuberculosis имеет размер от 0,2 до 5,0 мкм бациллы.
   3. Это тонкие бациллы, не имеющие спор.
   4. Облигатный аэроб.
   5. Он растет в областях с высоким давлением O2 (pO ₂ ), таких как ткань верхушки легкого.
   6. Это медленнорастущий организм, которому для роста требуется 1-2 недели и более.
   7. Он имеет высокое содержание липидов в клеточных стенках, таких как микозиды, и непроницаем для пятен по Граму.
      1. Мазки обрабатывают концентрированным карбол-фуксином в течение 10-20 минут, который действует как протрава при нагревании, а затем обесцвечивают 20% -ной серной кислотой + спирт, теперь бациллы будут иметь ярко-красный цвет.

         Кислотоустойчивые туберкулезные палочки

   8. Эти бактерии нуждаются в высокообогащенной среде, среде Левенштейна-Йенсена. Эти бактерии не растут на обычных средах.
      1. Среда Левенштейна-Йенсена содержит цельные яйца, аспаргин, глицерин и малахитовый зеленый, которые подавляют рост загрязняющих веществ.
      2. Образец инкубируют при 37 ° C в течение 2–3 недель, но культуру следует хранить в течение 6–8 недель.
   9. В настоящее время эти бактерии идентифицируются с помощью флуоресцентной микроскопии.
4. Они делятся на две группы:
   1. Устройство для быстрого выращивания, которое образует колонии за 2–3 дня.
   2. Медленное выращивание, которое занимает от 2 до 3 недель.
5. Важными с медицинской точки зрения микобактериями являются:
   1. M. tuberculosis.
   2. M. bovis.
   3. M. leprae.
   4. Атипичные микобактерии.
6. Mycobacteria tuberculosis вызывает медленно прогрессирующую хроническую инфекцию, обычно поражающую легкие.
   1. Но другие органы не щадят этой болезни.
   2. Основным источником является так называемое открытое заболевание секрета легких.

Принцип ТТ

1. TT — важный тест как для диагностики, так и для профилактики туберкулеза.
   1. Этот тест более чувствителен, чем рентген грудной клетки.
2. Этот тест проводится на пациенте, где очищенные производные белка (PPD), стабилизированные Tween 80 (наночастицы, покрытые полисорбатом 80), вводятся в кожу (интрадермально).
   1. Стандартный исследуемый материал средней прочности, 5 туберкулиновых единиц, PPD.
3. Лимфоциты распознают PPD как антиген и вызывают реакцию типа IV, опосредованную клетками.

Патогенез гранулемы туберкулеза

4. У человека, болеющего туберкулезом или перенесшего туберкулез в прошлом, будет местная воспалительная реакция.
5. Этот тест дает тяжелую реакцию в случае активного туберкулеза или вакцинированных пациентов. Возможно шелушение кожи.

Чтение тестовой зоны:

1. Считайте контрольную область через 48-72 часа после инъекции.
2. отрицательный случай, когда нет уплотнения.
3. В положительных случаях уплотнение в месте инъекции появится через 48-72 часа.

   Тубекулин Тест Маунто

3. Американское торакальное общество и CDC предлагают следующие критерии разным группам населения:
4. Индуцирование <5 мм D наблюдается в:
   1. Пациенты с ВИЧ или иммунодефицитное состояние.
   2. Или пациент с дефектом CMI.
   3. Тесный контакт с активным больным туберкулезом.
   4. Пациент с рентгенологическим диагнозом старого туберкулеза.
   5. Пациенты с фиброзом или кальцинозом в легких, которые указывают на перенесенный туберкулез легких.
5. Индуцирование> 10 мм в диаметре.
   1. В / в наркопотребители.
   2. Жильцы дома престарелых.
   3. Путешественник из эндемичной зоны или зоны повышенного риска по туберкулезу, заключенные, бездомные, наркоманы и другие хронически больные пациенты.
   4. Работник учреждения по уходу на дому.
   5. Недоедание, постгастрэктомия, прием стероидов и диабет.
6. Индикация диаметром> 15 мм. Видно на:
   1. Больной активной формой туберкулеза.
   2. Все пациенты, не соответствующие вышеуказанным критериям.
7. Среди медицинских работников или других людей, которым необходимо повторное тестирование, реактивная реакция может быть ошибочно принята за конверсию.
   3. В тех случаях, когда первичная реакция отрицательная или результат вызывает сомнения, введите вторую дозу через одну неделю.
   4. Если в следующем году размер уплотнения увеличится более чем на 6 мм, можно предположить новую туберкулезную инфекцию.

Противопоказания

1. Пациент с активным туберкулезом, потому что у него будет очень тяжелая реакция.
2. Пациент, которому сделана вакцинация Bacillus Calmette Guerin (BCG).
3. Не использовать у истощенного пациента.

Положительный результат теста:

1. Активный случай туберкулеза.
2. Другие типы микобактериальных инфекций.

Отрицательный результат теста:

1. Хронически больной с иммунодефицитом.
2. Пациент, не зараженный туберкулезом.
3. Выявлено 20% ВИЧ-отрицательных и 40% ВИЧ-инфицированных больных туберкулезом.
4. Вирусная инфекция, включая корь и краснуху, может подавлять реактивность туберкулина, однако этот эффект временный.

Из-за ограниченной чувствительности и специфичности туберкулиновой кожной пробы появились новые методы диагностики M.туберкулезная инфекция разрабатывается как иммуноабсорбент, связанный с сэндвич-захватом.

.