Птеригиум мкб: Ошибка 404. Файл не найден

Содержание

Другие варианты синдрома Тернера (дети, стационар)

МКБ: Q96.8

Другие варианты синдрома Тернера (дети, стационар) — это хромосомная патология, обусловленная частичной или полной Х-моносомией. Синдром Тернера в подавляющем большинстве случаев встречается у девочек, крайне редко наблюдается у мальчиков.

Симптомы других вариантов синдрома Тернера у детей проявляются короткой шеей со складками кожи по бокам (птеригиум-синдром), врожденными пороками сердца, лимфостазом, отечностью стоп и кистей и др.

Дети с синдромом Шерешевского-Тернера могут рождаться недоношенными, однако даже в случае доношенной беременности росто-весовые показатели ребенка нередко снижены (масса тела 2500—2800 г, длина 42-48 см).

Наиболее частыми сердечно-сосудистыми пороками, сопровождающими синдром Шерешевского-Тернера, служат ДМЖП, открытый артериальный проток, коарктация аорты, аневризма аорты. Со стороны мочевыделительной системы у больных может отмечаться наличие подковообразной почки, удвоение лоханок, стеноз почечных артерий, приводящий к артериальной гипертензии. Нарушения развития зрительной системы при синдроме Шерешевского-Тернера в большинстве случаев представлены птозом, косоглазием, близорукостью, дальтонизмом.

В случае диагноза другие варианты синдрома Тернера, чтобы узнать как вылечить другие варианты синдрома Тернера, следует обратиться к врачам, которые указаны в стандарте оказания медицинской помощи.

Лечение других вариантов синдрома Тернера у детей в данном случае подразумевает прием лекарственных препаратов из стандарта оказания медицинской помощи.

Информация предоставлена на основании приказа Министерства здравоохранения РФ от 29 декабря 2012 г. N 1659н «Об утверждении стандарта специализированной медицинской помощи детям при задержке роста»

Biogenom показывает все мероприятия для подтверждения диагноза, которые указаны в стандартах Минздрава РФ.

Точный список мероприятий может определить только Ваш лечащий врач.

Диагностика заболевания

Получите персональную консультацию врача по Вашему состоянию здоровья.

Для диагностики заболевания проводят следующие мероприятия:

Функциональные исследования

Осмотр периферии глазного дна трехзеркальной линзой Гольдмана

Регистрация электрокардиограммы

Рентгенография кисти руки

Магнитно-резонансная томография головного мозга

Ультразвуковое исследование щитовидной железы и паращитовидных желез

Эхокардиография

Компьютерная томография головы

Компьютерная томография головы с контрастированием структур головного мозга

Магнитно-резонансная томография головного мозга с контрастированием

Периметрия

Ультразвуковое исследование матки и придатков трансабдоминальное

Ультразвуковое исследование надпочечников

Ультразвуковое исследование органов мошонки

Ультразвуковое исследование почек и надпочечников

Электроэнцефалография

Лабораторные исследования

Анализ крови биохимический общетерапевтический

Анализ мочи общий

Исследование тиреотропина сыворотки крови

Исследование уровня гликированного гемоглобина в крови

Исследование уровня глюкозы в крови

Исследование уровня инсулиноподобного ростового фактора I в крови

Исследование уровня неорганического фосфора в крови

Исследование уровня пролактина в крови

Исследование уровня свободного тироксина (T4) сыворотки крови

Исследование уровня щелочной фосфатазы в крови

Общий (клинический) анализ крови развернутый

Анализ крови по оценке нарушений липидного обмена биохимический

Исследование уровня ионизированного кальция в крови

Исследование уровня калия в крови

Исследование уровня лютеинизирующего гормона в сыворотке крови

Исследование уровня натрия в крови

Исследование уровня общего кальция в крови

Исследование уровня свободного кортизола в крови

Исследование уровня фолликулостимулирующего гормона в сыворотке крови

Цитогенетическое исследование (кариотип)

Идентификация генов

Исследование уровня инсулина плазмы крови

Исследование уровня общего тестостерона в крови

Исследование уровня общего эстрадиола в крови

Исследование уровня соматотропного гормона в крови

Определение объема мочи

Определение удельного веса (относительной плотности) мочи

К каким специалистам следует обращаться

Ежедневный осмотр врачом- детским эндокринологом с наблюдением и уходом среднего и младшего медицинского персонала в отделении стационара

Прием (осмотр, консультация) врача- детского эндокринолога первичный

Прием (осмотр, консультация) врача-офтальмолога первичный

Составление родословной

Прием (осмотр, консультация) врача-генетика первичный

Прием (осмотр, консультация) врача-офтальмолога повторный

Прием (осмотр, консультация) врача-акушера-гинеколога первичный

Прием (осмотр, консультация) врача-акушера-гинеколога повторный

Прием (осмотр, консультация) врача- детского кардиолога первичный

Прием (осмотр, консультация) врача- детского кардиолога повторный

Прием (осмотр, консультация) врача- детского уролога-андролога первичный

Прием (осмотр, консультация) врача- детского уролога-андролога повторный

Прием (осмотр, консультация) врача-невролога первичный

Прием (осмотр, консультация) врача-нейрохирурга первичный

Прием (осмотр, консультация) врача сурдолога-оториноларинголога первичный

Прием (осмотр, консультация) врача сурдолога-оториноларинголога повторный

Прием (осмотр, консультация) врача-травматолога-ортопеда первичный

Прием (осмотр, консультация) врача-травматолога-ортопеда повторный

Лечение заболевания

Для лечения заболевания используются следующие группы лекарственных препаратов:

Инсулины короткого действия и их аналоги для инъекционного введения

Инсулин растворимый [человеческий генно- инженерный]

Другие ирригационные растворы

Декстроза (Глюкоза буфус, Глюкоза-Э, Глюкостерил)

Агонисты имидазолиновых рецепторов

Клонидин (Клофелин)

Производные 3-оксоандрост-4-ена

Тестостерон [смесь эфиров] (Омнадрен 250, Сустанон-250)

Тестостерон (Андрогель, Небидо, Тестостерона пропионат)

Природные и полусинтетические эстрогены

Эстрадиол (Дивигель, Климара, Прогинова)

Производные прегнадиена

Дидрогестерон (Дюфастон)

Соматропин и его агонисты

Соматропин (Джинтропин, Нордитропин НордиЛет, Растан)

Глюкокортикоиды

Гидрокортизон (Кортеф, Латикорт, Локоид Крело)

Гормоны щитовидной железы

Левотироксин натрия (L-Тироксин 100 Берлин-Хеми, L-Тироксин 125 Берлин-Хеми, Левотироксин)

Окончательный перечень функциональных и лабораторных исследований, консультаций врачей, а также лекарственная терапия определяются лечащим врачом.

Профилактика заболевания

Психологическая адаптация

Оперативные вмешательства | Алматинская многопрофильная клиническая больница

№

Наименование услуг

Цена услуги в тенге на 2021г

Нейрохирургические операции

1 категория сложности

Удаление грыжи диска, краниопластика, невролиз, трепонация черепа, пластика дефектов черепа и др. операции длительностью менее часа

18 100

2 категория сложности

Перелом позвоночника, спондилодез и др. операции длительностью 2 часа

26 000

3 категории сложности

Опухоль головного мозга, аневризма сосудов и др. операции длительностью 3 часа

28 200

Урологические операции

1 категория сложности

«SEETIO AETAE» и низведение яица

17 800

Операция Иванисевич, полиэктомия, эпидидимэктомия

11 000

Операция по Брегману (удаление водянки)

11 000

Аденомоэктомия

35 000

2 категория сложности

Пиеллитотомия, нефропексия по Ривоиру

32 100

Нефроэктомия, резекция мочевого пузыря, пересадка мочеточника

30 000

Хирургические операции

1 категория сложности

Аппендэктомия, струмэктомия, симпатэктомия, винэктомия, грыжесечение, геморойэктомия, иссечение свища

19 600

Парапроктит, секторальная резекция флегмоны молочной железы

19 600

2 категория сложности

Ушивание перфоративной язвы желудка, холецистэктомия, закрытие гастростомы, аутодермопластика, эхинококоэктомия печени, спленэктомия.

34 500

3 категории сложности

Резекция желудка, торокотомия, механическая желтуха, резекция печени, эхинококоэктомия легких

43 200

4 категория сложности

Пластические операции (без стоимости пластического материала-протезы)

31 200

Гинекологические операции

1 категория сложности

Искусственный аборт, полипэктомия, диагностическое выскабливание полости матки, вскрытие абсцесса бартолиновой железы, эксцизия шейки матки, консервативная миомэктомия (откручивания узла)

6 100

2 категория сложности

Внематочная беременность, цистэктомия

17 800

3 категории сложности

Экстирпация матки, надвлагалищная ампутация матки, чрезвлагалищная экстирпация и ампутация матки, пластическая операция на промежности и влагалище, Кесарево сечения

27 000

Травматологические операции

1 категория сложности

ПХО (без повреждения мышц и сухожилия)

4 900

Закрытия репозиция и наложения гипсовых повязок в\конечности и н\конечности

3 300

Удаление доброкачественных опухолей, остеомы, бурситы, экзостозы, ПХОР (обширные размозженные), вскрытие флегмон, абсцессов, некроэктомия, удаление инородных тел из туловища, закрытое вправление крупных суставов, удаление штивтов из в\к и н\к, свободная кожная пластика 10-15% удаление пластины в\к и н\к, удаление инородных тел в\к голени, стопы)

14 700

Удаление штивтов из ключицы, предплечья, кисти и стопы, демонтаж аппарата Елизарова в\к и н\к, кожная пластика малой площади, вскрытие флегмон, некроэктомия с малой площадью, внутрикостное промывание кисти, стопы, предплечье, голени.

18 100

Репозиция переломов мелких костей. Обработка ограниченных по площади ожогов, вправление вывихов мелких суставов, травматический отрыв пальцев кисти и стопы.

13 500

Пункция суставов

3 000

Скелетное вытяжение

5 900

2 категория сложности

МОС предплечья, лодыжек, внутреннего мыщелка плеча, надколенника, восстановление межберцового синдесмоза, ортопедических операции мелких суставов

33 000

Восстановление АКС, минескэктомия, сбоводная кожная пластика больше 15%, фистуло-секвестрэктомия кисти, стопы, восстановление сухожилий кисти, стопы, плеча, предплечья, бедра, ампутация в\к и стопы н\к.

20 800

МОС кисти стопы

24 100

3 категории сложности

МОС плеча со штифтами, МОС бедра со штифтами, МОС голени со штифтом, МОС аппаратом Елизарова в\к и н\к, МОС плеча с платинами, МОС бедра с шурупами, МОС голени пластинами, МОС шейки бедра, МОС крыши вертлужной впадины, восстановление симфиза костей таза.

32 500

Фистуло-секвестрэктомия в\к, н\к, привычный вывих плеча надколенника

18 900

Артродез коленного и голеностопного сустава, артродез тазобедренного сустава, костно-пластические операции в\к и н\к, открытое вправление в\к и н\к, костная аутопластика шейки бедра, удлинение сегмента в\к и н\к.

43 600

Ампутация н\к, бедра, голени.Костно пластические операции в\к и н\к. Восстановление крестообразных связок, удлинение сегмента в\к и н\к, Восстановление ахилового сухожилия, восстановление сухожилия длины головки двуглавой мышцы плеча

20 200

Оториноларингологические операции

1 категория сложности

Вторичный шов, удаление зуба, шинирование, удаление кист миндалин, вскрытие абсцесса перегородки носа пункция придаточных пазух носа парацентез вскрытие фурункулов

12 900

2 категория сложности

Резекция перегородки носа, конхотомия, папиллотомия гортани, фибротомия гортани, трахеостомия, рассечение синехий, вазотомия полипотомия носа, полипотомия уха, удаление фибромартером липом ЧЛХ, ЛОР

16 300

Тонзиллэктомия

10 400

Удаление врожденных свищей, периостомия, гайморотомия, этмоидотомия, секвестрэктомия, репозиция скуловой кости, репозиция костей носа, застарелые переломы носа-устранение деформации наружного носа, биопсия гортани, носа, глотки.

22 800

3 категории сложности

Фротомия, удаление доброкачественных образований ЛОР и ЧЛХ, мастоидотомия, удаление слюной железы , уронопластика, остеосинтез, пластика заушной раны, гайморотомия, при перфорации гайморовой пазухи

27 200

4 категория сложности

Хейлопластика, пластические операции ЛОР, ЧЛХ, общеполостные санирующие операции на ухе. Формирование филатовского стебля, тимпанопластика.

28 400

Офтальмологические операции

1 категория сложности

Халязин, папилома и ксантелазма век, вскрытие абсцесса век, флегмоны слезного мешка, атеромы век, снятие швов в операционной

22 900

2 категория сложности

Трихиаз век, заворот и выворот век, кисти конъюктивы, птеригиум, зондирование слезоносового канала и др.

10 045

3 категории сложности

Гипотензивные операции, экстрация катаракты без имплантации ИОЛ, энуклеции, эвисцерации, операции при косоглазии и др

55 100

4 категория сложности

Интраокулярная линза Crysnal (факоэмульсификация катарактыс имплат. ИОЛ тонельная экстракапсулярная экстракция ИОЛ различные виды реконструктивных операции с импл. ИОЛ и др

161 000

Интраокулярная линза Natural

227 000

что такое и как лечить.

Одним из заболеваний конъюнктивы является птеригиум или крыловидная плева. Он представляет собой разрастание ее тканей до роговичной области. Такой дефект расположен во внутреннем углу глаза и имеет треугольную форму. В большинстве случаев новообразование развивается медленно, из-за чего обнаружить его на начальных стадиях сложно. Иногда конъюнктива разрастается очень быстро, влияя на зрение. Основная причина развития птеригия – отрицательное воздействие разнообразных факторов (от пыли до химикатов). Заболеванию подвержены все люди, однако представители народов юга и севера, возраст которых перешел среднюю планку, страдают им чаще. Офтальмологи дают такое определение крыловидной плевы:

Птеригиум код по МКБ-10

Н11.0 Птеригий

Причины развития птеригиума

Точного списка причин, которые становятся толчком к образованию разрастаний конъюнктивы, на сегодняшний момент нет. Однако риск развития заболевания повышается из-за таких факторов:

Чрезмерное воздействие ультрафиолета естественного происхождения на зрительные органы.
Попадание в глаза пыли или их раздражение по другим причинам.
Воздействие сильных ветров.
Наследственность.
Длительное нахождение за компьютером.
Постоянные воспалительные процессы конъюнктивы.

Такие проявления становятся причиной интенсивного роста сосудов. При их длительном разрастании увеличивается объем эпителиальной ткани. После в роговицу проникают фибробласты, генерирующие соединительную ткань. Все новообразования становятся одним целым, что и называется птеригиумом.

Виды птеригиума

Птеригиум может быть стационарным и прогрессирующим. Второй из них отличается тем что, головка новообразования выступает над роговицей. При этом сосуды, которые полны кровью и извиваются в разных направлениях, образуют полноценную сеть. По их состоянию определяют степень прогрессирования заболевания:

1-ая степень. Минимальная вероятность прогрессирования. Птеригиум при этом имеет атрофичный и прозрачный вид. Сквозь него можно увидеть сосуды эписклеры.

2-ая степень. Сосуды через птеригиум просматриваются плохо. Нарост выступает и выглядит полупрозрачным.

3-яя степень. Активность птеригиума возрастает. Он становится мутным, из-за чего через него невозможно увидеть сосуды.

В зависимости от клинического проявления выделяют такие стадии птеригиума:

На этой стадии поражается только лимб (область соединения роговицы и склеры). При этом больной не испытывает дискомфорта.
Между лимбом и краем зрачка (в середине расстояния между ними) располагается головка птеригиума. Перед ней развивается неправильный астегматизм. В оптической зоне образуется лёгкая степень правильного астигматизма. При этом возможно снижение зрения до показателей 0,9–0,7.

Локализация головки птеригиума меняется. Теперь ее местоположение – край зрачка. Роговица утолщается, из-за чего зрение падает до 0,5.

Показатели зрения на этой стадии 0,3–0,2. Развивается выраженный астигматизм. Головка птеригиума располагается в центральной роговичной области.
Головка птеригиума заходит за центр роговицы и разрастается дальше. Зрение становится ниже 0,1. При этом может развиться бельмо. В некоторых случаях конъюнктива срастается с веками или слезными органами.

В зависимости от стадии птиригиума выявляются определенные признаки заболевания.

Крыловидная плева может быть истинной (первичной) и ложной (вторичной). Истинный птиригиум характерен как проявление у людей пожилого возраста в результате негативного воздействия окружающей среды. Причиной возникновения ложной формы заболевания становится образование рубцов из-за механических повреждений конъюнктивы (травмы, ожоги, воспалительные процессы). Ложный птиригиум не имеет склонности к прогрессу, но его локализация возможна в любой области зрительных органов.

Симптомы птеригиума

Изначально птеригиум не доставляет дискомфорта. Первая его стадия выражается как незначительный косметический дефект. По мере прогрессирования заболевания выявляется такая симптоматика:

Помутнение роговицы в области периферии.
На роговице появляется мутный нарост, который чаще всего располагается со стороны носа.
Птеригиум раздражает нервные окончания, находящиеся внутри века. Из-за этого появляется чувство инородного тела в глазу.
Новообразование не только лишено слезной пленки, но и повреждает ту, которая находится на здоровом участке глаза. Из-за этого зрительные органы раздражаются и больной испытывает симптом «сухого глаза».
Зрение постепенно снижается из-за нарушения проникновения света к рецепторам глаза.

Воспалительный процесс при птеригиуме сопровождается зудом, покраснением, отеком и обильным выделением слезных желез.

Диагностика птеригиума

Птеригиум легко определить визуально. Последующие исследования направлены на выявление характеристик заболевания. При этом используются такие методы диагностики:

Биомикроскопия. С ее помощью определяется размер и степень распространения новообразования.
Офтальмоскопия предназначена для выявления стадии заболевания. Те же цели преследуют рефрактометрия и визометрия.
Кристаллография. Представляет собой исследование слезовыделительной функции с целью выявления дальнейшего распространения заболевания и возможности его рецидива.
Кератотопография. Таким способом определяется степень птиригиума и его форма.
Флюоресцентная ангиография. Метод выявления сосудистых изменений.

В соответствии с полученными результатами назначается лечение.

Лечение птеригиума

Для лечения крыловидной плевы используются консервативные и хирургические методы. В случае отсутствия дискомфортных ощущений и изменений зрительных функций, новообразование удаляют только при желании пациента. При этом назначаются лекарственные средства, заменяющие слезу, и медикаменты, останавливающие воспаление. Суть консервативного метода – исключение возможности разрастания тканей до роговичной области. Одна из возможных схем такого лечения при этом выглядит так:

Вылечить птеригиум окончательно может только операция. При этом используется лазер или трансплантат. На первых стадиях удалить крыловидную плеву можно воздействием на нарост лазерным лучом. Если заболевание распространилась до такой степени, что оболочка глаза подверглась сильному дефекту, то пораженную область заменяют на трансплантат. После операции применяются антибактериальные и противовоспалительные лекарственные средства. Стоит обратить внимание, что хирургическое вмешательство могут повлечь за собой ряд осложнений. Это развитие инфекции или диплопии, образование рубцовой ткани и отторжение трансплантата. Вот возможная клиническая картина при птеригиуме:

Из комментария видно, что в некоторых случаях даже операция не может стать гарантией для выздоровления.

Народные средства против птеригиума

Назначение народных средств при крыловидной плеве – снижение симптоматических проявлений. В этих целях глаза протирают заваренным чаем или настоем ромашки, которые помогают остановить воспалительный процесс. Отличным эффектом при этом обладают глиняные компрессы и капли на травах. Народные средства стоит применять как дополнение к основному лечению по совету врача.

Профилактика птеригиума

Вылечить птеригиум очень трудно. Поэтому лучше постараться снизить риск его развития. Профилактика заболевания подразумевает следование таким правилам:

Защищайте глаза от воздействия солнечных лучей.
Соблюдайте меры безопасности при работе с химикатами.
Старайтесь ограничить воздействие пыли на глаза.
Не трогайте глаза грязными руками, чтобы не занести в них инфекцию.
Работа за компьютером должна чередоваться с отдыхом.

Если избежать образования плевы не удалось, нужно незамедлительно обратиться к врачу.

причины, симптомы, диагностика и лечение

Факосклероз – это патология, которая сопровождается уплотнением хрусталика и изменением его морфометрических показателей. Клинические проявления включают в себя снижение остроты зрения, нарушение цветовосприятия, затруднение ориентации в сумерках. При миопической форме пациенты отмечают временное улучшение зрения при работе на близком расстоянии. Основные методы диагностики: визометрия, биомикроскопия, авторефрактометрия, ультразвуковое исследование (А-сканирование глаза). Консервативная терапия предполагает инстилляции препаратов на основе N-ацетилкарнозина. Хирургическое лечение сводится к факоэмульсификации с имплантацией ИОЛ.

Общие сведения

Факосклероз – это изменения хрусталика, которые представлены увеличением его массы и толщины. Патология встречается преимущественно среди лиц старше 55-ти лет, однако возможно возникновение и у лиц молодого возраста. В общей структуре заболеваемости хрусталика на долю факосклероза приходится 24,4%. Согласно статистическим данным, в 3/4 случаев в течение 5-ти лет развивается главное осложнение ‒ начальная катаракта. Представители обоих полов, различных рас, национальностей и регионов проживания болеют с одинаковой частотой.

Факосклероз

Причины факосклероза

Этиология остается до конца не изученной. Ранее в клинической офтальмологии факосклероз рассматривали как естественный инволютивный процесс у пациентов преклонного возраста. Однако склеротические изменения наблюдаются и молодых лиц (особенно с высокой степенью близорукости). Согласно результатам исследований, к числу факторов риска развития патологии относятся:

Курение. В условиях эксперимента было доказано, что табакокурение ведет к уплотнению хрусталиковых масс. Выраженность помутнения носит дозозависимый эффект. Прекращение курения способствует регрессии отдельных изменений и улучшению зрительных функций.

Хирургические вмешательства. Вероятность возникновения факосклероза возрастает при выполнении витрэктомии и газовой тампонады сетчатки. На протяжении 2-х лет после операции удается диагностировать поствитрэктомическую катаракту. Первичная хирургическая обработка ранений глаза повышает риск развития болезни.

Прием медикаментов. Назначение гиполипидемических препаратов предрасполагает к уплотнению центральных отделов хрусталиковых масс. Это наиболее выражено при их одновременном применении с макролидами из-за нарастания уровня циркулирующих в крови продуктов распада статина.

Травматические повреждения. Причиной склеротических изменений хрусталика могут становиться контузии и проникающие ранения глаз. Признаки факосклероза при этом выявляются в ранние сроки после травмы. Вероятность формирования набухающей катаракты высокая.

Патогенез

С возрастом масса и толщина хрусталика увеличивается, в то время как его участие в процессе аккомодации существенно снижается. По мере образования новых кортикальных слоев ядро сжимается и затвердевает. Данный процесс и лежит в основе развития факосклероза. Патогенез миопической формы напрямую связан с повышением концентрации натрия и кальция в цитоплазме клеток, а также снижением калия и глутатиона.

Химическая модификация и протеолитическое расщепление кристаллинов (хрусталиковых белков) приводит к появлению высокомолекулярных белковых агрегатов. Из-за их увеличения в размере возникают резкие колебания в локальном показателе преломления линзы. Это ведет к рассеиванию света и уменьшению прозрачности. Поэтому у пациентов пожилого возраста хрусталик приобретает желтоватую или коричневатую окраску.

Симптомы факосклероза

В патологический процесс оба глаза вовлекаются в разной степени. Основное клиническое проявление миопической формы – улучшение зрения вблизи на фоне пресбиопии. Пациенты отмечают, что постепенно могут отказаться от использования очков для работы. При этом снижается острота зрения вдаль. По мере образования кортикальных помутнений процесс подбора очковой коррекции затрудняется.

Со временем хрусталик меняет свою окраску, и больные предъявляют жалобы на то, что цвет окружающих предметов становится менее насыщенным. В темное время суток ухудшается ориентация в пространстве. При поражении обоих глаз симптомы факосклероза долгое время остаются незамеченными. Из-за резкого изменения показателей преломления возможно появление монокулярной диплопии.

Осложнения

Развитие патологии становится причиной расстройства аккомодации. С возрастом у пациентов прогрессирует пресбиопия. При одностороннем процессе нарушается бинокулярное и стереоскопическое зрение. Подобные поражения хрусталика в детстве возникают крайне редко, однако влекут за собой формирование амблиопии. Также патология сопровождается изменением клинической рефракции. В 76,4% случаев исходом факосклероза является катаракта.

Диагностика

При сборе анамнеза врач-офтальмолог обращает внимание на продолжительность заболевания, глазные травмы и проведенные ранее микрохирургические вмешательства (витрэктомия, введение газовой смеси). При объективном осмотре следует оценить положение и подвижность глаз, сравнить размеры и форму зрачков с обеих сторон. Комплекс методов диагностики факосклероза включает:

Визометрию. Степень снижения остроты зрения коррелирует с выраженностью склеротических изменений. Как правило, корригируемая острота зрения не превышает 0,5-0,8 дптр. При миопическом типе зрение вблизи может достигать 0,7-0,9 дптр.

УЗИ глаза (А-сканирование). Методика позволяет измерить толщину хрусталика, глубину передней камеры, а также длину переднезадней оси глаза. Проводят исследование после инстилляции анестетика. Необходимое положение пациента – вертикальное.

Биомикроскопию глаза. При осмотре глазного яблока с помощью щелевой лампы определяется уплотнение ядра хрусталика. Оно приобретает желтоватый оттенок. Эмбриональные швы не меняют своей окраски. В возрасте старше 55 лет незначительное уплотнение в сочетании с изменением цвета принято считать нормой.

Авторефрактометрию. Ранние проявления факосклероза не оказывают влияния на показатели рефракции. Однако при миопическом факосклерозе наблюдается уменьшение сферического компонента. В тоже время цилиндрическая часть остается неизменной.

Лечение факосклероза

Консервативная терапия

При выявлении начальных признаков факосклероза у пациентов без выраженной клинической симптоматики показано местное применение препаратов, содержащих N-ацетилкарнозин. Лекарственное средство обладает антиоксидантными свойствами, т. к. способно противостоять свободным радикалам. Оксидаза защищает хрусталик, а также роговицу и конъюнктиву от повреждения липидными пероксидазами. Консервативная терапия направлена на стабилизацию и улучшение зрительных функций.

Хирургическое лечение

Суть оперативного вмешательства заключается в факоэмульсификации с последующей имплантацией интраокулярной линзы. Операция показана при развитии клинических признаков зрительной дисфункции, миопической форме патологии или сопутствующих рефракционных расстройствах. Хирургическое лечение проводится в амбулаторных условиях. В послеоперационном периоде необходимы инстилляции антибиотиков, нестероидных противовоспалительных средств, глюкокортикостероидов.

Экспериментально лечение

На сегодняшний день на стадии клинических испытаний находится современный ингибитор факосклероза на основе пиреноксина и тиопронина. Результаты исследования показывают, что применение ингибитора факосклероза позволяет предупредить прогрессирование патологических изменений в хрусталике. Ученые полагают, что средство будет назначаться в возрасте после 55-60 лет при наличии первых симптомов заболевания или воздействии факторов риска.

Прогноз и профилактика

С превентивной целью используются поливитаминные комплексы и минеральные добавки. Однако, их применение противопоказано у больных с эксфолиативным синдромом. Первые объективные признаки повышения плотности хрусталиковых масс являются основанием для постановки пациента на диспансерный учет и офтальмологического осмотра не менее 2 раз в год.

Прогноз при данном заболевании для жизни и трудоспособности благоприятный. Своевременное выполнение оперативного вмешательства дает возможность восстановить остроту зрения до прежнего уровня.

Транскрипционное профилирование для идентификации ключевых генов и путей развития птеригиума

Ранее несколько групп проводили исследования микроматрицы ДНК птеригиума; однако в нескольких исследованиях использовалась RNA-Seq, которая имеет преимущества перед анализом ДНК-микрочипов (Rai et al., 2018). Bang et al. (2017) использовали RNA-Seq для изучения факторов комплемента и обнаружили, что несколько факторов не регулируются в птеригиуме по сравнению с нормальными тканями конъюнктивы (Bang et al., 2017). Основываясь на предыдущих исследованиях экспрессии генов птеригиума, одна из основных особенностей этого исследования состоит в том, чтобы взять на себя ведущую роль в интеграции методов РНК-Seq и биоинформатического анализа для изучения транскрипции всего генома в тканях птеригиума, и это первое исследование, в котором делается попытка использовать метод WGCNA. изучить механизмы заболевания.

Связи с клеточной адгезией и ремоделированием внеклеточного матрикса

Поскольку птеригиум представляет собой заболевание глазной поверхности, характеризующееся чрезмерным прорастанием сосудов и накоплением внеклеточного матрикса, аномальная экспрессия белков внеклеточного матрикса может быть связана с образованием птеригиума.

По результатам WGCNA, выполненного на DEG, мы идентифицировали пять генов-концентраторов в пяти модулях, включая ECM1, IQGAP2, GADD34, FN1 и CXCL12. Подтверждено проверкой qRT-PCR, три из пяти генов были связаны с клеточной адгезией и ремоделированием внеклеточного матрикса.Это согласуется с предыдущим исследованием, показывающим, что ECM1, который кодирует белок 1 внеклеточного матрикса, был обнаружен значительно увеличенным в птеригиуме. ECM1 показал наибольшее сходство в желтом модуле. Ранее John-Aryankalayil et al. (2006) сообщили, что активация гена ECM1 играет ключевую роль в птеригиуме, что также было подтверждено несколькими др. Исследованиями (Naib-Majani et al., 2004; Turner et al., 2007). FN1 кодирует фибронектин 1, который является важным гликопротеином в клеточной адгезии и миграции во время эмбриогенеза, заживления ран и метастазирования; и более высокая экспрессия FN1 наблюдалась в тканях птеригиума (Engelsvold et al., 2013б). В предыдущем исследовании изучались значительные изменения в FN1 с помощью анализа ДНК-микрочипов и сообщалось, что FN1 служит потенциальным регулятором миграции эпителиальных клеток, отложения внеклеточного матрикса и эпителиально-мезенхимального перехода в птеригиуме (Engelsvold et al., 2013a). IQGAP2 представляет собой передающий сигнал каркасный белок, который действует как интегратор сигналов Rho GTPase и Ca ²⁺ / кальмодулин, связанных с клеточной адгезией и реорганизацией цитоскелета. В исследовании также сообщается, что IQGAP2 играет роль в регуляции передачи сигналов Wnt / β-катенин и PI3K / Akt (Schmidt et al., 2003). Интересно, что сообщалось о внутриядерном накоплении β-catenin в тканях птеригиума (Kato et al., 2007). Однако функции IQGAP2 в птеригиуме не изучены. Наше исследование может предоставить новое понимание роли IQGAP2 в механизмах патогенеза птеригиума.

Ссылки на иммунологию

Сообщалось о нескольких потенциальных механизмах патогенеза прорастания птеригиума, относящихся к прошлому веку, включая иммунологические механизмы (Pinkerton, Hokama & Shigemura, 1984) и повышенный клеточный стресс (Kau et al., 2006). Результаты WGCNA показали, что CXCL12 и GADD34 были генами-концентраторами в коричневом модуле и бирюзовом модулях, соответственно. CXCL12 (также называемый SDF-1) кодирует фактор-1, происходящий из стромальных клеток, ангиогенный хемокин. Он играет роль в различных клеточных функциях, включая эмбриогенез, иммунный надзор, воспалительные реакции и так далее. CXCL1 способствует ангиогенезу через CXCR2 (Miyake et al., 2013) и регулирует рекрутирование гранулоцитов во время воспалительного процесса (Geiser et al., 1993). Bamdad et al. (2017) сообщили, что повышенная регуляция SDF-1 способствует развитию птеригиума (Bamdad et al., 2017). Kim et al. (2013) сообщили, что уровни CXCL12 и CXCR4 можно использовать для определения степени тяжести птеригиума (Kim et al., 2013). GADD34 — это белок цикла роста, который может быть вызван остановкой роста, повреждением ДНК и другими видами клеточного стресса. Когда внутриклеточные белки не могут правильно складываться, нарушение физиологической функции эндоплазматического ретикулума (ЭР) приводит к «стрессу эндоплазматического ретикулума».Длительный период стресса ER может индуцировать экспрессию GADD34 (Reid et al., 2016). Соответственно, мы также обнаружили, что связанный со стрессом путь ER играет важную роль в развитии птеригиума согласно результатам RNA-Seq.

На основе RNA-Seq верхними низкоэкспрессируемыми ДЭГ были LCN1, LTF и SCGB2A1 (LCN1: снижение в 0,094 раза, p <0,0001; LTF: уменьшение в 0,36 раза, p <0,0001; SCGB2A1: Снижение в 0,26 раза, p <0,0001), которые были связаны с иммунным процессом.Считается, что LCN1, кодирующий член семейства липокалинов, участвует в врожденном иммунном ответе. Было обнаружено, что экспрессия LCN1 значительно повышена в тканях рака молочной железы по сравнению с соседними нормальными тканями, возможно, в результате большего количества неоантигенов у онкологических больных и, следовательно, большей иммунной инфильтрации (Yang et al., 2019). LTF - важный компонент врожденной иммунной системы. О трех других генах в предыдущих исследованиях птеригиума не сообщалось. Однако, как сообщалось, уровни белка этих трех генов с пониженной регуляцией были нарушены у пациентов с синдромом сухого глаза (Perumal et al., 2016). Сухой глаз является важным фактором риска образования первичного или рецидивирующего птеригиума, а птеригиум также связан с нестабильностью глазной поверхности и болезнью сухого глаза (Ozsutcu et al., 2014). Многие исследования пытались объяснить связь между птеригием и сухим глазом. Основываясь на нашем исследовании, следует обратить внимание на такие гены, как LCN1, LTF и SCGB2A1, которые имеют более низкие уровни экспрессии в птеригиуме, чтобы определить, принимают ли они непосредственное участие в развитии птеригиума и синдрома сухого глаза.

В заключение, в этом исследовании мы строго отбирали субъектов и сопоставляли демографическую информацию, включая возраст, пол и т. Д., Между пациентом и контрольной группой. Было обнаружено, что в тканях птеригиума аберрантно экспрессируется ряд генов и белков, включая факторы роста, матриксные металлопротеиназы, интерлейкины, белки, связанные с пролиферацией, белки, связанные с апоптозом, молекулы клеточной адгезии, белки плотных контактов и пути ответа на стресс эндоплазматического ретикулума. молекулы.Настоящее исследование также подтвердило роль ключевых биологических активностей, о которых сообщалось в исследованиях молекулярных механизмов птеригиума.

В целом, это исследование глубже проникло в транскриптом птеригиума, впервые применив комбинацию методов RNA-Seq и биоинформатического анализа. Мы предполагаем, что гены, идентифицированные как связанные с птеригием, взаимно взаимодействуют и образуют сложную молекулярную сеть. Возможно, что значительная дисрегуляция узловых генов напрямую нарушает всю сеть, способствуя инициации и развитию птеригиума.Таким образом, фармацевтические вмешательства, направленные на эти гены-концентраторы, могут быть эффективными для лечения птеригиума.

В нашем исследовании были некоторые ограничения. Во-первых, размер выборки был относительно небольшим, и мы также не классифицировали птеригиум по морфологическим и патологическим характеристикам. Во-вторых, мы не проводили эксперименты на клетках in vitro, чтобы проверить потенциальный механизм связанного со стрессом пути ER. В-третьих, отсутствие функциональной проверки определенных хаб-генов требует дальнейших исследований.И последнее, но не менее важное: многие важные факторы риска, такие как ультрафиолетовое облучение или хроническое воспаление глаз, могут напрямую влиять на развитие птеригиума. Из-за ограниченной информации по этому поводу мы не проводили систематический анализ корреляции между факторами риска и данными транскрипции.

UVB-опосредованное подавление протеасомы в культивируемых первичных фибробластах птеригия человека

BMC Ophthalmol. 2018; 18: 328.

, ¹, ², ¹, ^1, ³, ² и ²

Alexios J.Aletras

¹ Лаборатория биохимии, кафедра химии, Университет Патры, 26 504 Патры, Греция

Иоаннис Триливас

² Кафедра офтальмологии, Медицинская школа, Университет Патры, Патры, Греция

Мария- Эльпида Кристопулу

¹ Лаборатория биохимии, химический факультет Патрского университета, 26 504 Патры, Греция

Сотирия Дракули

¹ Биохимическая лаборатория химического факультета Патрского университета, 26 504 Патры, Греция

³ Текущий адрес: Лаборатория биохимии медицинского факультета Фессалийского университета, Волос, Греция

Константин Д.Георгакопулос

² Кафедра офтальмологии, Медицинская школа, Университет Патры, Патры, Греция

Николаос Фармакакис

² Кафедра офтальмологии, Медицинская школа, Университет Патры, Патры, Греция

¹ Лаборатория Биохимия, кафедра химии, Университет Патры, 26 504 Патры, Греция

² Кафедра офтальмологии, Медицинская школа, Университет Патры, Патры, Греция

³ Текущий адрес: Лаборатория биохимии, медицинский факультет, Университет Фессалии, Волос, Греция

Автор, ответственный за переписку.

Поступило 05.04.2018 г .; Принято 30 ноября 2018 г.

Открытый доступ Эта статья распространяется в соответствии с условиями Международной лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что вы должным образом укажете автора (авторов) и источник, предоставите ссылку на лицензию Creative Commons и укажете, были ли внесены изменения. Отказ от лицензии Creative Commons Public Domain Dedication (http: // creativecommons.org / publicdomain / zero / 1.0 /) применяется к данным, представленным в этой статье, если не указано иное. Эта статья цитировалась в других статьях PMC.

Заявление о доступности данных: Данные не могут быть переданы в настоящее время, потому что это первичное исследование, и последующие исследования продолжаются на основе этого исследования.

Реферат

Предпосылки

Птеригиум — это состояние, характеризующееся разрастанием эпителия роговицы, инфильтрацией воспалительных клеток и аномальным накоплением внеклеточного матрикса.Хроническое воздействие ультрафиолета считается патогенным фактором этого заболевания. Протеасома — это внутриклеточный мультисубъединичный протеазный комплекс, который разрушает внутриклеточные белки. Среди протеасомных субъединиц β5 (PSMB5), обладающий химотрипсиноподобной активностью. Он считается основной субъединицей протеасомы, и ее экспрессия опосредуется путем Nrf2-ARE во многих типах клеток. В этом исследовании изучается экспрессия PSMB5 в птеригиуме и влияние УФ-В излучения на его экспрессию и активность в фибробластах птеригиума.

Методы

Нормальные образцы конъюнктивы и птеригиума были получены из бульбарной конъюнктивы пациентов, перенесших операцию по удалению катаракты, и пациентов с птеригием, перенесших хирургическое удаление первичной ткани, соответственно. Фибробласты выделяли после обработки образцов коллагеназой клостридия. Экспрессию PSMB5 и Nrf2 в тканях и клетках устанавливали с помощью анализа RT-PCR и вестерн-блоттинга. Выживание клеток измеряли методом МТТ, а химотрипсиноподобную активность протеасом определяли флуорометрией.

Результаты

Анализ ОТ-ПЦР показал, что экспрессия PSMB5 была значительно ниже в птеригиуме, чем в нормальной конъюнктиве. Экспрессия PSMB5 опосредована путем Nrf2 / ARE, на что указывает использование активатора Nrf2 Oltipraz. Экспрессия PSMB5 и Nrf2 фибробластами птеригиума подавлялась дозозависимым образом после УФВ-излучения 0–50 мДж / см ² доз. Экспрессия PSMB5, но не Nrf2, оставалась почти на контрольном уровне, когда воздействие UVB проводилось после предварительной инкубации клеток с ингибитором src-киназ PP2.Облучение УФВ имело очень слабый вредный эффект на выживаемость фибробластов, в то время как оно не влияло на химотрипсиноподобную активность протеасом.

Заключение

В фибробластах птеригиума воздействие UVB приводит к подавлению экспрессии Nrf2 / ARE-опосредованного гена PSMB5, в котором могут участвовать src-киназы. Этот эффект может быть частично ответственным за более низкую экспрессию PSMB5, обнаруженную в птеригиуме, по сравнению с нормальной конъюнктивой.

Ключевые слова: Птеригиум, фибробласты, протеасома, UVB-облучение, путь Nrf2-ARE, киназы Src

Предпосылки

Птеригиум — заболевание глаза, проявляющееся гиперплазией эпителия роговицы, обычно двусторонним, разрастанием стромальных сосудов значительная реваскуляризация, инфильтрация воспалительных клеток и аномальное накопление внеклеточного матрикса, основными компонентами которого являются эластин и коллаген.Гистопатологические исследования показали, что эпителий птеригиума, который проникает в роговицу, демонстрирует такие изменения, как плоскоклеточная метаплазия и разрастание бокаловидных клеток. Также наблюдалось основное повреждение слоя Боумена [1].

Иммуогистологические исследования показывают, что птеригиум — это, скорее, заболевание лимбальных эпителиальных стволовых клеток, формирование и развитие которого может быть вызвано повреждением или активацией этих стволовых клеток [2]. Точные причины патогенеза птеригиума остаются неясными, однако ультрафиолетовое (УФ) излучение считается наиболее приемлемой причиной возникновения этого заболевания [3, 4].

UVB-излучение вызывает повреждение клеточной ДНК, РНК и компонентов внеклеточного матрикса за счет активации различных путей [5]. UVB-излучение также стимулирует экспрессию цитокинов и факторов роста в клетках птеригиума, которые, как считается, играют ключевую роль в становлении и развитии птеригиума. Ранее сообщалось об экспрессии цитокинов и факторов роста, таких как IL-6, IL-8, TNF-α, bFGF, TGF-β и PDGF, в птеригиуме [6–10]. Металлопротеиназы внеклеточного матрикса (ММП) также могут быть вовлечены в патогенез птеригиума.Экспрессия MMP, таких как MMP-2, MMP-3, MMP-9 и особенно MMP-1, которая является наиболее распространенной, была продемонстрирована в тканях птеригиума [11–13]. Кроме того, ранее сообщалось о высокой экспрессии индуцируемого гипоксией фактора-1α (HIF-1α) и белков теплового шока (Hsp), таких как Hsp90, Hsp70 и Hsp27, в тканях птеригиума [14, 15]. Они могут вносить вклад в механизмы клеточной защиты от стрессовых состояний.

Протеасома 26S представляет собой внутриклеточный протеолитический комплекс из двух компонентов: протеолитического ядра 20S, обладающего каталитической активностью, и регуляторной субъединицы 19S [16, 17].Протеолитическое ядро 20S состоит из 28 субъединиц, распределенных в четыре гептамерных кольца, уложенных друг на друга, образуя структуру, напоминающую цилиндр. Компоненты двух внешних колец называются α-субъединицами, а компоненты двух внутренних колец — β-субъединицами. Протеасома обладает множественной протеазной активностью, такой как каспазоподобная, трипсиноподобная и химотрипсиноподобная активность, локализованная на субъединицах β1, β2 и β5 соответственно, и способна разрушать почти все внутриклеточные аномальные и денатурированные белки, а также функциональные белки, которые необходимо переработать.Он также играет роль в прогрессировании клеточного цикла, а также в развитии и гибели клеток [18–21]. Нормальная функция протеасомы и связанная с ней избирательная деградация окисленных белков, которую она вызывает, вносят большой вклад в клеточную защиту от окислительного стресса. Напротив, нарушение функции протеасомы приводит к накоплению окисленных / неправильно свернутых белков в клетке и может быть ответственным за проявление нескольких дегенеративных заболеваний [22–26].

Предыдущие исследования установили, что экспрессия каталитических субъединиц протеасомы может быть индуцирована различными экзогенными стимулами через путь Nrf2-ARE (фактор 2-антиоксидантный ответ, связанный с NF-E2), и было высказано предположение, что усиление регуляция протеасомных субъединиц активаторами Nrf2 может вносить вклад в защиту клеток от окислительного повреждения за счет избирательной деградации окисленных белков, предотвращая, таким образом, образование белковых агрегатов и их накопление в клетках [27–33].

Nrf2 относится к семейству основной лейциновой молнии NF-E2 (ядерный фактор эритроидного происхождения 2). В нормальных условиях он возникает в виде комплекса с белком KEAP1 (белок Кельча, полученный из эритроидных клеток с белком, ассоциированным с CNC-гомологией (ECH)), остающимся в цитоплазме, где он впоследствии разрушается путем убиквитин / протеасома. . Под воздействием окислительного стресса комплекс Nrf2-KEAP1 диссоциирует и Nrf2 мигрирует в ядро, где взаимодействует с небольшими белками семейства Maf (TF малых мышечно-апоневротических фибросарком, необходимых для трансактивации Nrf2), образуя гетеродимеры, которые связываются с ARE в промоторах целевых генов.Различные небольшие электрофильные молекулы, включая олтипраз (5- [2-пиразинил] -4-метил-1,2-дитиол-3-тион), инактивируют KEAP1 и высвобождают Nrf2, который затем мигрирует в ядро [34].

Роль протеасомы в патогенезе птеригиума, а также влияние УФ-В излучения на его экспрессию и активность в клетках птеригиума еще не изучены. В настоящем исследовании мы исследовали влияние УФ-В излучения на экспрессию и активность субъединицы β5 протеасомы (PSMB5) в фибробластах птеригиума.

Методы

Отбор образцов

Образцы нормальной бульбарной конъюнктивальной ткани были получены от пяти пациентов (2 мужчин и 3 женщины), перенесших операцию по удалению катаракты, у которых не было симптомов заболевания глазной поверхности или сухости глаз, возраст которых варьировался от От 61 до 90 лет (средний возраст ± SD 75,40 ± 12,26). Ткани птеригиума, расположенные в носу, были получены от пяти пациентов (3 мужчин и 2 женщины), перенесших первичную операцию по удалению птеригиума, возраст которых варьировал от 60 до 84 лет (средний возраст ± SD 71.80 ± 8,73). Исследуемая популяция была греческого происхождения, и все образцы были собраны в отделении офтальмологии университетской больницы Патры, Патры, Греция.

Конъюнктивальные и первичные культуры фибробластов Pterygium

Образцы птеригиума или нормальной конъюнктивы сразу после удаления переносили на лед в лабораторию (время переноса ~ 10 мин), где их промывали, измельчали и расщепляли коллагеназой клостридия 1 мг / мл в Бессывороточная среда Игла, модифицированная Дульбекко (DMEM) (BioChrom AG, Берлин, Германия), в течение 2 ч при 37 ° C [35].Высвободившиеся клетки осаждали и ресуспендировали в DMEM с добавлением 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1% пенициллина и 1% стрептомицина, высевали и выращивали при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO ₂. . После культивирования в течение ночи неприлипающие клетки удаляли, а прикрепленные клетки культивировали в среде DMEM плюс 10% FBS. Для всех экспериментов клетки использовали после пассажа 4, когда они составляли гомогенную популяцию фибробластоподобных клеток.

UVB-облучение культивируемых клеток

Фибробласты высевали на планшеты с шестью лунками (Greiner, Frickenhausen, Германия) и выращивали в среде DMEM плюс 10% FBS.Как только клетки достигли полуконфлюэнтности, среду аспирировали и клетки голодали в бессывороточной среде DMEM, содержащей 0,2% гидролизата лактальбумина (DMEM-0,2% LH) [36], в течение 24 часов перед экспериментом. Затем среду заменяли PBS (1 мл / лунку), и монослои облучали УФ-светом от 0 до 50 мДж / см ² UVB, используя лампу Sankyo Denki G20T10E, которая излучает УФB-лучи, со спектром излучения в диапазоне от 280 нм. до 360 нм и один спектральный пик при 306 нм. Время воздействия (t) (в секундах) определялось по уравнению t = доза (мДж / см ²) / мощность флюенса (мВт / см ²) [37].После каждого воздействия клетки помещали в свежую бессывороточную среду DMEM-0,2% LH и культивировали в течение дополнительных 24 часов. Когда использовали Oltipraz (Sigma-Aldrich Chemical Co., Сент-Луис, Миссури) или PP2 (Sigma-Aldrich Chemical Co., Сент-Луис, Миссури), клетки предварительно инкубировали в присутствии соответствующего фактора в бессывороточной среде. DMEM-0,2% LH за 2 ч до облучения.

Жизнеспособность клеток

Жизнеспособность клеток определяли методом МТТ, как описано ранее [38]. Вкратце, после облучения УФВ клетки культивировали в течение 24 ч в среде DMEM-0.2% LH, затем кондиционированную среду удаляли и раствор 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромида (МТТ) (Sigma-Aldrich Chemical Co., Сент-Луис, Миссури) (1 мг / мл) в той же среде. После инкубации при 37 ° C в течение 4 ч раствор тщательно аспирировали, кристаллы формазана растворяли в ДМСО и измеряли оптическую плотность при 540 нм.

Определение протеасомной активности

После UVB-излучения клетки культивировали в течение 24 часов в среде DMEM-0.2% LH, а затем лизировали раствором 1 мМ DTT в воде в течение 1 ч при 4 ° C [39]. Лизаты центрифугировали при 14000 g в течение 30 мин при 4 ° C и определяли концентрацию белка в супернатантах методом Брэдфорда [40], используя бычий сывороточный альбумин в качестве стандарта. Затем супернатанты анализировали на химотрипсиноподобную активность протеасомы 20S с гидролизом флуорогенного субстрата N-сукцинил-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC (Sigma-Aldrich, Дорсет, Великобритания) в течение 1 ч при 37 ^{. ο} C, как описано ранее [41].Активность протеасом определяли как разницу между общей активностью супернатантов клеточного лизата и оставшейся активностью в присутствии ингибитора протеасом MG-132 в конечной концентрации 100 мкМ. Флуоресценцию измеряли с помощью флуориметра TECAN infinite M200 (Австрия) (возбуждение при 370 нм и испускание при 440 нм).

Выделение

РНК и анализ ОТ-ПЦР

Тотальную РНК экстрагировали из нормальной ткани конъюнктивы и птеригиума, а также из фибробластов в соответствии с инструкциями производителя спин-колонки RNeasy (Qiagen, США).Анализ ОТ-ПЦР выполняли в один этап с использованием набора One-Step RT-PCR (Qiagen, США) в соответствии с инструкциями производителя. RT проводили в течение 30 минут при 50 ° C, а затем 15 минут при 95 ° C. Амплификации проводились с 30 циклами. Каждый цикл включал денатурацию при 95 ° C в течение 1 минуты, отжиг при соответствующей температуре в течение 1 минуты, удлинение при 72 ° C в течение 1 минуты с последующим окончательным удлинением при 72 ° C в течение 10 минут. Праймеры для ПЦР, используемые для PSMB5, [(смысловой) 5′-GAG-ATC-AAC-CCA-TAC-CTG-CTA-G-3 ‘и (антисмысловой) 5’-AGT-CAC-CCC-AAG-AAA-CAC -AAG-C-3 ‘] [42], Nrf2, [(смысл) 5′-AAA-CCA-GTG-GAT-CTG-CCA-AC-3′ и (антисмысловой) 5’-GAC-CGG-GAA- TAT-CAG-GAA-CA-3 ‘] [43] и GAPDH, [(смысл) 5′-TCA-AGA-TCA-TCA-GCA-ATG-CCT-CC-3′ и (антисмысловой) 5’- AGT-GAG-CTT-CCC-GTT-CAG-C-3 ‘] были синтезированы MWG-Biotech AG (Эберсберг, Германия).Температура отжига составляла 58 ° C, 49 ° C и 60 ° C для PSMB5, Nrf2 и GAPDH соответственно. Продукты амплификации ПЦР анализировали и визуализировали с помощью электрофореза на 2% агарозных гелях, содержащих 0,01% гель-красителя на основе нуклеиновой кислоты GelRed (Biotium Inc. Hayward, Калифорния, США). Интенсивность продуктов ПЦР измеряли с помощью программного обеспечения Scion Image PC [44] и выражали в произвольных единицах (пикселях). Отношение уровня мРНК PSMB5 или Nrf2 к уровню гена домашнего хозяйства GAPDH определяли по денситометрическим значениям сканирования транскриптов.

Количественная ПЦР в реальном времени

Суммарную РНК экстрагировали из фибробластов с использованием набора Nucleo Spin RNA (Macherey-Nagel, Düren, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Количественный анализ ПЦР в реальном времени (qPCR) выполняли в один этап с использованием набора ΚΑPA SYBR® FAST qPCR Master Mix (2x) (KAPA BIOSYSTEMS, Бостон, США) в соответствии с инструкциями производителя. Анализы проводили в трех экземплярах на системе обнаружения Rotor-Gene Q (QIAGEN). Условия циклов включали активацию фермента в течение 10 минут при 50 ° C, затем 40 циклов при 95 ° C в течение 5 минут, 60 ° C в течение 10 с и окончательные 72 ° C в течение 10 секунд.GAPDH использовался в качестве внутреннего стандарта. Используемые праймеры: PSMB5: 5′-GGCAATGTCGAATCTATGAGC-3 ‘(смысл) и 5′-GTTCCCTTCACTGTCCACGTA-3′ (антисмысловой), и GAPDH: 5’-AGGCTGTTGTCATACTTCTCAT-3 ‘(смысл) и 5’-GGCGTCCACT (антисмысловой).

Иммуноблот-анализ и обнаружение белка PSMB5

После УФ-В-излучения клетки собирали, лизировали в буфере для образцов Лэммли [45], обрабатывали 2-меркапроэтанолом и затем подвергали электрофорезу в SDS-полиакриламидном геле (SDS-PAGE) на 10% полиакриламидные гели с последующим вестерн-блоттингом, как описано ранее [46].Мембраны инкубировали с кроличьими поликлональными антителами против PSMB5 (Enzo Life Sciences), а затем с вторичными антителами, козьими антителами против кроличьих IgG, конъюгированными с пероксидазой хрена в соответствующем разведении. Иммунореактивные белки детектировали методом усиленной хемилюминесценции в соответствии с инструкциями производителя (Pierce, Rockford, IL, USA). Аналогичным образом мембраны также повторно зондировали кроличьими поликлональными антителами против α-тубулина (Sigma-Aldrich Chemical Co., Сент-Луис, Миссури).Интенсивность соответствующих белковых полос измеряли с помощью программного обеспечения Scion Image PC [44], выражали в произвольных единицах (пикселях), и рассчитывали соотношение PSMB5 / α-тубулин.

Статистический анализ

Данные были проанализированы с использованием непарного t-критерия Стьюдента с пределом значимости p <0,05. Для анализа всех данных и построения графиков использовался коммерческий пакет программного обеспечения (Prism; GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния).

Результаты

Экспрессия PSMB5 в птеригиуме и нормальной ткани конъюнктивы

Экспрессия PSMB5 на уровне мРНК в птеригиуме и нормальной ткани конъюнктивы исследовалась с помощью ОТ-ПЦР (рис.). Экспрессия PSMB5 в тканях птеригиума была статистически значимо ниже, чем в нормальной конъюнктиве. Этот результат не был связан с различиями в возрасте пациентов с птеригием и нормальной конъюнктивой, поскольку не было значительных различий между возрастным распределением и средним возрастом двух групп доноров.

ОТ-ПЦР анализ стационарных уровней мРНК PSMB5 с использованием общей РНК из птеригиума и нормальной ткани конъюнктивы. Указаны продукты для PSMB5 (550 п.н.) и GAPDH (263 п.н.).L: лестница ДНК. (*) указывает на значительную разницу ( p <0,05) между нормальными тканями конъюнктивы и птеригиума

Влияние УФ-излучения В на экспрессию и активность PSMB5 в фибробластах

Поскольку воздействие УФ-В считается основным патогенетическим фактором при болезни птеригиума, мы исследовали, влияет ли УФ-В-излучение на экспрессию протеасомы в фибробластах птеригиума, поскольку фибробласты продуцируют многие компоненты внеклеточного матрикса и участвуют в образовании птеригиума.Фибробласты птеригиума облучали УФ-В в дозах 0–50 мДж / см ², а экспрессию PSMB5 на уровне мРНК исследовали с помощью ОТ-ПЦР (рис.). Было замечено, что УФ-В излучение вызывало значительное дозозависимое подавление экспрессии PSMB5, которое было выше при дозах 40 и 50 мДж / см ², 77 и 85%, соответственно (рис. А). Приведенные выше данные были дополнительно подтверждены вестерн-блоттингом (рис. А). Как показано на фиг. А (верхняя панель), только одна основная иммунореактивная полоса приблизительно 22 кДа, соответствующая человеческому PSMB5, была обнаружена во всех использованных дозах облучения.По соотношению PSMB5 / α-тубулин было установлено, что производство белка PSMB5 зависит от дозы облучения.

RT-PCR ( a ) и qPCR ( b ) анализ стационарных уровней мРНК PSMB5 с использованием общей РНК из птеригиевых и нормальных фибробластов конъюнктивы, соответственно, облученных различными дозами UVB-излучения (0-50 мДж / см ²). Указаны продукты для PSMB5 (550 п.н.) и GAPDH (263 п.н.). L: лестница ДНК. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов.(*) указывает на значительную разницу (p <0,05) по сравнению с контролем (без облучения)

Типичные вестерн-блоттинги лизатов птеригиума ( a ) и нормальных конъюнктивальных ( b ) фибробластов, облученных разными дозами УФ-В-излучения ( 0–50 мДж / см ²), используя антитела против PSMB5 или тубулина. (*) указывает на значительную разницу (p <0,05) по сравнению с контролем (без облучения)

Этот эффект не был результатом снижения выживаемости фибробластов под воздействием УФ-излучения, поскольку УФ-облучение имело очень низкий вредный эффект на выживаемость фибробластов, как показано Метод МТТ (рис.а).

Жизнеспособность фибробластов Pterygium ( a ) и протеасомная химотрипсиноподобная активность в этих клетках ( b ) после воздействия UVB-излучения в различных дозах (0–50 мДж / см ²). Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. (*) указывает на значительную разницу (p <0,05) по сравнению с контролем (без облучения)

Кроме того, УФ-облучение не влияло на химотрипсиноподобную активность протеасомы. При измерении этой активности в лизатах фибробластов птеригия после обработки УФ-В не было обнаружено спада активности ни в одной из использованных доз УФ-В облучения (рис.б).

Когда нормальные фибробласты конъюнктивы подвергались такой же обработке УФ-В облучением, также наблюдалось дозозависимое подавление экспрессии PSMB5 (рис. B). Однако он был ниже, чем вызванный УФ-В излучением в фибробласте птеригиума (рис. А), 28 и 36% при дозах 40 и 50 мДж / см ² соответственно. Этот результат был подтвержден вестерн-блоттингом (рис. B). Также наблюдалось зависимое от дозы облучения снижение продукции белка PSMB5.

Влияние УФ-В облучения на экспрессию Nrf2 в фибробластах птеригиума

Поскольку экспрессия PSMB5 опосредуется путем Nrf2 / ARE в различных видах клеток [27–33], мы исследовали, происходит ли то же самое в фибробластах птеригиума.Фибробласты птеригиума культивировали в присутствии Oltipraz, активатора пути Nrf2 / ARE [47, 48], а экспрессию PSMB5 на уровне мРНК исследовали с помощью ОТ-ПЦР (рис.). Oltipraz вызывал усиление экспрессии PSMB5, указывая на то, что экспрессия этой субъединицы в фибробластах птеригиума действительно опосредуется путем Nrf2 / ARE. Принимая во внимание это наблюдение, мы предположили, что подавление PSMB5 UVB может быть связано с подавлением экспрессии Nrf2, вызванной UVB.Ранее сообщалось, что воздействие УФ-В излучения как на нормальные кератиноциты человека, так и на дермальные фибробласты человека in vitro , значительно подавляло экспрессию Nrf2 и Nrf2-зависимых генов [49]. Таким образом, суммарную РНК, выделенную из фибробластов птеригиума, подвергнутых УФ-В излучению в дозах 0–50 мДж / см ², использовали в ОТ-ПЦР со специфическими праймерами для Nrf2 (рис.). Как показано на рис., Облучение УФВ вызывало дозозависимое подавление экспрессии Nrf2 в фибробластах птеригиума, подобное подавлению, достигаемому для PSMB5, но ниже его (рис.а). При дозах 40 и 50 мДж / см ² было подсчитано, что подавление экспрессии Nrf2 составило 35 и 50% против 77 и 85% для PSMB5. Поскольку экспрессия PSMB5 в фибробластах птеригиума опосредуется путем Nrf2 / ARE, можно было бы ожидать, что подавление экспрессии Nrf2 облучением UVB будет примерно на тех же уровнях, что и подавление экспрессии PSMB5, вызванное UVB. Похоже, что, хотя облучение UVB оказывает слабое влияние на экспрессию Nrf2, другие факторы, которые могут стимулироваться облучением UVB, влияют на путь Nrf2 / ARE и, следовательно, приводят к значительному подавлению экспрессии ARE-опосредованного гена PSMB5.

ОТ-ПЦР-анализ стационарных уровней мРНК PSMB5 с использованием тотальной РНК из фибробластов птеригиума, культивированных в отсутствие или в присутствии олтипраза. Указаны продукты для PSMB5 (550 п.н.) и GAPDH (263 п.н.). L: лестница ДНК. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. (*) указывает на значительное увеличение (p <0,05) по сравнению с контролем

Анализ ОТ-ПЦР устойчивых уровней мРНК Nrf2 с использованием общей РНК из фибробластов птеригия, облученных различными дозами УФВ-излучения (0–50 мДж / см ²).Указаны продукты для Nrf2 (173 п.н.) и GAPDH (263 п.н.). L: лестница ДНК. (*) указывает на значительную разницу (p <0,05) по сравнению с контролем (без облучения)

Влияние УФ-В облучения на экспрессию PSMB5 и Nrf2 в фибробластах птеригия после предварительной обработки ингибитором src-киназ PP2

Ранее сообщалось, что у мышей В клетках гепатомы высокая доза УФ-В облучения вызывает активацию / ядерную локализацию киназы семейства src Fyn, которая фосфорилирует Nrf2 и приводит к экспорту из ядра и исключению этого фактора из ядра [50].Чтобы проверить, применимо ли то же самое к фибробластам птеригия, клетки облучали UVB после предварительной инкубации с ингибитором src-киназы PP2 [51] при дозах облучения 0-50 мДж / см ² и экспрессии PSMB5 и Nrf2. на уровне мРНК исследовали с помощью ОТ-ПЦР (рис.). Как показано на фиг. А, в присутствии PP2 экспрессия PSMB5 оставалась почти на контрольном уровне (подавление только на 17,5 и 20% при дозах 40 и 50 мДж / см ² соответственно). Эти результаты были подтверждены вестерн-блоттингом (рис.а). По соотношению PSMB5 / α-тубулин было установлено, что продукция белка PSMB5 оставалась почти на уровне контроля. Напротив, после аналогичной процедуры было замечено, что экспрессия Nrf2 оставалась неизменной (фиг. C) с предварительной обработкой PP2 или без нее (фиг.).

Анализ RT-PCR PSMB5 ( a ) и Nrf2 ( b ) и анализ qPCR ( c ) устойчивых уровней мРНК с использованием общей РНК из птеригиума и нормальных фибробластов конъюнктивы, соответственно, облученных различными дозы УФ-В излучения (0–50 мДж / см ²) после предварительной обработки PP2.Указаны продукты для PSMB5 (550 п.н.), Nrf2 (173 п.н.) и GAPDH (263 п.н.). L: лестница ДНК. (*) указывает на значительную разницу ( p <0,05) по сравнению с контролем (без облучения)

Типичный вестерн-блоттинг лизатов птеригиума ( a ) и нормальных фибробластов конъюнктивы ( b ), облученных разными дозами УФ-В облучение (0-50 мДж / см ²) после предварительной обработки PP2 с использованием антител против PSMB5 или α-тубулина

Экспрессия мРНК и уровней белка PSMB5 оставалась почти на уровне контроля, когда нормальные фибробласты конъюнктивы были облучены после предварительного облучения. -инкубация с PP2, как было установлено с помощью количественной ПЦР и вестерн-блоттинга (рис.б) и (рис. б) соответственно.

Обсуждение

Хотя патогенез птеригиума до конца не изучен, УФВ-излучение считается наиболее важным патогенетическим фактором окружающей среды при этом заболевании. Среди прочего, он стимулирует выработку активных форм кислорода (АФК), которые могут окислять несколько компонентов, включая белки [52, 53].

Протеасома 26S является основной внутриклеточной протеолитической системой, ответственной за деградацию многих внутриклеточных белков, включая аномальные и окислительно поврежденные белки.Некоторые дегенеративные заболевания характеризуются накоплением сильно окисленных и агрегированных белков в цитозоле клеток. Множество доказательств указывает на то, что эти агрегаты блокируют активность протеасом, что приводит к апоптозу и старению клеток [20–26]. Экспрессия протеасом подавляется в стареющих клетках, а стабильная сверхэкспрессия PSMB5 меняет фенотип старения [54]. В этом отношении протеасома 26S считается важной для клеток, защищая их от окислительного стресса и старения, и поддержание ее экспрессии и активности в клетках может быть полезным.

На основании всех вышеперечисленных наблюдений ожидается, что протеасомы могут играть ключевую роль в образовании птеригиума. Однако влияние УФ-В излучения на экспрессию и активность протеасом в птеригиуме не изучалось до нашего исследования.

Здесь мы представляем доказательства того, что экспрессия PSMB5 в тканях птеригиума значительно ниже по сравнению с нормальными тканями конъюнктивы, что указывает на то, что отягчающие факторы, такие как облучение UVB, вызывают подавление экспрессии PSMB5 в клетках конъюнктивы, таких как эпителиальные клетки. и фибробласты.Принимая во внимание роль и функцию протеасомы в клетках, можно предположить, что более низкая экспрессия протеасомы в птеригиуме может быть связана с ее патогенезом.

Мы также представляем доказательства влияния УФ-В излучения на экспрессию и активность PSMB5 в фибробластах птеригиума. Было обнаружено, что УФ-В-излучение, которое проявляет очень низкий вредный эффект на жизнеспособность клеток, вызывало значительное подавление PSMB5 в фибробластах птеригиума в дозозависимом режиме.UVB-облучение имело такой же эффект, но в меньшей степени, на экспрессию PSMB5 в нормальных фибробластах конъюнктивы, указывая на то, что наблюдаемый эффект UVB-облучения на фибробласты птеригия не был результатом дегенерации этих клеток из-за облучения. Этот аспект подтверждается тем фактом, что явление было предотвращено в птеригиуме и нормальных фибробластах в присутствии PP2. Различия в степени эффекта могут быть связаны с ранее существовавшей активацией фибробластов птеригия от УФ-В-облучения, и многие провоспалительные цитокины возникли в поражении.Ранее сообщалось о различных ответах птеригиума и нормальных фибробластов конъюнктивы против провоспалительных цитокинов, продуцирующих ММП [55]. Хотя экспрессия PSMB5 была подавлена, не наблюдалось снижения химотрипсин-подобной специфической активности этой субъединицы, что указывает на то, что протеасома довольно устойчива к УФ-В-излучению, что согласуется с предыдущими результатами исследований на кератиноцитах и фибробластах кожи человека [56, 57 ]. Напротив, УФА-излучение оказывает на одни и те же клетки разные эффекты.Он вызывает подавление активности протеасомы, но не влияет на экспрессию субъединиц протеасомы, как сообщалось ранее [58, 59].

Используя активатор Nrf2 Oltipraz, мы наблюдали усиление экспрессии PSMB5 в фибробластах птеригиума, что согласуется с предыдущими исследованиями, показывающими, что экспрессия каталитической субъединицы протеасомы PSMB5, несущей хемотрипсиноподобную активность, увеличивается Nrf2 через ARE-расположенный на проксимальном промоторном участке этого гена [29].

Хотя облучение UVB вызвало подавление экспрессии Nrf2, оно не является основной причиной наблюдаемого высокого подавления экспрессии PSMB5, поскольку после предварительной обработки фибробластов ингибитором src-киназ PP2 и воздействия UVB подавление экспрессии Nrf2 сохранялся, в то время как подавление экспрессии PSMB5 было предотвращено, и его уровни оставались почти на уровне контроля, что указывает на то, что кто-то src-киназа, индуцированная / активированная УФ-излучением, ответственна за подавление экспрессии PSMB5.Ранее сообщалось, что воздействие высоких доз УФ-B на гепатому мыши, кератиноциты мыши и клетки фибробластов кожи человека приводило к ядерному экспорту / исключению Nrf2 и снижению экспрессии опосредованного ARE гена. В этом исследовании было продемонстрировано, что киназа Fyn, член семейства тирозинкиназ src, опосредует ядерное исключение Nrf2 в ответ на УФ-В излучение [50].

Похоже, что то же самое может происходить в фибробластах птеригиума, подвергнутых облучению УФ-В. Однако неизвестно, какая src-киназа (-ы) задействована, поскольку семейство src тирозинкиназ состоит из четырех членов: Fyn, Lyn, Yes и Src [60].Что касается Fyn-киназы, ее UVB-индуцированное фосфорилирование и ядерная локализация сообщались ранее [51]. Кроме того, еще предстоит выяснить механизм, с помощью которого киназа src получает сигналы от UVB, ведущие к активации и ядерному экспорту Nrf2. Однако мы не можем исключить возможность того, что экспрессия и активация киназы src, индуцированная УФ-В, может быть опосредована цитокинами или факторами роста, экспрессия которых индуцируется УФ-В. Все эти вопросы находятся в нашем рассмотрении.

Выводы

В настоящем исследовании мы показали, что экспрессия PSMB5 в птеригиуме ниже, чем в нормальной конъюнктиве. Это может быть связано с облучением UVB, которое оказывает подавляющее действие на экспрессию PSMB5 в фибробластах птеригиума, которые, как известно, в свою очередь участвуют в патогенезе птеригиума. Этот эффект опосредуется киназой src, действующей на путь Nrf2 / ARE. Поскольку протеасома, как известно, участвует в регуляции экспрессии различных факторов, таких как металлопротеиназы и их ингибиторы, цитокины и коллагены [58, 61-63], все из которых могут вносить вклад в образование птеригиума, это может быть пришли к выводу, что участие УФВ-излучения в патогенезе птеригиума частично опосредовано подавлением экспрессии протеасом, о котором мы также сообщаем здесь.

Благодарности

Нет.

Доступность данных и материалов

В настоящее время нельзя делиться данными, потому что это первичное исследование, и последующие исследования продолжаются на основе этого исследования.

Аббревиатуры

necrosis

ARE	Антиоксидантный ответный элемент
bFGF	Базовый фактор роста фибробластов
DMEM	s		Dulbecfo’s модифицированная среда Dulbecfo	1,4-дитиотреитол
FBS	Фетальная бычья сыворотка
GAPDH	Глицеральдегид 3-фосфатдегидрогеназа
	IL-6
IL-6 Интерлейкин-8
KEAP1	Кельч-подобный белок, полученный из эритроидных клеток с белком, ассоциированным с гомологией CNC (ECH)
MMPs	Металлопротеиназы внеклеточного матрикса
	4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолий бромид
Nrf2	Ядерный фактор (эритроидный 2) -подобный 2
Олтипраз	(5- [2-пиразинил] -4-метил-1,2-дитиол-3-тион)
PDGF	Фактор роста тромбоцитов
PP2	4-амино-5- (4-хлорфенил) -7- (диметилэтил) пиразоло [3,4- d ] пиримидин
PSMB5	PSMB5	Субъединица протеасомы β5
КПЦР	количественная цепная реакция в реальном времени Полимеразная цепная реакция
ОТ-ПЦР	Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией
SDS-PAGE	Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия
TGF-β	Трансформирующий фактор роста-β
TNF-α
		TNF-α
Ультрафиолет B

Вклад авторов

AJA внесла свой вклад в концепцию и дизайн экспериментов и отточила рукопись.IT, M-EC и SD внесли свой вклад в выполнение экспериментов и подготовку рукописи. CDG и NP внесли свой вклад в хирургический сбор образцов тканей, а также в редактирование и подготовку рукописи. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Примечания

Одобрение этики и согласие на участие

Исследование проводилось в соответствии с принципами Хельсинкской декларации и было одобрено местным комитетом по этике экспериментов на людях Университетской больницы Патры.Письменное информированное согласие было получено от каждого пациента перед хирургической процедурой на его участие в этом исследовании.

Согласие на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Примечание издателя

Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах и принадлежностей организаций.

Ссылки

1. Ди Джироламо Н., Чуй Дж., Коронео М.Т., Уэйкфилд Д.Патогенез птеригий: роль цитокинов, факторов роста и матриксных металлопротеиназ. Prog Retin Eye Res. 2004. 23: 195–228. DOI: 10.1016 / j.preteyeres.2004.02.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 2. Душку Н, Рид Т.В. Иммуногистохимическое доказательство того, что птеригия человека возникает в результате инвазии экспрессирующих виментин измененных базальных клеток лимбального эпителия. Curr Eye Res. 1994; 13: 473–481. DOI: 10.3109 / 02713689408999878. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Коронео М.Т., Ди Джироламо Н., Уэйкфилд Д.Патогенез птеригий. Curr Opin Ophthalmol. 1999; 10: 282–288. DOI: 10.1097 / 00055735-199

0-00011. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Kria L, Ohira A, Amemiya T. Иммуногистохимическая локализация основного фактора роста фибробластов, фактора роста тромбоцитов, трансформирующего фактора роста бета и фактора некроза опухоли альфа в птеригиуме. Acta Histochem. 1996; 98: 195–201. DOI: 10.1016 / S0065-1281 (96) 80038-9. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Криа Л., Охира А., Амемия Т. Факторы роста в культивируемых фибробластах птеригиума: иммуногистохимический анализ и анализ ELISA.Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 1998. 236: 702–708. DOI: 10.1007 / s004170050144. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Ди Джироламо Н., Кумар Р.К., Коронео М.Т., Уэйкфилд Д. UVB-опосредованная индукция интерлейкина-6 и -8 в птеригиях и культивируемых эпителиальных клетках птеригия человека. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2002; 43: 3430–3437. [PubMed] [Google Scholar] 9. Джин Дж, Гуань М, Сыма Дж, Гао Дж, Чжан М, Лю З., Фант Дж, Ма Дж. Снижение фактора, производного от пигментного эпителия, и повышение уровня фактора роста эндотелия сосудов при птеригиях.Роговица. 2003. 22: 473–477. DOI: 10.1097 / 00003226-200307000-00015. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Ди Джироламо Н., Уэйкфилд Д., Коронео МТ. UVB-опосредованная индукция цитокинов и факторов роста в эпителиальных клетках птеригиума включает рецепторы клеточной поверхности и внутриклеточную передачу сигналов. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2006; 47: 2430–2437. DOI: 10.1167 / iovs.05-1130. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Ди Джироламо Н., МакКласки П.Дж., Ллойд А., Коронео М.Т., Уэйкфилд Д. Экспрессия ММП и ТИМП в птеригиях человека и культивируемых эпителиальных клетках птеригия.Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2000; 41: 671–679. [PubMed] [Google Scholar] 12. Ди Джироламо Н., Коронео М.Т., Уэйкфилд Д. Активный матрилизин (ММР-7) в птеригиях человека: потенциальная роль в ангиогенезе. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2001; 42: 1963–1968. [PubMed] [Google Scholar] 13. Ди Джироламо Н., Уэйкфилд Д., Коронео МТ. Дифференциальная экспрессия матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов на продвигающейся головке птеригиума. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2000; 41: 4142–4149. [PubMed] [Google Scholar] 14. Фармакакис Н, Ассимакопулу М.Иммуногистохимическое определение белка теплового шока 27 и Ki-67 в птеригиуме человека. Br J Ophthalmol. 2001; 85: 1392–1393. DOI: 10.1136 / bjo.85.11.1384j. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Пагулатос Д., Фармакакис Н., Лакументас Дж., Ассимакопулу М. Гипоксия-индуцируемый фактор-1α, белок фон Хиппель-Линдау и экспрессия белка теплового шока в офтальмологическом птеригиуме и нормальной конъюнктиве. Mol Vis. 2014; 20: 441–457. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 16. Гликман М.Х., Цехановер А.Протеолитический путь убиквитин-протеасома: разрушение ради конструирования. Physiol Rev.2002; 82: 373–428. DOI: 10.1152 / Physrev.00027.2001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Миндаль Дж. Б., Коэн Г. М.. Протеасома: новая мишень для химиотерапии рака. Лейкемия. 2002; 16: 433–443. DOI: 10.1038 / sj.leu.2402417. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Демаси М., Дэвис К.Дж. Ингибиторы протеасом вызывают внутриклеточную агрегацию белков и гибель клеток по кислородзависимому механизму. FEBS Lett.2003. 542: 89–94. DOI: 10.1016 / S0014-5793 (03) 00353-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 19. Sitte N, Merker K, von Zglinicki T, Grune T. Окисление и деградация белков во время пролиферативного старения фибробластов MRC-5 человека. Free Radic Biol Med. 2000; 28: 701–708. DOI: 10.1016 / S0891-5849 (99) 00279-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Грун Т, Райнхекель Т, Дэвис К.Дж. Распад окисленных белков в клетках млекопитающих. FASEB J. 1997; 11: 526–534. DOI: 10.1096 / fasebj.11.7.9212076. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21.Гачинская М., Осмульский П.А., Подопечный В.Ф. Смотритель или гробовщик? Роль протеасомы в старении. Mech Aging Dev. 2001; 122: 235–254. DOI: 10.1016 / S0047-6374 (00) 00246-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Стефани М, Добсон СМ. Агрегация белков и совокупная токсичность: новое понимание сворачивания белков, болезней неправильного сворачивания и биологической эволюции. J Mol Med. 2003. 27: 678–699. DOI: 10.1007 / s00109-003-0464-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Keller JN, Gee J, Ding Q. Протеасома в старении мозга.Aging Res Rev.2002; 1: 279–293. DOI: 10.1016 / S1568-1637 (01) 00006-X. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Holtz WA, O’Malley KL. Миметики паркинсонизма вызывают аспекты развернутого белкового ответа при гибели дофаминергических нейронов. J Biol Chem. 2003; 278: 19367–19377. DOI: 10.1074 / jbc.M211821200. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. Шерман М.Ю., Гольдберг АЛ. Клеточная защита от развернутых белков: клеточный биолог думает о нейродегенеративных заболеваниях. Нейрон. 2001; 29: 15–32. DOI: 10.1016 / S0896-6273 (01) 00177-5.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. Холливелл Б. Гипотеза: протеасомная дисфункция: первичное событие нейрогенерации, которое приводит к нитративному и окислительному стрессу и последующей гибели клеток. Ann N Y Acad Sci. 2002; 962: 182–194. DOI: 10.1111 / j.1749-6632.2002.tb04067.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Kwak MK, Cho JM, Huang B, Shin S, Kensler TW. Роль повышенной экспрессии протеасомы в защитных эффектах сульфорафана против цитотоксичности, опосредованной перекисью водорода, в клетках нейробластомы мышей.Free Radic Biol Med. 2007. 43: 809–817. DOI: 10.1016 / j.freeradbiomed.2007.05.029. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. Квак МК, Хуанг Б., Чанг Х, Ким Дж. А., Кенслер Т. В.. Тканево-специфическое увеличение каталитических субъединиц протеасомы 26S за счет непрямого антиоксидантного действия дитиолетиона у мышей: повышенная активность в отношении деградации аномального белка. Life Sci. 2007. 80: 2411–2420. DOI: 10.1016 / j.lfs.2007.04.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Kwak MK, Wakabayashi N, Greenlaw JL, Yamamoto M, Kensler TW.Антиоксиданты усиливают экспрессию протеасом млекопитающих через сигнальный путь Keap1-Nrf2. Mol Cell Biol. 2003; 23: 8786–8794. DOI: 10.1128 / MCB.23.23.8786-8794.2003. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Kwak MK, Wakabayashi N, Itoh K, Motohashi H, Yamamoto M, Kensler TW. Модуляция экспрессии генов дитиолетионами для химиопрофилактики рака через путь Keap1-Nrf2. Идентификация новых кластеров генов для выживания клеток. J Biol Chem. 2003. 278: 8135–8145. DOI: 10.1074 / JBC.M211898200. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Пак Х.М., Ким Дж.А., Квак МК. Защита от цитотоксичности бета-амилоида с помощью сульфорафана: роль протеасомы. Arch Pharm Res. 2009. 32: 109–115. DOI: 10.1007 / s12272-009-1124-2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Квак МК, Кенслер Т.В. Индукция 26S субъединицы протеасомы PSMB5 бифункциональным индуктором 3-метилхолантреном через путь Nrf2-ARE, но не через AhR / Arnt-XRE. Biochem Biophys Res Commun. 2006; 345: 1350–1357. DOI: 10.1016 / j.bbrc.2006.05.043. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Крафт DC, Deocaris CC, Wadhwa R, Rattan SI. Предварительная инкубация с ингибитором протеасом MG-132 усиливает протеасомную активность через фактор транскрипции Nrf2 в стареющих фибробластах кожи человека. Ann N Y Acad Sci. 2006; 1067: 420–424. DOI: 10.1196 / annals.1354.060. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Ли Дж. М., Джонсон Дж. А. Важная роль пути Nrf2-ARE в механизме клеточной защиты. J Biochem Mol Biol. 2004. 37: 139–143. [PubMed] [Google Scholar] 36.Сато Т., Ито А., Мори Ю. Интерлейкин 6 усиливает продукцию тканевого ингибитора металлопротеиназ (ТИМП), но не матриксных металлопротеиназ фибробластами человека. Biochem Biophys Res Commun. 1990; 170: 824–829. DOI: 10.1016 / 0006-291X (90) 92165-V. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Brenneisen P, Wlaschek M, Wenk J, Blaudschun R, Hinrichs R, Dissemond J, Krieg T., Scharffetter-Kochanek K. Индукция интерстициальной коллагеназы и стромелина-1 ультрафиолетом B происходит в человеческих фибробластах кожи через аутокрин-6-зависимые интерлейкины. петля.FEBS Let. 1999; 449: 36-40. DOI: 10.1016 / S0014-5793 (99) 00402-0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Кори А.Х., Оуэн Т.К., Барлтроп Дж. А., Кори Дж. Г.. Использование анализа водорастворимого тетразолия / формазана для анализа роста клеток в культуре. Cancer Commun. 1991; 3: 207–212. DOI: 10.3727 / 095535491820873191. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Кабаллеро М., Литон ПБ, Эпштейн Д.Л., Гонсалес П. Ингибирование протеасом хроническим окислительным стрессом в клетках трабекулярной сети человека. Biochem Biophys Res Commun. 2003. 308: 346–352.DOI: 10.1016 / S0006-291X (03) 01385-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Брэдфорд ММ. Быстрый и чувствительный метод количественного определения количества белка в микрограммах, использующий принцип связывания белок-краситель. Анальная биохимия. 1976; 72: 248–254. DOI: 10.1016 / 0003-2697 (76)

-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Хондроджианни Н., Петропулос I, Франчески К., Фриге Б., Гонос Е.С. Культуры фибробластов здоровых долгожителей имеют активную протеасому. Exp Gerontol. 2000; 35: 721–728. DOI: 10.1016 / S0531-5565 (00) 00137-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 42. Мураками Ю., Канда К., Йокота К. -И, Канаяма Х-О, Кагава С. Прогностическое значение экспрессии иммунопротеосомных субъединиц у пациентов с почечно-клеточной карциномой: предварительное исследование. Мол Урол. 2001; 5: 113–119. DOI: 10,1089 / 10915360152559594. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 43. Патель А., Чжан С., Шреста А.К., Матуру П., Мурти Б., Шиванна Б. Омепразол индуцирует гемоксигеназу-1 в эндотелиальных клетках микрососудов легких плода человека через независимый от перекиси водорода сигнальный путь Nrf2.Toxicol Appl Pharmacol. 2016; 311: 26–33. DOI: 10.1016 / j.taap.2016.10.002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Веллеман С.Г. Количественная оценка иммуноблотов с помощью цифрового сканера. Биотехники. 1995; 18: 1056–1058. [PubMed] [Google Scholar] 45. Laemmli UK. Расщепление структурных белков при сборке головки бактериофага Т4. Природа. 1970; 227: 680–685. DOI: 10.1038 / 227680a0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46. Ниаракис А., Джаннопулу Е., Равазула П., Панагиотопулос Е., Заркадис И.К., Алетрас А.Дж.Обнаружение скрытой растворимой формы матричной металлопротеиназы мембранного типа 1, связанной с тканевым ингибитором матриксных металлопротеиназ-2 в перипротезных тканях и жидкостях из эндопротезов рыхлой артропластики. FEBS J. 2013; 280: 6541–6555. DOI: 10.1111 / febs.12555. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 47. Merrell MD, Jackson JP, Augustine LM, Fisher CD, Slitt AL, Maher JM, Huang W., Moore DD, Zhang Y, Klaassen CD, Cherrington NJ. Активатор Nrf2 олтипраз также активирует конститутивный рецептор андростана.Утилизация наркотиков. 2008; 36: 1716–1721. DOI: 10.1124 / dmd.108.020867. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Yu Z, Shao W., Chiang Y, Foltz W., Zhang Z, Ling W., Fantus IG, Jin T. Oltipraz активизирует ядерный фактор (эритроидный 2) -подобный 2 (NRF2) антиоксидантную систему и предотвращает инсулинорезистентность и ожирение, вызванное с помощью диеты с высоким содержанием жиров у мышей C57BL / 6J. Диабетология. 2011; 54: 922–934. DOI: 10.1007 / s00125-010-2001-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Kokot A, Metze D, Mouchet N, Galibert MD, Schiller M, Luger TA, Böhm M.α-меланоцит-стимулирующий гормон противодействует подавляющему эффекту UVB на Nrf2 и Nrf-зависимую экспрессию генов в коже человека. Эндокринология. 2009; 150: 3197–3206. DOI: 10.1210 / en.2008-1315. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Каннан С., Джайсвал А.К. Регулирование фактора транскрипции фактора 2, связанного с NF-E2, с помощью низких и высоких доз UVB. Cancer Res. 2006; 66: 8421–8429. DOI: 10.1158 / 0008-5472.CAN-06-1181. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. He Z, Cho YY, Ma WY и др. Регулирование ультрафиолетового B-индуцированного фосфорилирования гистона h4 по серину 10 с помощью киназы Fyn.J Biol Chem. 2005; 280: 2446–2454. DOI: 10.1074 / jbc.M402053200. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Хо Дж. Н., Ли Й. Х., Пак Дж. С., Джун У. Дж., Ким Х. К., Хон Б. С., Шин Д.Х., Чо Х.Й. Защитные эффекты аукубина, выделенного из Eucommia ulmoides , против УФ-В-индуцированного окислительного стресса в фибробластах кожи человека. Биол Фарм Булл. 2005. 28: 1244–1248. DOI: 10.1248 / bpb.28.1244. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53. Cavinato M, Koziel R, Romani N, Weinmüllner R, Jenewein B, Hermann M, Dubrac S, Ratzinger G, Grillari J, Schmuth M, Jansen-Dürr P.У-индуцированное Старение дермальных фибробластов человека включает в себя ухудшение протеасомы и повышенную активность аутофагической. Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2017; 72: 632–639. [PubMed] [Google Scholar] 54. Хондроджианни Н., Стратфорд, Флорида, Тругакос И.П., Фриге Б., Риветт А.Дж., Гонос Е.С. Центральная роль протеасомы в старении и выживании фибробластов человека: индукция фенотипа, подобного старению, при его ингибировании и устойчивость к стрессу при его активации. J Biol Chem. 2003; 278: 28026–28037. DOI: 10.1074 / jbc.M301048200. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55. Соломон А, Ли Д-Кью, Ли С-Б, Ценг SCG. Регулирование коллагеназы, стромелизина и активатора плазминогена урокиназного типа в первичных фибробластах тельца Pterygium воспалительными цитокинами. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2000; 41: 2154–2163. [PubMed] [Google Scholar] 56. Bulteau A-L, Moreau M, Nizard C, Friguet B. Протеасома и фотостарение. Эффекты УФ-излучения. Ann N Y Acad Sci. 2007; 1100: 280–290. DOI: 10.1196 / анналы.1395.029. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57.Debacq-Chainiaux F, Borlon C, Pascal T, Royer V, Eliaers F, Ninane N, Carrard G, Friguet B, de Longueville F, Boffe S, Remacle J, Toussaint O. Неоднократное воздействие УФ-B на фибробласты кожи человека на субцитотоксическом уровне вызывает преждевременное старение через сигнальный путь TGF-beta1. J Cell Sci. 2005. 118: 743–758. DOI: 10.1242 / jcs.01651. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 58. Каталгол Б, Зиаджа I, Брэзинг Н, Юнг Т., Хён А, Альпертунга Б, Шредер П., Хондроджианни Н, Гонос Э.С., Петропулос I, Фригет Б, Клотц Л.О., Крутманн Дж., Грюн Т.Протеасома является неотъемлемой частью экспрессии генов, индуцированной солнечным ультрафиолетовым излучением. J Biol Chem. 2009. 284: 30076–30086. DOI: 10.1074 / jbc.M109.044503. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 59. Bulteau A-L, Moreau M, Nizard C, Friguet B. Нарушение функции протеасом при облучении кератиноцитов человека UVA и UVB. Free Radic Biol Med. 2002; 32: 1157–1170. DOI: 10.1016 / S0891-5849 (02) 00816-X. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 60. Парсонс С., Парсонс Дж. Т.. Киназы семейства Src, ключевые регуляторы передачи сигналов.Онкоген. 2004; 23: 7906–7909. DOI: 10.1038 / sj.onc.1208160. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 61. Fineschi S, Reith W., Guerne PA, Dayer J-M, Chizzolini C. Протеасомная блокада оказывает антифибротическое действие за счет координированного подавления коллагена типа I и тканевого ингибитора металлопротеиназы-1 и повышения продукции металлопротеиназы-1 в дермальных фибробластах человека. FASEB J. 2006; 20: 562–564. DOI: 10.1096 / fj.05-4870fje. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 62. Гоффин Л., Сегин-Эстевес К., Альварес М., Райт В., Чиццолини К.Регуляция транскрипции матриксной металлопротеиназы-1 и коллагена 1A2 объясняет антифиброзный эффект, проявляемый ингибированием протеасом в дермальных фибробластах человека. Arthritis Res Ther. 2010; 12: R73. DOI: 10.1186 / ar2991. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 63. Ortiz-Lazareno PC, Hernandez-Flores G, Dominguez-Rodriguez JR, Lerma-Diaz JM, Jave-Suarez LF, Aguilar-Lemarroy A, Gomez-Contreras PC, Scott-Algara D, Bravo-Cuellar A. Ингибитор протеасомы MG132 модулирует провоспалительное продукция цитокинов и экспрессия их рецепторов в клетках U937: участие ядерного фактора-κB и белка-активатора-1.Иммунология. 2008; 124: 534–541. DOI: 10.1111 / j.1365-2567.2008.02806.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Анализ экспрессии гена WWOX и уровней белка в птеригиуме

В текущем исследовании кальбиндин-D9k (CaBP-9k), мощный биомаркер для скрининга эстрогеноподобных химических веществ окружающей среды in vivo и in vitro, был принят для изучения потенциальных эстрогеноподобных свойств следующих парабенов: пропил-, изопропил- , бутил- и изобутил-парабен. Незрелым самкам крыс вводили в течение 3 дней с 14 по 16 день после рождения 17? -Этинилэстрадиол (ЭЭ, 1 мг / кг массы тела (МТ) в день) или парабены (62.5, 250 и 1000 мг / кг МТ в сутки). В утеротрофических анализах значительно увеличившаяся масса матки была обнаружена в группе, получавшей EE, и в группах, получавших наибольшую дозу изопропил-, бутил- и изобутил-парабенов. Кроме того, эти парабены индуцировали уровни мРНК и белка CaBP-9k в матке, тогда как совместное лечение парабенами и фулвестрантом (Faslodex, ранее известный как ICI 182, 780), антагонистом чистого эстрогенового рецептора (ER), полностью меняло индуцированный парабеном экспрессия генов и увеличение веса матки.Чтобы исследовать ER-опосредованный механизм (ы), посредством которого парабены проявляют свои эффекты, был проанализирован уровень экспрессии ERÎ ± и рецептора прогестерона (PR). Воздействие EE или парабенов вызвало резкое снижение экспрессии обоих ER? Уровни мРНК и белка, тогда как совместное лечение с фулвестрантом полностью изменило эти эффекты. Эти данные показали разницу CaBP-9k и ER? экспрессия, предполагая, что CaBP-9k не может экспрессироваться через ER? путь. Влияние парабенов на экспрессию CaBP-9k через посредничество PR значительно увеличило экспрессию гена PR матки, хорошо известного гена, регулирующего ER, как на уровне транскрипции, так и на уровне трансляции, было показано в наибольшей дозе изопропил- и бутилпарабенов. .Эти парабены индуцировали экспрессию гена PR, которая полностью блокировалась фулвестрантом. Этот результат указывает на то, что экспрессия CaBP-9k может включать PR-посредники в эстрогенном эффекте парабена в матке незрелой крысы. Взятые вместе, парабены проявляют эстрогеноподобное свойство in vivo, которое может быть опосредовано PR и / или ER? сигнальный путь. Кроме того, наши результаты расширили текущее понимание потенциальных побочных эффектов парабенов, связанных с их эстрогеноподобной активностью.Дальнейшие исследования необходимы для более подробного выяснения неблагоприятного воздействия парабенов на человека и дикую природу.

Низкий рост и первичная недостаточность яичников, возможно, из-за эффекта хромосомного положения в сбалансированной транслокации X; 1

Fortuno C, Labarta E. Генетика первичной недостаточности яичников: обзор. J Assist Reprod Genet. 2014; 12: 1573–85.

Артикул

Google ученый

Welt СК.Первичная недостаточность яичников: более точный термин для преждевременной недостаточности яичников. Clin Endocrinol. 2008. 68: 499–509.

Артикул

Google ученый

Visser JA, Schipper I, Laven JS, Themmen AP. Антимюллеров гормон: маркер резерва яичников при первичной недостаточности яичников. Nat Rev Endocrinol. 2012; 8: 331–41.

CAS
PubMed

Google ученый

Персани Л., Россетти Р., Каччиаторе С. Гены, участвующие в преждевременной недостаточности яичников у человека. J Mol Endocrinol. 2010; 45: 257–79.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

Zinn AR. Х-хромосома и яичник. J Soc Gynecol Investig. 2001; 8: S34–6.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

Госвами Д., Конвей Г.С. Преждевременная недостаточность яичников.Обновление Hum Reprod. 2005; 11: 391–410.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

Мойсес-Оливейра М., Дос Сантос Г.Р., Голло Дантас А., Уэта Р., Перес А.Б., Хайдар М. и др. Генетические механизмы, приводящие к первичной аменорее при сбалансированных транслокациях Х-аутосомы. Fertil Steril. 2015; 103: 1289–96.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

Therman E, Laxova R, Susman B.Критическая область на человеческом Xq. Hum Genet. 1990; 85: 455–61.

CAS
PubMed

Google ученый

Rizzolio F, Bione S, Sala C, Goegan M, Gentile M, Gregato G и др. Хромосомные перестройки в Xq и преждевременная недостаточность яичников: картирование 25 новых случаев и обзор литературы. Hum Reprod. 2006; 21: 1477–83.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

10.

Мумм С., Эррера Л., Вельц П.В., Скардови А., Нагараджа Р., Эспозито Т. и др. Х / аутосомные транслокации в критической области Xq, связанные с преждевременной недостаточностью яичников, находятся внутри и вне генов. Геномика. 2001. 76: 30–6.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

11.

Прюитт Р.Л., Чен Х., Барнс Р.И., Зинн АР. Большинство X; аутосомные транслокации, связанные с преждевременной недостаточностью яичников, не прерывают Х-сцепленные гены.Цитогенетические и геномные исследования. 2002; 97: 32–8.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

12.

Шлут-Болард С., Оттавиани А., Гилсон Э., Магдлниер Ф. Эффекты положения хромосомы и пестрота генов: влияние на патологии. В: Трюгве Т., редактор. Справочник по эпигенетике: новая молекулярная и медицинская генетика. Глава 6. AL, США: Бирмингем; 2011.

Google ученый

13.

Genesio R, Melis D, Gatto S, Izzo A, Ronga V, Cappuccio G и др. Разнообразное молчание посредством эпигенетических модификаций большой области Xq в случае сбалансированной транслокации X; 2 с фенотипом, подобным Incontinentia Pigmenti. Эпигенетика. 2011; 6: 1242–7.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

14.

Bione S, Rizzolio F, Sala C, Ricotti R, Goegan M, Manzini MC и др. Мутационный анализ двух генов-кандидатов на преждевременную недостаточность яичников, DACh3 и POF1B.Hum Reprod. 2004. 19: 2759–66.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

15.

Rizzolio F, Sala C, Alboresi S, Bione S, Gilli S, Goegan M, et al. Эпигенетический контроль критической области преждевременной недостаточности яичников на аутосомных генах, перемещенных в Х-хромосому: гипотеза. Hum Genet. 2007; 121: 441–50.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

16.

Gleicher N, Barad DH. Ген FMR1 как регулятор набора яичников и резерва яичников. Obset Gynecol Surv. 2010; 65: 523–30.

Артикул

Google ученый

17.

Мюррей А. Преждевременная недостаточность яичников и ген FMR1. Semin Reprod Med. 2000. 18: 59–66.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

18.

Миано М.Г., Лаперута С., Чиурацци П., Д’Урсо М., Урсини М.В.Дисфункция яичников и аллели FMR1 в большой итальянской семье с нарушениями POF и FRAXA: отчет о болезни. BMC Med Genet. 2007; 8:18.

PubMed Central
PubMed
Статья

Google ученый

19.

Jin M, Yu Y, Huang H. Обновленная информация о первичной недостаточности яичников. Sci China Life Sci. 2011; 55: 677–86.

Артикул

Google ученый

20.

Виттенбергер М.Д., Хагерман Р.Дж., Шерман С.Л., МакКонки-Розелл А., Велт К.К., Арматур Р.В. и др.Премутация и воспроизведение FMR1. Fertil Steril. 2007; 87: 456–65.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

21. Диаграммы роста

от Центра по контролю и профилактике заболеваний (2000) http://www.cdc.gov/growthcharts.

22.

Hantash FM, Goos DG, Tsao D, Quan F, Buller-Burckle A, Peng M, et al. Качественная оценка статуса триплетных повторов FMR1 (CGG) n у нормальных, промежуточных, предмутационных, полных мутаций и мозаичных носителей у обоих полов: значение для носителей синдрома ломкой Х и скрининг новорожденных.Генетика в медицине. 2010; 12: 162–73.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

23.

Liehr T, Weise A, Heller A, Starke H, Mrasek K, Kuechler A, et al. Многоцветное разбиение хромосом (MCB) с помощью зондов на основе YAC / BAC и библиотек ДНК-микродиссекций для конкретных участков. Cytogenet Genome Res. 2002; 97: 43–50.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

24.

Jacobs PA, Migeon BR. Исследования инактивации Х-хромосомы при трисомиях. Cytogenet Cell Genet. 1989. 50: 75–7.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

25.

Pfarr W., Webersinke G, Paar C., Wechselberger C. Иммунодетекция 5′-метилцитозина на хромосомах, окрашенных по Гимзе. Биотехнологии. 2005; 38: 527–30.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

26.

Бойл С., Гилкрист С., Бриджер Дж. М., Махи Н., Эллис Дж. А., Бикмор В. А.. Пространственная организация хромосом человека в ядрах нормальных и эмерин-мутантных клеток. Hum Mol Genet. 2001; 10: 211–9.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

27.

База данных геномных вариантов: http://dgv.tcag.ca/dgv/app/.

28.

База данных DECIPHER: http://decipher.sanger.ac.uk/.

29.

UCSC Genome Browser: http: // genome.ucsc.edu/.

30.

Консорциум ISCA и общедоступная база данных https://www.clinicalgenome.org/

31.

Программное обеспечение Primer 3 http://bioinfo.ut.ee/primer3-0.4.0/primer3/

32.

Бернардино Дж., Ламольятт Э., Ломбард М., Нивело А., Малфой Б., Датрилло Б. и др. Метилирование ДНК Х-хромосом женского пола: полуколичественный анализ in situ. Хромосома. 1996. 104: 528–35.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

33.

Бернардино-Сгерри Дж., Флагелло Д., Датрилло Б. Общее метилирование ДНК и структура хроматина нормальных и аномальных Х-хромосом. Cytogenet Genome Res. 2002; 99: 85–91.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

34.

Кремер Т., Кремер М., Дитцель С., Мюллер С., Соловей И., Факан С. Хромосомные территории — функциональный ядерный ландшафт. Curr Opin Cell Biol. 2006; 18: 307–16.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

35.

Harewood L, Schütz F, Boyle S, Perry P, Delorenzi M, Bickmore WA и др. Влияние ядерной реорганизации, вызванной транслокацией, на экспрессию генов. Genome Res. 2010. 20: 554–64.

CAS
PubMed Central
PubMed
Статья

Google ученый

36.

Hiratani I, Ryba T., Itoh M, Yokochi T., Schwaiger M, Chang CW и др. Глобальная реорганизация репликационных доменов во время дифференцировки эмбриональных стволовых клеток. PLoS Biol.2008; 6, с245.

PubMed Central
PubMed
Статья

Google ученый

37.

Schuettler J, Peng Z, Zimmer J, Sinn P, Von Hagens C, Strowitzki T, et al. Вариабельная экспрессия гена Fragile X Mental Retardation 1 (FMR1) у пациентов с синдромом преждевременной недостаточности яичников не зависит от количества триплетов (CGG) n в экзоне 1. Hum Reprod. 2011; 26: 1241–51.

CAS
PubMed
Статья

Google ученый

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

5 наихудших проблем со зрением — слабое зрение в Новой Англии

Если вас интересует Топ-10 списка на 2021 год, вы можете найти его, <щелкнув здесь>!

10 лучших средств для слабовидения при возрастной дегенерации желтого пятна (AMD) — 2021

Вот 5 худших проблем со зрением , от которых страдают пожилые люди.

1. Глаукома

Резкая и сильная боль в глазах и появление ореолов могут быть признаками глаукомы. Глаукома — это заболевание глаз, вызванное повышенным давлением жидкости в глазах, которое потенциально может повредить хрупкие волокна зрительного нерва. Это повреждение необратимо и может даже привести к слепоте.

2. Дегенерация желтого пятна

Дегенерация желтого пятна, также известная как возрастная дегенерация желтого пятна, является основной причиной слепоты у пожилых людей.Сухая и влажная — это два типа AMD, которые поражают пожилых людей. Сухая AMD поражает почти 90 процентов пожилых людей и возникает, когда кровеносные сосуды желтого пятна со временем истончаются. Влажная AMD — это когда неправильные разрастания кровеносных сосудов выводят жидкость и кровь из глаз, что, в свою очередь, приводит к потере зрения и даже слепоте.

3. Сухие глаза

Это заболевание глаз возникает, когда слезные железы не могут производить достаточно качественной слезы. Сухие глаза — очень неприятное состояние, вызывающее жжение, покраснение и зуд.В крайних случаях может произойти потеря зрения. Домашний увлажнитель воздуха или специальные глазные капли могут вызвать настоящие слезы. В более серьезных случаях сухости глаз могут потребоваться рецептурные капли или операция.

4. Катаракта

Катаракта вызывает помутнение хрусталика глаза человека. Это происходит, когда происходит расщепление важнейших белков, основная цель которых — поддерживать чистоту хрусталика. Катаракта часто встречается у людей старше 45 лет. Часто в этом возрасте линзы начинают испытывать проблемы с изменением формы, чтобы сфокусировать зрение на дальнозорких и близких объектах.

5. Затуманенное зрение

Проблемы со зрением в условиях недостаточного освещения и снижение интенсивности цвета — это симптомы, на которые следует обращать внимание пожилым людям. Хирургическое вмешательство — единственный способ вылечить помутнение зрения, но оно рекомендуется только в том случае, если катаракта ухудшает способность человека выполнять повседневные дела или при сильной боли.

Это наиболее распространенные и опасные проблемы со зрением, от которых страдают пожилые люди. Убедитесь, что ваш пожилой близкий регулярно посещает своего офтальмолога, и сообщайте его врачу, если он испытывает какие-либо изменения зрения.Эти профилактические меры могут спасти зрение старшего.

Если вам или близкому человеку поставили диагноз «дегенерация желтого пятна», мы создали эту электронную книгу из 12 разделов «Что теперь? — бесплатный ресурс, который поможет вам или близкому человеку, у которого диагностирована дегенерация желтого пятна. <Щелкните здесь>, чтобы получить доступ.

О слабовидении и слепоте в Новой Англии

Новая Англия со слабым зрением и слепотой дает надежду только благодаря технологиям, обучению и уходу.Мы предоставляем полный спектр услуг по обучению реабилитации с помощью вспомогательных технологий. Мы предлагаем почти 100% всех основных электронных продуктов для слабовидящих, слепых и программных продуктов, несколько демонстрационных залов вспомогательных технологий и команду тренеров по реабилитации по технологиям зрения, чтобы помочь всем с нарушениями зрения.

Мы предоставляем «выбор пациента», демонстрируя многочисленные варианты технологий от самых уважаемых мировых поставщиков, все в соответствии с индивидуальными бюджетными ограничениями и личными, образовательными или профессиональными целями.Мы также предлагаем индивидуальные обучающие решения и поддержку по устранению неполадок.

Широко известная, проверенная и пользующаяся доверием по всей Новой Англии, наша команда имеет более 75 лет опыта работы в области слабовидения и слепоты. Наши предложения по талантам, технологиям и обучению не имеют себе равных и пользуются большим уважением. Мы — чрезвычайно уникальный и необычный ресурс для всех, кто страдает потерей зрения в Новой Англии. Мы здесь, чтобы помочь.

Благодаря нашим необязательным демонстрациям — либо в одном из наших удобно расположенных выставочных залов вспомогательных технологий, либо у себя дома, в офисе или в школе — клиенты получают 2-часовую бесплатную персональную демонстрацию почти 100% всех доступных технологий для слабовидящих и слепых.

Другие варианты синдрома Тернера (дети, стационар)

МКБ: Q96.8

Диагностика заболевания

К каким специалистам следует обращаться

Лечение заболевания

Профилактика заболевания

Оперативные вмешательства | Алматинская многопрофильная клиническая больница

что такое и как лечить.

Птеригиум код по МКБ-10

Причины развития птеригиума

Виды птеригиума

Симптомы птеригиума

Диагностика птеригиума

Лечение птеригиума

Народные средства против птеригиума

Профилактика птеригиума

причины, симптомы, диагностика и лечение

Общие сведения

Причины факосклероза

Патогенез

Симптомы факосклероза

Осложнения

Диагностика

Лечение факосклероза

Консервативная терапия

Хирургическое лечение

Экспериментально лечение

Прогноз и профилактика

Транскрипционное профилирование для идентификации ключевых генов и путей развития птеригиума

Связи с клеточной адгезией и ремоделированием внеклеточного матрикса

Ссылки на иммунологию

UVB-опосредованное подавление протеасомы в культивируемых первичных фибробластах птеригия человека

Alexios J.Aletras

Иоаннис Триливас

Мария- Эльпида Кристопулу

Сотирия Дракули

Константин Д.Георгакопулос

Николаос Фармакакис

Реферат

Предпосылки

Методы

Результаты

Заключение

Предпосылки

Методы

Отбор образцов

Конъюнктивальные и первичные культуры фибробластов Pterygium

UVB-облучение культивируемых клеток

Жизнеспособность клеток

Определение протеасомной активности

РНК и анализ ОТ-ПЦР

Количественная ПЦР в реальном времени

Иммуноблот-анализ и обнаружение белка PSMB5

Статистический анализ

Результаты

Экспрессия PSMB5 в птеригиуме и нормальной ткани конъюнктивы

Влияние УФ-излучения В на экспрессию и активность PSMB5 в фибробластах

Влияние УФ-В облучения на экспрессию Nrf2 в фибробластах птеригиума

Влияние УФ-В облучения на экспрессию PSMB5 и Nrf2 в фибробластах птеригия после предварительной обработки ингибитором src-киназ PP2

Обсуждение

Выводы

Благодарности

Доступность данных и материалов

Аббревиатуры

Вклад авторов

Примечания

Одобрение этики и согласие на участие

Согласие на публикацию

Конкурирующие интересы

Примечание издателя

Ссылки

Анализ экспрессии гена WWOX и уровней белка в птеригиуме

Низкий рост и первичная недостаточность яичников, возможно, из-за эффекта хромосомного положения в сбалансированной транслокации X; 1

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Что сохраняется в файле cookie?

5 наихудших проблем со зрением — слабое зрение в Новой Англии

Добавить комментарий Отменить ответ