Стерилизации средство: Средства для стерилизации и дезинфекции

 ISO — ISO 14160: 2020 — Стерилизация медицинских изделий. Жидкие химические стерилизующие агенты для одноразовых медицинских изделий, в которых используются ткани животных и их производные.
 
 Этот документ определяет требования к характеристикам жидкого химического стерилизующего агента и к разработке, валидации, контролю процесса и мониторингу стерилизации жидкими химическими стерилизующими агентами одноразовых медицинских изделий, содержащих, полностью или частично, материалы животного происхождения. .
 В этом документе рассматривается контроль рисков, связанных с заражением бактериями и грибками, путем применения процесса жидкой химической стерилизации. Риски, связанные с другими микроорганизмами, можно оценить с помощью других методов (см. ПРИМЕЧАНИЕ 1).
 Этот документ не применим к материалам человеческого происхождения.
 В этом документе не описаны методы валидации инактивации вирусов и возбудителей трансмиссивной губчатой ​​энцефалопатии (TSE) (см. ПРИМЕЧАНИЕ 2 и ПРИМЕЧАНИЕ 3).
 В этом документе не описаны методы проверки инактивации или уничтожения простейших и паразитов.
 Требования к валидации и текущему контролю, описанные в этом документе, применимы только к определенному процессу стерилизации медицинского изделия, который выполняется после производственного процесса, и не учитывают летальные эффекты других шагов по снижению бионагрузки (см. ПРИМЕЧАНИЕ 4).
 В этом документе не указаны тесты для установления влияния любого выбранного процесса стерилизации на пригодность медицинского изделия (см. ПРИМЕЧАНИЕ 5).
 Этот документ не охватывает уровень остаточного стерилизующего агента в медицинских изделиях (см. ПРИМЕЧАНИЕ 6).
 Руководство по характеристике жидкого химического стерилизующего агента и по разработке, валидации, контролю процесса и мониторингу стерилизации жидкими химическими стерилизующими агентами одноразовых медицинских изделий, содержащих, полностью или частично, материалы животного происхождения, приведено в справочное приложение A.
 ПРИМЕЧАНИЕ 1 Важное значение имеет предварительное применение принципов менеджмента риска к медицинским изделиям, использующим ткани животных, как описано в ISO 22442-1.ISO 18362 предоставляет информацию о контроле микробных рисков во время обработки медицинских продуктов на основе клеток.
 ПРИМЕЧАНИЕ 2 Жидкие химические стерилизующие агенты, традиционно используемые для стерилизации тканей животных в медицинских изделиях, могут оказаться неэффективными для инактивации возбудителей TSE, таких как губчатая энцефалопатия крупного рогатого скота (BSE) или скрейпи. Удовлетворительная валидация в соответствии с этим документом не обязательно свидетельствует об инактивации инфекционных агентов этого типа.Контроль рисков, связанных с поиском, сбором и обработкой материалов животного происхождения, описан в ISO 22442-2.
 ПРИМЕЧАНИЕ 3. Валидация инактивации, устранения или устранения и инактивации вирусов и агентов TSE описана в ISO 22442-3.
 ПРИМЕЧАНИЕ 4. Процессы производства медицинских изделий, содержащих ткани животных, часто включают воздействие химических агентов, которые могут значительно снизить бионагрузку на медицинское изделие. После производственного процесса медицинское изделие подвергается определенному процессу стерилизации.
 ПРИМЕЧАНИЕ 5. Такие испытания являются важной частью проектирования и разработки медицинского изделия.
 ПРИМЕЧАНИЕ 6 ISO 10993-17 определяет метод установления допустимых пределов для остатков стерилизующих агентов.
 ПРИМЕЧАНИЕ 7. Стандарты систем менеджмента качества (см. ISO 13485) могут использоваться для контроля всех стадий производства, включая процесс стерилизации.
 Определение времени десятичного восстановления (значение D) химических агентов, используемых в больницах для дезинфекции | BMC Infectious Diseases 
 Классификация спектра активности каждого химического агента в соответствии с D-значениями тестовых бактерий при заданных условиях описывает его возможное использование в программах инфекционного контроля в среде здравоохранения [3, 8, 10].Однако не существует дезинфицирующего средства, которое могло бы обслуживать все ситуации и удовлетворить все потребности, из-за существования различных условий использования в повседневной медицинской помощи [3, 5, 6, 8, 10].
 Для лучшего понимания эффективности дезинфицирующего средства и стандартизации использования в программах санитарии в больницах тестируемые бактерии в растворе считались стандартными биологическими индикаторами (BI). Требуемая от BI задача по мониторингу процедуры дезинфекции является функцией как исходной популяции BI (N  0 ), так и значения D [15, 18].Избыточный подход к воздействию дезинфицирующих средств основан на предположении, что степень обработки инактивирует начальную бионагрузку (> 10 90 10 9 4 90 110 КОЕ / мл) и обеспечит дополнительный фактор безопасности [7, 8]. D-значения и уровни достоверности для каждого протестированного дезинфицирующего раствора и бактерий показаны в таблице 1.
  Таблица 1 Десятичное время уменьшения (D-значения) для бактерий в различных растворах химических агентов. 
 В целом ожидается, что дезинфицирующее средство будет способно по крайней мере на 5-log  10  уменьшить количество патогенных бактерий в течение периода времени более 5, но менее 10 минут [6, 19].Ожидается, что химический дезинфицирующий агент будет способен снижать количество инфекционных бактерий на 3 log  10  в течение 30 секунд [6, 19]. Однако удаление спор, которое осуществляется другими химическими агентами, требует более длительного времени воздействия для достижения установленного уровня достоверности.
 Хлоргексидин 
 Вегетативными штаммами, которые показали лучшую устойчивость к раствору 0,4% хлоргексидина, были  E. cloacae  и  S. aureus , по крайней мере 1.В 5 раз больше, чем значения D, показанные более чувствительными, которыми были  A. calcoaceticus ,  S. marcencens  и  E. coli.  Временного интервала от 3 до 4 минут было достаточно, чтобы сократить 90% популяции  E. coli ,  S. marcescens  и  A. calcoaceticus;  a 3log  10  Снижение бионагрузки для этих видов варьировалось от 9 до 12 мин.
 Штаммы спор, подвергшиеся воздействию 2,0% хлоргексидина, показали значения D в 1,4 раза выше для  B.stearothermophilus , чем у B. subtilis  .
 Было замечено, что самый сильный 2,0% раствор хлоргексидина (в 5 раз превышающий концентрацию 0,4% хлоргексидина, использованный против других бактерий) показал положительную активность против популяций  B. subtilis  и  B. stearothermophilus.  Необычно обнаружить, что смеси спирт / хлоргексидин проявляют какую-либо активность против спор и могут отражать логарифмическое сокращение вегетативных клеток, которые остаются в популяции спор, используемой для целей тестирования.Следовательно, время десятичного сокращения действительно отражало логарифмическое сокращение смешанных популяций, образованных вегетативными клетками и спорами, и этот результат должен быть подтвержден.
 Хлоргексидин в концентрации 0,4% в воде или 70% спирте широко применяется в качестве дезинфицирующего средства низкого уровня для кожи, став в последние годы ведущим больничным антисептиком благодаря подтвержденному бактерицидному (не спороцидному) эффекту и нетоксичным побочным эффектам [11 , 20, 21]. Хлоргексидин в концентрации 0,2% является хорошо известным в стоматологии противомикробным препаратом. 2.0% раствор хлоргексидина применялся для дезинфекции ортодонтических протезов после механической очистки.
 В Бразилии 0,4%, 2,0% и 4,0% растворы хлоргексидина [11] широко известны как широко используемые дезинфицирующие средства в больницах. В основных сферах применения хлоргексидин рекомендуется для дезинфекции рук и предплечий хирургической бригады и кожи пациента (предоперационные и инвазивные процедуры), а также для купания новорожденных. Сообщалось, что препарат с 0.Нанесение 5% хлоргексидина в 70% спирте на кожу ребенка перед инвазивными процедурами обеспечило значительную задержку колонизации катетеров [20].
 2,0% и 4,0% хлоргексидин, используемый для хирургических скрабов для рук, позволил снизить количество микроорганизмов на 3log  10  по сравнению с исходным количеством популяции, а 2,0% раствор вызывал меньшее раздражение рук, чем 4% препарат [20], учитывая 20 секунды трения рук [11, 21].
 Для полного погружения инвазивных медицинских устройств общее время воздействия для: (i) от 6 до 12log  10  уменьшения вегетативной бионагрузки на 0.4% раствор хлоргексидина варьировал от 49,8 мин до 99,6 мин в зависимости от устойчивости  E. cloacae , учитывая низкий уровень дезинфекции; и (ii) 12log  10  спорообразующих штаммов (n = 12) варьировались от 80,4 мин (1 час 20 минут) до 109,2 минуты (1 час 49 минут), учитывая высокий уровень дезинфекции 2,0% раствором хлоргексидина.
 2,0% хлоргексидин в 70% спирте будет протестирован в нашей лаборатории для определения D-значений тестовых штаммов бактерий, а также при асептике рук и погружении различных медицинских устройств в больницу в городе. Сан-Паулу.
 Формальдегид (0,5%) 
 В растворе 5000 мг / л (0,5%) формальдегида спорообразующие вещества  B. stearothermophilus  и  B. subtilis  показали аналогичные значения D, соответственно, показав удвоенную устойчивость из  A. calcoaceticus  и  E. cloacae ; и пятикратная устойчивость, как определено для  S. marcescens , наиболее чувствительного вида.
 Несмотря на свою эффективность в низких концентрациях (0,5%), формальдегид является высококоррозионным и токсичным соединением, которое считается потенциально канцерогенным.Его пары раздражают глаза и легкие. Максимальная концентрация 1,0 мг / л в рабочей среде рекомендована Национальным институтом безопасности и гигиены труда. В настоящее время 37% раствор концентрата формальдегида получают промышленным способом без какого-либо запаха или раздражения при работе, но со всей безопасностью. В Бразилии формальдегид дешевле, чем глутаровый альдегид, и его выбирают для использования в основном в государственных медицинских центрах для различных целей в соответствии с жесткими правилами [4, 11].
 В Бразилии в больницах 4,0% раствор формальдегида считается дезинфицирующим средством высокого уровня и применяется при 24-часовом воздействии при дезинфекции капиллярных трубок диализных систем. Для дезинфекции полукритических изделий с высоким уровнем дезинфекции формальдегид в спиртовом растворе 8,0% об. / Об. Или водном при 10,0% об. / Об. Препаратах применяется при 18-часовом воздействии. Учитывая низкий уровень дезинфекции больничных устройств, рекомендуется 4,0% раствор формальдегида на срок от 30 минут до 4 часов [11].Рекомендуемая концентрация формальдегида в препаратах в 10 раз выше, чем концентрация тестируемого раствора формальдегида на 0,5%, что показало уменьшение количества спор на 12log  10  за более короткое время, чем это предусмотрено законодательством Бразилии. И  B. subtilis , и  B. stearothermophilus  показали себя адекватными БИ при оценке эффективности формальдегида при погружении медицинских устройств. Периоды от 65,4 мин до 141,3 мин необходимы для уменьшения 6 и 12log  10  исходной популяции спор, соответственно.
 Даже для производителей парентеральных растворов 1,0% раствор формальдегида исторически ассоциировался с дезинфекцией системы очистки воды. Недавно для тех же применений формальдегид был заменен растворами перуксусной кислоты с перекисью водорода или без нее [22].
 Глутаральдегид 
 В растворе 2,0% глутаральдегида оба спорообразователя  B. subtilis  и  B. stearothermophilus  показали одинаковое значение D, D = 25.0 мин, что примерно в 3-4 раза больше, чем определенное для наиболее устойчивых вегетативных видов  E. coli  и  E. cloacae . Наиболее чувствительными вегетативными штаммами были  A. calcoaceticus ,  S. marcescens ,  S. aureus  и  E. cloacae .
 Широкое использование глутаральдегида высокого уровня дезинфекции обусловлено его особыми характеристиками. Он активен в присутствии органических материалов и не вступает в реакцию с натуральными и синтетическими материалами и моющими средствами.Он не коагулирует белковый материал и не оказывает коррозионного воздействия на металлы и резину. Однако глутаральдегид — токсичное соединение, которое раздражает кожу, слизистые оболочки и глаза. По этой причине, как и с большинством химических растворов, обращение с ним требует использования средств индивидуальной защиты [4, 11].
 Глутаральдегид в настоящее время является наиболее широко используемым химическим веществом для дезинфекции высоких и средних уровней. Раствор глутаральдегида широко используется в термолабильных и полукритических изделиях, таких как материалы, используемые в респираторной терапии, волоконно-оптические эндоскопы, а также оборудование, используемое для подачи анестезиологического газа, металлические изделия и аспирационное оборудование [23, 24].Законодательный орган Бразилии рекомендует использовать 2,0% глутарового альдегида в течение 8–10-часового воздействия для процедур стерилизации [4, 11].
  B. subtilis  и  B. stearothermophilus  оказались подходящими БИ для оценки глутарового альдегида в качестве стерилизующего агента, требующего времени воздействия 300 мин (5 ч) для уменьшения 12log  10  жизнеспособных форм спор. Глутаральдегид также подходит для дезинфекции полукритических изделий, требуя 150-минутной экспозиции для восстановления 6log  10 , соответственно, в популяциях  B.subtilis  и  B. stearothermophilus . Сравнивая стерилизующий эффект 0,5% формальдегида и 2,0% глутарового альдегида, необходимое время разложения n = 12 циклов  B. subtilis  варьировалось от 141,6 мин (2 ч 22 мин) до 300,0 мин (5 ч), соответственно. 0,5% раствор формальдегида был более эффективным по сравнению с 2,0% раствором глутаральдегида. Способность глутаральдегида сокращать n = 6 циклов вегетативных штаммов варьировала от 28,2 мин ( A. calcoaceticus ) до 42.Время воздействия 6 мин ( E. coli ). После тщательной очистки, экспонирования эндоскопов в течение 120 минут было сочтено достаточным для их немедленного повторного использования.
 Ассоциация перуксусной кислоты (PAA, 0,45%) плюс перекись водорода (H 
 2  O  2  2,2%) (Minncare  ® ) и 1,5% растворы перекиси водорода
 Наиболее устойчивые бактерии к раствору 1,0 % Minncare (0,45% перуксусной кислоты плюс 2,2% перекиси водорода) были  B. stearothermophilus ,  B.subtilis  и  E. coli , которые показали в 2–3 раза более высокие значения D, чем более чувствительные штаммы  A. calcoaceticus ,  E. cloacae  и  S. aureus , которые показали аналогичную устойчивость.
 Значения D, оцененные для вегетативных бактерий в 1,5% H  2  O  2  (pH = 3,3), были аналогичны значениям, определенным в 1,0% смеси Minncare (pH = 2,3) с 2,2% H  2  O  2 . Однако присутствие 0,45% перуксусной кислоты придавало смеси спороцидную активность, снижая в 10 раз значение D, равное  B.subtilis  (от D = 55,2 мин в 1,5% растворе H  2  O  2  до 5,9 мин в 1% смеси Minncare). Рассматривая суспензию спор  B. stearothermophilus , значение D составляло 4,7 мин для 26,5% H  2  O  2 , концентрация которого в 12 раз превышала концентрацию в 1% смеси Minncare. Перуксусная кислота при переменной концентрации ≤ 1,0% была подтверждена спороцидным действием [1, 25].
 Minncare имеет менее неприятный запах, чем глутаровый альдегид, но может раздражать глаза и дыхательные пути, поэтому при обращении с ним необходимо использовать средства индивидуальной защиты.Сбалансированная смесь перуксусной кислоты, перекиси водорода и воды разлагается на уксусную кислоту и воду, что считается безопасным в соответствии с большинством правил техники безопасности. Его коррозионное воздействие на металлические поверхности в высоких концентрациях является недостатком. Minncare не следует использовать на таких материалах, как медь или бронза, но он хорошо совместим с пластмассами. Разбавление и добавление антикоррозионного средства превращают его в подходящий продукт для дезинфекции эндоскопов [25]. Рекомендуемая концентрация для дезинфекции высокого уровня — это стабилизированная смесь 0.От 2 до 0,35% перуксусной кислоты и 4–6% перекиси водорода [1, 25].
 Стабилизированная 1,0% смесь Minncare может применяться для очистки мембран обратного осмоса и аппарата непрерывной деионизации в течение трех часов для получения очищенной воды и 18 часов для получения воды для инъекций, которые будут использоваться для приготовления парентеральных растворов, в том числе перитонеальных. диализные растворы. По данным Вессони Пенна и соавт. [22], штаммы  E. coli  ATCC 25922 и  Pseudomonas aeruginosa  ATCC 27853 показали наибольшую устойчивость среди тестируемых вегетативных грамотрицательных бактерий при воздействии, соответственно, 4.0% перекиси водорода и 1,0% Minncare (надуксусная кислота (0,45%) + раствор перекиси водорода (2,2%)), что позволяет предположить, что для мониторинга дезинфекции систем для воды должны потребоваться  P. aeruginosa  и  E. coli . цели очистки.
 В недавней работе было показано, что  B. stearothermophilus  является более подходящим BI для оценки растворов перуксусной кислоты и перекиси водорода. Для уменьшения количества жизнеспособных клеток на 6 (n = 6 циклов) и 12 (n = 12 циклов) log 90 · 107 · 10 90 · 108, соответственно, эффективное время воздействия составило 54.6 мин. И 109,2 мин. Среди вегетативных штаммов  E. coli  показал себя адекватным БИ с коэффициентом уменьшения логарифма 6 за 40,2 мин по сравнению с 35,4 минутами, наблюдаемыми для  B. subtilis , для любой дезинфекции осмосных обратных мембран (при очистке воды). систем) или полукритических статей в сфере здравоохранения.
 Раствор перекиси водорода (H  2  O  2 ) (1–2% по весу), который использовался как мощный окислитель белков и других органических и неорганических покрытых коркой почв, рекомендуется для слабой дезинфекции. [11] питьевой воды, некритических предметов, твердых и гладких поверхностей.AH  2  O  2  раствор с концентрацией 1,5 ± 0,5% был приготовлен в соответствии с бразильской больничной практикой для очистки медицинских устройств [26], концентрация которого проста в обращении, имеет низкую токсичность и не повреждает волокнистые материалы и металл. поверхности.
 Дихлоризоцианурат натрия (NaDCC) и гипохлорит натрия (NaOCL) 
 Наиболее устойчивыми растительными штаммами к раствору дихлоризоцианурата натрия (NaDCC) 1000 мг / л (0,1%) были  A. calcoaceticus  и  E.coli , который показал такое же значение D. Наиболее чувствительными вегетативными штаммами с аналогичными значениями D были  S. marcescens ,  E. cloacae  и  S. aureus.  Чтобы сократить логарифмический цикл  B. subtilis  и  B. stearothermophilus , требовалось время воздействия от 3,8 до 4,4 минут до 0,2% NaDCC.
 Значения D для вегетативных тест-бактерий в 0,025% (250 мг / л) растворе гипохлорита натрия (NaOCL) (pH = 7,0) варьировались от 4.7 мин для  S. aureus  до 7,5 мин для  E. cloacae  и  E. coli , значения D которых были близки к значениям, определенным для тех же штаммов, подвергнутых воздействию 0,1% раствора NaDCC. Устойчивость, наблюдаемая для спорных форм:  B. subtilis  (D = 20,6 мин) и  B. stearothermophilus  (D = 24,0 мин), подвергшихся воздействию 0,025% гипохлорита натрия, была близка и вдвое превышала значения D, достигнутые для той же споры. формы, соответственно, D = 10,3 мин и D = 9,4 мин при воздействии 0.05% раствор гипохлорита натрия в тех же условиях (pH = 7,0, 25 ° C).
 Дезинфицирующие средства на основе хлора легко вступают в реакцию с органическими материалами, включая кровь, экскременты и ткани. Его антимикробная активность пропорционально снижается по отношению к количеству присутствующего органического материала. Следовательно, концентрация хлора, доступная в процессе дезинфекции, должна быть достаточно высокой, чтобы удовлетворить расход хлора (хор вступает в реакцию с органическим материалом) и обеспечить достаточное количество хлора для антимикробной активности.
 Недиссоциированная форма, хлорноватистая кислота (HOCL) в воде с pH 5–8, отвечает за инактивацию микроорганизмов хлорсодержащими агентами (CRA) [25]. Диссоциированные формы, гипохлорит-ионы (OCl  — ), которые преобладают в сильнощелочных (pH> 9,0) растворах, проявляют меньшую антимикробную активность. При более высоких концентрациях растворы гипохлорита натрия (NaOCL) имеют pH> 8, что затрудняет высвобождение активного соединения [14]. Растворы NaOCL, хотя и эффективны при очень низких концентрациях, вплоть до 250 мг / л (0.025%) по сравнению с концентрацией 1000 мг / л (0,1%) раствора NaDCC, оказывают сильное разъедающее действие на металлические поверхности и раздражают кожу [4, 11, 19].
 Органический хлор (NaDCC) можно использовать в более высоких концентрациях, чем неорганические соединения (NaOCL), поскольку NaDCC демонстрирует медленное разложение и высвобождение активного хлора (HOCL). Его стабильность при pH 7 обеспечивает исключительную экспериментальную воспроизводимость. С другой стороны, 0,1% раствор NaDCC показывает меньшую токсичность, раздражение глаз и кожи, меньшее коррозионное воздействие на металлическую поверхность и меньшую агрессивность к пластиковым и резиновым изделиям, чем раствор гипохлорита натрия 250 мг / л.
 На практике NaDCC в форме таблеток, которые растворялись очень медленно и тем самым высвобождали хлорноватистую кислоту с той же скоростью, с которой она использовалась, поддерживала соответствующий уровень доступного хлора, не влияя на pH воды [27]. Поэтому 0,1% NaDCC рекомендуется использовать в открытых контейнерах для промежуточной дезинфекции полукритических предметов; и 0,2% раствор NaDCC может применяться для достижения высокого уровня дезинфекции в медицинских центрах.
 Рекомендация министерских директив Бразилии [4, 11] по низкоуровневой дезинфекции лактатов, иналотерапии и оксигентотерапии — это воздействие в течение 60 минут раствора гипохлорита натрия (NaOCL) с концентрацией 250 мг / л (0.025%). Растворы 0,5% NaOCL для ночного воздействия используются для обеспечения промежуточного уровня дезинфекции устройств кислородной терапии и анестезии в больничных центрах. Растворы 1% NaOCL применяются для дезинфекции твердых поверхностей в критических зонах больниц (палаты интенсивной терапии, детские, палаты, операционные, места для специальных процедур).
  E. coli  и  A. calcoaceticus  могли использоваться в качестве подходящего БИ для оценки NaDCC в качестве дезинфицирующего агента (n = 6 циклов) в течение интервала 35.4 мин. Параметр высокого уровня дезинфекции, n = 12, требовал времени воздействия 53,3 мин и 45,0 мин для  B. stearothermophilus  и  B. subtilis  соответственно.  Споры B. stearothermophilus , как наблюдали, образуют соответствующие BI для контроля стерилизующей активности с помощью нанесения 0,2% NaDCC.
 Пять идеальных методов стерилизации эксплантатов в культуре тканей — Технология растительных клеток 
  ОСНОВЫ ЗАГРЯЗНЕНИЯ 
 Загрязнение культур — распространенная проблема в культуре тканей, которая влияет на урожайность и продуктивность культивируемых растений.Определение контаминации — это случайное попадание в питательную среду загрязняющих веществ, таких как бактерии, грибы, водоросли или другие источники патогенов. Существует множество методов, позволяющих избежать заражения вашими культурами. Но первый вопрос, который задает новичок-энтузиаст культур тканей, звучит так: «Какие вещи следует стерилизовать перед выполнением процессов культивирования тканей? Это все, что мы используем? »
 Ответ на вопрос: ДА!  нужен  для стерилизации всего, что вы используете для выращивания растений в искусственной лаборатории.Процесс культивирования тканей требует соблюдения абсолютной асептики. Таким образом, вы должны быть особенно осторожны с чистотой и поддержанием асептической среды в вашей зоне культивирования.
 В этой статье вы познакомитесь с различными методами стерилизации, а затем подробно расскажете обо всех методах, которые вы можете использовать для стерилизации эксплантатов, что является важным этапом в культуре тканей.
 Различные методы стерилизации, используемые при культивировании тканей 
 Различные устройства и предметы первой необходимости для культивирования тканей требуют различных процедур для их стерилизации.Список методов стерилизации и их использования поясняется ниже.
  Стерилизация нагреванием:  Сухое тепло и влажное тепло используются для стерилизации оборудования. Автоклав работает по принципу влажного тепла, и они могут стерилизовать стеклянные аппараты, твердые или жидкие среды, дистиллированную воду, физиологический раствор, выброшенные культуры и загрязненные среды. А духовые шкафы с горячим воздухом работают по принципу сухого тепла. Они могут стерилизовать стеклянную посуду (например, чашки Петри, колбы, пипетки и пробирки), порошок (например, крахмал, оксид цинка и сульфадиазин), материалы, содержащие масла, металлическое оборудование (например, скальпели, ножницы и лезвия)
  Стерилизация путем фильтрации:  Жидкий раствор пропускают через мембрану для стерилизации от микроорганизмов.Размер пор в фильтре определяет, какой размер микроорганизмов будет отфильтрован. Он используется для стерилизации термолабильных веществ для роста, таких как зеатин, гибберелловая кислота (GA3), абсцизовая кислота (ABA), мочевина и некоторые витамины.
  Стерилизация воздуха:  Ламинарный вытяжной шкаф является лучшим примером. Он оснащен фильтрами HEPA и воздуходувкой, которая продувает воздух через фильтры, чтобы предотвратить попадание в воздух всевозможных микроорганизмов размером более 0,3 микрометра с эффективностью 99%.
  Тиндаллизация:  Используется для уничтожения термостойких эндоспор. В этом методе среду нагревают на водяной бане в течение 1 часа в течение 3 дней подряд, а затем выдерживают при комнатной температуре после двух случаев последовательного кипячения.
  Стерилизация поверхности:  Этот метод используется для стерилизации поверхности эксплантата, который вы используете в процессах культивирования тканей. Следующий раздел посвящен этой технике. Итак, давайте посмотрим!
 Поверхностная стерилизация эксплантов 
 Поверхностная стерилизация является важным этапом культивирования тканей.Эксплантаты, полученные из исходного растения, должны быть полностью свободны от каких-либо микроорганизмов перед их культивированием на среде. Некоторые эндофиты также присутствуют в растениях — микробах, обитающих внутри эксплантата. Для предотвращения эндофитов вы можете исследовать исходные растения и эксплант перед их использованием в процессе культивирования.
  Подробнее:   Explants 
 Если у вас нет оборудования для выполнения процесса, вы можете использовать смесь консервантов для растений (PPM) в ваших питательных средах.PPM — это эффективное химическое вещество, которое используется в культуре тканей, чтобы избежать всевозможных загрязнений из культур. Лучшая часть PPM заключается в том, что вы можете автоклавировать его со средой, и вам потребуется всего 1-2 мл на литр питательной среды. Разве это не круто !!
  Закупка PPM:     PPM 
 ПЯТЬ ОБЫЧНЫХ ЭКСПЛАНТАТОВ СТЕРИЛИЗАЦИИ 
  Хлорид ртути:  Он редко используется в лабораториях из-за его высокой токсичности для растений и людей.Так что, если вы его используете, соблюдайте осторожность. После воздействия на эксплантаты хлорида ртути многократно промойте их стерильной водой, чтобы удалить с эксплантатов все следы минералов.
  Гипохлорит натрия:  Он широко известен как отбеливатель. Это наиболее частый выбор для поверхностной стерилизации эксплантов. Коммерческий отбеливатель для стирки содержит 5,25% гипохлорита натрия. При использовании в культуре тканей отбеливатель разбавляется до 10-20%, что дает 0,5-1,0% отбеливателя в конечной концентрации.Продолжительность времени, необходимого для стерилизации эксплантата, варьируется для каждого типа эксплантата. Но обычно для стерилизации достаточно 10-20 минут.
  Гипохлорит кальция:  Он имеется в продаже в виде порошка, и перед использованием его для стерилизации необходимо растворить в воде. Растворив его в воде, отфильтруйте раствор. Конечная концентрация раствора, используемого в лабораториях, составляет около 3,25%.
  Перекись водорода:  Это редко используемый химикат для стерилизации поверхностей.Благоприятная концентрация использования перекиси водорода составляет 30%. Примите все меры предосторожности, если вы используете химикат для поверхностной стерилизации эксплантатов.
  Этанол:  Его также называют изопропиловым спиртом. 70% этанол широко используется в качестве стерилизующего агента в лабораториях по культивированию тканей, но он также чрезвычайно фитотоксичен. Эксплантаты хранятся в химикате только в течение одной секунды, потому что более длительное воздействие этанола повреждает нежные эксплантаты.
  ВОЗМОЖНЫЕ ИСКЛЮЧЕНИЯ 
 В некоторых случаях для поверхностной стерилизации растительных материалов также используются бром, нитрат серебра и смесь антибиотиков.Более того, для эффективных результатов добавьте Твин 20 или любое другое поверхностно-активное вещество в раствор гипохлорита натрия. Кроме того, продолжайте движение или встряхивайте смесь при поверхностной стерилизации эксплантатов.
 Вы изучили пять наиболее часто используемых методов стерилизации и средств для стерилизации поверхности ваших эксплантатов. Это эффективные методы, которые помогут вам поддерживать асептические условия в вашей лаборатории для здорового роста ваших культур. Сообщите нам, какие растения вы выращиваете в своей лаборатории.Мы будем рады услышать вашу историю! Подпишитесь на электронную почту о технологиях растительных клеток и канал на Youtube, чтобы получать все последние обновления.
 Счастливого выращивания!
 Ссылка 
 Бхатиа, С., и Шарма, К. (2015). Технические сбои в микроразмножении. Современные применения биотехнологии растений в фармацевтических науках, 393–404. DOI: 10.1016 / b978-0-12-802221-4.00013-3
 http://priede.bf.lu.lv/grozs/AuguFiziologijas/Augu_audu_kulturas_MAG/literatura/Surface-sterilizing%20plant%20material_MichiganStateUni.pdf
 Станисавлевич, Александар и Бошняк, Деян и Ивна, Штолфа и Вукович, Розмари и Куюнджич, Тони и Дренянчевич, Мато. (2017). Стерилизация различных типов эксплантатов при микроразмножении подвоя вишни CAB-6p и Gisela 6. Poljoprivreda. 23. 31-37. 10.18047 / poljo.23.2.5.
 https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/protocols/biology/explant-sterilization.html#
  Хотите поделиться историей о РСТ?  
 Мы будем рады услышать ваши отзывы и предложения! 
 На нашем веб-сайте также будут представлены истории отдельных продуктов PCT.Не забывайте, что некоторые вкусности могут попасть в ваш дом вместе с ним. 
 Поделитесь со мной своими предложениями и историей на [email protected]
  Избранные статьи 
 Размножение тканевой культуры банана
 
 Банан — это тропический фрукт, который люди употребляют в сыром и вареном виде.Считается, что он возник в Юго-Восточной Азии, в таких странах, как Индия, Филиппины, Малайзия и т.д.
  подробнее 
 Как PPM ™ может спасти ваш эксперимент по культуре тканей
 
 Смесь консервантов для растений (PPM ™) — это надежный состав, используемый в качестве биоцида широкого спектра действия в экспериментах с культурами тканей растений.Путем борьбы с бактериями, грибками и другими загрязнениями…
  подробнее 
 
 
 PPM против антибиотиков — сравнение
 
 Независимо от того, выращиваете ли вы семена для фруктов или гуру клонирования растений, вы знаете, насколько важно уберечь свои растения от загрязнений.От микробных инфекций, передающихся по воздуху, от микробных инфекций, передающихся по воздуху…
  подробнее 
 
 
 Загрязнение тканевой культуры и 7 простых шагов по предотвращению
 
 Опять заражение! Культивирование тканей — долгий и трудоемкий процесс, и его неприятно, когда грибки или бактерии атакуют наши прекрасные культуры.Для выращивания клеток в лабораториях требуется много…
  подробнее 
 
 
 Мировой рынок средств для стерилизации продуктов питания и напитков 
 Войти
 Ваш сохраненный список
 Партнеры
 Продавать в AWS Marketplace
 Главная страница веб-сервисов Amazon
 Помощь
 AWS Marketplace в Twitter
 Блог AWS Marketplace
 Новостная лента
 РешенияБизнес-приложенияДанные и аналитикаDevOpsИнфраструктурное ПОИнтернет вещейМашинное обучениеМиграцияБезопасностьЭнергияФинансовые услугиЗдравоохранениеМедиа и развлеченияГосударственный секторТелекоммуникацииAWS Control TowerПодготовленные модели Amazon SageMaker
 Программное обеспечение для инфраструктурыРезервное копирование и восстановлениеАналитика данныхВысокопроизводительные вычисленияМиграцияСетевая инфраструктураОперационные системыБезопасностьХранилище
 Управление жизненным циклом DevOpsAgile
 Приложения для бизнеса
 Машинное обучениеСлужбы обзора человекаРешения для MLСлужбы маркировки данныхКомпьютерное зрениеОбработка естественного языка Распознавание речиТекстИзображениеВидеоАудиоСтруктурированныеИнтеллектуальная автоматизация
 Данные ПродуктыДанные о финансовых услугахДанные о здравоохранении и биологии
 Интернет-аналитикаПриложенияПодключение устройствУправление устройствамиБезопасность устройствПромышленный IoTSmart для дома и города
 Профессиональные услугиОценкиВнедрениеУправляемые услугиПремиум-поддержкаОбучение
 ОтраслиОбразование и исследованияФинансовые услугиЗдоровье и науки о жизниМедиа и развлеченияПромышленность
 AWS IQ
 Веб-сайты и мобильные приложенияБазы данных и аналитикаСеть и безопасностьМашинное обучениеПроизводительность и сотрудничествоОптимизация затратДругое
 Ресурсы
 ВебинарыБелые документыРуководства по внедрениюВидеоАналитические отчетыМероприятия
 Продавайте на AWS MarketplaceПортал управленияЗарегистрируйтесь в качестве продавцаРуководство продавцаПриложение для партнеровИстории успеха партнеров
 О AWS MarketplaceЧто такое AWS Marketplace? Истории успеха клиентовБлог AWSПресс-релизыСобытияПомощь и часто задаваемые вопросыКарьера
 Избранные категорииПодписки SaaSWindows Server
 Управление учетной записью Консоль управленияУправление счетами и расходамиПодписка на обновленияЛичная информацияСпособ оплатыУправление идентификацией и доступом AWSУчетные данные безопасностиЗапрос об увеличении лимита обслуживанияСвяжитесь с нами
 AWS Marketplace принимает на работу!
 Amazon Web Services (AWS) — это динамично развивающееся бизнес-подразделение Amazon.com. В настоящее время мы нанимаем инженеров по разработке программного обеспечения, менеджеров по продуктам, менеджеров по работе с клиентами, архитекторов решений, инженеров службы поддержки, системных инженеров, дизайнеров и многих других. Посетите нашу страницу карьеры или страницу карьеры для разработчиков, чтобы узнать больше.
 Amazon Web Services — работодатель с равными возможностями.
 © 2012-
 2021 г.
 , Amazon Web Services, Inc. или ее аффилированных лиц.Все права защищены.
 Стоматологов: Школа стоматологии Университета Индианы: IUPUI 
 Как мне создать учетную запись? 
  Примечание:  Веб-портал SMS временно недоступен для обновлений. Чтобы получить доступ к отчетам или у вас есть вопросы, позвоните нам по телефону 317-274-5411 или напишите нам по адресу [email protected]
 Заполните форму, чтобы создать новую учетную запись.
 После отправки формы вы получите электронное письмо с уведомлением о том, что ваша информация проверяется.
 После подтверждения вашей учетной записи вы получите два сообщения электронной почты: одно с вашим именем пользователя профиля и одно с паролем вашего профиля.
 После получения имени пользователя и пароля войдите в свою учетную запись.
 После первого входа в систему вы получите телефонный звонок не более чем через два рабочих дня. Во время этого телефонного звонка мы проведем вас через первоначальную настройку учетной записи и предоставим вам номер вашей учетной записи.
 После того, как вы получите номер счета для своего стерилизатора, вы сможете заказывать тест-полоски через Интернет.
 Если у вас есть вопросы или комментарии, свяжитесь с нами, и мы свяжемся с вами не более чем через два рабочих дня.
 Как присваиваются и используются номера счетов? 
 SMS хранит текущий список доступных номеров счетов, которые мы назначаем стерилизаторам, когда клиенты присоединяются к нашей службе. Номер вашего счета привязан к индивидуальному стерилизатору и проштампован на каждом конверте с двойным карманом. Обращайтесь к нему во всей переписке.
 Если ваш офис проверяет более одного стерилизатора,  каждому стерилизатору должен быть присвоен отдельный номер счета  для обеспечения надлежащего ведения учета.Если ваш офис покупает новый стерилизатор, вы должны позвонить нам перед использованием любых тестов на споры, чтобы мы могли присвоить вашему новому стерилизатору другой номер счета.
 Как контролируется процесс стерилизации? 
 Процедуры стерилизации следует контролировать с помощью комбинации механических, химических и биологических методов, разработанных для оценки условий стерилизации и эффективности процедуры.
 Механические методы 
 Механические методы контроля стерилизации включают оценку времени цикла, температуры и давления стерилизационного оборудования путем наблюдения за датчиками или дисплеями на стерилизаторе.Некоторые настольные стерилизаторы имеют записывающие устройства, которые распечатывают эти параметры. Правильные показания не гарантируют стерилизацию, но неправильные показания могут быть первым признаком того, что возникла проблема с циклом стерилизации.
 Химические индикаторы 
 Внутренние и внешние химические индикаторы используют чувствительные химические вещества для оценки физических условий, таких как температура, во время процесса стерилизации. Химические индикаторы, такие как термочувствительная лента, быстро меняют цвет при достижении заданного параметра.
 Внутренний химический индикатор должен быть помещен в каждую стерилизационную упаковку, чтобы гарантировать, что стерилизующий агент проник в упаковочный материал и действительно достиг инструментов внутри. Внешний индикатор следует использовать, когда внутренний индикатор не виден снаружи упаковки.
 Однопараметрические внутренние индикаторы предоставляют информацию только об одном параметре стерилизации и доступны для пара, сухого тепла и ненасыщенных химических паров. Многопараметрические внутренние индикаторы измеряют 2–3 параметра и могут обеспечить более надежную индикацию выполнения условий стерилизации.Многопараметрические внутренние индикаторы доступны только для паровых стерилизаторов (т. Е. Автоклавов). См. Инструкции производителя для правильного использования и размещения химических индикаторов.
 Результаты теста индикатора отображаются сразу после завершения цикла стерилизации и могут дать раннее указание на проблему и место возникновения проблемы в процессе. Если внутренний или внешний индикатор указывает на неадекватную обработку, обработанный элемент не должен использоваться.Поскольку химические индикаторы не подтверждают, что стерилизация была достигнута, требуется биологический индикатор (например, тест на споры).
 Биологические индикаторы 
 Биологические индикаторы (БИ) являются наиболее распространенным средством мониторинга процесса стерилизации, поскольку они напрямую определяют наличие наиболее устойчивых микроорганизмов (например, виды  Geobacillus  или  Bacillus ), а не просто определяют наличие соблюдены физические и химические условия, необходимые для стерилизации.Поскольку споры, используемые в БИ, более устойчивы и присутствуют в большем количестве, чем обычные микробные загрязнители, обнаруживаемые на оборудовании для ухода за пациентами, инактивированный БИ указывает на то, что другие потенциальные патогены в нагрузке также были убиты.
 Когда заканчиваются тесты на споры? 
 Каждый конверт с двойным карманом имеет дату истечения срока годности, что дает достаточно времени для текущего контроля.  Мы не можем бесплатно заменить просроченные тесты.  Анализы с истекшим сроком годности следует стерилизовать и выбросить.
 Как мне хранить свои тесты на споры? 
 Храните все конверты с двойным карманом в прохладном, сухом месте, вдали от стерилизатора и других источников тепла.
 Как использовать тест на споры? 
 Снимите два пакета с тест-полосками со стороны ТЕСТИРОВАНИЯ одного конверта с двумя карманами и поместите их в пакет инструментов или лоток для стерилизации. Не открывайте маленькие пакеты, содержащие полоски со спорами. Не открывайте КОНТРОЛЬНУЮ сторону конверта с двумя карманами.
 Для стерилизаторов сухого нагрева поместите тест-пакет или лоток для анализа спор на верхнюю полку в центре или в центре отдельной полки. Для всех других типов стерилизаторов поместите тестовую упаковку или лоток в центре среди других пакетов или лотков.
 Обработайте пакет или лоток, содержащий пакеты со спорами, в обычном цикле стерилизации.
 После цикла поместите оба пакета полосок со спорами обратно в ИСПЫТАТЕЛЬНУЮ сторону конверта с двумя карманами и закройте клапан.
 Заполните верхнюю половину формы отчета по SMS на обратной стороне листа инструкций, прилагаемого к тесту.
 Поместите запечатанный конверт с двойным карманом и весь лист в один предварительно оплаченный почтовый конверт и отправьте по почте. Мы проанализируем полоски со спорами, заполним нашу часть формы отчета и вернем ее вам. Если споры на тест-полосках разрастаются (что указывает на неудачную стерилизацию), мы сообщим вам результаты и заполним форму отчета.
 Как долго я должен хранить результаты тестов? 
 Департамент здравоохранения штата Индиана требует, чтобы все заполненные формы отчетов по SMS хранились в течение  пяти лет.
 Когда я обрабатываю полоски со спорами, следует ли их обрабатывать в пустом автоклаве или в автоклаве с инструментами? 
 Полоски со спорами следует обрабатывать инструментами во время нормального цикла загрузки.
 Как часто мне нужно проходить тестирование? 
  В штате Индиана требуется еженедельное тестирование стерилизаторов.  Во всех остальных штатах следует обращаться в местный департамент здравоохранения штата.
 Правильное функционирование циклов стерилизации должно проверяться для каждого стерилизатора путем периодического (как минимум еженедельно) использования биологических индикаторов (BI).Следуйте инструкциям производителя относительно правильного размещения BI в стерилизаторе. Контрольный БИ (не обработанный в стерилизаторе) из той же партии, что и тестовый индикатор, следует инкубировать с тестовым БИ. Контрольный БИ должен давать положительные результаты на рост бактерий.
 В дополнение к регулярному биологическому мониторингу пользователи оборудования должны проводить биологический мониторинг:
 Каждый раз, когда используется новый тип упаковочного материала или лотка
 После обучения нового стерилизационного персонала
 После ремонта стерилизатора
 После любого изменение процедуры загрузки стерилизатора
 Следует ли мне проводить биологический мониторинг (тестирование спор) чаще при стерилизации имплантируемого устройства? 
 Следует контролировать любую загрузку, содержащую имплантируемые устройства.В идеале имплантируемые предметы не следует использовать до тех пор, пока результаты тестов не станут отрицательными. Как отмечалось ранее, необходимо соблюдать инструкции производителя относительно правильного размещения биологического индикатора (BI) в стерилизаторе. Контрольный БИ (не обработанный в стерилизаторе) из той же партии, что и тестовый индикатор, следует инкубировать таким же образом, как и тестовый БИ. Контрольный биологический индикатор должен давать положительные результаты на рост бактерий.
 Что делать, если результат теста на споры положительный? 
 Если механический (т.е.g., время, температура, давление) и химические (внутренние или внешние) индикаторы указывают на то, что стерилизатор функционирует должным образом, единичный положительный результат теста на споры, вероятно, не указывает на неисправность стерилизатора. Другие предметы, кроме имплантируемых, не нужно отзывать; однако операторы стерилизатора должны немедленно повторить тест на споры, используя тот же цикл, в котором был получен положительный биологический индикатор (BI). Стерилизатор должен быть выведен из эксплуатации, а рабочие процедуры стерилизации пересмотрены, чтобы определить, может ли быть виновата ошибка оператора.
 Если результат повторного теста на споры отрицательный и рабочие процедуры были правильными, стерилизатор можно вернуть в эксплуатацию. Если результат повторного теста на споры положительный, не используйте стерилизатор до тех пор, пока он не будет проверен или отремонтирован и повторно протестирован с помощью тестов BI в трех последовательных циклах стерилизации в пустой камере. По возможности, предметы из подозрительных партий, относящиеся к последнему отрицательному BI, должны быть отозваны, переупакованы и повторно стерилизованы.
 Результаты биологического мониторинга и отчеты мониторинга стерилизации должны быть зарегистрированы.
 Нет доказательств того, что вакцина COVID-19 приводит к стерилизации. 
 ПРЕТЕНЗИЯ: Руководитель исследования в Pfizer утверждает, что вакцина против COVID-19 вызывает женскую стерилизацию, поскольку она содержит спайковый белок, известный как синцитин-1.
 ОЦЕНКА AP: Неверно. Вакцина от COVID-19 Pfizer и BioNTech не содержит белка синцитин-1, который важен для образования плаценты. Руководитель отдела исследований в Pfizer таких заявлений не делал.
 ФАКТЫ: Пользователи социальных сетей делятся снимком экрана из статьи под названием «Руководитель исследования Pfizer: вакцина против Covid — это женская стерилизация», чтобы заявить, что вакцина приводит к стерилизации женщин.Информация в статье, опубликованной в блоге Health and Money News, приписывается Майклу Йидону, британскому врачу на пенсии, который покинул Pfizer девять лет назад. Попытки добраться до Йедона не увенчались успехом.
 В статье говорится, что «вакцина содержит спайковый белок синцитин-1, жизненно важный для формирования плаценты человека у женщин». Далее говорится, что «вакцина работает так, что мы формируем иммунный ответ ПРОТИВ спайк-белка, мы также обучаем женский организм атаковать синцитин-1, что может привести к бесплодию у женщин с неопределенной продолжительностью».
 Посты, содержащие ложную информацию, распространили петицию, поданную Йедоном и Вольфгангом Водаргом, немецким врачом, в Европейское агентство по лекарственным средствам, в котором требовалось прекратить клинические испытания вакцины Pfizer в Европейском союзе до тех пор, пока не будут получены более подробные данные о безопасности и эффективности. предоставлена. В петиции эти двое признают, что нет никаких указаний на то, что «будут ли антитела против белков-шипов вирусов SARS также действовать как антитела против синцитина-1».
 «Однако, если бы это было так, это также предотвратило бы образование плаценты, что привело бы к фактическому бесплодию вакцинированных женщин», — говорится в петиции.
 Эксперты говорят, что нет никаких доказательств того, что вакцина Pfizer может привести к стерилизации женщин.
 Ребекка Датч, заведующая кафедрой молекулярной и клеточной биохимии Университета Кентукки, сообщила в электронном письме, что, хотя синцитин-1 и белок-шип в целом имеют некоторые общие черты, они сильно отличаются в деталях, которые распознают антитела.
 Помимо того факта, что спайковый белок COVID-19 и синцитин-1 являются вирусными слитными белками, которые вызывают слияние мембран, они вообще не связаны, сказал Датч.Кроме того, вакцина, разрабатываемая Moderna, как и вакцина, разрабатываемая Pfizer и BioNTech, полагается на мРНК-мессенджер, которая сообщает организму, как производить спайковый белок, и обучает иммунную систему распознавать настоящий вирус. Они не содержат синцитин-1.
 «Идея этой технологии заключается в том, что обе эти вакцины содержат последовательность РНК, кодирующую спайковый белок SARS-COV2», — сказал Мэтью Фриман, доцент микробиологии и иммунологии Медицинской школы Университета Мэриленда. .
 Джейкоб Йоунт, доцент кафедры микробных инфекций и иммунитета Медицинского колледжа Университета штата Огайо, изучал белки синцитина, а также SARS-CoV-2. Йоунт сказал, что вакцины COVID не содержат белка синцитина-1 или мРНК, кодирующей синцитин-1, и поэтому нет оснований полагать, что будет развиваться иммунный ответ против синцитина-1.
 «Мы не наблюдаем бесплодия с вакциной против гриппа, и она также нацелена на вирусный гибридный белок так же, как спайк является вирусным гибридным белком коронавируса», — сказал он.
 Сторонники антивакцины поделились ложным постом в Интернете, побуждая других распространять информацию. Йоунт сказал, что он узнал о ложном заявлении, когда кто-то отправил его ему на Facebook.
 Пресс-секретарь Pfizer Джерика Питтс подтвердила Associated Press, что их кандидатная вакцина не вызывает бесплодия.
 «Было ошибочно высказано предположение, что вакцины COVID-19 вызовут бесплодие из-за общей аминокислотной последовательности в шиповом белке SARS-CoV-2 и плацентарном белке», — сказала она в электронном письме.