Электрофорез с атропином: Физиолечение при нейрогнном мочевом пузыре

Содержание

Физиолечение при нейрогнном мочевом пузыре

Физиотерапия при нейрогенном мочевом пузыре

Физические методы лечения нейрогенных дисфункций мочевого пузыря применяют в комплексной патогенетической терапии пациентов с нейрогенными дисфункциями мочевого пузыря и назначают с учетом характера нарушений. 

При гиперактивности мочевого пузыря используют методы, обладающие спазмолитическим, симпатомиметическим, седативным эффектами, способствующими расслаблению детрузора и сокращению сфинктера.
В случае гипотонии применяют методы стимуляции детрузора, обладающие холиноподобным эффектом (миостимулирующие методы). 
 

Спазмолитические методы физиотерапевтического лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря:

Электрофорез холинолитиков. Применяют атропин (0,1% раствор), платифиллин (0,03% раствор), 0,2% раствор эуфиллина на область мочевого пузыря, ежедневно, плотность тока 0,03-0,05 мА/см2, по 10-15 мин; курс 10-12 процедур;

Парафиновые аппликации дают спазмолитический эффект за счёт теплового действия, в результате чего достигается расслабление гладкой мускулатуры мочевого пузыря. Применяют на зону мочевого пузыря или по трусиковой методике. Температура парафина 40-45°С, время воздействия 30-45 мин, ежедневно; курс 10-15 процедур;

Ультразвуковая терапия способствует улучшению кровоснабжения зон иннервации сфинктера и детрузора. Проводится на паравертебральные области (LI-LIII) и область мочевого пузыря. Интенсивность воздействия 0,1-0,4 Вт/см2, лабильно, по 3-5 мин на зону, ежедневно; курс 10-12 процедур.

Седативные методы физиотерапевтического лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря:

Электросонтерапия способствует накоплению серотонина в подкорковых структурах за счет активации токами проводимости серотонинергических нейронов дорсального ядра шва. Процедуры проводят при частоте импульсов 10-20 Гц, продолжительность процедуры 20-30 мин, через день или 2 дня подряд с перерывом на третий; курс 10-12 процедур;

Гальванический воротник по Щербаку. При применении этого метода снижается афферентная импульсация в ствол головного мозга вследствие активации потенциалзависимых калиевых ионных каналов и гиперполяризации возбудимых мембран периферических нервных волокон воротниковой области, достигается нормализация тормозновозбудительных процессов в коре головного мозга. Сила тока 6-16 мА, продолжительность процедуры 6-16 мин, ежедневно; курс 10 процедур.

 

Миостимулирующие методы физиотерапевтического лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря:

 

Диадинамотерапия области мочевого пузыря током ОР приводит к ритмическому сокращению большого числа миофибрилл мышц сфинктера, что применяют при гиперрефлекторном мочевом пузыре, в течение 5-7 мин, ежедневно; курс 10 процедур;
СМТ-терапия области мочевого пузыря активирует сокращение сфинктера. Используют II РР, частота модуляций 30 Гц, глубина модуляций 75-100%, ежедневно; курс 10 процедур;

Электрофорез прозерина (0,1% раствор), галантамина (0,25% раствор) на область мочевого пузыря, плотность тока 0,03-0,05 мА/см2, ежедневно; курс 10 процедур.
 

Наибольшее распространение получили методы электростимуляции.

Электростимуляция, применяющеяся для коррекции нейрогенной дисфункции мочеиспускания, может быть: поверхностной (кожной), внутриполостной (внутрипузырной, анальной или вагинальной) и инвазивной (сакральная нейромодуляция). 

 

В последнее время широкое распространение получило сочетание электростимуляции с терапией по принципу биологической обратной связи (БОС-терапия). В этом случае пациент, подключенный к аппарату, выполняет упражнения, результат которых можно увидеть на экране монитора в виде анимированного графика. Это позволяет значительно повысить эффективность физических упражнений, направленных на укрепление мышц тазового дна.

Причины, диагностика и лечение энуреза у детей

Энурез – недержание мочи, которому подвержены дети в возрасте от 5 лет. Современные врачи считают патологическим недержание мочи во время сна именно с этого возраста, так как у детей младшего возраста еще не развит контроль мочевого пузыря и мокрая постель не является отклонением от нормы

Классификация и виды энуреза

Педиатры и урологи классифицируют энурез по нескольким показателям и выделяют следующие виды:

  • Первичный – дети не контролируют себя с раннего возраста и каждую ночь просыпаются в мокрой постели.
  • Вторичный – родители отмечают период в жизни ребенка, в течение 6 месяцев, когда ребенок просыпается в сухой постели.
  • Дневной энурез – ребенок не держит мочу во время бодрствования и дневного сна.
  • Ночной энурез – мочеиспускание происходит во время сна.
  • Сочетанный – ребенок не контролирует мочеиспускание и днем и ночью.

Симптомы

  • Непроизвольное учащенное мочеиспускание днем.
  • Недержание мочи в ночное время.

Причины

Причины недержания мочи, как правило, устанавливаются врачом, только так можно определить природу появления заболевания и подобрать корректное лечение. Основные причины:

  • Нервная система не соответствует возрасту. При незрелой нервной системе ребенок не чувствует позывов к мочеиспусканию.
  • Cсоры в семье и другие стрессовые факторы.
  • Наследственность. Если у родителей в детстве было недержание, с большой вероятностью ребенок столкнется с этой же проблемой.
  • Заболевание мочеполовой системы. У девочек проблема заключается в суждении мочеиспускательного канала, а у мальчиков в узкой крайней плоти.
  • Инфекции мочеполовых путей.
  • Патология беременности, внутриутробная гипоксия.

Диагностика

В любом заболевании важна грамотная диагностика. Задача родителей состоит в том, чтобы вовремя обратиться к врачу и получить лечение как можно раньше. Для первичной диагностики необходимо исключить патологию мочевыделительной системы у уролога или нефролога. Далее, если функции почек и мочевого пузыря не нарушены, обследование продолжается у врача-невролога. При этом необходимо пройти исследование пояснично-крестцового отдела позвоночника для исключения врожденных аномалий. Также проводится дообследование головного мозга на предмет выявления органической патологии и функциональной незрелости клеток коры головного мозга.

Лечение энуреза

Существуют различные методы лечения энуреза, как правило, это меры, направленные на улучшение состояния и избавления от проблем. По возможности необходимо оградить ребенка от семейных конфликтов и других стрессовых ситуаций, которые нарушают его эмоциональное состояние.

Медикаментозное лечение энуреза важно, если у ребенка наблюдается гиперактивность, нестабильный эмоциональный фон, несвоевременное развитие нервной системы.

При комплексной терапии необходимо проводить массаж, укрепляющий мышцы живота и спины. Физиотерапия также относится к обязательным методам лечения: дарсонваль, электрофорез, магнитотерапия.

Важно помнить, что энурез не является приговором, и вовремя принятые меры помогут значительно сократить время лечения.

К какому врачу обратиться при детском энурезе

Наш центр использует комплексный подход в диагностике и лечении энуреза у детей. Квалифицированные специалисты (педиатр, уролог, нефролог, невролог) назначат все необходимые исследования с использованием высококачественной аппаратуры в диагностике заболевания.

В нашем Центре можно получить все необходимые процедуры: медикаментозную терапию под наблюдением врача в дневном стационаре, массаж, физиотерапию (дарсонваль, магнитотерапию, электрофорез) — мы предлагаем эффективное лечение энуреза и индивидуальный подход к каждому пациенту.

Внимание к каждому пациенту – основа работы Первого ДМЦ.


Записаться к неврологу

Первый детский медицинский центр
Здоровье детей – спокойствие родителей!

Поделиться в соцсетях:

 

Физические методы лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря: физиотерапия, электрофорез, облучение при энурезе — Лечение: Физиотерапия — Лечение

Физические методы лечения нейрогенных дисфункций мочевого пузыря применяют в комплексной патогенетической терапии пациентов с нейрогенными дисфункциями мочевого пузыря и назначают с учётом формы (гипо- или гиперрефлекторной) дисфункции. С учётом ведущей роли нарушений детрузорносфинктерных отношений воздействие осуществляется на местном уровне. При гиперрефлекторной нейрогенной дисфункции мочевого пузыря используют методы, обладающие спазмолитическим, симпатомиметическим эффектами, способствующими расслаблению детрузора и сокращению сфинктера.

В случае гипорефлекторной нейрогенной дисфункции мочевого пузыря применяют методы стимуляции детрузора мочевого пузыря, обладающие холиноподобным эффектом (миостимулирующие методы). С учётом важной роли патологии спинальных центров регуляции мочеиспускания в формировании нейрогенной дисфункции мочевого пузыря используют методы, обладающие спазмолитическим, сосудорасширяющим действием. В определённом проценте случаев нейрогенной дисфункции мочевого пузыря может быть связана с невротическими нарушениями личности и дисбалансом процессов возбуждения и торможения в ЦНС и вегетативной регуляции мочевого пузыря (вегетокорригирующие методы).

  • Спазмолитические методы: электрофорез холинолитиков, спазмолитиков, парафинотерапия, ультразвуковая терапия;
  • Миостимулирующие методы: диадинамо, СМТ-терапия, электрофорез холиномиметиков;
  • Вегетокорригирующие методы: гальванизация по глазнично-затылочной методике, УФ-облучение сегментарных зон в эритемных дозах, инфракрасная лазеротерапия, пелоидотерапия;
  • Седативные методы: электросонтерапия, гальванический воротник по Щербаку.

Спазмолитические методы физиотерапевтического лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря:

  • Электрофорез холинолитиков. Применяют атропин (0,1% раствор), платифиллин (0,03% раствор), 0,2% раствор эуфиллина на область мочевого пузыря, ежедневно, плотность тока 0,03-0,05 мА/см2, по 10-15 мин; курс 10-12 процедур;
  • Парафиновые аппликации дают спазмолитический эффект за счёт теплового действия, в результате чего достигается расслабление гладкой мускулатуры мочевого пузыря. Применяют на зону мочевого пузыря или по трусиковой методике. Температура парафина 40-45°С, время воздействия 30-45 мин, ежедневно; курс 10-15 процедур;
  • Ультразвуковая терапия способствует улучшению кровоснабжения зон иннервации сфинктера и детрузора. Проводится на паравертебральные области (LI-LIII) и область мочевого пузыря. Интенсивность воздействия 0,1-0,4 Вт/см2, лабильно, по 3-5 мин на зону, ежедневно; курс 10-12 процедур.

Миостимулирующие методы физиотерапевтического лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря:

  • Диадинамотерапия области мочевого пузыря током ОР приводит к ритмическому сокращению большого числа миофибрилл мышц сфинктера, что применяют при гиперрефлекторном мочевом пузыре, в течение 5-7 мин, ежедневно; курс 10 процедур;
  • СМТ-терапия области мочевого пузыря активирует сокращение сфинктера. Используют II РР, частота модуляций 30 Гц, глубина модуляций 75-100%, ежедневно; курс 10 процедур;
  • Электрофорез прозерина (0,1% раствор), галантамина (0,25% раствор) на область мочевого пузыря, плотность тока 0,03-0,05 мА/см2, ежедневно; курс 10 процедур.

Вегетокорригирующие методы физиотерапевтического лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря:

  • Гальванизация по глазнично-затылочной методике приводит к активации кровотока в подкорковых структурах, области ретикулярной формации (сетчатое образование), структур промежуточного и среднего мозга, что оказывает влияние на соотношение симпатических и парасимпатических влияний. Плотность тока 0,02 мА/см2, продолжительность процедуры до 30 мин, через день; курс 10 процедур;
  • Ультрафиолетовое облучение в эритемных дозах. Облучают область ягодиц, поясничнокрестцовую область, область гипогастрия, начиная с 4 биодоз и добавляя по 1 биодозе, ежедневно; курс 4-5 процедур;
  • ИК-лазеротерапия сегментарных зон, области проекции мочевого пузыря и зоны промежности в сочетании с общим воздействием (точки рефлексотерапии или зоны верхушечного толчка, тимуса), частота воздействия 5-50 Гц (1000 Гц на точки акупунктуры), время воздействия 1-2 мин на зону;
  • Пелоидотерапия. Применяют аппликации иловых и торфяных грязей на трусиковую зону. Биологически активные вещества грязей стимулируют продукцию глюкокортикоидов и катехоламинов надпочечниками. Температура грязей 38-40°С, продолжительность процедуры 10-20 мин, ежедневно; курс 10-15 процедур.

Седативные методы физиотерапевтического лечения нейрогенной дисфункции мочевого пузыря:

  • Электросонтерапия способствует накоплению серотонина в подкорковых структурах за счет активации токами проводимости серотонинергических нейронов дорсального ядра шва. Процедуры проводят при частоте импульсов 10-20 Гц, продолжительность процедуры 20-30 мин, через день или 2 дня подряд с перерывом на третий; курс 10-12 процедур;
  • Гальванический воротник по Щербаку. При применении этого метода снижается афферентная импульсация в ствол головного мозга вследствие активации потенциалзависимых калиевых ионных каналов и гиперполяризации возбудимых мембран периферических нервных волокон воротниковой области, достигается нормализация тормозновозбудительных процессов в коре головного мозга. Сила тока 6-16 мА, продолжительность процедуры 6-16 мин, ежедневно; курс 10 процедур.

Правильный и индивидуальный подбор современных методов лечения нарушений мочеиспускания и недержания мочи у детей открывает новые возможности в решении ряда важных медицинских, социальных и психологических проблем, помогает улучшить качество жизни больных и повысить их социальную активность.

Самохвалова С.А.

Рассказать / Поделиться:

Атропин для лечения прогрессирующей миопии

29 Июн Применение атропина для лечения прогрессирующей миопии у детей и подростков

Posted at 16:18h
  Проблематика зрения
by bdmin

Распространенность миопии в мире варьирует в пределах 20-50% среди взрослого населения стран Европы и США, тогда как в странах Азии эти показатели достигают 60 — 90%. Снижение детской близорукости является очень важной задачей медицины. Среди имеющихся сообщений об использовании консервативных методов лечения для стабилизации миопии в последние годы заслуживает внимание направление использования фармакологических средств и оптических методов коррекции с воздействием на периферическую коррекцию.

По сообщениям J.Cooper с соавторами показано, что наиболее эффективным методом замедления прогрессирования близорукости является использование атропина, затем следует пирензепин и ортокератология и наименее эффективный способ- прогрессивные очки.
Атропин — М-холиноблокатор, алкалоид содержащийся в красавке (Atropa belladonna), в белене (Hyoscýamus níger), в дурмане (Datúra stramónium), в скополии (Scopolia carniolica) и других растений семейства пасленовых (Solanaceae).

Атропин входит в реестр препаратов, включенных в Федеральный закон «О наркотических средствах и психотропных веществах». Выделяют несколько механизмов действия атропина:

  • блокирует аккомодацию, является не специфическим антагонистом мускариновых рецепторов и связываясь с таковыми в цилиарной мышце, способен уменьшать возможное влияние чрезмерного напряжения аккомодации на прогрессирование близорукости;
  • воздействует на выброс нейротрансмиттера допамина из клеточных структур и , таким образом может изменять ретинальные сигналы, влияющие на рост глазного яблока.

Атропин может достигать значимых уровней в кровотоке оказывая системное воздействие, подавляя секрецию гормона роста из гипофиза, что может нарушать нормальный рост глаза.
Однако биохимическая основа тормозящего эффекта атропина на увеличение максимальной длины глаза остается не до конца изученной. Научные работы показали, что атропин замедляет прогрессирование близорукости не посредством аккомодационного механизма. Хотя механизм влияния атропина точно не известен, предполагается, что он воздействует (прямо или опосредованно) на сетчатую оболочку глаза и склеру, замедляя утончение или растяжение последней и, следовательно, рост глаза. Этот рост, возможно, состоит из серии биохимических процессов, где атропин может замедлять одну или несколько стадий развития, изменяя механизмы обратных связей. Поэтому остановка лечения атропином может вызвать быстрый рост глаза, хотя настоящий механизм, по всей вероятности, гораздо более сложный. Первое сообщение о лечении близорукости атропином было сделано в XIX веке Уэллсом.

Современная эра использования атропина была начата R. Bedrossian и S.Yostin в 1964г. Использовался 1% атропин для местной терапии. Тем не менее эти исследования к сожалению, имели значительные методологические недостатки, не позволившие сделать обоснованное заключение.
В 1999 г. Y.Shih исследовал влияние более низких концентраций атропина на прогрессирование близорукости. Несмотря на то, что 1% атропин эффективно замедляет прогрессирование, это сопровождается неблагоприятными последствиями: светобоязнь, нечеткость зрения вблизи. В проведенном исследовании дети в возрасте от 6 до 13 лет применяли ежедневно по капле на ночь 0,5%, 0,25%, 0,1% атропин или 0,5% тропикамид для контроля лечения сроком наблюдения до 2-х лет. Все концентрации атропина показали выраженный эффект. Авторы сделали вывод, что все концентрации имеют значительное влияние на контроль близорукости, тем не менее раствор 0,5% был более эффективен.
M.Chiang с соавторами в связи с поиском методов лечения, использовали метод лечения: после полной циклоплегии всем детям назначали очки с фотохромными линзами и полной коррекцией, в очках для чтения добавляли +2,25Д на каждый глаз, закапывали 1% атропин 1 раз в неделю. Контроль проводился каждый год, никаких серьезных побочных эффектов, связанных с применением атропина, авторы не наблюдали.

Y.Shih с соавторами в 2001 году провели клиническое исследование детей от 6 до 13 лет, оценивая эффекты лечения атропином 0,5% с ношением мульти/монофокальных очков, сделали вывод, что тормозящий эффект прогрессирования связан исключительно с применением 0,5% раствора атропина, а не с мульти/монофокальной очковой коррекцией.
J.Zee с соавторами в 2006 г. провели исследование по оценке эффективности 0,05% раствора атропина для контроля прогрессирования миопии у детей школьного возраста. Результаты этого исследования показали, что использование 0,05 % раствора атропина является эффективным для контроля прогрессирования близорукости у большинства детей школьного возраста, по крайней мере в течении года.

P.Lu с соавторами в 2010 г. провели исследования влияния разных концентраций атропина (0,1% раствора для лета, 0,25% для весны и осени, 0,5% для зимы) на эффективность замедления прогрессирования близорукости в зависимости от сезона. По окончанию годового срока наблюдения авторы заключили, что изменения концентрации атропина в зависимости от сезона представляется эффективным методом контроля прогрессирования миопии у детей школьного возраста.

P.Fang с соавторами в 2010году оценил эффективность 0,025% раствора атропина для профилактики возникновения близорукости у детей. Был сделан вывод, что регулярное местное применение 0,025% раствора атропина может предотвратить начало развития близорукости у детей школьного возраста за период 1 год. Целью следующего исследования A.Chia с соавторами в 2012 году было проведено сравнение эффективности более низких доз атропина 0,5%; 0,1% и 0,01%. Атропин закапывали 1 раз каждую ночь в оба глаза на протяжении 2-х лет. Различия в прогрессировании близорукости и изменение осевой длины между группами были незначительны и клинически не значимыми. Атропин 0,01% имел незначительное влияние на остроту зрения вблизи , незначительно влиял на размер зрачка. Аллергические конъюнктивит и дерматит не отмечались в группе 0,01%. Авторы пришли к выводу, что применение раствора атропина 0,01 % дает минимальные побочные эффекты по сравнению с атропином более высоких концентраций и сохраняет сравнимую эффективность в контроле прогрессирования миопии.

Хотя механизм влияния атропина точно не известен, предполагается, что он воздействует прямо или опосредованно на сетчатую оболочку глаза и склеру замедляя утончение или растяжение последней и, следовательно рост глаза. Этот рост, возможно, состоит из серии биохимических процессов, где атропин может замедлять одну или несколько стадий развития, изменяя механизмы обратных связей. Следует отметить, что длительная атропинизация не приводит к повышению внутри глазного давления.
Тем не менее безопасность длительного применения атропина требует дальнейшего изучения. Среди побочных эффектов применение 0,01% раствора атропина наблюдаются существенно менее выраженные осложнения: аллергическая реакция, реакция гиперчувствительности, дискомфорт, повышенная светочувствительность, затуманенность зрения вблизи. Уменьшение детской близорукости является очень важной задачей медицины. Атропин в малых дозах 0,01% является хорошим компромиссом между возможными отрицательными эффектами и статистически значимым уменьшением прогрессирования миопии. Рекомендуется по крайней мере 2- годичный курс лечения детей в возрасте 8-13 лет.

Используемая литература:
«Вестник офтальмологии» № 3. 2017 г. том 133
«Применение атропина для лечения прогрессирующей миопии у детей и подростков» Т.Ю.

Клинические синдромы расстройств мочеиспускания и принципы их лечения


При выделении клинических синдромов основное значение
придается тонусу детрузора и сфинктера и их взаимоотношению. Тонус детрузора или
силу его сокращения измеряют по приросту внутрипузырного давления в ответ на
введение всегда постоянного количества жидкости — 50 мл, если этот прирост
составляет 103±13 мм водн. ст., тонус детрузора мочевого пузыря считается
нормальным, при меньшем приросте — сниженным, при большем — повышенным.
Нормальными показателями сфинктерометрии считаются 70—110 мм рт.ст.

Клинические синдромы

Выделяют множество клинических синдромов расстройств
мочеиспускания в зависимости от проводникового или сегментарного типов
дисфункции мочевого пузыря.

При проводниковом типе расстройства могут быть
атонический, гипотонический, нормотонический синдромы, синдром гипертонии
детрузора и сфинктера, синдромы преобладающей гипертонии детрузора и
преобладающей гипертонии сфинктера.

При сегментарном типе расстройства — атонический и
нормотонический синдромы, гипотония детрузора и сфинктера, преобладающая
гипотония детрузора и преобладающая гипотония сфинктера.

Атонический синдром отмечается чаще при сегментарном
типе расстройства мочеиспускания. При цистометрическом исследовании введение в
мочевой пузырь 100-450 мл жидкости не изменяет нулевого пузырного давления.
Введение больших объемов (до 750 сопровождается медленным повышением
внутрипузырного давления, но оно не превышает 80-90 мм водн. ст. Сфинктерометрия
при атоническом синдроме выявляет низкие показатели тонуса сфинктера — 25-30 мм
рт.ст. Клинически это сочетается с атонией и арефлексией скелетной мускулатуры.

Синдром гипотонии детрузора и сфинктера также
результат сегментарных дисфункций мочевого пузыря, при этом снижается тонус
детрузора, вследствие чего увеличивается емкость пузыря до 500-700 мл. Тонус
сфинктера может быть пониженным, нормальным и даже повышенным.

Синдром преобладающей гипотонии сфинктера
наблюдается при травмах на уровне S2-S4 сегментов; для него характерно частое
непроизвольное отделение мочи без позыва. При сфинктерометрии выявляется
отчетливое снижение тонуса сфинктера и на цистограмме — незначительно сниженный
или нормальный тонус детрузора. При пальпаторном исследовании сфинктера прямой
кишки и мышц промежности определяется низкий тонус.

Синдром гипертонии детрузора и сфинктера отмечается
у больных с проводниковым типом дисфункции мочевого пузыря. Цистометрически при
введении в мочевой пузырь 50-80 мл жидкости наблюдается резкий скачок
внутрипузырного давления до 500 мм водн. ст. При сфинктерометрии тонус его
высокий — от 100 до 150 мм рт. ст. Наблюдаются резкие сокращения мышц
промежности в ответ на их пальпацию.

Синдром преобладающей гипертонии детрузора при
цистометрии характеризуется повышением тонуса детрузора при маленькой емкости
пузыря (50-150 мл), высокий скачок внутрипузырного давления в ответ на введение
50 мл жидкости, а тонус сфинктера может быть нормальным, повышенным или
пониженным.

Принцип лечения

Принцип лечения клинических синдромов расстройств
мочеиспускания заключается в том, чтобы:

  • с помощью
    правильно подобранной высоты колена отводящей трубки системы Монро увеличить
    емкость мочевого пузыря и «приучить» детрузор к сокращению в нормальном
    режиме;

  • с помощью
    электростимуляции мочевого пузыря добиться повышения тонуса детрузора;

  • с помощью
    парафиновых аппликаций и электрофореза с атропином на промежностные мышцы
    расслабить тонус сфинктера.

Электрофорез с прозерином или физостигмином на
область промежности повышает тонус мышц тазового дна и сфинктера мочевого
пузыря. Сакральные и пудендальные блокады с новокаином, прием байлофена снижают
тонус детрузора.

Эпидуральное введение прозерина и стрихнина повышает
тонус детрузора, кроме этого, оно стимулирует эрекцию у спинального больного.

С помощью иглорефлексотерапии можно точно
воздействовать на тонус сфинктера и детрузора, целенаправленно применяя
возбуждающий или тормозной тип ИРТ, тем самым в более короткий срок
восстанавливая функцию мочевого пузыря.

Четыре степени компенсации мочеиспускания

Выделяют 4 степени компенсации мочеиспускания у спинальных
больных.

При оптимальной степени компенсации мочеиспускания
больной может удерживать мочу в течение 4-5 часов при емкости пузыря 250-350 мл.
Остаточной мочи нет. Больные чувствуют наполнение пузыря или ого косвенные
признаки в виде своеобразных ощущений — тяжесть внизу живота, покалывание,
жжение в области мочевого пузыря, у них может возникать гиперемия лица, резкая
потливость, после чего происходит акт мочеиспускания.

Удовлетворительная степень компенсации предполагает
удерживание мочи 2-2,5 часа и осуществление мочеиспускания произвольно или с
натуживанием. Емкость мочевого пузыря 200- 250 мл, остаточной мочи 50-70 мл.
Позыв и ощущение прохождения мочи по уретре слабовыражеиы.

Минимальная степень компенсации устанавливается у
лиц с недостаточным контролем мочеиспускания. Мочевой пузырь опорожняется часто
(через 30-60 мин), нередко при интенсивном натуживании, выделяется малое
количество мочи (40-70 мл). Отсутствует позыв, чувство наполнения и прохождения
мочи по уретре. Нередко мочеиспускание непроизвольное или императивное. При
физическом напряжении, перемене положения тела моча не удерживается. Емкость
мочевого пузыря, как и количество остаточной мочи зависят от тонуса детрузора и
сфинктера (при гипотонии детрузора в пределах 500-700 мл, при гипертонии —
20-125 мл).

Неудовлетворительной степенью компенсации считается
состояние больных, при котором акт мочеиспускания полностью не контролируется,
непроизвольное мочеиспускание происходит либо каждые 10-30 мин, либо наблюдается
полное недержание мочи, либо ее полная задержка. Отсутствуют чувство наполнения,
позыв, и прохождение мочи и катетера по уретре. Емкость пузыря при гипотонии
детрузора 500-800 мл, остаточной мочи — 500-700 мл, при гипертонии детрузора
емкость 20-50 мл.

Тренировка мочевого пузыря

После установления причин неадекватного мочеиспускания и
курса терапии, направленной на нормализацию тонуса детрузора и сфинктера,
необходимо переходить к тренировке мочевого пузыря.

Она заключается в том, что больному предлагается вначале
каждые 1-2 часа, затем через более длительные промежутки времени пытаться
самостоятельно помочиться, помогая себе натуживанием и надавливанием руками на
переднюю брюшную стенку. После появления элементов или всего акта
мочеиспускания, «завязанного» по времени, эти сроки удлиняют, переводя
неудовлетворительную и минимальную степень компенсации в более благоприятные.

Формы нарушения мочеиспускания в позднем периоде травмы

Если в остром и раннем периодах травмы спинного мозга
наиболее частой формой расстройства мочеиспускания является задержка мочи, то в
поздний период могут быть следующие формы нарушения мочеиспускания.

Постоянное или истинное недержание мочи наблюдается
пбсле травмы конуса-эпиконуса спинного мозга, а также при травме корешков
конского хвоста. Задачей лечения является повышение тонуса сфинктера и детрузора
мочевого пузыря с целью выработки хотя бы императивного, а в случае
восстановления функции спинного мозга — нормального мочеиспускания.

Неудержание мочи или императивное мочеиспускание
является переходной формой автоматического мочеиспускания к нормальному и
обусловлено недостаточностью проводников спинного мозга вследствие частичного
нарушения их проводимости. Задача лечения таких больных сводится к выработке
нормального акта мочеиспускания или уменьшения степени недержания, что зависит
от восстановления функции спинного мозга. Лечебные мероприятия направлены на
повышение тонуса сфинктера и детрузора. С этой целью назначают подкожные
инъекции стрихнина, коротковолновую диатермию или электрофорез с прозерином на
область мочевого пузыря. Таким же образом можно лечить недержание мочи в остром
периоде травмы.

Затруднение мочеиспускания наблюдается у больных с
проводниковым типом расстройства его и частичным нарушением проводимости
спинного мозга. При этом нарушение проведения произвольного импульса не
обеспечивает достаточного расслабления «сфинктеров мочевого пузыря, тонус
которых резко повышен. Задачей Учения является снижение тонуса сфинктера при
одновременном повышении тонуса детрузора мочевого пузыря, Проводят электрофорез
анатропином, йодом на область промежностных мышц.

При наличии надлобкового свища в позднем периоде
травмы необходимо добиться выработки произвольного или автоматического акта
мочеиспускания и ликвидации цистостомы. Показаниями к закрытию цистостомы
является наличие пузырного рефлекса и возможность мочеиспускания по уретре, т.е.
ее проходимость. Наличие пузырного рефлекса проверяется с помощью цистометрии.

При подготовке к закрытию цистостомы большое значение имеет
тренировка мочевого пузыря, с целью увеличения его емкости, выработки пузырного
рефлекса. Для этого вначале к дренажной трубке подключают систему Монро.
Постепенно отводящий конец тройника поднимают на 20-30-40 см над уровнем лобка.
Дозированное повышение давления в мочевом пузыре способствует увеличению объема
сморщенного пузыря, который всегда является результатом эпицистостомии,
выработке пузырного рефлекса для нормального акта опорожнения.

Наличие антисептической жидкости, подбираемой в зависимости
от чувствительности микрофлоры мочи, позволяет проводить тренировку пузырного
рефлекса без опасения обострения инфекции. По мере выработки пузырного рефлекса
и восстановления нормального или автоматического мочеиспускания через уретру при
достаточном объеме мочевого пузыря, отсутствии обострения воспалительного
процесса и большого количества остаточной мочи дренажную трубку перекрывают на
несколько дней, а затем убирают. Катетеризируют мочевой пузырь постоянным
катетером на 7-9 дней, для того, чтобы закрылось отверстие на передней брюшной
стенке. После этого больной самостоятельно опорожняет мочевой пузырь.

Перльмуттер О.А.
Травма позвоночника и спинного мозга.


Дата публикации (обновления):
02 апреля 2016 г. 16:57

.


Комплексный подход к профилактике и лечению прогрессирующей миопии у школьников | Тарутта Е.П., Иомдина Е.Н., Тарасова Н.А., Маркосян Г.А., Максимова М.В.

В обзоре представлены средства местной и системной медикаментозной поддержки для профилактики и лечения прогрессирующей миопии у школьников, улучшающие работоспособность цилиарной мышцы и гемодинамику миопического глаза, оказывающие антиоксидантное и сосудопротекторное действие.

    Как известно, миопия — наиболее распространенная патология рефракции, ее частота в младших классах школы составляет 6–8%, а к окончанию школы, т. е. к 17 годам, — не менее 25–30% [1]. В гимназиях и лицеях этот показатель достигает 50%, что связано с более интенсивными и длительными зрительными нагрузками, продолжительной работой за компьютером, более частым использованием других электронных носителей информации [2]. Распространение миопии в мире неравномерно: максимальные цифры отмечаются в Юго-Восточной Азии: 
Южной Корее — 96,5% [3], Китае — 80% [4], Сингапуре — 73,9% [5], Гонконге — 61,5% [6]. Минимальные показатели частоты миопии у лиц молодого возраста отмечаются в странах Африки — около 11% [7]. По прогнозу 
B. Holden et al., к 2050 г. 49,8% населения будут близорукими, из них 9,8% — с миопией высокой степени [8]. При неблагоприятном течении миопия становится причиной развития патологии сетчатки, что в тяжелых случаях ведет к необратимому снижению корригированной остроты зрения и к инвалидности по зрению, наступающей в трудоспособном возрасте. Особенно неблагоприятный прогноз обычно имеет рано приобретенная близорукость, возникающая у дошкольников [9].
    В последние годы на основании данных о роли ослабленной аккомодации в происхождении миопии разработаны методы профилактики ее прогрессирования путем воздействия на аккомодационный аппарат глаза при помощи физических упражнений и медикаментозных средств [10–13].

    Медикаментозные методы воздействия при миопии

    Патогенетическое тормозящее действие на миопический процесс оказывают препараты, улучшающие работоспособность цилиарной мышцы и гемодинамику глаза (табл. 1).

    Препараты, влияющие на цилиарную мышцу

    В зарубежной литературе для медикаментозного контроля миопии предлагаются инстилляции различных концентраций холинолитика атропина. Установлено, что атропин активирует выброс нейротрансмиттера допамина из клеточных структур и влияет на рост глазного яблока [14]. Как известно, М-холинолитики воздействуют на циркулярную и меридиональную порцию волокон цилиарной мышцы — мышцы Брюкке и Мюллера, оказывая циклоплегическое действие.  
    Недостатками применения мидриатиков длительного действия являются выраженный мидриаз, светобоязнь, интоксикация, плохая переносимость детьми [15]. Кроме того, атропин может подавлять секрецию гормона роста [16–18]. По мнению Э. С. Аветисова, лечение атропином должно быть отвергнуто, т. к. он дополнительно парализует и без того ослабленную цилиарную мышцу [19]. В последние годы применяют 0,01% атропин, что значительно минимизирует побочные эффекты [20]. Однако в нашей стране этот метод пока не имеет законной основы и применяется только по разрешению локального этического комитета [21].
    Широкое применение в последние годы получил альфа-адреномиметик фенилэфрина гидрохлорид, поскольку существуют доказательства симпатической иннервации радиальной порции цилиарной мышцы (мышцы Иванова) — анатомического [22] и физиологического характера [23]. Стимуляция работы радиальной порции цилиарной мышцы улучшает аккомодацию вдаль и в целом зрительную работоспособность. Известен положительный опыт применения инстилляций 2,5% раствора фенилэфрина [24, 25] при привычно-избыточном напряжении аккомодации (ПИНА), прогрессирующей миопии, астенопии. Инстилляции фенилэфрина хорошо зарекомендовали себя в сочетании с домашними тренировками аккомодации, пневмомассажем и другими аппаратными воздействиями [26–31].

    Препараты, влияющие на гемодинамику

   

В лечении приобретенной миопии рекомендуется системное применение препаратов, улучшающих гемодинамику глаза. С этой целью уже при миопии слабой степени назначают никотиновую кислоту в сочетании с аскорбиновой кислотой [32]. О. Г. Левченко после курса лечения прогрессирующей миопии у детей 9–14 лет препаратом, содержащим гексилтеобромин и никотиновую кислоту, отмечала улучшение гемо- и гидродинамики глаза, зрительных функций и работоспособности цилиарной мышцы [33, 34].
    Обычно медикаментозное лечение, включающее трофические средства, улучшающие гемодинамику в тканях миопического глаза, проводится курсами 2 раза в год в домашних условиях [35–47].

    Витаминно-минеральные комплексы

    В лечении миопии также широко применяются витаминно-минеральные комплексы. Дефицит микронутриентов является фактором риска глазной патологии в молодом возрасте [48, 49], поэтому рекомендуется использование специализированных витаминно-минеральных комплексов, содержащих лютеин, зеаксантин, экстракт черники, бета-каротин. Лютеин и зеаксантин, каротиноиды, составляющие основу макулярного пигмента, предохраняют глаза от оптического и оксидативного стресса, характерных для прогрессирующей миопии.
    Два раза в год в течение 1–1,5 мес. рекомендуют курсовой прием комплекса витаминов, микроэлементов и препаратов на основе вытяжки черники (антоцианозидов). Антоцианозиды и флавоноиды, содержащиеся в листьях и плодах черники, благодаря их выраженному антиоксидантному и сосудопротекторному действию представляют особый интерес для профилактики прогрессирования миопии и развития ее осложнений [50]. По данным различных авторов, эти вещества способствуют улучшению реологических свойств крови, поскольку снижают тонус сосудистой стенки и способствуют ее укреплению (эффект обусловлен участием данных веществ в регуляции биосинтеза коллагена), уменьшают тромбообразование, а также ускоряют регенерацию обесцвеченного родопсина. Клинические исследования показали, что препараты черники 
(160–320 мг в день стандартной дозы — 25% антоцианозидов) способствуют улучшению зрительных функций у больных с поражением сетчатки различного генеза, в т. ч. и при миопии [51, 52]. Ускорение регенерации родо-
псина и активация ферментов сетчатки под влиянием экстракта черники улучшают ночное зрение, снижают риск развития дистрофии сетчатки, ускоряют процесс восстановления зрения после длительных зрительных нагрузок [53, 54]. Бета-каротин защищает клетки от повреждения активными формами кислорода и свободными радикалами. Он также обладает иммуномодулирующим действием, стимулирует дифференцировку В- и Т-лимфоцитов.
    В работе Т. Н. Никитиной показано, что прием препаратов линии Стрикс, содержащих экстракт черники, витамины Е и D, минералы, приводит к повышению зрительной работоспособности и остроты зрения [55]. По данным Т. В. Судовской и Т. Н. Киселевой, антиоксидантный комплекс Стрикс при его применении у детей приводит к повышению показателей скорости кровотока в глазной артерии, центральной артерии сетчатки, задних коротких цилиарных артериях, к снижению вазорезистентности, что свидетельствует об улучшении кровоснабжения сосудистой оболочки и сетчатки на фоне проведенного лечения [56].
    Показано, что применение антоцианозидов (в частности, препарата Стрикс) в комплексной терапии компьютерного зрительного синдрома положительно влияет на самочувствие пациентов, что выражается в уменьшении частоты таких симптомов, как затуманивание, замедленная перефокусировка с ближних объектов на дальние и обратно, быстрое утомление при чтении, трудности в восприятии печатного текста [57].
    В нашей практике в качестве источника антоцианозидов, витаминов и минеральных веществ мы также используем препарат Стрикс, назначая его детям с 7 лет по 1 таблетке в сутки. Одна таблетка препарата содержит 82,4 мг сухого экстракта плодов черники и 12 мг бета-каротина. Включение Стрикса в комплексное лечение детей и подростков с миопией способствует положительной динамике зрительных функций, улучшению работы аккомодационного аппарата глаза, улучшению гемодинамики глаза, исчезновению симптомов зрительного утомления и астенопии.

    Физиотерапевтические методы

    Для медикаментозного воздействия при миопии используют также магнитотерапию и магнитофорез лекарственных веществ. Как правило, курс лечения состоит из десяти 10-минутных процедур. Проводят магнитофорез с 2% р-ром кальция хлорида (для усиления тонуса симпатической нервной системы), 1% или 2,5% фенилэфрина и рибофлавина, метилэтилпиридинола (для коррекции трофических нарушений) [58].
     Применяют также электрофорез, который в офтальмологической практике проводят по трем методикам: на закрытые веки (по Бургиньону), через электрод-
ванночку на открытый глаз и эндоназально. Проводят электрофорез с 2% р-ром кальция хлорида (для усиления тонуса симпатической нервной системы и укрепления склеры), 1% р-ром фенилэфрина и рибофлавина с использованием электрода-ванночки или по Бургиньону, 0,5% р-ром дифенгидрамина (в целях снятия спазма гладкой мускулатуры и оказания холинолитического действия, но без расширения зрачка) и экстрактом алоэ в сочетании с аскорбиновой кислотой [58].
     Медикаментозная терапия используется в комплексном лечении близорукости наряду с оптической коррекцией и функциональными (аппаратными) воздействиями.

    Оптико-рефлекторные методы

    Эффективным подходом в комплексной профилактике прогрессирования миопии являются оптико-рефлекторные методы, основанные на стимуляции аккомодационного рефлекса путем расфокусировки изображения с помощью оптических стекол за счет изменения расстояния между объектом и глазом либо путем воздействия призмами на конвергентный аппарат глаза. Этот подход реализуется в целом ряде методик, перечисленных ниже.
    Тренировочные упражнения с помощью сменных линз по Аветисову — Мац включают последовательную ступенчатую нагрузку аккомодации с помощью отрицательных линз с последующей разгрузкой с помощью положительных линз [15].
    Оригинальный метод раскачки аккомодации предложили В. В. Волков и Л. Н. Колесникова [29, 59]. Метод заключается в поочередном приставлении к корригированному глазу положительных и отрицательных сферических линз.
    Положительные сферические линзы, вызывающие эффект микрозатуманивания, используемые в формате упражнений, снижают привычный тонус аккомодации и ПИНА, а также тонус мышц, задействованных в акте конвергенции.
    Помимо сферопризматических применяют тренировки с использованием призматических линз. Применение призм, расположенных основанием друг к другу, вызывает эффект дивергентной дезаккомодации. При этом происходит расслабление цилиарной мышцы и мышц, участвующих в акте конвергенции. При расположении призм основанием к виску повышается тонус наружных мышц, участвующих в акте конвергенции, и волокон цилиарной мышцы, аккомодирующих вблизи. К таким упражнениям относится метод дивергентной дезаккомодации по А. И. Дашевскому [60]. Призмы, выключая или ослабляя конвергенцию, рефлекторно снижают привычный тонус аккомодации и снижают или уменьшают псевдомиопию.
    Перечисленные методики, несмотря на свою эффективность, обладают и некоторыми недостатками, поскольку предполагают ручной подбор линз, характеризуются трудоемкостью, требуют значительных затрат времени, необходим специально обученный медицинский персонал, имеются неудобства при ручной замене линз, отмечается искажение изображения при использовании нескольких линз, например, при сочетании призма + сфера.
    Поэтому были разработаны простые устройства для применения в домашних условиях, использующие основные из перечисленных принципов воздействия на аккомодацию, в частности, аккомодометр оптический «АТО-1» [61].

    Оптическая коррекция

    Разгрузка аккомодации и конвергенции осуществляется также с помощью подбора постоянной коррекции. Согласно целому ряду сообщений, темп прогрессирования миопии снижают прогрессивные очки, особенно при условии индивидуального подбора аддидации по показаниям объективной аккомодометрии [62].
    Убедительные отдаленные результаты профилактики возникновения и прогрессирования миопии получены при использовании оригинального метода — альтернирующей анизокоррекции [63]. Метод заключается в создании постоянного, в течение всего дня, монолатерального слабомиопического дефокуса при почти полной коррекции парного глаза и смене воздействия с помощью поочередного ношения 2-х пар очков. Следует подчеркнуть, что как прогрессивная, так и альтернирующая коррекция могут усиливать экзофорию и даже вызывать экзодевиацию, очки должны назначаться только при устойчивом бинокулярном зрении и орто- или эзофории.
    Напротив, очки со специально разработанной линзой, не создающие в центре миопической дефокусировки и не ослабляющие аккомодационный рефлекс, не вызывающие диссоциацию аккомодации и конвергенции, особенно показаны при экзофории, но могут применяться также при орто- и эзофории. Принцип таких очков заключается в наведении миопического дефокуса на периферии сетчатки, что, в соответствии с современной теорией патогенеза миопии, тормозит прогрессирование и даже возникновение последней [64].

    Физические методы воздействия

    Важным компонентом комплексной профилактики развития миопии являются физические методы воздействия на моторный и сенсорный механизмы аккомодации. Сюда относится низкоинтенсивная лазерная стимуляция цилиарной мышцы на аппарате «МАКДЭЛ-09» — транссклеральное бесконтактное воздействие на цилиарную мышцу с помощью инфракрасного лазерного излучения. Этот метод предусматривает проведение 10 процедур 1 или 2 раза в день (в последнем случае с 30–40-минутным перерывом) 2–4 раза в год [65].
    Имеются сообщения об использовании электростимуляции цилиарной мышцы. При близорукости применяют в основном трансконъюнктивальную электроофтальмостимуляцию по В. В. Оковитову. Стимуляцию проводят ежедневно по 5 мин, курс включает 10 процедур. Лечение проводят под контролем состояния аккомодации — возможно развитие транзиторного многодневного спазма аккомодации, иногда сопровождаемого истинным усилением рефракции в течение ближайших месяцев [58].
    Необходимо подчеркнуть, что при приобретенной прогрессирующей близорукости не рекомендуется использовать метод видеокомпьютерной биоэлектрической коррекции активности коркового отдела зрительного анализатора [36, 38, 66]. Целесообразно использовать данный метод по прямому назначению — для лечения амблиопии. После курса таких тренировок при прогрессирующей близорукости возможно повышение тонуса аккомодации и даже развитие частичного спазма аккомодации.
    Не рекомендуется использовать при приобретенной прогрессирующей миопии и компьютерные программы для лечения амблиопии и другие плеоптические методы [35, 36, 38]. Такие тренировки усиливают динамическую рефракцию глаза, повышают привычный тонус аккомодации и тонус покоя аккомодации, индуцируя более быстрое прогрессирование близорукости.
    Плеоптическое лечение, включающее локальные засветы, прямое транспупиллярное низкоэнергетическое лазерное облучение сетчатки, лазерные спеклы для близи, видеокомпьютерную биоэлектрическую коррекцию активности коркового отдела зрительного анализатора, компьютерные программы для лечения амблиопии, целесообразно использовать для улучшения зрительных функций при врожденной близорукости с амблиопией [35–38].
    Для оптимизации рефрактогенеза при миопии рекомендуются также физиотерапия, рефлексотерапия и массаж [36–38, 66].
    Электрорефлексотерапию (электропунктуру) проводят контролируемым постоянным током, силу тока увеличивают до появления легкого покалывания или жжения в месте воздействия. Продолжительность воздействия на каждую 
точку — 1–2 мин. При воздействии на общие точки используется ток отрицательной полярности, на точки в области глаз — ток положительной полярности. Курс электропунктуры включает 5–6 процедур, проводится 2–3 раза в год. В редких случаях возможно транзиторное усиление динамической рефракции. Для лечения близорукости успешно используют иглорефлексотерапию, включая акупунктурные точки общего действия, местные, параорбитальные, воротниковой зоны, аурикулярные. Курс лечения состоит из 10 процедур по 20 мин, проводимых ежедневно или через день [67].
    Хорошо себя зарекомендовал массаж шейно-воротниковой зоны (10 процедур 2 раза в год), который благоприятно воздействует на гемодинамику и улучшает состояние мышечного каркаса у детей и подростков с миопией, у которых, как правило, наблюдаются нарушения опорно-двигательного аппарата на фоне дефицита двигательной активности.

    Общие мероприятия

    Ограничение физической активности лиц, страдающих близорукостью, как это рекомендовалось еще недавно, признано неправильным. Наоборот, показана важная роль физической культуры в предупреждении миопии и ее прогрессирования, поскольку физические упражнения способствуют как общему укреплению организма, активизации его функций, так и повышению работоспособности цилиарной мышцы и укреплению склеральной оболочки глаза. Исследования Е. И. Ливадо позволили установить, что снижение общей двигательной активности школьников при повышенной зрительной нагрузке может способствовать развитию близорукости [68]. На основе результатов проведенных исследований была разработана методика лечебной физкультуры для школьников с близорукостью, и показана ее эффективность при применении в комплексе мер по профилактике близорукости и ее прогрессирования. Специальные упражнения чередуют с упражнениями для укрепления мышц спины и шеи, передней брюшной стенки, также дыхательными упражнениями. Подвижные игры — прекрасное средство тренировки организма, повышения эмоционального состояния играющих, и, как показано в недавнем исследовании I. G. Morgan [69], такая физическая активность на свежем воздухе в комплексе с другими медицинскими средствами весьма способствует профилактике возникновения и прогрессирования миопии. Желательно проводить игры с непродолжительным быстрым бегом (10–15 м), передачей и ловлей мяча, бросками в стену или мишени.
    Необходимо иметь в виду результаты работы И. В. Сухиненко [70], которые показали, что циклические упражнения умеренной интенсивности (пульс 100–140 уд./мин) оказывают благоприятное воздействие на гемодинамику и аккомодационную способность глаз, вызывая реактивное усиление кровотока в глазу через некоторое время после нагрузки и повышение работоспособности цилиарной мышцы. В то же время после выполнения циклических упражнений значительной интенсивности (пульс 180 уд./мин и выше), а также упражнений на гимнастических снарядах, прыжков со скакалкой, акробатических упражнений отмечаются выраженная ишемия глаз, сохраняющаяся длительное время, и ухудшение работоспособности цилиарной мышцы. В настоящее время выделены градации допуска к различным видам спорта при заболеваниях органа зрения, в частности, при аномалиях рефракции [71], которые необходимо учитывать при индивидуальных рекомендациях детям и подросткам с миопией.

    Заключение

    Эффективная профилактика развития прогрессирующей миопии как многофакторной офтальмопатологии требует комплексного подхода, включающего различные методы целенаправленной оптической коррекции, функционального воздействия и медикаментозной терапии. Современные подходы и стандарты комплексного лечения отражены в Федеральных клинических рекомендациях на сайте http://avo-portal.ru. При назначении адекватного лечебного комплекса необходим индивидуальный подход, учитывающий состояние здоровья ребенка и функциональные особенности его органа зрения, что позволит остановить прогрессирование миопии и не допустить развитие необратимых патологических изменений глазного дна миопического генеза.

Сведения об авторах: Тарутта Елена Петровна — д.м.н, профессор, руководитель отдела; Иомдина Елена Наумовна — д.б.н., профессор, главный научный сотрудник; Тарасова Наталья Алексеевна — к.м.н., старший научный сотрудник; Маркосян Гаянэ Айказовна — д.м.н., ведущий научный сотрудник; Максимова Марина Викторовна — научный сотрудник. Отдел патологии рефракции, бинокулярного зрения и офтальмоэргономики ФГБУ «МНИИ ГБ им. Гельмгольца» Минздрава России. 105062, Российская Федерация, г. Москва, ул. Садовая-Черногрязская, д. 14/19. Контактная информация: Тарасова Наталья Алексеевна, e-mail: [email protected]. Прозрачность финансовой деятельности: никто из авторов не имеет финансовой заинтересованности в представленных материалах или методах. Конфликт интересов отсутствует. Статья поступила 30.04.2018.
About the authors: Elena P. Tarutta — MD, PhD, professor, Head of Department; Elena N. Iomdina — Doct. Biol. Sci, professor, principal researcher; Natalya A. Tarasova — PhD, senior researcher; Gayane A. Markosyan — MD, PhD, leading researcher; Marina V. Maksimova — researcher. Department of pathology of refraction, binocular vision and ophthalmoergonomics of Moscow Research Institute of Eye Diseases named after Helmholtz. 14/19, Sadovaya-Chernogryazskaya str., Moscow, 105062, Russian Federation. Contact information: Natalya A. Tarasova, e-mail: [email protected]. Financial Disclosure: no author has a financial or property interest in any material or method mentioned. There is no conflict of interests. Received 30.04.2018.

.

Цены на услуги физиотерапии в Симферополе

ФИЗИОТЕРАПИЯ:
Консультация врача физиотерапевта

– консультация меньше 10 минут – БЕСПЛАТНАЯ!

– если в этот же день делаете врачебную процедуру после консультации – консультация БЕСПЛАТНАЯ!

1000 руб
Консультация врача иглорефлексотерапевта

– консультация меньше 10 минут – БЕСПЛАТНАЯ!

– если в этот же день делаете врачебную процедуру после консультации – консультация БЕСПЛАТНАЯ!

1000 руб
Электрофорез с магнезией – 15 минут 500 руб
Электрофорез с эуфилином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с (эуфилин +димпексид + анальгин) – 15 минут 600 руб
Электрофорез с никотиновой кислотой – 15 минут 500 руб
Электрофорез с лидазой – 15 минут 500 руб
Электрофорез с карипазимом – 15 минут 850 руб
Электрофорез с новокаином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с (новокаин + эуфилин) – 15 минут 600 руб
Электрофорез с прозерином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с калия йодидом – 15 минут 500 руб
Электрофорез с анальгином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с дибазолом – 15 минут 500 руб
Электрофорез с атропином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с вит. В1 – 15 минут 500 руб
Электрофорез с баралгином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с гидрокартизона сукцинатом – 15 минут 500 руб
Электрофорез с папаверином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с гордоксом – 15 минут 700 руб
Электрофорез с лидокаином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с но-шпой – 15 минут 500 руб
Электрофорез с прозерином – 15 минут 500 руб
Электрофорез с преднизалоном – 15 минут 600 руб
Электрофорез с трипсином – 15 минут 600 руб
Электрофорез (преднизалон + димексид + анальгин) – 15 минут 750 руб
Электрофорез CaCl2 – 15 минут 500 руб
Ультразвук – 15 минут 550 руб
Ультразвук с гидрокортизоном – 15 минут 650 руб
Ультрафонофорез с мазью хондроитина – 20 минут 450 руб (для пенсионеров – 400 руб)
Ультрафонофорез с гидрокортизоновой мазью – 20 минут 650 руб
Фонофорез с лонгидазой 600 руб
Фонофорез с карипазимом 850 руб
Электропунктура 500 руб
Амплипульс 550 руб
Амплипульс с медикаментами от 450 руб до 750 руб
Магнитотерапия -15-20 минут 600 руб
Магнитотерапия + лазер – 15 минут 450 руб
Лазеротерапия – 15 минут 400 руб
Иглорефлексотерапия – 1 процедура 2 000 руб
Электромиостимуляция 450 руб
Гирудотерапия:
Сеанс гирудотерапии 3 000 руб
Аппликации грязей мертвого моря 300 руб
Аппликации нестероидных противовоспалительных мазей 100 руб
Парафинотерапия 300 руб
Детский физиотерапевтический комплекс (массаж + электрофорез с хлоридом кальция + парафинотерапия) 1 500 руб
Аккупунктурное паравертебральное введение гомеопатических препаратов (Германия) 1 500 руб
Аккупунктурное околосуставное введение гомеопатических препаратов (Германия) 1 500 руб
Плазмотерапия суставов:
1 пробирка плазмы 2000 руб
2 пробирки плазмы 4000 руб
Внимание! Дорогие наши пациенты, если Вы предоставите цены у конкурентов Крыма (клиники, салоны) дешевле, чем у нас на процедуры Физиотерапия в клинике VARA – мы обещаем Вам сделать 5% скидку от цен конкурентов.

Определение сульфата атропина в моче человека капиллярным электрофорезом с использованием химически модифицированного электрода в качестве датчика электрохемилюминесценции определение сульфата атропина на основе платинового электрода, модифицированного Eu-PB, в качестве рабочего электрода. Аналит вводили в разделительный капилляр длиной 50 см (25 м i.д., 360 м в.д.) электрокинетической инжекцией в течение 10 с при 10 кВ. Были обсуждены и оптимизированы параметры, связанные с разделением и обнаружением. Было доказано, что 10 мМ фосфатный буфер при pH 8,0 может обеспечить наиболее благоприятное разрешение, а высокая чувствительность обнаружения была получена при использовании потенциала обнаружения при 1,15 В и 5 мМ Ru (bpy)

3 2+ в 80 мМ фосфатный буфер при pH 8,0 в резервуаре для обнаружения. В оптимизированных условиях площадь пика ECL была пропорциональна концентрации атропина сульфата в диапазоне от 0.08-20
с пределом обнаружения 50 (3). Относительные стандартные значения времени миграции и площади пика составили 0,81 и 3,19% соответственно. Разработанный метод был успешно применен для определения уровня сульфата атропина в образцах мочи пациентов с выздоровлением от 90,9 до 98,6%.

1. Введение

Атропин ((±) -гиосциамин) — это активный алкалоид тропина из пасленовых растений (как одно из традиционных китайских сырых трав), и его химическая структура показана на рисунке 1.Сульфат атропина уже много лет используется в клинической практике в качестве холинолитика при премедикации анестезии. Однако высокая доза атропина сульфата может стимулировать центральную нервную систему и нарушать функцию почек человека, что приводит к токсической реакции [1]. Следовательно, необходимо разработать чувствительные и эффективные методы количественного определения сульфата атропина в области клинической медицины.

На сегодняшний день различные хроматографические методы, включая жидкостную хроматографию (ЖХ) [2], высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) [3, 4], тонкослойную хроматографию (ТСХ) [5] и газовую хроматографию ( GC) [6] были зарегистрированы для анализа атропина.Однако недостатком хроматографии, по-видимому, является трудоемкость из-за необходимой экстракции, концентрирования и / или дериватизации перед анализом. Кроме того, недавно был изготовлен датчик объемных акустических волн, который используется для определения сульфата атропина в сыворотке и моче [7]. Из прикладной области спектроскопического анализа для обнаружения атропина были разработаны атомно-абсорбционный метод (AAS) [8], хемилюминесцентный метод (CL) [9] и электрохемилюминесцентный метод (ECL) [10].Однако эти методы часто сталкиваются с плохой селективностью при анализе сложных образцов, когда они не сочетаются с другими методами разделения.

Капиллярный электрофорез (КЭ) представляет собой интересную альтернативу мощному инструменту разделения и уже применяется для анализа атропина. Однако существующие методы КЭ для атропина обычно сочетаются с детектором УФ-В, что приводит к ограниченным пределам обнаружения [11]. В последние годы сочетание CE и Ru (bpy) 3 2+ на основе ECL-детектирование оказалось многообещающим и эффективным аналитическим методом в области биохимического анализа с высокой чувствительностью и отличной эффективностью разделения [12– 15].Однако использование платинового электрода без покрытия при обнаружении CE-ECL может ухудшить стабильность и чувствительность из-за отравляющего эффекта сложных матриц в реальных биологических жидкостях [10].

В последние годы химически модифицированные электроды широко используются для обнаружения следовых количеств реальных биологических жидкостей, поскольку отравляющее действие сложных матриц на неизолированный платиновый электрод может ухудшить стабильность и чувствительность [16]. В частности, берлинская лазурь (ПБ), его аналог и родственные композитные пленочные модифицированные электроды привлекли больше внимания в широком диапазоне электрохимии из-за присущей ему стабильности, сильно обратимого характера электродных реакций, простоты приготовления и низкой стоимости [17].К сожалению, о применении модифицированного электрода аналога PB с редкоземельными ионами в системах CE-ECL не сообщалось другими исследователями, хотя некоторые модифицированные электроды также использовались в качестве твердотельных детекторов ECL при обнаружении CE-ECL [16, 18] . В наших предыдущих работах [19, 20] было доказано, что только платиновый микроэлектрод, модифицированный пленочным аналогом берлинской синей (Eu-PB), легированный европием (III), обладает хорошей каталитической активностью в отношении электрохемилюминесценции Ru (bpy) 3 2+ Система на базе .С учетом этого готовится платиновый электрод, модифицированный Eu-PB, который используется в качестве рабочего электрода, а метод CE-ECL на основе Ru (bpy) 3 2+ разработан для прямого определения сульфата атропина в образцах мочи. пациентов в этой статье. Благодаря этой альтернативе был получен более широкий линейный диапазон и значительно улучшенная чувствительность к сульфату атропина, поскольку можно было избежать возможного загрязнения электрода.

2. Экспериментальная
2.1. Реагенты и химикаты

Сульфат атропина был от Sigma (St.Луис, Миссури, США) и свежеприготовленные путем серийного разбавления дважды деионизированной водой непосредственно перед использованием. Гексагидрат хлорида трис (2,2′-бипиридил) рутения (II) (98%) был от Aldrich (Милуоки, Висконсин, США). Фосфат натрия (pH 8,0, Г. р.) Использовали в качестве буферного раствора. Все химические вещества и реагенты были аналитической чистоты, за исключением конкретных заявлений. Повсюду использовали дважды деионизированную воду, и все растворы перед использованием фильтровали через мембрану с размером пор 0,22 мкм мкм.

2.2. Использовали прибор

MPI-A для анализа многопараметрической системы капиллярного хемилюминесцентного электрофореза с самосборным программным обеспечением CE-ECL (Xi’an Remax Electronic and Technological Co., Китай). Капилляр из плавленого кварца без покрытия (50 см × 25 мкм, м внутренний диаметр) был получен от Yongnian Optical Fiber Factory (Хэбэй, Китай). Детектирование ECL на конце колонки было установлено с трехэлектродной конфигурацией, которая состояла из модифицированного Eu-PB платинового диска (Φ = 0,5 мм) в качестве рабочего электрода, Ag / AgCl, заполненного насыщенным KCl, в качестве электрода сравнения. и платиновая проволока в качестве вспомогательного электрода.

Электрохимический анализатор CHI832 (Shanghai Chenhua Apparatus Corporation, Китай) использовали как для модификации рабочего электрода, так и для измерения дифференциальных импульсных вольтамперограмм (D.P.V.s).

2.3. Процедура

Принципиальная схема системы обнаружения CE-ECL была такой же, как сообщалось в предыдущей работе [19]. Раствор 5 мМ Ru (bpy) 3 2+ в 80 мМ фосфатном буфере (pH 8,0) вводили непосредственно в реакционный резервуар.Рабочий буферный раствор представлял собой 10 мМ фосфатный буфер (pH 8,0). Образцы вводили в электрокинетическом режиме при 10 кВ в течение 10 с. Напряжение разделения 17 кВ. Трубка фотоумножителя (ФЭУ) была смещена на -850 В. Расстояние между капилляром и рабочим электродом было отрегулировано примерно на 150 мкм м. Свежий Ru (bpy) 3 2+ заменяли каждые 3 часа для обеспечения хорошей воспроизводимости. Капилляр промывали текущим буфером между двумя инъекциями образца до тех пор, пока базовый уровень не стал стабильным.Концентрации образца количественно определяли по площади пика ECL.

2.4. Приготовление модифицированного Eu-PB платинового электрода

Модифицированная композитная пленка была приготовлена ​​на гладкой и очищаемой поверхности платинового электрода. Непосредственно добавлен в электрохимическую ячейку. Пленка Eu-PB была постепенно электроосаждена при циклическом сканировании потенциала ячейки от 0 до 1.3 В со скоростью 20 мВ / с для двадцати сегментов (по сравнению с контрольным электродом SCE).

2,5. Приготовление пробы мочи

Свежие пробы мочи пациентов были получены из второй больницы Университета Ланьчжоу и собраны у двух пациентов мужского пола через 3 и 8 часов после инъекции 0,5 мг сульфата атропина, соответственно. Образцы мочи центрифугировали при 2000 об / мин в течение 10 мин. Затем верхний слой отделяли и разбавляли в 20 раз деионизированной водой с последующим пропусканием через 0.22 мкм м мембраны и непосредственно вводится в систему CE-ECL и анализируется.

3. Результаты и обсуждение
3.1. Действие платинового рабочего электрода, модифицированного Eu-PB
3.1.1. Влияние на электроокисление Ru (bpy)

3 2+

Характеристики электроокисления Ru (bpy) 3 2+ тестировали до и после модификации рабочего электрода методом дифференциальной импульсной вольтамперометрии.Как показано на рисунке 2, пиковый ток от электроокисления Ru (bpy) 3 2+ был значительно увеличен на модифицированном электроде, и наблюдался пик окисления Ru (bpy) 3 2+ . ок. 1,05 В (по сравнению с Ag / AgCl), с небольшим отрицательным сдвигом ок. 20 мВ по сравнению с немодифицированным электродом. Следовательно, эффективность ECL Ru (bpy) 3 2+ может быть улучшена за счет каталитического окисления Ru (bpy) 3 2+ и, следовательно, большего образования Ru (bpy) в возбужденном состоянии 3 2+ в подготовленном электроде.

3.1.2. Влияние атропина на реакцию ECL

Люминесцентную реакцию атропина исследовали в подготовленном электроде, как показано на рисунке 3. Было обнаружено, что отношение изменения сигнала ECL к изменению концентрации сульфата атропина () было значительно увеличено за счет использование платинового электрода, модифицированного Eu-PB, в качестве датчика ECL, что указывает на то, что изменение сигнала ECL было более чувствительным к изменению концентрации сульфата атропина.Следовательно, наклон калибровочной кривой будет увеличиваться. Кроме того, на рисунке 3 также показано, что линейный диапазон будет расширен при модификации Pt-электрода. Таким образом, приготовленный электрод выиграет от улучшенной чувствительности и линейности для сульфата атропина.

3.1.3. Эффект защиты от отравления модифицированного электрода

Чтобы исследовать эффект защиты от отравления модифицированного электрода, сульфат атропина в реальных образцах мочи пациентов определяли методом CE-ECL с использованием платинового электрода и подготовленного электрода в качестве датчика ECL, соответственно.Было обнаружено, что использование немодифицированного электрода привело к уширению пиков и значительно нестабильному измерению из-за отравляющего действия электрода, и поэтому было непригодным для анализа реальных образцов мочи. Хотя было обнаружено, что мочевая кислота, другие матрицы и метаболиты атропина в образцах мочи мало мешали обнаружению с использованием подготовленного электрода, и, следовательно, были получены усиленный сигнал ECL, более низкий уровень шума, лучшая форма пика и улучшенная воспроизводимость. Также было доказано, что подготовленный электрод был достаточно стабильным для многократного использования в системе обнаружения в течение одного месяца без необходимости замены электродов.Одним словом, модифицированный электрод показывает преимущество отличного антиотравления для реальных образцов мочи.

3.2. Оптимизация условий
3.2.1. Влияние Ru (bpy)

3 2+ Концентрация

Концентрация Ru (bpy) 3 2+ оказала большое влияние на сигнал ECL. Результаты показали, что интенсивность ECL заметно увеличивалась с увеличением концентрации Ru (bpy) 3 2+ с 0,2 до 5,0 мМ из-за ускорения скорости реакции.В этой работе было принято 5 мМ Ru (bpy) 3 2+ в 80 мМ фосфатном буфере из-за повышенной чувствительности и экономии в использовании реагента.

3.2.2. Влияние рабочего буфера

Определение атропина изучали в различных буферных системах, включая фосфатный, ацетатный, трис-HCl, лимонная кислота-цитрат натрия и боратные буферы. Наконец, фосфат был выбран с точки зрения стабильной базовой линии, более низкого уровня шума, более короткого времени анализа и лучшей формы пика.

Далее, влияние фосфата на детектирование было исследовано в широком диапазоне pH 4.5–10,0 с интервалом 0,5 единиц pH. Как показано на рисунке 4, интенсивность ECL увеличивалась с увеличением значения pH в диапазоне pH 4,5–7,5 и достигала плато при pH 7,5–8,5, выше которого она немного снижалась. Возможная причина рассматривалась как конкурентная реакция между ионами Ru (bpy) 3 2+ и OH , образующимися при высоком значении pH [21]. Поэтому для всех последующих работ был выбран pH 8,0.

При фиксированном значении pH 8,0 концентрация рабочего буфера была изменена с 5 до 20 мМ.Было обнаружено, что работа с высокой концентрацией буфера позволяет улучшить чувствительность и разрешение. Однако высокая концентрация буфера может вызвать чрезмерный нагрев, вызванный эффектом Джоуля, что приведет к нестабильным измерениям. Следовательно, 10 мМ фосфата при pH 8,0 использовали в качестве рабочего буфера.

3.2.3. Влияние потенциала обнаружения

Интенсивность ECL зависит от эффективности электролизера Ru (bpy) 3 3+ и существенно зависит от потенциала окисления, приложенного к электроду.Как видно на рисунке 5, увеличение производства Ru (барр. / Год) 3 3+ с ростом потенциала привело к усилению отклика, и максимальное значение было получено при 1,15 В. Выше этого значения отклик немного уменьшился, что означает что эффективность электролизного Ru (bpy) 3 3+ снижается, поскольку доминируют конкурентные реакции с участием буфера. Таким образом, оптимальный потенциал составил 1,15 В.

3.2.4. Влияние напряжения разделения

Напряжение разделения одновременно влияло на интенсивность ECL и время миграции.Больше аналита прибыло в диффузионный слой рабочего электрода в течение заданного времени с увеличением напряжения разделения, что привело к более высокому сигналу ECL. Кроме того, увеличение напряжения разделения сокращает время миграции из-за увеличения EOF. Однако неспособность системы удалить избыточное джоулево тепло, генерируемое при высоких напряжениях, привело к уширению пиков и снижению воспроизводимости. Наконец, лучшим выбором для разделения напряжения было 17 кВ.

3.2.5. Влияние напряжения инжекции и времени инжекции

Также изучалось влияние напряжения инжекции и времени инжекции.Результаты показали, что было трудно получить подходящую интенсивность ECL, хотя высокая эффективность колонки могла быть достигнута, когда время инжекции было сокращено, а напряжение инжекции было уменьшено. Кроме того, воспроизводимость ухудшалась, когда вводился чрезмерный объем образца. Наконец, были рекомендованы параметры закачки 10 с при 10 кВ.

3.3. Калибровка и обнаружение

В оптимальных условиях калибровочный график зависимости концентрации сульфата атропина от площади пика ECL был линейным в диапазоне от 0.От 08 до 20 μ г · мл −1 , что было шире, чем полученное на голом платиновом электроде [22]. Уравнение регрессии может быть выражено как: с коэффициентом корреляции 0,9994 (). Предел обнаружения, определяемый как трехкратное превышение S.D. для холостого сигнала реагента было 50 нг · мл -1 .

Точность предложенного метода определялась повторным введением () 5,0 мкг г · мл -1 стандартного раствора сульфата атропина. Относительные стандартные отклонения (Р.S.D.) времени миграции и площадь пика ECL составляли 0,81 и 3,19% соответственно.

3.4. Заявки

Для проверки заявки на клинический анализ предложенным методом были определены уровни сульфата атропина в реальных образцах мочи двух пациентов. Электрофореграмма на фиг. 6 показала, что мочевая кислота, другие матрицы и метаболиты атропина в образцах мочи мало влияют на обнаружение с использованием подготовленного электрода. Как видно на рисунке 6, пик на 267 с был идентифицирован как от сульфата атропина путем добавления стандартов к раствору образца.Количественное восстановление составило 98,6% (), и около 22,4% сульфата атропина было выведено с мочой в неизмененном виде. В процессе измерения всегда обнаруживался другой пик на 375 с, который, по оценкам, был связан с нормальным метаболитом в моче человека. Аналогичным образом был проанализирован другой образец мочи, и было получено извлечение 90,9% (). Результаты приведены в таблице 1.


Образец Найдено (мг · мл -1 ) R.S.D. (%) для площади пика Добавлен (мг · мл -1 ) Извлечен (мг · мл -1 ) Извлечение (%)

1 0,112 1,52 0,100 0,0986 98,6
2 0,0782 2,19 0,100 0,0909 9022 9022 9022 9022 9022 9022 9022 9022 9022 9022 то же, что и в таблице 1.Образец 1 был взят от пациента, который был прооперирован по поводу удаления полипа после ок. 3 ч при введении сульфата атропина; образец 2 был взят от пациента, который был прооперирован по поводу уремии после ок. 8 ч при введении сульфата атропина.
4. Заключение

В этой статье описана связь метода ECL на основе Ru (bpy) 3 2+ с методом CE для определения сульфата атропина. Платиновый электрод, модифицированный Eu-PB, был подготовлен и использован в качестве датчика ECL для замены традиционного неизолированного Pt-электрода, поскольку можно было максимально избежать адсорбции и прямого окисления электроактивных частиц в реальных образцах мочи пациентов на поверхности рабочего электрода.Следовательно, стабильность и воспроизводимость сигналов, линейный диапазон и отношение сигнала ECL к концентрации сульфата атропина были значительно улучшены. Подводя итог, предлагаемый метод показал отличные характеристики в отношении селективности, чувствительности, линейности и стабильности, а также имеет большие перспективы для определения тропановых алкалоидов в жидкостях организма.

Благодарности

Авторы выражают благодарность Natural Foundation (№ 1010RJZA017) провинции Ганьсу и Natural Foundation of the National (№20707039) за поддержку исследования.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
    Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
    браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
    Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Метод определения атропина в фармацевтическом препарате с использованием CE-ECL

[1]
Пол А. Гринвуд, Кэролайн Меррин, Том МакКриди, Джиллиан М. Гринуэй. Хемилюминесценция μTAS для определения атропина и петидина [J].Таланта, 2002 56 539-545.

DOI: 10.1016 / s0039-9140 (01) 00578-1

[2]
Теруфуми Фудзивара, Имдад У Мохаммадзай, Кацуми Мураяма и Такахиро Кумамару.Экстракция растворителем в оперативном режиме связана с системой обнаружения обращенной мицеллярной хемилюминесценции для определения следовых уровней атропина [J]. Анальный. Chem. 2000 72 1715-1719.

DOI: 10.1021 / ac9d

[3]
Ян Пин, Вэй Цзюнь, Ни Чжэнь-Ю, Се Цзянь-Вэй.Одновременное определение метилхлорида пиралоксима, сульфата атропина, гидрохлорида бенактизина в инъекции Jielin методом ионной парной ВЭЖХ [J]. Китайский журнал спектроскопической лаборатории. 2003 20 419-423.

[4]
Ли Цзин, Ван, Эркан.Применение трис (2, 2′-бипиридил) рутения (II) в электрохемилюминесценции [J]. Химическая запись. 2012 12 (1) 177-187.

DOI: 10.1002 / tcr.201100017

[5]
Ин Гао, Юаньхун Сю, Биньян Хан, Цзин Ли, Цянь Сян, Чувствительное определение вертицина и вертицинона в Bulbus Fritillariae с помощью ионной жидкости с помощью системы капиллярного электрофореза – электрохемилюминесценции [J].Таланта 2009 80 448–453.

DOI: 10.1016 / j.talanta.2009.07.012

[6]
Цянь Сян, Хао Ван, Юаньхун Сю, Лян Сунь, Ин Гао.Обнаружение галантамина в Bulbus lycoridis radiatae методом капиллярного электрофореза с электрохемилюминесценцией на конце колонки трис (2, 2′-бипиридил) рутения (II) [J]. Азиатский химический журнал 2011 23 (4) 1553-1556.

[7]
Ханвен Сун, Лицин Ли, Мин Су.Одновременное определение лидокаина, пролина и ломефлоксацина в моче человека методом КЭ с электрохемилюминесцентным детектированием [J]. Хроматография, 2008 67 399–405.

DOI: 10.1365 / s10337-008-0518-5

[8]
Лю Янь-Мин, Цао Цзюнь-Тао, Тянь Вэй, Чжэн Янь-Ли.Определение левофлоксацина и норфлоксацина капиллярным электрофорезом с электрохемилюминесцентным детектированием и аппликациями в моче человека [J]. Электрофорез 2008 29 3207-3212.

DOI: 10.1002 / elps.200800048

[9]
Чжифэн Фу, Линь Ван, Юнхонг Ван.Капиллярный электрофорез — лектрохемилюминесцентное обнаружение N, N-диметилэтаноламина и его применение в профилировании примесей и исследовании стабильности меклофеноксата [J]. Analytica Chimica Acta 2009 638 220–224.

DOI: 10.1016 / j.aca.2009.02.024

Хиральное разделение атропина, гоматропина и восьми синтетических тропиниловых и пиперидиниловых эфиров методом капиллярного зонного электрофореза с добавками циклодекстрина2.1) OctanesElectrophoresis, Capillary

Trending Feeds

COVID-19

Коронавирусы включают большое семейство вирусов, вызывающих простуду, а также более серьезные заболевания, такие как продолжающаяся вспышка коронавирусной болезни 2019 г. (COVID-19). ; официально известна как 2019-nCoV). Коронавирусы могут передаваться от животных человеку; симптомы включают жар, кашель, одышку и затрудненное дыхание; в более тяжелых случаях заражение может привести к летальному исходу.Этот канал охватывает недавние исследования COVID-19.

Бластомикоз

Бластомикоз Грибковые инфекции распространяются при вдыхании спор Blastomyces dermatitidis. Ознакомьтесь с последними исследованиями грибковых инфекций бластомикоза здесь.

Комплекс ядерных пор в ALS / FTD

Изменения в ядерно-цитоплазматическом транспорте, контролируемом комплексом ядерных пор, могут быть вовлечены в патомеханизм, лежащий в основе множественных нейродегенеративных заболеваний, включая боковой амиотрофический склероз и лобно-височную деменцию.Вот последние исследования комплекса ядерных пор при ALS и FTD.

Применение молекулярного штрих-кодирования

Концепция молекулярного штрих-кодирования заключается в том, что каждая исходная молекула ДНК или РНК связана с уникальным штрих-кодом последовательности. Считывания последовательностей с разными штрих-кодами представляют разные исходные молекулы, в то время как считывания последовательностей с одинаковым штрих-кодом являются результатом дублирования ПЦР с одной исходной молекулы. Ознакомьтесь с последними исследованиями в области молекулярного штрих-кодирования здесь.

Синдром хронической усталости

Синдром хронической усталости — заболевание, характеризующееся необъяснимой инвалидизирующей усталостью; патология которого не до конца изучена.Ознакомьтесь с последними исследованиями синдрома хронической усталости здесь.

Развитие плюрипотентности

Плюрипотентность относится к способности клетки развиваться в три первичных слоя зародышевых клеток эмбриона. Этот канал посвящен механизмам, лежащим в основе эволюции плюрипотентности. Вот последнее исследование.

Вариагация эффекта положения

Вариагация эффекта положения Вариагация происходит, когда ген инактивирован из-за его расположения рядом с гетерохроматическими областями в хромосоме.Ознакомьтесь с последними исследованиями вариагации эффекта позиции здесь.

Агонисты рецепторов STING

Стимуляторы генов IFN (STING) представляют собой группу трансмембранных белков, которые участвуют в индукции интерферона I типа, важного для врожденного иммунного ответа. Стимуляция STING была активной областью исследований в лечении рака и инфекционных заболеваний. Вот последние исследования агонистов рецепторов STING.

Микробицид

Микробициды — это продукты, которые можно наносить на поверхности слизистой оболочки влагалища или прямой кишки с целью предотвращения или, по крайней мере, значительного снижения передачи инфекций, передаваемых половым путем.Вот последние исследования микробицидов.

Связанные статьи

Журнал хроматографии. a

F HuiD W Armstrong

Journal of Chromatography. a

W MaruszaH Engelhardt

Журнал хроматографии. a

Bi-Feng LiuYing-Tang Lu

Журнал хроматографии. a

Марианна Филе Жак Кроммен

Журнал хроматографии. a

Y S WuS F Li

Эффективность антидотов (мидазолам, атропин и HI-6) на молекулярные и невропатологические изменения, вызванные нервно-паралитическими агентами | BMC Neuroscience

  • 1.

    Brown MA, Brix KA: Обзор последствий для здоровья воздействия фосфорорганических нервно-паралитических агентов в высоких, средних и низких уровнях. J Appl Toxicol. 1998, 18: 393-408. 10.1002 / (SICI) 1099-1263 (199811/12) 18: 6 <393 :: AID-JAT528> 3.0.CO; 2-0.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 2.

    Sidell FR: Клинические аспекты интоксикации нервно-паралитическими агентами. Боевые отравляющие вещества. Под редакцией: Сомани С.М. 1992, Нью-Йорк: Academic Press, 155–194.

    Google ученый

  • 3.

    Доусон Р.М.: Обзор оксимов, доступных для лечения отравлений нервно-паралитическими агентами. J Appl Toxicol. 1994, 14: 317-331. 10.1002 / jat.2550140502.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 4.

    Данн М.А., Сиделл FR: Прогресс в медицинской защите от нервно-паралитических агентов. J Am Med Assoc. 1989, 262: 649-652. 10.1001 / jama.1989.03430050065028.

    Артикул
    CAS

    Google ученый

  • 5.

    McDonough JH, Shih TM: нейрофармакологические механизмы эпилептических припадков, вызванных нервно-паралитическим агентом, и невропатологии. Neurosci Biobehav Rev.1997, 21: 559-579. 10.1016 / S0149-7634 (96) 00050-4.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 6.

    McDonough JH, Shih TM: Фармакологическая модуляция приступов, вызванных зоманом.Neurosci Biobehav Rev.1993, 17: 203-215. 10.1016 / S0149-7634 (05) 80151-4.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 7.

    Aas P: Будущие аспекты медицинского лечения интоксикации нервно-паралитическим агентом. Prehospital Disaster Med. 2003, 18: 208-216.

    PubMed

    Google ученый

  • 8.

    Морита Х., Янагисава Н., Накадзима Т., Симидзу М., Хирабаяси Х., Окудера Х., Нохара М., Мидорикава Ю., Мимура С.: отравление зарином в Масумото, Япония.Ланцет. 1995, 346: 290-293. 10.1016 / S0140-6736 (95) 92170-2.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 9.

    Нодзаки Х., Айкава Н., Фудзисима С., Сузуки М., Шинозава Ю., Хори С., Ногава С.: Случай отравления VX и отличие от зарина. Ланцет. 1995, 346: 698-699. 10.1016 / S0140-6736 (95) 92306-3.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 10.

    Окумура Т., Такасу Н., Ишимацу С., Мияноки С., Мицухаси А., Кумада К., Танака К., Хинохара С. Отчет о 640 жертвах атаки зарином в токийском метро. Ann Emerg Med. 1996, 28: 129-135. 10.1016 / S0196-0644 (96) 70052-5.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 11.

    Охбу С., Ямасина А., Такасу Н., Ямагути Т., Мурай Т., Накано К., Мацуи Ю., Миками Р., Сакурай К., Хинохара С.: отравление зарином в метро Токио. Саузерн Мед Дж.1997, 90: 587-593. 10.1097 / 00007611-199706000-00002.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 12.

    Lemercier G, Carpentier P, Sentenac-Roumanou H, Moralis P: Гистологические и гистохимические изменения в центральной нервной системе крысы, отравленной необратимым антихолинэстеразным фосфорорганическим соединением. Acta Neuropathol (Кровать). 1983, 61: 123-129. 10.1007 / BF00697391.

    Артикул
    CAS

    Google ученый

  • 13.

    Hayward IJ, Wall HG, Jaax NK, Wade JV, Marlow DD, Nold JB: Уменьшение патологии головного мозга у макак резус, подвергшихся воздействию органофосфатов, после терапии бензодиазепинами. J Neurol Sci. 1990, 98: 99-106. 10.1016 / 0022-510Х (90)

    -П.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 14.

    Кастро К.А., Ларсен Т., Фингер А.В., Солана Р.П., Макмастер С.Б.: Поведенческая эффективность диазепама против воздействия нервно-паралитического агента на макаки-резус. Pharmacol Biochem Behav.1991, 41: 159-164.

    Артикул

    Google ученый

  • 15.

    Philippens IHCHM, Melchers BPC, DeGroot DMG, Wolthius OL: поведенческие характеристики, гистология мозга и последствия ЭЭГ после немедленного комбинированного лечения атропином / диазепамом у отравленных зоманом крыс. Pharmacol Biochem Behav. 1992, 42: 711-719. 10.1016 / 0091-3057 (92)

    -С.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 16.

    Lallement G, Clarencon D, Brouchier G, Baubichon D, Galonnier M, Blanchet G, Mestries J-C: Эффективность атропина / пралидоксима / диазепама или атропина / HI-6 / продиазепама у приматов, отравленных зоманом. Pharmacol Biochem Behav. 1997, 56: 325-332. 10.1016 / S0091-3057 (96) 00292-4.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 17.

    Сольберг Ю., Белкин М. Роль эксайтотоксичности при центральном отравлении фосфорорганическими нервно-паралитическими агентами.Trends Pharmacol Sci. 1997, 18: 183-185. 10.1016 / S0165-6147 (97) 89540-5.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 18.

    Мюрер Т., Андерсен Дж. М., Нгуен Н.Х., Аас П: вызванные Зоманом судороги у крыс, купированных фармакологическими средствами через 45 минут: невропатология и когнитивные способности. Neurotoxicol. 2005, 26: 39-48. 10.1016 / j.neuro.2004.07.011.

    Артикул
    CAS

    Google ученый

  • 19.

    Shih TM, McDonough JH: Судороги, вызванные фосфорорганическими нервно-паралитическими агентами, и эффективность сульфата атропина в качестве противосудорожного лечения. Pharmacol Biochem Behav. 1999, 64: 147-153. 10.1016 / S0091-3057 (99) 00114-8.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 20.

    Ши Т., Дунихо С.М., МакДоноу Дж. Х .: Контроль судорог, вызванных нервно-паралитическим агентом, имеет решающее значение для нейрозащиты и выживания. Toxicol Appl Pharmacol. 2003, 188: 69-80.10.1016 / S0041-008X (03) 00019-X.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 21.

    Sieghart W: Структура и фармакология подтипов рецепторов гамма-аминомасляной кислотыA. Pharmacol Rev.1995, 47: 181-234.

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 22.

    McDonough JH, Van Shura KE, LaMont JC, McMonagle JD, Shih T: Сравнение внутримышечных, интраназальных или сублингвальных способов введения мидазолама для контроля приступов, вызванных зоманом.Basic Clin Pharmacol Toxicol. 2009, 104: 27-34. 10.1111 / j.1742-7843.2008.00326.x.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 23.

    Damodaran TV, Patel AG, Greenfield ST, Dressman HK, Lin SM, Abou-Donia MB: Профили экспрессии генов в головном мозге крысы сразу и через 3 месяца после острого воздействия зарина. Biochem Pharmacol. 2006, 71: 497-520. 10.1016 / j.bcp.2005.10.051.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 24.

    Диллман Дж. Ф., Филлипс С. С., Книффин Д. М., Томпкинс С. П., Гамильтон Т. А., Кан Р. К.: Профиль экспрессии генов гиппокампа крысы после воздействия зомана, ингибитора ацетилхолинэстеразы. Chem Res Toxicol. 2009, 18: 28-34.

    Артикул

    Google ученый

  • 25.

    Pachiappan A, Thwin MM, Manikandan J, Keong LW, Lee FK, Manikandan J, Sivakumar V, Gopalakrishnakone P: ETS2 Регулирующий нейродегенеративный сигнальный путь нейрональных клеток человека (SH-SY5Y), подвергнутых единичному и многократному воздействию низкой -доза зарин (ГБ).Chem Res Toxicol. 2009, 22: 990-996. 10.1021 / tx8003467.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 26.

    RamaRao G, Bhattacharya BK: Множественные изменения путей передачи сигналов во время отравления нервно-паралитическим агентом. Toxicol Lett. 2012, 208: 16-22. 10.1016 / j.toxlet.2011.09.022.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 27.

    Kaufer D, Friedman A, Seidman S, Soreq H: Антихолинэстеразы индуцируют мультигенный ответ транскрипционной обратной связи, подавляя холинергическую нейротрансмиссию.Chem Biol Interact. 1999, 119–120: 349-360.

    Артикул
    PubMed

    Google ученый

  • 28.

    Meshorer E, Soreq H: Достоинства и недостатки альтернативного сплайсинга AChE при невропатологиях, связанных со стрессом. Trend Neurosci. 2006, 29: 216-224. 10.1016 / j.tins.2006.02.005.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 29.

    Thiele TE, Roitman MF, Bernstein IL: индукция C-fos в стволе мозга крысы в ​​ответ на обусловленное этанолом и хлоридом лития обусловленное отвращение вкуса.Alcohol Clin Exp Res. 1996, 20: 1023-1028. 10.1111 / j.1530-0277.1996.tb01941.x.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 30.

    Kaufer D, Friedman A, Seidman S, Soreq H: Острый стресс способствует долгосрочным изменениям в экспрессии холинергических генов. Природа. 1998, 393: 373-377. 10.1038 / 30741.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 31.

    RamaRao G, Bhattacharya BK, Kumar S, Waghmare CK: Экспрессия генов и профиль фосфопротеинов некоторых ключевых нейрональных сигнальных белков после интоксикации зоманом.Toxicol. 2011, 290: 195-202. 10.1016 / j.tox.2011.09.005.

    Артикул
    CAS

    Google ученый

  • 32.

    Милатович Д., Гупта Р.С., Ашнер М.: Токсичность антихолинэстеразы и окислительный стресс. Sci World J. 2006, 6: 295-310.

    Артикул
    CAS

    Google ученый

  • 33.

    Милатович С.З., Гупта Р.К., Ашнер М., Милатович Д.: Защита от окислительного повреждения и нейродегенерации, вызванного DFP, антиоксидантами и антагонистом рецептора NMDA.Toxicol Appl Pharmacol. 2009, 240: 124-131. 10.1016 / j.taap.2009.07.006.

    PubMed Central
    Статья
    PubMed

    Google ученый

  • 34.

    Рикелл Д. Д., Гленн Дж. Ф., Хьюстон МЫ: Медицинская защита от нервно-паралитических агентов: новое направление. Milit Med. 1987, 152: 35-41.

    Google ученый

  • 35.

    Баджгар Дж .: Представьте взгляды на токсикодинамику отравления зоманом. Acta Med (Градец Кралове).1996, 39: 101-5.

    CAS

    Google ученый

  • 36.

    Bajgar J: Отравление фосфорорганическими соединениями / нервно-паралитическими агентами: механизм действия, диагностика, профилактика и лечение. Adv Clin Chem. 2004, 38: 151-216.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 37.

    RamaRao G, Waghmare C, Srivastava N, Bhattacharya BK: региональные изменения экспрессии субъединиц JNK3 и CaMKII-α в мозге крысы после отравления зоманом.Hum Exp Toxicol. 2011, 30 (6): 448-459. 10.1177 / 0960327110386814.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 38.

    Копловиц И., Ментон Р., Мэтьюз К., Шутц М., Ноллс С., Келли С.: Дозозависимые эффекты лечения атропином и HI-6 фосфорорганическими отравлениями у морских свинок. Drug Chem Toxicol. 1995, 18 (2-3): 119-36.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 39.

    Ellman GL, Courtney KD, Andres V, Feather-Stone RM: Новое и быстрое колориметрическое определение активности ацетилхолинэстеразы. Biochem Pharmacol. 1961, 7: 88-95. 10.1016 / 0006-2952 (61) -9.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 40.

    Bradford MM: Быстрый и чувствительный метод количественного определения количества белка в микрограммах, использующий принцип связывания белок-краситель. Анальная биохимия. 1976, 72: 248-254.10.1016 / 0003-2697 (76)

    -3.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 41.

    Schmued LC, Albertson C, Slikker W: Fluoro-Jade: новый флуорохром для чувствительной и надежной гистохимической локализации дегенерации нейронов. Brain Res. 1997, 751: 37-46. 10.1016 / S0006-8993 (96) 01387-Х.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 42.

    McDonough JH, Dochterman LW, Smith CD, Shih TM: Защита от невропатологии, вызванной нервно-паралитическим агентом, но не сердечной патологии, связана с противосудорожным действием лекарственного лечения.Neurotoxicol. 1995, 16: 123-132.

    CAS

    Google ученый

  • 43.

    McDonough JH, McDonough JH, Zoeffel LD, McMonagle J, Copeland TL, Smith CD, Shih T-M: Противосудорожное лечение приступов нервно-паралитического агента: антихолинергические препараты по сравнению с диазепамом у морских свинок, отравленных зоманом. Epilepsy Res. 2000, 38: 1-14.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 44.

    Tellmann G, Olivier G: Light cycler 480 Система ПЦР в реальном времени: инновационные решения для относительной количественной оценки.Biochemica. 2006, 4: 16-18.

    Google ученый

  • 45.

    ДиДжованни К. Внутренний терроризм с применением химических или биологических агентов: психиатрические аспекты. Am J Psychiatry. 1999, 156: 1500-1505.

    Артикул
    PubMed

    Google ученый

  • 46.

    Lallement G, Carpentier P, CoUet A, Baubichon D, Peruot-Marino I, Blanchet G: внеклеточные изменения ацетилхолина в лимбических структурах крыс во время припадков, вызванных зоманом.Neurotoxicol. 1992, 13: 557-568.

    CAS

    Google ученый

  • 47.

    Carpentier P, Lambrinidis M, Blanchet G: Ранние дендритные изменения в пирамидных нейронах гиппокампа (поле CA1) крыс, подвергшихся острой интоксикации зоманом: исследование под световым микроскопом. Brain Res. 1991, 541: 293-299. 10.1016 / 0006-8993 (91) -5.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 48.

    Гупта Р.П., Дамодаран Т.В., Абу-Дония МБ: Индукция мРНК C-Fos в центральной и периферической системе кур, получавших диизопропилфосфорофторидат (DFP). Neurochem Res. 2000, 25: 327-334. 10.1023 / А: 1007580702080.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 49.

    RamaRao G, Acharya J, Bhattacharya BK: Изменения уровня окисления белков, кальпаина и белков цитоскелета (альфа-тубулин и pNF-H) в мозге крысы после воздействия нервно-паралитического агента.Toxicol Lett. 2011, 203: 227-236. 10.1016 / j.toxlet.2011.03.020.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 50.

    Зивин М., Милатович Д., Деттбарн В.Д .: Нитронное соединение, улавливающее спиновый захват, N-трет-бутил-альфа-фенилнитрон предотвращает судороги, вызванные антихолинэстразой. Brain Res. 1999, 11: 6158-6162.

    Google ученый

  • 51.

    Циммер Л.А., Эннис М., Уайли Р.Г., Шипли М.Т .: Судороги, вызванные нервным газом: роль ацетилхолина в быстрой индукции Fos и глиального белка фибрилловой кислоты в грушевидной коре головного мозга.J Neurosci. 1998, 18 (10): 3897-3908.

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 52.

    Лю Дж., Лю М.С., Ван KKW: Кальпаин в ЦНС: от синаптической функции до нейротоксичности. Sci Signal. 2008, 1:14 — 8 апреля

    Google ученый

  • 53.

    Camins A, Verdaguer E, Folch J, Pallas M: Участие активации кальпаина в нейродегенеративных процессах. CNS Drug Rev.2006, 12 (2): 135-148.10.1111 / j.1527-3458.2006.00135.x.

    Артикул
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 54.

    Торрес-Альторо М.И., Матур Б.Н., Дреруп Дж. М., Томас Р., Ловингер Д.М., О’Каллаган Дж. П., Бибб Дж. А. Фосфаты органофосфатов нарушают регуляцию дофаминовой передачи сигналов, глутаматергической нейротрансмиссии и вызывают нейрональные маркеры в полосатом теле. J Neurochem. 2011, 119 (2): 303-313. 10.1111 / j.1471-4159.2011.07428.x.

    PubMed Central
    Статья
    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 55.

    Spradling KD, Lumley LA, Robison CL, Meyerhoff JL, Dillman JF: Транскрипционные ответы чувствительных к нервному агенту областей мозга миндалины, гиппокампа, грушевидной коры, перегородки и таламуса после воздействия зарин с органофосфонат-антихолинэстеразой. J Neuroinflam. 2011, 8 (84): 2-21.

    Google ученый

  • 56.

    Duysen EG, Li B, Xie W, Schopfer LM, Anderson RS, Broomfield CA, Lockridge O: Доказательства неацетилхолинэстеразных мишеней фосфорорганического нервно-паралитического агента: сверхчувствительность мыши с нокаутом ацетилхолинэстеразы к летальности VX.J Pharmacol Exp Ther. 2001, 299: 528-535.

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  • 57.

    Ричардс П., Джонсон М., Рэй Д., Уокер С. Новые белковые мишени для фосфорорганических соединений. Chem Biol Interact. 1999, 119–120. 503–511

    Google ученый

  • Эффект атропина, вызывающий апоптоз, на эпителиальные клетки кизила человека

    · Основные исследования · · Текущий
    Выпуск ·
    · Достигнуть · · Поиск
    Статьи
    · · Подача онлайн · · О IJO ·

    C Итотоксическое действие и возможное
    механизмы действия тетракаина на эпителиальные клетки роговицы человека in vitro

    Синь Панг, Тинг-Цзюнь Фэн

    Ключевая лаборатория
    для инженерии тканей роговицы, Колледж морских наук о жизни, Океан
    Китайский университет, Циндао 266003, провинция Шаньдун,
    Китай

    Для корреспонденции: Ting-Jun
    Поклонник.Ключевая лаборатория инженерии тканей роговицы, Колледж
    Науки о морской жизни, Океанский университет
    Китая, Циндао 266003, провинция Шаньдун, Китай. [email protected]

    Поступило:
    2015-10-02 Принято:
    2015-12-25

    Аннотация

    AIM: Для демонстрации
    цитотоксический эффект и возможные механизмы Тетракаина на роговице человека
    эпителиальные (HCEP) клетки in vitro .

    МЕТОДЫ: In vitro культивировать
    Клетки HCEP обрабатывали гидрохлоридом тетракаина в различных дозах для
    разное время, их морфология, жизнеспособность и плазматическая мембрана
    проницаемость определяли с помощью световой микроскопии, метилтиазолилтетразолий
    (МТТ) анализ и окрашивание акридиновым оранжевым (АО) / бромидом этидия (EB),
    соответственно. Их развитие клеточного цикла, ориентация фосфатидилсерина в
    плазматическая мембрана и потенциал митохондриальной мембраны (MTP) были оценены с помощью
    проточной цитометрии.Фрагментация ДНК, ультраструктура, активация каспаз и
    цитоплазматический фактор, индуцирующий апоптоз (AIF) и цитохром c (Cyt. c) вдоль
    с экспрессией белков семейства B-клеточной лимфомы-2 (Bcl-2).
    гель-электрофорезом, просвечивающим электронным микроскопом, ферментно-связанный
    иммуносорбентный анализ (ELISA) и вестерн-блоттинг соответственно.

    РЕЗУЛЬТАТЫ: После воздействия тетракаина в дозах от 10,0 до 0,3125 г / л,
    клетки HCEP показали дозозависимую и зависящую от времени морфологическую аномалию и
    типичный цитопатический эффект, снижение жизнеспособности и плазма
    повышение проницаемости мембраны.Вызванная тетракаином экстернализация фосфатидилсерина, фрагментация ДНК, фаза G 1
    остановка и ультраструктурные аномалии и формирование апоптотического тела.
    Кроме того, тетракаин в дозе 0,3125 г / л также индуцировал каспазу-3, -9 и
    -8 активация, нарушение MTP, повышающая регуляция цитоплазматического количества Cyt.
    c и AIF, выражения Bax и Bad, а также понижающее регулирование
    выражения Bcl-2 и Bcl-xL.

    ВЫВОД: Тетракаин выше 0.3125 г / л (1/32 клинически применяемого
    дозировка) имеет зависящую от дозы и времени цитотоксичность по отношению к клеткам HCEP in vitro , с индукцией апоптоза клеток через рецептор смерти, опосредованный
    митохондрион-зависимый путь.

    КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Тетракаин; цитотоксичность;
    эпителиальные клетки кизила человека; апоптоз; митохондрия

    DOI: 10.18240 / ijo.2016.0 4.04

    Образец цитирования: Pang X, Fan TJ. Цитотоксическое действие и возможное
    механизмы воздействия тетракаина на эпителиальные клетки роговицы человека in vitro. Int J Ophthalmol 2016; 9 (4): 497-504

    ВВЕДЕНИЕ

    Эпителиальные клетки роговицы человека (HCEP), самый верхний защитный барьер
    роговица с 6-8 слоями клеток, необходима для поддержания роговицы.
    прозрачность и наше видение [ 1] .Как только клетки HCEP были повреждены травмой,
    инфекция и лекарства, возникла дисфункция эпителия роговицы, что привело к
    хроническое воспаление, изъязвления роговицы, отек, помутнение и даже слепота [ 2-4] .

    Местные анестетики, такие как
    Пропаракаин, лидокаин, тетракаин и бупивакаин широко используются в глазной хирургии.
    диагностическая и офтальмологическая хирургия в глазной клинике [5-6] .
    Сообщалось, что некоторые местные анестетики обладают токсическими побочными эффектами на
    эпителиальные клетки роговицы после многократного и длительного использования [ 7-9] .Среди них тетракаин, один из наиболее часто используемых сложноэфирных
    анестетики в офтальмологических операциях из-за быстрого начала
    действие и ткань
    проникновение, было
    сообщалось о побочных эффектах, таких как задержка реэпителизации,
    повреждение мембраны эпителиальных клеток и разрежение микроворсинок в клинических и
    исследования на животных [8-10 ] . Однако
    детальная цитотоксичность тетракаина и его возможные клеточные и молекулярные
    механизмы пока четко не прояснены
    из-за отсутствия in vitro модель [11] .Недавно созданная линия нетрансфицированных клеток HCEP с нормальным фенотипом [ 12] и функциональными потенциалами в конструкции эквивалента роговицы [ 13-14] , делает возможным изучение интенсивно
    цитотоксичность тетракаина и лежащие в ее основе механизмы in vitro . Здесь мы стремились изучить цитотоксичность
    Тетракаин для клеток HCEP и его клеточные и молекулярные цитотоксические механизмы
    с использованием модели in vitro клеток HCEP.

    МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

    Материалы Клетки HCEP из линии клеток HCEP, ранее созданной в нашей
    лаборатория [12] , г.
    поддерживали и культивировали в среде DMEM / F12 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)
    содержащий 10% (об. / об.) плодов крупного рогатого скота
    сыворотка (FBS; Invitrogen) при 37 в 25-см колбах для культур 2
    (Нунк, Уолтем, Массачусетс, США). Тетракаин
    гидрохлорид (C 15 H 25 ClN 2 O 2 ; Cas
    Нет.: 136-47-0; Чистота> 98,0%) был приобретен у Tokyo Chemical
    Промышленность (Токио, Япония). Исходный раствор 20,0 г / л
    Тетракаин готовили с бессывороточной средой DMEM и поэтапно разбавляли до
    концентрации от 10,0 г / л (клиническая доза) до 0,15625 г / л (1/64
    его клиническая применяемая дозировка) растворяется в 10% (об. / об.) среде FBS-DMEM / F12 перед
    использование.

    Опытный образец HCEP
    клетки культивировали до логарифмической фазы и обрабатывали тетракаином.
    при концентрациях от 10.От 0 г / л до
    0,15625 г / л. Для оценки цитотоксичности необходимо изучить морфологию, жизнеспособность и
    прогрессию клеточного цикла проверяли с помощью световой микроскопии, метилтиазолил
    анализ тетразолия (МТТ) и поток
    цитометрия (FCM) с использованием окрашивания йодидом пропидия (PI) соответственно. Для
    проверка апоптоза, проницаемость плазматической мембраны, фосфатидилсерин
    (PS) ориентацию, статус ДНК и ультраструктуру исследовали акридином.
    двойное окрашивание апельсином (АО) / бромидом этидия (EB), FCM с использованием Аннексина-V / PI
    окрашивание, электрофорез ДНК и просвечивающая электронная микроскопия,
    соответственно.Для постулирования сигнального пути апоптоза каспаза
    активация, митохондриальный трансмембранный потенциал (MTP) и митохондриальный высвобождение
    цитоплазматический фактор, индуцирующий апоптоз (AIF) и цитохром c (Cyt. c) вдоль
    с экспрессией белков семейства В-клеточной лимфомы-2 (Bcl-2) исследовали ферментом
    иммуноферментный анализ (ELISA), FCM с использованием 5,5,6,6-тетрахлор-1,1,3,3-тетраэтилбензимида
    (JC-1) окрашивание и вестерн-блоттинг,
    соответственно. Во всех экспериментах клетки HCEP культивировали в одной среде.
    без какого-либо гидрохлорида тетракаина в тот же момент времени использовали в качестве холостого контроля.

    Методы

    Световая микроскопия для наблюдений за ростом и морфологией
    клеток HCEP культивировали в
    24-луночный культуральный планшет (Nunc) в 10% (об. / об.) среде FBS-DMEM / F12 при 37 в инкубаторе с 5% (об. / об.) CO 2 . После того, как клетки выросли в
    логарифмической фазы, питательную среду заменяли соответственно такой же
    среда, содержащая тетракаин в концентрации 10,0-0,15625 г / л. Морфология
    и статус роста клеток контролировали последовательно с помощью
    инвертированный световой микроскоп TS100 (Nikon, Токио, Япония).

    Метилтиазолилтетразолий для анализа жизнеспособности клеток Анализ МТТ клеток HCEP, подвергнутых воздействию гидрохлорида тетракаина, выполняли как
    описано ранее [15] . Вкратце, клетки HCEP в 96-луночном
    планшеты (Nunc) (110 4 клеток на лунку) культивировали и обрабатывали как
    описано выше. Через 2-4 часа добавляли 20 л 1,1 ммоль / л МТТ (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США).
    в среду и инкубировали в течение 4 ч при 37 в темноте.Затем 150 л
    диметилсульфоксида (ДМСО, Sigma-Aldrich) добавляли для растворения формазана
    производится при 37 в темноте для
    15 мин, а оптическую плотность при 490 нм измеряли с помощью микропланшета Multiskan GO.
    читатель (Thermo Scientific, Массачусетс, США).

    Двойное флуоресцентное окрашивание для плазматической мембраны
    анализ проницаемости
    AO / EB двойное окрашивание
    Клетки HCEP, подвергшиеся воздействию
    Тетракаин применяли, как описано ранее [ 15] .Вкратце, клетки HCEP в
    24-луночный культуральный планшет культивировали и обрабатывали, как описано выше. Тогда
    клетки собирали каждые 1-4 часа путем переваривания 2,5 г / л трипсина (1-2 минуты) и
    центрифугирование (200 g, 10мин). После окрашивания раствором АО / ЕВ (100 мг / л АО:
    100 мг / л ЭБ = 1: 1) (Sigma-Aldrich) в течение 1 мин, окрашенные клетки
    наблюдались под флуоресцентным микроскопом Ti-S (Nikon, Токио, Япония). Не менее 400 ячеек были
    засчитывается в каждой группе. Клетки HCEP с красными или оранжевыми ядрами были обозначены как
    апоптотические клетки, в то время как клетки с зелеными ядрами как неапоптотические клетки, и их
    коэффициент апоптоза рассчитывали по формуле: скорость апоптоза
    (%) = апоптотические клетки / (апоптотические клетки + неапоптотические клетки) 100% с как минимум
    Подсчитано по 400 клеток в каждой группе.

    Электрофорез в агарозном геле
    для анализа фрагментации ДНК
    Электрофорез в ДНК-агарозном геле
    Клетки HCEP, подвергшиеся воздействию
    Тетракаин применяли согласно ранее описанному методу [ 16] . Вкратце, HCEP
    клетки в 25-см колбах 2 (Nunc) культивировали, обрабатывали и
    собирают как описано выше. После однократной промывки охлажденным фосфатно-буферным раствором
    физиологический раствор (PBS), геномную ДНК выделяли с помощью Quick Tissue / Culture Cells
    Набор для экстракции геномной ДНК (Dongsheng Biotech, Пекин, Китай).ДНК
    Препарат из каждой группы подвергали электрофорезу в 1% (мас. / об.) агарозном геле (200 мА,
    260 мин), окрашивали 50 мг / л ЭБ в течение 10 минут и наблюдали с помощью EC3 Imaging.
    Система (УВП, Апленд, Калифорния, США).

    Просвечивающая электронная микроскопия для определения ультраструктуры клеток HCEP в 25 см 2 колбах культивировали, обрабатывали 0,3125 г / л тетракаина и собирали, как описано
    выше. После фиксации 40 г / л
    глутаральдегид и 10 г / л тетроксида осмия последовательно, клетки
    обезвоженный и залитый эпоксидной смолой.Ультратонкие срезы окрашивали 20
    г / л уранилацетат-цитрат свинца и наблюдается с помощью пропускающего электрона H700
    микроскоп (ТЕМ, Hitachi, Токио, Япония).

    Анализ проточной цитометрии Ход клеточного цикла, PS
    ориентация и MTP обработанных тетракаином клеток HCEP были
    детектируется и анализируется с помощью FCM, как описано ранее [15] . Вкратце, клетки HCEP в 6-луночных планшетах были
    культивировали, обрабатывали 0,3125 г / л гидрохлорида тетракаина и собирали как
    описано выше.После двукратной промывки 1 мл PBS клетки фиксировали
    70% (об. / Об.) Спирта в течение ночи при 4. Затем клетки окрашивали PI для определения клеточного цикла.
    анализ, окрашенный аннексином V / PI с использованием набора для обнаружения апоптоза аннексина V FITC I
    для анализа ориентации PS и окрашивали 10 г / мл JC-1 для анализа MTP,
    соответственно. Окрашенные клетки выявляли с помощью FACScan FCM (BD Biosciences,
    Сан-Хосе, Калифорния, США).

    ELISA для анализа активации каспаз
    Активация
    каспазы-3, -8 и -9 клеток HCEP, обработанных тетракаином, выполняли, как описано ранее [15] .Вкратце, клетки HCEP в 25 см колбах 2 культивировали, обрабатывали
    0,3125 г / л тетракаина, собирают, как описано выше.
    каждые 2 ч. Экстракты цельноклеточного белка получали лизированием 110 6 клеток в 500 мкл лизиса RIPA.
    буфер (Biotime, Пекин, Китай) и покрытый высокосвязывающим
    96-луночные микротитровальные планшеты (Nunc), 100 мкл на лунку, на 4 сутки. После блокировки 5% (мас. / Об.) Обезжиренным молоком (BD
    Bioscience) лунки инкубировали последовательно с 100 мкл
    кроличьи антитела против каспазы-3/8/9 (активная форма) человека (1: 500) (биосинтез
    Biotechnology, Пекин, Китай) и 100 л козьих антикроликов, меченных HRP.
    вторичное антитело (1: 3000) (cwBiotech, Нанкин, провинция Цзянсу, Китай) при 37 в течение 2 часов.Колориметрическую реакцию вызывали добавлением 100 л
    хромогенный субстрат (0,1 г / л тетраметилбензидин, 100 ммоль / л ацетатный буфер,
    pH 5,6 и 1 ммоль / л перекиси водорода мочевины) в течение 25 мин в темноте при комнатной температуре.
    температура. Развитие окраски было остановлено добавлением 50 л H 2 SO 4 (0,5
    моль / л), и измеряли оптическую плотность каждой лунки при 490 нм, соответственно,
    с помощью микропланшетного ридера Multiskan GO (Thermo Scientific).

    Вестерн-блот анализ
    цитоплазматическое количество AIF и Cyt.c, а экспрессия белков семейства Bcl-2 была
    детектируется вестерн-блоттингом, как описано ранее [17] .
    Вкратце, клетки HCEP в 25 см 2
    колбы культивировали, обрабатывали 0,3125 г / л тетракаина.
    и собраны, как описано
    выше каждые 4 часа. Был приготовлен экстракт цельноклеточного белка.
    как описано выше для анализа экспрессии белков семейства Bcl-2, и
    цитоплазматический экстракт был приготовлен с использованием митохондриального и цитоплазматического белка
    набор для экстракции (Sangon Biological Engineering, Шанхай, Китай) для
    анализ высвобождения митохондрий AIF и Cyt.c. Белковый экстракт из
    одинаковое количество клеток в каждой группе подвергали электрофорезу 10% (мас. / об.) SDS-PAGE,
    и перенесены на мембраны для блоттинга из нитроцеллюлозы с помощью полусухого блоттинга.
    система. После блокирования 5% (об. / Об.) Обезжиренным молоком мембраны инкубировали.
    с кроличьими моноклональными антителами против человеческого IgG к Bad, Bax, Bcl-2, Bcl-xL, AIF,
    Cyt. c и -актин (Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния, США) (все в
    1: 1000 разведение) при 4
    в течение ночи и моноклональные антитела козы против кроличьего IgG, конъюгированные с HRP (1: 5000)
    в течение 2 ч при комнатной температуре соответственно.Наконец, мембраны были погружены
    в хемилюминесцентных реагентах (Пирс, Роркфорд, Иллинойс, США) (0,1 мл / см 2 )
    и визуализируется в рентгеновских пленках. Оптическая плотность каждой полосы была определена количественно.
    с использованием программного обеспечения для анализа ImageJ (NIH, NY, USA) с -актином в качестве внутреннего
    контроль.

    Статистический анализ Каждый эксперимент повторяли 3 раза
    независимо. Все данные были представлены как среднее стандартное отклонение и проанализированы на предмет статистической
    значимость с помощью одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с использованием SPSS для Windows
    версия 17.0 (SPSS, Inc., Чикаго, Иллинойс, США). Отличия от контроля были
    считается статистически значимым, если P <0,05.

    РЕЗУЛЬТАТЫ

    Морфологическое отклонение Для оценки цитотоксичности
    Тетракаин, рост и морфология клеток HCEP были сначала проверены светом.
    микроскопия. Было обнаружено, что клетки HCEP, обработанные 10,0-0,3125 г / л тетракаина
    обнаружена задержка роста и аномальные морфологические изменения,
    такие как вакуолизация цитоплазмы, сжатие клеток, поворот,
    отслоение от культурального матрикса, появление цитопатического эффекта (ЦПЭ) и
    в конце концов смерть.Принимая во внимание, что клетки HCEP, обработанные тетракаином ниже
    концентрация 0,3125 г / л не показала явных морфологических изменений
    по сравнению с контролем (рис. 1).

    Рисунок 1
    Морфологическая аномалия клеток HCEP, обработанных тетракаином
    Культивированные клетки HCEP обрабатывали
    указанная концентрация и время воздействия Тетракаина, а также их рост
    состояние и морфологию контролировали с помощью световой микроскопии. Один представитель
    Была показана фотография из трех независимых экспериментов.c: CPE. Бар: 20 м.

    Снижение жизнеспособности Кому
    проверить цитотоксичность тетракаина, жизнеспособность клеток HCEP была затем
    измеряется анализом МТТ. Результаты показали, что жизнеспособность клеток HCEP, обработанных
    с 10,0-0,15625 г / л тетракаина значительно снизился ( P <0,05 или P <0,01) в зависимости от дозы и времени, в то время как у HCEP клетки, обработанные гидрохлоридом тетракаина ниже концентрации 0.3125 г / л не показали значительных отличий от контроля (рис. 2А).

    Рисунок 2
    Снижение жизнеспособности и замедление клеточного цикла клеток HCEP, обработанных тетракаином
    A: МТТ-анализ. Жизнеспособность клеток
    Обработанные тетракаином клетки HCEP в каждой группе выражали в процентах.
    (среднее SD) поглощения 490 нм по сравнению с соответствующим контролем ( n = 3). B: FCM с иодидом пропидия (PI)
    окрашивание. Остановка фазы G1 клеток HCEP, подвергшихся воздействию 0.3125 г / л тетракаина было
    показано. Количество клеток HCEP в разных фазах клеточного цикла в каждой группе составляло
    выражается в процентах (meanSD) от общего количества ячеек ( n = 3) соответственно. a P <0,05, b P <0,01 по сравнению с контролем.

    Блокировка цикла ячейки Кому
    постулируйте механизмы задержки роста тетракаина, клеточный цикл
    прогрессирование клеток HCEP оценивали с помощью FCM
    анализ с использованием окрашивания PI.Выяснилось, что количество 0,3125 г / л
    Обработанные тетракаином клетки HCEP в G1
    фаза увеличивалась со временем, тогда как в фазах S и G2 / M со временем уменьшалась,
    по сравнению с контрольными (рис. 2В).

    Плазма
    Повышение проницаемости мембраны
    Для определения апоптоза
    индуцируя эффект тетракаина, проницаемость плазматической мембраны клеток HCEP была впервые обнаружена с помощью AO / EB
    двойное флуоресцентное окрашивание. Результаты показали, что плазматическая мембрана
    проницаемость HCEP, обработанного тетракаином
    количество клеток увеличивалось с дозой и временем ( P <0.05 или P <0,01), тогда как у клеток HCEP, обработанных тетракаином, ниже концентрация 0,3125 г / л не показала существенных отличий от концентрации контролирует. Апоптотическое соотношение клеток HCEP показано на рисунке 3А.

    Рисунок 3 Проницаемость плазменной мембраны
    возвышение и экстернализация PS
    Обработанные тетракаином клетки HCEP
    A: AO / EB
    двойное флуоресцентное окрашивание. Апоптотический
    соотношение рассчитывали как процент (среднее SD) от общего количества клеток.
    на основании повышения проницаемости плазматической мембраны клеток HCEP ( n = 3).B: FCM с аннексином V / пропидием
    окрашивание йодидом (PI). Количество аннексин-V-положительных (PS-экстернализованных) HCEP
    клетки, подвергшиеся воздействию 0,3125 г / л тетракаина в каждой группе, выражали как
    процент (среднее значение SD) от общего количества ячеек ( n = 3). а P < 0,05,
    b P < 0,01 по сравнению с контролем.

    Экстернализация фосфатидилсерина Кому
    подтвердить индуцирующий апоптоз эффект Тетракаина, ориентацию PS в плазматической мембране
    Затем клетки HCEP исследовали с помощью анализа FCM, используя окрашивание аннексином V / PI.Это было
    обнаружили, что клетки HCEP, обработанные 0,3125 г / л тетракаина, проявляли
    значительное увеличение экстернализации PS и количества положительных по аннексину V
    клетки (внешние клетки PS) увеличивались со временем ( P <0,01) по сравнению с контрольными клетками (рис. 3B).

    Фрагментация ДНК Для проверки индуцирующего апоптоз эффекта Тетракаина геномная ДНК клеток HCEP также была
    проверено электрофорезом в агарозном геле. Результаты показали, что геномная
    ДНК, экстрагированная из клеток HCEP, обработанных 2-28 ч 10.0-0,15625 г / л тетракаина
    был поврежден до сильно фрагментированного состояния, и появились типичные лестницы ДНК, в то время как
    не было обнаружено фрагментации ДНК в клетках HCEP, обработанных Тетракаином ниже
    концентрация 0,3125 г / л даже в течение 28 часов, что было аналогично контролю (рис.
    4А).

    Рисунок 4 ДНК
    фрагментация и ультраструктурная аномалия клеток HCEP
    A: электрофорез в 1% агарозном геле
    ДНК. Показаны дозировка и время воздействия Тетракаина.
    вверху и внизу каждой полосы соответственно.Показаны распределенные лестницы ДНК.
    Маркер, ДНК-маркер D2000. B: фотографии ТЕА. Дозировка и выдержка
    Время приема тетракаина указано в верхней части каждой фотографии. chn: сжатый
    хроматин; м: Митохондрия; mv: Microvillus; N: ядро;
    v: Vacuoles; апо: апоптотическое тело. Штанга: 1 м.

    Ультраструктурная аномалия Для подтверждения
    Эффект индуцирования апоптоза тетракаином, ультраструктура клеток HCEP была дополнительно исследована с помощью ТЕМ.Результаты показали, что клетки HCEP, обработанные 0,3125 г / л тетракаина в течение 4 часов, показали
    ранние апоптотические ультраструктурные изменения, такие как структурные
    дезорганизация, вакуолизация цитоплазмы и набухание митохондрий. Те
    после лечения в течение 8 часов наблюдались апоптотические ультраструктурные изменения на средней стадии
    включая расширенное набухание митохондрий, конденсацию хроматина и
    внутриядерный край и несколько апоптотических образований тельца. Те, кого лечили
    в течение 12 часов наблюдались поздние стадии апоптозоподобных ультраструктурных изменений, таких как распад клеток и большое количество апоптотических тел
    формирование (Рисунок 4B).

    Активация каспазы К
    постулировали триггерные пути апоптоза, индуцированного тетракаином,
    активацию каспазы-3, -8 и -9 клеток HCEP определяли с помощью ELISA с использованием
    антитела против их активных форм. Результаты показали, что каспаза-8 в
    0,3125 г / л обработанных тетракаином клеток HCEP активировали до пикового значения через 6 часов ( P <0,05), каспаза-9 в клетках была активирована. активируется до максимального значения через 8 часов ( P <0,01), и каспаза-3 в клетках постоянно активировалась в течение периода наблюдения. 12 часов ( P <0.01) (Рисунок 5A).

    Рисунок 5 Активация каспазы и MTP
    разрушение 0,3125 г / л
    Клетки HCEP, обработанные тетракаином
    A: ELISA с использованием моноклональных антител к
    активные формы каспазы-3, -8 и
    -9. Коэффициент активации каспаз в каждой группе выражали в процентах.
    (среднее SD) по сравнению с соответствующим контролем на основе поглощения 490 нм ( n = 3). B: FCM с окрашиванием JC-1. Сотовый
    количество JC-1-положительных (разрушенных MTP) клеток HCEP в каждой группе было экспрессировано
    в процентах (meanSD) от общего количества ячеек ( n = 3). а P < 0,05,
    b P < 0,01 по сравнению с контролем.

    Потенциальное нарушение митохондриальной мембраны Для проверки причастности
    митохондрион-зависимого пути апоптоза, индуцированного тетракаином, MTP HCEP
    клетки анализировали с помощью FCM с использованием JC-1
    окрашивание. Результаты показали, что MTP
    клеток HCEP, обработанных 0,3125 г / л тетракаина, было значительно разрушено
    с течением времени.Количество мономерных JC-1 положительных клеток
    увеличилось с 1,73% 0,53% от
    контроль до 67,63% 3,75% через 4 часа
    и 78,61% 4,24% при
    8h соответственно (Рисунок 5B).

    Количественные изменения белков, запускающих апоптоз Чтобы подтвердить, что митохондрион-зависимый путь участвует в апоптозе, индуцированном тетракаином, цитоплазматическое количество
    AIF и Cyt. c, и экспрессия белков семейства Bcl-2 в HCEP
    клетки были дополнительно обнаружены Вестерн
    пятно. Было обнаружено, что уровень экспрессии Bax и Bad был
    с повышением, то Bcl-2 и Bcl-xL с пониженной регуляцией, а количество
    цитоплазматический AIF и Cyt.c был активирован в клетках HCEP после воздействия
    0,3125 г / л тетракаина в течение 4 и 8 часов соответственно (рис. 6).

    Фигура 6 Вестерн-блоттинг белков, запускающих апоптоз, в клетках HCEP, обработанных тетракаином 0,3125 г / л A: Вестерн-блоттинг
    изображений. Цитоплазматический Cyt. c и AIF, а паттерн экспрессии Bcl-2
    белки семейства в клетках HCEP. B: Денситометрический анализ. В
    относительный уровень количества белка выражали как процент (среднее стандартное отклонение) от
    плотность полосы белка по сравнению с внутренним контролем -актина ( n = 3). a P <0,05, b P <0,01 против контроля.

    ОБСУЖДЕНИЕ

    Сообщается, что тетракаин токсичен для роговицы кроликов.
    эпителиальные клетки in vivo [ 7-8] . Однако цитотоксичность и лежащие в ее основе механизмы тетракаина
    до сих пор не очень хорошо изучены. Здесь мы исследовали цитотоксичность
    Тетракаин и его механизмы индукции апоптоза впервые с использованием модели in vitro нетрансфицированных клеток HCEP.

    Для оценки цитотоксичности тетракаина, морфологии, жизнеспособности,
    и развитие клеточного цикла клеток HCEP изучали с помощью световой микроскопии, МТТ.
    пробирный и FCM
    с использованием окраски ИП соответственно. Наш
    результаты показали, что тетракаин в концентрациях выше 0,3125 г / л (1/32 его
    клинически применяемая доза) может вызвать задержку роста, подобную апоптозу
    морфологические изменения с CPE, снижением жизнеспособности и остановкой фазы G1 HCEP
    клетки в зависимости от времени и / или дозы.Все это указывает на то, что
    Тетракаин имеет зависящую от дозы и времени цитотоксичность по отношению к клеткам HCEP in vitro , что подтверждается
    предыдущие сообщения о цитотоксических эффектах пропаракаина, оксибупрокаина и лидокаина [15, 18-20] . Как сообщается, клетки, задержанные в фазе G1, навсегда перейдут в стареющие клетки.
    состояние, которое может вызвать апоптоз
    если бы они не смогли пройти
    КПП G1 / S [21] .Следовательно, остановка клеточного цикла в сочетании с морфологическими изменениями
    и снижение жизнеспособности, означают, что тетракаин может вызывать апоптоз
    влияние на клетки HCEP in vitro .

    Как известно, плазматическая мембрана
    повышение проницаемости, экстернализация PS, фрагментация ДНК (также известная как
    Лестница ДНК) и формирование апоптотического тела являются отличительными чертами апоптотического
    гибель клеток [ 2 2-24] .Чтобы проверить индуцирующий апоптоз эффект Тетракаина, плазматическая мембрана
    проницаемость, ориентация ПС, целостность ДНК и ультраструктура
    Обработанные тетракаином клетки HCEP затем детектировали окрашиванием AO / EB, FCM с использованием
    Окрашивание аннексином-V / PI, электрофорез в агарозном геле и ТЕМ соответственно. Наш
    результаты показали, что тетракаин в концентрациях выше 0,3125 г / л может
    вызывают повышение проницаемости плазматической мембраны и фрагментацию
    геномная ДНК клеток HCEP в зависимости от дозы и времени. Между тем,
    0.3125 г / л тетракаина также может вызывать экстернализацию PS и типичный
    апоптотические ультраструктурные изменения, такие как структурная дезорганизация,
    конденсация хроматина и образование апоптотических тел клеток HCEP. Все эти
    указывают на то, что Тетракаин оказывает индуцирующее апоптоз действие на клетки HCEP in vitro . Эффект, вызывающий апоптоз
    Тетракаина также были поддержаны нашими предыдущими отчетами о
    индуцирующие апоптоз эффекты оксибупрокаина, лидокаина и пропаракаина [ 15,18-20] .

    Как правило, апоптоз запускается двумя основными путями: рецептор смерти.
    опосредованный внешний путь и внутренний митохондрион-зависимый путь [ 25] , оба из которых связаны
    на активацию различных инициаторных каспаз [26] . Кому
    постулируют возможные пути, участвующие в апоптозе, индуцированном тетракаином,
    активация каспазы-3 / -8 / -9 HCEP
    клетки характеризовали методом ELISA
    с использованием моноклональных антител против активной формы каспазы-3 / -8 / -9.Мы обнаружили, что тетракаин может активировать
    каспаза-8, -9 и -3 соответственно. Как хорошо выяснено, активация каспазы-8
    опосредуется рецептором смерти Fas / CD95, а активация каспазы-9 происходит
    при посредничестве Cyt. c высвобождается из митохондрии, что запускается
    нарушение работы MTP [26] . Наши результаты активации обоих
    каспаза-8 и -9 предполагают, что апоптоз, индуцированный тетракаином, наиболее вероятно
    опосредовано как путем рецептора смерти, так и путем митохондрий.К
    проверить участие митохондрии
    при апоптозе, индуцированном тетракаином, мы затем исследовали нарушение
    MTP с помощью FCM с использованием окрашивания JC-1,
    и обнаружили, что тетракаин может вызывать
    Нарушение MTP клеток HCEP. Как известно в митохондрион-зависимом пути,
    нарушение MTP — это
    предпосылка для запуска митохондриального высвобождения Cyt. c (требуется для
    активация каспазы-9) и AIF (требуется для каспазонезависимой начальной
    конденсация хроматина и крупномасштабная фрагментация ДНК) [26-27] .Наши результаты показывают, что апоптоз, индуцированный тетракаином, запускается
    митохондрион-зависимый путь. Чтобы проверить митохондриальное высвобождение Cyt. C и AIF, мы наконец изучили
    цитоплазматическое количество AIF и Cyt. c вместе с уровнем экспрессии Bcl-2
    семейство белков методом вестерн-блоттинга. Мы обнаружили, что тетракаин может активировать
    цитоплазматическое количество AIF и Cyt. c, повышают уровень экспрессии Bax
    и Bad, и подавляют уровень экспрессии Bcl-2 и Bcl-xL.Также
    продемонстрировано в белках семейства Bcl-2, антиапоптотическая функция Bcl-2 и Bcl-xL
    как привратник митохондрий для предотвращения высвобождения Cyt. c и AIF, а
    проапоптотические Bax и Bad взаимодействуют с проницаемостью митохондрий
    переходная пора, чтобы вызвать разрушение MTP и высвобождение Cyt. c и AIF из
    митохондрии в цитоплазму [28-29] . Наши результаты
    повышающая регуляция Cyt. c и AIF,
    в сочетании с разрушением MTP и активацией каспазы-9 указывает на то, что индуцированный тетракаином апоптоз
    клеток HCEP регулируется митохондриально-зависимым путем.Этот вывод
    подтверждается нашими предыдущими отчетами об апоптозе, вызванном местными
    анестетики [15,18-20] .

    Нашим
    знаний, это первая попытка изучения цитотоксичности тетракаина.
    к клеткам HCEP и его цитотоксическим механизмам на клеточном и молекулярном уровнях in vitro . Даже эти выводы
    особенно важно при выборе оптимального местного анестетика.
    в клинических ситуациях они не позволяют нам предсказать клинические выводы
    непосредственно без дополнительных исследований в
    vivo
    .

    Тетракаин в концентрациях выше 0,3125 г / л (1/32 его клинической
    примененная доза) имеет зависящую от дозы и времени цитотоксичность по отношению к клеткам HCEP в
    vitro
    , который реализуется путем индукции апоптоза в этих клетках через митохондриально-зависимый путь, опосредованный рецептором смерти. Наш
    находки позволяют по-новому взглянуть на неотъемлемую часть цитотоксичности и
    индуцирующий апоптоз эффект Тетракаина на клетки HCEP.

    БЛАГОДАРНОСТИ

    Мы благодарим г.Мин-Чжуан Чжу из ключевой лаборатории марикультуры за его
    руководство и поддержка во время анализа проточной цитометрии.

    Фонд: При поддержке National
    Программа исследований и разработок в области высоких технологий (программа 863) Китая
    (№ 2006AA02A132).

    Конфликты интересов: Pang
    X
    , нет; Вентилятор TJ , Нет.


    ЛИТЕРАТУРА [Вверх]

    1
    Судзуки К., Сайто Дж., Янаи Р., Ямада Н., Чикама Т., Секи К., Нисида Т.Клеточная матрица
    и межклеточные взаимодействия во время заживления эпителиальных ран роговицы. Prog Retin Eye Res 2003; 22 (2): 113-133. [CrossRef]

    2
    Киношита С., Адачи В., Сотодзоно К., Нисида К., Ёкои Н., Куанток А.Дж., Окубо К.
    Характеристики эпителия глазной поверхности человека. Prog Retin Eye Res 2001; 20 (5): 639-673. [CrossRef]

    3
    Дарт Дж. Роговичная токсичность: эпителий и строма в ятрогенных и
    искусственное заболевание. Глаз (Лондон) 2003; 17 (8): 886-892.[CrossRef]

    4
    Патель М., Фраунфельдер Ф.В. Токсичность местных офтальмологических анестетиков. Мнение эксперта по наркотикам Metab Toxicol
    2013; 9 (8): 983-988. [CrossRef]
    [PubMed]

    5
    Verma S, Corbett MC, Patmore A, Heacock G, Marshall J. Сравнительное исследование
    продолжительность и эффективность тетракаина 1% и бупивакаина 0,75% в контроле
    боль после фоторефрактивной кератэктомии (ФРК). Eur J Ophthalmol 1997; 7 (4): 327-333. [PubMed]

    6
    Джексон Т., МакЛюр Х.Фармакология местных анестетиков. Ophthalmol Clin North Am 2006; 19 (2): 155-161. [PubMed]

    7
    Грант Р.Л., Акоста Д. Сравнительная токсичность тетреакаина, пропаракаина и
    кокаин оценивали с использованием первичных культур эпителиальных клеток роговицы кролика. Exp Eye Res 1994; 58 (4): 469-478. [CrossRef] [PubMed]

    8
    Болика М., Колар Г., Виденсек Дж. Токсические побочные эффекты местных анестетиков на
    роговица человека. Br J Офтальмол
    1994; 78 (5): 386-389.[CrossRef]

    9
    Таппейнер С, Флюкигер Ф, Бёнке М, Гольдблюм Д, Гарвег Дж. Эффект актуального
    анестетики и этанол при заживлении корнеоэпителиальных ран ex vivo
    модель свиньи на весь земной шар. J Катаракта
    Refract Surg
    2012; 38 (3): 519-524. [CrossRef] [PubMed]

    10
    Грант Р.Л., Акоста Д. мл. Исследование оцифрованной флуоресцентной визуализации эффектов
    местные анестетики на цитозольный кальций и потенциал митохондриальной мембраны в
    культивированные эпителиальные клетки роговицы кролика. Toxicol
    Appl Pharmacol
    1994; 129 (1): 23-35. [CrossRef] [PubMed]

    11
    Кастро-Муньозледо Ф. Культуры эпителиальных клеток роговицы как инструмент исследования,
    скрининг и тестирование на наркотики. Exp Eye Res 2008; 86 (3): 459-469.
    [CrossRef] [PubMed]

    12
    Fan TJ, Xu B, Zhao J, Yang HS, Wang RX, Hu XZ. Создание
    нетрансфицированная линия эпителиальных клеток роговицы человека и ее биосовместимость с
    обнаженная амниотическая оболочка. Инт Дж
    Офтальмол
    2011; 4 (3): 228-234.[Бесплатная статья PMC]
    [PubMed]

    13
    Сюй Б, Фань Т.Дж., Ян Х.С., Сунь А, Чжао Дж., Ма XY, Ху XZ. In vitro Реконструкция и характеристика тканевой инженерии
    эпителий роговицы человека с посевными клетками нетрансфицированной роговицы человека
    линия эпителиальных клеток. Int J Офтальмол
    2012; 5 (3): 281-285. [Бесплатная статья PMC]
    [PubMed]

    14
    Сюй Б, Фан ТДЖ, Чжао Дж, Сунь А, Ван RX, Ху XZ, Ю ХЗ, Фан XY, Сюй XH.
    Трансплантация тканеинженерного эпителия роговицы человека в лимбальный ствол
    модели кроликов с клеточной недостаточностью. Инт Дж
    Офтальмол
    2012; 5 (4): 424-429. [Бесплатная статья PMC]
    [PubMed]

    15
    Wen Q, Fan T, Bai S, Sui Y. Цитотоксичность пропаракаина для роговицы человека
    эндотелиальные клетки in vitro . J Toxicol Sci 2015; 40 (4): 427-436. [CrossRef] [PubMed]

    16
    Ли С.В., Бахаман АР. Модифицированный гелевый препарат для анализа отдельных фрагментов ДНК
    в электрофорезе в агарозном геле. Троп
    Биомед
    2010; 27 (2): 351-354. [PubMed]

    17
    Тиан Ц.Л., Вэнь Ц., Фан ТДж.Цитотоксичность атропина для эпителия роговицы человека
    клетки, вызывая остановку клеточного цикла и митохондриально-зависимый апоптоз. Exp Toxicol Pathol 2015; 67 (10): 517-524.
    [CrossRef] [PubMed]

    18 Fan TJ, Wen Q, Yu MM, Ge Y, Miao Y,
    Ван ДП. Экспериментальные исследования влияния оксибупрокаина гидрохлорида на
    эндотелиальные клетки роговицы человека. Guoji
    Янке Зажи
    (Int Eye Sci) 2012; 12 (8): 1442-1446.

    19
    Ю ХЗ, Ли ЙХ, Ван RX, Чжоу Х, Ю ММ, Гэ Й, Чжао Дж, Фань ТДж.Цитотоксичность
    лидокаин к эндотелиальным клеткам роговицы человека in vitro . Basic Clin
    Pharmacol Toxicol
    2014; 114 (4): 352-359. [CrossRef] [PubMed]

    20
    Чжоу X, Ли YH, Yu HZ, Wang RX, Fan TJ. Местный анестетик лидокаин вызывает
    апоптоз стромальных клеток роговицы человека в
    витро
    . Int J Офтальмол
    2013; 6 (6): 766-771. [Бесплатная статья PMC]
    [PubMed]

    21
    Сяо XY, Хао M, Ян XY, Ba Q, Li M, Ni SJ, Wang LS, Du X.Ликохалкон А
    подавляет рост клеток рака желудка, останавливая развитие клеточного цикла и
    индуцирование апоптоза. Cancer Lett
    2011; 302 (1): 69-75. [CrossRef]
    [PubMed]

    22
    Dallaporta B, Marchetti P, de Pablo MA, Maisse C, Duc HT, Mtivier D, Zamzami
    N, Geuskens M, Kroemer G. Потенциал плазматической мембраны в апоптозе тимоцитов. J Immunol 1999; 162 (11): 6534-6542. [PubMed]

    23
    Vermes I, Haanen C, Steffens-Nakken H, Reutelingsperger C.Новый тест для
    апоптоз. Проточная цитометрия обнаружения экспрессии фосфатидилсерина на ранних стадиях
    апоптозные клетки с использованием меченного флуоресцеином аннексина V. J. Immunol. Methods 1995; 184 (1): 39-51. [CrossRef]

    24
    Такемура Г., Като С., Аояма Т., Хаякава Ю., Канох М., Маруяма Р., Араи М.,
    Нишигаки К., Минатогути С., Фукуда К., Фудзивара Т., Фудзивара Х. Характеристика
    ультраструктуры и ее связь с фрагментацией ДНК в Fas-индуцированном
    апоптоз культивированных сердечных миоцитов. Дж
    Патол
    2001; 193 (4): 546-556. [CrossRef]

    25
    Джин З., Эль-Дейри В.С. Обзор сигнальных путей клеточной смерти. Cancer Biol Ther 2005; 4 (2): 139-163. [CrossRef] [PubMed]

    26
    Fan TJ, Han LH, Cong RS, Liang J. Протеазы семейства Каспаз и апоптоз. Acta Biochim Biophys Sin (Шанхай)
    2005; 37 (11): 719-727. [CrossRef]

    27 L CX, Fan TJ, Hu GB, Cong RS.
    Фактор апоптоза и апоптоз. Шэн
    У Хуа Сюэ Ю Шэн У Ву Ли Сюэ Бао (Шанхай)
    2003; 35 (10): 881-885.

    28 Fu YF, Fan TJ. Белки семейства Bcl-2
    и апоптоз. Шэн У Хуа Сюэ Ю Шэн
    У Ву Ли Сюэ Бао (Шанхай)
    2002; 34 (4): 389-394.

    29
    Chen Q, Lesnefsky EJ. Сохраняет блокаду транспорта электронов при ишемии.
    bcl-2 и ингибирует открытие митохондриальной переходной поры проницаемости. FEBS lett 2011; 585 (6): 921-926. [CrossRef] [PubMed] [Бесплатная статья PMC]
    [Вверх]

    Полный обзор ценных тропановых алкалоидов: скополамина, атропина и гиосциамина

    1.Кукула-Кох В.А. и Видельски. J. Алкалоиды. В: Симоне Бадал и Рупика Дельгода, фармакогнозия: основы, приложения и стратегии. Академическая пресса. 2017, стр: 163-98. [DOI: 10.1016 / B978-0-12-802104-0.00009-3]

    2. Дьюик П.М. Лекарственные натуральные продукты. Биосинтетический подход. 3-е изд. Атриум, Великобритания: John Wiley & Sons Ltd. 2009, стр: 311-481.

    3. Анишевский Т. Алкалоидсекреты жизни. Химия алкалоидов, биологическое значение, приложения и экологическая роль, т.56, 710. Нидерланды: Elsevier B.V. 2007, стр: 182-9.

    4. Лоунасмаа М., Тамминен Т. Тропановые алкалоиды. В: Cordell GA. (ред.). Алкалоиды. Академический, Нью-Йорк. 1993, 44, стр: 1-114. [DOI: 10.1016 / S0099-9598 (08) 60143-1] 5. О’Лири М.Э., Хэнкокс Дж. Роль потенциалзависимых натриевых, калиевых и кальциевых каналов в развитии кокаин-ассоциированных сердечных аритмий. Br. J. Clin Pharmacology. 2010; 69 (5): 427-42. [DOI: 10.1111 / j.1365-2125.2010.03629.x] 6. Кейл М. Тонкие химические вещества из растений.В: Oksman-Caldentey KM, Barz WH (eds) Plant Biotechnology and Transgenic Plants, Marcel Dekker, Inc., NY. 2002, стр: 347-72. [DOI: 10.1201 / 9780203

    9.ch25]

    7. Chevallier, MA. Энциклопедия лекарственных растений; Дорлинг по-доброму. 1996, pp: 336.

    8. Brown JH., Taylor P. Агонисты и антагонисты мускариновых рецепторов. В: Hardman, J.G., et al. (Ред.), Фармакологические основы терапии. Макгроу-Хилл, Нью-Йорк. 1996, стр: 141-60.

    9. Китагава И., Исидзу Т., Охаши К., Сибуя Х.Хиральность натуральных продуктов: гиосциамин и скополамин. Yakugaku Zasshi. 2000; 120: 1017-23. [DOI: 10.1248 / yakushi1947.120.10_1017]

    10. Будавари С., Виндхольц М. Hyoscamine. В: Индекс Мерк: Энциклопедия химикатов, лекарств и биологических препаратов, 12-е изд. Merck. 1996, стр: 148-9.

    11. О’Нил MJ. Индекс Мерк — энциклопедия химикатов, лекарств и биологических препаратов. Уайтхаус, Нью-Джерси: Merck and Co., Inc., 2006, стр. 1450.

    12. Lide DR. Справочник по химии и физике.CRC Press, Тейлор и Фрэнсис, Бока-Ратон, Флорида. 2007, стр. 3-458.

    13. Будавари С., Виндхольц М. Атропин. В указателе Merck: Энциклопедия химикатов, лекарств и биологических препаратов, 12-е изд. Merck. 1996, стр: 148-9.

    14. Индекс Мерк. 9 изд. Рэуэй, Нью-Джерси: Merck & Co., Inc., 1976, стр. 647.

    15. Lide, DR. Справочник по химии и физике. 81-е издание. CRC Press LLC, Бока-Ратон: Флорида. 2000, стр: 3-27.

    16. Weast RC. Справочник по химии и физике.60-е изд. Бока-Ратон, Флорида: CRC Press Inc., 1979, стр: C-346.

    17. Саншайн I. Справочник по аналитической токсикологии. Кливленд: The Chemical Rubber Co., 1969, стр: C-13.

    18. Trissel LA. Справочник по инъекционным наркотикам. 9 изд. Bethesda, MD. Американское общество разработки продуктов фармацевтов систем здравоохранения. 1996, p: 109.

    19. Lewis RJ. Опасные свойства промышленных материалов Сакса. 9 изд. Тома 1-3. Нью-Йорк, Нью-Йорк: Ван Ностранд Рейнхольд. 1996, стр: 289.

    20.Парфитт К. Мартиндейл: Полный справочник лекарств, 32-е изд. Фармацевтическая пресса, Лондон, 1999 г., стр. 455-7.

    21. Dei S, Bartolini A, Bellucci C, Ghelardini C, Gualtieri F, Manetti D, Romanelli MN. Scapecchi S, Teorodi E. Дифференциальная анальгетическая активность энантиомеров производных атропина не коррелирует с их селективностью к мускариновому подтипу. Евро. J. Med. Chem. 1997; 32: 595-605. [DOI: 10.1016 / S0223-5234 (97) 83285-0]

    22. Osol, A. (ed.). Remington’s Pharmaceutical Sciences.16-е изд. Истон, Пенсильвания: Mack Publishing Co., 1980, стр. 856.

    23. Гриффин В.Дж., Лин Г.Д. Хемотаксономия и географическое распространение тропановых алкалоидов. Фитохим. 2000; 53: 623-37. [DOI: 10.1016 / S0031-9422 (99) 00475-6]

    24. Горбанпур М., Салехи Арджманд Х., Хатами М., Хоссейни Н. Оценка морфологической изменчивости и изменчивости тропановых алкалоидов в некоторых популяциях Hyosscyamus niger L. JMP. 2018; 17 (2): 105-24.

    25. Эль Базауи А., Беллимам М.А., Сулеймани А. Девять новых тропановых алкалоидов из Datura stramonium L.идентифицировано ГХ / МС. Фитотерапия. 2011; 193-7. DOI: 10.1016 / j.fitote.2010.09.010. [DOI: 10.1016 / j.fitote.2010.09.010] 26. Ионкова И., Витте Л., Альферманн HA. Спектр тропановых алкалоидов в трансформированных корнях Datura quercifolia и Hyoscyamus gyorffyi, культивируемых in vitro. Planta Med. 1994; 60: 382-4. [DOI: 10.1055 / s-2006-959509] 27. Витале А.А., Арчер А., Помилио А.Б. Алкалоиды Datura ferox из Аргентины. J. Ethnopharmacol. 1995; 49: 81-9. [DOI: 10.1016 / 0378-8741 (95)

    -7] 28. Эванс В.К., Соманабандху, А.Алкалоиды дурмана обесцвечивают. Фитохим. 1974; 13: 304-305. [DOI: 10.1016 / S0031-9422 (00) -3] 29. Эванс В. К. и Веллендорф М. Алкалоиды корней дурмана. J. Chem. Soc., 1959; 0: 1406-9. [DOI: 10.1039 / jr95

    406] 30. Страхил Берков, Равиа Заид, Цветелина Дончева. Алкалоидные узоры у некоторых разновидностей Datura kymatocarpa. Фитотерапия 2006; 77: 179-82. [DOI: 10.1016 / j.fitote.2006.01.002] 31. Эванс В.К. и Майор В.А. Алкалоиды рода Datura. Часть V. Алкалоиды Datura sanguinea R.и П. и родственные эфиры тропана-3a. J. Chem. Соц (С). 1968; 22: 2775-8. [DOI: 10.1039 / J39680002775] 32. Кариньо-Бетанкур А., Агравал А.А., Халичке Р., Нуньес-Фарфан Дж. Филогенетические корреляции между химической и физической защитой растений меняются с онтогенезом. Новый Фитол. 2014; 206: 796-806. [DOI: 10.1111 / nph.13300]

    33. Рэтч К. Энциклопедия психоактивных растений: этнофармакология и ее приложения. Park Street Press, Рочестер, США. 1998.

    34. Пока Р., Мата Р., Пиментел Дж.Ботаника, этноботаника и химия Datura lanosa (Solanaceae) в Мексике. Аналес дель Института биологии национального автономного университета Мексики, Ботаническая серия, 1991 год; 61: 21-42.

    35. Lindequist UDatura. В: Hagers handbuch der Pharmazeuti-schen Praxis, 5-е изд. Спрингер, Берлин. 1992, стр: 1138-54.

    36. Парр Дж., Пейн Дж., Иглз Дж., Чампан Б.Т., Робинс Р.Дж., Родос, MJC. Изменения в накоплении тропановых алкалоидов в пасленовых и стратегии их использования. Фитохим.1990; 29: 2545-50. [DOI: 10.1016 / 0031-9422 (90) 85185-I] 37. Саманани Н., Факкини П. Дж. Компартментализация вторичного метаболизма растений. Последние достижения в фитохимии. 2006; 40: 53-83. [DOI: 10.1016 / S0079-9920 (06) 80037-7] 38. Zhang L. Ding, R, Chai Y, Bonfill M, Moyano E, Oksman-Kaldenty KM, Xu T, Pi Y, Wang Z, Zhang H, Kai G, Liao Z, Sun X, Tang, K. Разработка пути биосинтеза тропана в культурах волосистых корней Hyoscyamus niger. Proc. Natl. Акад. Sci. 2004; 101: 6786-91. [DOI: 10.1073 / pnas.04013] 39. Кутчан Т.М., Фрик С., Вейд М. Инженерные пути биосинтеза растительных алкалоидов: прогресс и перспективы. Adv. Завод Биохим. Мол. Биол. 2008; 1: 283-310. [DOI: 10.1016 / S1755-0408 (07) 01010-7] 40. Ziegler J, Facchini, PJ. Биосинтез алкалоидов: метаболизм и торговля. Анну. Rev. Plant Biol. 2008; 59: 735-69. [DOI: 10.1146 / annurev.arplant.59.032607.092730]

    41. Самуэльссон Г. Лекарства природного происхождения: Учебник фармакогнозии. Шведская фармацевтическая пресса, Стокгольм. 2001.

    42.Горбанпур М., Маджноун Хосейни Н., Резазаде Ш., Омиди М., Хавази К., Хатами М. Вариации продукции тропановых алкалоидов корней и побегов Hyoscyamus niger при прививке двух штаммов ризобактерий и стрессе от дефицита воды. JMP. 2011; 10 (40): 160-70.

    43. Горбанпур М., Хавази К., Гафарзадеган Р., Хатами М. Две основных разновидности тропановых алкалоидов черной белены (Hyoscyamus niger) при инокуляции PGPR и индукции стресса из-за дефицита воды на стадии цветения. JMP. 2013; 12 (45): 29-42.

    44. Айгнер Т.Г., Мишкин М. Влияние физостигмина и скополамина на распознавание памяти у обезьян. Behav Neural Biol. 1986; 45: 81-7. [DOI: 10.1016 / S0163-1047 (86) 80008-5] 45. Спинкс А. и Васиак Дж. Скополамин (гиосцин) для профилактики и лечения укачивания. Кокрановская база данных Syst. Ред. DOI: 10.1002 / 14651858 (2011). [DOI: 10.1002 / 14651858] 46. Shiraishi K и Takayanagi I. Подтип мускариновых рецепторов, опосредующих расслабление и сокращение гладких мышц, расширяющих радужную оболочку радужки крысы.Gen. Pharmacol. 1993; 24 (1): 139 — 42. [DOI: 10.1016 / 0306-3623 (93) -R] 47. Jones DNC и Higgins GA. Влияние скополамина на зрительное внимание у крыс. Psychopharmacol. 1995; 120: 142-9. [DOI: 10.1007 / BF02246186] 48. Тобин Г., Джилио Д. и Готрик Б. Исследования подтипов мускариновых рецепторов в функции слюнных желез у анестезированных крыс. Автономная неврология: основы и клинические. 2002; 100: 1-9. [DOI: 10.1016 / S1566-0702 (02) 00139-X]

    49. Eglen RM, Hedge SS. и Уотсон Н. Подтипы мускариновых рецепторов и функция гладких мышц.Pharmacol. Rev.1996; 48 (4): 531-65.

    50. Чинто А., Фултон Дж., Козил Н., Азиз М., Суд М. и Йоманс Дж. С.. Роль холинергических рецепторов в локомоции, индуцированной скополамином и оксотреморином-М. Pharmacol. Biochem. Behav. 2003; 76: 53-61. [DOI: 10.1016 / S0091-3057 (03) 00196-5] 51. Дай Й, Амбудкар И.С., Хорн В.Дж., Йе Ч., Кусвелари Е.Е., Уолл С.Дж., Ли М., Ясуда Р.П., Вулф Б.Б. и Баум Б.Дж. Доказательства того, что мускариновые рецепторы M3 в околоушной железе крысы связаны с двумя системами вторичных мессенджеров. Являюсь. J. Physiol. 1991; 261: 1063-73.[DOI: 10.1152 / ajpcell.1991.261.6.C1063] 52. МакГоги Дж., Эверитт Б.Дж., Роббинс Т.В. и Сартер М., Роль кортикальных холинергических афферентных проекций в познании: влияние новых селективных иммунотоксинов. Behav. Головной мозг. Res. 2000; 115: 251-63. [DOI: 10.1016 / S0166-4328 (00) 00262-X] 53. DeFrates LJ, Hoehns JD, Sakornbut EL, Glascock DG, Tew AR. Антимускариновая интоксикация, возникающая при приеме внутрь семян луны. Анна. Фармакотер. 2004; 39: 173-6. [DOI: 10.1345 / aph.1D536]

    54. Брюс Н. Алкалоиды.В: Rehm HJ. Рид Г. и Брюс NC. (Ред.), Биотехнологический набор. Уайли, Кембридж, Великобритания. 2008, стр: 332-50.

    55. Гуггисберг Г. и Гессе М. Алкалоиды: химия и фармакология. Академический, Нью-Йорк. 1983, 22: 85-188. [DOI: 10.1016 / S0099-9598 (08) 60178-9] 56. Гелардини К. Галеотти Н. Гуальтьери Ф. Беллуччи К. и Бартолини А. Облегчение памяти с помощью атропина: парадоксальный эффект. Фитотерапия Res. 1998; 12: 7-9. https://doi.org/10.1002/(SICI)1099-1573(1998)12:1+3.0.CO;2-R [DOI: 10.1002 / (SICI) 1099-1573 (1998) 12: 1 + 3.0.CO; 2-R] 57. Лопес-Энрикес Э., Рафаэль Моралес А и Роберт Ф. Влияние сульфата атропина на легочную гипертрофическую остеоартропатию. Rheum артрита. 1980; 23: 7. [DOI: 10.1002 / art.1780230708] 58. Клемент Дж. Г. и Ли М. Дж.. Фармакокинетика реактиватора оксима ацетилхолинэстеразы, HI-6, у макак-резусов (Macaca mulatta): влияние анестезии атропином, диазепамом и метоксифлураном. Биофарм. Утилизация лекарств. 1990; 11: 227-32. [DOI: 10.1002 / bdd.2510110307] 59. Blozovski D и Bachevalier J. Влияние атропина на поведенческое возбуждение у развивающейся крысы.Dev. Psychol. 1975; 8 (2): 97-102. [DOI: 10.1002 / dev.420080202] 60. Ли С., Топчий И. и Кочиш Б. Влияние атропина, вводимого в медиальную перегородку или гиппокамп, на высокочастотные и низкочастотные тета-ритмы в гиппокампе крыс, анестезированных уретаном. Synapse 2007; 61: 412-9. [DOI: 10.1002 / syn.20388] 61. Уилсон Л.М. и Риччи Д.К. Влияние скополамина на поведение пассивного избегания у неполовозрелых крыс. Dev. Psychobiol. 1976; 9 (3): 245-4. [DOI: 10.1002 / dev.4200

    ] 62. Дэвид М. Уорбертон. Комментарий к: Влияние скополамина и никотина на быстродействие обработки информации человеком.Психофармакология 1984; 82: 147-50. [DOI: 10.1007 / BF00427761] 63. Poorheidari G, Pratt JA и Dehghan N. Влияние низких доз скополамина на двигательную активность: Отсутствие разделения между когнитивными и отсутствующими эффектами. Neurosci. Res. Comuni. 31 (3): 1520-6769. [DOI: 10.1002 / nrc.10049] 64. Ферт А.Ю. и Уокер К. Визуальные побочные эффекты от трансдермального скополамина (гиосцина). Dev. Med. Ребенок. Neurol. 2006; 48: 137-8. [DOI: 10.1017 / S0012162206000296] 65. Весалайнен Р.К., Тахванайнен КУО, Кайла Т.Дж., Кантола И.М., Куусела Т.А. и Экберг Д.Л.Влияние низких доз трансдермального скополамина на вегетативную сердечно-сосудистую систему у здоровых молодых людей. Clin. Physiol. 1997; 17: 135 — 48. [DOI: 10.1046 / j.1365-2281.1997.t01-1-02020.x] 66. Ricng J, Gualtierib F и Tucek S. Конститутивное ингибирующее действие мускариновых рецепторов на аденилатциклазу в сердечных мембранах: эффекты атропина, S — (-) — гиосциамин и R — (+) — гиосциамин. 5-й Международный симпозиум по холинергическим механизмам. 1998. [DOI: 10.1016 / S0928-4257 (99) 80099-0] 67. Rozear M. Bircher RP.Чай CY. Wang SC. Влияние интрацеребровентрикулярного L-гиосциамина, этибензтропина и прокаина на сердечные аритмии, вызванные у собак пентилентетразолом, пикротоксином или дезланозидом. шапка. J. Neurophurmucol. 1968; 7: 1-6. [DOI: 10.1016 / 0028-3908 (68) -8] 68. Ким Н., Эстрада О., Чавес Б., Стюарт К. и Д’Аурия Дж. Биосинтез алкалоидов тропана и гранатана: систематический анализ. Молекулы. 2016; 21: 1510; [DOI: 10.3390 / modules21111510] 69. Хиби Н., Фудзита Т., Хатано М., Хашимото Т. и Ямада Ю.Путресцин N-метилтрансфераза в культивируемых корнях Hyoscyamus albus: n-Бутиламин как мощный ингибитор трансферазы как in vitro, так и in vivo. Plant Physiol. 1992; 100: 826. [DOI: 10.1104 / pp.100.2.826] 70. Stenzel O, Teuber M. и Drager B. Путресцин-N-метилтрансфераза в Solanum tuberosum L., калистегин-образующем растении. Planta. 2006; 223: 200. [DOI: 10.1007 / s00425-005-0077-z] 71. Scholl Y, Hoke D и Drager B. Калистегины в calystegia sepium получены тропановым алкалоидным путем. Фитохим.2001; 58: 883. [DOI: 10.1016 / S0031-9422 (01) 00362-4] 72. Scholl Y. Schneider B. и Drager B. Биосинтез калистегинов: 15N ЯМР и кинетика образования в корневых культурах Calystegia sepium. Фитохим. 2003; 62: 325. [DOI: 10.1016 / S0031-9422 (02) 00544-7] 73. Sato F. Takeshita N. Fitchen JH. Фудзивара Х. и Ямада Ю. Метаболическая инженерия биосинтеза растительных алкалоидов. Фитохим. 2001; 98 (1): 367-72. [DOI: 10.1073 / pnas.98.1.367] 74. Duran-Patron R. Hagan DO. Гамильтон JT. и Вонг CW. Биосинтетические исследования тропановой кольцевой системы тропановых алкалоидов Datura stramonium.Фитохим. 2000; 53: 777. [DOI: 10.1016 / S0031-9422 (00) 00022-4] 75. Lanoue A, Boitel-Conti M, Portais JC, Laberche JC, Barbotin JN, Christen P и Sangwan-Norreel B. Кинетическое исследование литорина. перегруппировка волосистых корней Datura innoxia с помощью спектроскопии ЯМР (13) C. J. Nat. Prod. 2002; 65: 1131. [DOI: 10.1021 / np010612c] 76. Эйх Э. Алкалоиды, производные орнитина. В: Eich E. (Eds.) Solanaceae и Convolvulaceae: Secondary Metabolites. Springer-Verlag Berlin Heidelberg. 2008, стр: 33-212. [DOI: 10.1007 / 978-3-540-74541-9_3]

    77.Мацуда Дж., Окабе С., Хашимото Т. и Ямада Ю. Молекулярное клонирование гиосциамин-6-бета-гидроксилазы, 2-оксоглутарат-зависимой диоксигеназы, из культивируемых корней Hyoscyamus niger. J. Biol. Chem. 1991; 266: 9460-4.

    78. Suzuki K, Yun DJ, Chen XY, Yamada Y и Hashimoto T. Ген гиосциамин-6-гидроксилазы Atropa belladonna по-разному экспрессируется в перицикле корня и пыльниках. Завод Мол. Биол. 1999; 40: 141. [DOI: 10.1093 / oxfordjournals.pcp.a029540]

    79. Хашимото Т., Хаяси А., Амано Ю., Коно Дж., Иванари Х., Усуда С. и Ямада Ю.Гиосциамин-6-бета-гидроксилаза, фермент, участвующий в биосинтезе тропановых алкалоидов, локализуется в перицикле корня. J. Biol. Chem. 1991; 266: 4648.

    80. Ахмад А. и Лите Э. Биосинтез тропиновой части гиосциамина из δ-N-метилорнитина. Фитохим. 1970; 9: 2345-7. [DOI: 10.1016 / S0031-9422 (00) 85738-6] 81. Хамфри А.Дж. и О’Хаган Д. Биосинтез тропановых алкалоидов. Нерешенная проблема вековой давности. Nat. Prod. Rep. 2001; 18: 494-502. [DOI: 10.1039 / b001713m] 82. Dräger B. Тропинонредуктазы, ферменты в точке ветвления метаболизма тропановых алкалоидов.Фитохимия 2006; 67: 327-37. [DOI: 10.1016 / j.phytochem.2005.12.001] 83. Портстеффен А., Дрегер Б. и Нарстедт А. Снижение уровня тропинона в культурах корня дурмана Stramonium двумя специфическими редуктазами. Фитохим. 1994; 37: 391-400. [DOI: 10.1016 / 0031-9422 (94) 85066-6] 84. Хашимото Т. и Ямада Ю. Биогенез алкалоидов: молекулярные аспекты. Анну. Rev. Plant Physiol. Завод Мол. Биол. 1994; 45: 257-85. [DOI: 10.1146 / annurev.pp.45.060194.001353] 85. Zhang L, Ding R, Chai Y, Bonfill M, Moyano E, Oksman-Caldentey KM, Xu T., Pi Y, Wang Z, Zhang H, Kai G, Ляо З, Сунь X и Тан К.Инженерный путь биосинтеза тропана в культурах волосистых корней Hyoscyamus niger. PNAS. 2004; 1001: 6786-91. [DOI: 10.1073 / pnas.04013] 86. Сато Ф., Хашимото Т., Хачия А., Тамура К., Чой К., Моришиге Т., Фудзимото Х. и Ямада Ю. Метаболическая инженерия биосинтеза растительных алкалоидов. PNAS. 2001; 98: 367-72. [DOI: 10.1073 / pnas.98.1.367] 87. Мойано Э., Форнале С., Паласон Дж., Кусидо Р.М., Баньи Н. и Пиньоль М.Т. Продукция алкалоидов в культурах волосистых корней гибридов Duboisia, сверхэкспрессирующих ген pmt. Фитохимия 2002; 59: 697-702.[DOI: 10.1016 / S0031-9422 (02) 00044-4] 88. Мойано Э., Йухикайнен К., Таммела П., Паласон Дж., Кусидо Р.М., Пиньол М.Т., Тири Т.Х. и Оксман-Калдентей К.М. Влияние сверхэкспрессии гена pmt на продукцию тропановых алкалоидов в трансформированных корневых культурах Datura metel и Hyoscyamus muticus. J. Exp. Бот. 2003; 54: 203-11. [DOI: 10.1093 / jxb / erg014]

    89. Роте Г., Драгер Б. Тропановые алкалоиды — метаболический ответ на углеводный сигнал в корневых культурах Atropa belladonna. Plant Sci. 2002; 163: 979-85. ttps: // doi.org / 10.1016 / S0168-9452 (02) 00247-9

    90. Йухикайнен К. Линдгрен Л., Йокелайнен Т., Хилтунен Р., Теери TH. и Оксман-Кальдентей К.М. Повышение выработки скополамина в культурах волосистых корней Hyoscyamus muticus L. с помощью генной инженерии. Planta. 1999; 208: 545-51. [DOI: 10.1007 / s004250050592] 91. PalazónJ. Мояно Э. Кусидо RM. Бонфилл М. Оксман-Кальдентей КМ. и Piñol MT. Производство алкалоидов в волосатых корнях гибридов Duboisia и растений, чрезмерно экспрессирующих ген h6h. Plant Sci. 2003, 165: 1289-95. [DOI: 10.1016 / S0168-9452 (03) 00340-6] 92. Эле Э. и Дрегер Б. Анализ алкалоидов тропана с помощью хроматографических и электрофоретических методов: обновленная информация. J Chromatogr B. 2010; 1391-406. [DOI: 10.1016 / j.jchromb.2010.03.007] 93. Биери С., Брахет А., Войти Дж. Л. и Кристен П. Распределение кокаина среди диких видов Erythroxylum. J Ethnopharmacol. 2006; 439-47. [DOI: 10.1016 / j.jep.2005.08.021] 94. Кауфманн Б. и Кристен П. Недавние методы экстракции натуральных продуктов: экстракция с помощью микроволн и экстракция растворителем под давлением.Фитохим Анал. 2002; 105-13. [DOI: 10.1002 / pca.631] 95. Браше А., Рудаз С., Матеус Л., Кристен П. и Войти Дж. Л. Оптимизация ускоренной экстракции растворителем кокаина и бензоилэкгонина из листьев коки. J Sep Sci. 2001; 865-73. https://doi.org/10.1002/1615-9314(20011101)24:10/113.0.CO;2-U [DOI: 10.1002 / 1615-9314 (20011101) 24: 10 / 113.0.CO; 2-U] 96. Чхве Й.Х., Чин Ю.В., Ким Дж., Чон Ш. и Ю КП. Стратегии сверхкритической жидкостной экстракции солей гиосциамина и скополамина с использованием основных модификаторов.J Chromatogr, A. 1999; 47-55. [DOI: 10.1016 / S0021-9673 (99) 00962-0] 97. Brachet A., Christen P, Gauvrit JY, Longeray R., Lanteri P. и Veuthey JL. Схема эксперимента по сверхкритической жидкостной экстракции кокаина из листьев коки. J Biochem Biophys Methods. 2000; 353-66. [DOI: 10.1016 / S0165-022X (00) 00062-2] 98. Brachet A, Mateus L., Cherkaoui S., Christen P, Gauvrit JY, Lanteri P. и Veuthey JL. Применение центральных композиционных конструкций в сверхкритической флюидной экстракции тропановых алкалоидов в растительных экстрактах.Анализ. 1999; 772-8. [DOI: 10.1051 / analusis: 1999143] 99. Leicach SR, Chludil HD. и Ябер ГМА. Хроматография и спектроскопия алкалоидов. Издательство «Наука», Энфилд, штат Нью-Хэмпшир, США. 2009; 175-201. [DOI: 10.1201 / b10195-10] 100. Cardillo AB, Talou JR и Giulietti AM. Экспрессия гена Brugmansia Candida Hyoscyamine 6beta-Hydroxylase в Saccharomyces cerevisiae и его потенциальное использование в качестве биокатализатора. Факт о микробных клетках: 2008; 7: 17. [DOI: 10.1186 / 1475-2859-7-17] 101. Андреола Б., Пиован А., Да Д.Л., Филиппини Р.и Каппеллетти Э. Односторонний мидриаз из-за трубы Ангела. Clin Toxicol. 2008; 329-31. [DOI: 10.1080 / 15563650701378720] 102. Прамод К.К., Сингх С. и Джаябаскаран С. Экспрессия гиосциамин-6b-гидроксилазы в клетках перицикла корня и накопление ее продукта — скополамина в тканях листа и стебля Datura metel L. Plant Sci. 2009; 178, 202-6. [DOI: 10.1016 / j.plantsci.2009.11.004]

    103. Хоссейни Н., Эбрахими С.Н., Салехи П., Асгари Б. и Ахмади М. Одновременное определение атропина и скополамина в разных частях растений Hyoscyamus arachnoideus Pojark с помощью высокоэффективной жидкости хроматография (ВЭЖХ).J Med Plants Res. 2011; 5: 3552-57.

    104. Ибрагим А.И., Абд ЭКМ, Ноуэр А., Абдель М.А. и Абд Е.А.А. Производство алкалоидов и органогенез из каллуса Hyoscyamus muticus L. in vitro. J Appl Sci Res. 2009; 5: 82-92.

    105. Бахманзадеган А., Сефидкон Ф. и Сонболи А. Определение гиосциамина и скополамина у четырех видов Hyoscyamus из Ирана. Iran J Pharm Res. 2009; 8 (1): 65-70.

    106. Aehle E, и Dräger B. Анализ алкалоидов тропана с помощью хроматографических и электрофоретических методов: обновление.J. Chromatography B. 2010; 878 (17-18): 1391-406. [DOI: 10.1016 / j.jchromb.2010.03.007] 107. Музкиз М. Разделение алкалоидов с помощью газовой хроматографии. В: Wilson ID, Adlard ER, Cooke M, Poole CF (eds) Энциклопедия науки о разделении. Академический, Сан-Диеж. 2000, стр: 1938-49. [DOI: 10.1016 / B0-12-226770-2 / 02561-8] 108. Намера А., Яшики М., Хиросе Ю., Ямаджи С., Тани Т., Кодзима Т. 2002. Количественный анализ тропановых алкалоидов в биологических материалах с помощью газовой хроматографии. -масс-спектрометрии. Forensic Sci Int.; 130: 34-43. [DOI: 10.1016 / S0379-0738 (02) 00302-X] 109. Хартманн Т., Витте Л., Опрах Ф., Топпель Г. Повторное исследование алкалоидного состава растений Atropa belladonna, корневых культур и культур клеточных суспензий. Planta Med. 1986; 390-5. [DOI: 10.1055 / s-2007-969194] 110. Альтрия К., Марш А. и Сангер-ван Г.С. Капиллярный электрофорез для анализа низкомолекулярных фармацевтических препаратов. Электрофорез. 2006; 27, 2263-82. [DOI: 10.1002 / elps.200600030] 111. Ганзера М. Контроль качества растительных лекарственных средств с помощью капиллярного электрофореза: возможности, требования и применение.Электрофорез. 2008; 29: 3489-503. [DOI: 10.1002 / elps.200700901] 112. Кучинотта В., Контино А., Джуффрида А., Маккаррон Г. и Мессина М. Применение заряженных одиночных изомерных производных циклодекстринов в капиллярном электрофорезе для хирального анализа. J Chromatogr A. 2010; 1217 (7): 953-67. [DOI: 10.1016 / j.chroma.2009.11.094] 113. Ren X, Ma Y, Zhou M, Huo S, Yao J, and Chen H.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *