Иммунограмма развернутая: Иммунограмма расширенная, сдать анализ на иммунитет

Иммунограмма расширенная, сдать анализ на иммунитет

Метод определения
Субпопуляции лимфоцитов – иммунофенотипирование (проточная цитофлюориметрия, безотмывочная технология).

Фагоцитарная активность — оценка фагоцитоза бактерий с флюоресцентной меткой. 

Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) — спектрофотометрия.

Иммуноглобулины A, M, G: иммунотурбидиметрия.

Иммуноглобулин E: хемилюминесцентный иммуноанализ.

Исследуемый материал
Цельная кровь с ЭДТА, цельная кровь с гепарином, сыворотка крови

Синонимы: Скрининговая оценка состояния звеньев иммунитета; Иммунограмма; Иммунофенотипирование; Клеточный иммунитет; 

Human Immune System; Immunophenotyping; Human Leukocyte Differentiation Antigens. 

Краткое описание комплексного исследования «Иммунологическое обследование расширенное» 

Скрининговая оценка состояния различных звеньев иммунитета, используемая в диагностике первичных и вторичных иммунодефицитов, аутоиммунных, лимфопролиферативных, инфекционных, гематологических заболеваний.  

В состав профиля входят следующие показатели: 

1. Лимфоциты , абсолютное значение 




2. Субпопуляции лимфоцитов:

   
   

   • Т-лимфоциты (CD3+)

   
   

   • Т-хелперы (CD3+CD4+)

   
   

   • Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+)

   
   

   • Иммунорегуляторный индекс (CD3+CD4+/CD3+CD8+)

   
   

   • В-лимфоциты (СD19+)

   
   

   • ЕК-клетки (CD3-CD16+CD56+)

   
   

   • Т-ЕК-клетки (CD3+CD16+CD56+)

   
   

   • Активированные Т-лимфоциты (CD3+HLA-DR+)

   
   

   • Активированные клетки, не относящиеся к Т-лимфоцитам (В-лимфоциты и активированные ЕК) (CD3-HLA-DR+) 




3. Способность к активации в ответ на ФГА:

   
   

   • Т-лимфоцитов (CD3+CD69+)

   
   

   • В- и ЕК-лимфоцитов (СD3-CD69+) 




4. Фагоцитарная активность:

   
   

   • Фагоцитоз (гранулоциты)

   
   

   • Фагоцитоз (моноциты) 




5. Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) 




6. Иммуноглобулины:

   
   

   • IgG

   
   

   • IgA

   
   

   • IgM

   
   

   • IgE 

Какие параметры оцениваются в исследовании «Иммунологическое обследование расширенное» 

Основные субпопуляции лимфоцитов: 

Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они контролируют работу В-лимфоцитов, ответственных за образование антител, т. е. за гуморальный иммунный ответ. Т-хелперы, Th (от англ. to help – помогать) – разновидность Т-лимфоцитов, несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками, участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины. Цитотоксические Т-клетки — распознают фрагменты антигена, на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в области контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней. В-лимфоциты (от лат. «bursa» — сумка по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты отвечают делением и дифференциацией в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет. ЕК-клетки (естественные клетки-киллеры) или натуральные киллеры-клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически изменённым клеткам-мишеням, которые не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам. Т-ЕК-клетки (ЕКТ) – клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов. 

Активированные лимфоциты. 

HLA-DR – один из антигенов MHC класса II (major histocompatibility complex — главный комплекс гистосовместимости), участвующих в презентации потенциально чужеродных антигенов, что необходимо для формирования адекватного иммунного ответа. При иммунофенотипировании может быть использован в качестве маркёра активированных клеток. CD3+HLA-DR+ — клетки, представляющие собой зрелые активированные Т-лимфоциты человека. CD3-HLA-DR+ — активированные клетки, не относящиеся к Т-лимфоцитам (В-лимфоциты и активированные ЕК). 

Способность лимфоцитов к активации. 

Способность лимфоцитов к активации в данном тесте оценивают по содержанию лимфоцитов, экспрессирующих CD69 в ответ на инкубацию в присутствии ФГА (митоген растительного происхождения). CD69 (другие названия — activation inducer molecule, AIM; early activation antigen, EA-1) – ранний маркёр активации, трансмембранный белок типа I.

Этот белок вовлечен в ранние механизмы активации Т-клеток, ЕК-клеток, В-клеток, моноцитов и тромбоцитов. 

Фагоцитарная активность лейкоцитов. 

Данные по фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов (относительное содержание клеток, фагоцитировавших добавленные к пробе при инкубации меченые флюоресцентной меткой бактерии) позволяют оценить резервные возможности этих клеток по поглощению и перевариванию чужеродных агентов. 

Циркулирующие иммунные комплексы общие (ЦИК) 

Одновременное присутствие высоких концентраций антигенов и их специфических антител может вести к образованию циркулирующих иммунных комплексов. Иммунные комплексы могут выходить из кровотока в мелких сосудах и откладываться в тканях, например, в гломерулах почек, в лёгких, коже, суставах, стенке сосудов. ЦИК обладают способностью связывать и активировать комплемент, что ведёт к повреждению ткани.

Повышение уровня ЦИК может наблюдаться при аутоиммунных заболеваниях, хронических инфекционных заболеваниях, при которых постоянная продукция антигена инфекционным агентом сочетается с иммунным ответом на него (хронические гепатиты).

Клинически это часто проявляется гломерулонефритами, артритами, нейропатиями.

Несмотря на непосредственную роль в патогенезе некоторых заболеваний, определение ЦИК не всегда информативно, поскольку количество иммунных комплексов, отложившихся в тканях более важно, чем количество комплексов, циркулирующих в крови. Исследование ЦИК может быть недостаточно чувствительным и специфичным в диагностике болезней, вызываемых иммунными комплексами, и должно дополняться исследованием эффектов ЦИК на функцию органов (например, концентрация креатинина и анализ мочи), а также определением С3 С4 компонентов комплемента (см. тест № 193), количество которых снижается вследствие усиленного потребления.  

Иммуноглобулины. См. информацию.к тестам Иммуноглобулины IgG, IgA, IgM, IgE — №№ 45, 46, 47, 67. 

Оценка данных, полученных в исследовании «Иммунологическое обследование расширенное» 

Данные иммунологического исследования интерпретирует врач-иммунолог в комплексе со всеми клинико-анамнестическими данными конкретного пациента. При оценке иммунного статуса пациента результаты исследования оценивают с точки зрения природы и стадии патологического процесса, сопутствующих заболеваний, приёма лекарственных препаратов и пр. При этом важны не только абсолютные значения отдельных показателей, но и их соотношение и динамика показателей. Изменения иммунологических показателей могут быть проявлением нормальной реакции организма на воздействие физиологических или патологических факторов (с различной картиной сдвигов на разных стадиях заболевания), отражать чрезмерную активацию, истощение иммунной системы, характеризовать врождённый или приобретённый дефект отдельных звеньев иммунной системы.

Иммунограмма (клеточный иммунитет) — Комплексы медицинских анализов и их цен в KDL

Алергология. ImmunoCAP. Индивидуальные аллергены, IgE

Аллергокомпоненты ImmunoCAP

Аллергокомпоненты деревьев

Аллергокомпоненты животных и птиц

Аллергокомпоненты плесени

Аллергокомпоненты трав

Пищевые аллергокомпоненты

Аллергология. ImmunoCAP. Комплексные исследования IgE (результат по каждому аллергену)

Аллергология. ImmunoCAP. Панели аллергенов IgE, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. ImmunoCAP. Фадиатоп

Аллергология. Immulite. Индивидуальные аллергены

Аллергены гельминтов, IgE

Аллергены грибов (кандида и плесневых), IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены клещей домашней пыли, IgE

Аллергены лекарств и химических веществ, IgE

Аллергены насекомых, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены ткани, IgE

Аллергены трав, IgE

Бактериальные аллегены (стафилококк), IgE

Пищевые аллергены, IgE

Пищевые аллергены, IgG

Аллергология. Immulite. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Immulite. Панели аллергенов, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергены деревьев, IgE (панель)

Аллергены животных и птиц, IgE (панель)

Аллергены трав, IgE (панель)

Ингаляционные аллергены, IgE (панель)

Пищевые аллергены, IgE (панель)

Аллергология. Immulite. Панели пищевых аллергенов IgG (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. ImmunoCAP. Индивидуальные аллергены, IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены трав, IgE

Пищевые аллергены, IgE

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Местные анестетики, IgE

Биохимические исследования крови

Диагностика анемий

Липидный обмен

Обмен белков

Обмен пигментов

Обмен углеводов

Специфические белки

Ферменты

Электролиты и микроэлементы

Биохимические исследования мочи

Разовая порция мочи

Суточная порция мочи

Витамины, аминокислоты, жирные кислоты

Гематология

Гемостаз (коагулограмма)

Генетические исследования

HLA-типирование

Исследование генетических полиморфизмов методом пиросеквенирования

Исследование генетических полиморфизмов методом ПЦР

Молекулярно-генетический анализ мужского бесплодия

Гистологические исследования

Гистологические исследования лаборатории UNIM

Гормоны биологических жидкостей

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Гормоны крови

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Маркеры остеопороза

Пренатальная диагностика

Ренин-альдостероновая система

Тесты репродукции

Функция органов пищеварения

Функция щитовидной железы

Гормоны мочи

Диагностика методом ПЦР

COVID-19

Андрофлор, иследование биоценоза (муж)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы группы герпеса

Возбудитель туберкулеза

ВПЧ (вирус папилломы человека)

Грибы рода кандида

Листерии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Стрептококки (вкл. S.agalactie)

Токсоплазма

Урогенитальные инфекции, ИППП

Урогенитальные инфекции, комплексные исследования

Урогенитальные инфекции, условные патогены

Фемофлор, исследование биоценоза (жен)

Флороценоз, иследование биоценоза (жен)

Цитомегаловирус

Диагностика методом ПЦР, кал

Кишечные инфекции

Диагностика методом ПЦР, клещ

Клещевые инфекции

Диагностика методом ПЦР, кровь.

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус краснухи

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

ВИЧ

Возбудитель туберкулеза

Гепатит D

Гепатит G

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит С

Листерии

Парвовирус

Токсоплазма

Цитомегаловирус

Жидкостная цитология

Изосерология

Иммуногистохимические исследования

Иммунологические исследования

Иммунограмма (клеточный иммунитет)

Интерфероновый статус, базовое исследование

Интерфероновый статус, чувствительность к препаратам

Оценка гуморального иммунитета

Специальные иммунологические исследования

Исследование абортуса

Исследование мочевого камня

Исследование парапротеинов. Скрининг и иммунофиксация

Исследования слюны

Исследования слюны

Комплексные исследования

Лекарственный мониторинг

Маркеры аутоиммунных заболеваний

Антифосфолипидный синдром (АФС)

Аутоиммунные заболевания легких и сердца

Аутоиммунные неврологические заболевания

Аутоиммунные поражения ЖКТ и целиакия

Аутоиммунные поражения печени

Аутоиммунные поражения почек и васкулиты

Аутоиммунные эндокринопатии и бесплодие

Диагностика артритов

Пузырные дерматозы

Системные ревматические заболевания

Эли-тесты

Микробиологические исследования (посевы)

Посев крови на стерильность

Посев на гемофильную палочку

Посев на грибы (Candida)

Посев на грибы (возбудители микозов кожи и ногтей)

Посев на дифтерию

Посев на микоплазмы и уреаплазмы

Посев на пиогенный стрептококк

Посев на стафилококк

Посевы кала

Посевы мочи

Посевы на микрофлору (конъюнктива)

Посевы на микрофлору (отделяемое)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт женщины)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт мужчины)

Посевы на микрофлору ЛОР-органы)

Ускоренные посевы с расширенной антибиотикограммой

Неинвазивная диагностика болезней печени

Программы неинвазивной диагностики болезней печени

Неинвазивный пренатальный ДНК-тест (НИПТ)

Неинвазивный пренатальный тест (пол/резус плода)

Общеклинические исследования

Исследование назального секрета

Исследование секрета простаты

Исследования кала

Исследования мочи

Исследования эякулята

Микроскопическое исследование биологических жидкостей

Микроскопия на наличие патогенных грибов и паразитов

Микроскопия отделяемого урогенитального тракта

Онкогематология

Иммунофенотипирование при лимфопролиферативных заболеваниях

Миелограмма

Молекулярная диагностика миелопролиферативных заболеваний

Цитохимические исследования клеток крови и костного мозга

Онкогенетика

Онкомаркеры

Пищевая непереносимость, IgG4

Полногеномные исследования и панели наследственных заболеваний

Пренатальный скрининг

Серологические маркеры инфекций

Аденовирус

Бруцеллез

Вирус HTLV

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Коксаки

Вирус кори

Вирус краснухи

Вирус эпидемического паротита

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы простого герпеса I и II типа

ВИЧ

Гепатит D

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит Е

Гепатит С

Грибковые инфекции

Дифтерия

Кишечные инфекции

Клещевые инфекции

Коклюш и паракоклюш

Коронавирус

Менингококк

Паразитарные инвазии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Сифилис

Столбняк

Токсоплазма

Туберкулез

Урогенитальные инфекции

Хеликобактер

Цитомегаловирус

Специализированные лабораторные исследования.

Дыхательный тест

Микробиоценоз по Осипову

Тяжелые металлы и микроэлементы

Тяжелые металлы и микроэлементы в волосах

Тяжелые металлы и микроэлементы в крови

Тяжелые металлы и микроэлементы в моче

Услуги

Выезд на дом

ЭКГ

Установление родства

Химико-токсикологические исследования

Хромосомный микроматричный анализ

Цитогенетические исследования

Цитологические исследования

Чекап

Иммунологические исследования. Иммуногематология Волгоград. Сдать анализы иммунограмма, цены.

Комплексные исследования

Аллергодиагностика

Аллергодиагностика бытовых аллергенов

Аутоиммунные маркеры аутоиммунных нарушений

Бактериологические исследования

Биохимические исследования

Гематологические исследования

Генетические исследования

Гормоны, биологически активные вещества и онкомаркеры

Инфекции, бактерии

Инфекции, бактерии. Определение антител в крови методом ИФА

Инфекции, вирусы

Инфекции, гельминты, простейшие и грибы

Исследования мочи

Микроскопия

Мониторинг лекарственных препаратов

Общеклинические исследования

Определение отцовства / родства

Пренатальная диагностика развития плода (prisca)

Сахарный диабет диагностика: аутоиммунные и генетические маркеры

Цитологические исследования

Инфекции. бактерии.определение антител в крови методом ифа

Лабораторные комплексы и наборы.

Иммунограмма (развернутая)

Группа:

Код: КА40

Краткая характеристика анализа:

Иммунограмма — комплексное исследование, позволяющее оценить состояние иммунной системы (как в целом, так и её различных звеньев) Показания для назначения: -Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением. -Подозрение на врожденный или приобретённый иммунодефицит. -Аутоиммунные заболевания. -Аллергические заболевания. -Онкологические заболевания. -Обследование реципиентов до и после трансплантации органов. -Обследование пациентов перед серъёзными оперативными вмешательствами. -Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами. Метод: проточная цитометрия, иммуноферментный анализ

Выбирая, где сделать иммунограмму в Волгограде и Волжском, выбирайте удобную Вам клинику или лабораторию — цена анализа, стоимость забора материала и проведения исследований одинаковые

Строгое соблюдение правил подготовки к лабораторному исследованию — залог получения точных результатов. Проконсультируйтесь с нашим специалистом, как подготовиться к анализу.

В Центрах лабораторной диагностики Диалайн результаты анализов можно получить любым удобным способом:

— лично в руки в Центре лабораторной диагностики
— по Email

Выдача результатов анализов производится в любом Центре лабораторной диагностики независимого от того, в каком был сдан биоматериал. Возможна доставка курьером

Для расшифровки результата анализа лучше всего обратиться к специалисту. Врачи наших клиник и лабораторий проконсультируют вас по всем вопросам

Стоимость анализа

Корзина

Письмо отправлено на указанную почту

Как подготовиться к анализу

• Взятие крови предпочтительно (рекомендовано) проводить утром натощак, после 8-14 часов ночного периода голодания. • Допустимо через 3-4 часа после легкого приема пищи. • Непосредственно перед взятием крови пациент должен находиться в состоянии покоя не менее 10 — 15 минут. • Для мониторинга терапии взятие крови проводится в одно и тоже время. • Прием препаратов накануне или в день исследования необходимо согласовать с лечащим врачом. • Исключить (накануне) повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), приём алкоголя, не курить 2 часа. • Рекомендуется незадолго до взятия крови выпить негазированной воды, это поможет набрать необходимый для исследования объем крови, уменьшит вязкость крови и снизит вероятность образования сгустков в пробирке. • Образцы крови с гемолизом исследованию не подлежат! • Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования • Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.

Где сдать анализ

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 07:00 до 19:00
Вс.:  с 08:00 до 14:00

Схема проезда

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 08:00 до 18:00
Вс.:  c 08:00 до 13:00

Схема проезда

Режим работы

Пн. -пт.: с 07:00 до 15:00
Сб.: с 08:00 до 13:00
Вс.: выходной

Схема проезда

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 08:00 до 18:00
Вс.:  с 08:00 до 13:00

Схема проезда

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 08:00 до 18:00
Вс.:  c 08:00 до 13:00

Схема проезда

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 16:00
Сб.: с 08:00 до 13:00
Вс.: выходной

Схема проезда

Режим работы

Пон.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 08:00 до 18:00
Вс.:  c 08:00 до 13:00

Схема проезда

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 08:00 до 18:00
Вс.:  с 08:00 до 13:00

Схема проезда

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 08:00 до 18:00
Вс.:  с 08:00 до 13:00

Схема проезда

Режим работы

Пн.-пт.: с 07:00 до 20:00
Сб.: с 08:00 до 18:00
Вс.: с 08:00 до 13:00

Схема проезда

Забор анализов в Некрасовке, +7 (495) 003-25-72

цены, адреса клиник в Санкт-Петербурге, отзывы пациентов, запись онлайн – Spb.meds.ru

Медицинский центр Традиции

11-я линия Васильевского острова, д. 36 | р-н Василеостровский

Василеостровская

Спортивная

Медицинский центр «Традиции» предоставляет качественную и профессиональную медицинскую помощь взрослым и детям по многим направлениям медицины: гастроэнтерологии, кардиологии, дерматологии, офтальмологии, проктологии, эндокринологии, терапии, онкологии и др. Здесь работают высококвалифицированные специалисты, которые используют передовые методы диагностики и лечения и имеют большой практический опыт.Смотреть еще »

09:00-21:00
10:00-17:00 10:00-15:00

Лечим анализы. О здравом смысле и жизненной опытности – Трибуна – новини Сум

Молодая женщина хочет второго ребёнка. Есть некоторые вопросы в состоянии её здоровья, которые вынудили “пойти по врачам” – на консультацию к иммунологу и другим специалистам – чтобы наилучшим образом подготовить свой организм к беременности и родам, максимально снизив риски для будущего малыша. Ну и речь опять пошла об иммуноглобулинах, антителах.

Обследовали женщину по полной программе. Естественно, на ТORCH-комплекс – ведь речь идёт о планируемой беременности (кстати, в Европе, Америке это совершенно необязательный анализ. Назначается, если есть к тому основания, а основания – это жалобы пациента).

Зачем-то на глисты (жалоб, аллергий, повышенного количества эозинофилов в анализе крови нет). Причём, никто не искал глистов там, где они живут, т.е. в кишечнике: “Фи, это как-то некультурно – с какашками носиться и ковыряться в них. Мы интеллигентно посмотрим, по крови!”

На грибы обследовали – причём не целевыми методами бактериологии (если молочница – ищите кандиды на слизистых влагалища, если стоматит – на слизистых ротовой полости. Хотя ни того, ни другого у женщины не было) – нет, по крови. И в довершение – развёрнутая иммунограмма.

И, конечно, у неё всё, что хотели, нашли.

Нашли повышенные иммуноглобулины G к аскаридам – аж в 1,1 раза (0,23 при норме 0,2). К лямблиям – аж в 1,2 раза (0,25 и 0,2 соответственно). К грибам, к цитомегаловирусу, герпесу, Эпштейн-Барр вирусу. И, естественно, сниженный иммунитет по иммунограмме. Кстати, ни разу в жизни не видел нормального этого анализа, обязательно что-то отклонено от нормы.

И это нормально – иммунная система постоянно в работе.

Она всегда раздражена, изменчива, всё время на страже здоровья от внешних и внутренних врагов – что тот чекист, “боец невидимого фронта”. Хорошо об этом анализе сказал незабвенный Н.М. Амосов: “Я и так вижу, когда у человека иммунитет снижен – мелкие ранки плохо заживают, гнойнички на коже, ОРЗ или часто, или с осложнениями”. Плюс обычный клинический анализ крови из пальца значимые проблемы покажет. А иммунограмма, в большинстве случаев, нужна в тяжёлых случаях врождённого, наследственного иммунодефицита, чаще в детской практике, для установления реальной причины и правильного лечения. Добивает ещё, когда в конце иммунограммы расписано, какой иммуностимулятор на какое звено “угнетённого” иммунитета действует. А ещё придумали иммуномодуляторы – это такие умные таблетки, которые сами знают, какую часть иммунитета надо простимулировать, а какую ослабить. О как! При том, что в цивилизованном мире (извините) таких препаратов просто не существует. Не додумались они ещё.

Ну и понеслась! – началось лечение.

Назначили противогрибковую терапию – сначала внутривенно, потом в таблетках. И от глистов три препарата: фуразолидон, зентел и пирантел. Дальше бы, вероятно, занялись TORCH-инфекциями, но женщине попалась на глаза вышеупомянутая моя заметка, и она решила получить альтернативное врачебное мнение.

Что я предложил в ходе online консультации? А всё, как в статье писал. Проверили ЦМВ, ЭБВ и герпес на IgM – они оказались отрицательными (хотя IgG не в пример глистам и грибам, были высокие – от 9 до 11. Точно бы лечили). То есть, активности инфекционного процесса нет, никакой терапии не требуется, у женщины есть иммунитет к этим инфекциям, благодаря чему и она, и будущий плод полностью защищены от них. А вот в отношении токсоплазмы ситуация оказалась другая (иммунологом этот анализ не был назначен) – IgG не обнаружены, и я нацелил женщину на возможный риск заражения во время беременности и угрозу плоду. Уточняем иммунный статус по краснухе, этот вирус тоже может быть опасен маленькому, если инфицирование произойдёт во время вынашивания (уродства). Если IgG окажется положительным – угрозы нет, женщина переболела (краснуху часто переносят в лёгкой форме, без сыпи, под маской ОРВИ, не зная того сами) и имеет стойкий иммунитет, а если IgG отрицательные – может, стоит и прививку сделать, чтобы не переживать по поводу возможного заражения краснухой во время беременности.

В ходе консультации (разговорились) выяснилась ещё одна небезынтересная подробность. Родственница пациентки проходила обследование в уролога, и у неё выявили положительные IgG к нескольким возбудителям ИППП – заболеваний, передающихся половым путём (уреаплазма, микоплазма, гарднерелла…) Некоторые из них в общемировой медицинской практике вообще считаются условнопатогенными или даже нормальными обитателями слизистых половых путей, т.е. “лечить их” не надо даже в случае положительного анализа IgM, ПЦР (полимеразная цепная реакция) и бактериологического исследования, а не то что IgG. Но не в нашей радостной стране.

Догадываетесь, что было дальше? Правильно, уже лечат.

Причём лечат иммуноглобулинами – препаратами из крови доноров. А кто иногда приходит ту кровь сдавать, в попытке хоть как-то заработать на хлеб в нашей непрерывно улучшающейся действительности и при неуклонно повышающемся благосостоянии народонаселения – вы знаете. Как ту кровь тестируют на возможное заражение? Не всегда и не на все инфекции кровь тестируется с применением других методик, кроме ИФА. Также можно вспомнить о “сером окне” – времени от внедрения возбудителя в организм до появления специфических антител. Естественно, что в этот период – а он может длиться до нескольких месяцев – их в крови не обнаружат. Ну а если добавить, что в сохранившихся образцах замороженной в 1930-х годах крови доноров в США ретроспективно обнаружили вирус СПИДа, при том, что сам вирус открыли только в 1981… Через 50 лет! Поняли, о чём я? За последние 30 лет открыли более 20 новых, точнее, ранее неизвестных инфекций. То есть, что в той крови (препараты из которой вы сегодня себе колете), смогут находить через 20 лет – одному богу известно.

Осторожно нужно с препаратами крови, только по строгим показаниям, когда без них ну никак…

Кстати, лечат и родственницу, и её мужа – обоих сразу. Интересная практика у урологов (да и у гинекологов) – лечат второго участника действа на основании результатов анализов его полового партнёра. И то так, зачем заморачиваться? Хотя… можно подумать и прогнать мысль об откатах от лаборатории. Можно же в два раза больше получить? Недоработочка? Нет, расчёт тут правильный: второй пациент может и не дойти до лаборатории, а лечение намного дороже, чем обследование – комплексное и длительное, иногда годами. И тут можно снова подумать и снова прогнать мысль об откатах – но уже от фармфирм.

Но факты эти общеизвестны и даже уже не интересны. Поразила меня аргументация доктора, почему их надо лечить, эти иммуноглобулины G. Такого я ещё не слышал – вот как полезно общаться с пациентами. Итак, внимание, коллеги (учитесь!) и потенциальные жертвы: доктор суммировал все положительные результаты IgG к трём возбудителям! Ну, например, 4,2+5,3+8,1 и получил убийственную цифру, аж в 17,6 раза превышающую норму! Ну как тут не согласиться на лечение…

Да, и ещё одну ремарку он бросил, очевидно, по принципу “контрольный в голову”: Вы же понимаете, иммунная система отвлекается на этих возбудителей, а вдруг в это время на вас нападёт ещё кто-то? А они все вокруг, вирусы-убийцы. В любой момент! – и моментально в море… Вы же не выдержите, ваш организм не справится!

То бишь – вдруг война, а я уставший?

Ну что тут скажешь… Я вас только спрошу: где вы видели сильную армию, не принимавшую участия в боевых действиях? Вон, с началом АТО появилась в Украине и армия. А раньше – всё разворовали, финансирования нет и не предвиделось… Или: сколько пробежит человек, никогда не тренировавшийся, и марафонец, регулярно поддерживающий свою форму? Или: как научиться подтягиваться 20 раз? отжиматься 100?

Путь только один. Тренировки. И поверьте (я уже говорил вначале), что наша иммунная система постоянно в действии. Если уж и дальше проводить параллель с армией, то постоянные манёвры, учения, марш-броски. Никто (организм, в смысле) не будет содержать бездельников-иждивенцев, кормить их задарма. Это в политическом устройстве возможно (и то не в нормальных странах), а природа этого не терпит.

Есть даже одиозная теория стимуляции и постоянной тренировки иммунной системы: дескать, мыться не надо и глистов гонять не надо, чтобы микробы и паразиты постоянно держали “иммунку” в боевой готовности. Перегибы, конечно. Иммунной системе работы и после бани хватит (особенно, если ты туда с красивой девушкой намылился), а паразитов в организме столько (ещё и неидентифицированных нами), что реально выползающих аскарид можно и травануть.

Кстати, о мыле. Помните “Сэйфгард”, чудо-мыло с бактерицидным эффектом? Куда-то пропало. И слава Богу. Вроде, и идея правильная: помыл руки – и микробов нету, и мама весь день за сына спокойна (реклама была такая) – лезь, куда хочешь, пачкайся. Ан, нет. Дело в том, что бактерицидный эффект распространяется как на вредных микробов, так и на полезных. То есть, убивает и тех, и тех. Только вот полезных убить намного легче, их не травили сто лет антибиотиками, они нежные и доверчивые. А вот стафилококк… Попробуйте выполоть помидоры на грядке – вырастут новые? А сорняки? Да что с ними ни делай, лезут и лезут! Так и тут. Полезные бифидум- и лактобактерии уничтожить легко – восстановить тяжко. А ведь они держат биологическую нишу на коже занятой. Полез туда золотистый стафилококк – а места-то ему и нет. Причём держат намного лучше, чем любой антибиотик. А если вы их “выполете” “Сэйфгардом”? Заходи, селись, занимай свободные места – прям, как в освободившиеся квартиры репрессированной интеллигенции в 37-м заселяли лимиту из глубинки. Эти пробьются…

Природа пустоты не терпит.

Так вот, назначение лечения по причине выявления IgG к условно патогенным и нормальным обитателям слизистых (это та же кожа, но внутри) опасно и чревато не только аллергиями, побочным действием и облегчением вашего кошелька. Убивая их комбинированными и изощрёнными схемами антибиотиков, мы освобождаем ниши для действительно болезнетворных бактерий и вирусов – и они уже придут нечувствительными к медикаментам. Не зря на всех международных конгрессах последних лет твердят о конце антибактериальной эры – не работают антибиотики, всё…

Так что такие врачи ещё и играют на руку инфекциям, якобы борясь с ними – необоснованно назначая антибактериальную терапию и формируя устойчивые штаммы микробов. Ну а если глобальные мировые катаклизмы вас не волнуют, задумайтесь о себе, близком, любимом, родном и единственном – и совершенно теперь незащищённом перед угрозой сепсиса и внутрибольничной инфекции. Помните, у Льва Толстого про пастушка? “Волк, волк!” А когда волк по-настоящему напал, никто и не помог…

И на закуску, по аналогии с “от шефа”, ещё крылатая фраза “от доктора”, которую поведала мне пациентка – в продолжение аналогии с политической ситуацией и рациональным хозяйствованием: Вы же понимаете, если Харьковскую область профинансировать избыточно, то Луганской денег не хватит. Понятно, да? Много иммуноглобулинов на уреаплазму идёт, на грипп не хватает. С другого, так сказать, конца подошёл, чтобы убедительнее было.

По этому поводу ещё замечу, опять же сравнивая ресурсы государства и человека. Конечно, в нашей стране всё время всего не хватает. Позычаем на стороне. Интересно, есть ли что-то похожее на это попрошайничество в биологии?.. Что-то ничего в голову не приходит. Наверное, отсутствие аналогии в природе, божественно-разумно устроенной, доказывает, что это гибельный путь, не живой. Но не о том. В отличие от нашего государства, человеческий организм сконструирован с огромными ресурсами и потрясающим запасом прочности, которые он может задействовать в экстремальных ситуациях, примеров масса. Иммунная система не исключение.

По этому поводу вспоминается чудный еврейский анекдот:

– Изя, ты спишь?

– Нэт.

– А почему глаза закрыты?

– Зрэние экономлю.

Так что не экономьте, на ваш век органов хватит – природа всё продумала.

Ну вот, пожалуй, и всё, что я сегодня хотел вам поведать. Поучительная история. Жду ваших откликов, коллеги. Может, кто с чем не согласен? Давайте обсуждать. Жду ваших отзывов, а если надо, и звонков, потребители медицинских услуг (не люблю это слово, но не выбросишь из песни – врачи и пациенты стали равноправными участниками товарно-денежных отношений). Боритесь за свои права потребителей, пусть эти услуги будут качественными. Ну правда, это ж не просроченный творожок – чертыхнулся да выкинул.

Praemonitus praemunitus – предупреждён, значит, вооружён.

Ностальгическая латынь. Всё давно придумано, до нас.

И ещё раз вспомню гениального Николая Михайловича, приведу здесь нелицеприятное его высказывание из “Энциклопедии здоровья” о нас, медиках:

Не надейтесь на медицину. Она неплохо лечит многие болезни, но не может сделать человека здоровым. Пока она даже не может научить человека, как стать здоровым. Более того: бойтесь попасть в плен к врачам! Порой они склонны преувеличивать слабости человека и могущество своей науки, создают у людей мнимые болезни и выдают векселя, которые не могут оплатить.

Я люблю медицину, ценю и уважаю своих коллег. Но я люблю и своих пациентов. Я не указал здесь никаких имён, хотя они мне известны. И никогда этого не сделаю.

Будьте здоровы и помните:

Перед лабораторией надо снимать шляпу, а не голову.

Лаборатория в медицинском центре МЕДЕОР в Челябинске

Иммунограмма рака как основа для персонализированной иммунотерапии при уротелиальном раке

Резюме

Контекст:

Ужасающие перспективы уротелиального рака (ЯК) изменились с введением иммунотерапии. Тем не менее, многие пациенты не отвечают, а отличительные биомаркеры в настоящее время отсутствуют. Появление этого нового арсенала иммунотерапевтических методов лечения в сочетании со сложной биологией иммунологического ответа опухоли требует разработки всеобъемлющей структуры, которая может обеспечить обзор важных иммунологических процессов, действующих у отдельных пациентов.

Цель:

Разработать комплексную основу, основанную на параметрах, специфичных для опухоли и хозяина, для понимания иммунотерапевтического ответа при ЯК. Эта структура может дать информацию для рациональных клинических испытаний, основанных на биологии, и в конечном итоге направить нас к индивидуальному лечению пациентов.

Получение доказательств:

Был проведен обзор литературы по иммунотерапии ЯК, данным клинических испытаний и биомаркерам ответа на ингибирование контрольных точек.

Синтез доказательств:

Здесь мы предлагаем иммунограмму ЯК, основанную на имеющихся в настоящее время клинических и трансляционных данных.Иммунограмма ЯК описывает несколько параметров, специфичных для опухоли и хозяина, которые необходимы для успешного иммунотерапевтического лечения. Эти семь параметров включают чужеродность опухоли, инфильтрацию иммунных клеток, отсутствие ингибирующих контрольных точек, общую производительность и иммунный статус, отсутствие растворимых ингибиторов, отсутствие ингибирующего метаболизма опухоли и чувствительность опухоли к иммунным эффекторам.

Выводы:

Продольная интеграция индивидуальных параметров пациента может в конечном итоге привести к индивидуализированной и динамической иммунотерапии, чтобы приспособиться к дарвиновским силам, которые управляют эволюцией опухоли.Включение многопараметрических биомаркеров в модели количественного прогнозирования станет ключевой задачей для интеграции иммунограммы в повседневную клиническую практику.

Краткое описание пациента:

Здесь мы предлагаем иммунограмму уротелиального рака, новый способ описания важных иммунологических характеристик пациентов с уротелиальным раком и их опухолей. Семь характеристик определяют вероятность иммунологического ответа опухоли. Используя эту иммунограмму, мы стремимся лучше понять, почему некоторые пациенты реагируют на иммунотерапию, а некоторые нет, чтобы в конечном итоге улучшить противоопухолевую терапию.

Ключевые слова: Уротелиальный рак, Иммунотерапия, Ингибиторы иммунных контрольных точек, Цитотоксический Т-лимфоцит-ассоциированный белок 4, Запрограммированная гибель клеток 1, лиганд рецептора запрограммированной клеточной смерти 1, Биомаркеры

1. Введение

Введение блокады контрольных точек ( CPB) изменил схему лечения метастатического уротелиального рака (mUC) [1,2]. Тем не менее, многие пациенты не испытывают клинической пользы от одного только анти-PD- (L) 1. Хотя наблюдаются потенциально важные ассоциации между биомаркерами и клиническими ответами на CPB, эти биомаркеры еще не готовы для клинической практики, пока не будут проспективно подтверждены в клинических исследованиях.Неоднородность предшествующих терапий и использование архивной ткани для разработки биомаркеров и дальнейшей интерпретации облаков. В 2016 году Бланк и его коллеги [3] предложили иммунограмму рака, теоретическую основу, которая объединяет кандидатные биомаркеры, чтобы в конечном итоге информировать индивидуальное лечение с помощью многопараметрических биомаркеров. Иммунограмма была построена на предположении, что активность Т-клеток является основным эффекторным механизмом, на который влияют семь несвязанных иммуногенных параметров: чужеродность опухоли, общий иммунный статус, способность к инфильтрации иммунных клеток, отсутствие контрольных точек, отсутствие растворимых ингибиторов, отсутствие ингибитора. метаболизм опухоли и чувствительность опухоли к иммунным эффекторным механизмам.

Недавно эта концепция была распространена на немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) [4]. Здесь мы предлагаем иммунограмму рака специально для пациентов с уротелиальным раком (ЯК). Основные цели: (1) лучше понять сложность противоопухолевого иммунного ответа при ЯК и, таким образом, облегчить трансляционные исследования, и (2) помочь определить приоритетность биомаркеров, которые должны быть проспективно протестированы в клинических исследованиях, что в конечном итоге приведет к многофакторной модели, которая может лучше предсказать клинический ответ на CPB при ЯК.

2. Сбор доказательств

Поиск в PubMed / Medline проводился по таким терминам, как рак уротелия, рак мочевого пузыря, иммунотерапия, биомаркеры, ингибирование контрольных точек, ингибиторы контрольных точек, блокада контрольных точек, анти-CTLA-4, анти-PD-1 и анти-PD-L1. Дополнительная литература была найдена с использованием подхода «снежного кома». Были включены соответствующие данные с недавних конференций.

3. Обобщение доказательств

3.1. Иммунограмма UC

Иммунограмма UC () представляет собой теоретическую основу с многопараметрическими кандидатными биомаркерами, структурированными вокруг семи осей с целью выявления наиболее важных факторов, определяющих противоопухолевый иммунный ответ.Доступные данные для каждой оси, основанные на результатах, полученных в UC, если таковые имеются, рассмотрены ниже.

Иммунограмма рака уротелия. Предлагаемая иммунограмма рака для пациентов с ЯК отражает семь ключевых иммунологических осей и лежащих в их основе биомаркеров (курсив), которые способствуют успешному лечению иммунотерапией. Иммунограмма построена на предположении, что активность Т-клеток является основным эффекторным механизмом, на который влияют эти семь несвязанных осей. Внешняя область графика отображает наиболее благоприятный иммунный статус для лечения иммунотерапией.В приведенном выше примере с гипотетическим пациентом линия соединяет семь параметров в очень благоприятной ситуации для иммунологического противоопухолевого ответа. Несколько примеров онкологических иммунограмм пациентов с ЯК, которые лечились анти-PD-L1 в исследовании IMvigor210, можно найти в Дополнительных материалах (Приложения к иммунограмме уротелиального рака).

IDO = индоламин-2,3-диоксигеназа 1; IFNg = гамма-интерферон; IL = интерлейкин; ЛДГ = лактатдегидрогеназа; NLR = отношение нейтрофилов к лимфоцитам; TGF-β = трансформирующий фактор роста бета; ЯК = уротелиальный рак; VEGF = фактор роста эндотелия сосудов; ВОЗ = Всемирная организация здравоохранения.

3.2. Инородность опухоли

3.2.1. Мутации опухоли

Адаптивная иммунная система может распознавать особенности опухоли как «чужеродные» и вызывать иммунный ответ. Раковые антигены включают иммунопривилегированные пептиды или генетически измененные пептиды (неоантигены) [5]. Было высказано предположение, что высокая мутационная нагрузка опухоли (TMB) и нагрузка неоантигенов связаны с более высокой вероятностью иммунотерапевтического ответа. Соответственно, пембролизумаб проявляет замечательную активность при раке с дефицитом репарации ошибочного спаривания (MMR) [6], что приводит к очень высокой частоте мутаций.Предварительный анализ статуса MMR в образцах опухолей ЯК показал, что дефицит MMR особенно наблюдался при уротелиальном раке верхних трактов [7]. Интересно, что пять из этих пациентов с дефицитом MMR лечились CPB, и все показали устойчивый ответ, включая три полных ответа [7]. После меланомы и рака легкого ЯК имеет самую высокую частоту соматических мутаций [8]. В клинических испытаниях атезолизумаба [9] и ниволумаба [10,11] ответ опухоли был связан с TMB. Более того, экспрессия APOBEC3A / 3B [12] и мутации в генах, участвующих в ответе на повреждение ДНК [13], были связаны с TMB и ответом на CPB.

3.2.2. Молекулярные подтипы

Профилирование транскриптомов в проекте «Атлас ракового генома» (TCGA) показало, что UC можно сгруппировать в молекулярные подтипы [8,14]. Эти молекулярные подтипы были связаны с ответом на атезолизумаб в исследовании IMvigor210 [9]. Сигнатуры экспрессии генов использовали для различения базальных и просветных подтипов, определенных TCGA у 195 пациентов с ЯК. Частота объективного ответа (ЧОО) была самой высокой в ​​подтипе просветного кластера II (34%), по сравнению с 10% для кластера I, 16% для кластера III и 20% для кластера IV [9].Напротив, в исследовании Checkmate 275 с ниволумабом самая высокая частота ответа (30%) наблюдалась в базальном кластере III, тогда как в просветном кластере II уровень ответа составлял 25% [11]. Поскольку неясно, почему некоторые молекулярные подтипы реагируют на лечение, а некоторые — нет, необходимы большие наборы данных из испытаний фазы III, чтобы лучше понять молекулярные сигнатуры как предикторы иммунотерапевтического ответа.

3.2.3. Вирусные интеграции

Геномные данные из UC были использованы консорциумом TCGA для исследования вирусной интеграции в UC.Эти данные показали, что 6% исследованных опухолей мочевого пузыря содержали вирусную ДНК и транскрипты, в том числе ДНК вирусов ВПЧ и ВК [15]. Вирусные интеграции могут способствовать увеличению инородности опухоли за счет экспрессии вирусных онкогенов, которые могут вызывать иммунный ответ [16]. Роль вирусных интеграций в иммунотерапевтическом лечении ЯК в настоящее время неясна.

3.3. Инфильтрация иммунных клеток

3.3.1. Внутриопухолевые Т-клетки

CD8 + Т-клетки, инфильтрирующие опухоль, играют ключевую роль в противоопухолевом иммунитете, и их присутствие в опухолево-иммунном микроокружении (TME) было связано с более длительным выживанием при некоторых злокачественных новообразованиях [17], включая UC [18].Данные исследования IMvigor210 показали, что плотность CD8 + в области опухоли была связана с ответом на атезолизумаб в mUC [9]. Профили внутриопухолевых Т-клеток могут быть охарактеризованы тремя гистологически разными фенотипами: (1) фенотип иммунного воспаления, отмеченный устойчивым иммунным инфильтратом и экспрессией PD-L1, (2) фенотип иммунного исключения, где Т-клетки особенно присутствуют в строма и (3) фенотип иммунной пустыни, характеризующийся отсутствием инфильтрирующих лимфоцитов [19].В когорте UC IMvigor210 47% опухолей были классифицированы как иммунные исключения, 27% были классифицированы как иммунная пустыня и 26% имели фенотип воспаления [12]. Последний продемонстрировал самый высокий ответ на атезолизумаб и коррелировал с сигналом PD-L1 и эффекторной сигнатурой CD8 T при анализе экспрессии генов. Гены, стимулированные интерфероном гамма (IFNg), и хемокины CXCL9 и CXCL10 были в значительной степени связаны с положительностью PD-L1 и ответом на атезолизумаб [9,12]. Экспрессия иммунных генов, таких как IFNg , CXCL9 и CXCL10 , также была повышена в опухолях mUC, отвечающих на ниволумаб, в исследовании Checkmate 275 [11].Передача сигналов трансформирующего фактора роста бета (TGF-β) была отрицательно связана с ответом в иммуно-исключенных опухолях (описанных ниже).

Несколько сигнальных путей, активируемых при ЯК, были связаны с отсутствием Т-клеточного воспаления, включая гамма-рецептор, активируемый пролифератором пероксисом (PPAR-γ) и рецептор фактора роста фибробластов (FGFR) [20]. Эти сигнальные пути способствуют прогрессированию опухоли и обладают противовоспалительными свойствами и особенно активны в опухолях просвета I [21–23].Ингибирование пути PPAR-γ усиливает воспалительные хемокины и цитокины на моделях мышей [22]. Недавние данные об эрдафитинибе (ингибиторе пан-FGFR) у пациентов с mUC с предварительно заданными изменениями FGFR продемонстрировали устойчивый ответ (ORR 70%) у пациентов с предшествующей CPB [24]. Могут ли ингибиторы FGFR ресенсибилизировать опухоли просвета I к иммунотерапии, еще предстоит изучить.

Используя другой подход, предвзятый агонист CD-122 (рецептор интерлейкина [IL] -2) NKTR-214 плюс ниволумаб показал преимущественную активацию и разрастание эффекторных Т-клеток и NK-клеток по сравнению с T-reg, с замечательной скоростью ответа у онкологических больных. (Диаб и др., ASCO 2018).Интересно, что устойчивые ответы наблюдались также в PD-L1-отрицательных опухолях. Эти предварительные данные о модуляторах PPAR-y, ингибиторах FGFR и NKTR-214 демонстрируют потенциальные стратегии для «зажигания» иммуно-холодового ЯК и восстановления иммунного надзора, как было показано с ингибированием BRAF при меланоме [25].

3.3.2. Ингибирующие иммунные клетки

Помимо присутствия противоопухолевых иммунных клеток, другие субпопуляции иммунных клеток могут способствовать прогрессированию рака за счет активности в отношении иммуносупрессивной среды.Например, T-reg ингибируют функцию CD8 + T-клеток посредством высвобождения иммуносупрессивных цитокинов, включая IL-10 [26]. В небольшой когорте ЯК соотношение CD8 + и T-reg плотностей инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL) было тесно связано с ответом на неоадъювантную химиотерапию (NAC) [27]. Тем не менее, точная роль T-regs в UC остается неясной. Макрофаги — это высокопластичные клетки, и когда они накапливаются в опухолях, они называются ассоциированными с опухолью макрофагами (ТАМ). Макрофаги могут становиться поляризованными и нарушать функцию CD8 + Т-клеток после манипулирования сигналами опухолевого происхождения, включая ангиопоэтин-2, M-CSF, CCL2 и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) [28–30].Посттрансляционная модификация цитокинов и хемокинов, индуцированная ТАМ, препятствует проникновению Т-клеток в опухоль, что приводит к улавливанию CD8 + Т-клеток в строме, таким образом поддерживая иммунно-исключенные и иммунные опухоли пустыни [31]. Новые данные предполагают, что высокая внутриопухолевая плотность ТАМ связана со стадией опухоли и плохой реакцией на NAC при ЯК [32]. Кроме того, было обнаружено, что ТАМ экспрессируют PD-L1 при высвобождении опухолевых цитокинов при раке мочевого пузыря [33]. Тем не менее, точная роль супрессивных иммунных клеток в TME не установлена ​​при UC.Это необходимо, так как истощение ингибирующих клеток может потенциально усиливать опосредованные Т-клетками ответы и оптимизацию параметров иммунограммы, предполагая улучшение условий для CPB [34].

3.4. Отсутствие тормозных постов

3.4.1. PD-L1

В исследованиях фазы II атезолизумаба (Imvigor210) и ниволумаба (Checkmate 275) у пациентов с PD-L1-положительным ЯК наблюдались численно более высокие ЧОО и более длительная общая выживаемость (ОВ) [9,11], тогда как результаты были противоречивыми. существуют для пембролизумаба [1,35].Недавние данные продемонстрировали, что PD-L1 полагается на CMTM6 / 4 (молекула, стабилизирующая поверхностную экспрессию PD-L1), чтобы эффективно выполнять свою иммуносупрессивную роль. Блокирование CMTM6 реактивировало эффекторные Т-клетки и может представлять новую стратегию нацеливания на ось PD-1 / PD-L1 [36]. Помимо ограниченных знаний о регуляции PD-L1, вариабельность тестов PD-L1, сопровождаемая пространственно-временной динамикой экспрессии, объясняет слабость PD-L1 как биомаркера одного аналита и необходимость комплексного многопараметрического подхода.

3.4.2. Другие иммунные контрольные точки

Помимо PD-1 / PD-L1, в mUC изучаются многие другие иммунные контрольные точки. Как показано для меланомы [37], комбинация лечения анти-PD- (L) 1 с анти-CTLA-4 может вызвать более высокую частоту ответа по сравнению с одним анти-PD-1 / PD-L1 (Sharma et al, SITC 2016). Другие интересные мишени, изученные в клинических испытаниях (дополнительная таблица 1), включают Т-клеточный иммуноглобулин и муцин-домен-3 (TIM-3), Т-клеточный иммунорецептор с доменами Ig и ITIM, ген 3 активации лимфоцитов (LAG-3). , и НКГ2А.Эти контрольные точки могут быть выражены на исходном уровне или могут быть вызваны лечением, направленным на PD-1 / PD-L1, что указывает на приобретенную резистентность [38,39]. Недавние данные по анти-LAG-3 продемонстрировали, что пациенты с рефрактерной меланомой против PD-1 имели 16% ответ на комбинированную терапию анти-PD-1 / LAG-3 [40,41]. Еще более высокие показатели ответа наблюдались у пациентов с положительной реакцией на LAG-3 на внутриопухолевые иммунные клетки, что позволяет предположить, что экспрессия LAG-3 может быть механизмом устойчивости к терапии анти-PD-1. У пациентов с предыдущим ответом на монотерапию анти-PD-1 активация LAG-3 может быть механизмом приобретенной устойчивости, как описано в доклинических моделях [42,43].В явном противоречии с моделью приобретенной устойчивости путем усиления ингибирующих контрольных точек, анализ экспрессии генов в биоптатах во время лечения показал повышенную экспрессию иммунных контрольных точек (например, TIGIT , LAG-3 и TIM-3 ). при лечении анти-PD-1 / PD-L1, особенно у респондеров [44,45]. NKG2A представляет собой ингибирующий рецептор, экспрессируемый как Т-, так и NK-клетками, связывающими HLA-E, часто используется опухолями для уклонения от иммунного надзора [46]. Введение анти-NKG2A в ранние клинические испытания позволило ввести стратегии одновременной активации как эффекторных клеток, так и расширения противоопухолевых ответов [47, 48].Надеемся, что исследования, проверяющие комбинированную иммунотерапию и стратегии, нацеленные на множественные эффекторные клетки, повысят иммунный ответ.

3.5. Общая работоспособность и иммунный статус

На сегодняшний день большая часть данных, касающихся прогнозирования ответа на иммунотерапию, сосредоточена на внутриопухолевых характеристиках. Несмотря на меньшее внимание, доступность крови пациента делает биомаркеры крови привлекательным подходом, который может способствовать отбору пациентов для лечения иммунотерапией.Ретроспективное исследование 720 пациентов с метастатической меланомой, получавших ипилимумаб, продемонстрировало, что повышение абсолютных уровней нейтрофилов значительно снижает общую выживаемость и выживаемость без прогрессирования (ВБП) [49]. Высокое количество лимфоцитов CD4 + / CD8 + было связано с улучшением выживаемости после лечения меланомой против CTLA-4, тогда как снижение количества лимфоцитов коррелировало с плохим исходом [50]. Несколько других биомаркеров, связанных с иммунным статусом, были связаны с ответом на ипилимумаб у пациентов с меланомой, включая высокое абсолютное количество эозинофилов [51], повышенные уровни периферических Т-клеток и высокое исходное количество периферических Т-рег FoxP3 + [51,52].

В UC данные об общем иммунном статусе немногочисленны. Отношение нейтрофилов к лимфоцитам (NLR), по-видимому, является прогностическим маркером при ЯК [53]. Недавний предварительный анализ показывает, что низкий NLR и высокий уровень альбумина связаны с уменьшением размеров опухоли и более высоким OS после лечения дурвалумабом у пациентов с ЯК [54]. Другие неблагоприятные прогностические клинические параметры, такие как низкий исходный статус работоспособности или наличие метастазов в костях или печени, являются индикаторами плохого прогноза и отсутствия ответа на КПБ при ЯК [9].Интересно, что Sharma et al (Sharma et al, AACR 2018) недавно показали, что низкие исходные уровни циркулирующих миелоидных супрессорных клеток (MDSC) были связаны с более длительным OS в испытании Checkmate 275, тестирующем ниволумаб на mUC. Кроме того, MDSC в периферической крови были отрицательно связаны с патологической стадией цистэктомии, особенно у пациентов, получавших NAC [55]. Будущие исследования позволят выяснить, обладают ли составные биомаркеры, полученные из крови до лечения и во время лечения, биомаркерным потенциалом при ЯК, укрепляя структуру иммунограммы и улучшая наше понимание противоопухолевых ответов, чтобы в конечном итоге предсказать клинический ответ.

3.6. Отсутствие растворимых ингибиторов

Растворимые иммунодепрессивные факторы (т.е. цитокины и факторы роста) могут создавать враждебные и иммунодепрессивные TME. Иммунодепрессивные цитокины, такие как IL-10 и TGF-β, часто высвобождаются опухолевыми клетками, T-reg, MDSC или фибробластами и являются решающими регуляторами истощения T-клеток в резистентных опухолях [28,56]. Повышенный уровень IL-10 может вызывать иммуносупрессию, способствуя поляризации T-reg [57] и увеличивая экспрессию PD-L1 на дендритных клетках и ТАМ, что приводит к опосредованному PD-L1 истощению Т-клеток [58].При ЯК более высокие уровни сывороточного IL-10 были обнаружены в опухолях высокой степени злокачественности по сравнению с опухолями более низкой степени злокачественности, тогда как более высокие уровни IL-10 в моче были связаны с плохой безрецидивной выживаемостью.

TGF-β играет важную роль в ангиогенезе и иммуносупрессии [59,60]. Недавние данные продемонстрировали, что TGF-β может напрямую нарушать функцию CD8 + T-клеток путем подавления функциональных эффекторных белков (например, гранзимов и перфоринов) [59], а высокие уровни TGF-β, как было показано, являются показателем плохого прогноза в резектабельной мышце. -инвазивный рак мочевого пузыря (MIBC) [61].В углубленном анализе исследования IMvigor210 невосприимчивость к атезолизумабу была связана с передачей сигналов TGF-ß в фибробластах, особенно у пациентов с иммунно-исключенными опухолями [12]. В модели мышей, демонстрирующей иммунно-исключенный фенотип, лечение анти-TGF-ß плюс анти-PD-L1 снижало передачу сигналов TGF-ß в стромальных клетках, усиливало внутриопухолевый трафик Т-клеток и индуцировало опосредованное Т-клетками отторжение опухоли [12 ]. Аденозин также может нарушить функцию Т-клеток. Аденозин связывает рецептор A2A на Т-клетках и ингибирует пролиферацию Т-клеток и цитолитическую функцию [62], хотя также известно, что он способствует метастазированию посредством передачи сигналов A2B на опухолевые клетки [63].Более того, CD73 превращает АМФ в аденозин и, как известно, является индикатором плохого прогноза при ЯК [64]. Интересно, что опухоли PD-L1- / CD73 + показали более низкие значения TIL по сравнению с опухолями PD-L1 + / CD73–, предполагая, что CD73 может играть роль в исключении Т-клеток и стимулировании опухолей иммунной пустыни [64]. Другой механизм, используемый опухолевыми клетками для нарушения функции Т-клеток, — это секреция VEGF [65]. VEGF способствует ангиогенезу опухоли, напрямую ухудшает функцию Т-клеток и способствует прогрессированию опухоли при ЯК [65,66].Рамуцирумаб, антитело, нацеленное на рецептор-2 VEGF, показало улучшение ВБП при добавлении к доцетакселу при ЯК второй линии [67]. При раке почек и легких комбинация атезолизумаба и бевацизумаба (анти-VEGF) показала клиническую пользу у пациентов с метастазами [68], и эта стратегия в настоящее время изучается у пациентов с распространенным ЯК. Недавняя работа продемонстрировала, что воспалительные опухоли характеризуются высокой экспрессией циклооксигеназ (COX), простагландина E2 (PGE2) и IL-6, которые известны своей иммуносупрессивной активностью [69,70].В частности, IL-6 стимулирует гепатоциты синтезировать CRP и, таким образом, отмечает CRP как суррогат иммуносупрессивных опухолей [70]. Ретроспективный анализ 88 пациентов с MIBC, получавших химиолучевую терапию, показал, что повышенный уровень СРБ до лечения предсказывает плохой прогноз [71]. Никакие исследования не связывали уровни CRP с клиническим исходом при CPB при UC.

3,7. Отсутствие ингибирующего метаболизма опухоли

Недавно Реннер и др. [72] опубликовали обзор метаболических признаков рака, в котором описывается метаболическое взаимодействие между опухолевыми и иммунными клетками как динамическая система, которую можно перевоспитать с помощью лечения рака.Высокая потребность в энергии и противоопухолевый иммунитет заставляют опухолевые клетки, MDSC или гранулоциты сильно экспрессировать лактатдегидрогеназу (LDH), индоламин-2,3-диоксигеназу 1 (IDO1), COX, переносчики глюкозы, глутаминазу, аргиназу и окислительное фосфорилирование [72,73 ]. В результате необходимое топливо для эффективного функционирования Т-клеток, такое как глюкоза и аминокислоты, истощается в TME и, как следствие, ухудшает противоопухолевую функцию Т-клеток [74]. Более того, лактат и другие продукты метаболизма, такие как кинуренины и PGE2, дополнительно ухудшают противоопухолевую функцию Т-клеток [72].IDO1 — это фермент, который превращает триптофан в кинуренин и часто активируется опухолями, истощая противоопухолевые Т-клетки [75]. В ткани рака мочевого пузыря IDO1 экспрессировался в 57% случаев, в то время как в здоровой ткани мочевого пузыря только 18% экспрессировались IDO1. Более высокая экспрессия IDO1 была связана с плохой гистологической степенью (инвазивность опухоли) и плохим клиническим исходом при раке мочевого пузыря [76]. В модели рака мочевого пузыря у мышей на IDO1 была направлена ​​siRNA, что привело к усилению противоопухолевого иммунитета [77]. Epacadostat [78] и BMS-986205 [79], оба селективных блокатора IDO1, были недавно протестированы в комбинации с анти-PD-1 в исследованиях с одной группой и показали эффективность в отношении mUC [79].Однако недавние рандомизированные данные по меланоме не смогли продемонстрировать преимущества эпакадостата, что поставило под сомнение валидность этой стратегии у невыбранных пациентов (Long et al, ASCO 2018). Причины неудач могут включать в себя отсутствие подходящих биомаркеров для отбора пациентов. Несмотря на отрицательные результаты испытаний эпакадостата при меланоме, в ЯК продолжаются рандомизированные испытания комбинаций анти-IDO1 с CPB, основанные на сигналах эффективности в одноранговых испытаниях и доклиническом обосновании.

Другие аминокислоты, необходимые для метаболизма и функционирования Т-клеток и опухолевых клеток, — это аргинин и глутамин.Доклинические данные продемонстрировали, что истощение аргинина ингибирует активацию и функцию Т-клеток и NK-клеток и способствует образованию MDSCs in vivo [80], тогда как депривация глутамина особенно способствует поляризации T-reg [81]. CB-1158 нацелен на аргиназу, чтобы предотвратить депривацию аргинина, и в настоящее время тестируется с пембролизумабом или без него в mUC. Препарат, нацеленный на глутаминазу (CB-839), в настоящее время проходит испытания в рамках фазы I / II клинических испытаний по оценке CB-839 в комбинации с ниволумабом у пациентов с меланомой, почечно-клеточной карциномой и НМРЛ.Высокие уровни ЛДГ коррелируют с плохим прогнозом и более низким ЧОО для КПБ при меланоме [82]. Было обнаружено, что при ЯК у пациентов с высоким содержанием лактата в сыворотке плохой прогноз [83]. Кроме того, ЛДГ включен в шестифакторную прогностическую модель, разработанную Пондом и др. [84]. Эта модель была разработана для прогнозирования ОС у резистентных к платине пациентов с mUC, получавших атезолизумаб, но требует дальнейшего уточнения и проверки на более крупных наборах данных, включая наборы данных с другими агентами, нацеленными на PD-1 / PD-L1. Таким образом, точная связь между уровнями ЛДГ и реакцией на КПБ требует дальнейшего исследования.В заключение, вмешательство в метаболические пути может обеспечить способы прямого или косвенного устранения опухолевых клеток путем перепрограммирования метаболических путей для усиления функции CD8 + Т-клеток.

3.8. Чувствительность опухоли к иммунным эффекторам

3.8.1. Презентация и распознавание антигена

Активация CD8 + Т-клеток зависит от нескольких одновременных сигнальных взаимодействий, включая связывание Т-клеточного рецептора (TCR) с комплексом MHC-антиген на опухолевых клетках и костимулирующую передачу сигналов [85].Опухоли могут ускользать от иммунного надзора CD8 + Т-клеток за счет генетических и эпигенетических изменений в антигенпредставляющем аппарате. Ранние исследования эпигенетических модификаторов привели к повторной экспрессии ассоциированных с опухолью антигенов и комплексов MHC-антиген, тогда как потенциальный синергизм наблюдался при сочетании эпигенетических модификаторов с CPB [86,87]. Сходным образом точечные мутации и делеции в бета-2-микроглобулине (B2M), важнейшем строительном блоке, необходимом для сборки MHC класса I, были обнаружены почти в 30% опухолей меланомы при устойчивости к CPB [88].Анализ прогрессирующего опухолевого поражения, полученного от пациента с колоректальным раком, получавшего терапию TIL (анти-KRAS G12D, представленный HLA-C * 08: 02), показал потерю HLA-C * 08: 02 в рецидивирующем поражении [89] . В UC ранние данные предполагают, что потеря HLA из-за мутаций в генах β2-микроглобулинов не была основной причиной низкого присутствия HLA класса I. Напротив, скоординированное подавление транскрипции компонентов HLA B2M и APM оказалось ключевым элементом необратимой потери HLA [90]. Хотя доказательства в настоящее время отсутствуют, вероятно, что вызванные иммунотерапией изменения в антиген-презентирующем механизме также происходят при ЯК.

3.8.2. Репертуар TCR

Репертуар TCR также участвует в распознавании антигена. В ретроспективном анализе меланомы и рака простаты пациенты, ответившие на ипилимумаб, показали стабильность клонотипа TCR в PBMC через 4 недели после начала лечения [91]. В mUC стойкие ответы на лечение атезолизумабом были связаны с более низкой исходной клональностью TCR в периферической крови [92], предполагая, что большее разнообразие рецепторов TCR может увеличить вероятность присутствия опухолеспецифической популяции Т-клеток.Недавние провокационные данные показали, что неоадъювантное лечение ипилимумабом плюс ниволумаб индуцировало большее количество увеличившихся и вновь обнаруживаемых клонов TCR в периферической крови по сравнению с адъювантной настройкой при меланоме 3 стадии (Rozeman et al, ESMO 2017).

3.8.3. Передача сигналов IFNg

Эффекторная функция CD8 + Т-клеток может быть нарушена, несмотря на успешное связывание опухолевых клеток. Утрата передачи сигналов IFNg была связана с устойчивостью к иммунотерапии против CTLA-4 [93]. При меланоме мутационный анализ показал, что первичная резистентность к ипилимумабу была связана с мутациями рецепторов IFNg 1 и 2 ( IFNGR1 и IFNGR2 ), фактора регуляции интерферона 1 и JAK1 и JAK2, , позволяющих раковым клеткам ускользать. от IFNg-опосредованного убийства [93].Кроме того, было показано, что опосредованная TGF-β подавляющая регуляция гранзимов и перфоринов нарушает опосредованное CD8 + T-клетками противоопухолевое уничтожение [59].

4. Выводы

В последние годы было предложено несколько биомаркеров иммунотерапевтического ответа. Тем не менее, эти биомаркеры не готовы для включения в клиническую практику из-за недостаточной дискриминирующей способности. Сбор тканей для анализа биомаркеров был неоднородным (например, трансуретральная резекция против цистэктомии против биопсии метастатического участка) с вариабельностью в предшествующих курсах лечения.Необходимы более однородный сбор тканей в проспективных исследованиях и включение этой систематической ошибки в интерпретацию биомаркеров. Кроме того, некоторые биомаркеры могут быть более динамичными, чем другие, и за ними следует внимательно следить [94]. Иммунограмма ЯК представляет собой постоянно развивающуюся теоретическую основу, которая включает многомерные биомаркеры-кандидаты, которые должны быть измерены и подтверждены в клинических исследованиях, что в конечном итоге будет способствовать принятию клинических решений. Отдельного пациента можно оценить по каждой из семи осей, чтобы оценить вероятность возникновения ответа и определить, какие факторы могут все еще препятствовать ответу.Мы провели такую ​​оценку для нескольких пациентов, получавших CPB (и Дополнительный материал, Применение иммунограммы уротелиального рака). Индивидуализированные данные о параметрах иммунограммы могут быть получены с помощью геномики опухоли, сигнатур иммунных генов, иммуногистохимии и анализов крови, и их можно отслеживать в ходе заболевания, чтобы соответствующим образом скорректировать лечение. Ключевой задачей на ближайшее будущее будет изучение возможности включения данных о параметрах иммунограммы ЯК в количественные прогностические модели, которые можно использовать в клинической практике.

Примеры иммунограмм пациентов с уротелиальным раком, получавших ингибирование контрольной точки анти-PD- (L) 1 второй линии. На иммунограммах UC внешняя область графика отображает наиболее благоприятный статус для опосредованного Т-клетками противоопухолевого иммунного ответа, на который влияют семь несвязанных осей. Показатели иммунограммы основаны на доступных данных от отдельных пациентов по этой конкретной оси. Оранжевая стрелка: сдвиг иммунограммы после обработки анти-PD- (L) 1. Оси иммунограммы, по которым нет доступных данных, отмечены оранжевой звездой (*) и на иммунограмме были квалифицированы как благоприятные (гипотетически).(A) Пациент с высокой мутационной нагрузкой, благоприятным классом II TCGA и значительной инфильтрацией CD8 + Т-лимфоцитами. Пациент имел благоприятные сигнатуры иммунной активации CD8-эффектора и IFNg, тогда как оценка PD-L1 (IC2) была неблагоприятной и могла иметь нарушенный естественный противоопухолевый ответ. Пациент имел 1 балл по шкале ВОЗ, не имел висцеральных метастазов и имел благоприятное соотношение NLR и LDH. Все параметры, за исключением высокой экспрессии PD-L1, были благоприятными для иммунного ответа. Лечение анти-PD-L1 корректирует единственный неблагоприятный параметр, который мог помешать Т-клеткам выполнять противоопухолевый ответ, и приводил к полному ответу, который все еще продолжается (OS в настоящее время 1230 дней).(B) Пациент с неблагоприятной инородностью опухоли (низкий TMB, TCGA IV) с резкой внутриопухолевой инфильтрацией CD8 + Т-клетками и благоприятными сигнатурами активации CD8-эффектора и IFNg. Окружающая среда опухоли показывала высокую экспрессию PD-L1 IC (PD-L1 IC2), что могло препятствовать Т-клеткам элиминировать опухолевые клетки. У этого пациента был ВОЗ 1 без висцеральных метастазов, с благоприятным соотношением NLR и LDH. Хотя у этого пациента была резкая внутриопухолевая инфильтрация CD8 + Т-клетками с благоприятной сигнатурой иммунного гена, лечение анти-PD-L1 не привело к опухолевому ответу, и OS (117 дней) была ограничена.В этом случае участие других путей ингибиторной контрольной точки, регуляторных Т-клеток или присутствие растворимых ингибиторов (например, TGF-β) может объяснить устойчивость к анти-PD-L1. Кроме того, несмотря на наличие достаточной инфильтрации CD8 + Т-лимфоцитов, ограниченный репертуар опухолеспецифических Т-клеток может объяснить отсутствие ответа, несмотря на наличие достаточной инфильтрации CD8 + Т-лимфоцитами. Лечение анти-PD- (L) 1 / CTLA-4 гипотетически могло привести к более широкому и эффективному иммунному ответу. Дополнительные примеры можно найти в дополнительном материале (Применение иммунограммы уротелиального рака).IC = иммунная клетка; IDO = индоламин-2,3-диоксигеназа 1; IFNg = гамма-интерферон; IL = интерлейкин; ЛДГ = лактатдегидрогеназа; NLR = отношение нейтрофилов к лимфоцитам; ОС = общая выживаемость; TCGA = Атлас генома рака; TGF-β = трансформирующий фактор роста бета; TMB = мутационная нагрузка опухоли; ЯК = уротелиальный рак; VEGF = фактор роста эндотелия сосудов; ВОЗ = Всемирная организация здравоохранения.

Сноски

Раскрытие финансовой информации: Михиль С. ван дер Хейден подтверждает, что все конфликты интересов, включая конкретные финансовые интересы, отношения и аффилированность, относящиеся к предмету или материалам, обсуждаемым в рукописи (например, занятость / принадлежность , гранты или финансирование, консультации, гонорары, владение акциями или опционы, свидетельства экспертов, гонорары или патенты, поданные, полученные или ожидающие рассмотрения), являются следующими.Н. ван Дейк. никто. S.A. Funt. поддержка исследований — Genentech / Roche, AstraZeneca; долевое участие — Urogen Pharma и Allogene Therapeutics. C.U. Пустой. гонорары за консультационные услуги (институту) — BMS, Merck / MSD, Novartis, Roche, Lilly, GSK, Pfizer и GenMab; финансирование исследований — Novartis и BMS. Т. Паулз. гонорары за консультационные услуги — BMS, Pfizer, Merck / MSD, AstraZeneca, Lilly, Roche / Genentech и Exelexis; финансирование исследований — AstraZeneca и Roche / Genentech. Дж. Э. Розенберг. гонорары за консультационные услуги — BMS, Merck / MSD, AstraZeneca / Medimmune, Lilly, Roche / Genentech, Agensys, Inovio Pharmaceuticals и EMD Serono; финансирование исследований — AstraZeneca / Medimmune, Incyte, Roche / Genentech, Mirati Therapeutics, Oncogenex, Novartis и Viralytics; акции / собственность — Merck and Illumina.РС. ван дер Хейден. гонорары за консультационные услуги (институту) — AstraZeneca / Medimmune, Roche / Genentech, BMS и Merck / MSD; финансирование исследований — BMS и Astellas.

Заявление издателя: Это PDF-файл неотредактированной рукописи, принятой к публикации. В качестве услуги для наших клиентов мы предоставляем эту раннюю версию рукописи. Рукопись будет подвергнута копирайтингу, верстке и проверке полученного доказательства, прежде чем она будет опубликована в окончательной форме. Обратите внимание, что во время производственного процесса могут быть обнаружены ошибки, которые могут повлиять на содержание, и все юридические оговорки, относящиеся к журналу, имеют отношение.

Десятилетие ингибиторов иммунных контрольных точек в терапии рака

Главным достижением в лечении рака за последнее десятилетие, несомненно, стало внедрение иммуномодуляторов, нацеленных на Т-клетки, блокирующих иммунные контрольные точки CTLA-4 и PD1 или PDL1. В 2011 году был утвержден ипилимумаб, первое антитело, блокирующее иммунную контрольную точку (CTLA4). За этим быстро последовала разработка моноклональных антител, направленных на PD1 (пембролизумаб и ниволумаб) и PDL1 (атезолизумаб и дурвалумаб).Антитела против PD1 / PDL1 стали одними из наиболее широко назначаемых противоопухолевых препаратов. Иммуномодуляторы, нацеленные на Т-клетки, в настоящее время используются как отдельные агенты или в сочетании с химиотерапией в качестве первой или второй линии лечения примерно 50 типов рака. В настоящее время проводится более 3000 активных клинических испытаний модуляторов Т-клеток, что составляет около 2/3 от всех онкологических исследований ¹ .

Тем не менее, десять лет назад, незадолго до эры ингибиторов иммунных контрольных точек (ICI), иммунотерапия солидных опухолей находилась в тяжелом положении.В его основе лежали иммуноцитокины, такие как интерлейкин-2 или альфа-интерферон, которые были малоэффективными и высокотоксичными. В ходе клинических исследований были протестированы различные формы противораковых вакцин, которые в большинстве своем оказались неэффективными ² . У иммунотерапии была небольшая и сокращающаяся аудитория на международных онкологических встречах, в то время как сеансы, связанные с новой быстро развивающейся областью таргетной терапии, были переполнены. Однако после первого успеха иммунотерапии ICI и до сегодняшнего дня ситуация изменилась, иммунотерапия лидирует в этой области, и иммунологи восстановили большое влияние в исследованиях рака, о чем свидетельствует присуждение Нобелевской премии по медицине 2018 года двум иммунологам, которые были у истоков концепции иммунотерапии на основе ICI Джеймс Эллисон и Тасуку Хондзё ³ .

Радикально новое видение лечения рака

Это почетное место в области лечения рака, несомненно, заслужено благодаря огромному клиническому прогрессу, достигнутому ICI в лечении некоторых агрессивных видов рака, таких как метастатическая меланома, первое заболевание, которое Показана эффективность ICI ^4,5 . Иммунотерапия ICI не только продемонстрировала поразительную эффективность у некоторых пациентов, но и произвела революцию в области онкологии более чем одним способом. Это изменило способ, которым врачи оценивают эффективность лечения или устраняют побочные эффекты.Это также привело к более целостному взгляду на больных раком, помимо обычных раковых клеток, и создало новые и плодотворные взаимодействия между иммунологами, онкологами и другими специалистами по органам.

Действительно, успех иммунотерапии, основанной на разрушении рака через активацию иммунной системы хозяина, привел к более полному представлению о раке. Теперь он учитывает не только раковые клетки, которые должны быть нацелены и уничтожены, но также и иммунную среду рака. Теперь мы полностью осознаем малую значимость обычных доклинических испытаний противораковых препаратов, проводимых на культивируемых линиях раковых клеток и животных с ослабленным иммунитетом.Последние полностью игнорируют иммунную систему. В настоящее время все шире используются новые и более надежные доклинические модели с использованием иммунокомпетентных животных.

Новые инструменты для трансляционных и клинических исследований теперь включают иммунные параметры, такие как наличие и состояние активации Т-лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, экспрессия иммунной контрольной точки PDL1 или оценка мутационной нагрузки опухоли (TMB) ⁶ . Интересно, что TMB, который представляет собой соотношение несинонимичных соматических мутаций на мегабазу опухолевой ДНК, исторически был в основном связан с устойчивостью к цитотоксической или таргетной терапии.С другой стороны, при иммунотерапии ICI возможность множественных неоантигенов, происходящих из сильно мутировавших опухолей, оказывается благоприятным фактором для ответа ⁷ . Вот почему рак легких у курильщиков, характеризующийся высоким уровнем индуцированных табаком генетических соматических мутаций, лучше реагирует на иммунотерапию, чем рак легких, связанный с более низким уровнем ТМВ, у некурящих пациентов ⁷ . Корреляция между высоким TMB и ответом на иммунотерапию привела к авторизации препаратов против PD1 для высоко мутировавших видов рака, связанных с дефицитом репарации ошибочного спаривания ДНК (микросателлитная нестабильность) ⁸ .Это редкий пример в истории лечения рака, когда лекарство было разрешено на основе биологического онкологического механизма, независимо от основного типа опухоли.

Иммунотерапия ICI может вызвать замедленный ответ опухоли даже после первоначального увеличения размера метастазов. Такие псевдопрогрессы могут быть следствием отсроченной эффективности иммунотерапии или начального набора иммунных клеток, что приводит к временному увеличению размера опухоли. Таким образом, обычные стандартные критерии радиологической оценки (RECIST-1.1), обычно применяемые для мониторинга ответов на химиотерапию или таргетную терапию, не были адаптированы к этой новой кинетике ответов. В систему оценки iRECIST (иммунный RECIST) ⁹ были включены новые руководящие принципы для критериев оценки, включая увеличенную задержку для подтверждения или опровержения увеличения опухоли.

Нам также необходимо изменить основные конечные точки клинических испытаний, оценивающих ICI. Преимущество ICI не отражается должным образом классическими конечными точками, такими как медиана выживаемости без прогрессирования, частота ответа или отношение рисков (HR), потому что ICI может иметь отсроченный эффект с переменной долей выживших в долгосрочной перспективе (плато или хвост Кривая).Анализ доли пациентов, которые живы или не прогрессируют в поздние временные точки (контрольные анализы) или ограниченного среднего времени выживания (измерение средней выживаемости от момента времени 0 до указанного времени), более адаптированы к иммунотерапии ICI ¹⁰ .

Еще одно глубокое изменение связано с типом побочных эффектов, связанных с иммунотерапией ¹¹ . Неудивительно, что они радикально отличаются от тех, которые были связаны с предыдущим лечением, цитотоксической или таргетной терапией.Поскольку механизм действия ICI основан на подавлении физиологического тормоза иммунной активации, они часто имеют нецелевые эффекты, приводящие к иммуноопосредованному воспалению различных органов или тканей. Широкий и совершенно новый реестр ятрогенных эффектов, называемых иммуноопосредованными или связанными с иммунитетом, может выглядеть как аутоиммунные заболевания, такие как аутоиммунный тиреоидит, что в конечном итоге приводит к постоянному гипотиреозу или воспалительным заболеваниям кишечника. Иногда они могут быть тяжелыми, особенно когда анти-CTLA и анти-PD1 используются в комбинации, с до 60% нежелательных явлений 3-5 степени.Хотя и редко, смертельный исход, связанный с ИКИ, может произойти, если тяжелое ятрогенное событие, такое как миокардит, энцефалит или острый гипофизит, не удается легко диагностировать и лечить высокими дозами стероидов и более мощных иммунодепрессантов ¹² . Этот новый спектр нежелательных явлений потребовал быстрого и эффективного взаимодействия между лечащими онкологами и специалистами по различным органам, а также терапевтами, чтобы оптимизировать управление широким спектром нежелательных явлений, связанных с иммунной системой.

Надежда на излечение, но для меньшинства пациентов

Одним из наиболее впечатляющих успехов ICI стала длительная ремиссия, несмотря на прекращение лечения, что вселяет большие надежды на излечение у некоторых пациентов ¹³ .Это особенно хорошо документировано у пациентов с меланомой, которые достигают полного ответа, что означает полное исчезновение всех видимых метастазов. Это относится примерно к 20% пациентов с меланомой, получавших лечение анти-PD1 с анти-CTLA-4 или без него. В настоящее время широко признано, что лечение таких пациентов можно прекратить, по крайней мере, через 6 месяцев терапии, поскольку их риск рецидива оценивается менее 10% за 5-летний период наблюдения, который доступен сегодня ¹³ .Столь длительная полная ремиссия болезни была совершенно немыслима до эры ICI. Однако не все типы рака реагируют так же хорошо, как меланома, и данные о возможности прекращения терапии не столь зрелы для других видов рака.

Все еще в меланоме, которая является ведущей областью развития ICI, было показано, что один год адъювантного лечения анти-PD1 снижает риск рецидива после хирургической резекции метастазов в регионарные лимфатические узлы (стадия III) ^14,15 . При других типах рака, таких как рак легких, ICI в настоящее время оценивается как адъювантная терапия.Одно важное изменение для пациентов и врачей связано с тем фактом, что влияние побочных эффектов не одинаково у пациентов с метастатическим раком или у тех, кто получает адъювантное лечение с целью снижения риска рецидива. В последнем случае следует осторожно оценить возможность возникновения серьезных или стойких побочных эффектов. Например, риск гипотиреоза, который возникает у 10% пациентов, принимающих анти-PD1, считается приемлемым в контексте метастатического заболевания.В случае адъювантной терапии этот 10% -ный риск необходимости принимать заместительную гормональную терапию до конца жизни должен быть сбалансирован с ожидаемой пользой лечения.

Отношение пациентов к иммунотерапии рака обычно положительное. Пациенты часто ценят идею борьбы с раком за счет мобилизации собственной иммунной системы. Из-за этой частой приверженности стратегии лечения вполне вероятно, что пациенты могут быть более активно вовлечены в свое лечение и что взаимодействие между пациентами и врачами может быть облегчено, по крайней мере, на этапе начала лечения.

Противоположный эффект состоит в том, что иммунотерапия в некоторой степени является жертвой собственного успеха. Привлекательность этой стратегии лечения среди пациентов и широкой общественности, подкрепленная упрощенным и приукрашенным освещением в средствах массовой информации, вызвала очень большие ожидания и является источником глубокого разочарования у пациентов, для которых лечение ICI не соответствует его ожиданиям, и они все еще остаются большинство.

Veracyte купить у фирмы HalioDx иммуноонкологической диагностики за 260 млн евро

Приобретение позволит Veracyte разрабатывать и производить тестовые наборы для диагностической платформы nCounter.

Платформа мультимодального анализа Immunogram

HalioDx поможет Veracyte расширить партнерский бизнес в области биофармацевтики.(Фото: Адам Радосавлевич из Pixabay)

Компания по геномной диагностике Veracyte согласилась приобрести компанию по иммуноонкологической диагностике HalioDx в рамках сделки стоимостью около 260 миллионов евро.

По условиям сделки, Veracyte выплатит HalioDx 147 млн ​​евро наличными и до 113 млн евро на складе.

HalioDx предоставляет передовые диагностические продукты и услуги онкологам и организациям, занимающимся разработкой лекарственных препаратов.

Компания предлагает ряд решений для оценки иммунитета, включая анализ Immunoscore для оценки иммунного контекста опухоли.

Считается, что тест Immunoscore расширяет меню расширенных диагностических тестов Veracyte.

HalioDx разработала передовую партнерскую экосистему биофармацевтики, чтобы помочь обнаружить клинически значимые сигнатуры биомаркеров, а также продемонстрировать их использование в клинических испытаниях, а также в разработке и коммерциализации полученных результатов IVD и сопутствующих диагностических тестов.

Фирма управляет лабораториями, сертифицированными CLIA, в США и Франции. Он также управляет производством во Франции для разработки, производства и поставки клинических продуктов для диагностики in vitro.

Приобретение HalioDx позволит Veracyte разрабатывать и производить тестовые наборы для диагностической платформы nCounter.

Платформа мультимодального анализа Immunogram

HalioDx поможет Veracyte расширить партнерский бизнес в области биофармацевтики.

Исполнительный председатель

Veracyte Бонни Андерсон сказала: «Приобретение HalioDx будет способствовать нашему долгосрочному росту, предоставляя ключевые стратегические возможности, которые помогут нам реализовать наше мощное видение улучшения результатов для пациентов во всем мире на каждом этапе их пути. .

«Наши предыдущие стратегические приобретения предоставили эксклюзивный глобальный доступ к лучшей в своем классе диагностической платформе и значительно расширенному меню тестирования рака».

Ожидается, что сделка будет завершена в третьем финансовом квартале этого года при соблюдении обычных условий закрытия, включая одобрение иностранных инвестиций во Франции.

HalioDx станет дочерней компанией Veracyte после заключения сделки.

Goldman Sachs выступает в качестве финансового консультанта Veracyte, в то время как Fenwick & West и Latham & Watkins действуют в качестве юридических советников Veracyte в США и Франции.Shearman & Sterling действует как юридический советник HalioDx.

В феврале этого года Veracyte согласилась приобрести американскую компанию по прецизионной онкологии Decipher Biosciences, занимающуюся коммерческой онкологией.

У вас есть интересный контент, которым вы можете поделиться с нами? Введите свой адрес электронной почты, чтобы мы могли связаться с нами.

Патология Т-клеток при системной красной волчанке

Системная красная волчанка (СКВ) характеризуется выработкой широкого спектра аутоантител.Таким образом, это состояние традиционно классифицировалось как «В-клеточное заболевание». Однако убедительные доказательства показали, что без помощи Т-лимфоцитов-помощников «беспомощным» В-клеткам действительно трудно стать достаточно функциональными, чтобы вызвать воспаление, связанное с СКВ. Было признано, что Т-клетки играют решающую роль в патогенности СКВ благодаря их способности взаимодействовать с В-клетками и оказывать им огромную помощь в стимулировании производства аутоантител. Недавно в Т-клетках волчанки был идентифицирован ряд фенотипических и функциональных изменений, которые увеличивают склонность к запуску воспаления, связанного с волчанкой.Здесь будут обсуждаться потенциальные механизмы, включающие изменения в экспрессии Т-клеточных рецепторов, пострецепторной нисходящей передачи сигналов, эпигенетики и окислительного стресса, которые способствуют активации Т-клеток волчанки. Кроме того, будет показано, как регуляторные CD4 +, CD8 + и Т-клетки снижают воспаление, связанное с волчанкой. Наконец, хотя имеющиеся в настоящее время результаты клинических испытаний терапевтических агентов, которые манипулируют Т-клетками, таких как ингибиторы кальциневрина, показывают, что они, по крайней мере, так же эффективны и безопасны, как обычные иммунодепрессанты при лечении волчаночного гломерулонефрита, несомненно, необходимы более крупные клинические испытания для подтверждения этих фактов пока что благоприятные выводы.

1. Введение

Системная красная волчанка характеризуется производством множества аутоантител, которые потенциально вызывают воспаление, связанное с иммунными комплексами, в различных тканях и органах [1]. Нарушение иммунной толерантности считается одним из основных механизмов, запускающих выработку аутоантител В-клетками и образующими антитела клетками, что приводит к воспалению при связывании с аутоантигенами и последующему повреждению тканей [2]. Таким образом, СКВ классически считалась заболеванием, вызванным В-клетками.Недавние убедительные доказательства продемонстрировали, что Т-клетки на самом деле имеют решающее значение в патогенезе СКВ, поскольку они усиливают выработку аутоантител, предлагая существенную помощь В-клеткам за счет стимуляции последних дифференцироваться, пролиферировать и созревать, в дополнение к их поддержке в классе. -переключение аутоантител, которые экспрессируют В-клетки [3]. Следовательно, в настоящее время считается, что СКВ является состоянием, управляемым Т-клетками, и, действительно, нацеливание на молекулы, экспрессируемые на Т-клетках, и их сигнальные пути могут быть одной из потенциальных терапевтических стратегий при СКВ.

По сравнению со здоровыми людьми, ряд исследований продемонстрировал, что Т-клетки, выделенные от пациентов с СКВ, являются аномальными в отношении их фенотипов и функций [4, 5]. Фенотипические и функциональные изменения Т-клеток волчанки, включая увеличение популяции Th27, нарушения физиологии Т-клеточных рецепторов (TCR) и пострецепторной передачи сигналов ниже по течению, оксидативный стресс и эпигенетические изменения приводят к преувеличению ответа TCR на стимулы и склонности Т-клетки волчанки активируются [6].Кроме того, неспособность регуляторных CD4 + и CD8 + Т-лимфоцитов смягчать провоспалительную среду, возникающую при СКВ, вносит свой вклад в патогенность этого состояния [7, 8]. В этом кратком обзоре будет обсуждаться подробный отчет о предполагаемых механизмах нарушения нормальной физиологии Т-клеток и о том, почему регуляторные Т-клетки не могут облегчить провоспалительный ответ при СКВ. Текущее состояние клинических испытаний терапевтических агентов, нацеленных на молекулы, экспрессирующие на и внутри Т-клеток, для лечения СКВ будет обновлено.

2. Т-клетки, их рецепторы и передача сигналов в нормальных условиях и СКВ

2.1. Т-клеточные рецепторы и CD3: краткое обсуждение их нормальной структуры и функций

Т-клетки распознают антигены, представленные им основным комплексом гистосовместимости антигенпрезентирующих клеток через TCR, экспрессируемые на их поверхности. Стимуляция TCR при связывании антигена запускает нижестоящие сигнальные пути, которые обеспечивают различные физиологические функции Т-клеток.Большинство TCR (95%) представляют собой гетеродимеры, которые состоят из цепочки и цепи (рецепторы) и закреплены в плазматической мембране коротким цитоплазматическим хвостом [9]. Незначительная группа (15%) TCR состоит из цепи и цепи (рецепторов), которые экспрессируются в определенных популяциях Т-клеток тимуса и периферических Т-клеток в эпителии [10, 11]. TCR связаны с CD3, который представляет собой серию полипептидов с согласованными аминокислотными последовательностями и отвечает за передачу сигнала при распознавании антигена TCR [9, 12].CD3 состоит из четырех инвариантных полипептидов, а именно,,, и, а комплекс CD3-TCR организован таким образом, что четыре цепи TCR (две и две положительно заряженные цепи) связаны с двумя, двумя, одним и одним цепные полипептиды CD3, которые все заряжены отрицательно [9, 12]. CD3 имеет внеклеточный, трансмембранный и цитоплазматический хвосты, при этом 2 цепи (или ее вариант — цепь) являются самыми длинными цитоплазматическими цепями среди остальных. Цитоплазматические части и цепи критически вовлечены в передачу сигнала TCR, поскольку они обладают иммунорецепторными мотивами активации тирозина (ITAM), которые являются мишенями фосфорилирования различными специфическими протеинкиназами в процессах передачи сигнала [13].Вкратце, ITAM фосфорилируются через несколько минут после вовлечения TCR. ITAM и последующие активируемые пути, такие как путь -ассоциированный белок 70 (ZAP-70), важны для активации Т-клеток [14].

Тесно связанный с CD3, FcR также ассоциируется с ITAM. Однако вместо стимуляции пути ZAP-70 предпочтительно используется путь тирозинкиназы селезенки (Syk) [15, 16]. Стимуляция Syk обычно приводит к большему притоку кальция в клетки, чем тот, который включает путь ZAP-70, вероятно, регулируемый факторами транскрипции c-Jun и Ets2 [17].Такая «перестройка» пострецепторного нижележащего сигнального механизма имеет сильное патологическое значение для Т-лимфоцитов волчанки (обсуждается в следующем разделе).

2.2. Изменения в рецепторах Т-клеток и их сигнальных путях

субъединиц CD3 субоптимально синтезируются в Т-клетках пациентов с СКВ [18]. Более того, очевидно снижение стабильности и увеличение деградации CD3 в Т-клетках волчанки [19–21]. Чтобы заменить дефицитные субъединицы CD3, рецепторы FcR реципрокно активируются и экспрессируются на Т-клетках волчанки [16].Вместо связывания с ZAP-70 для передачи сигналов с помощью субъединиц CD3, FcR связывается с сигнальным путем Syk, и такая «перестроенная» нижерасположенная передача сигналов обеспечивает более сильное фосфорилирование сигнальных молекул и более высокий приток кальция, что усиливает сигналы, полученные из TCR, в Т-клетках волчанки [17 ]. Увеличение внутриклеточного кальция активирует кальциневрин в цитоплазме, что усиливает действие ядерного фактора активированных Т-клеток (NF-ATc2) за счет дефосфорилирующего действия кальциневрина [22].(См. Рисунок 1). Активированный NF-ATc2 изменяет экспрессию некоторых генов, включая ген CD40L Т-клеток волчанки, путем связывания с промотором гена CD40L [22]. CD40L представляет собой костимулирующую молекулу, экспрессируемую на Т-клетках, и ее родственное взаимодействие с CD40, экспрессируемым на В-клетках, способствует дифференцировке, пролиферации и продукции антител последних, а также переключению классов в сочетании с действием IL-10 и IL-21. [23].

Другой механизм, посредством которого Т-клетки волчанки демонстрируют более низкий порог активации, — это присутствие преагрегированных липидных рафтов на их клеточной мембране [24].Липидные рафты — это богатые липидами области на поверхности клетки, где концентрируются TCR и связанные с ними сигнальные молекулы [25, 26]. В инактивированном состоянии липидные рафты равномерно распределены по клеточной мембране, но в Т-клетках волчанки кластеризация липидных рафтов была продемонстрирована даже при минимальной стимуляции [24, 27]. Сгруппированные липидные рафты увеличивают нижний порог передачи сигнала, поскольку молекулы, необходимые для активации рецепторов, физически сгруппированы в Т-клетках волчанки.Чтобы доказать эти потенциальные механизмы, внутрибрюшинное введение фармакологически активных соединений, которые нарушают (MCD) и усиливают (холерный токсин B) кластеризацию липидных рафтов, продемонстрировало снижение и стимулирование активации Т-клеток, соответственно, на модели, подверженной волчанке у мышей [28].

2.3. Другие аномальные пути передачи сигналов в Т-клетках волчанки

Все чаще выявляются аномалии определенных путей передачи сигналов в Т-клетках волчанки, которые приводят к дефектам активации Т-клеток у пациентов с СКВ.Сообщалось об ухудшении зависимого от циклического аденозинмонофосфата (цАМФ) фосфорилирования из-за снижения уровня протеинкиназы А [29, 30]. Кроме того, было обнаружено, что активность путей с участием протеинкиназы C и p56-лимфоцит-специфической протеинтирозинкиназы (p56lck) также нарушена [31, 32]. С другой стороны, было обнаружено, что активность протеинкиназы PKR и фосфатидилинозитол-3 киназы (PI3K) повышена на животной модели, склонной к волчанке [33, 34]. Фармакологическое ингибирование PI3K может облегчить гломерулонефрит и снизить смертность на модели MRL / мышиной волчанки [35].Активность митоген-активируемых протеиновых (MAP) киназ, которая имеет решающее значение для пролиферации и апоптоза Т-клеток, снижена в Т-клетках пациентов с СКВ [36]. Было показано, что у животных с дефицитом PKC (активатора MAP-киназы) развивается спонтанное волчаночноподобное заболевание [37].

2.4. Изменения в экспрессии генов, частично из-за снижения метилирования ДНК

Как описано выше, повышенная регуляция CD40L в Т-клетках волчанки очевидна в результате активации NF-ATc2, вторичной по отношению к высокому потоку кальция [17, 22].Увеличение CD40L усиливает экспрессию CD80 и других костимулирующих молекул на антигенпрезентирующих клетках, что дополнительно усиливает стимулирующие сигналы к Т-клеткам [23]. Ген CD40L является чувствительным к СКВ и является чувствительным к метилированию. Метилирование ДНК обычно подавляет транскрипцию и экспрессию генов. При СКВ метилирование ДНК, которое, как было показано, снижено в Т-клетках, связано с аутореактивностью Т-клеток [23]. Гипометилирование в одной из Х-хромосом, которая неактивна у больных волчанкой женского пола, вызывает сверхэкспрессию мРНК CD40L и, следовательно, экспрессию CD40L на Т-клетках волчанки [23].Изменения активности киназы MAP и PKC также вызываются гипометилированием, вторичным по отношению к дефициту ДНК-метилтрансферазы 1 в Т-клетках волчанки [23, 38].

IL-2 играет важную роль в снижении поляризации наивных CD4 + клеток по направлению к фенотипу Th27 [39] (см. Рисунок 1). Снижение продукции IL-2, продемонстрированное у пациентов с СКВ, усиливает рост популяции Th27, что способствует локальному воспалению и рекрутированию иммуноцитов отчасти из-за повышенной продукции IL-17 [40].Экспрессия IL-2 Т-клетками фактически жестко регулируется связывающим белком (CREB) элемента ответа сАМР факторов транскрипции (CREB) и модулятором CRE (CREM) [41]. CREB усиливает транскрипцию гена IL-2 , тогда как CREM подавляет его, конкурируя за сайт связывания CRE с CREB [42]. Баланс между активностью CREB и CREM, который важен для определения того, является ли IL-2 активным или подавленным, изменяется в Т-клетках волчанки [43]. Высокое соотношение CREM и CREB в Т-клетках волчанки способствует дефициту ИЛ-2 [43].Существует по крайней мере 2 предложенных механизма, объясняющих повышенную активность CREM и снижение активности CREB в Т-клетках волчанки. Во-первых, высокие уровни антилимфоцитарных антител у пациентов с СКВ активируют кальций / кальмодулин-зависимую киназу IV (CaMKIV), которая усиливает активность CREM за счет фосфорилирования [44]. Во-вторых, повышенный внутриядерный уровень протеинфосфатазы 2A (PP2A) в Т-лимфоцитах волчанки дефосфорилирует и инактивирует CREB [45, 46]. Следует отметить, что Elf-1, важный фактор транскрипции CD3, дефосфорилируется за счет повышенного уровня внутриядерного PP2A в Т-клетках волчанки [47].Дефосфорилированный Elf-1 не может связываться с ДНК и инициировать транскрипцию транскрипции CD3, что приводит к увеличению соотношения FcR и CD3 [47], что способствует последующей активации путей Syk вместо ZAP-70 в Т-клетках волчанки [17] (см. Фигура 1).

Было продемонстрировано усиление окислительного стресса в лимфоцитах волчанки, о чем свидетельствуют ультраструктурные изменения в виде тубулоретикулярных структур органелл в лимфоцитах пациентов с активной волчанкой [48]. Окислительный стресс вызывает активность оксида азота и повышение трансмембранного потенциала митохондрий, что приводит к активации протеинкиназы, называемой трансмембранным потенциалом митохондрий, и мишенью рапамицина (mTOR) млекопитающих в Т-клетках волчанки [49].Увеличение активности mTOR вызывает опосредованное RAB4A подавление CD3 и приводит к высокому притоку кальция при стимуляции Т-клеток волчанки [50]. Увеличение внутриклеточного кальция активирует модулятор элемента ответа цАМФ (CREM), который ингибирует IL-2 и усиливает экспрессию IL-17. Эти изменения благоприятствуют поляризации от T _h 1 до T _h 17 и ингибируют CD8 + T-клетки [51]. Активация mTOR также подавляет транскрипцию FoxP3, ингибируя ДНК-метилтрансферазу 1 (DNMT1), что приводит к гипометилированию промотора FoxP3 [51].Рапамицин, ингибитор mTOR, продемонстрировал в небольшом клиническом исследовании девяти пациентов с волчанкой способность нормализовать приток кальция, вызванный активацией Т-клеток, и снижать общую активность волчанки [50]. Другие потенциальные механизмы mTOR в ингибировании иммунного ответа будут обсуждаться в следующем разделе.

3. Изменение количества и супрессорной активности регуляторных Т-клеток в SLE

3.1. Регуляторные клетки CD4 + T

Было показано, что

регуляторных T-клеток CD4 + (CD4 + Treg) снижается во вторичных лимфоидных органах модели мышей с предрасположенностью к волчанке NZB / W F1 по сравнению с неаутоиммунными мышами соответствующего возраста [52].Дефицит Treg CD4 + связан с развитием волчаночно-подобного заболевания, в то время как адоптивный перенос Treg CD4 + замедляет прогрессирование почечной недостаточности и снижает смертность мышей NZB / W F1 [52]. Было показано, что помимо CD4 + Treg тимуса, периферические Treg-клетки CD4 + (CD4 + iTreg), обусловленные действием IL-2 и TGF, способны снижать уровни анти-дцДНК в сыворотке крови и ослаблять иммунный комплексный гломерулонефрит, вторичный по отношению к уменьшению помощи Т-клеток. к В-клеткам у мышей NZB / W F1 [53].

У людей количество CD4 + Treg обычно ниже у пациентов с активной СКВ по сравнению с пациентами с неактивным заболеванием и здоровыми людьми [54].Пониженные уровни P3 (FoxP3) в CD4 + Treg у пациентов с активной волчанкой обычно считаются причиной того, что у этих пациентов меньше Treg-супрессивная активность, чем у их коллег с неактивным заболеванием [55–57]. Интересно, что эффективная иммуносупрессивная терапия глюкокортикоидами и ритуксимабом восстанавливает количество функциональных Treg у пациентов с СКВ [58–60]. Несмотря на преобладающее мнение о низком количестве и функциональном качестве Treg у пациентов с СКВ, отсутствие действительно надежных маркеров, позволяющих идентифицировать и изолировать подлинную популяцию Treg, делает надежность и воспроизводимость исследований Treg при СКВ проблемой [61].Helios, который является фактором транскрипции, принадлежащим к семейству Ikaros, недавно было показано, что он экспрессируется большинством Т-клеток FoxP3 + у людей, и было продемонстрировано, что он способен регулировать экспрессию FoxP3 путем связывания с промотором FoxP3 [ 62]. В отличие от предыдущих результатов, которые подтверждали более низкое количество Treg у пациентов с волчанкой с более активным заболеванием, действительно было показано, что популяция Foxp3 + Helios + Treg значительно увеличилась у пациентов с активной СКВ по сравнению с пациентами с неактивным заболеванием и здоровыми людьми из контрольной группы [ 61, 62].Кроме того, было показано, что FoxP3 + Helios + T-клетки, выделенные от 20 пациентов с волчанкой, имеют более низкую продукцию IL-2 и IFN по сравнению с таковыми из FoxP3 + Helios- T-клеток [62].

3.2. Регуляторные клетки CD8 + T

В экспериментальных мышах, индуцированных как NZB / W F1, так и человеческими моноклональными антителами к ДНК, экспансия Treg CD8 + толерогенным пептидом подавляла продукцию анти-dsDNA, пролиферацию CD4 + T-клеток и продукцию интерферона 2 типа. вероятно, в результате TGF и FoxP3, продуцируемых CD8 + iTregs [63, 64].

Подобно результатам CD4 + Treg, исследования количества циркулирующих CD8 + Treg у пациентов с СКВ дали противоречивые результаты [65, 66]. Treg CD8 + от пациентов с активной SLE не смогли подавить эффекторные T-клетки, тогда как Treg CD8 + от пациентов с неактивной SLE продемонстрировали сравнимую подавляющую способность с таковыми от здоровых людей [65]. Особо следует отметить, что поскольку данные CD8 + Tregs при СКВ основаны на небольшом количестве клинических исследований, необходимы более надежные исследования для дальнейшей характеристики количества и функциональных аспектов CD8 + Treg у пациентов с СКВ.

3.3. T-регуляторные клетки

Недавно было обнаружено, что группа редких T-клеток, которые экспрессируют высокие уровни CD25 и CD27 и низкий уровень CD45RA, обладают регуляторной и супрессивной активностями (Treg-клетки), особенно подмножество V1 [67]. Подсчет популяций мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) выявил значительно меньшее количество циркулирующих Treg-клеток у пациентов с СКВ по сравнению со здоровым контролем [67]. Кроме того, была обнаружена значимая обратная корреляция между активностью волчанки и уровнем циркулирующих Treg-клеток [67]. In vitro эксперимент подтвердил способность Treg-клеток волчанки экспрессировать FoxP3 CD27-зависимым образом, когда клетки культивировали в присутствии TGF [67]. Кроме того, было продемонстрировано, что Treg-клетки способны подавлять пролиферацию аутологичных эффекторных клеток CD4 + в системах сокультивирования [67]. Хотя это и редко встречается в популяции PBMC, необходимы дальнейшие эксперименты, чтобы полностью охарактеризовать фенотип и функцию этих Treg-клеток, которые могут играть важную иммунопатогенную, а также потенциальную терапевтическую роль в подавлении болезненной активности СКВ.

4. Терапевтические испытания лекарств, которые манипулируют Т-клетками при СКВ

4.1. Ингибиторы кальциневрина

Наиболее часто используемые ингибиторы кальциневрина, включая циклоспорин и такролимус, показали в рандомизированных контролируемых исследованиях, по крайней мере, такую ​​же эффективность и безопасность, как и традиционное лечение пролиферативного и мембранозного гломерулонефрита [68–70]. Годовое квазирандомизированное исследование показало, что частота ремиссии протеинурии составила 83%, 60% и 27% у пациентов, получавших циклоспорин, внутривенный циклофосфамид и преднизолон, соответственно, хотя частота рецидивов протеинурии была выше у пациентов, получавших циклоспорин, чем у пациентов, получавших циклоспорин. получавшие циклофосфамид [68].В качестве индукционной терапии используется комбинация преднизолона и внутривенного циклофосфамида (всего шесть 4-недельных импульсов, начиная с 750 / площади поверхности тела) или такролимуса (начиная с 0,05 мг / кг / день и титруемого до минимального уровня 5. –10 нг / мл) одинаково эффективны для достижения полной ремиссии почек [70]. Такролимус оказался более безопасным, поскольку побочные эффекты, включая лейкопению и желудочно-кишечные заболевания, были менее частыми по сравнению с пациентами в группе циклофосфамида [70].

4.2. Анти-CD40L

Как обсуждалось ранее, CD40L, который сверхэкспрессируется на Т-клетках волчанки, стимулирует экспрессию CD40 на В-клетках с образованием аутоантител. Таким образом, антагонизация CD40L является потенциальной терапевтической мишенью для лечения СКВ. Однако два основных клинических испытания, посвященных блокаде пути CD40-CD40L при лечении СКВ, не принесли результатов [71, 72]. В дополнение к неспособности удовлетворить заранее определенные конечные точки исследования, неблагоприятный профиль побочных эффектов анти-CD40L, к сожалению, привел к преждевременному прекращению многоцентрового исследования фазы II BG9588 при СКВ [72].В двойном слепом плацебо-контролируемом исследовании 85 пациентов с СКВ от легкой до умеренной степени активности были рандомизированы для получения 6 инфузий анти-CD40L в дозах 2,5, 5 и 10 мг / кг и плацебо в дозах 0, 2, 4, 8, 12 и 16 недель [71]. После 20 недель лечения активность волчанки улучшилась во всех группах по сравнению с исходным уровнем, но не было обнаружено статистической значимости среди различных групп [71]. Также не было отмечено различий в показателях утомляемости и качестве жизни [71]. В меньшей фазе II открытого исследования по оценке BG9588 при лечении 28 пациентов с пролиферативным волчаночным гломерулонефритом возникновение 2 инфарктов миокарда у субъектов привело к преждевременному прекращению исследования, хотя и значительно снизило протеинурию, гематурию и антибиотики. Продемонстрирован титр дцДНК с увеличением уровня С3 в сыворотке [72].

4.3. Рапамицин

Будучи безопасным и хорошо переносимым лекарством, клинически используемым для предотвращения отторжения трансплантата, рапамицин, макролидный антибиотик, регулирующий митохондриальный трансмембранный потенциал и приток кальция, оценивался в небольшом неконтролируемом исследовании на предмет его эффективности у пациентов с СКВ [50]. У 9 пациентов с волчанкой, резистентных к традиционному лечению, рапамицин 2 мг в день снижал активность заболевания и потребность в преднизолоне [50]. Уровень кальция в митохондриях и индуцированный активацией Т-клеток приток кальция нормализовались у пациентов, получавших рапамицин [50].В недавнем проспективном открытом исследовании было показано, что рапамицин подавляет выработку ИЛ-4 и некроз двойных отрицательных (DN) Т-клеток у пациентов с СКВ. Кроме того, рапамицин усиливал экспрессию FoxP3 в CD25 + / CD4 + T-клетках и рост CD25 + CD19 + B-клеток [73], что означает, что mTOR может запускать продукцию IL-4 и некроз DN T-клеток при активной СКВ.

4.4. N-ацетилцистеин

Недавно в небольшом клиническом испытании был показан N-ацетилцистеин (NAC), предшественник глутатиона, в дозах 2.4 г и 4,8 г в день могут снизить активность волчанки и утомляемость после 3 месяцев лечения по сравнению с плацебо [74]. NAC снижает активность mTOR и усиливает апоптоз Т-клеток, что сопровождается обратным увеличением популяций CD4 / CD8. Интересно, что NAC, как было показано, индуцирует экспрессию FoxP3 в CD4 + Treg-клетках и снижает уровни анти-дцДНК в сыворотке [74]. Безусловно, необходимы более масштабные клинические испытания для подтверждения эффективности этого возбуждающего терапевтического агента, особенно ожидается, что побочные эффекты NAC из-за иммуносупрессии будут минимальными.

5. Заключение

Как при мышиной системе, так и при заболевании СКВ у человека обнаруживается аномалия Т-клеток на основании их изменений в фенотипе, физиологии рецепторов и передачи сигналов, транскрипции генов и нарушенной супрессорной активности регуляторных лимфоцитов. Существенное участие Т-клеток в патогенезе СКВ и очевидный успех терапии, направленной на Т-клетки у пациентов с СКВ, приводят к твердому убеждению, что СКВ действительно является аутоиммунным заболеванием, управляемым Т-клетками.Хотя манипуляции с В-клетками и их семьями с использованием терапии истощения В-клеток (BDT) кажутся очень многообещающими в лечении СКВ, и утверждается, что В-клетки относительно более важны в патогенезе СКВ, чем другие иммуноциты, несоответствие длительные положительные эффекты BDT против гораздо более короткого периода полужизни ритуксимаба неизменно объясняют потенциальную важность участия Т-клеток в патогенном процессе СКВ [58, 59].

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации данной статьи.

Veracyte приобретет онкологическую диагностическую фирму HalioDx за 317 млн ​​долларов

Приобретение HalioDx поможет Veracyte в разработке и производстве тестовых наборов для диагностической платформы nCounter на различных рынках. Предоставлено: Veracyte.

Veracyte согласилась приобрести компанию HalioDx, занимающуюся иммуноонкологической диагностикой, на общую сумму около 317 млн ​​долларов (260 млн евро) для увеличения своего присутствия в сегменте онкологической диагностики во всем мире.

Сумма сделки составляет около 179 млн долларов (147 млн ​​евро) наличными и до 137,5 млн долларов (113 млн евро) в акциях, отметили в компании.

HalioDx специализируется на предоставлении диагностических продуктов и услуг онкологам и компаниям, занимающимся разработкой лекарств.

Он имеет ряд решений для иммунной оценки, в том числе анализ Immunoscore. Этот анализ может измерить иммунный контекст опухоли как решающий фактор, определяющий исход и реакцию пациентов на лечение рака.

Исполнительный председатель Veracyte Бонни Андерсон сказала: «Наши предыдущие стратегические приобретения предоставили эксклюзивный глобальный доступ к лучшей в своем классе диагностической платформе и значительно расширенному меню тестирования рака.

«Мы считаем, что HalioDx поможет стимулировать наш глобальный рост за счет ускорения разработки и производства тестов для диагностики in vitro (IVD) в Европе, а также за счет расширения нашего научного опыта в развивающейся области иммуноонкологии.”

Приобретение HalioDx поможет Veracyte в разработке и производстве тестовых наборов для диагностической платформы nCounter в Европе и на других рынках мира.

Компания планирует перенести производство наборов на завод HalioDx в Марселе, Франция. В настоящее время комплекты производятся компанией NanoString Technologies.

В декабре 2019 года Veracyte подписала окончательное соглашение с NanoString на эксклюзивную глобальную лицензию на платформу nCounter последней для диагностического использования.

Платформа мультимодального анализа Immunogram от HalioDx предоставит Veracyte возможности разработки для различных показаний. Он также может выступать в качестве платформы для развития партнерского бизнеса Veracyte в области биофармацевтики.

Возможности HalioDx в области иммуно-онкологии дополняют опыт Veracyte в области геномики рака и его биорепозиторий геномного содержимого, разработанный на основе данных полного транскриптома.

Кроме того, последняя сделка расширит спектр диагностики рака Veracyte до восьми из десяти ведущих онкологических заболеваний в США.

Тест Immunoscore, который помогает в принятии решений о лечении колоректального рака, расширит меню диагностических тестов Veracyte, предназначенных для неудовлетворенных потребностей в непрерывном уходе за пациентами.

По завершении сделки, которая ожидается в третьем финансовом квартале этого года, HalioDx станет дочерней компанией Veracyte.

После приобретения работа и лаборатории HalioDx продолжатся в Марселе, Франция, и Ричмонде, Вирджиния, США.

Связанные компании

Sartorius

Производство медицинских изделий и контроль качества

TEAC

Медицинские видеомагнитофоны и решения для управления медицинским видео

Связанные компании

Sartorius

Производство медицинских изделий и контроль качества

28 августа 2020

TEAC

Медицинские видеомагнитофоны и решения для управления медицинским видео

28 августа 2020

Пивот Интернэшнл

Медицинское оборудование, разработка продуктов и производственные услуги

28 августа 2020

ImmunoG PRP — 300 грамм

{«id»: 9160516690, «title»: «CytoDetox® Liposomal Zeolite Clinoptilolite with Fulvates», «handle»: «cytodetox-product», «description»: «\ u003cp \ u003eCytoDetox® Liposomal Zeolite Clinoptilolite с фульватами. крайний способ поддержки удаления токсинов из окружающей среды, таких как тяжелые металлы, химические вещества, пестициды и биотоксины, на клеточном уровне, безопасно и на 100% естественным путем.CytoDetox содержит фрагменты молекулярного клиноптилолита, которые происходят из цеолитов. Цеолиты (клиноптилолит) — это природные минералы, образованные из окаменевшего вулканического пепла и морской воды, которые известны как природный детоксификатор для окружающей среды. \ / div >> поддерживая естественную способность вашего тела детоксифицировать каждую клетку.Этот цеолит, клиноптилолит и липосомальная технология содержат ингредиенты, предоставленные природой, без известных аллергенов или побочных эффектов, и сразу начинают работать. \ U003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \»> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cp> \ u003c \ / p> \ n \ u003cp> Вы готовы начать True Cellular Detox ™ с бутылкой CytoDetox® в руке. Вот несколько советов по достижению наилучших результатов: \ u003c \ / p> \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \» \ u003e \ n \ u003cmeta charset = \ «utf-8 \»> \ u003cspan color = \ «# 000000 \» face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «color: # 000000; font-family: tahoma, sans-serif; \»> ** NEW \ u0026amp; УЛУЧШЕННАЯ ФОРМУЛА! ** \ u003c \ / span> \ n \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \»> \ u003cspan color = \ «# 000000 \» face = \ «tahoma, sans-serif \ «style = \» color: # 000000; font-family: tahoma, sans-serif; \ «> \ u003c \ / span \ u003e \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \» gmail_default \ «\ u003e \ u003cspan color = \» # 000000 \ «face = \» tahoma, sans-serif \ «style = \» color: # 000000; font-family: tahoma, sans-serif; \ «> \ u003cspan> \ u003cb \ u003e Предлагаемое использование: \ u003c \ / b> \ u003c \ / span \ u003e \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ gmail_de \ n \ u003cul \ u003e \ n \ u003cli \ u003eTake \ u003cspan> 0.5 — 1,0 мл перорально (от 1 \ / 2 до 1 капельницы) от 2 до \ u003c \ / span> \ u003cspan> 3 раза в день. \ U003c \ / span> \ n \ u003c \ / li> \ n \ u003c \ / ul \ u003e \ n \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \» \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \ «\ u003e \ u003cb \ u003e14-дневная дозировка Ultra CytoDetox®: \ u003c \ / b> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \» gmail_default «> \ n \ u003cul \ u003e \ n \ u003cli> Для периодического использования для поддержки более глубокой очистки клеток.\ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli> В течение 14 дней принимать по 1 мл (1 капельница) 4 раза в день. \ u003c \ / li> \ n \ u003c \ / ul> \ n \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \» \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \» \ u003e ПРИМЕЧАНИЕ: Ultra CytoDetox После приема следует сделать перерыв на 7-14 дней (вне цикла). Эту дозировку можно периодически использовать для более глубокого очищения. Эту дозировку также можно снизить до уровня обслуживания во время паузы. \ U003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \»> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans -serif \ «style = \» font-family: tahoma, sans-serif; \ «> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \» gmail_default \ «\ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \» \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \» \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> \ u003cb \ u003eВажно Рекомендуемые инструкции: \ u003c \ / b \ u003e \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \» \ u003e \ n \ u003cul \ u003e \ n \ u003cli \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> Мы рекомендуем Cy toDetox следует принимать натощак или через 30 минут после еды.\ u003c \ / span> \ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \» \ u003eДля усиления эффекта избегайте еды и питья в течение 15-30 минут после приема CytoDetox. \ u003c \ / span> \ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> Возьмите CytoDetox под язык и взмахните в течение 30 секунд перед глотанием. \ u003c \ / span> \ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> Увеличьте потребление воды для лучших результатов.\ u003c \ / span> \ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \» \ u003eЕсли вы в настоящее время используете CytoDetox в рамках программы True Cellular Detox ™, следуйте указаниям и инструкциям, приведенным в этой программе. \ u003c \ / span \ u003e \ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli> \ u003cspan face = \ » tahoma, sans-serif \ «style = \» font-family: tahoma, sans-serif; \ «> Если возникают неприятные симптомы детоксикации (например, тошнота, расстройство пищеварения, головные боли и т. д.)) приостановите использование и обсудите со своим врачом. \ u003c \ / span> \ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font- family: tahoma, sans-serif; \ «> Дозировка может варьироваться для достижения желаемых результатов, пожалуйста, посетите www.CytoDetox.com для получения дополнительной информации. \ u003c \ / span \ u003e \ u003c \ / li \ u003e \ n \ u003cli> \ n \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \» \ u003e \ u003cspan color = \ «# 000000 \» style = \ «color: # 000000; \ «> Если вы хотите работать с тренером по здоровью, у нас есть консультации по здоровью \ u003cspan> \ u003c \ / span> \ u003c \ / span \ u003e.\ u003c \ / span> \ u003c \ / li> \ n \ u003c \ / ul \ u003e \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \ «> \ u003cb \ u003e \ u003ca href = \» https: \ / \ / drpompa.com \ / additional-resources \ / health-tips \ / cell-detoxification-cytodetox-zeolite \ » > Изучите науку, лежащую в основе нашего Истинного клеточного детокса \ u003c \ / a> \ u003c \ / b \ u003e \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003c \ / div> \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \» \ u003e \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div> \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> Если вы ищите более комплексную программу детоксикации, которая поддерживает все аспекты здоровья — включая диету, эмоциональную детоксикацию и многое другое — ознакомьтесь с программой True Cellular Detox ™, первой и единственной в мире системой, которая проведет вас через процесс детоксикации в чел на высоком уровне и дает реальные результаты.\ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \» \ u003e \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \» > Strong> Ингредиенты:> Clinoptilolite Zeolite 2,5 мг, Фосфатидилхолин 25 мг, Фульваты 0,5 мг \ u003c \ / span >> «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> \ u003c \ / span \ u003e \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family: tahoma, sans-serif; \»> \ u003cstrong> Другие ингредиенты:> \ u003c \ / strong> очищенная вода, глицерин (органическое горчичное зерно), Этанол (органический) \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv \ u003e \ n \ u003cbr> \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \» style = \ «font-family : tahoma, sans-serif; \ «> \ u003c \ / span> \ n \ u003c \ / div> \ n \ u003c div> \ n \ u003cdiv class = \ «gmail_default \»> \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \»> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003cspan face = \ «tahoma, sans-serif \»> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003cspan face = \ » sans-serif \ «> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div> \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003cspan face = \» tahoma, sans-serif \ «> \ u003c \ / span> \ u003c \ / div> \ n \ u003c \ / div> \ n \ u003cstrong> * Внимание: \ u003c \ / strong> Если вы беременны или кормите грудью, перед применением проконсультируйтесь с лечащим врачом.Хранить в недоступном для детей месте. \ U003c \ / div \ u003e \ n \ u003cdiv \ u003e \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003c \ / div \ u003e \ n \ u003cp> * Эти утверждения не были оценены Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов. Этот продукт не предназначен для диагностики, лечения или предотвращения каких-либо заболеваний. \ U003c \ / p> «,» published_at «:» 2017-06-24T15: 33: 45 «,» created_at «:» 2017-04- 03T07: 27: 00 »,« vendor »:« True Cellular Formulas »,« type »:« Категории, добавки, потеря веса, детокс »,« теги »: [« 180 »,« 180 решений »,« 180 решений », «за пределами голодания», «бренды», «carthook_checkout», «carthook_cyto_single», «cyto», «cyto detox», «cytodetox», «Detox», «dmsa», «голодание», «имитирующая голодание диета», «fmd» »,« ИММУН »,« Иммунная поддержка »,« пролон »,« ПРОГРАММА TCD »,« Истинные клеточные формулы »,« vendor 180 »,« vendor180 »,« потеря веса »],« price »: 7497,« price_min » : 7497, «price_max»: 7497, «price_varies»: false, «compare_at_price»: null, «compare_at_price_min»: 0, «compare_at_price_max»: 0, «compare_at_price_varies»: true, «all_variant_ids»: [32509807890], «варианты», «варианты» : [{«id»: 32509807890, «product_id»: 9160516690, «product_handle»: «cytodetox-product», «title»: «Заголовок по умолчанию», «option1»: «Заголовок по умолчанию», «option2»: null, «option3»: null, «sku»: «CYTODETOX», «requires_shipping»: true, «taxable»: false, «Feature_image»: null, «image_id»: null, «available»: true, «name»: «CytoDetox» ® Липосомальный цеолит клиноптилолит с фульватами — Заголовок по умолчанию »,« options »: [« Заголовок по умолчанию »],« price »: 7497,« weight »: 142,« compare_at_price »: null,« inventory_quantity »: 3636,« inventory_management »: «shopify», «inventory_policy»: «continue», «inventory_in_cart»: 0, «inventory_remaining»: 3636, «incoming»: false, «next_incoming_date»: null, «taxable»: false, «barcode»: «09807890»} ], «available»: true, «images»: [«\ / \ / cdn.shopify.com \ / s \ / files \ / 1 \ / 1501 \ / 0392 \ / products \ /CytoDetox_Product-Image-01_358a3a18-9616-47af-9bd8-30992d5b5bcc.png? v = 1588867605 «,» \ / \ / cdn .shopify.com \ / s \ / files \ / 1 \ / 1501 \ / 0392 \ / products \ /image_40_09cf2b32-a89c-4b45-91e4-873d87cc6155.png? v = 1588867788 «,» \ / \ / cdn.shopify. com \ / s \ / files \ / 1 \ / 1501 \ / 0392 \ / products \ /image_40.png? v = 1588867788 «],» Feature_image «:» \ / \ / cdn.shopify.com \ / s \ / файлы \ / 1 \ / 1501 \ / 0392 \ / products \ /CytoDetox_Product-Image-01_358a3a18-9616-47af-9bd8-30992d5b5bcc.png? v = 1588867605 «,» параметры «: [» Название «],» URL «: «\ / products \ / cytodetox-product»}

Адоптивная клеточная терапия и модуляция микросреды опухоли: новые идеи из ASCO 2016

Лейла Ходжа ^{1 , 2} и Бишал Гьявали ³

¹ Royal Free Hospital, Pond Street, London NW3 2QG, UK.

² Astrazeneca PLC, Кембриджшир SG8 6HB, Великобритания

³ Отделение гематоонкологии, Госпиталь Нобель, Катманду 21034, Непал

Для корреспонденции: Бишал Гьявали. Почта: [email protected]

Аннотация

Иммуноонкология изменила картину лечения рака в последние годы. Ингибиторы иммунных контрольных точек (ICI) показали преимущество в выживаемости с длительными ремиссиями при различных формах рака.Однако есть еще один подход к использованию силы иммунной системы в борьбе с раком: стратегия адоптивной клеточной терапии (АКТ). Хотя ACT ограничен небольшими специализированными центрами и еще не принес такого успеха, как ICI, на встрече ASCO в этом году были представлены некоторые важные результаты. Из этих исследований были извлечены важные уроки, включая будущие перспективы и проблемы. В этой редакционной статье мы резюмируем важные исследования ACT, представленные на встрече ASCO 2016, и обсуждаем дальнейшие шаги.

Ключевые слова: иммунотерапия, адоптивная клеточная терапия, иммуноонкология, Т-клетки, модифицированные химерными рецепторами антигена, лимфоциты, инфильтрирующие опухоль

Авторские права: © авторы; лицензиат e онкологическая медицина. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/3.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что оригинальная работа правильно процитировано.

Опубликовано: 09.01.2016; Поступила: 19.07.2016

Из-за значительного успеха, достигнутого с помощью ингибиторов иммунных контрольных точек (ICI), большая часть текущих исследований в области иммунной онкологии сосредоточена на поиске оптимальных схем лечения, комбинаций партнеров и управлении токсичностью этих агентов. Однако еще одним важным аспектом иммуноонкологии с огромным потенциалом клинической пользы является стратегия адоптивной клеточной терапии (АКТ). Хотя обе эти стратегии действуют через повышение иммунитета организма против раковых клеток, они отличаются в одном важном аспекте.В то время как ICI в основном вызывает уже существующий иммунный ответ, блокируя иммуно-ингибирующие молекулы или их рецепторы, ACT может сделать опухоль более иммунной, собирая Т-клетки у пациента, размножая их in vitro и повторно вводя их в хозяин.

В соответствии с нынешней тенденцией, иммуноонкология оставалась главной темой ежегодного собрания Американского общества клинической онкологии (ASCO) в 2016 году. Однако в этом году, в дополнение к многочисленным тезисам, устным обсуждениям и презентациям по ICI при различных опухолях и в других опухолях. различные комбинации с небольшими молекулами и другими антителами, также был представлен ряд презентаций по ACT.Во время конгресса было проведено 8 устных презентаций, 5 по химерным антигенным рецепторам-модифицированным Т-клеткам (CART) при гематологическом раке [1–5], 2 — о солидных опухолях [6–7] и 1 рандомизированное исследование с использованием инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL). ) терапии меланомы [8] (таблица 1).

Ответы на терапию CART при рефрактерных гематологических злокачественных новообразованиях были замечательными [9]. Все гематологические исследования, представленные на этом заседании ASCO, также показали впечатляющую частоту полного ответа (CR) при рефрактерной болезни.Они были ранними, к 28-му дню, глубокими и прочными с минимальным остаточным заболеванием (отрицательный костный мозг) после лечения. Тем не менее, рецидивы могли произойти после CR, и если они были, они, по-видимому, произошли в течение 6 месяцев после лечения. В исследованиях были и другие общие темы: предварительная химиотерапия, особенно флударабин, была важна для увеличения и приживления Т-клеток, а токсичность могла быть очень серьезной с летальным исходом, связанным с лечением, по крайней мере в 2 исследованиях. Наиболее частыми токсическими эффектами были синдром высвобождения цитокинов (который считается причиной смертей, связанных с лечением) и нейротоксичность (спутанность сознания, делирий, афазия, судороги, все из которых полностью исчезли).Количество введенных Т-клеток и профили цитокинов были связаны с токсичностью, как и бремя болезни. Токсичность можно уменьшить, изменив дозу инфузионных клеток в зависимости от опухолевой нагрузки.

Терапия TIL была опробована в основном при меланоме с некоторым успехом еще до начала ICI [10–11]. Исследование терапии TIL, проведенное Национальным институтом здравоохранения (NIH), было интересно тем, что это было рандомизированное исследование двух протоколов, которое NIH оценил в нескольких исследованиях с одной группой [8].Предварительная химиотерапия плюс или минус облучение всего тела (TBI) была проведена 101 пациенту, по 50 и 51 пациенту в каждой группе. Ответы и исходы были схожими, но токсичность увеличилась в группе с ЧМТ с идиосинкразическим побочным эффектом в виде тромботической микроангиопатии, что привело к единственной смерти в исследовании. В целом, в настоящее время NIH пролечил 196 пациентов с меланомой с помощью TIL, 44 CR (23%) были замечены и 42 из них продолжаются через 14–140 месяцев после лечения (частота частичного ответа 62%).Однозначные числа пациентов ранее имели ICI, и им казалось, что дела обстоят хуже, но это анекдотично.

В случае солидных опухолей результаты были гораздо менее впечатляющими, но особенно интересным оказался один подход. Сенсибилизированные EBV цитотоксические Т-клетки были выбраны из панели, состоящей из более чем 300 линий класса GMP, созданных, когда серопозитивные гематопоэтические донорские Т-клетки EBV были сенсибилизированы облученными трансформированными B-клеточными линиями с EBV 95,8 и сопоставление было выполнено по крайней мере для 2/8 аллелей HLA и проявляют ВЭБ-специфическую цитотоксичность, ограниченную аллелем HLA, общим для пациента [6].На сегодняшний день ACT всегда был аутологичным, что делало его трудозатратным и дорогостоящим. Создание готового продукта значительно упростит процесс и, возможно, увеличит количество подходящих пациентов.

Наконец, оцениваются и другие сконструированные клетки. Фаза Ib / II испытания расширенных и активированных аутологичных естественных клеток-киллеров (NK) с трастузумабом при рефрактерном метастатическом раке молочной железы HER2 (MBC) [12] в плакате описывала исследование, разработанное для повышения антителозависимого клеточно-опосредованного цитотоксического эффекта трастузумаба. .Клетки собирали у пациентов и инкубировали с облученными клетками k562-mb15-41BBl в течение 10 дней. Одиннадцать пациентов получали трастузумаб (от 3 недель до 8 циклов). За циклом 1 следовала инфузия NK-клеток и 1 МЕ / м IL2 ² × 3 еженедельно для 6 доз. Никаких ответов не наблюдалось, но 7 из 10 пациентов имели стабильное заболевание, 3 пациента получили вторую инфузию в цикле 6 и 2 пациента получили третью инфузию в цикле 8. NK-клетки действительно увеличивались с увеличением ADCC, но это расширение было умеренным.

Иммунофенотипирование клеток опухолей может в конечном итоге помочь в выявлении пациентов, которым может помочь иммунотерапия. Immunoscore при колоректальном раке [13] был утвержден в настоящее время, и были многочисленные презентации по биомаркерам ответа на ICI. И наоборот, также необходимы биомаркеры устойчивости для выявления пациентов, которые просто не реагируют на иммунотерапию. Недавно предложенная «иммунограмма рака» может служить основой для размышлений об эффективной иммунотерапии на индивидуальной основе [14].Одно из требований этой иммунограммы — иммунная (Т-клеточная) инфильтрация. Следовательно, можно предположить, что так называемые иммунологически холодные опухоли подходят для АКТ.

Таблица 1. Важные исследования ACT, представленные на ASCO 2016.

Это была тема для обсуждения на образовательной сессии по CART при саркоме, которую провел Сет Поллак из Центра Фреда Хатчинсона. Синовиальные и миксоидные круглоклеточные саркомы гомогенны по положительности NYESO (антиген раковых яичек), но помимо некоторых ранних данных по TIL при синовиальной саркоме от NIH, иммунотерапия (включая ICI) не произвела впечатления.Пациентам на исходном уровне и во время лечения проводились биопсии. Эти опухоли описаны как иммунологически холодные опухоли: очень мало Т-клеток проникает в опухоль, и они имеют низкое окрашивание PD1 в дополнение к низкому окрашиванию PDL1 в опухоли. Наблюдается большое количество CD168 (макрофаги M2), но экспрессия MHC I и II низкая. Было начато испытание IFNg и предварительной химиотерапии с последующим введением сконструированных Т-клеток для инфузии NYESO и низкой дозы Il2. Был 1 частичный ответ, но также 1 смерть от миозита, предположительно связанного с циклофосфамидом, и исследование было остановлено.Концепция модуляции микроокружения, чтобы сделать его более иммуногенным, также тестируется с использованием конструкции gp100 TCR, продуцируемой иммунокором [15]. Антитело к IMCgp100 связывается с TCR, таким образом привлекая Т-клетки в опухоль, как только они связываются с опухолевыми клетками. В настоящее время проводится исследование с тремя руками; отдельно, в комбинации с дурвулумабом (PDL1) или в комбинации с комбинацией дурвулумаба и тремелимумаба (NCT02535078).

Так как же АКТ вписывается в нынешнюю картину лечения рака? В гематологическом заболевании кажется, что оно имеет место, в частности, при рефрактерном заболевании, и особенно если токсичность может быть лучше снижена.Вполне возможно, что, если токсичность будет улучшена, она может найти место раньше в парадигмах лечения. В солидных опухолях реакции плохие, поэтому комбинации, возможно, с ICI, могут быть областью для изучения. Альтернативно сконструированные Т-клетки, сконструированные так, чтобы высвобождать стимулирующие цитокины, такие как IL-12, или не экспрессировать PD-1, могли бы иметь большую эффективность. TIL-терапия, по крайней мере, при меланоме, выглядит более многообещающей и будет продолжением исследований, возможно, в сочетании с другими агентами, такими как антиангиогенные средства или ICI, для дальнейшего повышения эффективности.Одним из недостатков всех этих подходов ACT, не говоря уже о токсичности, является аутологичная природа конструкций. Т-клетки должны быть собраны, а затем повторно введены после экспансии. Лечение с помощью АКТ проводится только в специализированных центрах, хотя количество таких центров во всем мире растет. Коммерциализация этой терапии потребует готового продукта, который можно использовать для широкого круга пациентов. Новые молекулярные методы, такие как CRISPR / Cas 9, должны облегчить это, и действительно, первое испытание на людях запланировано на конец года [16].

Путь вперед

Одноагентные ICI, особенно антитела anit-PD-1, обладают относительно низкими профилями токсичности по сравнению с химиотерапией. Стремление основываться на активности одного агента привело к тому, что в клинических испытаниях изучается множество различных комбинационных стратегий. Однако даже при комбинированной иммунотерапии почти половина пациентов не отвечает. Без проверенных прогностических биомаркеров для выбора пациентов либо для одного агента, либо для конкретной комбинации будет сложно определить, какие пациенты реагируют на определенные терапевтические стратегии или действительно ли все пациенты будут реагировать на иммунотерапию при правильной комбинации.Кроме того, комбинаторный подход с использованием по крайней мере 2 агентов повысит токсичность, что поставит под угрозу применимость к широким группам пациентов.

АКТ может вызвать опасную для жизни токсичность, но сообщаемая эффективность, особенно при рефракционных гематологических злокачественных новообразованиях, впечатляет. Таким образом, снижение токсичности АКТ должно стать основным направлением будущих исследований. Без уменьшения связанной с этим токсичности ACT не может получить более широкого применения, несмотря на результаты испытаний фазы 3 на выживаемость.В солидных опухолях отсутствие прогнозирующего биомаркера дополнительно препятствует более широкому использованию этой терапии, хотя иммунологически холодные опухоли могут особенно подходить для подхода ACT и, как можно предположить, устойчивы к терапии ICI. Ответ на АКТ после ИКИ в настоящее время неизвестен, так как большинство доступных данных АКТ получены от пациентов до ИКИ.

Вывод

Несмотря на то, что впереди стоят серьезные проблемы, особенно в случае солидных опухолей, АКТ может найти свое место в парадигмах лечения различных опухолей, если и когда будут смягчены две основные проблемы, связанные с АКТ: логистика проведения терапии АКТ и серьезность токсичности. .

Конфликт интересов

Доктор Ходжа работает врачом-исследователем в Astrazeneca, но эта работа не зависит от Astrazeneca. Д-р Гьявали не заявляет о конфликте интересов.

Список литературы

1. Turtle CJ et al (2016) Скорость стойкого полного ответа при ОЛЛ, НХЛ и ХЛЛ после иммунотерапии с оптимизированным лимфодеплецированием и определенным составом CD19 CAR-T-клеток Тезисы заседаний ASCO 34 (15_suppl) 102

2.Porter DL et al (2016) Рандомизированное исследование фазы II оптимизации дозы Т-лимфоцитов, модифицированных химерными рецепторами антигена (CAR), направленных против CD19 у пациентов (пациенты) с рецидивом, рефрактерным (R / R) CL L Тезисы собрания ASCO 34 (15_suppl) 3009

3. Maude SL et al (2016) Устойчивые ремиссии с CD19-специфическими Т-клетками, модифицированными химерным антигеном (CAR), у детей с рецидивом / рефрактерным ALL ASCO Meeting Abstracts 34 (15_suppl) 3011

4.Maude SL et al (2016) Эффективность гуманизированных CD19-нацеленных на химерный антигенный рецептор (CAR) Т-лимфоцитов у детей с рецидивом ОЛЛ ASCO Meeting Abstracts 34 (15_suppl) 3007

5. Kochenderfer J, и др. (2016) Т-лимфоциты рецептора химерного антигена против CD19, которым предшествовала химиотерапия в низких дозах, чтобы вызвать ремиссию прогрессирующей лимфомы ASCO Meeting Abstracts 34 (15_suppl) LBA3010.

6. Prockop S и др. (2016) Лечение EBV карциномы носоглотки с использованием банка EBV-специфических цитотоксических Т-клеток ASCO Meeting Abstracts 34 (15_suppl) 3012

7. Tanyi JL et al (2016) A nti-мезотелин химерные антигенные Т-клетки у пациентов с эпителиальным раком яичников Тезисы докладов ASCO Meeting 34 (15_suppl) 5511

8.Goff SL et a l (2016) Рандомизированная проспективная оценка, сравнивающая интенсивность лимфодеплеции до адаптивного переноса инфильтрирующих опухоль лимфоцитов у пациентов с метастатической меланомой Тезисы докладов ASCO Meeting 34 (15 доп.) 3006

9. Dai HY и др. (2016) Т-клетки, модифицированные химерными антигенными рецепторами для лечения рака J Natl Cancer Inst 108 (7)

10.Dudley ME et al (2008) Адоптивная клеточная терапия для пациентов с метастатической меланомой: оценка препаративных режимов интенсивной миелоаблативной химиолучевой терапии J Clin Oncol 26 (32) 5233–9

11. Rosenberg SA et al (2011) Устойчивые полные ответы у пациентов с метастатической меланомой, получавших тяжелое предварительное лечение, с использованием иммунотерапии с переносом Т-клеток Clin Cancer Res 17 (13) 4550–7

12.Lee SC et al (2016) Испытание фазы Ib / II расширенных и активированных аутологичных естественных киллеров (NK) с трастузумабом (Tras) при рефрактерном метастатическом раке молочной железы (MBC) HER2 Тезисы встреч ASCO 34 ( 15_suppl) 3045

13. Galon J et al (2016) Проверка Immunoscore (IM) в качестве прогностического маркера при раке толстой кишки I / II / III стадии: результаты всемирного консорциума анализа 1336 пациентов Тезисы встреч ASCO 34 (15_suppl) 3500

14.Blank CU et al (2016) ИММУНОЛОГИЯ РАКА. «Иммунограмма рака» Science 352 (6286) 658–60

15. Middleton MR et al (2016) Безопасность, фармакокинетика и эффективность IMCgp100, первого в своем классе растворимого TCR-антиCD3 биспецифического перенаправителя Т-клеток с активностью солидных опухолей: результаты исследования FIH на меланоме ASCO Meeting Рефераты 34 (15_suppl) 3016

16.https://www.statnews.com/2016/06/21/crispr-human-trials/ Статистический отчет о границах здравоохранения и медицины, 2016 г.

.