При лечебном электрофорезе ввод ионов калия осуществляют: аппарат для гальванизации и таблица полярности веществ для него, противопоказания и показания к процедуре

Содержание

что это такое, показания и противопоказания к применению современной методики Как проводится электрофорез

Лекарственный электрофорез (синоним: ионофорез, ионтофорез, ионогальванизация, гальваноионотерапия, электроионотерапия) — сочетанное воздействие на организм гальваническим током и вводимыми с его помощью через кожу или слизистые оболочки лекарственными веществами. С 1953 г. в СССР принято пользоваться только термином «лекарственный электрофорез» для обозначения метода введения в организм при помощи гальванического тока не только ионов электролитных растворов, но и ассоциированных с ионами более крупных частиц и сложных молекул органических соединений.

Ионы лекарственных веществ при лекарственном электрофорезе, проникая преимущественно через выводные отверстия потовых и сальных желез, задерживаются в толще кожи под электродом. Из такого кожного депо ионы поступают в ток лимфы и крови постепенно. Благодаря этому создаются условия для более продолжительного воздействия лекарственного вещества на организм — одно из важных преимуществ электрофореза по сравнению с другими способами введения лекарственных препаратов. При лекарственном электрофорезе наблюдается не только стимуляция различных защитных физиологических реакций гальваническим током (см. Гальванизация), но и специфическое действие лекарственного вещества, обусловленное его фармакологическими особенностями.

В основе сложного механизма физиологического и терапевтического действия лекарственного электрофореза лежит комплексное раздражение рецепторного аппарата кожи гальваническим током и вводимыми посредством его ионами лекарственного вещества, передаваемое по нервным путям высшим вегетативным центрам головного мозга, а также фармакологическое действие лекарственного вещества, находящегося в электрически активном состоянии. Таким образом, при электрофорезе наряду с местными изменениями в тканях возникают генерализованные вегетативные рефлексы (по А. Е. Щербаку, общие ионные рефлексы). Ионные рефлексы универсальны: их можно вызывать с любого, даже небольшого, участка кожи с нормальной чувствительностью. Для получения терапевтического эффекта не обязательно располагать электроды в области пораженного органа или стремиться во всех случаях к созданию высокой концентрации лекарственных веществ в крови. В физиотерапевтической практике получили широкое применение внеочаговые способы электрофореза лекарственных веществ в виде общих кальций-, йод-, цинк-, магний-, салицил- и других ионных рефлексов. Лечебное значение имеют и очаговые воздействия, реализующиеся через рефлекторный механизм действия гальванического тока и введенного вещества, и изменения электроионного состояния тканей, находящихся под влиянием силовых линий электрического поля постоянного тока в интерполярном пространстве. При этом происходит локальное усиление крово- и лимфообращения, повышается местный обмен веществ, изменяется проницаемость гистогематических барьеров, что и обусловливает преимущественную резорбцию тканями протекающего через эту область лекарственного вещества после проникновения его из кожного депо в общий кровоток.

Показания
. Электрофорез назначают при многих заболеваниях, в том числе тяжелых и длительно текущих, подлежащих лечению гальванизацией (см.) и различными лекарственными веществами. При назначении лекарственного электрофореза тех или иных препаратов необходимо учитывать как особенности их фармакологического действия, так и показания к применению этих препаратов при других способах их введения. Лекарственный электрофорез не следует противопоставлять другим методам лечения; его надо рассматривать как способ, расширяющий возможности применения многих лекарственных средств с терапевтической и профилактической целью при нервных, хирургических, внутренних, гинекологических болезнях, заболеваниях глаз, уха и др. Путем электрофореза можно вводить самые различные лекарственные вещества, если только установлена возможность перемещения их под действием постоянного тока (таблица).

Лекарственные вещества, наиболее часто применяемые для электрофореза

Вводимый ион или частица (применяемое вещество) Концентрация раствора (%) Полюс тока
Адреналин (хлористоводородный) 0,1 +
Аконитин (азотнокислый) 0,001-0,002 +
Акрихин 1 +
Алоэ (экстракт) *
Антипирин (салицилат) 1-10 +
Аскорбиновая кислота 5-10
Атропин (сернокислый) 0,1 +
Ацетилхолин (хлористый) 0,1 +
Биомицин (солянокислый) 0,5 +
Бром (натрий или калий) 1-10
Витамин В1 (тиамин) 2-5 +
Гиалуронидаза 0,5-1 г (в 1 % растворе новокаина) +
Гистамин 0,01 +
Дикаин 2-4 +
Димедрол 0,25-0,5 +
Дионин 0,1 +
Йод (калий или натрий) 1-10
Кальций (хлористый) 1-10 +
Калий (хлористый) 1-10 +
Сульфотиофен (кислотный остаток; ихтиол) 1-10
Кодеин (фосфорнокислый) 0,1-0,5 +
Кокаин (хлористоводородный) 0,1 +
Кофеин (натрий-бензоат) 1 (в 5% растворе соды)
Литий (салицилат и др. , кроме карбоната) 1-10 +
Магний (сернокислая магнезия) 1-10 +
Медь (сульфат) 1-2 +
Морфин (солянокислый) 0,1 +
Никотиновая кислота 1
Новокаин (солянокислый) 1-10 +
Осарсол 1 (в 0,5% растворе соды) +
Папаверин (хлористоводородный) 0,1 +
ПАБК (новокаин) 1-10 +
ПАСК 1-5
Пенициллин (натриевая соль) **
Пилокарпин (солянокислый) 0,1-1 +
Платифиллин (кислый виннокаменнокислый) 0,03 +
Прозерин 0,1 +
Салициловая кислота (кислотный остаток; натрий) 1-10
Сальсолин (хлористоводородный) 0,1 +
Сера (гипосульфит) 2-5
Серебро (азотнокислое) 1-2 +
Синтомицин 0,3 +
Стрептомицин (хлоркальциевый) *** +
Стрептоцид (белый) 0,8 (в 1% растворе соды)
Стрихнин (азотнокислый) 0,1 +
Сульфазол 0,8 (в 1% растворе соды)
Сульфат (магнезия сернокислая) 2-10
Сульфит (гипосульфит натрия) 2-2,5
Террамицин (окситетрациклин, порошок) *** +
Туберкулин 10-25 +
Уротропин 2-10 +
Фосфорная кислота (радикал, натрий) 2-5
Фталазол 0,8
Хинин (двухлористоводородный) 1 +
Хлор (натрий) 3-10
Цинк (хлористый) 0,1-2 +
Эзерин (салицилат) 0,1 +
Эуфиллин 2
Эфедрин 0,1 +

* Экстракт алоэ готовят из листьев, выдержанных 15 суток в темноте при t° 4-8°. Приготовляют кашицу и заливают дистиллированной водой (100 г массы на 300 мл воды), настаивают в течение часа при комнатной температуре, кипятят 2 мин., фильтруют и разливают в посуду по 50-200 мл. Бутылочки кипятят на водяной бане 15 мин. Экстракт хранят в темном месте.
** 600-1000 ЕД на 1 см 2 прокладки (по 5000-10 000 ЕД в I мл раствора).
*** Как и пенициллин.
**** 100 000-1 000 000 ЕД (в 0,1-1 г порошка) на прокладку (растворитель -физиологический раствор, 10-30 мл).

В зависимости от особенностей клинической картины, течения процесса и состояния организма назначают рефлекторно-сегментарные (см. Сегментарно-рефлекторная терапия), общие или местные процедуры электрофореза.

Противопоказания
: новообразования, декомпенсация сердечной деятельности, острые воспалительные процессы, наклонность к кровотечению, некоторые формы экземы и дерматитов, индивидуальная непереносимость назначенного лекарственного вещества или гальванического тока.

Техника электрофореза
. Для лекарственного электрофореза используют источники гальванического тока. Применяют металлические электроды, толстые матерчатые прокладки, соблюдая все правила проведения процедур и расположения электродов, как и при гальванизации. В отличие от гальванизации, на влажную прокладку под активным электродом накладывают смоченный приготовленным на дистиллированной воде раствором лекарственного вещества листок фильтровальной бумаги или кусочек вдвое сложенной марли — по размерам прокладки, а прокладку под индифферентным электродом смачивают теплой водой.

Процедуры проводятся при плотности тока в пределах от 0,01 до 0,1 мА/см 2 в зависимости от методики (чем больше площадь прокладки, тем меньшей плотностью тока следует пользоваться во избежание перераздражения и неблагоприятных реакций). Длительность процедуры 10-20 мин., реже 30 мин., при особой необходимости ее увеличивают до 40-60 мин. В течение курса лечения следует проводить в среднем 15 — 20 процедур, назначаемых ежедневно, через день или с другими интервалами при специальных методиках. При длительно текущих или рецидивирующих заболеваниях после одно-двухмесячного перерыва можно проводить повторно курсы лечения.

В практике, помимо местного применения, наиболее распространены следующие методики электрофореза лекарственных веществ.

Общие ионные рефлексы по Щербаку
. Два электрода с прокладками площадью 120-140 см 2 каждая располагают поперечно или по диагонали, чаще на плече (рис. 3) или на бедре. Электроды посредством гибких изолированных проводов соединяют с источниками гальванического тока в соответствии с полярностью вводимых ионов. Обычно используют растворы хлористого кальция, йодистого калия, сернокислого цинка, бромистого натрия, сернокислого магния, салициловокислого натрия. Выше электродов накладывают резиновый бинт, чтобы вызвать легкую степень застойной гиперемии. Плотность тока постепенно увеличивают с 0,05 мА/см 2 до 0,15-0,2 мА/см 2 . Длительность процедуры 20 мин. После 10-й и 17-й минут делают одноминутный перерыв для уменьшения поляризационного сопротивления.

Рис. 3. Расположение электродов при вызывании общего ионного рефлекса:
1 и 2 — свинцовые пластинки с матерчатыми прокладками;
3 — изолированный провод;
4 — резиновый бинт.

Рис. 4. Расположение электродов при ионном воротнике.

Ионные воротники
(кальциевый, йодистый, бромистый, салициловый, магниевый, новокаиновый, эуфиллиновый и др.). На воротниковую зону (шейные и два верхних грудных кожных сегмента) накладывают три слоя фильтровальной бумаги или марли площадью 1000 см 2 , смоченной в 50 мл раствора лекарственного вещества, приготовленного на дистиллированной воде (t° 38-39°). Поверх располагают прокладку такой же площади из фланели или бязи толщиной 1 см к металлический электрод. Другой электрод с прокладкой площадью 400 см 2 располагают в пояснично-крестцовой области (рис. 4). Матерчатые прокладки смачивают теплой водой (t° 38-39°). При помощи ионного воротника можно одновременно вводить кальций с анода и бром с катода (кальций-бромистый воротник), новокаин с анода и йод с катода (новокаин-йодистый воротник) и некоторые другие сочетания. В течение первых процедур ток постепенно увеличивают с 4-6 до 10 мА, а длительность сеанса — с 6 до 10 мин. При необходимости ток можно увеличить до 16 мА, а продолжительность процедуры — до 20 мин.

Рис. 5. Расположение электродов при верхнем и нижнем ионных поясах.

Ионные пояса
(кальциевый, бромистый, йодистый, магниевый и др.). На уровне нижних грудных и верхних поясничных позвонков (при верхнем поясе) или на уровне нижних поясничных и крестцовых позвонков (при нижнем поясе) накладывают три слоя фильтровальной бумаги или марли площадью 1125 см 2 (15X75 см), смоченной в 50 мл раствора лекарственного вещества, приготовленного на дистиллированной воде (t° 38-39°). Сверху располагают матерчатую прокладку такой же площади толщиной 1 м и металлический электрод. Два индифферентных электрода с прокладками площадью 320 см 2 каждая располагают на передней поверхности верхней трети бедер при верхнем поясе или на задней поверхности бедер при нижнем поясе (рис. 5). Ток от 8 до 15 мА, продолжительность процедуры 8-10 мин. , при необходимости ее увеличивают до 15-20 мин.

Рис. 6. Расположение электродов при общем электрофорезе.

Общий электрофорез по Вермелю
. Активный электрод с фильтровальной бумагой на прокладке площадью 300 см 2 , смоченной раствором лекарственного вещества, располагают в межлопаточной области, а два индифферентных электрода с прокладками площадью по 150 см 2 помещают на задней поверхности голеней (рис. 6). Ток 10-30 мА, продолжительность процедуры 20-30 мин.

Глазнично-затылочный электрофорез по Бургиньону
. Два активных электрода округлой формы диаметром 5 см с прокладками, смоченными раствором лекарственного вещества, накладывают в области глазницы поверх закрытых глаз; индифферентный электрод с прокладкой площадью 40-60 см 2 располагают на задней поверхности шеи. Ток до 4 мА, длительность процедуры до 30 мин.

Назальный электрофорез
, предложенный Н. И. Гращенковым и Г. Н. Кассилем, заключается во введении в обе ноздри смоченных лекарственным веществом ватных тампонов на облуженных концах проводов или марлевых турундочек, концы которых укладывают поверх полоски клеенки над верхней губой, прикрывая активным электродом размером 2×3 см. Индифферентный электрод с прокладкой площадью 80 см 2 располагают на задней поверхности шеи.

Иногда применяют электрофорез лекарственных веществ с помощью четырех- или двухкамерных ванн. Ряд специальных методик электрофореза используют в отиатрии, офтальмологии, гинекологии, дерматологии. Электрофорез лекарственных веществ можно сочетать с индуктотермией (см.) и грязевыми аппликациями (см. Грязелечение).

Содержание

Применяемый в рамках физиотерапии данный метод аппаратного введения лекарств помогает безболезненно доставить нужное средство непосредственно к патологическому очагу. Узнайте, какие медикаменты можно транспортировать в организм при помощи этой процедуры.

Что такое электрофорез

Тема благотворного влияния тока на здоровье человека поднималась научным сообществом с давних времен. Лекарственный электрофорез, который в медицине еще называют гальванофорезом, гальванизацией или ионофорезом, предполагает преобразование под воздействием электрических импульсов разных медикаментозных средств в мельчайшие частицы – ионы с дальнейшей доставкой последних в проблемные области. При аппаратном введении лекарственных препаратов большая их часть остается в слоях дермы. Остатки же транспортируются с кровью и лимфой по всему организму.

Показания и противопоказания

Данная процедура эффективна против целого ряда заболеваний. Недопонимание относительно того, электрофорез — что это, возникает у многих пациентов, впервые собирающихся пройти данную процедуру. Аппаратное введение лекарств рекомендуется при многих диагнозах: от нарушений опорно-двигательного аппарата до офтальмологических проблем. По этой причине вопрос, для чего нужен электрофорез, невозможно полностью раскрыть. Между тем для аппаратного введения медикаментов имеются некоторые ограничения. Противопоказания к электрофорезу следующие:

  • патологии сосудов и сердца;
  • онкологические заболевания;
  • повышенная температура;
  • воспалительные процессы в стадии обострения;
  • экзема и дерматитные проявления;
  • аллергия на вводимые во время процедуры лекарства

Электрофорез с эуфиллином

Аппаратное введение ионов этого лекарства помогает достичь бронхорасширяющего, противовоспалительного и болеутоляющего эффектов. Эуфиллин для электрофореза используется в виде 2-процентного раствора, который под влиянием тока проникает в слои дермы пациента. Оседание лекарства в подкожно-жировой клетчатке способствует его постепенному, дозированному поступлению в организм.

Стоит сказать, что за время процедуры происходит интенсивное насыщение хрящевой ткани больного активными компонентами препарата. Такая фармакология эуфиллина используется при лечении болезней опорно-двигательного аппарата: остеохондроза воротниковой зоны и поясничного отдела, межпозвоночной грыжи. Кроме того, его аппаратное введение применяется для улучшения мозгового и почечного кровообращения, лечения бронхита.

С лидазой

Указанное ферментное вещество участвует в расщеплении гиалуроновой кислоты, способствует более активному движению межсуставной жидкости. Лидаза для электрофореза выбирается с целью предупреждения и лечения спаечного процесса, воспалительных явлений разной локализации. Процедура способствует рассасыванию послеоперационных рубцов, восстановлению кожи после ожогов.

Аппаратное введение лидазы эффективно против негативных последствий пневмонии, туберкулеза, бронхита. Лечение отита и других воспалительных поражений ушей может осуществляться посредством одновременного использования эндоурального катафореза и внешнего анафореза. При этом раствором лидазы пропитывается только катод. Анод располагается на шее.

С карипазимом

Гальванический ток помогает транспортировать активное вещество препарата непосредственно к проблемной области. Электрофорез с карипазимом применяется для лечения патологий позвоночника и суставов. Процедура особенно эффективна при межпозвоночной грыже. Ткани, за счет которых образуется болезненное выпячивание в позвоночном столбе, под воздействием тока размягчаются, что уменьшает раздражительность нервных корешков и, как следствие, выраженность болевого синдрома.

С новокаином

Аппаратное введение этого анестезирующего медикамента осуществляется для получения обезболивающего эффекта. Электрофорез с новокаином показан при нейропатических синдромах, радикулите, остеохондрозе и других суставных патологиях. Особенно эффективно при этом применение физиотерапии совместно с лечебным массажем и другими мануальными процедурами.

С кальцием

Данный нутриент считается универсальным веществом для аппаратного введения. Так, ионофорез с хлоридом кальция применяется для лечения воспалений ротовой полости, миозитов, дисплазии тазобедренных суставов. Отдельно стоит упомянуть, что врачи назначают введение этого минерала аппаратным методом при патологиях свертываемости крови. Особенно важен кальций для грудничков. При нехватке этого элемента костная ткань ребенка развивается по неправильному алгоритму.

С гидрокортизоном

Аппаратное введение лекарственных средств группы глюкокортикостероидов применяется для купирования аллергических и аутоиммунных состояний. Электрофорез с гидрокортизоном часто используется в неврологической практике. Стоит отметить, то данная процедура помогает избавиться от экземы, дерматитных проявлений. В зависимости от степени повреждения кожных покровов, для аппаратного введения рекомендуется использовать крем либо эмульсию на основе гидрокортизона.

С магнезией

Под действием гальванического тока сульфат магния легко проникает сквозь клеточную мембрану. Достаточное количество этого нутриента в организме является залогом здоровья нервной, сердечно-сосудистой систем. Данный минерал участвует во многих химических реакциях, от него во многом зависит энергетический потенциал клетки. Электрофорез с магнезией борется с воспалениями, способствует нормализации сердечного ритма и артериального давления. Между тем сульфат магния запрещено применять при желудочных кровотечениях, патологиях почек и печени.

С прозерином

В инструкции к данному препарату указано, что он обладает высокой антихолинэстеразной активностью. По этой причине электрофорезом с прозерином лечат многие неврологические патологии, которые сопровождаются снижением тонуса мышц и нарушением проводимости электрических импульсов. Важно отметить, что схожим фармакологическим действием обладают и широко применяемые в физиотерапии препараты брома. Показаниями к назначению аппаратного введения прозерина служат:

  • миастения;
  • невриты разных частей тела;
  • атония мочевого пузыря;
  • восстановление после инсульта;
  • перенесенные вирусные нейроинфекции.

С димексидом

Процедура помогает добиться антибактериального, противовоспалительного эффекта. С ее помощью проводят лечение остеохондроза, разных суставных патологий, гнойниковой инфекции в стадии ремиссии. Электрофорез с димексидом особенно полезен людям, которым по каким-либо причинам нельзя осуществлять пероральное или инъекционное введение антибактериальных средств. Важно отметить, что процедура практически не имеет побочных эффектов.

С лидокаином

Метод подразумевает местное аппаратное введение анестетика с целью обезболивания. Сравнивая эффекты, получаемые после транспортировки током новокаина и указанного препарата, можно сказать, что электрофорез с лидокаином отличается менее интенсивным воздействием на тканевые структуры. Показанием для такой доставки анестезирующего лекарственного средства в организм служит ярко выраженный болевой синдром разной этиологии.

С никотиновой кислотой

Аппаратное введение этого водорастворимого витамина, или ниацина, обеспечивает нормальное протекание окислительно-восстановительных реакций. Электрофорез с никотиновой кислотой может проводиться с разными целями. Установлено, что ниацин весьма полезен для пациентов, страдающих от сахарного диабета и сердечно-сосудистых заболеваний. Кроме того, аппаратное введение ионов никотиновой кислоты помогает уменьшить концентрацию липопротеинов и триглицеридов в крови.

С дибазолом

Миотропный спазмолитик используется для лечения артериальной гипертонии, облегчения передачи нервных импульсов в спинном мозге. Электрофорез с дибазолом нередко применяется как метод формирования неспецифической сопротивляемости организма к воздействию экзогенных раздражающих факторов. К тому же создание в дерме больного своеобразного дибазолового депо обеспечивает синтезирование его собственного интерферона на протяжении длительного времени.

Электрофорез при беременности

В период вынашивания ребенка иммунитет женщины падает, что может послужить пусковым механизмом развития многих заболеваний. Большая часть лекарственных средств во время эмбрионального развития плода противопоказана к применению, поэтому электрофорез при беременности является своеобразным выходом из положения для будущих мам. Помимо этого, несомненными преимуществами данной процедуры являются:

  1. безопасность для ребенка;
  2. обеспечение высокой локальной концентрации лекарств на фоне их минимальной дозировки.

В гинекологии

Достижение терапевтического эффекта во время лечения болезней женской половой сферы сопряжено с некоторыми сложностями, связанными с точной постановкой диагноза и особенностями каждого отдельного клинического случая. Широко используемыми средствами для электрофореза в гинекологии являются растворы йода, магнезии и лидазы. Хороших результатов при лечении хронических воспалительных процессов с выраженным болевым синдромом помогает добиться аппаратное введение в нижнюю часть живота женщин йодистого калия.

Для детей

Маленькие пациенты в большинстве случаев проходят процедуру по методу Ратнера. Ученый предложил аппаратное введение эуфиллина и папаверина грудничкам с натальными цереброспинальными повреждениями. Электрофорез для детей постарше назначается при лечении бронхитов, диатеза. Методика часто используется при переломах конечностей. Насморк и другие проблемы с носовыми проходами лечатся эндоназальным введением растворов.

В стоматологии

Основным показанием для аппаратного введения лекарств в этой области медицины является инфицирование зубных каналов при периодонтите, пульпите. Методика проведения электрофореза в стоматологии предполагает целенаправленное транспортирование препаратов, благодаря которому происходит более активное восстановление поврежденных дентинных канальцев. Посредством такой доставки антибиотиков ликвидируется патогенный бактериальный фон, что предупреждает возникновение вторичного кариеса на запломбированном зубе.

В косметологии

Омоложение и оздоровление кожи при помощи тока можно проводить разными способами. Так, электрофорез в косметологии, или ионофорез, осуществляется посредством стационарных и лабильных электродов. Главным условием эффективного устранения проблем с кожными покровами является соблюдение полярности вводимого вещества. Отдельно стоит сказать о фонофорезе. Данная процедура предполагает введение витаминов и лекарственных препаратов в глубинные слои кожи при помощи испускаемых аппаратом ультразвуковых волн.

Домашний электрофорез

Процедуру можно также проводить самостоятельно посредством специальных приборов. Домашний электрофорез избавляет пациента от необходимости посещения медучреждения. Приборы для этой цели можно приобрести в аптечной сети по вполне доступным ценам. Осуществлять аппаратное введение лекарств в домашних условиях рекомендуется только после одобрения лечащего врача и ознакомления с инструкцией по тому, как делают электрофорез. В свободной продаже можно приобрести следующие приборы:

  1. «Поток-1»
  2. «Поток-БР»
  3. «Элфор»
  4. «АГН-32»

Побочные действия

В случае полного соблюдения всех условий правильного аппаратного введения медикаментов какие-либо негативные последствия, как правило, не возникают. Лекарственным электрофорезом, побочные действия которого обусловлены лишь индивидуальной непереносимостью применяемых во время сеанса препаратов, лечат даже грудничков. Вследствие этого не нужно сторониться ионофореза. Стоит ли говорить, что, помимо лечебного воздействия, вы ощутите еще и релаксационный эффект от процедуры.

Видео

Внимание!
Информация представленная в статье носит ознакомительный характер. Материалы статьи не призывают к самостоятельному лечению. Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Нашли в тексте ошибку? Выделите её, нажмите Ctrl + Enter и мы всё исправим!

Гальванизация – физиотерапевтический метод, при котором на тело пациента оказывается воздействие непрерывным электрическим током малой силы и напряжения.

Гальванический ток проникает в органы и ткани организма человека, стимулируя возникновение сложных физико-химических процессов.


Лечебный эффект

Механизм действия гальванизации заключается в непрерывном воздействии электрического тока небольшой силы и напряженности на отдельные участки тела и кожных покровов пациента. При воздействии тока на организм человека в клетках изменяется баланс ионов, и происходят физические и химические трансформации.

Применение гальванизации приводит к таким эффектам:

Основные параметры процедуры

Процедура гальванизации в физиотерапии может проводиться с различной дозировкой плотности, силы тока и по длительности воздействия. Для данного физиотерапевтического метода применяют ток невысокого напряжения (до 80 В) и незначительной силы (до 50 мА). Плотность тока варьируется от 0,01 мА/см2 до 0, 08 мА/см2.

Наиболее сильный ток применяют при терапевтическом воздействии на туловище и конечности (от 15 мА до 30 мА). При наложении электродов на область головы, лица, слизистых оболочек сила тока не превышает 5 мА.

Ток к телу пациента подводится при помощи электродов (свинцовые пластины толщиной до 1 мм, с влажной прокладкой, и подведенный к пластине шнур). Также электроды могут быть встроены в резервуар («ванночку»), применяемый для погружения в него части тела, требующей терапии. Гидрофильная прокладка и вода в резервуаре необходимы для предупреждения ожога кожных покровов пациента продуктами электролиза.

Электроды могут иметь прямоугольную форму, быть в виде полумаски (применение на лице), в виде «воротника» (для воздействия на верхнюю часть спины и надплечий), в виде воронки (для применения в области ушей), «ванночка». Также существуют полостные электроды для внутривлагалищного и ректального применения.

После закрепления электродов на теле пациента, или помещения части тела в «ванночку» запускается ток, и постепенно наращивается до достижения необходимых параметров. Процедура завершается постепенным уменьшением тока до его выключения.

Электроды могут быть наложены поперечно или продольно. Поперечное наложение способствует более эффективному воздействию на глубокорасположенные ткани. Электроды располагаются на противоположных участках тела, напротив друг друга. Продольное расположение обеспечивает воздействие на поверхностные участки тканей. Электроды накладываются на одну сторону тела.

При проведении процедуры необходимо принимать во внимание ощущения пациента. Нормальная реакция на ток проявляется в виде ощущения «ползающих мурашек», небольшого покалывания. Плотность тока необходимо снизить при возникновении ощущения жжения.

После проведения 5-7 сеансов гальванизации состояние пациента может ухудшиться. Данный эффект обозначает положительный эффект от проведенных процедур.

Длительность процедуры составляет от 15 минут (при общем воздействии) до 40 минут (при местном воздействии). Терапевтический курс состоит из 10-20 сеансов гальванизации. Рекомендовано проведение процедуры ежедневно или через день. Прохождение повторного курса возможно через месяц.

Место в неврологической и общемедицинской практике

Гальванизация является эффективным методом терапии таких неврологических заболеваний:

Также гальванизация широко применяется в таких областях медицины:

  • кардиология;
  • гастроэнтерология;
  • урология;
  • пульмонология;
  • стоматология;
  • хирургия;
  • эндокринология;
  • ортопедия;
  • гинекология;
  • косметология;
  • дерматология;
  • офтальмология.

Техника и методы проведения процедуры

Перед началом процедуры кожа пациента должна быть очищена. При наличии повреждений кожных покровов данные участки необходимо обработать вазелином, и покрыть ватой, резиной или клеенкой.

Электроды накладываются продольно (воздействие на поверхностные ткани) и поперечно (влияние на глубокие тканы и органы). Возможно расположение поперечно-диагонально.

При проведении процедуры больной занимает сидячее или лежачее положение. Электроды крепятся при помощи лейкопластыря, бинта, или небольших емкостей с песком.

Существуют различные методы применения гальванизации:

Электрофорез, как улучшенный метод гальванизации

Сочетание гальванизации с лекарственными средствами называется электрофорезом. Гальванический ток применяется для более результативного усвоения лекарственных препаратов организмом, и делает их воздействие эффективным и мягким.

Лекарственные растворы вводятся в организм через слизистые оболочки и кожные покровы под воздействием электрического поля. Наиболее эффективным является воздействие на волосяные фолликулы, протоки сальных желез, межклеточные промежутки и потовые железы.

В лекарственных препаратах, применяемых при электрофорезе, содержатся ионы (заряженные частицы), которые вводятся в организм различными электродами. Выбор электрода зависит от заряда ионов. Во время одной процедуры с разных точек воздействия могут вводиться различные вещества.

Процедура электрофореза является безболезненной, однако возможны дискомфортные ощущения в виде легкого покалывания в области наложения электродов.

  • воспалительные процессы;

Электрофорез может проводиться различными путями:

  1. Через кожные покровы
    – электроды размещаются на коже пациента.
  2. При помощи ванночек
    – в резервуар с встроенными электродами помещается раствор лекарственного вещества, и в данную «ванночку» помещается часть тела, требующая воздействия.
  3. Полостным методом
    – раствор лекарственного препарата вводится ректально или во влагалище. Электрод также вводится внутрь. С наружной части тела крепится электрод, имеющий другую полярность (применяется для терапии болезней толстого кишечника и органов малого таза).
  4. Внутритканевым методом
    – препарат вводится перорально, ингаляционно, внутривенно, электроды накладываются на пораженный орган или область (наиболее эффективно при болезнях органов дыхания).

В результате процедуры лекарственные вещества накапливаются в кожных покровах, и могут оставаться там от 12 часов до 20 суток. За счет этого обеспечивается более длительное воздействие препаратов, и медленное выведение их из организма.

Преимущество метода в том, что накопление лекарственного препарата происходит локально, не распространяя его на весь организм.

Концентрация лекарства в области применения в несколько раз превышает концентрацию при обычных способах ввода. Электрофорез позволяет ввести лекарства в области с нарушением микроциркуляции и кровообращения, куда обычно проникновение медпрепаратов затрудняется. Положительной чертой метода также является низкий уровень аллергических и побочных реакций.

Применяемые аппараты

Аппараты для гальванизации и электрофореза являются электронными выпрямителями переменного тока осветительной сети. Для проведения процедуры гальванизации применяются следующие приборы:

  • «Поток-1», «Поток-01М», «Поток-Бр»;
  • «ГР»;
  • «АГН-1», «АГН-2»;
  • «Радиус»;
  • «НЭТ»;
  • «ЭТЕР»;
  • «ЭЛФОР», «ЭЛФОР-Проф»;
  • «ЭСМА».

Аппарат для гальванизации и электрофореза ЭЛФОР

Противопоказания к применению физиолечения

  • индивидуальной непереносимости гальванического тока;
  • наличии новообразований или подозрений на них;
  • острых воспалительных заболеваниях;
  • сердечно-сосудистые заболевания в тяжелой форме;
  • острых гнойных заболеваниях;
  • системных заболеваниях крови;
  • выраженном атеросклерозе;
  • экземе, дерматите;
  • лихорадочных состояниях;
  • заболеваниях кожных покровов;
  • повреждениях кожи;
  • нарушенной чувствительности кожи;
  • во время беременности;
  • при кахексии.

Электрофорез – это физиотерапевтическая процедура, основанная на одновременном воздействии на ткани организма электричества и лекарственного препарата. Электрический ток оказывает раздражающее действие на периферические нервные волокна, по которым импульсы распространяются к вегетативной нервной системе. Вводимое через неповреждённую кожу лекарство вступает во взаимодействие с клетками организма. Данный вариант физиолечения обеспечивает влияние фармакологического средства на весь организм благодаря равномерному поступлению активных веществ в кровь и лимфу.


Принцип действия электрофореза основан на полярности частиц. Под влиянием постоянного электрического тока молекулы действующего вещества двигаются вдоль траектории распространения электричества от одного электрода к другому. Некоторые препараты вводятся только с одного полюса, другие можно вводить с обоих. Для того чтобы правильно сделать электрофорез, необходимо строгое соблюдение алгоритма выполнения физиопроцедуры. Иначе не будет достигнут лечебный эффект.

Общие принципы

Электрофорез через неповреждённую кожу проводится в двух вариантах. При первом варианте лекарственным средством смачивается прокладка, которая размещается на коже в месте наложения электрода. Существуют прокладки, изначально содержащие лекарственное вещество. Это значительно облегчает выполнение процедуры и удобно для тех, кто проводит электрофорез дома. Второй вариант выполнения отличается тем, что действующее вещество находится в растворе, которым заполняют специальную ёмкость, в нее помещают руки или ноги пациента. Этот метод позволяет вводить большее количество препарата, так как раствор соприкасается со значительной площадью кожи.

В медицинских учреждениях проводится электрофорез через слизистые оболочки. Полостные органы (желудок, мочевой пузырь, прямая кишка, влагалище) заполняют раствором лекарства. Этот способ позволяет воздействовать на всю массу целевого органа.

Электрофорез – такой же метод введения медикаментов, как и внутримышечные, внутривенные инъекции.

В организм проникает комплекс веществ, которые оказывают воздействие на обменные процессы в тканях. При наличии повышенной чувствительности или аллергической реакции в прошлом к компонентам медикаментозного средства их введение путём электрофореза противопоказано.

Методика проведения

Стандартный электрод для электрофореза представлен металлической или тканевой пластиной. Для проведения процедуры в области шеи используют электроды в виде воротника. Если необходимо воздействие на небольшие участки тела (например, нос), то применяют электроды меньшего размера.

Прежде чем начать делать процедуру, медсестра обязана предупредить пациента об ощущениях, которые возникают во время её выполнения. Возможно возникновение ощущения жжения или покалывания. Если ощущения становятся острыми, появляется интенсивная боль, то может понадобиться изменение режима терапии или её прекращение. Правильно сделанная процедура сопровождается приятными ощущениями.

Существует важное правило. Электрофорез не проводится на участках с повреждённой кожей. Также нельзя его проводить при наличии родимых пятен или пигментных невусов на целевом участке.

Техника наложения электродов зависит от расположения и размеров области поражения, характера заболевания. Если предусмотрено поперечное расположение, то электроды накладывают на противоположных поверхностях тела (например, живот и спина). При продольном положении электроды располагаются на одной поверхности, но один несколько ближе к патологическому очагу, другой дальше. Этот способ подходит для воздействия на конечности, позвоночник. Длительность процедуры 15-30 минут.

Физиотерапия с использованием электрофореза проводится в основном аппаратами: «Поток-1», «ГР-2», «ГК-2», «Элфор», «Элфор-Проф». Эти приборы небольшие, поэтому возможно выполнение процедур в домашних условиях. Самостоятельное проведение процедур не рекомендуется, так как необходим контроль со стороны специально обученного сестринского персонала для правильности проведения.

Примеры лекарственного электрофореза

В пульмонологии, хирургии и ортопедии распространена практика электрофореза с ферментными препаратами и гормонами. Одним из наиболее часто используемых ферментов является гиалуронидаза, которая выпускается под торговым названием «Лидаза». Кроме того, есть гиалуронидаза с добавлением специфических компонентов, которые обеспечивают более длительное действие − препарат «Лонгидаза».

Для того чтобы сделать возможным проникновение таких крупных молекул, как ферменты, через кожу, необходимо использование буферных растворов. Обычно с этой целью используют растворы кислот (для лидазы) или щелочей (для таких ферментов, как трипсин, химотрипсин). Также щёлочной буфер необходим для обеспечения эффективного электрофореза гормонов (например, гидрокортизона).

Для достижения большего эффекта применяются комбинированные средства. Например, препарат «Карипаин» является комплексом из папаина, химопапаина, коллагеназы, лизоцима, протеиназы и бромелайна. Используется при заболеваниях суставов (артриты, артрозы, контрактуры), позвоночника (грыжи, остеохондроз в области поясницы и шеи).

При болях в позвоночнике в неврологической практике используется электрофорез с новокаином. Буферных растворов для проведения этой процедуры не требуется. Возможно введение чистого препарата. Обычно используется 0,25-5% раствор.

В пульмонологии практикуют физиотерапевтическое лечение при острых в период реконвалесценции и хронических патологиях.

Важно! Применение каких-либо методов физиотерапии, в том числе электрофореза, в острую фазу заболевания категорически запрещается.

Во время выздоровления при пневмонии, обострениях хронических обструктивных заболеваний лёгких, бронхите используется электрофорез с эуфиллином, новокаином, лидазой.

Варианты электрофореза

Лекарственный электрофорез по методике Вермеля. Пациент находится в положении лёжа на животе. Один большой электрод располагают на спине между лопатками. Электроды с противоположными полюсами фиксируют в районе икроножных мышц.

Методика Щербака обычно применяется при патологии шейного или поясничного отделов позвоночника. На поясничную область накладывают обычный прямоугольный электрод. Второй в виде воротника оборачивается вокруг шеи и спускается на грудную клетку.

В комплексной терпи патологии тазобедренных суставов используют электрофорез трусиковой зоны по Щербаку. Один из электродов, как и в предыдущем варианте, на пояснице. Два других в проекции тазобедренных суставов на передней поверхности бедра.

К особым вариантам относят электрофорез лица, глаз, области ран, носа и области симпатических узлов. В гинекологической практике используют полостной электрофорез, при котором один из электродов расположен на поясничной области, а другой в полости влагалища. В проктологии и урологии возможно использование ректального электрода для лечения хронических воспалительных заболеваний околопрямокишечной клетчатки, мочевого пузыря, простаты.

Особенности у детей

В педиатрии электрофорез используют по тем же показаниям, что и для взрослых пациентов. Однако детский организм в большей степени, чем взрослый, состоит из воды, а, следовательно, из растворов электролитов. Кроме того, у ребёнка кожа обладает незначительным сопротивлением. Гальванический ток, используемый для электрофореза, оказывает более быстрое и выраженное воздействие. Поэтому в дозировании процедур применяется отдельная методика расчёта.

Перед проведением процедуры необходимо тщательно осмотреть ребёнка. Наличие диатеза, гнойничковых заболеваний, повреждений кожи – противопоказание для электрофореза. После процедуры необходимо обработать место наложения вазелином или детским кремом. Родители должны следить за состоянием и поведением своего ребёнка и в лечебном учреждении, и дома. Нарушение аппетита, сна, беспокойство или вялость указывают на возможные побочные действия самого электрофореза или препаратов, которые с его помощью вводятся.

Безопасность

Электрофорез – это процедура с использованием электрического тока. Несмотря на то что на электроды подаётся постоянный ток, в большинстве случаев аппарат подключается к сети с переменным током. Любые неисправности в приборе могут стать причиной электротравмы. Поэтому проведение электрофореза самостоятельно в домашних условиях не рекомендуется. При невозможности посещения лечебно-профилактических учреждений предпочтительнее обратиться в центры, которые предоставляют услуги выезда на дом.

Неправильно подобранная доза тока может послужить причиной ожога кожи. При появлении ощущения жжения или интенсивной боли процедуру прекращают. Аппарат выключается. Место ожога обрабатывают раствором перманганата калия или спиртовым раствором танина.

В кабинете, где проводится электрофорез, обязательно должна быть аптечка скорой помощи на случай возникновения анафилактического шока.

В ней находятся: раствор адреналина 0,1%, преднизолон или дексаметазон в ампулах, эуфиллин, противоаллергические препараты (диазолин, лоратадин), флакон с 0,9% раствором хлорида натрия, шприцы, системы, жгут. Персонал кабинета физиотерапии обязан уметь оказывать помощь при осложнениях аллергической природы.

В настоящее время в лечении различных заболеваний используют разнообразные методы. Если раньше медицина больше основывалась на лекарственной терапии, то сейчас часто назначают физиотерапевтические процедуры. Они помогают быстрее справиться с болезнью. Надо знать, что физиотерапия включает много методов, с одним из которых мы и познакомимся подробнее. Рассмотрим, что собой представляет лекарственный электрофорез, при каких патологиях он показан и имеет ли противопоказания.

Сущность метода лечения

Электрофорез относится к физиотерапевтическим процедурам. Во время сеанса организм пациента подвергается воздействию электрических импульсов с целью получить стойкий терапевтический эффект.

Лекарственный электрофорез используют также для введения медицинских препаратов через кожные покровы и слизистые оболочки. Можно сказать, что этот метод является комплексным, так как идет одновременное воздействие тока и лекарственного средства. Какой препарат выбрать для процедуры, каковы процентное содержание и полярность введения, определяет только лечащий врач с учетом состояния пациента и тяжести заболевания.

Сущность электрофореза сводится к тому, что лекарственные препараты поступают внутрь тканей в виде заряженных частиц через межклеточные пространства, протоки потовых и сальных желез. В результате воздействия электрического тока эффективность препаратов существенно увеличивается, так как происходит повышение чувствительности тканей.

Все медикаменты вводятся с учетом их полярности, если это катионы, то они вводятся с анода, а анионы — с катода. Самым лучшим растворителем считается дистиллированная вода, но для плохорастворимых соединений используют спирт или «Димексид».

Лекарственный электрофорез

Механизм действия этой процедуры заключается в том, что лекарственный препарат в виде ионов поступает внутрь организма пациента через поры и протоки сальных и потовых желез. Катионы и анионы задерживаются на кожных покровах под электродом, а затем постепенно проникают в кровь и лимфу. Из-за такого постепенного поступления воздействие лекарства на организм длительное, что является одним из преимуществ этого метода терапии.

Осуществляется лекарственный электрофорез при помощи разных аппаратов, одним из которых является «Поток». Этот прибор в медицине используется уже давно, он проверен временем и надежен. Есть возможность регулировать во время процедуры а также устанавливать время. В настоящее время выпускаются современные аналоги прибора, которые имеют цифровые индикаторы.

Чтобы получить терапевтический эффект, совсем необязательно располагать электроды на больном органе или вводить большие дозы препаратов. Посредством физиотерапии вводят ионы кальция, магния, йода для повышения рефлекторного воздействия на пораженную ткань.

Методики проведения электрофореза

Чтобы повысить эффективность данной процедуры, постоянно разрабатываются и совершенствуются методики электрофореза лекарственного. В настоящее время используют следующие:

  1. Пролонгированная гальванизация. Применяют электрический ток малой силы, но время воздействия продолжительное. Батарея «Крона» является источником тока. Курс лечебных процедур обычно составляет 20-30 сеансов. Электрофорез хорошо успокаивает, оказывает обезболивающее действие.
  2. Лабильная гальванизация. Один электрод во время процедуры закрепляется неподвижно, а второй находится в движении и перемещается со скоростью 3-5 см в секунду по поверхности кожи. Чтобы исключить колебания тока, в аппарат вводят стабилизирующее устройство. Процедура хорошо повышает метаболизм, улучшает кровоснабжение органов и тканей и нервно-мышечную проводимость.
  3. Внутритканевый электрофорез. Проведение процедуры лекарственного электрофореза по данной методике сводится к введению через канюлю подкожно или внутримышечно препарата или смеси веществ. Вводиться лекарство может струйно или капельно. К очагу поражения поперек накладывают электроды, чтобы увеличить концентрацию медицинского препарата. Если лекарство вводят струйно, то ток включают одновременно с этим, а при капельном — после введения.

В неврологической практике электрофорез используют при многих заболеваниях нервной системы. Применяют следующие методики:

1. Вакуум-электрофорез. Используется специальный аппарат ЭВАК-1, который имеет вакуумный насос, кюветы. Во время процедуры кюветы прикладываются к кожным покровам или слизистой оболочке, а прокладка пропитывается лекарственным препаратом. После того как создается разряженное давление, кожа приподнимается и тесно соприкасается с препаратом. Длительность процедуры составляет всего 5-10 минут, на курс необходимо сделать таких 5-10 в зависимости от состояния пациента и тяжести его заболевания. Этот метод электрофореза позволяет ввести большее количество лекарства и гораздо глубже.

2. Микроэлектрофорез. Для проведения процедуры используют ватный вкладыш, в который вставляют фитилек, пропитанный лекарственным препаратом. Сверху располагается электрод для создания контакта металлического наконечника с ватой. Применение лекарственного электрофореза по данной методике используют часто при гипертонии, нарушениях сна, патологиях нервной системы.

3. Электрофонофорез представляет собой сочетание ультразвука и электрофореза. Имеется специальный прибор, который состоит из источника переменного тока, оказывающего терапевтический эффект, датчика, преобразующего ультразвук, источника стабилизированного тока, электронасадки и электрода. Во время процедуры электрод фиксируется на коже, электронасадку заполняют препаратом, закрепляют на ультразвуковом датчике и соединяют с другим полюсом источника тока. Сила тока наращивается постепенно, а потом уже включается ультразвук. Процедуры делают ежедневно, можно через день, по 10-15 минут.

Методики электрофореза лекарственного разные, но какие использовать, решает лечащий врач.

Способы электрофореза

Кроме различных методик, имеются способы использования данной процедуры:

  1. Ванночковый. Сущность заключается в том, что в специальную емкость со встроенными электродами помещается лекарственный раствор и погружается часть тела пациента.
  2. Внутритканевый. Внутривенно или перорально вводят препарат, а на больной участок накладывают электроды.
  3. Полостной способ используют при заболеваниях прямой кишки или влагалища. Внутрь вводится лекарство и подводится электрод, а второй электрод прикрепляется на внешней части тела.

Если назначается лекарственный электрофорез, алгоритм проведения важно знать, но надо также и учитывать, что на всасывание препарата могут оказать влияние различные факторы:

  • Место воздействия процедуры.
  • Возраст больного.
  • Продолжительность электрофореза.
  • Дозировка и концентрация лекарства.
  • Сила электрического тока.
  • Заряд ионов и их размер.
  • Индивидуальные особенности пациента.

Все это необходимо учитывать и корректировать параметры в каждом случае индивидуально.

В чем преимущества электрофореза

Существует много физиотерапевтических процедур, и каждая имеет свои плюсы и минусы. Преимущества лекарственного электрофореза заключаются в следующем:

  • Во время процедуры вводится небольшое количество лекарственного средства.
  • Вещества накапливаются, значит, процедура оказывает пролонгированное действие.
  • Лекарства вводятся в наиболее доступной форме, в виде ионов.
  • Создается высокая местная концентрация без насыщения крови и лимфы.
  • Можно вводить лекарственные вещества в места патологии, что особенно важно при нарушении микроциркуляции.
  • Процедура абсолютно безболезненная.
  • Очень редко наблюдаются побочные эффекты.
  • Лекарства не поступают в ЖКТ, а значит, не разрушаются.
  • Лекарственное вещество вводится через целостные кожные покровы, поэтому специальной стерилизации не требуется.

Таким образом, можно сказать, что этот метод физиотерапевтического воздействия не только эффективный, но и безопасный. Но прежде чем делать лекарственный электрофорез, показания и противопоказания должны быть изучены.

В каких случаях назначают электрофорез

Эта физиотерапевтическая процедура назначается достаточно часто в комплексном лечении многих неврологических, гинекологических, хирургических заболеваний. Не обходится без электрофореза педиатрия и стоматология. Вот перечень некоторых патологий, которые успешно лечатся данной процедурой:

  1. Болезни органов дыхательной системы, начиная с обычного бронхита и заканчивая бронхиальной астмой и пневмонией.
  2. Заболевания уха, горла и носа.
  3. Прекрасно поддаются терапии болезни ЖКТ, например гастрит, панкреатит, язвенная болезнь.
  4. Используется электрофорез в комплексной терапии патологий сердечно-сосудистой системы. Сюда можно отнести гипертонию, гипотонию, стенокардию, мерцательную аритмию и др.
  5. Заболевания мочеполовой системы.
  6. Патологии нервной системы практически не обходятся без данного способа лечения. Прекрасно лечатся мигрени, неврозы, радикулиты, межпозвоночные грыжи и др.
  7. Опорно-двигательная система также хорошо отзывается на электрофорез. Эту процедуру часто назначают после переломов, при остеохондрозе, артрозе, артрите.
  8. Болезни эндокринной системы.
  9. Кожные заболевания.
  10. В области стоматологии также не редкость электрофорез, например при стоматите, гингивите, пародонтите.

Как видно из приведенного списка, лекарственный электрофорез показания имеет достаточно обширные.

Противопоказания к процедуре

Нет такого лечения или процедуры, которые бы были разрешены абсолютно всем. Мы уже рассмотрели, какие имеет лекарственный электрофорез показания. И противопоказания у данного метода терапии имеются. К таковым можно отнести:

  • Доброкачественные и злокачественные новообразования в любом месте организма.
  • Наличие сердечной недостаточности.
  • Наличие кардиостимулятора.
  • Любой воспалительный процесс в организме в стадии обострения.
  • Высокая температура тела.
  • Тяжелая форма бронхиальной астмы.
  • Нарушения свертывания крови.
  • Кожные заболевания, например экзема или дерматит.
  • Нарушение чувствительности кожных покровов.
  • Наличие механических повреждений в месте наложения лекарственных прокладок.
  • Непереносимость электрического тока.
  • Аллергия на лекарственный препарат.
  • Если предполагается наложение электродов на область матки и яичников, то менструация является противопоказанием.

В любом случае, даже если вы считаете, что у вас нет противопоказаний к процедуре, проведение лекарственного электрофореза возможно только после консультации с врачом. Должны быть учтены все нюансы.

Лечебное воздействие электрофореза

Если назначается лекарственный электрофорез, методика проведения, в принципе, любая принесет большую пользу, так как процедура производит следующий терапевтический эффект:

  • Снижает интенсивность воспалительных процессов.
  • Обладает противоотечным действием.
  • Снимает болевые ощущения.
  • Устраняет спазм мышечных волокон.
  • Действует успокаивающе на нервную систему.
  • Ускоряет регенерацию тканей.
  • Активизирует иммунную систему человека.

В момент процедуры эффект также зависит от доминирующего электрода. Если это катод, то:

  • Происходит расширение кровеносных и лимфатических сосудов.
  • Релаксация.
  • Нормализуется обмен веществ.
  • Стабилизируется работа желез внутренней секреции.
  • Стимулируется выработка биологически активных веществ.

Положительный электрод — анод — оказывает следующее воздействие:

  • Способствует выведению лишней жидкости из организма.
  • Обезболивает.
  • Убирает воспаление.

В пользе такой процедуры можно не сомневаться, но главное, чтобы были учтены все противопоказания, иначе это может привести к нежелательным последствиям.

Побочные эффекты электрофореза

Если процедура назначена врачом с учетом состояния пациента и его заболевания, то лекарственный электрофорез нежелательные эффекты дает достаточно редко. Чаще всего это лекарственный препарат, которые могут проявляться жжением, покраснением, сыпью и отечностью. После окончания процедуры все симптомы быстро исчезают.

Некоторые пациенты через несколько сеансов отмечают усиление болезненности, небольшое повышение температуры тела. Обычно к концу курса терапии все ощущения проходят без медицинского вмешательства.

Этапы проведения процедуры

Если назначено проведение процедуры лекарственного электрофореза, алгоритм должен быть следующим:

  1. Медсестра или врач перед процедурой должны обязательно проверить исправность аппарата.
  2. Посмотреть в карточке пациента назначения доктора.
  3. Подробно разъяснить, особенно если человек в первый раз делает электрофорез, какие ощущения могут быть.
  4. Помочь пациенту занять удобное положение.
  5. Удостовериться в целостности кожных покровов в месте наложения прокладки.
  6. Приготовить прокладки, соответствующие месту наложения, намочить их в теплой воде.
  7. Приложить их на тело больного.
  8. Сверху накладывается свинцовая пластина, которая будет соединяться проводом с аппаратом.
  9. Произвести расчет силы тока для процедуры.
  10. Проверить, чтобы регулятор интенсивности тока стоял в крайнем левом положении.
  11. Подключить прибор к сети.
  12. Переключатель шунта поставить на отметку «5», если пациентом является ребенок или процедура делается на голову, и «50» для взрослых пациентов и других частей тела.
  13. Постепенно увеличивать силу тока до необходимой величины.
  14. Если пациент процедуру переносит хорошо, то его можно накрыть, но предупредить, что при любых неприятных ощущениях он должен сообщить медсестре.
  15. Засечь время проведения электрофореза.
  16. После окончания регулятор силы тока поставить в положение «0».
  17. Отключить прибор от сети.
  18. Снять с тела пациента электроды и осмотреть кожу на наличие покраснений и раздражений.
  19. Пациенту напомнить, когда он должен прийти на следующую процедуру.

Этот алгоритм выполнения должна знать любая медицинская сестра.

Любые физиотерапевтические процедуры окажут существенную помощь в комплексной терапии, но только тогда, когда они назначаются с учетом патологии и индивидуальных особенностей пациента, а также выполняются качественно, грамотным специалистом. 9sb7[«NvH8Jxމ7iOp*+?RQb8{9

h EkE7$`CTvb)-R.-1HMĬ:Q`xXgxyTg’:qo?dM/:#Nъ8od1 m39bbuxt.

%PDF-1.4
%쏢
2272 0 obj
>
endobj

xref
2272 34
0000000015 00000 n
0000001002 00000 n
0000001182 00000 n
0000001460 00000 n
0000325455 00000 n
0000325480 00000 n
0000325544 00000 n
0000326309 00000 n
0000612413 00000 n
0000613311 00000 n
0000621346 00000 n
0000630948 00000 n
0000639310 00000 n
0000648818 00000 n
0000656850 00000 n
0000663840 00000 n
0000672302 00000 n
0000682992 00000 n
0000690993 00000 n
0000697156 00000 n
0000702872 00000 n
0000708175 00000 n
0000711590 00000 n
0000716975 00000 n
0000725447 00000 n
0000732420 00000 n
0000742341 00000 n
0000749633 00000 n
0000756086 00000 n
0000775178 00000 n
0000794820 00000 n
0000794856 00000 n
0000794891 00000 n
0000795213 00000 n

trailer
]/Prev 4217516>>
startxref
0
%%EOF

2273 0 obj
>]
>>
/PageLayout/SinglePage
/PageMode/UseNone
/Page 1
/Metadata 2271 0 R
>>
endobj
2274 0 obj
>
/Contents 2275 0 R
/CropBox [0 0 419. _!rKy[(yZ!I(`L|p=ռ7 z60dl_ r

}jo!˿3q۟28ޟ3r{y;Nt9Tvo! ꝿClMlqԟu>O

;O 6=;>i
yc iAJ,a:W=϶qe߰5y];؟2- g!C}: `T=1?KWSBӄ+@?iX|?=Z͖»g

помех в электрофорезе белков | AACC.org

Слайды

Загрузить слайды (pdf)

Выписка

Скачать стенограмму (pdf)

Слайд 1:

Здравствуйте, меня зовут Ану Махарджан. Я научный сотрудник по клинической химии / иммунологии в Университете штата Юта в Солт-Лейк-Сити. Добро пожаловать в эту жемчужину лабораторной медицины на тему «Вмешательства в электрофорез белков»

Слайд 2:

Во время этого выступления я рассмотрю различные форматы электрофореза белков, потенциальные источники помех и подходы к их устранению или устранению.К концу жемчуга человек должен быть в состоянии идентифицировать различные методы электрофореза, используемые клиническими лабораториями, дифференцировать различные аналитические помехи в электрофорезе белков и обобщать подходы, чтобы минимизировать влияние этих источников помех на результаты электрофореза белков.

Слайд 3:

Гель-электрофорез

— это один из наиболее распространенных методов электрофореза, выполняемый путем нанесения образца на гелевую основу и разделения белка с помощью комбинации буфера и электрического поля, которое вызывает поток ионов между узлами.Гель-электрофорез состоит из поддерживающей среды, такой как агароза, ацетат целлюлозы или полиакриламидные гели с различными размерами пор. Гель агарозы — обычная поддерживающая среда, используемая в клинических лабораториях. Электрофорез часто проводят в буфере с pH 8,6, в результате чего большинство белков имеют общий отрицательный заряд. Обнаружение белков осуществляется путем визуализации с использованием красителей. Примеры красок, используемых для визуализации, включают бриллиантовый синий кумасси и амидо-черный. После окрашивания геля видимые полосы можно количественно определить с помощью денситометрии.

Слайд 4:

Капиллярный электрофорез — это метод разделения, при котором электрофорез выполняется в капиллярной трубке с приложением высокого напряжения. CE состоит из источника питания высокого напряжения, системы ввода образца, капиллярной трубки, детектора и устройства вывода. Капиллярные трубки обычно состоят из плавленого кварца с внутренним диаметром всего 20-100 мкм. Плавленый кремнезем содержит силанольные группы, которые ионизируются в щелочном буфере, создавая двойной электрический слой, создающий поток буфера к катоду.Этот электроосмотический поток заставляет большинство белков двигаться в одном направлении, независимо от их заряда. Белки перемещаются от анода к катоду и обычно обнаруживаются УФ-светом с длиной волны 200 нм, а также электрохимическими методами, методами флуоресценции, проводимости или масс-спектрометрии. КЭ популярен в клинических лабораториях из-за высокой пропускной способности и использования небольшого объема образцов.

Слайд 5:

Белковый электрофорез разделяет белковые структуры на альбумин или глобулины.Глобулины состоят из α-1, α-2, β и γ. Альбумин — это самый распространенный белок сыворотки крови человека. Область α- 1 содержит α1-антитрипсин, кислый гликопротеин α-1, α1-антихимотрипсин и липопротеин. Область α-2 состоит из α2-макроглобулина, гаптоглобина и церулоплазмина. Область β можно разделить на β-1 или β-2. β-1 состоит из трансферрина, β-липопротеина и C4, а β-2 состоит из C3 и фибриногена. γ-область содержит иммуноглобулины и C-реактивный белок. Иммуноглобулин А (IgA) также может мигрировать в β-область.

Слайд 6:

Иммунофиксация обычно применяется при обнаружении аномального белка, известного как М-спайк, с помощью гель-электрофореза или капиллярного электрофореза. Иммунофиксационный электрофорез характеризует аномальные полосы путем нанесения специфической антисыворотки на каждую дорожку электрофоретического геля. Затем иммунный комплекс исследуют путем окрашивания. Вот примеры иммунофиксации, выполненной на 3 разных образцах. Первое изображение показывает нормальный IFE, второе изображение показывает моноклональное антитело IgG κ, а третье изображение показывает моноклональное антитело IgM κ. IFE используется для диагностики и мониторинга различных дискразий плазматических клеток, таких как множественная миелома и макроглобулинемия Вальденстрема. IFE более чувствителен к анализу, но количественное определение M-белков с помощью IFE не проводится. IFE также используется в тех случаях, когда электрофорез сывороточного белка не может количественно определить небольшие отклонения, как это может случиться с бета-мигрирующими M-белками или небольшими свободными легкими цепями.

Слайд 7:

Одним из наиболее часто встречающихся помех в клинических лабораториях является гемолиз, и это вмешательство может повлиять на электрофорез.Гемолиз высвобождает гемоглобин и другое цитоплазматическое содержимое красных кровяных телец. In vivo причины гемолиза включают микробиологические агенты, преэклампсию, гемолитическую анемию и серповидно-клеточную анемию. In vitro причины включают использование игл с маленьким отверстием, которые разрывают эритроциты, чрезмерный вакуум или всасывание во время сбора образцов или длительное хранение образцов. Гемолиз приводит к тому, что комплексы гемоглобин и гемоглобин-гаптоглобин проявляются в виде дискретных полос в областях α2 и β.Эти полосы могут быть ошибочно приняты за моноклональные белки при интерпретации результатов электрофореза белков. Гель, показанный на рисунке справа, показывает гемоглобин, который проявляется как повышенный уровень белка в области β. Визуальный осмотр образца может подтвердить наличие гемолиза. При гемолизе, который не виден глазом, можно использовать IFE, чтобы исключить присутствие моноклонального белка. Правильное обучение методам взятия крови поможет свести к минимуму такое вмешательство. Кроме того, осведомленность об этом явлении и указание на потенциальное вмешательство из-за гемолиза в отчете может быть полезно для врачей.

Слайд 8:

Фибриноген — это нормальный гликопротеин плазмы, который при расщеплении тромбином до фибрина образует фибриновый сгусток для заживления ран. Образцы, которые не свертывались должным образом, особенно у пациентов, получающих терапию против свертывания, могут содержать фибриноген. Фибриноген будет мешать электрофорезу белков, если на анализ будет отправлен неправильный тип образца. Фибриноген будет мигрировать в область β / γ и может быть неверно интерпретирован как моноклональный иммуноглобулин. Один из способов исключить влияние фибриногена — провести иммунофиксацию.На рисунке электрофорез показывает пик в области β, который при отражении на IFE не показывает моноклональной полосы. Поскольку IFE использует специфические антисыворотки против иммуноглобулинов, IFE не подтвердит присутствие моноклонального белка, если аномальная полоса была вызвана фибриногеном. Решения по вмешательству фибриногена также включают обработку образца тромбином или осаждение этанолом для удаления фибриногена; однако клинические лаборатории обычно не используют эти методы лечения.

Вы также можете использовать тест-полоски, такие как Quantofix EDTA, для идентификации образцов с EDTA, когда есть подозрения на предоставленный образец.Обеспечение надлежащего обучения относительно требований к образцу поможет свести к минимуму такое вмешательство.

Слайд 9:

Еще одна экзогенная интерференция, встречающаяся при электрофорезе белков, особенно влияющая на CE, — это образцы, содержащие контрастные красители. Как уже упоминалось, обнаружение белков в CE часто основано на УФ-обнаружении при 200 нм. Рентгеноконтрастные агенты, используемые при визуализации, поглощают на той же длине волны и выглядят как моноклональные полосы. Многие из этих контрастных веществ влияют на фракцию α2-глобулина или, реже, на фракцию β2-глобулина.На этих рисунках, показывающих результаты КЭ, присутствуют 3 различных контрастных красителя, урографин, телебрикс и омнипак, которые показывают повышенную область α-2. В другом исследовании рентгеноконтрастные агенты в концентрации от 11 мкл до 1 мл сыворотки, что является ожидаемой концентрацией после болюсной инъекции для рентгенологического исследования, т.е. 7,5 г / л, приводили к появлению аномального пика в CE. Забор крови не должен предшествовать в течение 2-6 дней после введения пациентом контрастного вещества. Поскольку интерференция контрастного вещества происходит из-за УФ-обнаружения, интерференция не возникает при использовании других методов, таких как гель-электрофорез или иммунофиксация.

Слайд 10:

Антибиотики также вызывают помехи в CE из-за поглощения на длине волны УФ-излучения и проявляются в виде моноклональной полосы в областях α или β. Вот пример применения антибиотика пиперациллин-тазобактама, который вызвал небольшой пик в анодном участке β-глобулина. На рисунке слева этого пика нет, поскольку образец был собран до введения пиперациллин-тазобактама. Другие антибиотики, влияющие на CE, включают цефтриаксон, 5-флуроцистозин и сульфаметоксазол.Чтобы исключить влияние антибиотиков, можно использовать иммунофиксацию. Помехи можно уменьшить, взяв образец для электрофореза, когда антибиотик находится в минимальной концентрации.

Слайд 11:

Что касается интерференции, которую я описал до сих пор, IFE может отличить истинный моноклональный белок от интерференции. Однако это становится более трудным, когда вмешательство воздействует на IFE, что чаще наблюдается при терапии моноклональными антителами.

Терапия моноклональными антителами, такими как даратумумаб и элотузумумаб (одобренные FDA препараты), используются для лечения рецидивной или рефрактерной множественной миеломы.

Исатуксимаб — это новое моноклональное антитело, которое находится на рассмотрении для лечения множественной миеломы. Все эти моноклональные антитела представляют собой антитела IgG κ; следовательно, инфузия в высоких концентрациях будет имитировать κ M-белок IgG.

Слайд 12:

Цифры IFE здесь показывают появление моноклонального IgG κ IFE в образце сыворотки здорового донора, в который были добавлены различные моноклональные антитела. Вмешательство в электрофорез белков и ИФЭ может сохраняться в течение недель после лечения.Ошибочно истолкованные результаты могут привести к ненужному дополнительному исследованию или неправильной классификации заболевания.

Слайд 13:

Есть ограниченные возможности для подтверждения и уменьшения помех, вызванных моноклональными антителами. Из-за большого числа пациентов с множественной миеломой, получающих даратумумаб, существует специфический для даратумумаба иммунофиксационный анализ, известный как DIRA, для подтверждения и преодоления этого вмешательства.

В анализе DIRA используется даратумумаб-специфическое антитело для образования комплекса, который вызывает сдвиг в миграции даратумумаба на гель IFE.

Показанный рисунок демонстрирует анализ. Две дорожки фиксации общего белка сыворотки для исходного уровня и после лечения пациента с дара показаны на дорожках 1 и 2. В анализе также используются контроли миграции даратумумаба и комплекса даратумумаб: анти-даратумумаб, обозначенные на дорожках 3 и 4. Синяя стрелка показывает расположение контроля даратумумаба, а оранжевая стрелка показывает сдвиг, который происходит, когда даратумумаб образует комплекс со специфическим антителом к ​​даратумумабу.

Антисыворотки, используемые для анализа IFE, специфичны только для IgG и κ.Образцы исходной сыворотки с антидартумумабом или без него анализируются рядом с образцами сыворотки, собранными после последующей обработки даратумумабом. Красные стрелки на дорожках 7 и 11 указывают на предполагаемое вмешательство даратумумаба, обнаруженное после лечения. Дорожки 8 и 12 положительны для

даратумумаб: комплекс анти-даратумумаб, но отрицательный для предполагаемой полосы, что указывает на то, что образец является отрицательным по DIRA, что означает отсутствие моноклонального белка. Если бы был остаточный эндогенный белок М IgG κ, вторая полоса оставалась бы в этой предполагаемой области.Это будет соответствовать положительному тесту DIRA, указывающему на присутствие моноклонального белка. DIRA ограничен тем, что анализ предназначен только для различения даратумумаба, а не других терапевтических средств на основе моноклональных антител.

Слайд 14:

Альтернативой тесту DIRA является масс-спектрометрия MALDI-TOF, также известная как MASS-FIX. Основываясь на массе даратумумаба, этот метод позволяет отличить даратумумаб от эндогенного М-белка пациента. Однако этот метод все еще подвержен ложноотрицательным результатам примерно для 16% образцов пациентов, как показано в исследовании Мура и др. В 2019 году.Следовательно, MASS-FIX не может различить все образцы из-за плохого разрешения линейного прибора MALDI-TOF.

Существует еще один развивающийся метод масс-спектрометрии, называемый miRAMM — быстрое и точное измерение массы с использованием моноклональных иммуноглобулинов. miRAMM отличает эндогенный М-белок от моноклональных антител. Анализ основан на идентификации масс-спектров участков легкой цепи иммуноглобулинов, которые преобразованы в молекулярные массы каждого варианта легкой цепи.miRAMM может различать различия в молекулярных массах М-белков в пределах 1 Да. Этот метод отличает широкий спектр терапевтических средств с использованием моноклональных антител.

Однако он еще не используется в клинической лаборатории.

Слайд 15:

Вот пример miRAMM, позволяющий отличить М-белок от даратумумаба в образце пациента, в который добавлены различные концентрации даратумумаба. Чистый образец сыворотки с выделенным белком IgG-κ M подвергается воздействию даратумумаба различной концентрации и анализируется с помощью IFE и miRAMM.Образец сыворотки разбавляют даратумумабом различной концентрации, чтобы получить общий М-белок 0,3 г / дл. Верхняя панель результатов IFE показывает, что нет разницы в выходном изображении при разных концентрациях даратумумаба. Электрофорез белков показывает, что в целом 0,3 г / дл М-белка сохраняется, даже несмотря на изменение соотношения даратумумаб: М-белок.

Наконец, образцы с различной концентрацией даратумумаб: М-белок анализируют с помощью miRAMM. miRAMM четко различает пик для М-белка и даратумумаба.Он показывает, что пик даратумумаба увеличивается с увеличением концентрации даратумумаба, тогда как пик М-белка уменьшается.

Слайд 16:

В дополнение к DIRA и масс-спектрометрическому анализу для преодоления терапевтического вмешательства антител, новая технология, называемая антиген-специфическим терапевтическим анализом истощения моноклональных антител (ASADA), кажется многообещающей для уменьшения интерференции терапевтических антител. ASADA состоит из магнитных шариков, покрытых антигенами против специфического

терапевтических антител.Чтобы истощить даратумумаб, магнитные шарики покрывают His-меченным CD38. Аналогичным образом, чтобы истощить элотузумаб, магнитные шарики покрывают His-меченным SLAMF7. Использование магнитных шариков показывает потенциал для мультиплексирования различных терапевтических антител. В исследовании Liu et al., ASADA был высокоспецифичным в истощении даратумумаба в 12 образцах, которые, как известно, получали терапию даратумумабом. Только 1 образец пациента, подтвержденный терапией даратумумабом, не показал истощение запасов даратумумаба после лечения ASADA.В этом образце была высокая концентрация эндогенного IgG / k, который мигрировал вместе с даратумумабом, вызывая стойкий катодный IgG / k даже после лечения ASADA.

Слайд 17:

В этой таблице перечислены помехи, которые были рассмотрены, а также затронутые методы и способы устранения помех. Мешающие агенты, такие как гемолиз, фибриноген, контрастные красители и антибиотики, влияют на гель-электрофорез и капиллярный электрофорез.

Эти проблемы с помехами можно решить с помощью иммунофиксации.Терапия моноклональными антителами является одним из новейших мешающих средств, влияющих не только на гель-электрофорез и капиллярный электрофорез, но и на иммунофиксацию. Несколько методов, таких как анализ сдвига специфического mAb, масс-спектрометрия или анализ антиген-специфического терапевтического истощения моноклональных антител (ASADA), могут быть использованы для преодоления помех терапии моноклональными антителами.

Слайд 18:

Распознавание различных помех поможет определить правильный подход к устранению проблемы.Многие помехи могут быть устранены с помощью IFE, но терапевтические препараты с моноклональными антителами могут мешать точной интерпретации IFE. Следовательно, использование DIRA, масс-спектрометрических анализов или ASADA, если таковые имеются, может устранить помехи, вызванные терапевтическими препаратами моноклональных антител.

Slide 19: Вот ссылки, которые я использовал для подготовки этого выступления.

Слайд 20:

Я не раскрываю информацию для этой презентации.

Slide 21: Спасибо с www.TraineeCouncil.org

Спасибо, что присоединились ко мне на этой жемчужине лабораторной медицины «Вмешательства в электрофорез белков».

Справочник по применению капиллярного электрофореза

Об этой книге

Введение

За последнее десятилетие высокоэффективный капиллярный электрофорез (HPCE) стал мощным и универсальным методом разделения, который обещает конкурировать с высокоэффективной жидкостной хроматографией в применении к разделению как заряженных, так и нейтральных частиц.Высокая скорость и высокая эффективность разделения, которые могут быть достигнуты с использованием любого из различных режимов HPCE, привели к более широкому использованию этого метода в ряде аналитических сред. Однако эти процедуры все еще находятся на ранних стадиях разработки, и остается несколько препятствий для их принятия в качестве метода выбора для ряда аналитических задач. Одним из таких препятствий является выбор и оптимизация условий, необходимых для достижения воспроизводимого разделения аналитов, и именно в этой области эта новая книга призвана помочь.
Книга написана международной группой авторов, состоящей из академических и промышленных пользователей, а также производителей инструментов. В его основе лежит ряд таблиц, разделенных на конкретные области применения. В них приведены подробности опубликованных разделений широкого диапазона архетипических аналитов, успешных условий разделения и матрицы, в которой они были представлены. Эти таблицы основаны на разделениях, о которых сообщалось с 1992 года, и полностью ссылаются на оригинальную литературу.Таблицы поддерживаются обсуждениями проблем, которые представляет конкретная область, а также стратегиями и решениями, принятыми для их преодоления. Общие охватываемые области: биохимия, фармацевтика, бионаука, ионный анализ, анализ пищевых продуктов и наука об окружающей среде.

Ключевые слова

биохимия исследование мутации лекарств от рака

Редакторы и сотрудники

  • Хидехару Шинтани
  • Дж.Polonský
  1. 1. Национальный институт медицинских наук, Министерство здравоохранения и социального обеспечения, Токио, Япония,
    • DOI
      https://doi.org/10.1007/978-94-009-1561-9
    • Информация об авторских правах
      Springer Science + Business Media Б.V. 1997 г.
    • Имя издателя
      Спрингер, Дордрехт
    • электронные книги

      Архив книг Springer

    • Печатать ISBN
      978-94-010-7197-0
    • Интернет ISBN
      978-94-009-1561-9
    • Купить эту книгу на сайте издателя

    Связанные с белком

    G и АТФ-чувствительные внутренние каналы с ионами калия, необходимые для проникновения в ВИЧ

  2. 2.

    Лекарства от ВИЧ, одобренные FDA | Понимание ВИЧ / СПИДа | AIDSinfo. Доступно по адресу: https://aidsinfo.nih.gov/understanding-hiv-aids/fact-sheets/21/58/fda-approved-hiv-medicines (дата обращения: 6 января 2019 г.).

  3. 3.

    Чжан, X. Антиретровирусные препараты: текущее состояние и развитие в следующем десятилетии. Acta Pharmaceutica Sinica. В 8 , 131–136 (2018).

    ADS
    Статья

    Google ученый

  4. 5.

    Бхатти, А.Б., Усман, М. и Канди, В.Текущий сценарий ВИЧ / СПИДа, варианты лечения и основные проблемы с соблюдением антиретровирусной терапии. Cureus 8 , e515 – e515 (2016).

    PubMed
    PubMed Central

    Google ученый

  5. 6.

    König, R. et al. . Глобальный анализ взаимодействий хозяин-патоген, регулирующих репликацию ВИЧ-1 на ранней стадии. Cell 135 , 49–60 (2008).

    Артикул

    Google ученый

  6. 8.

    Brass, A. L. et al. . Идентификация белков-хозяев, необходимых для ВИЧ-инфекции, посредством функционального геномного скрининга. наука 319 , 921–926 (2008).

    ADS
    CAS
    Статья

    Google ученый

  7. 9.

    Cimermancic, P. et al. . Глобальный ландшафт комплексов ВИЧ — белок человека. 5–10, https://doi.org/10.1038/nature10719 (2012).

  8. 10.

    Emig-Agius, D. et al. . Интегрированная карта белковых комплексов ВИЧ-человека, способствующих вирусной инфекции. PLoS ONE 9 , e96687 (2014).

    ADS
    Статья

    Google ученый

  9. 11.

    Ачарья, П., Лусварги, С., Бьюли, К.А. и Квонг, П. Д. ВИЧ-1 gp120 в качестве терапевтической мишени: перемещение по движущемуся лабиринту. Заключение экспертов по терапевтическим целям 19 , 765–783 (2015).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  10. 12.

    Бриз В., Поведа Э. и Сориано В. Ингибиторы проникновения ВИЧ: механизмы действия и пути устойчивости. Журнал антимикробной химиотерапии 57 , 619–627 (2006).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  11. 14.

    Багал С. К. и др. . Ионные каналы как терапевтические мишени: перспектива открытия лекарств. Журнал медицинской химии 56 , 593–624 (2013).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  12. 15.

    Самсонов А.В. и др. . Влияние мембранного потенциала и сфинголипидных структур на слияние вируса леса Семлики. Журнал вирусологии 76 , 12691–12702 (2002).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  13. 17.

    Хелениус, А., Килиан, М., Веллстид, Дж., Меллман, И. и Рудник, Г. Влияние одновалентных катионов на проникновение вируса леса Семлики в клетки BHK-21. J Biol Chem 260 , 5691–5697 (1985).

    CAS
    PubMed

    Google ученый

  14. 18.

    Скотт, С. и Гриффин, С. Виропорины: структура, функция и потенциал в качестве противовирусных мишеней. Журнал общей вирусологии 96 , 2000–2027 (2015).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  15. 19.

    Ниева, Дж. Л., Мадан, В. и Карраско, Л. Виропорины: структура и биологические функции. Nature Reviews Microbiology 10 , 563–574 (2012).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  16. 20.

    Hsu, K., Han, J., Shinlapawittayatorn, K., Deschenes, I. & Marbán, E. Деполяризация мембранного потенциала как запускающий механизм для Vpu-опосредованного высвобождения ВИЧ-1. Биофизический журнал 99 , 1718–1725 (2010).

    ADS
    CAS
    Статья

    Google ученый

  17. 21.

    Хуанг, Д. Т.-Н., Чи, Н., Чен, С. -К., Ли, Т.-Й. & Hsu, K. Предпосылки K2P-каналы KCNK3 / 9/15 ограничивают образование везикул, происходящих из клеточной мембраны. Биохимия и биофизика клетки 61 , 585–594 (2011).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  18. 22.

    Биазиотто Р. и др. . Белок p13 вируса Т-клеточного лейкоза человека типа 1 (HTLV-1) модулирует митохондриальный мембранный потенциал и поглощение кальция. https://doi.org/10.1016/j.bbabio.2010.02.023 (2010).

  19. 23.

    Silic-Benussi, M. et al. . Модуляция митохондриальной проницаемости K + и продукции активных форм кислорода белком p13 вируса Т-клеточного лейкоза человека 1 типа. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) — Bioenergetics 1787 , 947–954 (2009).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  20. 25.

    Тейлор А. и др. . Эффекты внутрикадровой делеции локуса гена 6k из генома вируса реки Росс. Журнал вирусологии 90 , 4150–9 (2016).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  21. 26.

    Liljeström, P. & Garoff, H. Расположенные внутри расщепляемые сигнальные последовательности управляют образованием мембранных белков вируса леса Семлики из предшественника полипротеина. Журнал вирусологии 65 , 147–154 (1991).

    PubMed
    PubMed Central

    Google ученый

  22. 28.

    Сакураи, Ю. и др. . Два поровых канала контролируют проникновение в клетки-хозяева эболавируса и являются мишенями для лечения заболеваний. Science (Нью-Йорк, Нью-Йорк) 347 , 995–998 (2015).

    ADS
    CAS
    Статья

    Google ученый

  23. 29.

    Hover, S. et al. . Модуляция калиевых каналов подавляет инфекцию буньявируса. Журнал биологической химии 291 , 3411–3422 (2016).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  24. 31.

    Kort, J. J. & Jalonen, T.O. Белок nef вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) ингибирует калиевый канал с высокой проводимостью в глиальных клетках человека. Письма по неврологии 251 , 1–4 (1998).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  25. 32.

    Херрманн, М. и др. . Взаимодействие gp120 вируса иммунодефицита человека с потенциалзависимым калиевым каналом BEC1. Письма FEBS 584 , 3513–3518 (2010).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  26. 34.

    Чой, Б., Гатти, П. Дж., Хейслип, А. М., Фермин, С. Д. и Гарри, Р. Ф. Роль калия в производстве вируса иммунодефицита человека и цитопатических эффектах. Вирусология 247 , 189–199 (1998).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  27. 35.

    Ходаха, К., Мелищук, А., Армстронг, К. М., Киллинг, К.Каналы с TEA (+). Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 94 , 13335–13338 (1997).

    ADS
    CAS
    Статья

    Google ученый

  28. 36.

    Dalaklioglu, S. & Ozbey, G. Роль различных типов калиевых каналов в расслаблении кавернозного тела, вызванном ресвератролом. Журнал «Фармакогнозия» 10 , 47–52 (2014).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  29. 37.

    Корн, Х. Механизм действия 4-аминопиридина на потенциал-управляемые калиевые каналы в лимфоцитах. 99 , 217–240 (1992).

  30. 38.

    Dwivedi, R., Saha, S., Chowienczyk, P.J. & Ritter, J.M. Блокировка внутренних выпрямляющих K + каналов (KIR) ингибирует индуцированное брадикинином расширение сосудов в сосудистой сети сопротивления предплечья человека. Артериосклероз, тромбоз и сосудистая биология 25 , e7–9 (2005).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  31. 39.

    Цзян Ю. и Маккиннон Р. Участок бария в калиевом канале по данным рентгеновской кристаллографии. Журнал общей физиологии 115 , 269–272 (2000).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  32. 40.

    Риполл, К., Ледерер, В. Дж. И Николс, К. Г. О механизме ингибирования каналов КАТФ глибенкламидом в миоцитах желудочков крыс. Журнал кардиоваскулярной электрофизиологии 4 , 38–47 (1993).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  33. 41.

    Джонсон, Т. Д., Маррелли, С. П., Стинберг, М. Л., Чилдрес, В. Ф. и Брайан, Р. М. младший. Внутренние выпрямительные калиевые каналы в средней мозговой артерии крысы. Am J Physiol 274 , R541–7 (1998).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  34. 42.

    Гарри Р. Ф. и др. . Концентрации Na + и K + и регуляция синтеза белка в куриных клетках, инфицированных вирусом Синдбис. Вирусология 96 , 108–120 (1979).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  35. 43.

    Dascal, N. Передача сигналов через активируемые G-белком K + каналы. Передача сигналов в клетках 9 , 551–573 (1997).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  36. 45.

    Ogawa, M. et al. . Генерация АТФ в клетке-хозяине на ранней стадии инфекции увеличивается за счет усиления активности цитохром-с-оксидазы через пептид p2 из Gag вируса иммунодефицита человека 1 типа. Ретровирология 12 , 97 (2015).

    Артикул

    Google ученый

  37. 46.

    Бубиен, Дж. К., Бенвенист, Э. Н. и Бенос, Д. Дж. ВИЧ-gp120 активирует чувствительные к апамину калиевые каналы с высокой проводимостью в астроцитах крыс. Американский физиологический журнал 268 , C1440–9 (1995).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  38. 47.

    Пети П. и Лубатиерес-Мариани М. М. Калиевые каналы В-клеток, секретирующих инсулин. Фундаментальная и клиническая фармакология 6 , 123–134 (1992).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  39. 48.

    Лигтенберг, Дж. Дж., Венкер, К. Э., Слютер, У. Дж., Рейтсма, В. Д. и Ван Хафтен, Т. В. Влияние глибенкламида на высвобождение инсулина при умеренных и высоких уровнях глюкозы в крови у нормального человека. Европейский журнал клинических исследований 27 , 685–689 (1997).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  40. 50.

    Zhu, Q. et al. . Мишень гликопротеина gp120 оболочки ВИЧ-1 — индуцированное повреждение нейронов гиппокампа: роль потенциалзависимого K + канала Kv2. 1. Вирусная иммунология 28 , 495–503 (2015).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  41. 51.

    Ямада А. и др. . Применение и ограничения DiBAC4 (3), чувствительного к напряжению флуоресцентного красителя, для измерения мембранных потенциалов, регулируемых рекомбинантными Ca2 + -активированными K + каналами с большой проводимостью в клетках HEK293. Японский фармакологический журнал 86 , 342–350 (2001).

    CAS
    Статья

    Google ученый

  42. 52.

    Klapperstück, T., Glanz, D., Klapperstück, M. & Wohlrab, J. Методологические аспекты измерения абсолютных значений мембранного потенциала в клетках человека с помощью проточной цитометрии. Cytometry Part A 75 , 593–608 (2009).

    Артикул

    Google ученый

  43. Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


    Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

    Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее частые причины:

    • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
    • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
      Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
    • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
    • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
      браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
    • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
      Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.

    Почему этому сайту требуются файлы cookie?

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
    потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


    Что сохраняется в файлах cookie?

    Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

    Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт
    не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
    остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

    Белковый электрофорез, иммунофиксационный электрофорез | Лабораторные тесты онлайн

    Источники, использованные в текущем обзоре

    2019 обзор выполнен Алина Г. Софронеску, доктор философии, NRCC-CC, FACB и Редакционная коллегия LTO.

    Booth, R. et. al. (2018 Январь). Рекомендации по электрофорезу белков от Рабочей группы Канадского общества клинических химиков по моноклональной гаммопатии. Клиническая биохимия 51 (2018) 10-20. Доступно в Интернете по адресу https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0009912017309645. По состоянию на июль 2019 г.

    Фаннинг, С. и Хусейн, М. (8 сентября 2018 г., обновлено). Моноклональные гаммопатии неопределенного значения. Медицинская гематология.Доступно на сайте https://emedicine.medscape.com/article/204297-overview. По состоянию на июль 2019 г.

    LoCicero, R. et. al. (18 января 2018 г., обновлено). Электрофорез белков — сыворотка. Медицинская энциклопедия MedlinePlus. Доступно в Интернете по адресу https://medlineplus.gov/ency/article/003540.htm По состоянию на июль 2019 г.

    Дельгадо, Дж. (Сентябрь 2018 г., обновленная информация). Дискразии плазматических клеток. ARUP Consult. Доступно на сайте https://arupconsult.com/content/plasma-cell-dyscrasias. По состоянию на сентябрь 2019 г.

    (© 1995–2018). Электрофорез, белок, сыворотка. Клиника Мэйо Медицинские лаборатории Мэйо. Доступно на сайте https://www.mayomedicallaboratories.com/test-catalog/Clinical+and+Interpretive/97408. По состоянию на сентябрь 2019 г.

    Беренсон Дж. (Май 2018 г., обновленная информация). Моноклональная гаммопатия неопределенной значимости (MGUS). Руководство Merck Professional Version. Доступно в Интернете по адресу https://www.merckmanuals.com/professional/hemology-and-oncology/plasma-cell-disorders/monoclonal-gammopathy-of-undetermined-significance-mgus.По состоянию на сентябрь 2019 г.

    (1 сентября 2017 г., обновлено). Миелома. Общество лейкемии и лимфомы. Доступно в Интернете по адресу http://www.lls.org/sites/default/files/file_assets/PS39_Myeloma_Booklet_9_17_FINAL_with_Insert.pdf. По состоянию на сентябрь 2019 г.

    Sebia. Электрофорез капиллярных белков. Доступно на сайте https://www.sebia.com/en-EN/produits/capillarys-proteine-6. По состоянию на сентябрь 2019 г.

    Надер Рафаи. Учебник Тиц по клинической химии и молекулярной диагностике, 6-е издание.2018. Elsevier Inc.

    Источники, использованные в предыдущих обзорах

    Томас, Клейтон Л., редактор (1997). Циклопедический медицинский словарь Табера. Компания F.A. Davis, Филадельфия, Пенсильвания [18-е издание].

    Пагана, Кэтлин Д. и Пагана, Тимоти Дж. (2001). Справочник по диагностическим и лабораторным испытаниям Мосби, 5-е издание: Mosby, Inc., Сент-Луис, Миссури.

    Шпенглер, Рене (5 сентября 2002 г., обновлено). Библиотека здоровья LaurusHealth.com, медицинские тесты [он-лайн информация].

    Thomson Corporation (2002). Иммуноэлектрофорез. Hendrick Health System, Библиотека медицинской информации AccessMed [онлайн-информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.ehendrick.org/healthy/

    Thomson Corporation (2002). Белковый электрофорез. Hendrick Health System, Библиотека медицинской информации AccessMed [онлайн-информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.ehendrick.org/healthy/

    Thomson Corporation (28 января 2003 г.). Иммуноэлектрофорез. BluePrint for Health, Британская Колумбия / Британская Колумбия Миннесоты [информация в Интернете].Доступно в Интернете по адресу http://blueprint.bluecrossmn.com/topic/topic100587005.

    Иммунофиксационный электрофорез, количественный. Руководство ARUP по клиническим лабораторным исследованиям (CLT) [онлайн-информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.aruplab.com/guides/clt/tests/clt_al4b.htm#1152005.

    Электрофорез белков. Руководство ARUP по клиническим лабораторным исследованиям (CLT) [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.aruplab.com/guides/clt/tests/clt_155b.htm#1145652.

    Эльстрем, Р.(21 октября 2001 г., обновлено). Иммуноэлектрофорез — сыворотка. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003541.htm.

    Эльстром, Р. (3 ноября 2001 г., обновлено). Иммуноэлектрофорез — моча. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003592.htm.

    Эльстром, Р. (21 октября 2001 г., обновлено). Электрофорез белков — сыворотка.Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003540.htm.

    Эльстром, Р. (3 ноября 2001 г., обновлено). Электрофорез белков — моча. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003589.htm.

    Пагана, Кэтлин Д. и Пагана, Тимоти Дж. (© 2007). Справочник Мосби по диагностическим и лабораторным испытаниям, 8-е издание: Mosby, Inc., Сент-Луис, Миссури. Стр. 775-780.

    Кларк, В. и Дюфур, Д. Р., редакторы (2006). Современная практика клинической химии, AACC Press, Вашингтон, округ Колумбия. Стр. 197-210.

    Ву, А. (2006). Клиническое руководство по лабораторным испытаниям Тиц, четвертое издание. Сондерс Эльзевьер, Сент-Луис, Миссури. Стр. 922-926.

    Нанда, Р. (8 марта 2007 г., обновлено). Белковый электрофорез сыворотки. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003540.htm. Доступ 9 сентября 2007 г.

    (1 января 2005 г.). OConnell, T. et. al. Понимание и интерпретация электрофореза белков сыворотки. Американский семейный врач 2005; 71 (1): 105-112 [статья в онлайн-журнале]. Доступно в Интернете по адресу http://www.aafp.org/afp/20050101/105.html. Доступ 9 сентября 2007 г.

    Лониал, С. (9 сентября 2005 г., проверено). Диагностика и стадия множественной миеломы. Фонд исследования множественной миеломы [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http: //www. multiplemyeloma.org / about_myeloma / 2.05.php. Доступ 9 сентября 2007 г.

    Dugdale III, D. (Обновлено 5 февраля 2010 г.). Электрофорез белков — сыворотка. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003540.htm. По состоянию на май 2011 г.

    Dugdale III, D. (Обновлено 24 января 2011 г.). Электрофорез белков — моча. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003589.htm. По состоянию на май 2011 г.

    Рогоски Р. (июль 2009 г.). Анализ свободных легких цепей в сыворотке: обнаружение нарушений плазматических клеток. Наблюдатель в медицинской лаборатории [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.mlo-online.com/features/2009_july/0709_coverstory.aspx. По состоянию на май 2010 г.

    (© 1995–2010). Код единицы 80085: Электрофорез, белок, сыворотка. Клиника Мэйо Медицинские лаборатории Мэйо [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.mayomedicallaboratories.com/test-catalog/Clinical+and+Interpretive/80085.По состоянию на май 2011 г.

    Wood, P. et. al. (8 ноября 2010 г.). Сравнение электрофореза иммунофиксации сыворотки и анализа свободных легких цепей при обнаружении моноклональных гаммопатий. Medscape Today из Clin Лимфома Миелома . 2010; 10 (4): 278-280 [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.medscape.com/viewarticle/729328. По состоянию на май 2011 г.

    (© 2006-2010). Белковый электрофорез, CSF: 0050590. Справочник лабораторных тестов ARUP. [Он-лайн информация].Доступно в Интернете по адресу http://www.aruplab.com/guides/ug/tests/0050590.jsp. По состоянию на май 2011 г.

    О’Коннелл Т., Хорита Т., Касрави Б. Понимание и интерпретация электрофореза белков. Am Fam Physician 2005 1 января; 71 (1): 105-112. Доступно в Интернете по адресу http://www.aafp.org/afp/2005/0101/p105.html. По состоянию на май 2011 г.

    Кларк, В. и Дюфур, Д. Р., редакторы (2006). Современная практика клинической химии. AACC Press, Вашингтон, округ Колумбия. Глава 17, С. 89-91.

    Клиническая диагностика и лечение Генри с помощью лабораторных методов.21-е изд. Макферсон Р., Пинкус М., ред. Филадельфия, Пенсильвания: Saunders Elsevier: 2007, Pp 232-233, 241-242, 400, 843-846.

    Туазон С.А. и Скарпачи А. (Обновлено 5 сентября 2014 г.). Электрофорез белков сыворотки. Медицинские препараты и болезни [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://emedicine.medscape.com/article/2087113-overview. По состоянию на ноябрь 2014 г.

    Димоу А. и Лейтон Дж. Иммунофиксация. Медицинские препараты и болезни [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http: // emedicine.medscape.com/article/2086976-overview. По состоянию на ноябрь 2014 г.

    Герстен Т. (обновлено 24 февраля 2014 г.). Электрофорез белков — сыворотка. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003540.htm. По состоянию на ноябрь 2014 г.

    Чен, Ю. (Обновлено 29 мая 2014 г.). Электрофорез белков — моча. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003589.htm. По состоянию на ноябрь 2014 г.

    (© 1995–2014). Электрофорез, белок, сыворотка. Клиника Мэйо Медицинские лаборатории Мэйо [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.mayomedicallaboratories.com/test-catalog/Overview/80085. По состоянию на ноябрь 2014 г.

    Delgado, J. et. al. (Обновлено в августе 2014 г.). Дискразии плазматических клеток. ARUP Консультации [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.arupconsult.com/Topics/PlasmaCellDyscrasias.html?client_ID=LTD. По состоянию на ноябрь 2014 г.

    McTaggart, M. et. al. (2013). Замена электрофореза белков мочи анализом свободных легких цепей в сыворотке в качестве теста первой линии для выявления нарушений плазматических клеток обеспечивает повышенную диагностическую точность и потенциальную пользу для здоровья пациентов. Ам Дж. Клин Патол . v140 (6): 890-897 [Он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу http://www.medscape.com/viewarticle/818733. По состоянию на ноябрь 2014 г.

    Установка

    ПЦР — Шесть важнейших компонентов, которые следует учитывать | Thermo Fisher Scientific

    Успех ПЦР зависит от ряда факторов, при этом компоненты реакции играют решающую роль в амплификации.Ключевые моменты при настройке реакций включают следующее, и они подробно описаны на этой странице:

    Рекомендуемое видео: Основы ПЦР

    ?

    Матрица ПЦР для репликации может быть из любого источника ДНК, такого как геномная ДНК (гДНК), комплементарная ДНК (кДНК) и плазмидная ДНК.Тем не менее, состав или сложность ДНК способствует оптимальному количеству вводимых данных для амплификации ПЦР. Например, достаточно 0,1–1 нг плазмидной ДНК, в то время как 5–50 нг гДНК могут потребоваться в качестве исходного количества для 50 мкл ПЦР. Оптимальные количества матрицы также могут варьироваться в зависимости от типа используемой ДНК-полимеразы; ДНК-полимераза, сконструированная так, чтобы иметь более высокую чувствительность из-за сродства к матрице, потребовала бы меньшего количества вводимой ДНК. Оптимизация ввода ДНК важна, потому что более высокие количества увеличивают риск неспецифической амплификации, тогда как меньшие количества снижают выход ( Рисунок 1 ).

    Рисунок 1.Сравнение результатов ПЦР с плазмидой и матрицей гДНК человека. Эту же ДНК-полимеразу использовали для амплификации целевой последовательности размером 2 т.п.н. из различных количеств входящей ДНК в рекомендуемых условиях.

    Иногда протоколы ПЦР могут требовать ввода ДНК с точки зрения количества копий, особенно для гДНК.Расчет числа копий зависит от количества присутствующих молекул в молях входящей ДНК. Используя постоянную Авогадро (L) и молярную массу, число копий можно рассчитать как:

    Число копий = L x количество молей = L x (общая масса / молярная масса)

    Молярная масса конкретной цепи ДНК определяется ее размером или общим количеством оснований (т. Е. Сочетанием ее длины и одноцепочечной или двухцепочечной природы). Для удобства и простоты доступен онлайн-инструмент для вычисления количества копий по массе входной ДНК.

    Теоретически одной копии ДНК или одной клетки достаточно для амплификации с помощью ПЦР в идеальных условиях. Однако на практике эффективность амплификации определенного количества матрицы в значительной степени зависит от компонентов и параметров реакции, а также от чувствительности ДНК-полимеразы. Кроме того, выбранная ДНК-полимераза должна быть сертифицирована на контролируемый низкий уровень остаточной ДНК, чтобы минимизировать ложные сигналы при ПЦР.

    Помимо гДНК, кДНК и плазмидной ДНК, также можно повторно амплифицировать продукты ПЦР для получения более высокого выхода мишени.Хотя неочищенные продукты можно непосредственно использовать в качестве матрицы, переносимые компоненты реакции, такие как праймеры, dNTP, соли и побочные продукты, могут отрицательно влиять на амплификацию. Чтобы избежать такого ингибирования, общая рекомендация — развести реакционную смесь водой перед следующим раундом ПЦР. Для достижения наилучших результатов перед повторной амплификацией ампликоны ПЦР необходимо очистить. С оптимизированными наборами для очистки ПЦР процедура очистки ПЦР может быть выполнена всего за 5 минут.

    Как настроить реакцию ПЦР

    ДНК-полимеразы играют важную роль в репликации целевой ДНК. Taq ДНК-полимераза, возможно, самый известный фермент, используемый для ПЦР, и ее открытие произвело революцию в ПЦР. Taq ДНК-полимераза имеет относительно высокую термостабильность с периодом полураспада примерно 40 минут при 95 ° C [1]. Он включает нуклеотиды со скоростью около 60 оснований в секунду при 70 ° C и может увеличивать длину около 5 т.п.н., поэтому он подходит для стандартной ПЦР без особых требований. В настоящее время были созданы новые поколения ДНК-полимераз для значительного повышения эффективности ПЦР.

    В типичной реакции объемом 50 мкл для амплификации целевой ДНК достаточно 1-2 единиц ДНК-полимеразы. Однако может потребоваться корректировка количества фермента с помощью сложных шаблонов. Например, когда в образце ДНК присутствуют ингибиторы, увеличение количества ДНК-полимеразы может улучшить результаты ПЦР. Однако неспецифические продукты ПЦР могут появляться при более высоких концентрациях фермента (, рис. 2, ).

    Для более специализированных применений, таких как клонирование ПЦР, длинная амплификация и ПЦР с богатым анализом ГХ, предпочтительны ДНК-полимеразы с более высокими характеристиками.Эти ферменты способны генерировать продукты ПЦР с меньшим количеством ошибок из длинных матриц за более короткое время с лучшими выходами и более высокой устойчивостью к ингибиторам (узнайте больше о характеристиках ДНК-полимеразы).


    Рисунок 2.Повышенное количество ДНК-полимеразы может помочь с результатами ПЦР, но может продуцировать неспецифические ампликоны.
    Верхняя полоса представляет желаемый ампликон для ПЦР.

    Праймеры

    для ПЦР представляют собой синтетические ДНК-олигонуклеотиды примерно из 15–30 оснований.Праймеры для ПЦР предназначены для связывания (посредством комплементарности последовательностей) с последовательностями, фланкирующими интересующую область в матричной ДНК. Во время ПЦР ДНК-полимераза удлиняет праймеры с их 3′-концов. По существу, сайты связывания праймеров должны быть уникальными в непосредственной близости от мишени с минимальной гомологией с другими последовательностями входной ДНК, чтобы гарантировать специфическую амплификацию намеченной мишени.

    В дополнение к гомологии последовательностей, праймеры должны быть тщательно разработаны другими способами для специфичности амплификации ПЦР.Во-первых, последовательности праймеров должны иметь температуру плавления (T m ) в диапазоне 55–70 ° C, при этом T m s двух праймеров в пределах 5 ° C друг от друга. Не менее важно, что праймеры должны разрабатываться без комплементарности между праймерами (особенно на их 3′-концах), что способствует их отжигу (т. Е. Димеры праймеров), самокомплементарности, которая может вызывать самопраймер (т. Е. Вторичные структуры) или прямые повторы, которые могут привести к несовпадению с целевой областью шаблона.

    Советы по созданию праймеров для ПЦР

    Кроме того, содержание GC в грунтовке в идеале должно составлять 40–60% с равномерным распределением оснований C и G, чтобы избежать ошибочного заправки.Аналогично, на 3′-концах праймеров должно присутствовать не более трех оснований G или C, чтобы минимизировать неспецифическое праймирование. С другой стороны, один нуклеотид C или G на 3′-конце праймера может способствовать выгодному закреплению и удлинению праймера (, таблица 1, ). Для удобства и простоты доступен ряд онлайн-инструментов для биоинформатического проектирования и выбора оптимальных последовательностей праймеров с определенными параметрами.

    Таблица 1.Общие рекомендации по созданию праймеров для ПЦР.
    Dos Нельзя
    • 15–30 нит.
    • T м 55–70 ° C (в пределах 5 ° C, для двух грунтовок)
    • ГХ 40–60% (с равномерным распределением)
    • Один C или G на 3 ‘конце
    • Вторичная структура (взаимодополняемость)
    • Прямые повторы
    • Более трех G или C на 3-м конце

    Праймеры с длинными последовательностями (например,g.,> 50 нуклеотидов) и / или модифицированные основания часто необходимо очищать для удаления неполноразмерных продуктов и неконъюгированных нуклеотидов. Очистка праймера рекомендуется для таких применений, как клонирование и мутагенез, где целостность последовательности и длины имеет решающее значение для успеха эксперимента.

    При конструировании праймеров для клонирования ПЦР нематричные последовательности, такие как сайты рестрикции, последовательности рекомбинации и сайты связывания промоторов, могут быть введены на 5′-концы в виде удлинений. Эти последовательности расширения должны быть тщательно разработаны для минимального воздействия на амплификацию ПЦР и последующие приложения (узнайте больше о клонировании ПЦР).

    При настройке ПЦР к реакции добавляют праймеры в диапазоне 0,1–1 мкМ. Для праймеров с вырожденными основаниями или праймеров, используемых в длинной ПЦР, концентрация праймеров 0,3–1 мкМ часто является благоприятной. Общая рекомендация — начинать со стандартных концентраций и при необходимости корректировать. Более высокие концентрации праймеров часто способствуют ошибочному зачатию и неспецифической амплификации. С другой стороны, низкие концентрации праймеров могут привести к низкой амплификации или отсутствию амплификации желаемой мишени (, фиг. 3, ).

    Фигура 3. ПЦР-амплификация человеческой гДНК с различными концентрациями праймеров. В этих экспериментах амплифицировали фрагмент размером 0,7 т.п.н. с высоким содержанием GC.Обратите внимание на накопление неспецифических продуктов и димеров праймеров с высокими концентрациями праймеров.

    Дезоксинуклеозидтрифосфаты (дНТФ)

    dNTPs состоят из четырех основных нуклеотидов — dATP, dCTP, dGTP и dTTP — как строительных блоков новых цепей ДНК.Эти четыре нуклеотида обычно добавляют в реакцию ПЦР в эквимолярных количествах для оптимального включения оснований. Однако в определенных ситуациях, таких как случайный мутагенез с помощью ПЦР, преднамеренно вводятся несбалансированные концентрации dNTP, чтобы способствовать более высокой степени неправильного включения ДНК-полимеразой, не проверяющей правильность считывания.

    В обычных приложениях ПЦР рекомендуемая конечная концентрация каждого dNTP обычно составляет 0,2 мМ. Более высокие концентрации могут помочь в некоторых случаях, особенно в присутствии высоких уровней Mg 2+ , поскольку Mg 2+ связывается с dNTP и снижает их доступность для включения.Однако дНТФ, превышающие оптимальные концентрации, могут ингибировать ПЦР. Для эффективного включения ДНК-полимеразой свободные dNTP должны присутствовать в реакции в концентрации не менее 0,010–0,015 мМ (по их оценкам K m ) ( Рисунок 4 ). При использовании ДНК-полимераз без корректуры точность считывания можно повысить за счет снижения концентрации dNTP (0,01–0,05 мМ), а также пропорционального уменьшения Mg 2+ .


    Рисунок 4.ПЦР-амплификация лямбда ДНК размером 1 т.п.н. с различными концентрациями дНТФ.
    Конечная концентрация MgCl 2 в каждой реакции составляла 4 мМ.

    В некоторых приложениях dNTP могут включать специальные нуклеотиды. Примером является замена dTTP на дезоксиуридинтрифосфат (dUTP) в сочетании с предварительной обработкой урацил-ДНК-гликозилазой (UDG) в качестве стратегии предотвращения переносимого загрязнения ПЦР [2].UDG — это фермент репарации ДНК, который расщепляет урацил-содержащие цепи ДНК. Замена dTTP на dUTP приводит к образованию продуктов ПЦР, содержащих урацил. Инкубация образцов реакции с UDG до начала ПЦР удаляет загрязняющие переносимые ампликоны ПЦР с урацилом, тем самым предотвращая ложноположительные результаты от переносимых продуктов ПЦР (, фиг. 5, ).

    Рисунок 5.Обработка УДГ для предотвращения загрязнения ампликонов переносимой ПЦР. UDG расщепляет основания урацила (красные столбики), присутствующие во фрагментах ДНК. Абазовые цепи ДНК склонны к деградации в условиях ПЦР и не амплифицируются в последующей ПЦР.

    При использовании dUTP в ПЦР следует учитывать несколько предостережений. Во-первых, замена dUTP может снизить эффективность и чувствительность ПЦР.Эту проблему можно преодолеть, используя оптимальное соотношение dTTP к dUTP, так чтобы каждая молекула продукта ПЦР несла достаточное количество оснований урацила для эффективного лечения UDG, не влияя резко на эффективность ПЦР. Во-вторых, хотя ДНК-полимераза Taq включает dUTP во время синтеза ДНК, проверочные ДНК-полимеразы, такие как Pfu , не могут переносить dUTP, если они не были специально модифицированы для включения урацила. Это свойство связано с наличием урацил-связывающего кармана в ДНК-полимеразах на основе архей как механизма репарации ДНК [3,4].

    Аналогичным образом, модифицированные дНТФ, такие как аминоаллил-дУТФ, флуоресцеин-12-дУТФ, 5-бром-дУТФ и биотин-11-дУТФ, обычно используются для включения меток для последующих экспериментов. Подобно dUTP, ДНК-полимераза должна быть способна включать модифицированные dNTP для успешной ПЦР.

    Ион магния (Mg 2+ ) действует как кофактор активности ДНК-полимераз, обеспечивая включение dNTP во время полимеризации.Ионы магния в активном центре фермента катализируют образование фосфодиэфирной связи между 3′-ОН праймера и фосфатной группой dNTP (, фиг. 6, ). Кроме того, Mg 2+ облегчает образование комплекса между праймерами и матрицами ДНК за счет стабилизации отрицательных зарядов на их фосфатных каркасах ( Рисунок 8, ) [5].


    Рисунок 6.Функция иона магния в активном центре ДНК-полимеразы.
    Mg 2+ помогает координировать взаимодействие между 3′-ОН праймера и фосфатной группой входящего dNTP в полимеризации ДНК.

    Ионы Mg 2+ обычно доставляются в виде раствора MgCl 2 в смесь для ПЦР.Однако некоторые полимеразы, такие как ДНК-полимераза Pfu , предпочитают MgSO 4 , поскольку сульфат помогает обеспечить более надежные и воспроизводимые характеристики при определенных обстоятельствах. Концентрация магния часто нуждается в оптимизации, чтобы максимизировать выход ПЦР при сохранении специфичности из-за его связывания с dNTP, праймерами, матрицами ДНК и EDTA (если присутствует).

    Типичная конечная концентрация Mg 2+ в ПЦР находится в диапазоне 1–4 мМ, с шагом титрования 0,5 мМ, рекомендованным для оптимизации.Низкие концентрации Mg 2+ приводят к небольшому количеству продукта ПЦР или его отсутствию из-за пониженной активности полимеразы. С другой стороны, высокие концентрации Mg 2+ часто приводят к образованию неспецифических продуктов ПЦР из-за повышенной стабильности комплексов праймер-матрица, а также из-за увеличения ошибок репликации из-за неправильного включения dNTP (, фиг. 7, ).


    Рисунок 7.ПЦР-амплификация с различными концентрациями MgCl 2 .
    Верхние полосы представляют собой желаемый фрагмент 2,8 т.п.н., амплифицированный из человеческой гДНК.

    ПЦР проводят в буфере, который обеспечивает подходящую химическую среду для активности ДНК-полимеразы.PH буфера обычно составляет от 8,0 до 9,5 и часто стабилизируется трис-HCl.

    Для ДНК-полимеразы Taq обычным компонентом буфера является ион калия (K + ) из KCl, который способствует отжигу праймера. Иногда сульфат аммония (NH 4 ) 2 SO 4 может заменить KCl в буфере. Ион аммония (NH 4 + ) оказывает дестабилизирующее действие, особенно на слабые водородные связи между несовпадающими парами оснований праймер-матрица, тем самым повышая специфичность ( Фиг.8, ).Обратите внимание, что ДНК-полимеразы часто поставляются с буферами для ПЦР, оптимизированными для высокой активности ферментов; поэтому рекомендуется использовать предоставленный буфер для достижения оптимальных результатов ПЦР.

    Рисунок 8.Влияние буферных ионов на образование дуплекса ДНК. Ионы калия и магния (K + и Mg 2+ ) связываются с фосфатными группами (P ) на основной цепи ДНК и стабилизируют образование дуплекса, а ион аммония (NH 4 + ) может взаимодействуют с водородными связями между основаниями (N) и дестабилизируют образование дуплекса.

    Поскольку Mg 2+ обладает стабилизирующим действием, аналогичным K + , рекомендуемые концентрации MgCl 2 обычно ниже при использовании буфера KCl (1.5 ± 0,25 мМ), но выше с буфером (NH 4 ) 2 SO 4 (2,0 ± 0,5 мМ). Из-за антагонистических эффектов NH 4 + и Mg 2+ , буферы с (NH 4 ) 2 SO 4 предлагают более высокую специфичность праймера в широком диапазоне концентраций Mg 2+ ( Рисунок 9 ). Важно следовать рекомендациям по использованию буфера поставщика фермента, поскольку оптимальный буфер для ПЦР зависит от используемой ДНК-полимеразы.

    Рис. 9. Результаты ПЦР при различных концентрациях MgCl 2 в двух разных типах буфера, что демонстрирует важность выбора буфера для специфичности ПЦР. Фрагмент 0,95 т.п.н. амплифицировали из человеческой гДНК с ДНК-полимеразой Taq в этих реакциях.

    В определенных сценариях в буфер могут быть включены химические добавки или сорастворители для улучшения специфичности амплификации за счет снижения ошибочного старта и повышения эффективности амплификации за счет удаления вторичных структур (, таблица 2, ). Кроме того, некоторые ДНК-полимеразы поставляются со специально разработанными усилителями, оптимизированными для ДНК-полимеразы и буфера для ПЦР.Эти реагенты обычно используются для сложных образцов, таких как шаблоны, обогащенные ГХ. Обратите внимание, что использование химических добавок или сорастворителей может повлиять на отжиг праймера, денатурацию матрицы, связывание Mg 2+ и активность ферментов. Кроме того, они могут мешать определенным последующим применениям — например, неионогенным детергентам в экспериментах с микрочипами. Следовательно, важно знать состав буфера для успешной ПЦР и последующего использования.

    Таблица 2.Общие добавки или сорастворители, используемые в качестве усилителей ПЦР, и их рекомендуемые конечные концентрации [6].

    Рекомендации

    научных журналов — AAAS

    % PDF-1.6
    %
    92 0 объект
    >>>
    endobj
    91 0 объект
    > поток
    application / pdf

  44. Научные журналы — AAAS
  45. 2018-08-24T18: 19: 10 + 08: 002021-02-14T15: 38: 14-08: 002021-02-14T15: 38: 14-08: 00Adobe InDesign CC 2017 (Windows) uuid: b666b289-1dd1-11b2 -0a00-81001841b9ffxmp.did: f4fd3488-9b3f-9d45-a5a3-8a4b2d55f952xmp.id: d64063bd-cdea-f54f-ae3d-0aeb5f312819proof: pdfxmp.iid: acf10-598b40e-fe -805f-12478d22c8a0xmp.did: f4fd3488-9b3f-9d45-a5a3-8a4b2d55f952default

  46. преобразовано из приложения / x-indesign в приложение / pdfAdobe InDesign CC 2017 (Windows) / 2018-08-24T18: 19: 10: 00 90: 00
    Библиотека Adobe PDF 15.0 ложь
    конечный поток
    endobj
    88 0 объект
    >
    endobj
    20 0 объект
    >
    endobj
    90 0 объект
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 89 0 R / TrimBox [0.0 0.0 594.0 756.0] / Type / Page >>
    endobj
    1 0 obj
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / Properties> / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 2 0 R / TrimBox [0.0 0.0 594.0 756.0] / Type / Page >>
    endobj
    24 0 объект
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC / ImageI] / Properties> / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 25 0 R / TrimBox [0.0 0,0 594,0 756,0] / Тип / Страница >>
    endobj
    32 0 объект
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / Properties> / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 33 0 R / TrimBox [0.0 0.0 594.0 756.0] / Type / Page >>
    endobj
    41 0 объект
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / Properties> / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 42 0 R / TrimBox [0.0 0.0 594.0 756.0] / Type / Page >>
    endobj
    55 0 объект
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 56 0 R / TrimBox [0.0 0.0 594.0 756.0] / Тип / Страница >>
    endobj
    58 0 объект
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 59 0 R / TrimBox [0.0 0.0 594.0 756.0] / Type / Page >>
    endobj
    66 0 объект
    > / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 67 0 R / TrimBox [0.0 0.0 594.0 756.0] / Type / Page >>
    endobj
    139 0 объект
    > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Type / Page >>
    endobj
    164 0 объект
    [169 0 R 170 0 R 171 0 R 172 0 R 173 0 R 174 0 R]
    endobj
    165 0 объект
    > поток
    q
    174.25 0 0 21,75 72 662,25 см
    / Im0 Do
    Q
    BT
    / T1_0 1 Тс
    10 0 0 10 72 622 тм
    (Электрофоретическая доставка лекарств для контроля припадков) Tj
    ET
    BT
    / T1_1 1 Тс
    8 0 0 8 72 600,99997 тм
    (Бернард, Адам Уильямсон и Джордж Г. Маллиарас) Tj
    0 1 TD
    (Кристофер М. Проктор, Андреа Сл \ 351zia, Аттила Касас, Антуан Гестем \
    , Изабель дель Агуа, Анна-Мария Папа, Кристоф) Tj
    ET
    BT
    / T1_1 1 Тс
    8 0 0 8 72 554,99997 тм
    (DOI: 10.1126 / sciadv.aau1291) Tj
    4.22401 1 тд
    (\ (8 \), eaau1291.) Tj
    / T1_0 1 Тс
    -0,556 0 Тд
    (4) Tj
    / T1_2 1 Тс
    -3.66801 0 тд
    (Sci Adv \ 240) Tj
    ET
    BT
    / T1_0 1 Тс
    6 0 0 6 79 485 тм
    (СТАТЬЯ ИНСТРУМЕНТЫ) Tj
    ET
    BT
    0 0 1 рг
    / T1_1 1 Тс
    8 0 0 8 187 483 тм
    (http://advances.sciencemag.org/content/4/8/eaau1291)Tj
    ET
    BT
    0 г
    / T1_0 1 Тс
    6 0 0 6 79 442,99997 тм
    (МАТЕРИАЛЫ) Tj
    0 1.00001 TD
    (ДОПОЛНИТЕЛЬНО) Tj
    ET
    BT
    0 0 1 рг
    / T1_1 1 Тс
    8 0 0 8 187 447 тм
    (http: //advances.sciencemag.org/content/suppl/2018/08/27/4.8.eaau1291.DC1 \
    ) Tj
    ET
    BT
    0 г
    / T1_0 1 Тс
    6 0 0 6 79 407 тм
    (ССЫЛКИ) Tj
    ET
    BT
    0 0 1 рг
    / T1_1 1 Тс
    8 0 0 8 187 396,99997 тм
    (http: // advance.sciencemag.org/content/4/8/eaau1291#BIBL)Tj
    0 г
    0 1 TD
    (Эта статья цитирует 46 статей, 7 из которых вы можете получить бесплатно) Tj
    ET
    BT
    / T1_0 1 Тс
    6 0 0 6 79 371 тм
    (РАЗРЕШЕНИЯ) Tj
    ET
    BT
    0 0 1 рг
    / T1_1 1 Тс
    8 0 0 8 187 369 тм
    (http://www.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *